ANTECEDENTES

Se proponen hasta tres teoras para el origen de la sfilis: la teora del nuevo mundo, que propone que la sfilis era endmica en la zona actualmente conocida como Hait y que fue llevada al viejo mundo por Cristbal Coln; la teora del viejo mundo o precolombina que afirma que la sfilis provena del frica central, y lleg a Europa mucho antes que Coln llegara a Amrica y la teora unitaria, que sostiene que todas las infecciones por treponema eran una sola entidad clnica, y sus manifestaciones variaban de acuerdo a condiciones del medio ambiente, como el clima. Lo que s est muy claro es que para 1495 la sfilis era epidmica en Europa, y que lleg a otros pases como la India en 1498, a la China en 1505 y a Japn en 1569. Durante el Renacimiento esta enfermedad tuvo varios nombres, como la gran maldicin (en ingls: the great pox), enfermedad venrea, enfermedad francesa o Morbus Gallicus, enfermedad italiana, espaola, alemana o polaca. Lo cierto es que ningn pas aceptaba ser el origen de la nueva plaga y cada cual la adjudicaba a sus enemigos, para los turcos por ejemplo, era la enfermedad de los cristianos. El trmino enfermedad francesa o Morbus Gallicus fue el ms aceptado en esa poca, hasta que en 1530 el poeta italiano, Girolamo Fracastoro (14831553), que adems era astrnomo, botnico, matemtico y filsofo, escribi un poema denominado Syphilis sive morbus gallicus, que se traduce como Sfilis y la enfermedad francesa; trataba de un pastor llamado Sfilis, que fue afectado por la enfermedad Morbus Gallicus. Como era de esperarse, rpidamente se acept el nuevo trmino para esta enfermedad, porque as no se afectaba el buen nombre de las naciones. Pero adems Fracastoro, en 1546, escribi De contagione et contagiosis morbis et curatione, donde formul tres formas de transmisin para esta enfermedad, una forma directa entre humanos al igual que la sarna y la lepra, una forma indirecta a travs de objetos comoropa o a travs de animales y la tercera en que estos grmenes eran atrados por los humores o por la pestilencia. Los primeros modelos animales corresponden a 1903, y fue IlyaIlich Metchnikoff y Pierre Roux quienes transmitieron el agente causal de la sfilis a chimpancs, segn ellos ste era un virus, y lograron la trasmisin de la enfermedad entre primates, Poco despus dos investigadores italianos inocularon el germen en testculos y escroto de conejos. Fueron Fritz Schaudinn y Paul Hoffman, microbilogos alemanes, quienes en 1905 realizaron las primeras observaciones al microscopio del Treponema pallidum, con coloracin de Giemsa modificada y demostraron que la espiroqueta era el agente causal de la sfilis. Landsteiner tambin demostr que en la reaccin de Wassermann se podan usar otros tejidos, especialmente corazn bovino, luego se le aadi a la tcnica original de Wassermann, colesterol y lecitina para incrementar la sensibilidad de los antgenos. En 1912 Nichols y Hough aislaron el Treponema pallidum, subespecie pallidum del lquido cefalorraqudeo (LCR) de un paciente con neurosfilis y lo inocularon en testculos de conejos adultos, logrando mantener esta cepa viable, la que se denomin cepa Nichols. En 1922 Kahn desarroll un test de floculacin que no requera complemento y poda observarse microscpicamente en pocas horas. Fue recin en 1941, que Mary Pangborn purific la cardiolipina del corazn bovino, mediante repetidas precipitaciones con cloruro de bario, sta se mezcla con colesterol y lecitina para forma un antgeno estable usado en la deteccin de anticuerpos contra la sfilis, lo que permiti el desarrollo de la prueba de VDRL.

INTRODUCCIN En general, se acepta que los principales factores de virulencia de T. pallidum se relacionan con las siguientes caractersticas: a) la capacidad del microorganismo para transitar por diversas mucosas e invadir el cuerpo del hospedero; b) su movilidad tipo sacacorchos, que promueve el cruce de las capas tisulares; y c) su capacidad para atravesar placenta. La sfilis es una enfermedad de transmisin sexual causada por una espiroqueta (un organismo muy pequeo). Puede afectar al cuerpo entero. Cualquier persona que tenga relaciones sexuales sin proteccin con una persona infectada puede contraer sfilis. Tener ms de un compaero de relaciones sexuales aumenta el riesgo. La sfilis se transmite de una persona a otra a travs del contacto directo con la lastimadura, lesin o salpullido hmedo de la sfilis. Generalmente se transmite a travs del contacto sexual, ya sea por va vaginal, anal u oral. Tambin puede pasarse al besar o a travs del contacto manual u otro contacto personal cercano. Las mujeres embarazadas y con sfilis pueden transmitir la sfilis a sus bebs antes del parto. Puedes tener sfilis sin tener ningn sntoma y aun as puedes transmitirla a otros. Los sntomas tempranos son muy similares a los de muchas otras enfermedades. La sfilis tiene 4 etapas de sntomas: primaria, secundaria, latente y terciaria. Etapa 1 Primaria. Una lesin sin dolor (llamada chancro) puede aparecer en el rea por donde el germen entr inicialmente al cuerpo, generalmente en la vagina, el ano, la boca, los labios o la mano. Es firme y redonda y generalmente aparece de 9 a 90 das (el promedio es 21 das) despus de la exposicin. Las lesiones en la vagina pueden no notarse y desaparecer solas en 1 a 5 semanas. Sin embargo, todava se lleva el germen y se lo puede transmitir a otros. Etapa 2 Secundaria. Se pueden tener sntomas gripales de 3 semanas hasta 6 meses despus de la infeccin. En este momento, tambin pueden aparecer uno o ms salpullidos (normalmente lastimaduras marrones del tamao de una moneda pequea) en las palmas de las manos y las plantas del de los pies, el rea de la ingle y por todo el cuerpo. La bacteria vive en estas lesiones. Por consiguiente, cualquier contacto fsico (sexual y no sexual) con las lesiones puede transmitir la infeccin. La segunda etapa tambin puede incluir fiebre, dolor de cabeza, dolor de garganta, ganglios linfticos agrandados, dolor de garganta, prdida de pelo en diferentes reas, dolores musculares, manchas mucosas o llagas en la boca, cansancio y protuberancias o verrugas en las reas clidas y hmedas del cuerpo. Los salpullidos generalmente sanan en 2 a 6 semanas y se van sin tratamiento, pero aun as se lleva el germen y se lo puede transmitir. Etapa 3 Latente. Si la sfilis no se trata, los sntomas desaparecen pero el germen sigue permaneciendo en el cuerpo. La sfilis debe tratarse antes de llegar a esta fase, porque de lo contrario se corre el riesgo contraer sfilis terciaria o final. Etapa 4 Terciaria. Algunas personas desarrollan sfilis terciaria o final. sta es la etapa en que la bacteria daa el corazn, los ojos, el cerebro, el sistema nervioso, los huesos, las articulaciones o prcticamente cualquier otra parte del cuerpo. Esta fase puede durar aos o incluso dcadas. La sfilis terciaria puede causar enfermedad mental, ceguera, enfermedad del corazn, parlisis, dao cerebral o muerte.

FUNDAMENTO VDRL (por su siglas en ingls, Venereal Disease Research Laboratory) es una prueba serolgica realizada en medicina con sensibilidad y especificidad para complementar el diagnstico de sfilis. La prueba de VDRL comenz a desarrollarse antes de la Primera Guerra Mundial, con la participacin de August von Wassermann y Albert Ludwig Sigesmund Neisser. Modificaciones generales ocurrieron en 1946, las cuales son la base de la prueba actual. Debido a que la prueba del VDRL emplea marcadores indirectos de infeccin, se le conoce como una prueba para sfilis no-treponemica. El VDRL es una tcnica de floculacin que utiliza el antgeno de cardiolipina para detectar anticuerpos antitreponmicos inespecficos producidos por el individuo ante una infeccin sifiltica. Se practica normalmente en lmina de cristal, en la que se mezcla el suero del paciente (previamente calentado para inactivar el complemento), con una suspensin fresca de antgeno de cardiolipina; esta mezcla se agita de forma rotatoria y al cabo de pocos minutos puede observarse la floculacin utilizando un microscopio de bajo aumento; sus resultados pueden expresarse tanto cualitativa como cuantitativamente. Un VDRL positivo (reactivo), es un parmetro altamente sugestivo de sfilis, pero nunca sinnimo de sta, por lo que debe evaluarse en combinacin con la historia clnica del sujeto y sus antecedentes epidemiolgicos Cuando el resultado de la prueba confirmatoria resulta negativo, se considera que el resultado reactivo del VDRL es un verdadero negativo y que el sujeto no se encuentra infectado. Si el resultado de una prueba confirmatoria es positivo, se considera confirmado el diagnstico de sfilis en el paciente y este debe ser referido para tratamiento. Cualquier enfermedad por espiroquetas causa un VDRL positivo: sfilis, frambesia, pinta, bejel, fiebre recurrente, leptospirosis,enfermedad de Lyme y otras borreliosis. Resultados reactivos tambin resultan con otras enfermedades infecciosas,comotuberculosis, lepra,neumococo, endocarditisinfecciosa, neumonas vir ales, sarampin, varicela, paludismoy tripanosomiasis. Algunas enfermedades no infecciosas que pueden producir un VDRL reactivo incluyen las anemias hemolticas autoinmunes, enfermedades del colgeno, sndrome antifosfolipdico primario, ciertas inmunizaciones y el embarazo. Los falsos positivos, por lo general, no superan los ttulos de dilucin de 1/8; y pueden ser transitorios o permanentes, segn persistan, o no, ms de 6 meses. Examen de reagina plasmtica rpida (RPR) Es una prueba de deteccin para sfilis, que busca anticuerpos presentes en la sangre de personas que tengan esta enfermedad. La prueba es similar al examen de laboratorio de investigacin de enfermedades venreas ( VDRL).Se necesita una muestra de sangre. Se usa para examinar a personas que tengan sntomas de infecciones de transmisin sexual y de manera rutinaria para examinar mujeres embarazadas en bsqueda de la enfermedad. La prueba tambin se usa para ver cmo est funcionando el tratamiento para la sfilis. Despus del tratamiento con antibiticos, los niveles de anticuerpos para sfilis deben disminuir. Estos niveles pueden vigilarse con otra prueba de reagina plasmtica rpida. Los niveles inalterados o crecientes pueden significar que la infeccin persiste.

TECNICA Prueba De V.D.R.L. (Sfilis)

Materiales.
Bata Guantes Portaobjetos o placa Pipeta Pasteur con bulbo Aplicadores de madera Rotor RPR Carbn Control (+) Control (-) Solucin salina Suero sanguneo fresco DESARROLLO Mtodo cualitativo: 1. Atemperar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente. La sensibilidad del ensayo disminuye a temperaturas bajas. 2. Depositar 50L de la muestra a ensayar y una gota de cada uno de los controles positivo y negativo, sobre crculos de un distinto porta. 3. Homogeneizar suavemente el reactivo de RPR- carbn antes de usar. Invertir el vial dispensador y presionar ligeramente para eliminar las burbujas de aire. 4. Situar LA micro pipeta en posicin vertical y perpendicular al porta, y dispensar una gota (20L) de este reactivo junto a cada una de las gotas anteriores. 5. Mezclar las gotas con un palillo, procurando extender la mezcla por toda la superficie anterior del crculo. Emplear palillos distintos para cada muestra. 6. Situar el porta sobre un agitador rotatorio a 80 100 rpm. Durante 8 minutos. El exceso de tiempo puede originar falsos positivos. Mtodo semicualitativo: 1. Realizar diluciones dobles de la muestra en solucin salina 9g/L. 2. Proceder para cada dilucin, como en la prueba cualitativa.

LECTURA E INTERPRETACION Examinar macroscpicamente la presencia o ausencia de aglutinacin inmediatamente despus de retirar el porta del agitador. Agitar el porta manualmente un par de veces antes de realizar la lectura. Interpretacin: Tipo de aglutinacin Lectura Resultado Agregados grandes o medianos R Reactivo Agregados pequeos W Reactivo dbil Ningn agregado o ligera rugosidad N No reactivo En el mtodo semicuantitativo, se define el titulo como la dilucin mayor que da resultado positivo.

RPR Prueba Rpida de Reagina (Sfilis) MATERIALES. Bata Guantes Muestra de sangre Suspensin de Antgeno RPR. Suspensin de cardiolipina1,conteniendo micropartculas de carbn activado. Control Positivo RPR. Control lquido estabilizado, reactivo con antgeno RPR. Control Negativo RPR. Control lquido estabilizado, no reactivo con antgeno RPR. Aguja No. 18 sin bisel utilizada para dispensar aproximadamente 17mL de la suspensin del Antgeno. Pipetas/ agitadoras utilizadas para dispensar aproximadamente 50 mL (0.05 mL) de muestra. Tarjetas de Prueba (crculos de aproximadamente18 mm). Utilice como superficie de prueba. Se debe tener cuidado en la manipulacin de las tarjetas de prueba para evitar introducir contaminantes al crculo de prueba. Extienda cada muestra Sobre el total del rea del crculo de prueba. Rotador (100 2 rpm) Solucin salina (0.9%) Cronmetro Lmpara DESARROLLO Procedimiento cualitativo: 1. Lleve a temperatura ambiente la suspensin del antgeno de RPR, los controles y las muestras. 2. Tome la pipeta/agitador del extremo sellado. Al tiempo que oprime y mantiene presionado dicho extremo,coloque la pipeta dentro de la muestra. Suelte para permitir que la pipeta aspire un poco de muestra. 3. Sostenga en posicin vertical la pipeta/agitador directamente sobre un crculo de la tarjeta de prueba y coloque una gota de muestra sobre esta rea. 4. Utilizando el extremo plano de la pipeta/agitador, extienda la muestra para cubrir el total de la superficie del crculo. Deseche la pipeta/agitador. Repita el mismo procedimiento para cada muestra. 5. Agite el frasco de la suspensin del antgeno antes de utilizarlo. Sostngalo en posicin vertical y dispense varias gotas en la tapa del frasco para asegurarse de que el paso por la aguja es correcto. No limpie la aguja. Coloque una gota de la suspensin del antgeno sobre cada muestra. NO EXTIENDA! 6. Agite por 8 minutos a 100 rpm en un rotador mecnico. 7. Transcurrido este tiempo retire la tarjeta del rotador y agtela breve y suavemente. 8. Lea macroscpicamente bajo una lmpara de luz intensa.

Procedimiento cuantitativo: 1. Seleccione los sueros positivos obtenidos en la prueba cualitativa. 2. Colocar en una gradilla cuatro tubos 12 x 75 mm y numerarlos. 3. Agregar a cada uno de ellos 0.5 mL de solucin salina. 4. Depositar 0.5 mL de suero problema en el tubo No. 1 y mezclar. 5. Pasar 0.5 mL del tubo No. 1 al tubo No. 2 y mezclar. 6. Continuar esta operacin hasta el tubo No. 4. 7. Depositar 0.05 mL de cada una de las diluciones sobre anillos diferentes de la placa de reaccin. Extienda sobre el total de la superficie de cada crculo donde se colocaron las diluciones. 8. Aadir una gota de la suspensin del antgeno previamente resuspendido, exactamente sobre cada una de las gotas de las diluciones anteriores utilizando el frasco gotero al cual se le ha insertado la aguja No. 18 sin bisel. 9. Agite por 8 minutos a 100 rpm en un rotador mecnico. 10. Transcurrido este tiempo retire la tarjeta del rotador y agtela breve y suavemente. 11. Leer el resultado macroscpicamente

RESULTADOS

BIBLIOGRAFIA http://www.cyrlab.com.mx/Portals/0/Insertos/Licon/rpr.pdf http://sisbib.unmsm.edu.pe/bvrevistas/dermatologia/v14_n3/Pdf/a06.pdf http://www.youngwomenshealth.org/spsyphilis.html http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003533.htm http://bvs.sld.cu/revistas/mgi/vol15_5_99/mgi13599.htm http://es.wikipedia.org/wiki/Venereal_Disease_Research_Laboratory http://www.buenastareas.com/ensayos/Prueba-De-v-d-r-l-Sifilis/1097601.html http://depa.fquim.unam.mx/bacteriologia/pdfs/ART%CDC-Tpallidum.pdf http://es.wikipedia.org/wiki/Treponema_pallidum