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EVALUACIN DE LA Equisetum hyemale (COLA DE CABALLO) RESPECTO A UN FRMACO DE REFERENCIA (FUROSEMIDA) POR MEDIO DEL TEST DE LIPSCHITZ EN RATAS WISTAR HEMBRA
M. en C. Rangel Trujano Lidia, Q.F.I. Koizumi Castro Mara Guadalupe Crdenas Montero. A., Gonzlez Rodrguez. J., Isidro Morales M., Lozano Garca L., Nava Maldonado C. Ramrez Lynn Rodrigo Octubre 2012 sistema urinarioi, adems de que la especie Equisetum Hyemale contiene una enzima (tiaminasa) que desnaturaliza protenas. Keywords. Diuretics, abstract digestive Hyemale Equisetum (horsetail), equisetonin, Flavonoids, Furosemide, Medicinal plants. Abstract We conducted an experimental study on Wistar rats, with the aim of assessing the potential diuretic effect of the extract obtained by digestion of horsetail (Equisetum Hyemale). The results were compared with those obtained by furosemide (diuretic reference) at the dose of 5 mg / kg and with common water used as control. Urinary excretion was measured over a period of 2.5 hours, to determine the final volume concentration of Na +, Cl-. Checking the diuretic and digestive extract, and in turn compared with the effect of furosemide. After investigation of extracts with a dose of 100 mg / kg and 200 mg / kg, obtained by digestion is checked mayir effectiveness of the first dose by the presence of
Palabras Clave. Diurticos, Extractos Digestivo, Equisetum Hyemale (Cola de caballo), Equisetonina, Flavonoides, Furosemida, Plantas medicinales. Resumen Se realiz un estudio experimental en ratas lnea Wistar, con el objetivo de valorar el posible efecto diurtico del extracto obtenido por digestin de cola de caballo (Equisetum Hyemale). Los resultados fueron comparados con los obtenidos por la furosemida (diurtico de referencia), en la dosis de 5 mg/kg de peso y con agua comn utilizada como control. La excrecin urinaria se midi en un lapso de 2.5 horas, para determinar en el volumen final la concentracin de Na+, Cl-. Comprobando as la accin diurtica del extracto digestivo, y a su vez comparndolo con el efecto de la furosemida. Tras la investigacin con extractos a dosis de 100 mg/kg y 200 mg/kg, obtenidos por digestin, se comprueba mayor efectividad de la primera dosis por la presencia de flavonas glucosidicas como la equisetonina, y las saponinas. Sin embargo a dosis elevadas puede causar un efecto toxico, provocando efectos irritativos en el
glycosidic as equisetonin flavones, and saponins. But high doses can cause a toxic effect, causing irritating effects into the urinary system, and that the species Equisetum Hyemale contains an enzyme (thiaminase) that denatures proteins.
INTRODUCCIN Por definicin los diurticos son frmacos que estimulan la excrecin renal de agua y de electrolitos por lo que son utilizados para regular tanto el volumen como la composicin del medio interno en diferentes afecciones, lo que los hace un objeto de investigacin dentro de la rama de la farmacoterapia. Los trabajos de investigacin, dividen a estos frmacos en una clasificacin que ha sido variada, considerndose en ello: el sitio de accin (diurticos de asa), eficiencia (diurticos de techo alto), estructura qumica (diurticos tiazida), similitud de accin con otros diurticos (diurticos parecidos a tiazidas), efectos sobre la excrecin de potasio (diurticos ahorradores de potasio) osmticos y otros. Los diurticos osmticos aumentan la osmolaridad de la orina. Son filtrados por el glomrulo, no son secretados y no son reabsorbidos, actan en todo el Nern pero principalmente en TCP y en asa de Henle delgada). Son diurticos potentes usados para diuresis forzada en intoxicaciones. Preventivos de insuficiencia renal aguda. Edema cerebral. Glicerina o isosorbida va oral: reduccin de la presin intraocular previa a intervenciones oftalmolgicas. Los efectos que tienen son el de extraer agua del liquido intracelular; expandir el liquido extracelular, mientras que disminuyen la viscosidad sangunea y aumentan el FSR, para as producir "lavado osmtico", diuresis acuosa que impide la reabsorcin en lugares permeables al agua y disminuyen el volumen tisular. A pesar del gran desarrollo alcanzado por la sntesis qumica, en la actualidad las plantas
llamadas medicinales continan siendo un valioso arsenal de sustancias o de precursores de las mismas, ya sea en forma de medicamento vegetal o de materia prima para la industria farmacutica. Las posibilidades de encontrar nuevos medicamentos que alivien las diferentes enfermedades, han hecho que las plantas constituyan uno de los recursos teraputicos de mayor uso. Hoy nos vemos beneficiados con esta experiencia que ha contribuido al desarrollo de la actual fitoterapia, sin embargo no existe la suficiente evidencia documentada de la eficacia de estos productos naturales, esperando cumplir un importante papel en la teraputica del futuro. Entre las plantas usadas en los tratamientos mdicos como remedios herbolarios encontramos la Equisetum Hyemale (cola de caballo), la cual pertenece a una clase propia, la Equisetacae, que no tiene afinidad directa con ningn otro grupo de plantas. Son una especie cercana a los Helechos, pero con muy distintas propiedades fotoqumicas. La clase incluye nicamente un solo gnero, Equisetum, cuyo nombre deriva de la palabra latina equus (un caballo) y seta (una cerda), de la cual se conoce la peculiar apariencia notable de los tallos articulados. La especie E. hyemale, perteneciente al genero Equisetum, es una hierba de origen americano, habita en climas semisecos, seco y templado entre los 1000 a los 2600m sobre la superficie del mar, normalmente se encuentra asociada a la vegetacin acutica, a la orilla de los ros, o en las barrancas de bosque mesfilo de montaa y bosques de pino. En Mxico se localiza en los climas correspondientes en los Estados de: Nayarit, Jalisco, Aguascalientes, Michoacn, Estado de Mxico, Quertaro, Distrito Federal. Sus caractersticas fisiolgicas la hacen ver como una hierba erecta en forma de junco, generalmente no ramificada, de tallos acanalados, de hasta 10 mm de dimetro; los tallos se encuentran unidos en la base formando una vaina tan larga como ancha que presenta un anillo oscuro en la base; presenta articulaciones llamadas estrbilos (partes donde se producen esporas; no tiene
METODOLOGA. En primer lugar se seleccionaron los medicamentos y las plantas medicinales sobre los que centrar la bsqueda bibliogrfica:
Figura 1: en esta figura se pueden observar las eliminaciones de orina de cada uno de los lotes experimentados de acuerdo al tiempo de experimentacin transcurrido, observando que el lote 1 tiene mayor eliminacin de orina al minuto 60 al igual que el lote 2, sin embargo el lote 2 elimina una cantidad mucho menor de orina en el mismo tiempo. Por su parte el lote control y el testigo obtienen mayor excrecin de orina en el minuto 30.
Figura 2: se puede observar que hay un incremento notable de el volumen de eliminacin de orina en el lote 1 que fue administrado con 100mg/Kg de E. Hyemale, incluso en mayor cantidad que el lote testigo administrado con Furosemida (5mg/Kg), por su parte en el lote 2 (200 mg/Kg de E. Hyemale), en lugar de obtener un incrementos en la eliminacin, se logra observar que disminuye el volumen de orina respecto incluso al lote control.
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Escala: Alta: AD > 0,90, Moderada: AD (0,70 -, 0.87), Baja: AD (0.50 -,0.69), Nula: AD<0.50
Octubre 2012 Farmacologa UNAM FES-C 2 RESULTADOS DE PARMETROS DE ACCIN Y ACTIVIDAD DIURTICA DE LOS TRATAMIENTOS
Lote Vol.Final (ml) Excrecin urinaria (%) Accin diurtica Actividad diurtica Control 2.74 54.48 Tratamiento testigo Furosemida 1.75 35 0.64 Lote 1 100mg/Kg 3.3 66 1.21 1.89 Lote 2 200mg/Kg 0.73 14.6 0.27 0.42
2 1.8 1.6 1.4 1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 100mg/Kg 200mg/Kg Dosis de E. Hyemale
1.4 1.2 1 Grados de accin 0.8 0.6 0.4 0.2 0 furosemida 100mg/Kg Tratamiento 200mg/Kg
Figura 4: En ste histograma se observa que el tratamiento con mayor actividad diurtica de E. Hyemale a 100 mg/kg est por encima del tratamiento de furosemida. En la dosis de 200 mg/kg de E. Hyemale, tiene una accin muy baja.
RESULTADOS OBTENIDOS DEL EXAMEN GENERAL DE ORINA REALIZADO A LOS DIFERENTES LOTES:
ANALITO Glucosa Bilirubina Cetonas. Gravedad especfica Sangre pH LOTE CONTROL NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO 1.005 ALTO 6.5 NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO 2 gotas 10mg LOTE TESTIGO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO 1.005 TRAZAS 6 TRAZAS NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO 1 gotas 5mg LOTE 1 NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO 1.005 TRAZAS 6 TRAZAS NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO 1 gotas 5mg LOTE 2 NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO 1.01 TRAZAS 6.5 TRAZAS NORMAL NEGATIVO NEGATIVO 2 gotas 10mg
Figura 3: en este histograma podemos observar que el tratamiento con mayor accin diurtica es el de E. Hyemale a una dosis de 100mg/Kg aun por encima del tratamiento con Furosemida. Por su parte se puede observar que la E. Hyemale a dosis de 200mg/Kg tiene una accin muy pobre; debido a la toxicidad de la planta.
DISCUSIN DE RESULTADOS La cola de caballo es una de las plantas ms utilizadas en la medicina popular. Posee un rizoma central del cual salen dos clases de tallos: los frtiles, y los tallos estriles, que son de gran inters para la Fitoterapia, y por consiguiente para nuestra investigacin, ya que en ellos se encuentran los principios activos que confieren a la planta sus propiedades medicinales. Tas la experimentacin, los resultados obtenidos por el Test de Lipschitz nos demuestran que la accin diurtica de la E. Hyemale, no aumenta al aumentar la dosis administrada, sino por el contrario disminuye en un 80%, al duplicar la dosis. Respecto a nuestra evaluacin en el frmaco de comparacin se puede observar que la E. Hyemale es mas efectiva, a una dosis de 100mg/Kg que incluso la Furosemida a dosis teraputica recomendada de 5mg/Kg. El segundo parmetro evaluado es la Actividad Diurtica (AD) donde de acuerdo a la escala AD, el lote1 con tratamiento presento una AD catalogada como alta(1.89) en comparacin con el lote2 que presento una AD catalogada como nula (0.42). Lo cual indica que la dosis en ratas ms apropiada para poder ejercer su efecto diurtico es la de 100mg/Kg, mientras que a dosis mas alta como la de 200mg/Kg llega a ser toxica. En estudios anteriores se ha encontrado que la dosis ix letal media es de 500mg/Kg.) . Las modificaciones de la eliminacin hdrica, sdica y de cloro constatadas en la rata, muestran los efectos sobre los iones urinarios, teniendo as un ligero pero notable aumento de la eliminacin hdrica. El efecto diurtico del extracto acuoso qued demostrado en el presente proyecto al existir una respuesta diurtica positiva en la dosis ensayada: 100mg/kg, comparadas con el grupo control y con la furosemida. Se demostr que el extracto acuoso de 100mg/kg produjeron un mayor volumen de orina en 150minutos siendo a los 90
Grandes cantidades de cola de caballo pueden producir los sntomas de sobredosis de la nicotina, entre los que se incluyen fiebre, manos y pies fros, ritmo cardiaco anormal, dificultad para caminar, debilidad muscular y prdida de peso. Las personas que fuman o quienes usan los parches de nicotina o goma de mascar de xi nicotina deben evitar la cola de caballo. Experimentalmente en cuanto al el examen general de orina, cabe destacar que existi la presencia de sangre en la orina de todos los lotes y eliminacin de protenas en los lotes tratados tanto con el extracto de la planta como como en el lote testigo y por ende, el pH se ve alterado tratndose de un pH cido, aunque se encuentra dentro de lo normal. CONCLUSIONES Se valor el efecto diurtico de la cola de caballo en dos dosis 100mg/Kg y 200 mg/Kg, comparndola con un diurtico de asa (furosemida) obteniendo que la primera dosis tiene mayor actividad diurtica (AD= 1.89) que la segunda (AD= 0.42), reflejado tambin en el volumen de excresin promedio. Siendo sta de eleccin para su uso como diurtico. El mtodo de Lipchitz tiene gran utilidad para poder evaluar el efecto diurtico de el extracto de Equisetum hyemale, empleado en el presente trabajo experimental, ya que proporciona parmetros como la actividad diurtica. Es necesario realizar en estudios posteriores una evaluacin del efecto txico de Equisetum hyemale, ya que en el presente trabajo experimental, no se encuentran bien definidos, ya que nicamente se evalu su efecto diurtico. Wren, R. C. Enciclopedia de Medicina Herbolaria y Preparados Botnicos. Grijalbo. Mxico, 1994. II Tomos, 782 pginas. Referencia sobre E. arvense, en la pgina 200 vi http://www.conabio.gob.mx/malezasdemexico /equisetaceae/equisetumhyemale/fichas/ficha.h m vii Drogenkunde, 8a. ed. Heinz A., Hoppe (ed.), Berln W. De Gryter, 1975. Ref. R.C. Wren. Op. cit. p: 200 y 741 viii http://www.natureperu.com/product_info.ph p?products_id=176&language=es ix LPEZ LUENGO, TRNSITO (2001) Saponsidos Fititerapia.OFFARM pg.124-125.
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