Marzo 2013 Toxicologa e UNAM FES-C higiene pblica

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLN C-1

Av. 1 de Mayo s/n, colonia Sta. Mara las Torres, Cuautitln Izcalli, Estado. De Mxico.

SECCIN DE BIOQUMICA Y FARMACOLOGA HUMANA LABORATORIO TOXICOLOGA E HIGIENE PBLICA

IDENTIFICACION Y CUANTIFICACION DEL CIANURO PRESENTE EN SEMILLAS DE SORGO.

M. en C. Nopal Guerrero Tais, Q.F.B. Escalante Reynoso Gabriela Gonzlez Rodrguez Juana Ivonne, Martnez Karina, Martnez Nava Blanca Febrero 2013

Palabras Clave. Cianuro, intoxicacin, valoracin, reaccin colorimtrica, cuantificacin, reaccin de valoracin. Resumen El cianuro es uno de los compuestos ms txicos en la naturaleza. La intoxicacin por cianuro produce hipoxia intracelular, interrumpiendo la fosforilacin oxidativa. Se realiz la identificacin y cuantificacin de cianuro a partir de una muestra de sorgo, uno de tantos productos naturales donde puede ser encontrado. El estudio se llev a cabo por el uso de una titulacin alcalina a partir del producto destilado de la muestra (acido cianhdrico). En dicha titulacin se valora la muestra con AgNO3, logrndose la cuantificacin aproximada del HCN en mg. La realizacin de esta prctica obedece a

la necesidad de conocer las fuentes ms probables de exposicin e intoxicacin, adems del riego individual que puede presentar una intoxicacin por cianuros al ser esta una causa de mortalidad importante principalmente en animales. Keywords. Cyanide poisoning, colorimetric reaction, titration reaction Summary Cyanide is one of the most toxic compounds in nature. Cyanide poisoning produces intracellular hypoxia, disrupting oxidative phosphorylation. Was performed for identification and quantification of cyanide from a sample of sorghum, one of many natural products which can be found. The study was conducted by using an alkali titration of assessment, quantification,

Marzo 2013 Toxicologa e UNAM FES-C higiene pblica the distillate from the sample (hydrocyanic acid). In this quantification is evaluated sample with AgNO3, achieving approximate quantification of HCN in mg. The realization of this practice due to the need to know the most likely sources of exposure and poisoning, and irrigation individual may file a cyanide poisoning this being a major cause of mortality mainly in animals. INTRODUCCIN El cianuro es considerado en la actualidad uno de los txicos ms potentes y de accin ms rpida. Suele relacionrselo con episodios de muerte intencional, ya sean ejecuciones en las llamadas cmaras de gases, homicidios, por consumo de comprimidos de paracetamol adulterados, o suicidios. Sin embargo, el cianuro tambin ha originado algunas de las catstrofes toxicolgicas ms resonantes del siglo XX. Incendios en aeronaves en vuelo, debido a la combustin de material plstico, y muchos otros. Debido a su potencia y velocidad de accin, la letalidad del cianuro es muy elevada, lo que hace an ms importante que debamos reconocer esta intoxicacin e implementar con urgencia las medidas necesarias. El cido cianhdrico (HCN, cianuro de hidrgeno o cido prsico) es un lquido voltil incoloro o blanco azulado, con olor caracterstico a almendras amargas cuyo punto de ebullicin es 25,7C. Como gas, es incoloro, explosivo y muy irritante. En estado slido, se encuentra al cianuro como sales, principalmente de sodio, potasio o calcio. La mezcla de estas sales con diversos cidos minerales (por ejemplo el cido clorhdrico) o con agua genera grandes cantidades de HCN gaseoso. En la naturaleza lo encontramos en ciertas plantas en forma de amigdalina, sustancia que a nivel del intestino puede convertirse en cianuro por bacterias. Se puede encontrar, la amigdalina, no solo en las hojas y flores, sino tambin en las semillas y sus envoltorios. Algunos de los vegetales que contienen el precursor del cianuro son la almendra amarga, sorgo, algunas especies de csped, bamb, guisantes, linaza. Las causas de intoxicacin con los cianuros son muy variadas debido al extendido uso que se les ha dado. Se han utilizado como elemento en ajusticiamiento, en la industria se usa en metalurgia, joyera, cianuracion a nivel industrial de metales. En el rea mdica y biolgica se usa con frecuencia, lo cual facilita la disponibilidad de este elemento y la ocurrencia no solo de accidentes, sino tambin de suicidios. En vegetales se encuentra formando compuestos cianogenticos en gran variedad de plantas, las cuales pueden causar intoxicaciones mortales, especialmente en nios. La absorcin inhalatoria (hasta un 77%) es extremadamente rpida, apareciendo los sntomas en segundos con altas dosis. Por va oral(aproximadamente 50 %) el cido clorhdrico del estmago provoca liberacin de HCN, que es absorbido como ion cianuro (CN), generando sntomas en minutos. Las dosis letales de cianuro se han calculado en 200 a 300 mg para las sales de potasio y de calcio (por va oral), 50 mg para el HCN lquido (va oral), y 200 a 300ppm de HCN gaseoso, para provocar la muerte de forma casi inmediata (menores exposiciones por ms tiempo pueden tambin resultar letales). El cianuro posee la capacidad de unirse a diversas protenas como la mioglobina o las enzimas nitrato reductasa, anhidrasa carbnica, catalasa y diversas metaloenzimas. Tambin afecta el metabolismo de lpidos y el transporte de calcio. Sin embargo, su toxicidad radica principalmente en su capacidad para inhibir la enzima citocromo oxidasa, ltima enzima en la cadena de transporte de electrones. Debido a su alta afinidad por el hierro en estado frrico (Fe3+), el cianuro se une casi inmediatamente al hierro presente en el grupo hemo del complejo citocromo a-a3 presente en los tejidos. De esta manera, inhibe la fosforilacin oxidativa y detiene la produccin de la mayor parte del ATP celular, por impedir la respiracin aerobia. Se genera as una hipoxia histotxica, ya que los tejidos no extraen oxgeno de la sangre por no poder utilizarlo. Esto provoca la llamada arteriolizacin de la sangre venosa, que tiene un alto contenido de oxgeno y un color rojo similar al de la sangre arterial. Ante esta situacin, las clulas recurren a la respiracin anaerobia, con menor produccin de ATP y mayor produccin de lactato e

Marzo 2013 Toxicologa e UNAM FES-C higiene pblica hidrogeniones, resultando en una acidosis metablica. Al afectar este proceso rganos esenciales, se comprende por qu al poco tiempo sobreviene la muerte. HIPTESIS. Si el sorgo tiene un contenido razonable de cianuro, entonces este se obtendr por destilacin simple, en forma de cido cianhdrico; y por lo tanto se podr titular por via alcalina para conocer la cantidad de cianuro presente en la muestra. METODOLOGA. Al sospechar la presencia de cido cianhdrico, se procede al aislamiento para su posterior identificacin. Se requiere de una separacin previa del CNH de la muestra por una destilacin simple, la cual se realiza con 20.06g de muestra colocada en un matraz con 200mL de H2O destilada. Se calienta al principio suavemente para evitar la formacin de espuma y una vez alcanzado el punto de ebullicin se eleva lentamente la temperatura. y se recibi en un vaso precipitados con 20ml de agua con 0.5g NaOH, hasta un volumen de 96ml. El destilado se recoge en hidrxido de sodio para evitar prdidas del cido cianhdrico liberado. Se aforo a 250ml con agua destilada, y se tomaron 2 alcuotas de 100 cada una; se adicionaron respectivamente 8ml de NH4OH 6N, y 2ml de KI 5%. Finalmente se titul con AgNO3 0.02N hasta la aparicin de turbidez verde lechosa. RESULTADOS Tabla 1. Resultados de los volmenes de AgNO3 0.02N obtenidos a partir de la titulacin.
Titulacin. 1 2 mL gastados de AgNO3 0.3 0.3

El control de la contaminacin en aquellas personas que laboran con cianuro puede hacerse midiendo las cifras de tiocianatos en plasma o en orina: Tiocianatos en plasma <0.6mg/100ml Tiocianatos en orina <2.5mg/gramo de creatinina

Una de las caractersticas que nos permiten entender la alta toxicidad del cianuro, es el hecho de que los complejos (cianuro + metales) son solubles en agua y de esta forma se pueden <<movilizar>> metales txicos para los eres vivo (Cd, Cr, Pb, Hg, As). En el SNC la sustancia gris, el hipocampo, el cuerpo estriado y la sustancia negra, son comnmente afectados; esta distribucin de los efectos del cianuro est asociada con la anoxia histotxica. El cianuro tambin puede lesionar la sustancia blanca, particularmente el cuerpo calloso. El cianuro causa hipotensin por los defectos sobre el corazn. El in cianuro estimula directamente los quimiorreceptores del cuerpo carotdeo y de los cuerpos articos, produciendo hipernea. Las alteraciones cardacas son evidenciables despus, puesto que el corazn persiste ms tiempo en sus funciones que el sistema respiratorio.

Marzo 2013 Toxicologa e UNAM FES-C higiene pblica Clculo de la cantidad de cianuro en la muestra Nuestra cantidad de muestra pesada fueron 20.06 g de Sorgo, la cual despus del destilado se aforo a 250 ml. Alicuota 1 y 2 Se gastaron 0.3 ml de la solucin de AgNO3 0.02N del cual es liberado el cianuro por autolisis al momento de pulverizar la muestra y dejarla reposar. Las semillas contienen glucsido cristalino llamado amigdalina que forma cido cianhdrico y es venenoso, se libera el cianuro por hidrlisis enzimtica debido a la presencia de la beta glucosidasa. Debido a la volatilidad del HCN es necesario conectar a un aparato de destilacin que burbujee, y que a su vez lo reciba en una solucin con NaOH, en el cual se estabiliza el in cianuro.

HCN + NaOH

CN- + H2O + OH-

Y se procede a valorar las alcuotas con nitrato de plata y yoduro de potasio como indicador

2CN2- + Ag+ I- + Ag+

Ag(CN)2Ag I (Amarillo)

El yoduro reacciona con el exceso de plata cuando no hay ms cianuro disponible, lo que da como resultado yoduro de plata color amarillo que indica el fin de la valoracin. Como se puede observar la cantidad de cianuro es baja, por lo que la ingestin de estos frutos no representa un riesgo para la salud en un corto plazo, ya que para alcanzar la dosis letal esta entre 150 y 200 miligramos, dosis total pura en adulto. La inhalacin de 0.3mg/L produce la muerte as pues como lo vemos en los resultados las cantidades de CN no son tan elevadas como para provocar la muerte de una persona, a hora bien la ingesta continua de estas semillas pudiera resultar en una intoxicacin crnica con los daos que esto conlleva.

ANLISIS DE RESULTADOS: Esta prctica se realiz con la finalidad de identificar la presencia de cianuro en sorgo para lo cual empleamos una un mtodo volumtrico donde el cianuro se encuentra como glucsido ciangeno, en el caso del sorgo este glucsido ciangeno es la amigdalina cuya estructura qumica corresponde a

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Conclusiones Se identificaron las fuentes naturales de exposicin a cianuro, adems, se evalu el riesgo individual que puede presentar una intoxicacin por cianuros, de manera accidental en la mayora de los casos. Se analiz el fundamento de las tcnicas utilizadas en la identificacin y cuantificacin de cianuro en muestras de diferentes semillas. Se aplicaron las tcnicas ms comunes para la identificacin y cuantificacin de cianuros en el laboratorio

Referencias: GOVANTES Betes, Jesus; Govantes Esteso, Carlos. "Manual Normon". 7 edicin. Laboratorios Normon S.A., Madrid, 1999. pag 624-625, 683 Casarett y Doull "Fundamentos de Toxicologa" editorial McGraw-Hill Interamericana, Madrid, Espaa 2005 paf 274-281 Crdoba Daro, 2006, Toxicologa, 5 edicin, El manual moderno, Bogot, pp. 366-369 True, B., Dreisbach, R. 2003. Manual de toxicologa clnica de Dreisbach: prevencin, diagnostico y tratamiento. 7 edicin, editorial el manual moderno. Mxico D.F.