AVALIAO DA ATIVIDADE COAGULANTE DE EXTRATOS FRACIONADOS DOS FRUTOS DE SOLANUM PANICULATUM L.

(SOLANACEAE) Marcela Carmen de Melo Burger 1 , Bruno Henrique Ferraz de Moura 2, Antnio Carlos Severo Menezes 3 , Mirian Machado Mendes 4
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Bolsista PIBIC / UEG / UEG Colaborador /UEG Pesquisador Coordenador de Pesquisa / UEG Instituto de Gentica e Bioqumica, UFU

RESUMO - Os envenenamentos ofdicos constituem um problema de sade pblica no Brasil devido a grande incidncia de acidentes e a gravidade dos efeitos. A coagulopatia uma das maiores complicaes dos acidentes com serpentes e resulta principalmente do sinergismo das enzimas Thrombin-Like e procoagulantes, como essas enzimas provocam o consumo de fibrinognio o resultado que freqentemente as vtimas apresentam o sangue incoagulvel. Sendo as plantas medicinais um reservatrio de princpios ativos estas podem ser usados como remdios para uma infinidade de patologias, selecionamos a planta Solanum paniculatum L. para estudar sua atividade coagulante in vitro, utilizando a peonha da serpente Bothrops pauloensis conhecida popularmente como jararaca pintada, as fraes diclorometnica, acetato de etila e metanlica foram avaliadas, sendo que as fraes acetato de etila e metanlica tiveram uma atividade positiva significativa. Palavras-chave: Solanum paniculatum, atividade coagulante, envenenamento ofdico. 1. INTRODUO O Cerrado considerado um dos ecossistemas mais ricos do planeta. Embora seja um ambiente fragmentado e intensamente alterado pela ao antrpica (FELFILI & SILVA JNIOR, 2001). A famlia Solanaceae possui distribuio cosmopolita, concentrada na regio neotropical, incluindo cerca de 150 gneros e 3000 espcies. No Brasil ocorrem 32

2 gneros e 350 espcies. Muitas Solanaceae acumulam alcalides e so, em decorrncia disto, extremamente txicas. (SOUZA, 2005). As plantas so uma importante fonte de produtos naturais biologicamente ativos, muitos dos quais se constituem em modelos para a sntese de um grande nmero de frmacos. Pesquisadores da rea de produtos naturais mostram-se impressionados pelo fato desses produtos encontrados na natureza revelarem uma gama quase inacreditvel de diversidade em termos de estrutura e de propriedades fsico-qumicas e biolgicas (WALL & WANI, 1996). A espcie vegetal Solanum paniculatum L. (Solanaceae), vulgarmente

conhecida no Brasil como gerobeba, jo- manso, jubeba, jupeba, juribeba, juripeba, jurubeba, jurubeba-verdadeira, jurubebinha, jurupeba, tem sido empregada

empiricamente pela populao h mais de um sculo na preveno e tratamento de molstias hepticas (MATTOS-FILHO, 1997). Apresenta algumas indicaes, tais

como: a raiz utilizada para diabetes, ictercia, hepatite e nas febres, sudorfica; enquanto as folhas so usadas como cicatrizantes; os frutos nos problemas de fgado e de estmago , nas inflamaes do bao e da bexiga, tonica; e a juno de raiz, folha e fruto nos tumores internos (abdmen e tero) (RODRIGUES, 2001). H atualmente cerca de 2.900 espcies de serpentes no mundo, distribudas em 465 gneros e 20 famlias. No Brasil esto representadas nove famlias, 75 gneros e 321 espcies correspondendo a 10% do total de espcies conhecidas. Essas 321 espcies esto distribudas em quatro principais famlias: Colubridae (189 espcies), Boidae (10 espcies), Viperidae (22 espcies) e Elapidae (18 espcies). As espcies peonhentas brasileiras esto reunidas em duas principais famlias, Elapidae e Viperidae. Dentro da famlia Elapidae est o gnero Micrurus que compreende as serpentes conhecidas como corais. A famlia Viperidae engloba trs gneros Crotalus que compreende as cascavis, o gnero Bothrops que engloba as serpentes conhecidas como jararacas e o gnero Lachesis que representa as surucucus (CARDOSO, 2003). O gnero Bothrops possui mais de 30 espcies e subespcies que esto distribudas do sul do Mxico at a Argentina e em algumas ilhas do Caribe (GREENE, 1997). Em geral habitam ambientes midos como matas, possuem hbitos noturnos, so muito agressivas e se ameaadas atacam em silncio (HOGE, 1981). A espcie Bothrops neuwiedi conhecida popularmente por jararaca do rabo branco ou jararaca pintada foi descrita por AMARAL (1925). Era considerada uma nica espcie com 12

3 subespcies, entretanto aps uma reviso sistemtica em 2000 as 12 subespcies foram elevadas a sete espcies distintas. Essa classificao foi aceita pela Sociedade Brasileira de Herpetologia-SBH (2005) e assim a espcie Bothrops neuwiedi pauloensis passou a ser Bothrops pauloensis (SILVA, 2000). As peonhas de serpente so provavelmente as mais complexas de todas as peonhas animais. Cerca de 90 a 95% de seu peso seco constitudo por protenas compreendendo grande variedade de enzimas e toxinas no enzimticas, podendo exercer diferentes atividades farmacolgicas (DALMORA et al.,1992). A coagulopatia uma das maiores complicaes dos acidentes com serpentes das famlias Viperidae e Crotalinae e resulta principalmente do sinergismo das enzimas Thrombin-Like e procoagulantes (ANAI et al., 2002). Como essas enzimas provocam o consumo de fibrinognio o resultado que freqentemente as vtimas apresentam o sangue incoagulvel (ANAI et al., 2002). Quando administradas in vivo causam efeito desfibrinogenante, tornando o sangue incoagulvel por depletar o estoque de fibrinognio plasmtico, sendo utilizadas na medicina como agente antitrombtico, podendo at mesmo desfazer cogulos. Quando ensaiadas in vitro apresentam ao procoagulante (MARKLAND, 1998). As enzimas, Thrombin-Like tm aplicao teraputica na preveno e tratamento de desordens trombticas bem como na produo de cola de fibrina, que um adesivo biolgico, sendo utilizado para aumentar o poder de cicatrizao em suturas (LEITE et al., 2000) Neste trabalho, objetivou-se avaliar a atividade coagulante, com 10 g de peonha bruta de Bothrops pauloensis, de extratos particionados por ordem de polaridade (diclorometano, acetato de etila e metanol) dos frutos de Solanum paniculatum L.. 2. MATERIAL E MTODOS 2.1. MATERIAL VEGETAL Os frutos de Solanum paniculatum L, conhecida popularmente como jurubeba, foram coletados no ms de Janeiro de 2006, em Anpolis-Gois. 2.2. OBTENO DOS EXTRATOS Aps a coleta, os frutos foram macerados e colocados em erlenmeyers em contato com metanol por quatro meses, foram feitas extraes exaustivas com metanol a frio. O solvente foi evaporado com auxilio de um evaporador rotativo Te, 210 (roto

4 evaporador), e de um banho ultratermostato a 11C, a presso reduzida, sendo obtido o extrato bruto metanlico. O extrato metanlico bruto foi fracionado por partio em cromatografia em coluna, utilizando-se celulose microcristalina D como fase estacionria. O extrato foi solubilizado em soluo metanol e gua (1:3). Na partio foram utilizados solventes em ordem crescente de polaridade: hexano, diclorometano, acetato de etila e metanol, isso pra obter total extrao; depois utilizou-se novamente o evaporador rotativo para a evaporao destes solventes e obteno dos extratos particionados: hexnico (SPFrMH), Diclorometnico (SPFrMD), acetato de etila (SPFrMA) e metanlico (SPFrMM). 2.3. PREPARAO DOS EXTRATOS VEGETAIS E PROCEDIMENTO DO TESTE PARA DETERMINAO DA ATIVIDADE COAGULANTE Foram selecionados para o teste os extratos de acetato de etila, dic lorometnico e matanlico (SPFrMA, SPFrMD e SPFrMM, respectivamente) dos frutos de Solanum paniculatum L., cada um dos extratos foram divididos em dois grupos, os do grupo A caracterizam por terem concentrao de 10:100 (veneno:extrato) os do grupo B caracterizam por terem concentrao de 10:500 (veneno:extrato). Como controle foi utilizado apenas peonha (PB). A atividade foi calculada de acordo com ASSAKURA et al. (1992). A atividade coagulante foi expressa pelo tempo mdio de coagulao em segundos, de 100 L de plasma bovino previamente incubados a 37 C. induzida pelas peonhas na presena ou ausncia de princpios ativos utilizando o aparelho coagulmetro Quick Timer (DRAKE LTDA) que determina o tempo de coagulao de uma amostra (150 L), at um tempo Maximo de 120s. O tempo necessrio para formao da rede fibrina na forma de cogulo foi medido em segundos, sendo que a inibio da atividade foi observada de acordo com o aumento mdio do tempo de coagulao em relao ao controle (apenas peonha ). 4. RESULTADOS E DISCUSSO Os resultados apresentados neste trabalho, que teve como objetivo avaliar a possvel atividade coagulante dos extratos particionados SPFrMA, SPFrMD e SPFrMM dos frutos de Solanum paniculatum L., verificou-se que os extratos SPFrMA e SPFrMM apresentaram atividade positiva significativa. O grfico ilustrado na figura 2 demonstra os resultados do teste de atividade coagulante, realizado in vitro, dos extratos nas concentraes A (10:100) e B

5 (10:500), dos frutos de Solanum paniculatum L.. A inibio pode ser observada de acordo com o aumento do tempo de coagulao em relao ao controle (PB). De acordo com o grfico observa-se que os extratos SPFrMA e SPFrMM em concentrao mais baixa (A) aumentou o tempo de coagulao em relao ao PB e quando a concentrao aumenta (B) o tempo de coagulao tambm aumenta, sendo portanto um resultado de significativa positividade. J observando o extrato SPFrMD percebe-se que o resultado no positivo, j que este diminuiu o tempo de coagulao. Pode-se inferir que a positividade nos resultados apresentados pelos extratos de Solanum paniculatum L. esteja relacionada aos alcalides caractersticos da famlia Solanaceae, ao qual pertence espcie estudada. Diante destes resultados apresentados, percebe-se a importncia de pesquisar os extratos vegetais quanto a suas atividades biolgicas, seus princpios ativos e mtodos melhores de extrao de substncia com atividade farmacolgica para possveis isolamentos.
60 50 40 30 20 10 0 SPFrMA SPFrMA SPFrMM SPFrMM SPFrMD SPFrMD A B A B A B PB

Figura 2: Grfico da atividade coagulante expressa em tempo mdio de coagulao em segundos.

5. CONCLUSO Diante dos estudos realizados pode-se concluir que os resultados apresentados pelas fraes de acetato de metila e metanlica demonstraram ter atividade coagulante significativa. J a frao diclorometnica no apresentou atividade significativa.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICA

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