Transferencia de Masa, Momento y Energa en Fermentaciones

v Los fenmenos de transporte tienen lugar en los procesos conocidos como procesos de transferencia v En ellos establece el movimiento de una propiedad ( masa, momentum o energa) bajo la accin de una fuerza impulsora. v Al movimiento de una propiedad se le llama flujo

Aireacin Transferencia de Masa, Momento y Energa Agitacin Calor de fermentacin

v El comportamiento de las fermentaciones est fuertemente influenciado por las operaciones de transferencia.

Aireacin
v Proporcionar a los microorganismos aerobios el oxgeno necesario para llevar a cabo su proceso metablico. v La solubilidad del O2 es baja < 10mg/l v Se necesita alimentar en forma continua este nutriente v Demanda tpica es aproximadamente de 1g/l.

v Es posible que una determinada fermentacin, en especial las aerbicas, est limitada en sus posibilidades de mejorar su rendimiento y productividad, no por razones propias de las caractersticas de las clulas sino que por problemas en el diseo que permita satisfacer la alta demanda de transferencia de masa, y en especial de oxgeno.

Necesidades de Diseo DEMANDA DE OXIGENO = OFERTA DE OXIGENO

Demanda de Oxgeno de un Cultivo

v Un cultivo aerbico de clulas requiere del suministro de oxgeno a una determinada velocidad para asegurar la plena satisfaccin de sus requerimientos metablicos. v La demanda de oxgeno, NA ,se define como: La cantidad de oxgeno requerida por unidad de tiempo y por unidad de volumen de cultivo

NA =

mX
YO2

Recordando el crecimiento microbiano se puede representar por:

CaHbOC + m NH3 + n O2 q CdHeOfNg + r CO2 + t H2O + u ChHiOjNk

CdHeOfNg: Biomasa ChHiOjNk: Metabolito extracelular

El rendimiento de oxgeno en clulas se puede calcular por medio de la relacin entre n y q Si no se produce el metabolito extracelular (u = 0)

Correlacin de Mateles:
(Mateles, 1971)

32a + 8b - 16c Yo2 = + 0.01 f - 0.03d + 0.02 g - 0.08e Yx * M s

s

Ms: Peso molecular de la fuente de carbono y energa

Ref: Acevedo F.,Gentina JC., Illanes A (2002) Fundamentos de Ingeniera Bioqumica, Ed. Universitarias de Valparaso

v Valores usuales de NA : 50 a 200 m-moles de O2/L h (1.6-3.2 g O2/ L h)

v Valores superiores a 120 m-moles de O2/L h son difciles de satisfacer en equipos de diseo estndar y en condiciones de operacin econmicas.
Ref: Acevedo F.,Gentina JC., Illanes A (2002) Fundamentos de Ingeniera Bioqumica, Ed. Universitarias de Valparaso

Transferencia de Oxgeno en un cultivo (oferta)

El oxgeno se introduce por burbujeo y su concentracin depende de la agitacin Transferencia de oxigeno a las clulas ocurre en varias etapas:

(i) Del seno de la burbuja a una capa interna de gas (ii) Difusin en la capa interna de gas. (iii) Difusin a travs de una capa externa de lquido que rodea a la burbuja. Etapa limitante! (iv) Transferencia al seno del lquido (v) Difusin a travs de la capa de lquido que rodea a los microorganismos Etapa limitante! (vi) Difusin en el interior de los microorganismos

Velocidad de Transferencia de Oxgeno

La velocidad de transferencia por unidad de rea interfacial, W, est dada por:

W = kL (Ci C)
Como en la interfase se supone que hay equilibrio entre el oxgeno en el gas y el disuelto.

W = kL (Ci C)= kG (P Pi)

Las cantidades Pi y Ci resultan difciles de determinar en la prctica se prefiere hacer uso de las relaciones de equilibrio, C* y P*

Relaciones de equilibrio C* y P* La pendiente es la constante de Henry

La ley de Henry:

C = kP
C es la concentracin molar (mol/L) P es la presin parcial del gas (atm) k es la constante de Henry El valor de k depende de la naturaleza del gas, del lquido y de la temperatura

Velocidad de Transferencia de Oxgeno Volumtrica

Cuando el control de la transferencia de O2 se encuentra en la pelcula de lquido que rodea a la burbuja o a los microorganismos, la velocidad de transferencia de oxgeno, NA se puede expresar como:

NA = kLa (C* - C) = H kLa (P P*)

Se supone que hay equilibrio entre el oxgeno de el gas y el disuelto en el lquido.

Velocidad de Transferencia de Oxgeno Volumtrica

NA = kLa (C* - C) = H kLa (P P*)

kL: a: Coef volumtrico de transferencia de O2 a la fase lquida (cm/hr) A / V, rea interfacial especfica (cm2/m3) como a resulta difcil de determinar kLa C*: C: Conc. de O2 en el equilibrio (mM/L) (hipottico) Conc. de O2 disuelto en el seno de la fase lquida este valor no puede ser inferior Ccrtico 1mg/L P*: P: H : Presin de O2 en el equilibrio Presin de O2 en el seno de la fase gas cte. de Henry

Balance de Oxgeno

FO2

Ecuacin de balance de oxgeno en el fermentador:

Variacin = O2 que entra O2 que sale O2 consumido (por unid vol) O2 que entra O2 que sale = O2 transferido = NA

dC mx * = k L a (C - C ) dt Yo 2
x

Balance de Oxgeno

FO2

Ecuacin de balance de oxgeno en el fermentador:

En estado estacionario, para que el cultivo pueda crecer sin limitacin de oxgeno, el suministro debe ser igual a la demanda.

k L a (C - C ) =
*

mx
Yo2

Mtodos de determinacin de kLa

Para la adecuada operacin de un fermentador se hace necesario conocer el valor del coeficiente volumtrico de transferencia de O2

Medicin del flujo de oxgeno

Titulacin: Oxidacin de sulfito de sodio

kLa

Eliminacin del O2: Mtodo Dinmico Balances de masa: Medicin Directa con analizador de O2

Estimado mediante correlaciones

Mtodo del sulfito de sodio

Se basa en la rpida reaccin qumica de oxidacin del sulfito a sulfato mediante O2. Se reemplaza el medio por solucin de sulfito de sodio (sulfato cprico como catalizador) y se burbujea aire por un cierto tiempo. Sulfito + O2 Sulfato

kL a C =
*

Sulfitoinicial - Sulfito final Dt

kLa C* : Representa la mxima velocidad volumtrica de transferencia de O2 en un sistema dado (fermentador).

Mtodo dinmico
En este caso la medicin se realiza en el fermentador durante el crecimiento de un cultivo activo, registrndose el oxgeno disuelto mediante un electrodo. El proceso tiene 2 etapas:

Etapa 1: Durante la fermentacin se corta el suministro de aire (T1) y se registra la disminucin de O2 disuelto. En este caso el suministro es nulo

k L a (C * - C ) = 0

mx
Yo2

La pendiente de la curva es la demanda de O2:

dC = dt

El flujo de aire se repone antes que se alcance la concentracin crtica de oxgeno, Cc (bajo este valor la velocidad de metabolismo se hace dependiente de la concentracin C, pudindose causar daos irreversibles en los m.o.). Cc 0.1*Concentracin de Saturacin Bajo estas condiciones se cumple:

1 m x dC C =C + kLa dt Yo2
*

Desde la cual se despeja el trmino (-1/kLa) Depende de la velocidad de respuesta de los electrodos!!

Mtodo medicin directa Para aplicar este mtodo se utiliza un electrodo de oxgeno disuelto y sistemas para determinar oxgeno en la fase gaseosa. En este mtodo se calcula la demanda de oxgeno midiendo el flujo de aire y la concentracin de oxgeno en las corrientes gaseosas de entrada y salida. Con estos valores y la lectura de oxgeno disuelta, se calcula kLa. O2 entrada O2 salida = O2 transferido = kL a (C* - C)

Mtodo de alto costo debido al equipamiento analtico requerido.

Factores que afectan kLa

Temperatura Los aumentos de temperatura se producen aumentos en el coeficiente de transferencia, es as como se tiene: kL a (30C) = 1.15*kL a (20C) kL a (20C) = 1.15 kL a (10C)

Fermentacin con formacin de micelas Al formarse micelas se produce un aumento de la viscosidad lo que conlleva a una disminucin del kL a.

Factores que afectan kLa

Sustancias Orgnicas La adicin de compuestos orgnicos produce una disminucin tanto del kL como del rea especifica, a. Es as como: En agua + 1% peptona db (dimetro de burbuja) kL decrece a decrece

Efecto combinado implica que kLa (orgnico) = 0,4 kL a (agua) Agentes Surfactantes La adicin de agentes surfactantes que evitan la produccin de espuma alteran el valor de kLa. Afectando tanto al kL como al dimetro de las burbujas, db.

Condiciones de Operacin

Matraz

VTO = 30-60 [m moles/L h] kLa = 200-400 [ h-1 ]

Laboratorio VTO = 60-120 [m moles/L h]

kLa = 60-500 [ h-1 ]

Industrial

VTO = 70-100 [m moles/L h] kLa = 100-400 [ h-1 ]

VTO: Velocidad de transferencia de Oxgeno

Ref: Acevedo F.,Gentina JC., Illanes A (2002) Fundamentos de Ingeniera Bioqumica, Ed. Universitarias de Valparaso

Velocidad de Flujo de Aire

Para determinar la velocidad de flujo de aire necesario se puede tomar como dato la demanda de oxgeno, considerando la eficiencia de absorcin, E (3-30%). La tasa especfica de aireacin se entrega en volmenes de aire por volumen de lquido por min VVM

Faire N A 22.4 T VVM = = Vliquido 1000 0.21 E p 273 60

NA en [milimoles O2/ h*L], T en [K], Presin (p) en [atm] En condiciones normales de presin (P = 1 atm) y temperatura (T = 0C = 273 K) un mol de un gas ocupa un volumen de 22.4 L

Ref: Acevedo F.,Gentina JC., Illanes A (2002) Fundamentos de Ingeniera Bioqumica, Ed. Universitarias de Valparaso

Velocidad de Flujo de Aire

Otra forma es expresar la aireacin como velocidad superficial del aire,

vs

Faire = vs A

A: rea de la seccin transversal del fermentador Usualmente Vs est entre 30 -300 [cm/min] Generalmente Laboratorio Nivel Industrial Aireacin 1.5 vvm 0.2-0.7 vvm

Ref: Acevedo F.,Gentina JC., Illanes A (2002) Fundamentos de Ingeniera Bioqumica, Ed. Universitarias de Valparaso

Agitacin
Objetivos Mezclar el caldo de fermentacin, para obtener una suspensin uniforme (mezcla homognea) Acelerar las velocidades de transferencia de masa (nutrientes) y calor Disminuir el espesor de la pelcula lquida esttica.

Agitacin
En detalle, los objetivos de la agitacin pueden ser:
Mezcla de dos lquidos miscibles (ej: alcohol y agua) Disolucin de slidos en lquido (ej.: azcar y agua) Mejorar la transferencia de calor (ej.,en calentamiento o enfriamiento) Dispersin de un gas en un lquido (ej.,oxgeno en caldo de fermentacin) Dispersin de partculas finas en un lquido Dispersin de dos fases no miscibles (ej.,grasa en la leche)

Diferentes sistemas de agitacin

Agitacin por aire

Agitacin por paletas

Agitacin por aire

Agitacin
Los agitadores cuentan generalmente con 2 o 3 rotores en un mismo eje. Para obtener un alto grado de mezclado se utilizan placas deflectoras de modo de romper las lneas de flujo.

Placa deflectora Bafles

Agitadores
Los agitadores se dividen en A) Los que generan corrientes paralelas al eje del impulsor que se denominan impulsores de flujo axial; B) Los que generan corrientes en direccin radial tangencial que se llaman impulsores de flujo radial.

Tipos de agitadores Diferentes clases de RODETES, Impeler

Los tres tipos principales de agitadores son: paletas turbina hlice

Tipos de agitadores Diferentes clases de RODETES, Impeler

Los tres tipos principales de agitadores son: paletas turbina hlice

Paleta o pala
El flujo de lquido tiene una componente radial en el plano de la pala Producen una accin de mezcla suave, conveniente para el trabajo con materiales frgiles. Operaciones de mezcla simple: la mezcla de lquidos miscibles o la disolucin de productos slidos.

Turbina
eficaces para un amplio intervalo de viscosidades; en lquidos poco viscosos producen corrientes intensas, que se extienden por todo el tanque y destruyen las masas de lquido estancado.

Hlice
Giran a gran velocidad (de 500 a varios millares de r.p.m). No son muy efectivas si estn sobre ejes verticales situados en el centro del depsito de mezcla.

Clculo de Potencia para la agitacin en un Reactor

Sistemas sin aireacin Sistemas con aireacin

Razn HL/T
J A L

Valor 1,0 3,0 0,3 0,6 0,5 3,0 1,0 2,0 0,08 0,1

D/T A/D

F W E C D H

E/D, F/D J/T

Clculo de Potencia: Mecanismos de Agitacin en Sistemas sin Aireacin

Np: Nmero de Potencia: Valor que determina la potencia absorbida por el fluido

Np = Fuerza Externa Aplicada Fuerza Inercial del Fluido

Donde

Po gc Np = r N 3 D5

Po : Potencia externa entregada por el agitador [Kgf m /s] 1 HP = 76 Kgf m/sec gc :Factor de conversin : 9.8 kg m/Kgf sec2 N :Velocidad de rotacin del impeler [rps ] D
:Dimetro

del impeler [m]

r Densidad del Fludo [kg/m3]

Rodete 1 2 3 Turbina Rushton Turbina 4 paletas rectas (canalete) Hlice marina

H/T

D/T

C/D

deflectores

0,33

Diferentes Configuraciones
Si la configuracin es diferente se deben aplicar los siguientes factores:
T HL * D D T HL * D D f f

P( real ) = Pf

f: representa las condiciones de la tabla

Si el nmero de impeler es mayor que 1 P*( real) = N impeler * P(real)

Ejemplo
Se tiene un fermentador equipado con 2 set de turbinas de paletas planas y 4 baffles. Las dimensiones del fermentador son: Dimetro del fermentador 3m (T) Dimetro del agitador 1.5m (D) Ancho de los baffles 0.3 m (J) Altura del lquido 5 m (Hl) Las caractersticas del caldo de cultivo son una densidad de 1200 kg/m3 y una viscosidad de 0.02 kg/m sec. Las condiciones de operacin son una velocidad de rotacin de 60rpm y una velocidad de aireacin de 0.4 vvm. Se requiere calcular la potencia requerida para un sistema sin aireacin

Efecto de aireacin Potencia necesaria Aumenta o Disminuye?

Disminucin de la potencia consumida debido a la aireacin

La presencia de un gas produce cambios en la densidad, alrededor del agitador, principalmente por la presencia de burbujas. Los cambios producidos son bastante significativos al comparar los niveles de potencia requeridos en un sistema sin aireacin.

PG/ P = 0.3 1:
Dependiendo del tipo de agitador y la velocidad de aireacin, que se traduce en el grado de dispersin de las burbujas. La disminucin tpica en la potencia es del orden de un 40 a 60%

Na: Nmero de aireacin

Clculo de Potencia: Mecanismos de Agitacin en Sistemas con Aireacin

PG/ P = f (Na)
Velocidad Aparente del aire a travs de una seccin del tanque Na = Velocidad de agitacin

Fa D2 Fa Na = = N D N D3

Donde Fa: Flujo de aireacin [m3/seg] N: Velocidad de rotacin del impeler [rps ] D: Dimetro del impeler [m]

Clculo de Potencia: Mecanismos de Agitacin en Sistemas con Aireacin Para Turbina de paletas planas en un sistema aire-agua, se han determinado la siguiente correlacin:

PG = a* ( Po2 * N *Di3/ Faire 0.56)0.45

Donde a: Constante, si V >1000 L a=1, V <1000 L a=0.72 Densidad del lquido : 0.8- 1.65 g/cm3 Viscosidad del lquido : 0.9 100 cp Tensin superficial : 27-72 dinas/cm

Relacin entre la potencia con y sin aireacin, y el nmero de aireacin

np: Nmero de paletas

H/T

D/T

J/H

0,33

0,1

Ref: Aiba S (1973) Biochemical Engineering Academic Press, NY.

Ejemplo
Se tiene un fermentador equipado con 2 set de turbinas de paletas planas y 4 baffles. Las dimensiones del fermentador son: Dimetro del fermentador 3m (T) Dimetro del agitador 1.5m (D) Ancho de los baffles 0.3 m (J) Altura del lquido 5 m (Hl) Las caractersticas del caldo de cultivo son una densidad de 1200 kg/m3 y una viscosidad de 0.02 kg/m sec. Las condiciones de operacin son una velocidad de rotacin de 60rpm y una velocidad de aireacin de 0.4 vvm. Se requiere calcular la potencia para un sistema aireado

Correlaciones entre variables de diseo y el Coeficiente de Transferencias de O2 (kLa) Correlaciones del tipo: kLa = K *( PG /V )a * vsb * Ng

Donde (PG/V): Potencia por unidad de volumen vs : Velocidad del aire a travs del estanque vaco N: velocidad de agitacin

Ejemplo
Se tiene un fermentador equipado con 2 set de turbinas de paletas planas y 4 baffles. Las dimensiones del fermentador son: Dimetro del fermentador 3m (T) Dimetro del agitador 1.5m (D) Ancho de los baffles 0.3 m (J) Altura del lquido 5 m (Hl) Las caractersticas del caldo de cultivo son una densidad de 1200 kg/m3 y una viscosidad de 0.02 kg/m sec. Las condiciones de operacin son una velocidad de rotacin de 60rpm y una velocidad de aireacin de 0.4 vvm. Se requiere calcular el coeficiente de transferencia de oxgeno

Transferencia de Calor
El metabolismo celular es una reaccin global exotrmica La operacin a temperatura constante REMOCIN del calor de fermentacin implica la

El calor de fermentacin, QF, se calcula en base a balances de energa considerando: La oxidacin de sustrato Formacin de biomasa

Calor de Fermentacin

Fermentaciones anaerobias Se considera que la fraccin de sustrato que se convierte a clulas es muy pequea QF [Kcal/ l h] = QR [Kcal/ l h]
QR: Calor de reaccin de la secuencia metablica principal.

Calor de Fermentacin

Fermentaciones aerobias Es indispensable considerar la formacin de biomasa.

Una forma simplificada es la propuesta por Cooney et al. (1968):

QF [Kcal/ l h] = 0.12 * NA [milimoles/ l h]

NA: Demanda de oxgeno

Balance de energa en todo el fermentador, sin acumulacin y calores de las corrientes de entrada y salida y son despreciables.

QF + QA = QP + QI
QA: Calor de Agitacin. QP: Prdidas de calor QI: Calor transferido por el sistema de enfriamiento. Este parmetro es significativo en clulas que crezcan a altas tasas QF (8-15 [Kcal/ l h] ) >> QA (0.8-2.5 [Kcal/ l h] )

Diseo de sistemas de enfriamiento

QF + QA = QP + QI
Asumiendo QF: Se calcula segn la fermentacin (aerbica o anaerbica). QA = 0.1 * QF , o se puede despreciar. QP: Se puede estimar como las prdidas de calor por las paredes de un cuerpo cilndrico, suponiendo que tanto la temperatura interna como externa son constantes.

QP = h*p*T*HL* (Tf Ta)

h: Coeficiente de conveccin [ 10 25 Kcal/h m2] T: Dimetro del tanque HL: Altura del lquido Tf: Temperatura fermentador Ta: Temp ambiente.

Diseo de sistemas de enfriamiento

QF + QA = QP + QI
Asumiendo QF: Se calcula segn la fermentacin (aerbica o anaerbica). QA = 0.1 * QF , o se puede despreciar. QI: el diseo de los intercambiadores de calor se basan en: QI = U *A* DT A: rea de transferencia de calor DT: Diferencia de temperaturas media logartmica o aritmtica U: Coeficiente global de transferencia de calor (W/ (m2 K))

Diseo de sistemas de enfriamiento

v En fermentadores pequeos, el enfriamiento no es problema, algunas veces hay que adicionar calor para mantener las condiciones isotrmicas, debido a que las prdidas se hacen ms significativas. v En fermentadores industriales la remocin de calor resulta costosa.

Sistemas de enfriamiento
Equipo Chaqueta Usos y limitaciones Se utiliza en equipos de tamao piloto. Alto costo y rea de transferencia limitada Diagrama

Sistemas de enfriamiento
Equipo Serpentn Usos y limitaciones Bajo costo y gran rea de transferencia (pero en algunos casos no alcanza a ser suficiente) Diagrama

Sistemas de enfriamiento
Equipo Usos y limitaciones Diagrama

Intercambiador Si el serpentn no es externo suficiente. Aumento los costos y peligro de contaminacin e insuficiencia de aireacin. Lluvia Externa Barato y eficaz, se usa en conjunto con los serpentines.