PROY-NMX-F-051-SCFI-2006 ALIMENTOS ACEITES Y GRASAS VEGETALES O ANIMALES DETERMINACIN DEL NDICE DE ANISIDINA MTODO DE PRUEBA FOODS VEGETABLE OR ANIMAL

IMAL FATS AND OILS ANISIDINE VALUE DETERMINATION TEST METHOD

PROY-NMX-F-051-SCFI-2007

PREFACIO En la elaboracin de esta Norma participaron las siguientes Empresas e Instituciones: Asociacin Nacional de Industriales de Aceites y Mantecas Comestibles, A.C. Cmara Nacional de la Industria de Aceites, Grasas, Jabones y Detergentes, A.C. Cmara Nacional de la Industria de Aceites y Grasas Comestibles, A.C. Cmara de Aceites y Protenas de Occidente, A.C. Comit Tcnico de Normalizacin Nacional de la Industria de Aceites y Grasas Comestibles y Similares Cargill de Mxico, S.A. de C.:V. Coral Internacional, S.A. de C.V. Industrial Patrona, S.A. de C.V.

Ragasa Industrias, S.A. de C.V. Sigma Alimentos, S.A. de C.V. Tron Hermanos, S.A. de C.V.

OBJETIVO

Esta norma mexicana establece el mtodo de prueba para la determinacin del ndice o Valor de Anisidina en los aceites y grasas vegetales o animales. 2 DEFINICION

El ndice o valor de anisidina se define como 100 veces la densidad ptica medida en nm en una celda de 1 cm de una solucin que contiene 1,00 g del aceite o grasa en 100 mL de una mezcla de solvente y reactivo de acuerdo al mtodo de prueba que se describe en esta Norma. 3 FUNDAMENTO TECNICO

El mtodo de prueba que se establece en esta norma determina la cantidad de aldehdos (principalmente 2-alkenales y 2,4-dienales) en los aceites y grasas vegetales o animales, por la reaccin qumica ocurrida en una solucin de cido actico entre los compuestos aldehdicos presentes en el aceite y el compuesto p anisidina ( vea Notas 8.2.1) y la determinacin entonces de la absorbancia a 350nm. 4 APARATOS

4.1 4.2 4.3

4.4 4.5

Tubos de ensayo de 10 mL (mnimo), ya sea con tapones de vidrio esmerilado o con tapones de rosca con cubierta de Tefln. Matraces volumtricos de 25 Ml Pipetas o buretas automticas Nota Cualquier pipeta y/o bureta capaz de dispensar exactamente 1 mL y 5 mL se considera satisfactoria Espectrofotmetro adecuado para medir la absorbancia a 350nm Celdas de vidrio de 1,00( 0.01)cm. Las dos celdas de un par deben de ser idnticas. REACTIVOS Iso-octano (2,2,4-trimetil pentano), pticamente claro (ver 8.1 Precaucin y notas 8.2.2). Acido actico glacial, calidad grado analtico (ver notas 8.2.3). p-Anisidina, calidad grado analtico (ver 8 Notas, 8.1 Precaucin y 8.2.4), solucin de 0,25g/100mL en acido actico glacial (Reactivos, 2) (ver 8 notas 8.2.5). PROCEDIMIENTO NotaLa muestra deber de estar perfectamente clara y seca (ver 8 Notas 8.2.3)

5 5.1 5.2 5.3

6.1 6.2 6.3

6.4

Pesar 0,5-4,0g de la muestra, al ms cercano miligramo dentro de un matraz volumtrico de 25mL. Disolver y dilur al volumen con iso-octano. Medir la absorbancia (Ab) de la solucin a 350nm en una celda con el espectrofotmetro usando la celda de referencia llena con solvente, como blanco. Pipetear exactamente 5 mL de la solucin de aceite o grasa dentro de un tubo de ensayo (Aparatos, 1) y exactamente 5 mL de el solvente dentro de un segundo tubo de ensayo. Por medio de una pipeta automtica (4 Aparatos, 4.3) agregar exactamente 1 mL del reactivo de p-anisidina (5 Reactivos, 5.3) a cada tubo, tparlos y agitar muy bien. con fuerza. Despus de exactamente 10 minutos medir la absorbancia (As) de el solvente en el primer tubo de ensayo en una celda (4 Aparatos, 4.5) a 350 nm, usando la solucin del segundo tubo de ensayo como el blanco o testigo en la celda de referencia. EXPRESION DE RESULTADOS El ndice o valor de anisidina (IAN) se calcula por la frmula: IAN = 25 x (1.2As Ab) m Donde: As = absorbancia de la solucin de grasa despus de la reaccin con el reactivo p-anisidina (5 Reactivos 5.3). Ab = Absorbancia de la solucin de grasa. m = masa, en g de la muestra de aceite o grasa.

8 8.1 8.1.1

NOTAS PRECAUCION El iso-octano es inflamable y un riesgo de fuego. Sus lmites explosivos en aire son 1.1 a 6%. Es txico por ingestin y por inhalacin. Se requiere de una campana de humos que est funcionando correctamente cuando se est trabajando con este solvente. El cido actico, en su estado puro, es moderadamente txico por ingestin e inhalacin. Es un fuerte irritante y txico cuando se absorbe a travs de la piel. Su TLV es 0,1 ppm. (TLV= Toxic Limit Value; Lmite de Valor Txico) La p-anisidina es un fuerte irritante y txico cuando se absorbe a travs de la piel. El TLV es 0,1 ppm. NOTAS NUMERADAS En la presencia de cido actico, la p-anisidina reacciona con los compuestos aldehdicos en los aceites y grasas. La intensidad del color amarillento de los productos de la reaccin formados depende no solamente de la cantidad de compuestos aldehdicos presente pero tambin de su estructura qumica. Se ha encontrado que un doble enlace en la cadena de carbonos conjugado con el doble enlace del carbonilo aumenta la absorbencia molar de cuatro a cinco veces. Esto significa que, especialmente, los 2-alquenales y dienales contribuirn substancialmente al valor encontrado. En la mayor parte de los casos el iso-octano puede substiturse por el hexano normal como solvente. Sin embargo, los aceites que contienen cantidades altas de cidos grasos oxidados no se disolvern completamente en hexano normal. Para esos aceites el iso-octano deber usarse como solvente. La absorbancia del solvente usado (iso-octano o hexano normal), medida en una celda de 1,00 cm entre 300 y 380 nm, debe ser nula o casi nula. El producto comercial puede ser liberado de material absortivo por percolacin a travs de una columna de vidrio (3-5 cm de dimetro interno, y 100cm de largo) rellena con silica gel. La reaccin entre la p-anisidina y los aldehdos involucra la formacin de agua. De aqu que, la presencia de humedad en cualquiera de los reactivos o en la muestra lleva a una reaccin incompleta y, consecuentemente, valores bajos. Ya que el cido actico glacial es altamente higroscpico, es esencial checar su contenido de humedad por una determinacin Kart Fischer. Si el contenido de humedad excede el 0,1 porciento, el cido deber ser descartado. Durante el almacenamiento, la p-anisidina tiende a obscurecerse como resultado de la oxidacin. Los cristales de anisidina, los cuales deben de ser de color crema, debern ser almacenados de 0 a 4C en un frasco obscuro. Los cristales no debern ser expuestos a luz fuerte y debern ser usados antes de que se observe cualquier cambio de color. Un reactivo con cambio de color puede reducirse y decolorarse en la forma siguiente Disolver 4,0g de p-anisidina en 100 mL de agua destilada a 75C . Agregar 0,2g de sulfito de sodio y 2,0g de carbn activado y agitar por 5 minutos. Filtrar entonces a travs de un papel filtro doble. Si el carbn pasa a travs del filtro, repetir la filtracin. Enfrar la solucin filtrada a aproximadamente 0C, permitir que repose a esta temperatura por al menos 4 horas y preferentemente hasta el da siguiente. Separar por filtracin la p-anisidina

8.1.2

8.1.3

8.2 8.2.1

8.2.2

8.2.3

8.2.4

8.2.5

cristalizada y lavar con una pequea cantidad de agua destilada a una temperatura aproximada de 0C. Despus de secar en un desecador al vaco, transferir los cristales dentro de un frasco caf oscuro. Si se almacena en la oscuridad y a baja temperatura, los cristales obtenidos debern de no oscurecerse apreciablemente durante un ao. Las soluciones de reactivo que tengan una absorbancia mayor de 0,200 cuando se midan en una celda de 1,00 cm a 350 nm contra iso-octano o hexano normal como testigos debern ser descartadas.

PRECISION Y REPETIBILIDAD Resultados de pruebas realizadas (vea 10 Bibliografa 10.3) : Aceite de nabo crudo Muestra 1 Muestra 2 20 20 2,0 2,0 4,0 5,8 35 37 Aceite de palma refinado Muestra 1 Muestra 2 20 20 2,3 2,3 4,8 4,6 30 31

No. de laboratorios. Valor medio Repetabilidad, CV, % Reproducibilidad, CV, % 10 BIBLIOGRAFIA 10.1

NMX-Z-13-1977 Gua para la redaccin, estructuracin y presentacin de las Normas mexicanas (DOF 31/10/1977) Firestone, D., Editor Official Methods and Recommended Practices of the AOCS; Fifth Edition; American Oil ChemistsSociety; 1998; Mtodo Cd 18 90 FOSFA International Colaborative Study # P15, May, 1986, Document No. 384, ISO/TC34/SC11, Boston MA USA and Oxford, (UK) (1987)

10.2

10.3

11

CONCORDANCIA CON NORMAS INTERNACIONALES

No se puede establecer concordancia por no existir referencia al momento de la elaboracin de la presente.