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PUBLICACIONFINANCIADAPORINSTITUTOTECNOLGICODECD.ALTAMIRANO. 2011ITCA. CopyrightInstitutoTecnolgicodeCd.Altamirano,Cd.Altamirano,Gro.,Mxico. AUTORESDELVOLUMEN: GustavoAdolfoBallesterosPatrn,AmbarCasimiroArce,FranciscoZavalaHernndez, HctorManuelTovarSotoyLuisAlfonsoRodrguezPez. DIRECCINDELAOBRA: GustavoAdolfoBallesterosPatrnyLuisAlfonsoRodrguezPez REDACTORES: GustavoAdolfoBallesterosPatrn,AmbarCasimiroArce,FranciscoZavalaHernndez, HctorManuelTovarSotoyLuisAlfonsoRodrguezPez. DISEOINTERIOR,CUBIERTASYCARTOGRAFA: LuisAlfonsoRodrguezPez IMPRESIN: InstitutoTecnolgicodeCd.Altamirano. PRIMERAEDICIN:ABRILDE2011 MANUALDEPRCTICASDEFISIOLOGAVEGETAL GARABATOEDITORIAL,CD.ALTAMIRANO,GRO.,MXICO,108P. ISBN:9786077814085
Esta publicacin puede se reproducida, archivada en un sistema de recuperacin o trasmitida en cualquier formato o por medio corpreo o incorpreo, electrnico, mecnico, por fotocopia o grabacin o de cualquierotramanerasiempreycuandosecitealosautoresydueosdelCopyright.

MANUALDEPRCTICASDEFISIOLOGAVEGETAL
1. INTRODUCCIN Granpartedelaslimitantesparaelavancedelaaplicacindeconocimientoseslafaltade experiencias prcticas, que le permitan al estudiante fortalecer los postulados tericos mediante la evidencia experimental. En el Sistema Nacional de Educacin Superior Tecnolgicaseinsisteenelparadigmadeaprenderhaciendoatalpuntoqueiniciamosen el ao 2010 el sistema educativo por competencias, lamentablemente esto no se hace y loscursossedesarrollantericaymemorsticamente. En el Instituto Tecnolgico de Cd. Altamirano. Se ha tomado la decisin de fortalecer las reas bsicas, entre las cuales se destaca la Fisiologa Vegetal. Esto implica la adecuacin y dotacin de un laboratorio, su equipamiento y la preparacin de recursos humanos en estarea. El presente proyecto hace parte de los propsitos de organizacin del rea de Fisiologa Vegetal, mediante la elaboracin de un manual de prcticas para los estudiantes de Biologa y Agronoma del Instituto Tecnolgico de Cd. Altamirano. Cuya implementacin serbenficapuesmejoraremoslaaprehensindeconocimientosyhabilidadesporparte delosalumnos,loscualessernbeneficiados,puesrealizarntalleressobrelosdiferentes aspectosdelafisiologavegetal. Para realizacin de presente libro se revisaron manuales de Fisiologa Vegetal de otras institucionesyseseleccionaron50prcticasdelascualesfueronejecutadasenelInstituto TecnolgicodeCd.Altamirano.Adems,setuvounaestanciadedosmesesenelreade Fisiologa Vegetal del Colegio de Postgraduados de Texcoco. Con base en estas experienciasrealizadasseelaborelpresenteManualdeFisiologaVegetal.

INDICE
INTRODUCCIN PRACTICANo.1 PRACTICANo.2 PRACTICANo.3 PRACTICANo.4 PRACTICANo.5 PRACTICANo.6 PRACTICANo.7 PRACTICANo.8 PRACTICANo.9 PRACTICANo.10 PRACTICANo.11 PRACTICANo.12 PRACTICANo.13 PRACTICANo.14 PRACTICANo.15 PRACTICANo.16 PRACTICANo.17 PRACTICANo.18 PRACTICANo.19 PRACTICANo.20 PRACTICANo.21 PRACTICANo.22 PRACTICANo.23 PRACTICANo.24 PRACTICANo.25 PRACTICANo.26 PRACTICANo.27 PRACTICANo.28 PRACTICANo.29 PRACTICANo.30 PRACTICANo.31 PRACTICANo.32 PRACTICANo.33 PRACTICANo.34 PRACTICANo.35 PRACTICANo.36 PRACTICANo.37 PRACTICANo.38 PRACTICANo.39 PRACTICANo.40 LATENCIADESEMILLAS ETAPASVEGETATIVASDEMAZYFRJOL GERMINACINDESEMILLASENDIFERENTESSUELOS INFLUENCIADELOXGENOENLAGERMINACIN IMPORTANCIADELACALIDADDELALUZPARALAGERMINACIN. CRECIMIENTOYDESARROLLOPRUEBADELTETRAZOLIOPARA DETERMINARLAVIABILIDADDELASSEMILLAS. CLULASYTEJIDOSVEGETALES ESTRUCTURASANATMICASQUEINTERVIENENENELTRANSPORTEDE AGUA MADURACINDEFRUTOS REGULADORESDELCRECIMIENTOGIBERELINAS REGULADORESDELCRECIMIENTOCITOClNlNAS REGULADORESDELCRECIMIENTOETILENO OTROSREGULADORESDELCRECIMIENTOEFECTODEEXTRACTOSDE VARIOSFRUTOSSOBRELAGERMINACIONDESEMILLASDERABANO DOMINANCIAAPICALYABSICINDEHOJA REGULACINDELAABSCISINPORMEDIODEHORMONAS INDUCCINDEENRAIZAMIENTODEESQUEJESPORMEDIODE HORMONAS REGULADORESDELCRECIMIENTOAUXINAS METODOSPARALAMEDICIONDELAREAFOLIAR DETERMINACINDELREAFOLIAR ESTRUCTURASDEABSORCINDEAGUAYNUTRIENTES VELOCIDADDELFLUJODEAGUAENELSISTEMAVASCULAR INFLUENCIADELAHUMEDADATMOSFRICASOBRELAABSORCINDE AGUAPORSEMILLASALMACENADAS. MECANISMOSDEABSORCIONYTRANSPORTEDEAGUAENLASPLANTAS ACTIVIDADOSMTICADELASACAROSAYELALMIDN REDISTRIBUCINDEAGUAENELINTERIORDELAPLANTA ELASCENSODELAGUAENLASPLANTAS MTODOSPARAMEDIRLATRANSPIRACIN TRANSPIRACINYFOTOSNTESIS:IRGAYELSENSORDEHUMEDAD FACTORESQUEAFECTANLAVELOCIDADDETRANSPIRACION RESPIRACION;MEDICIONDELARESPIRACIONENSEMILLAS RESPIRACIONLAPRUEBADELTETRAZOLIOPARADETECTARLA ACTIVIDADDELASDESHIDROGENASASYVIABILIDADDELASSEMILLAS. RESPIRACIONLAINUNDACINYLAFORMACINDEAERENQUIMAEN ARROZ TCNICADEIMPRESINDEESTOMAS DISEODEEXPERIMENTOSDEFISIOLOGIAVEGETAL FERTILIZACINFOLIAR MADURACINDEFRUTOS POSICINDELOSESTOMASENHOJASDEDIFERENTESAMBIENTES CMOCONSTRUIRUNPORMETRO DETECCIONSEMICUANTITATIVADESALESMINERALESPORELMETODO DEMORGAN. SNTOMASDEDEFICIENCIAYTOXICIDADMINERAL 4 Pagina 3 6 8 9 10 12 14 16 17 19 20 22 26 30 32 34 35 38 41 46 47 48 50 52 55 56 57 59 63 65 67 69 71 73 74 75 76 77 78 80 86

PRACTICANo.41 PRACTICANo.42 PRACTICANo.43 PRACTICANo.44 PRACTICANo.45 PRACTICANo.46 PRACTICANo.47 PRACTICANo.48 PRACTICANo.49 PRACTICANo.50 BIBLIOGRAFIA

EFECTODESOLUCIONESNOBALANCEADASSOBREELCRECIMIENTODE PLNTULAS CULTIVOSHIDROPNICOS NUTRICIONMINERAL FOTOMORFOGNESISLALUZENELDESARROLLODELASPLNTULASY LALIGNIFICACIONDELOSTALLOS EFECTODELALUZSOBREELDESARROLLODELAPLNTULA ALGUNASPROPIEDADESDELASCLOROFILAS PIGMENTOSNOFOTOSINTETICOS:CAMBIOSDECOLORDELOS PIGMENTOSFLAVONOIDES EFECTODELAINTENSIDADDELALUZYDELACONCENTRACINDELCO2 ENLAFOTOSNTESIS PIGMENTOSFOTOSINTETICOSSEPARACIN,ESPECTRODEABSORCIONY FLUORESCENCIA IDENTIFICACINDEPLANTASC3YC4

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PRACTICANo.1 TITULO:LATENCIADESEMILLAS
INTRODUCCIN Aun cuando las condiciones ambientales sean adecuadas para la germinacin de semillas, muchas de ellas no lo hacen aunque estn viables. La no germinacin de las semillas, se conoce como latencia o letargo, y est ligada a causas intrnsecas de las semillas o frutos, pero tambin a efectos ambientales. La ilama (Annona diversifolia) es un frutal regional proceso de domesticacin que tiene caractersticas silvestres tales como dehiscencia de frutos y latencia de semillas, las cuales solo germinan despus de cuatro meses de almacenamientodebidoalaexistenciadeembrionesinmaduros OBJETIVO Demostrarlaexistenciadeletargoolatenciaensemillasdeilamaderecoleccinreciente. MATERIAL 200 semillas de ilama, (100 de este ao y 100 del ao pasado), bolsas de polietileno, tierra,lijas,agua,solucindegiberelinas. PROCEDIMIENTO Consigadoslotesde100semillasdeilama,cadauno.Elprimeroconsemillasdefrutosde este ao (octnov) y el segundo de frutos de la cosecha del ao pasado. Para tratar de romper el letargo seminal del lote de semillas de ilama reciente, divdalo en cinco grupos de20semillascadauno. Elprimergrupode20semillassereltestigo(noseharningntratamiento). El segundo grupo de semillas ser escarificado raspando la cubierta seminal con lija o rozndolas sobre un piso de cemento no pulido. El objetivo es romper la cubierta seminal paraquepenetreelagua. El tercer grupo de semillas sern colocadas en una solucin de giberelinas a 100 ppm. De concentracindurante3horas. Elcuartogrupodesemillasserncolocadasenaguahirviendodurante2minutos. Y el quinto grupo de semillas se colocaran durante 3 horas en agua con hielo las semillas sernsembradasenbolsasdepolietilenocontierra,aracindeunasemillaporbolsa. Cada uno de los tratamientos ser marcado en la respectiva bolsa. Cada tres das se inspeccionaran las bolsas para anotar la fecha de emergencia de las plntulas. A los 2 mesessesuspenderelexperimentoysediscutirnlosresultados. BIBLIOGRAFIA Abeles,D.S.1973.EthyleneinPlantBiology.AcademicPress.NewYork.London.
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Arumagan,S. And K.G. Shanmgavelu. 1975. Studies of sarcotesta on the seed germination ofpapaya(Cariespapaya).SeedResearch.3(2):7:780. Arditti, J. y A. Dunn. 1969. Experimental Plant Physlology. Holt, Rinehart y Winston, New York.

PRACTICANo.2 TITULO:ETAPASVEGETATIVASDEMAZYFRJOL
INTRODUCCIN La germinacin abre camino a la emergencia y desarrollo de la plntula hasta un estado, dondeelaspectodesusestructurasesencialesmanifiestasiesonocapazdedesarrollarse hastaunaplantanormalbajocondicionesfavorablesdesuelo. OBJETIVO Observarlamorfologadeplntulas. MATERIAL Bolsasplsticas,tierraysemillas(maz,frjol) PROCEDIMIENTO Coloque dos bloques de 20 bolsas con tierra, en un bloque siembre semillas de frjol y el otro semillas de maz. A continuacin observe las diferencias morfolgicas entre las plntulasdemazylasdefrjol. La radcula del embrin se convierte en raz primaria de la planta, se arraiga la extensin de la clulaepidrmicasuperficial de la raz implicadaen laabsorcin de agua y alimento. Sepresentalarazsecundariaatravsdelaprimaria. Maz; las races adventicias que se originan en los vstagos se van de otras races. La envolturafotosensibledelcoleoptilosobrelaplmula.Larazembrionariaseconvierteen elsistemainicialdelarazdelasemilla Dibuje una plntula de maz y escribe en ella las siguientes estructuras: coleoptilo, mesfilo,racesfibrosas. Dibuje una plntula de frjol y seale las siguientes partes: cotiledones, cuello de la raz, hipotilo,epictilo,hojasembrionales,plmula. BIBLIOGRAFIA Bidwell, R.G.S. 1979. Plant Physiology. 2a.de. MacMillan, New York. Devlin, R.M. 1975. Fisiologa Vegetal. Ed. Omega. Barcelona, Espaa. Hall, D.O. y K.K. Rao. 1978. Fotosntesis. De.Omega.Barcelona,Espaa. Cocklin, R.E. 1973. An unbreekeable potometer. En C. J. Clegg (Ed.) Plant Physlology. ASE Lab.Books.London.

PRACTICANo.3 TITULO:GERMINACINDESEMILLASENDIFERENTESSUELOS
INTRODUCCIN Demanerageneral,lagerminacinsepuededividirentresfases.Enla primera,lasemilla toma agua mediante el proceso de imbibicin y osmosis; en la segunda fase, la absorcin deaguacontinua,peroseinicianeincrementanprocesosmetablicoscomolarespiracin y la transformacin enzimtica de las reservas, en la tercera fase, aparece la radcula y se incrementaelcrecimiento. OBJETIVO Pruebasdegerminacinendiferentessuelos MATERIAL Bolsasplsticas,tierra,agua,50semillas(frjol) PROCEDIMIENTO Instale5lotesde10bolsasconsuelo,elprimerloteriguelodiariamenteconunasolucin salina preparada con agua y sal de cocina, el segundo lote se mantendr el suelo seco, tercer lote, suelo subregado; con un riego semanal, cuarto lote suelo encharcado; que se mantendrsaturadodeagua,yelquintoloteeseltestigoqueseregaratodoslosdas. Discutalosresultados. BIBLIOGRAFIA Salisbury,F.B.yC.W.Ross.1979.PlantPhyslology.2a.Ed.Wadsworth. SARH, Subsecretara de Agricultura y Operacin, 1917. Fertilizacin en funcin del anlisis del suelo (por el mtodo de Morgan). Servicio de Orientacin Tcnica al usuario, hoja de Divulgacin.No.21,Mxico.

PRACTICANo.4 TITULO:INFLUENCIADELOXGENOENLAGERMINACIN
INTRODUCCION Despus del humedecimiento inicial del medio donde se van a sembrar las semillas, no se requiere de riego adicional hasta que la germinacin haya ocurrido. Esto asegura que una adecuada cantidad de oxgeno sea retenida por el medio de germinacin. Es sabido que un excesivo riego a las semillas retarda la germinacin. Un riego abundante frecuentemente previene la germinacin, debido a que el oxgeno es relativamente insolubleenelagua.Muchaaguatambincausadaoensemilladepobrecalidad,debido aquelasclulasdeshidratadasnopuedencompetirconelrpidoflujodehumedad. OBJETIVO Comprobarlaimportanciadeloxgenoenlagerminacin MATERIAL Semillasderbano Frascosdebocaancha:3 Crisolesdeporcelanaobeakersde50ml:3 Papeldefiltro SolucindeKOHal15% Solucindecidopiroglicoal7% Aguadestilada Bandasdecaucho Papeldealuminio Pinzasdelaboratorio Algodn PROCEDIMIENTO Utilizandoloscrisolesyelpapeldefiltrohagatresgerminadoresycoloqueencadauno10 semillasderbano. Tome tres frascos de boca ancha (tipo envase de mermelada) y proceda en la forma siguiente: Frasco 1. Vierta 15 ml de KOH al 25% y 8 ml de cido piroglico al 7%, luego coloque dentro un crisol (germinador) teniendo el cuidado que no le entre solucin y tpelo hermticamenteconpapeldealuminiodoble,ajustandoconunasbandasdecaucho. Frasco2.Vierta15mldeaguadestilada,coloquedentrootrocrisol(Germinador)ytpelo hermticamenteconpapeldealuminio. Frasco 3. Vierta 15 ml de agua, coloque dentro un germinador y tape el frasco con algodn. Dejelosfrascosenelambientedellaboratorio. Luegode3dasobservelagerminacindelassemillasencadafrasco. Expliquelarazndelosresultados.
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BIBLIOGRAFIA Salisbury, F.B. Y W.C. Ross. 1978. Plant Physiology. 2a. Ed. Wadsworth. California Iberoamrica,Mxico,D.F.

Salisbury. F.B. y C.W. Ross. 1994. Fisiologa Vegetal. Gpo. Edit. Iberoamrica, Mxico. D.F. . SARH, Subsecretara de Agricultura y Operacin, 1917. Fertilizacin en funcin del anlisis del suelo (por el mtodo de Morgan). Servicio de Orientacin Tcnica al usuario, hoja de Divulgacin.No.21,Mxico.

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PRACTICANo.5 TITULO:IMPORTANCIADELACALIDADDELALUZPARALAGERMINACIN.
INTRODUCCION Adems de la humedad y temperatura favorables, algunas semillas requieren luz para su germinacin. El lepidio (Lepidium virginicum) no germina en la oscuridad. La variedad de lechuga"GrandRapidez",germinacercadel25%encompletaoscuridad;sinembargo,con una corta exposicin a la luz del da, cuando est germinando, llega a un 100%.La luz roja de660nanmetrosylarojalejana"farred"de730nanmetrossonfrecuentementelas mas efectivas en la regulacin de las reacciones de la planta a la luz; reacciones que van desde germinacin, coloracin de frutos, formacin de tubrculos y bulbos hasta la floracin de plantas, de da largo y de da corto, es decir todo lo relacionado con el fotoperodo. Laluzfluorescentecomnemiteconsiderableluzrojaperopocarojalejana,mientrasque laluzincandescente(bombilloscomunes)emiteconsiderableluzrojalejana.Otroaspecto interesante es que una doble capa de papel de celofn rojo detiene casi toda la luz roja lejana dejando pasar solo la roja de 560 nm, as mismo si se combinan capas de celofn rojo y azul se puede detener casi toda la luz roja dejando pasar solo la roja lejana de 730nm. Debetenerseencuentaademsquelafotoreaccinquepermitequelagerminacindela semillaseinicieesdetiporeversiblela,energaradiantedelaluzrojaladirigehaciauna direccin y la de la luz rojalejana hacia otra direccin opuesta. El pigmento responsable deestasreaccionesreversibleseselfitocromo. OBJETIVO Comprobar que luz de cierta longitud de onda favorece la germinacin de semillas que requierenluz. MATERIAL Semillassensitivasalaluzcomolechuga"GrandRapids",Lepidio,pastoazul,pastobromo, pastobermuda,tabaco,etc. Trescajasdepetri Papelfiltroodegerminacin Tres cajas cerradas hermticamente contra luz de aproximadamente 20 x 30 cm. de anchoyde12a15cmdealtocontapasmviles.Hacerunaaberturade10x20cm.enla parte superior de dos de las tapas. Sobre la abertura colocar dos capas de papel celofn rojo pegndolos con cinta transparente. Sobre la abertura de la segunda tapa colocar dos capas cada una de celofn rojo y azul pegndolas con cinta. La otra caja se deja totalmente cerrada contra la luz. Una fuente de luz fluorescente de 40 W. y un bombillo incandescentede100a150w.
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PROCEDIMIENTO Prepare tres platos de petri colocndoles dos capas de papel de filtro en el fondo y humedecindolos perfectamente; coloque en cada uno 100 semillas de lechuga "Grand Rapids" tpelas e identifquelas en tal forma que se pueda determinar al tacto cual es el plato uno el dos o el tres. Coloque los platos en la caja completamente oscura y deje las semillas que embeban agua por un perodo de 16 a 24 horas, a una temperatura de 20 a 25C. Al cabo del periodo indicado efecte los tratamientos siguientes, teniendo cuidado detrabajarenlaoscuridad. 1. Exponga el plato 1 a una luz fluorescente por 15 minutos y con filtro rojo, para lo cual el plato se coloca en la caja con tapa que tieneel papel rojo. La luz debe estar a 30 cm de distancia. 2.Expongaelplato2,bajoluzfluorescentepor15minutosdentrodelacajaconfiltrorojo y luego 15 minutos bajo luz incandescente y dentro de la caja con filtro azulrojo. La luz debeestara30cmdedistancia. 3. El plato 3 debe quedar por todo el tiempo degerminacin en completa oscuridad, para locualsedebeenvolverenpapeldealuminio. Deje transcurrir cuatro das y remueva las tapas de los platos y observe y cuente el nmerodesemillasgerminadasencadauno. Coloquelosresultadosenlatabla Tratamiento 1.luzrojade660nm 2.luzrojayluegoluzrojalejanade730nm 3.testigoenlaobscuridad Porcentajedegerminacin

Cuadro1.Importanciadelacalidaddelaluzparalagerminacin Discutalosresultados BIBLIOGRAFIA Arumagan,S. And K.G. Shanmgavelu. 1975. Studies of sarcotesta on the seed germination ofpapaya(Cariespapaya).SeedResearch.3(2):7:780. Arditti, J. y A. Dunn. 1969. Experimental Plant Physlology. Holt, Rinehart y Winston,NewYork

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PRACTICANo.6 TITULO: CRECIMIENTO Y DESARROLLO PRUEBA DEL TETRAZOLIO PARA DETERMINARLAVIABILIDADDELASSEMILLAS.


INTRODUCCION Cuandosetratadenutrirlasplantas,esimportantesaberqueellaselaboranlamayorade sustejidosprincipalmenteapartirdeunacombinacindedixidodecarbonoambientaly aguaobtenidadelsuelo. Durante el crecimiento, la formacin de los tejidos de las plantas sigue bsicamente tres pasos: la divisin (o mitosis) de las clulas embrionarias para formar nuevas clulas, el agrandamientoy/oalargamientodeestasclulasysudiferenciacin OBJETIVO Conocerypracticarunapruebarpidadelaboratorioparadeterminarsilassemillasestn vivas(viables). MATERIAL Clorurode2,3,5trifeniltetrazolio PapelindicadordepH KH2PO4 Na2HPO4.2H20 Semillasdemazysoya. PROCEDIMIENTO Preparacin de la solucin estndar de tetrazolio al 1%: Se prepara disolviendo 5 g de la sal con 500 cc de agua destilada. El pH de la solucin debe estar entre 6 a 8 para lograr unaactividadptima. CuandoelpHfinaldelasolucinesde4omenossedebeagregar1.82gdeKHP04y3.56g deNa2HP04.2H20. REPARACIONDELASSEMILLASAEVALUAR l.Lassemillasdemaz,arroz,sorgodebenserremojadas(embebidas)enaguaporunas12 horasparaquesuembrinseactiveyademssepuedahacerfcilmenteelcorte. 2. Para el caso del maz haga un corte limpio en 100 semillas (sin magullar o estropear el embrin)alolargodelejelongitudinaldelgrano.Descartelamitaddecadagrano. 3. Coloque las 100 mitades en cajas de petri y cbralas con la solucin de tetrazo1io al 0.5%. 4. Coloque las cajas de petri en un encubador a 40C por un tiempo de 30 a 60 minutos hastaqueelembrincoloreederojo. 5. Analice las semillas coloreadas comparando con figuras patrn que hay en el laboratorioyobtengaelporcentajedesemillasviables. NOTAS:a)Elembrineselnicoquecoloreaentodassuspartessiestnvivas.
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b) En semillas de soya luego de remojarlas se les quita la cubierta y se colocan en la solucin) 1% y a temperatura de 40C por 2 a 4 horas hasta obtener una coloracin roja brillante.Silasemillaestvivadebecolorear:loscotiledonesyelejeplmularadcula. BIBLIOGRAFIA Ross.W.C.1974.PlantPhyslologyLaboratoryManual.Wadsworth.Belmont,California.

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PRACTICANo.7 TITULO:CLULASYTEJIDOSVEGETALES
INTRODUCCIN La clulaesta formada de un protoplasma o unidad viva en la que se distingue un sistema de membranas, el citoplasma y el ncleo. Las clulas vegetales presentan una gran diversidadensutamao,forma,estructurayfuncindependiendodelvegetalydeltejido delqueformeparte. OBJETIVO Observacindeclulasytejidosvegetales MATERIAL Safranina,porteobjetos,tallo,raz,bistur. PROCEDIMIENTO Obtengaunaporcinpequeaydelgadaporcortetransversaldetalloyraz,tialamisma conSafraninaycolquelaenunportaobjetoyobservealmicroscopio. Observelossiguientestejidosdelarazyeltallodeplantasdepapaya:epidermis,corteza, endodermis,cilindrocentral,hacesvascularesdexilemayfloema. Dibujeloobservadoydiscutasusresultados. BIBLIOGRAFIA Bidwell, R.G.S. 1979. Plant Physiology. 2a. de. MacMillan, New York. Devlin, R.M. 1975. Fisiologa Vegetal. Ed. Omega. Barcelona, Espaa. Hall, D.O. y K.K. Rao. 1978. Fotosntesis. De.Omega.Barcelona,Espaa.

Cocklin,R.E.1973.Anunbreekeablepotometer.EnC.J.Clegg(Ed.)Plant.

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PRACTICANo.8 TITULO: ESTRUCTURAS ANATMICAS QUE INTERVIENEN EN EL TRANSPORTEDEAGUA


INTRODUCCIN Las plantas estn constituidas bsicamente por cuatro sistemas de tejido: meristemtico, epidrmico, fundamental y vascular. Cada una de las clulas que forman estos tejidos estn inmersas en agua y constituidas por ella. Esta agua est distribuida en dos regiones bien definidas del cuerpo de las plantas: 1) El apoplasto, que consta de todas las paredes celulares y los espacios intercelulares (considerado un sistema muerto); y 2) el simplasto, que est formado por todos los protoplastos de las clulas, los cuales estn unidos por plasmodesmosformandouncontinuo(considerandounsistemavivo). Eltransportedeaguadesdelarazatodaslaspartesdelasplantassellevaacaboatravs del tejido vascular. Este tejido est formado por xilema y floema. El xilema est considerado en el apoplasto y es el encargado del transporte (en cantidad) de agua; est formadoporunsistemadetuboscapilaresquerecorrenlaplanta(traqueidasyelementos delvaso).Elfloemaestconsideradodentrodelsimplastoyestformadotambinporun sistema de tubos capilares (elementos cribosos) a travs de los cuales tambin se lleva a cabotransportedeagua,peroenmenorcantidad. OBJETIVO Observar el tejido vascular (xilema y floema) en diferentes rganos de las plantas (raz, talloyhoja). MATERIAL Raz,talloyhojadelasplantasqueseelijan Navaja Portaycubreobjetos Microscopio Fluoroglucinaal2%enalcohol,etanolal95%ycidoclorhdricoconcentrado. PROCEDIMIENTO Hagauncortetransversallomsdelgadoqueseaposible,deraz,tallouhojaycolquelo en el portaobjetos, aada una gota de fluoroglucina al 2% y agregue una o dos gotas de cido clorhdrico concentrado y deje reposar durante dos minutos aproximadamente. Transcurrido este tiempo coloque el cubreobjetos y observe en el microscopio los tejidos quesetienderojo. Dibujeloobservado Discutalasdiferenciasentrexilemayfloema BIBLIOGRAFIA Rovalo, Merino, M. y Rojas Garcidueas, M. 197. Experimentos de Laboratorio de FisiologaVegetal.ITESM,Monterrey,Mxico.
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Richter,G.1972.FisiologadelMetabolismodelasPlantas.TraduccindeL.Miller,IICAde laOEA.CECSA,Mxico,D.F.

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PRACTICANo.9 TITULO:MADURACINDEFRUTOS
INTRODUCCIN Histricamente son tres los caminos que han conducido al establecimiento del etileno como una hormona vegetal: A) las antiguas observaciones de que los frutos maduran rpidamente si se les encierra en un cuarto con humo, B)el hecho deque enel cultivo de pia y mango se inicien incendios aledaos a los cultivos a fin de que el humo inicie la floracin. C) la induccin de la cada de las hojas de los rboles a partir del gas desprendidoenlaslmparasutilizadasparalailuminacinpublica. OBJETIVO Evaluarelefectodeletilenoenlamaduracindefrutos. MATERIAL Campanaybasedevidrio Mangosmadurosyverdes PROCEDIMIENTO Coloque dentro de la campana los pltanos verdes y maduros por separados y selle la campanacongrasa. Observecomosevadandolamaduracindelosfrutos. BIBLIOGRAFIA Gaiston,A.W.yDavies,P.J.1970.ControlMechanimsinPlantDevelopment.PrenticeHall, EnglewoodCliffs,NewYersey. HiII, T.A. 1977. Hormonas Reguladores del Crecimiento Vegetal. Omega, Barcelona, Espaa.

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PRACTICANo.10 TITULO:REGULADORESDELCRECIMIENTOGIBERELINAS.
INTRODUCCION Las giberelinas son hormonas vegetales cuya estructura bsica es el grupo gibano (Figura1).Unadelasgiberelinasmsconocidaseselcidogiberlico(GA3).Lasgiberelinas se identifican por un subndice que indica aproximadamente el orden en que fueron descubiertas en las plantas (Hill, 1977).En las plantas superiores la ruta de sntesis de las giberelinas Incluye como precursores compuestos como el mevalonato primero y posteriormenteotroscomoel()kaurenoyelestaviol(Figura1).

Figura1.Estructurabsicaysntesisdegiberelinas

En los esfuerzos dentro de la sntesis de las giberelinas se han generalizado substancias que pueden bloquear las reacciones que conducen a su produccin; a este grupo de substancias se les denomina retardadores del crecimiento. En el Cuadro 1 se muestra una listadevariosretardadoresdelcrecimientoycomoseobserva,unmismoretardadortiene diferentesnombres. ____________________________________________________________ AMO 1618 CARDAVAN ACPC CLOROMEQUAT CCC CICOCEL. DAMINOZIDE o Bo ALARSADHB995.PHOSPHONCBBP(Luckwill1981). Retardadoresdelcrecimiento. Tanto las giberelinas como los retardadores del crecimiento tienen muchas aplicaciones en la agricultura. Como es de esperarse, la accin de los retardadores del crecimiento es casisiemprecontrariaaladelasgiberelinas. Algunosejemplosdeusoson: Giberelinas: .Estimulanelcrecimiento(alargamientodeltalloyentrenudos). .Estimulanladivisincelular. .Provocanenciertasespeciesyenciertascondicioneslafloracin. .ControlanlaexpresinsexualhaciamasculinidadProvocanpartenocarpia. .Controlanlamovilizacindenutrientes.
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.Puedenayudaraestimularlagerminacin.

Retardadoresdecrecimiento: .Inhibenelalargamientodeltallo(sepuedenusarparaevitarelacame). .Inhibenladivisincelular. .Puedenprovocarlafloracinenfrutales. .Controlanlaexpresinsexualhaciafemeneidad. .Permitenllevaracabounadesviacindelosnutrientes. .Aumentantoleranciaasequa.

Para una discusin ms detallada de stas y muchas otras aplicaciones de estas substanciasconsultenaLuckwill(1981)yWeaver(1980).

OBJETIVOS .DemostrarlaestimulacindelcrecimientoylaInhibicindelmismoconcido GiberlicoyCicocelrespectivamente.

MATERIAL Alargamientoyreduccindeentrenudos 6plntulasdefrjolde15a20dasdegerminadas Acidogiberlico50ppm Cicocel5000ppm 3aspersores

PROCEDIMIENTO Asperje cada tercer da, tres veces, lotes de 2 plantas con cido giberlico, cicocel y agua destilada. Al cabo de 12 das despus de los tratamientos mida la longitud de los entrenudos y cuenteelnmerodeestosparacadatratamiento. Al asperjar procure cubrir con la solucin el follaje y que el roco de un tratamiento no alcancealasplantasdeotro.

BIBLIOGRAFA HiII, T.A. 1977. Hormonas Reguladores del Crecimiento Vegetal. Omega, Barcelona, Espaa.

Luckwill,L.C.1981.Growthregulatorsincropproduction.EdwardArnold,GreatBritain. Primo.Y.E.yR.Cuat.1968.HerbicidasyFitoreguladores.Edit.Aguilar.Espaa.

Rojas, G. M. 1976. Manual Terico Prctico de Herbicidas y Fitoreguladores. Ed. Limusa. Mxico.

Weaver,R.J.1980.ReguladoresdelCrecimientodelasPlantasenlaAgricultura. Trillas,Mxico.

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PRACTICANo.11 TITTULO:REGULADORESDELCRECIMIENTOCITOClNlNAS
INTRODUCCIN. Las Citocininas forman el grupo de fitohormonas descubiertas ms recientemente. Se lleg a conocer esta clase de hormonas por estudios del crecimiento de clulas vegetales como las del tallo del tabaco en condiciones estriles sobre medios nutritivos sintticos, donde se induce la divisin celular aadiendo al medio de cultivo extracto de malta o lechedecoco. A pesar de que pronto se hallaron muchos extractos vegetales que contenan sustancias con dicha actividad, no fue hasta 1964 que por fin se pudo determinar qumicamente la primeracitocininanaturaldenominadazeatina. Actualmente se conocen varios compuestos vegetales naturales, pertenecientes a este grupodehormonas,talescomolaisopenteniladeninayladihizeatinaapartedelacinotina ylabenciladeninasintticas(SalisburyyRoss,1994).Losefectosdeestassustanciasenlas plantassonvariados,siendoalgunosejemploslossiguientes: Retrasodelasenescenciadelashojas. Senescencia o envejecimiento es la fase de crecimiento vegetal que comprende de la plenamadurezalamuerteysecaracterizaporlaacumulacindeproductosmetablicosy prdidadepesosobretododehojasyfrutos. En las hojas la senescencia se pone de manifiesto por el amarillamiento, construccin de RNA,protenasyclorofila. La benciladenina es el regulador que mas frecuentemente se aplica para retrasar la senescencia vegetal. Su accin consiste en mantener un alto nivel de sntesis de protena retrasandoladegradacindelaclorofilaylasprotenas,educiendoelritmoderespiracin yengeneralmanteniendoelvigordelasclulas. Por lo comn las hojas separadas de la planta o las que se encuentran en tallos: portados envejecen con rapidez. Con frecuencia en las nervaduras uno de los resultados comunes de la senescencia es la podredumbre en almacenamiento debido desarrollo de bacteria y hongos en aminocidos y otras sustancias nutritivas, que se pierden de las clulas que estnenvejeciendo. Rupturadeladominanciaapical. La dominacia apical es la Inhibicin del crecimiento de las yemas laterales por el pice de una planta. Si se elimina este pice las yemas laterales comienzan a crecer, ramificndose la planta. Este efecto es bien conocido en la poda de frutales y en la jardinera. Se ha demostrado que la dominancia apical est controlada por las auxinas producidas por el pice. Enelcaso de lascitocininas se ha demostrado que si se agregana una yemalateral que no se encuentra en crecimiento y que est dominado por el pice del tallo, con frecuencia la yema lateral comienza a crecer (Salisbury y Ross, 1994). Este efecto ha sido
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utilizado en la horticultura ornamental para aumentar el nmero de hijuelos. En el aspecto patolgico las citocininas producidas por la bacteria Corynebacterium fascians producelaramificacinexcesivaenlaenfermedadllamadaescobadebrujaencrisantemo ychcharo(SalisburyyRoss.1994). OBJETIVOS. 1. Observar el efecto de la benciladenina (BA) sobre el envejecimiento de hojas de apio mediantelacuantificacindeclorofilas. 2. Observar el efecto de las aspersiones de BA sobre la ruptura de la dominancia apical. MATERIAL A)Retrasodelasenescenciaenhojasdeapio. El trabajo se dividir en dos partes, en la primera se aplicar el regulador (BA) y en la segundasecuantificarlaclorofila. AplicacionesdeBA Cuantificacindeclorofila 2vasosdeprecipitado250mI 50mldeacetona80% SosolucinBA 1Embudodevidrio 10mg/l 2Tubosdeensaye Bandejasdeplstico 1Probeta50ml Plantasdeapiodebuenaspecto. 1MorteroyPistilo Espectrofotmetro PROCEDIMIENTO AplicacionesdeBA a) De una planta de apio seleccione 4 hojas del mismo tamao y apariencia, lvelos con aguadestiladayescrralos. b)Sumerja2hojasenlasolucindeBA(10mg/l)durante5minutos.Squelasysacudael excesodesolucin.Sumerjaotras2hojasenaguadestilada.stasservirncomotestigos. c) Coloque las hoja1 tratadas con BA en un vaso de precipitado con agua y en otro vaso lashojastestigo. d) Repita este tratamiento 2 veces ms cada tercer da lo que har un total de 3 aplicaciones. e) Despus de 15 das o cuando note diferencias marcadas realice sus mediciones de clorofila. Cuantificacindeclorofilasa,bytotal. a)Pese0.2gdetejidos(hoja)deunodelostratamientos. b) Muela en el mortero adicionando 20 ml de acetona 80%. Procure extraer todo el pigmentodeformaquelosrestosdetejidoquedenblanquecinos. c)Filtreenelembudoconunagasa.Recibaelextractoenlaprobetade50ml d)Completeconelrestodeacetona80%elvolumendelextractoa20mI

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e) Haga lecturas de absorbancia en el espectrofotmetro a 645 y 663 nm. Use acetona 80%comoblanco. f)Repitaelanteriorprocedimientoparacadatratamiento. Paracalcularlacantidaddeclorofilassubstituyeenlassiguientesfrmulas: .mgclorofilaa/ghoja=12.7(A663)2.69(A645)XV 1000XW .mgclorofilab/g=22.9(A645)4.68(A663)XV 1000XW .mgclorofilastotales/ghoja20.2(A645)+8.02(A663)XV 1000XW Donde: .A663=Absorbanciaa663 .A645=Absorbanciaa645 .V=Volumenfinaldelextracto(20mL) .W=Pesofrescoengramosdeltejido(0.2g) Consusresultadoslleneelsiguientecuadro:
TRATAMIENTO Testigo BA10mg/L CLOROFILAa CLOROFILAb CLOROFILASTOTALES

Cuadro2.Cantidaddeclorofilaa,bytotalenlashojasdeapiotratadasconBA,alcabodedas.

BRupturadelaDominanciaApical.

Realizaraatravsdelasaspersionesdecitocininas.

MaterialesyMtodos. 3Plntulasdefrjolde2semanas. SolucindeBA200ppm +GA50ppm+Tween0.5%(Agentehumectante)

ACadaunadelasplantasapliquelosiguiente: a)AspersinconBA200ppm+Ga350ppm+Tween0.5%. b)Aspersinconagua+Tween0.5%. c)Plantasinpice,elcualsecorta. BIBLIOGRAFA. Gaiston, A.W. y P.J. Davies. 1970. Control Mechanims In Plant Development: Prenatice Hall,EnglewoodCliff.NewJersey.

Leopold,A.C.yM.Kawase,1964.Bensyladenineeffeetsonbeanleafgrowthand senescenee,AmerJ.Bol.5(3):294298.
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Salisbury,F.S.yC.W.Ross.1994.FisiologaVegetal.Gpo.Edil.Iberoamrica, Mxico,D.F.

Withan,F.M.,Blaydes,D.E.YDevlin,R.M.1971.ExperimentsinPlantPhyslology, vanMostrandReinHoldCo.,NewYork,Toronto,Melbourne.

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PRACTICANo.12 TITULO:REGULADORESDELCRECIMIENTOETILENO.
INTRODUCCIN. Histricamente son tres los caminos que han conducido al establecimiento del etileno como una hormona vegetal: a) las antiguas observaciones de que los frutos maduran ms rpidamente si se les encierra en un cuarto con humo, b) el hecho deque en elcultivo de pia y mango se inicien incendios aledaos a los cultivos a fin de que el humo Inicie y sincronice la floracin y c) la Induccin de la cada de las hojas de los rboles a partir del gasdesprendidoenlaslmparasutilizadasparalailuminacinpblicaamediadosde1864 (SalisburyyRoss,1979). No se acept al etileno como hormona sino hasta la dcada de los sesentas en que se aclarqueeletilenoesunmetabolitonormalproducidoporclulassanasyqueejerceun control regulador sobre fenmenos morfognicos de las mismas, a pesar de las dudas respectoasucapacidaddetransporte(Weaver,1980). En la actualidad se conocen muchas respuestas de las plantas controladas directamente por etileno aparte de aquellos casos en los que posiblemente otros reguladores del crecimiento ejercen sus efectos teniendo al etileno como intermediario (tal como ocurre en ciertas condiciones con las auxinas). Algunas de las respuestas de las plantas al etileno sonlassiguientes: Senescenciadeflorcortada. Respecto al envejecimiento de las flores se ha observado que el clavel est controlado principalmente por el etileno producido por la flor misma o por el smog de la contaminacin atmosfrica y que ste acelera el marchitamiento de los ptalos, lo que a su vez causa prdidas durante el manejo en el mercado y disminucin de su vida en el florero. Dado lo anterior se han Investigado centenares de substancias que puedan prolongarlavidadelasflorescortadas. Recientemente se ha encontrado que los iones de plata han producido los mejores resultados en la conservacin de flores cuando han sido asperjados o absorbidos por el tallo. De esta manera, tenemos que Red y Col. (1980) lograron que el tiosulfato de plata absorbidoporeltalloprolongarhasta66.9dasmslavidaenelflorerodeclavelesde la variedad Orchird Royalette. Descubrimientos como este han desencadenado estudios que nos Indican el tiempo de aplicacin, concentracin, variedades, temperaturas que produzcanlosmejoresresultados,ascomoelmecanismodeaccin. En lo que se refiere al mecanismo de accin se piensa que la plata es un agente anti etileno que Impide que ste desencadene el proceso de envejecimiento. Entre las evidencias a favor de este tenemos el trabajo de Halavy y Kofranek (1977) que nos demuestra que la plata contrarresta los efectos del etefn (una substancia que libera etilenoalserabsorbidaporlasplantasyqueporlotanto,aceleraelenvejecimientodelas flores.
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Formacindezonadeabscisin. La cada de las hojas y de los frutos ocurre porque se presenta la formacin de una(s) capa(s) de clulas especializadas llamada zona de abscisin. Dependiendo de la especie esta zona de abscisin puede formarse muy temprano durante el desarrollo o solamente cuandosealcanzalamadurez.Antesdequesecaigaelrganoseproducencambiosenla zona de abscisin tales como; a) divisiones celulares que forman una capa de clulas pequeas y apretadas a lo largo de la base del pecolo, b) disolucin enzimtica de la paredcelularodelalminamedia.c)taponamientodelosvasosdexilemayd)formacin decorchoenlazonadeseparacin;entreotros.Estoscambiosdebilitanelpuntodeunin yprovocandespuslaseparacinylacadadelrgano(GaistonyDavies,1970). El etileno puede utilizarse para acelerar la formacin de la zona de abscisin y esto ha resultadotilenaquellospasesenlosquesellevaacabolacosechamecnicadefrutales como manzana, cerezo, ctricos, olivo, pera,ciruelay nogal.En este caso las cosechadoras agitan el rbol y reciben en lonas extendidas los frutos. Si stos estn dbilmente unidos se requerir menor fuerza para agitar el rbol y se producir menos dao a ste, adems dehacermasuniformelacosecha(Weaver,1976).. Sin embargo, el etileno como gas es difcil de manejar en espacios abiertos, por lo que se ha preferido usar substancias que liberen etileno, siendo una de ellas el etefn o ethrel (cido cloroetilfosfnico). Este compuesto es estable en pH cido y se descompone liberando etileno en pH bsico, producindose entonces la accin de1 etileno, ya que las plantastienenensustejidosunpHmsaltoqueeldeletefn. CICH2CH2PO'+OH. CICH2CH2PO___ / / O' O' EtefnH CL+CH2=CH2+HP02' Etileno 3 Cuadro3.Liberacindeetilenoporeletefn(Abeles,1973). OBJETIVO Controldesenescenciadeflorcortada. a)Medirelaumentodelavidaenelflorerodeplantasdeclaveltratadascontiosulfatode plata. . b) Medir la disminucin de la vida en el florero causada por un aumento da la concentracindeetileno. e)Inducirlaformacindelazonadeabscisinenexplantesdefrjol. MATERIAL Senescenciadeflorcortada. Induccindelazonadeabscisin 12Clavelescortados 5Frascosdevidrio
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Etiquetas Sol.deetefna50ppmSol.detiosulftodeplata (Verapndice) Plantasdefrjolde20a24das degerminadas(20) Etefn0.25%enlalonina Lanolinasola Cajasdepetri(1) Agrolita Aplicadoresdevidrio (varilladevidrio) A)Controldelasenescenciaenflorcortada. Aumentodelavidaenelflorero En este caso el tiosulfato de plata, debe ser absorbido por el tallo de la planta por determinado tiempo. Solo deben introducirse 3 plantas en la soluci6n por 20 minutos y 3 plantas ms por 40 minutos. Despus de este tiempo squelas de la solucin y enjuguelas con agua corriente y col6quelas en los frascos de vidrio con agua. Ponga 3 plantassintiosulfatodeplataenotrofrascocomotestigo. Disminucindelavidaenelflorero. Coloqueunpocodelasolucindeetefnenunfrascoypongaah3claveles. Para cuantificar la vida de las flores se tomar como dato para cada tratamiento el nmero de das necesarios para que se marchite la primera flor. En general verifique la aparienciadesusplantasapartirdeltercerda:Describasuapariencia. B)Induccindelazonadeabscisin. Uno de los mtodos Iniciales en los que se prueban substancias que tengan capacidad de Inducir la abscisin es el bioensayo de los explantes de frjol en los que se utilizan las porcionesdelaplantaquesesealanenlaFigura2.

Figura2.Mtododelexplantedefrjolparabioensayodeabscisin.
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En este caso se va a utilizar el etefn agregado a la lanolina aun cuando en forma comercialsteseutilizaenformadesolucionesliquidasasperjndose. Procederemosdelasiguienteforma: a)Cortelosexplantes(20)delasplantasdefrjolydivdalosendosgruposde 10. b) Coloque la vermiculita en las cajas de petri y entierre all la base de los explantes tal comosevenenlaFigura3.Agregueunpocodeaguaaestavermiculita. Figura3.Cajadepetriconlosexplantesdefrjol c) Coloque con las varillas de vidrio un poco de lanolina o de lanolina con etefn a cada lote. Mantenga en la obscuridad. Para verificar si ha habido abscisin despus de cierto tiempopresionesuavementeconunlpizlospecolos. Reporte el porciento de abscisin a los 4, 7, 10 Y 12 das de iniciado el ensayo, para cada tratamiento. BIBLIOGRAFA.

Abeles,D.S.1973.EthyleneinPlantBiology.AcademicPress.NewYork.London

Gaiston,A.W.yDavies,P.J.1970.ControlMechanimsinPlantDevelopment.PrenticeHall, EnglewoodCliffs,NewYersey.

Halevy, A.H. y Kofranetz, A.M. 1977. Silver treatment of carnation flowers for reducing ethylenedamageandextendinglongevity.J.Amer.Soc.Hort.Sci.102(1):7677. Salisbury,F.B.yC.W.Ross.1979.PlantPhyslology.2a.Ed.Wadsworth,Salmont,California. Reid, M.S., D.S. Farnham y E.P. McEnrva. 1980. Effecto of silverthiosulfata and preservativa solutions on the vase lIte of miniature carnations. Hort Science 15(6):807 808. Weaver, R.J. 1980. Reguladores del crecimiento de las plantas en la agricultura.Trillas, Mxico. Apndice SolucindeTiosulfatodePlata. Semezclanenunaproporcinde1:1unasolucindeAgN03mMyNa2S20.Mm:0.67969 AgNO.para0.51.2.52969Na2S20. para0.5l.teirlosyformar1I.

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PRACTICANo.13 TITULO: OTROS REGULADORES DEL CRECIMIENTO EFECTO DE EXTRACTOS DEVARIOSFRUTOSSOBRELAGERMINACIONDESEMILLASDERABANO.


INTRODUCCIN. El estado de Veracruz es el mayor productor de papaya de la repblica y los agricultores obtienenporlogeneralsupropiasemillaponindolaasecarsinanteshaberremovidola sarcotesta(capagelatinosaquecubrelassemillas). Enestascondiciones,porlogenerallagerminaci6neslenta,yaquecomienzaalos15das 6 ms despus de la siembra y se extiende por un perodo aproximado de 15 das 6 ms, provocando as un desarrollo heterogneo de las plantas en los almcigos lo que obliga a extremar cuidados pues las plantas que ms tardan en brotar estn ms expuestas a ser daadas por plagas debido a su menor rea foliar. Lange (1961), citado en Mosqueda, 1969), menciona que obtuvo germinacin ms temprana y en mayor porcentaje en semillas sin sarcotesta probablemente porque la sarcotesta impide que se laven algunos Inhibidores de la germinacin; Gherardi y Vallo (1976) determinaron que los extractos de lassemillasdepapayacontenaninhibidorescidosyneutros,posiblementedenaturaleza fenolca. Con estos antecedentes se plantea que si bien en el caso de la papaya la sarcotesta aparentemente inhibe la germinacin de la semilla es probable que para otros frutos carnosos donde sus semillas estn "embebidas" en la solucin acuosa circundante, esta mismaseainhibitoriaparalagerminacindesupropiasemillaodeotras. OBJETIVO Enlapresenteprcticaseproponeverelefectodeextractosdejitomate,melnypapaya (sarcotesta)sobrelagerminacindesemillasderbano. MATERIAL 4CajasdePetriPapaya AlgodnMeln 3VasosdeprecipitadoJitomate 1Probetade100mlAguadestilada Gasa Extraccin. PAPAYA a) Elimine la sarcotesta a semillas frescas en nmero suficiente para obtener aproximadamente20mldeextractofiltradoendoblecapadegasa. b)Aforeelextractoobtenidoa50mlconaguadestilada. MELON a)PartaelmelnyextraigalassemillasconsuJugo.

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b) Colquelas directamente sobre tres capas de gasa y exprima sobre un vaso de precipitado. c)TomealIgualqueenelcasodepapaya20mlyaforea50mlconaguadestilada. JITOMATE a)Sigaelmismoprocedimientoqueparameln. SIEMBRA a) Separe cuatro lotes de 100 semillas de rbano y distribyalas sobre una caja de Petri con algodn. Humedezca adecuadamente el algodn con el extracto respectivo cada tratamiento. b) Mantenga a temperatura ambiente durante un da. El cuarto lote de 100 semillas utilcelocomocontrol. c) Cuente el % de germinacin al cabo de 24 y 48 horas. Compare los tratamientos. nota: En caso de que sea necesario humedecer nuevamente alguno de los tratamientos, hgalo conaguadestilada. BIBLIOGRAFA. Arumagan,S. And K.G. Shanmgavelu. 1975. Studies of sarcotesta on the seed germination ofpapaya(Cariespapaya).SeedResearch.3(2):7:780.

Gherardi,E.yI.F.M.Valio.1976.Ocurrenceofpromotinginhibitorysubstancesintheseed arilsofCaricapapayaL.J.Hort.Science.51:114.

Hartman, H.T. y D.F. Kester. 1971. Propagacin de Plantas. Traduccin de Antonio Mirano Ambrosio,C.E.C.S.A.Mxico.

Machlis, L. y J.G. Torrey. 1956. Plants in Action. A Laboratory Manual of Plant Physiology. W.H.Freeman,SanFrancisco.

MontesMeneses,J.1969.Correlacindelalongevidaddelassemillasdemazyfrjolcon laspruebasdetetrazolioygerminacin.Tesis,Fitotecnia,uach

Mosqueda,V.R.1969.Efectodediversostratamientosaplicadosalasemillade papayasobresupodergerminativo.AgriculturaTcnica.2(11):487491.

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PRACTICANo.14 TITULO:DOMINANCIAAPICALYABSICINDEHOJA
INTRODUCCION En mayora de las plantas, tanto herbceas como leosas, la yema apical es responsable del crecimiento del tallo principal. Aunque en las axilas de cada hoja hay una yema, por regla general sta permanece en reposos por lo menos durante algn tiempo, 1o que da por resultado la ramificacin empiece a cierta distancia del pice. Si por alguna razn la yema apical se muere, muy pronto empiezan a brotar las yemas axi1ares cercanas al pice. Efecto similar puede producirse con la aplicacin de ciertas sustancias orgnicas que e1iminan la dominancia apical; en un experimento anterior se estudi el uso de la tiourea para tal fin. En el caso de muchas conferas cuando la yema apical muere, las ramas laterales p1agitropas ms cercanas al apice se orientan en posicin vertical, originndoseunrbolconm1tiplesejesorttropos. Se supone que la dominancia de la yema apica1 se debe a la alta concentracin de las hormonasproducidasenella,lascualessetrasladanhaciaabajo.Laaltaconcentracinde hormonas en la zona del tallo cercana al pice inhibe el crecimiento de las yemas laterales, la cuales sin embargo, parecen ser estimuladas por concentraciones ms bajas. Si se elimina la yema apica1 disminuye la concentracin de hormonas en el tallo, bajando a un nivel ptimo para la brotacin de las yemas laterales. Tal cosa sucede tambin a cierta distancia del pice, ya que durante el traslado la concentracin de hormonas se reducegradualmente. Ademsdelasyemas,lashormonassonproducidasenlashojas,especialmenteenlasque estn en desarrollo. Estas hormonas tambin se trasladan hacia abajo, a travs del pecolo. Cuando las hojas alcanzan la madurez, la produccin de hormonas disminuye considerablementeenellas. En la base de cada pecolo (tambin en el pednculo de las flores) desde muy tempranamenteempiezaaformarseuntejidoqueatraviesatodoelpecoloyqueconsiste de clulas rectangulares con paredes muy delgadas. Mientras la concentracin de hormonas se mantenga alta, el desarrollo de este tejido, llamado tejido de abscisin no avanza. Tan pronto como la concentracin baja como ocurre en las hojas muy viejas, el pecoloseseparadeltallocomoconsecuenciadeldesarrollodeltejidodeabscisinydela disolucin de las lminas medias de sus paredes. En regiones con una estacin desfavorableparaelcrecimiento,lacadadehojasesmuypronunciadaenmuchasplantas leosas (plantas de hojas caducas), mientras que en algunas plantas herbceas del todo nohaydesfo1iacin. Existen varios factores fisiolgicos que aceleran o retardan la cada natural de las hojas. Adems de la sequa deben citarse ciertas enfermedades o acciones parasticas, alta humedad en el espacio radical, falta de carbohidratos o de ciertos elementos minerales, etc.
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OBJETIVO En este experimento se demostrar primeramente la dominancia de la yema apical. Al eliminar sta, se provoca la brotacin yel desarrollo de las yemas laterales, lo que resulta en una ramificacin abundante de la planta decapitada. En la segunda parte se comprobar la importancia de la concentracin de hormonas producidas en las hojas sobrelaabscisin,removiendolalminafoliar. PROCEDIMIENTO a)Dominanciaapical Obtenga tres plantas de tomate o de Coleus, de unos 20 a 25cm de altura, con la yema apical en crecimiento activo. Deje una planta como testigo. Elimine la yema de las otras dos por medio de un corte con una hoja de afeitar ms o menos 1cm ms abajo de la yema apical. Deje una de estas plantas sin ningn otro tratamiento y a la otra aplquele pastadelanolinaconhormonassobreelcorte.Repitaestaaplicacindespusdeunasdos semanas.Estudielaaparienciadelastresplantasdespusdedos,cuatroyseissemanas. Anotacindeobservaciones: BIBLIOGRAFIA Burd, D. Y Lomas, J. 1976. Mtodos de medicin del rea foliar: un estudio de precisin y rapidez. WMO Sympoolum de Agrometeorologia del Cultivo de Maz. lowa Slala University,Amea,lowa.TraduccindeE.,SolrzanoV.

Bould,C.1968.LeafanalysisasadiagnosticmethodandadvisoryaldincropNutrition.Exp. Agriculture.4:1727.

Bidwell, R.G.S. 1979. Plant Physiology. 2a.de. Mac Millan, New York. Devlin, R.M. 1975. Fisiologa Vegetal. Ed. Omega. Barcelona, Espaa. Hall, D.O. y K.K. Rao. 1978. Fotosntesis. De.Omega.Barcelona,Espaa.

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PRACTICANo.15 TITULO:REGULACINDELAABSCISINPORMEDIODEHORMONAS
OBJETIVO Observelacadadelospecolos,delosdiferentestratamientos.Hagaunadiscusindelos resultados. PROCEDIMIENTO Obtenga cinco plantas de Co1eus sembradas en macetas o en una caja de madera. Aplique los tratamientos siguientes: Deje una planta intacta para que sirva como testigo. En la segunda planta recorte con una hoja de afeitar las dos terceras partes de la lmina de todas las hojas menos de las ms jvenes, muy poco desarrolladas dejando el resto de la lmina pegado al pecolo. En las dems plantas, recorte completamente las lminas de todas las hojas tambin con excepcin de las ms jvenes en su base, o sea en la unin conelpecolo.Enunadeestasplantasapliquesobretodosloscortesdelospecolospasta dehormonaenlanolina.Enlospecolosdeotraplantaapliquelanolinapura,sinhormona. Dejelaltimaplantasintratar

Cadadepecolos Despusdedas...

Testigocon lamina

Plantasin Plantacon11/3 lmina delamina

Plantasinlmina hormona

Testigosinlamina lanolina

Cuadro3.Reguladoresdelaabscisinpormediodehormonas BIBLIOGRAFIA Weaver, R.J. 1980. Reguladores del Crecimiento de las Plantas en la Agricultura. Trillas, Mxico.

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PRACTICANo.16 TITULO: INDUCCIN DE ENRAIZAMIENTO DE ESQUEJES POR MEDIO DE HORMONAS


INTRODUCCION La mayora de las plantas "superiores" se propagan por medio de semillas. Sin embargo. En algunas especies la propagacin vegetativa por medio de bulbillos, estolones, tubrculos. etc., sustituye a la propagacin sexual. Si se mantienen partes de muchas plantas. Inclusive de especies que se propagan exclusivamente por semillas, en condiciones apropiadas estas partes se muestran capaces de producir una nueva planta esta particularidad es aprovechada por el hombre en la multiplicacin de plantas por medio de estacas, de hojas y an de pedazos de races; en esta forma se puede obtener rpidamente un nmero grande de plantas de constitucin gentica uniforme (propagacinclonal). Desdehacemuchotiemposesabequeelenraizamientodeestacasesmsrpidocuando stas tienen hojas y especialmente yemas. Como los centros principales de la produccin de hormonas son las yemas activas y las hojas jvenes. Puede presumirse que las hormonas producidas en estas partes (tambinen menor cantidad enhojas maduras) son trasladadas hacia la base de la estaca y provocan all la iniciacin de las races. La aplicacindereguladoresartificialesdecrecimientoalabasedeestacasestimulatambin la iniciacin de races. Especialmente en plantas en que la concentracin de hormonas naturales no es lo suficientemente alta para iniciarlas; sin embargo no pueden inducirse racesartificialmenteenpartesdondenormalmentenoseproducen. Puestoquelaconcentracinnecesariadelahormonaparalainiciacinderacesesmayor que la que se necesita para estimular su crecimiento posterior, debe tenerse cuidado de que despus de la fase de iniciacin de las races la concentracin hormonal se reduzca puesdelocontrariopuedeocurrirmsbienunainhibicineneldesarrollodelasracesya formadas. Debe mencionarse tambin que la concentracin ptima de la hormona para la fase de iniciacinderacesvarasegnlaespeciedelaplanta. Aunque las hormonas constituyen un factor sumamente importante en la formacin de racesstasdependenenaltogradodelascondicionesfisiolgicasenqueseencuentrala planta de la cual se toman las partes para la propagacin vegetativa. Adems de las hormonas existen otras sustancias tambin esenciales para la iniciacin de races cuya ausencia impide una accin positiva de las hormonas; entre las que se conocen deben mencionarse algunas vitaminas del grupo B, como la tiamina y la piridoxina. La falta de clorofila y de reservas de carbohidratos, lo mismo que de ciertos elementos esenciales tambinpuedelimitarlaformacinderaces. OBJETIVO Conocer el efecto de dos sustancias hormonales del grupo de las auxinas sobre 1a induccinderacesenesquejes.
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MATERIAL Acidoindolactico:AIA acidonaftalenactico:ANA EsquejesdeColeussp.Yuca,balsaminaosauce. Cascarilladearroz Nateraspequeas Telaplsticoobolsasdeplsticotransparentes Bandasdecaucho Hipocloritodesodio

PROCEDIMIENTO A partir de soluciones madres de AlA y ANA de 1000 ppm prepare 100 ml de cada una de lassolucionesquesernlosrespectivostratamientos:

Tratamiento 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.

Regulador AlA: AlA: AlA: ANA: ANA: ANA: Testigo

Concentracion 10ppm 100ppm 1000ppm 10ppm 100ppm 1000ppm H20

Prepare 21 esquejes (Estacas) de Coleus u otra planta de fcil enraizamiento, lo ms uniformes posibles en tamao y grosor. Desinfctelos con una solucin de hipoclorito de sodio al 0.5%. Utilice 3 esquejes por tratamiento y sumerja las bases en las respectivas soluciones dejndolos en contacto con las soluciones por 20 horas aproximadamente. Luego colquelos en materos con cascarilla de arroz hmeda y cbralos con plstico transparenteparaevitarexcesodehumedadatmosfricahgaleperforacionesalplstico. Luegode15dastomelosresultadosdelaproduccinderaces. Tomeelpromediodelnmeroylargoderacesporesqueje. Nmeroxderacespor Largoxderacespor Tratamiento esqueje esqueje.mm. AlA: 10ppm 1 2 3 4 5 6 7

AlA:

100ppm

AlA: 1000ppm ANA: ANA: ANA: 10ppm 100ppm 1000ppm

Testigo

Cuadro4.Induccindelenraizamientodeesquejespormediodehormonas
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Hagaunadiscusindelosresultados. BIBLIOGRAFIA Hartman, H.T. y D.F. Kester. 1971. Propagacin de Plantas. Traduccin de Antonio Mirano Ambrosio,C.E.C.S.A.Mxico.

Kestah, Z. Carshy, J. y Jarvis, P.G. 1971. Plant Photosynthetic Production Manual of Methods.W.JunhN.V.theHague.

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PRACTICANo.17 TITULO:REGULADORESDELCRECIMIENTOAUXINAS.
INTRODUCCIN. Unodelosimportantessistemasdecontroldelcrecimientoenlasplantasloproporcionan losllamadosreguladoresdelcrecimientovegetalofitohormonas. Una hormona vegetal es una sustancia orgnica que es sintetizada en el interior de la planta y que, a bajas concentraciones, puede activar, Inhibir o modificar cualitativamente elcrecimientoejerciendonormalmentestaaccinenunlugardistintoaldeorigen. Dentrodelosgruposimportantesdelashormonasvegetalesestnlasauxinas. UnaspectoprcticodeestashormonasvegetalesenlaestimulacindelaIniciacindelas races. La capacidad de muchas plantas para formar races en estaca colocados en condiciones favorables de crecimiento tiene un gran valor en la propagacin de las plantas. Otra de las aplicaciones prcticas mas difundida de los compuestos sintticos de tipo auxinico es el control de las malas hierbas. Las malezas que compiten con los cultivos por la luz, nutrientes y agua principalmente, son eliminados desde hace miles de aos en forma manual, las tcnicas y las sustancias qumicas han desplazado paulatinamente el deshierbe manual. Algunos herbicidas selectivos son molculas similares a los fitoreguladores naturales, por ejemplo el 2.4D el cual dependiendo de las concentraciones que se usen, puede tener efecto inhibitorio o de promotor del crecimiento. Tambin se ha visto que las auxinas participan en el control de la dominancia apical, ya que la sustitucin del pice por una pasta de lanolina mantiene las yemas laterales sin crecer(RobertsyWhitehouse,1976).SalisburyyRoss(1994)hacenunarevisindelpapel de las auxinas en la dominancia apical y sobre la medicinde este regulador en las yemas lateralesdeplantasconysinpice. OBJETIVO . Determinar cul de las concentraciones de ANA acelera la formacin de races en estacasdefrjol. . Conocer el efecto del 2,4D (2,4Diclorofenoxiactico) como regulador del crecimiento y comoherbicida. MATERIAL Enraizamientodeestacasactividadherbicida Solucionesdiluidoes:6macetas ANA5.10.2030mg/lplantasdemaz,frjolyvariasmalezas Estacasdefrjol50,500y1000 Vasosdeprecipitadoapersonesmanuales Dominanciaapical Plntulasdechicharo.Frjol AlA1g/lenlanolina
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PROCEDIMIENTO Enraizamientodeestacas a) Se proporcionarn las plntulas de frjol para hacer estacas de 10 cm de longitud. su profesordeprcticaleIndicarcmo. b)Seusarn5estacasporconcentracindeANAyuntestigo. c) Inmediatamente despus se ponen en contacto con las diferentes concentraciones. En 10mldesolucin. d)Eltiempodeinmersinvaadependerdelacapacidaddeabsorcindelasestacas. e) Una vez absorbidos los 10 ml de solucin se le debe agregar agua suficiente para mantenervivaslasestacasporunperodode10a15das. La observacin del nmero y longitud de las races se har a los 15 das despus de iniciadalaprctica.
TRATAMIENTO NUMEROPROMEDIO LONGITUDPROMEDIO DELASRAICES(A LOS___DIAS) OBSERVACIONES GENERALES

TESTIGO 5mg/l 10mg/l 20mg/l 30mg/l

Cuadro5.Reguladoresdelcrecimientoauxinas Elaboraruncuadroconlosdatossiguientesparalasconcentracionesqueseaplicaron. Actividaddeherbicidas. a)Rotulecadaespecialidad. 1)Testigo3)500ppm 2)50ppm4)1000ppm b) Cuando las plantas alcancen de 15 a 30 cm de altura, aplique por aspersin la solucin de2,4Dacadatratamiento. c)Deberestaralpendientedesumaterialyregarsegnseanecesario. Hagaobservacionessobrequemaduras,marchitamiento,deformacionesdespusde6,12, 24horasyalcabode2y5das. DominanciaApical
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Se requieren plntulas de frjol con la primerahoja trifoliada totalmente expandida o con un desarrollo similar en chcharo. Retire el pice de dos plantas y aplique lanolina con o sin AIA. Deje una tercera planta como testigo, sin cortar el pice. Permita que se desarrollenlasplantasyalcabodeuntiempoverifiqueeltamaodelasyemaslaterales. BIBLIOGRAFIA Hill, T.A., .1977. Hormonas Reguladores del Crecimiento Vegetal. Omega, Barcelona, Espaa. Luckwill,L.C.1981.Growthregulatorsincropproduction.EdwardArnold,GreatBritain.

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PRACTICANo.18 TITULO:METODOSPARALAMEDICIONDELAREAFOLIAR
INTRODUCCIN. ElreatotaldelashojassedescribemedianteelllamadondicedereaFoliar (IAF). Este valor Indica el nmero de unidades de rea por unidad de rea de terreno es decir: IAF=readelashojas/readelsuelo EI IAF sirve como un Indicador de la superficie disponible para la absorcin de luz y suministra un denominador comn para discutir el potencial fotosinttico de un cultivo determinado. El IAF puede variar drsticamente mediante la densidad de poblacin, la distribucin de las plantas o por un cambio de variedad. Nichiporovichen 1960 (Citado en Mitchell1970)hacenotarquelossiguientespuntossontilescomounabasedediscusin cuandosetrabajeconelIAF. a)ElIAFdebesersuficienteparainterceptartantaradiacincomoseaposible. b)ElIAFdebedetenerunamagnitudtalqueprevengaelparasitismo,stoes,lacondicin en la cual las hojas Inferiores usen los carbohidratos a una velocidad ms, alta de la que losfotosintetizan. c) El IAF debe reunir las condiciones y propsitos para los cuales el cultivo est destinado. Un IAF mximo no siempre conduce a una mxima produccin de grano ni produce siemprelosmximosdemateriaseca. El IAF se registra en un estado especfico del crecimiento (por ejemplo a los 30das del brote de las plntulas, durante la antesis, etc.), y las comparaciones entre variedades se hacenenunmismoestadodedesarrollo. ElIAFproporcionaademslabaseparaobtenerotrosparmetrostilesenladescripcin de la fotosntesis de un cultivo. Por ejemplo un valor relacionado con el IAF es el de duracin del rea foliar (DAF) y es utilizado, para describir el tiempo durante e1 cual el rea foliar es funcional. Por ejemplo un campo de maz puede tener un IAF de 4.5 en el momento de la polinizacin pero seria til conocer cunto tiempo es mantenido este IAF. Puede Incluso hacerse una comparacin usando la DAF para dos variedades, una de las cuales mantiene un IAF de 4.5 durante 40 das y otra un IAF de 5.3 por 30 das. Estos valores nos proporcionarn informacin acerca de cmo, usar estas variedades para un medio ambiente con determinadas condiciones de radiacin, fertilidad o periodos de sequa(Mitchell.1970). Volviendo al IAF debemos hacer notar que en la medicin del rea de las hojas se considera solamente un lado de stas. Ahora bien; en la determinacin del IAF el problemabsicoeslamedicindelreadelashojas.Qumtodosexistenparamedirel readelashojas?Mencionaremosenestecasocuatrodeellos: 1)Mtodogravimetrico Consisteentrazarelcontornodelahojasobreunpapel,recortarlaypesarla.Elreadela hojaescalculadamedianteelpesadodehojasdepapeldereaconocida,esdecir: Pesodelpapelconreaconocida__________________reaconocida Pesodelaimpresindelahoja_____________X(readelahoja)
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2)Relacinentrelasmedidaslinealesyelreadelahoja. Laformageneraldeestemtododeclculodelreadeunahojaes: AF=bxAxL+a Donde: AF=readelahoja A=Anchomximodelahoja L=Largomximodelahoja ayb=Coeficientes(dependendelahoja) De acuerdo a sto, solo es necesario obtener las medias necesarias y conocer el valor del coeficientea y b para obtenerel rea (AF) de la hoja. En el Cuadro 1 se encuentran varios valoresdeaybparadiferentescultivos.
ESPECIE CACAO TOMATE PEPINO MAIZYSORGO GIRASOL ALGODN MANZANA TRIGO CEBADA TRIGO ARROZ MAIZ GRAMINEASENGENERAL GIRASOL TABACO ALGODN ECUACION AF=156.188xL+9.178 AF=0.1551Xl2 AF=0.8663xL6.3985cv.Local AF=0.8132x.LxA6.3985cv.Marketer AF=0.75xLxA AF=0.6798xLxA AF=0.77xLxA AF0.708xLxA F=0.836xLxA(Fernndezyarias,1989) VALORDEb,a=0 0.64 0.65 0.66 0.710.81 0.66 0.610.76 0.610.76 0.69 (TomadodeGestak,elal.1971) (TomadodeGestak,elal.1971)

Cuadro 6. Ejemplos de coeficientes a y b utilizados para calcular el rea foliar de varias especies. En el apndice 1 se presenta un resumen de la metodologa para que se calculen los modelosdecualquierotraespecie.
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3)Mtododelconteodeintersecciones. Este mtodo utiliza una placa de vidrio, plstico u otro material sobre la cual se traza una red con lineas horizontales y verticales de tal manera que aparecen cierto nmero de Interseccionesocrucesentrelaslineas. Para estimar la superficie de una o varias hojas necesitamos contar el nmero total de Intersecciones que tocan las lminas de las hojas y sustituir en la siguiente relacin (Hart, 1965):A=nxS/N Donde: A=readelashojas n=NmerodeInterseccionesquetocanlaslminasdelashojas. S=Superficietotaldelaplaca N=numerototaldeInterseccionesdelaplaca Se han llevado a cabo algunos trabajos que tratan de determinar cul es la densidad de Interacciones ms adecuadas para obtener una medida ms confiable de la superficie foliaryBurdyLomas(1976)sugierenqueunadensidadde100interseccionesen100cm2 es lamejor.Otra ventaja de usar una rejilla deestas proporciones que larelacin anterior seconvierteen:A=n Es conveniente contar varias veces el nmero de intersecciones que tocan la lmina de la hoja y sacar un promedio. As mismo es importante saber qu intersecciones contar y cules no. Para lograr formarse un criterio acerca de sto es conveniente practicar un pocomidiendoelreadeunasuperficieconocida. Por otra parte, debe recordarse que el rea obtenida hasta ahora es estimada y que si se desea mayor precisin puede trazarse una grfica que relacione las reas obtenidas en la rejilla con reas verdaderas (medidas en otro mtodo mas exacto, planmetro por ejemplo) y obtener la ecuacin que las relacione. De esta manera, cualquier otra medida obtenidaconlarejillapuedesustituirseenlaecuacinyobtenerasunvalormscercano alverdadero. 4) Planmetroptico. Este es uno de los mtodos ms prcticos y precisos de medir el rea de una muestra de hojas.Unplanmetroconstaesencialmente,deloselementosincluidosenlaFigura8.

Figura4.Elementosdeunplanmetroptico
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En este dispositivo tenemos que la foto celda recibe una cantidad de luz constante, produciendoasuvezunacorrienteconstante.Siinterferimoselpasodelaluzconlminas de superficie conocida se producirn determinadas variaciones de la corriente. De esta manera hacemos una calibracin del aparato. Despus Introducimos las hojas (superficie desconocida)yobservamoslavariacindecorriente. Las hojas se conocen por la curva de calibracin. Los planmetros comerciales hacen directamente la conversin de variaciones de corriente a superficie, por lo que facilitan muchoeltrabajo.Sinembargo,nosiempresedisponedeunplanmetro,porlocualestil conocerotrosmtodosdemedicindelreafoliar. Todos los mtodos anteriores excepto el segundo son destructivos (hay que arrancar las hojas). Existen otros mtodos no destructivos que preservan hojas en la planta. Para conocerestosmtodosconslteseaSestak,et,al(971). OBJETIVO. Conocer y comparar los resultados de cuatro mtodos de medicin del rea de las hojas deunaespecie. MATERIAL Hojasdepapel Tijeras Balanzaelctrica Regla. Rejilla Planmetro Hojasdeunaplanta(sorgo,trigo,tabaco,etc.) PROCEDIMIENTO Medir el rea de un grupo de hojas por los cuatro mtodos descritos anteriormente. Reportesusresultadosdeacuerdoalsiguientecuadro: METODO AREAFOLIAR RELACIONAFx/AF4
1)Gravimetrico 2)medidaslineales 3)conteodeintersecciones 4)planmetro

Cuadro 7. Compare los valores obtenidos para cada mtodo y con ayuda de la relacin AFx/AF4 discutalosresultadosenfuncindelaexactitudyeltiempoempleadoparallevarlosacabo.


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BIBLIOGRAFIA Burd, D. Y Lomas, J. 1976. Mtodos de medicin del rea foliar: un estudio de precisin y rapidez. WMO Sympoolum de Agrometeorologia del Cultivo de Maz. Iowa State UniversityPress,Amea,lowa.TraduccindeE.,SolrzanoV.

Fernndez, H.y E. Arios. 1989. Estimacin del rea Foliar en Plantas de Cultivo. Porte 1. AgrotecnicadeCu.15148.deResenss,SuelosyAgroqumica.Lahabana.Cuba.

Harl.P.H.1965.Ainthegridlosestimatingcreaofgrassleaves.AgronJ.57(e):634.

Kestah, Z. Carshy, J. y Jarvis, P.G. 1971. Plant Photosynthetic Production Manual of Methods.W.JunhN.V.theHague.

Mitchell,R.C.1970.CropGrowthandculture.IowaStateUniversityPress.Ame,lowa. APENDICE1 Para obtener los valores de a y b de los modelos lineales AF = b x L x A + a se procede comosigue: 1) Obtenga una muestra de hojas de la especie de Inters. Los tamaos deben cubrir desde las hojas pequeas hasta las ms grandes. Numere cada una de ellas y obtenga su largomximoyanchomximo. 2) Con ayuda del planmetro ptico u otro mtodo que tenga cierta exactitud (el mtodo delasinteracciones,porejemplo)obtengaelAFfecadahoja. ConestosdatosseobtieneunaecuacinderegresinlinealutilizandocomoXalproducto deLxAoaLoAsolas.Lasecuacionessernentoncesdeltipo: AF=LxAxb+a AF=Lxb+a AF=Axb+a Seleccione el mejor modelo de acuerdo al valor de R2. A continuacin se presenta la forma de Introducir estos datos en un programa SAS. Se presenta as mismo una de las salidasyculessonlosparmetrosqueseutilizanparalaelaboracindelmodelo.
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PRACTICANo.19 TITULO:DETERMINACINDELREAFOLIAR
INTRODUCCIN La estructura de las plantas es una expresin del proceso conocido como desarrollo, el queasuveztieneaspectoscuantitativos(crecimiento)ycualitativos(diferenciacin). El crecimiento se puede evaluar a travs de medidas de longitud, peso, volumen, rea de todalaplantaounapartedeella. OBJETIVO Estimarelreafoliardeuncultivoporunmtodoindirecto MATERIAL Hojasdefrjolypepino,papelmilimtrico,cartulina,sustratosymacetas. PROCEDIMIENTO Unmesprevioalaprctica,sembrarde10a15semillas(pormaceta)decadaespecie,de unamacetacortalashojas,dibujarenunacartulinaelcontorno,medirlalongitudyancho dehojayrecortarla,siguiendoelcontornomedirelpesodecadahojaydeltotaldehojas. Por otro lado, recortar una cartulina de 10x10 cm. y medir el peso. Conociendo el rea (100cm2)ypesodelacartulina,yconociendoelpesodecadahojaydeltotaldehojas,se podr determinar por una simple regla de tres el rea foliar de cada hoja y el total de la planta. Se llevar acabo de 10 lecturas completas en diferentes etapas de crecimiento de laplanta,segraficaryseinterpretarlosresultados. BIBLIOGRAFIA Fernndez, H.y E. Arios. 1989. Estimacin del rea Foliar en Plantas de Cultivo. Porte 1. AgrotecnicadeCu.15148.deResenss,SuelosyAgroqumica.Lahabana.Cuba.

Harl.P.H.1965.Ainthegridlosestimatingcreaofgrassleaves.AgronJ.57(e):634.

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PRACTICANo.20 TITULO:ESTRUCTURASDEABSORCINDEAGUAYNUTRIENTES
INTRODUCCIN Cuando regamos una planta, el movimiento del agua va del suelo a la raz que la absorbe principalmente por los pelos radicales, de la raz pasa al tallo conducindola a las hojas y portranspiracinllegaalaatmsfera. Para que el agua y nutrientes lleguen a los vasos del xilema y que ascienda el agua, se tienedosvasorutas:apoplastoysimplasto OBJETIVO Distinguirlasdosvasdeabsorcindeaguaynutrientes:apoplastoysimplasto. Identificarlosvasosascendentesconductoresdelxilemaylosdescendentesdelfloema MATERIAL Microscopio,cortestransversalesdetallodejitomate. PROCEDIMIENTO Se explicara la importancia de la absorcin de agua y nutrientes, as como las vas de absorcin en forma esquemtica, y a partir de preparaciones previamente elaboradas, se observaranlostejidosconductores BIBLIOGRAFIA Kramer, P.J. 1974. Relaciones Hdricas de Suelos y Plantas. EDUTEX. Mxico. Salisbury, F.B.,yC.Ross.1994.FisiologaVegetal.Gpo.Edit.Iberoamrica,Mxico. Kramer. P.J. 1974. Relaciones Hdricas de suelos y Plantas (versin en espaol de edicin de1969).L.Tejada(trad.)Edutex.Mxico,D.F.

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PRACTICANo.21 TITULO:VELOCIDADDELFLUJODEAGUAENELSISTEMAVASCULAR
INTRODUCCIN La continua prdida de agua de las hojas por transpiracin, se debe principalmente al incremento de temperatura de la atmsfera y al dficit de presin de vapor que existe en staenrelacinconlaplanta. Esta prdida de agua a travs de los tejidos genera una diferencia de potencial de agua (A) entre la hoja y la raz, y provoca un flujo de agua a travs de la planta. La velocidad de este flujo vara considerablemente dependiendo de la especie y, en general, es directamente proporcional al gradiente de (A 1) entre el suelo y las hojas e inversamenteproporcionalalasumaderesistenciaseneltrayectodelagua. OBJETIVO Determinar la velocidad a que el agua avanza en el sistema vascular de diferentes especies. MATERIAL Diferentes plantas, charola de plstico, navaja, regla, colorantes (rojo congo, azul de metileno,etctera). PROCEDIMIENTO Para demostrar que el agua avanza a diferente velocidad en el sistema vascular de las diferentes especies, conviene utilizar plantas altas a las que se les haya quitado las hojas inferiores. Prepareunasolucinderojocongoenagua(ocualquierotrocoloranteaninico).Coloque lasplantasenunacharolaquecontengalasolucincolorida,Corteeltallobajolasolucin (connavaja)ymantngalosumergidodurantealgntiempo(25minutos).Ahora,squelo y mantngalo en su posicin natural (perpendicular al piso) y registre el tiempo. Si la velocidad de transpiracin es alta, el colorante penetrar en los haces vasculares y avanzar ms rpidamente que en las plantas donde la velocidad de transpiracin sea baja. Transcurridos aproximadamente 30 minutos, corte el tallo nuevamente en una regin cerca de las hojas. De este punto empiece a hacer cortes delgados, con navaja y obsrvelos en el microscopio. Registre la distancia que avanz el colorante desde el sitio en donde hizo el corte original y multiplquelo por el tiempo en que se mantuvo en posicinperpendicular.Assabraproximadamentelavelocidaddelflujodeagua. Hagalomismoconcadaespecie.

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Figura5.Sistemaideadoparademostrarelflujodelaguaporelxilema

BIBLIOGRAFIA Montes Meneses, J. 1969. Correlacin de la longevidad de las semillas de maz y frjol con laspruebasdetetrazolioygerminacin.Tesis,Fitotecnia,UACH.

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PRACTICANo.22 TITULO: INFLUENCIA DE LA HUMEDAD ATMOSFRICA SOBRE LA ABSORCINDEAGUAPORSEMILLASALMACENADAS.

OBJETIVO Comprobarquelassemillasabsorbenaguadelmedioenqueestnalmacenadas. MATERIAL Semillasdesorgo,trigo,etc. Acidosulfricoconcentrado,densidad1.84y95%deconcentracin. Cincotubosdeensayodeunapulgadadedimetroy80cc. Taponesdecauchoocorchoopapeldealuminio. Malladealambretipoanjeo Gradilla Probetagraduadade100cc. Balanza Hornodesecado Bandasdecaucho PROCEDIMIENTO Aplicando sus conocimientos del laboratorio de qumica y con mucho cuidado prepare 20cc de cada una de las soluciones de cido sulfrico siguientes colocndolas en los respectivostubosdeensayomarcados.Useaguadelallavecomosolvente.

Tubol.H2S04al80% Tubo2.H2S04al60% Tubo3.H2S04al40% Tubo4.H2S04al20% Eneltubo5coloqueaguanicamente.

Pese 5 grupos cada uno de 3 gramos de semillas de sorgo o trigo y colquelas dentro de cada tubo con ayuda de pedazos de malla de alambre detal manera que no queden las semillasencontactoconlasolucin. Tape bien los tubos y deje el experimento una semana bajo condiciones del laboratorio.
NOTA:EncadatuboseproducirunahumedadrelativadeacuerdoalacantidaddeH2S04quecontenga. Tubos 1 2 3 4 5 Humedad PesoinicialPesoluegode GananciaoPrdida 8dasg deagua(g) Relativa% (g) 10 17.0 76.0. 90.0 100.0 Pesosecoa 100Cg PorcentajeAguaen Baseapesoseco

Cuadro8.Influenciadelahumedadatmosfricasobrelaabsorcindeaguaporsemillasalmacenadas.

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Expliquelarazndelosresultados BIBLIOGRAFIA Pierre.W.H.,Kirkham.D.,Pesek.J.y.Shaw,.R.(Edo.)1996.PlantEnviromentandEfficient WaltUse.4a.Reimpresin(1961).

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PRACTICANo.23 TITULO: MECANISMOS DE ABSORCION Y TRANSPORTE DE AGUA EN LAS PLANTAS


INTRODUCCIN. Las plantas llevan a cabo la absorcin y transporte de agua a travs de dos mecanismos, en el primero de ellos la raz se comporta como un osmmetro debido a la acumulacin de sales minerales en el estele de la raz, lo que provoca que haya, cuando los niveles de humedad del suelo lo permiten un fenmeno de osmosis. En el segundo mecanismo de absorcin de agua se tiene que la transpiracin en las hojas provoca una tensin en la columnadeaguadelxilema,tensinquesetransmitealolargodeltalloylarazyquejala elaguadelsuelo,dndoseenformasimultneaunaabsorcinyeltransportedelagua

Figura6.AscensodeaguayTranspiracin

Mecanismosdeabsorcinytransportedeaguaenlasplantas.Alarazsecomportacomo unosmmetro;B,larazyeltallopresentanunacolumnadeaguabajotensin. En el caso de la absorcin y transporte de agua por osmosis sta debe pasar por membranascelulares,porloquecualquierfactorqueafectelaestabilidaddeestosafecta elprocesodeabsorcin.Porotrolado,enelcasodelaabsorcinytransporteportensin, unodelosrequisitosesquehayatranspiracin(SalisburyyRoss.1994). OBJETIVO 1)Demostrarlapresinradicalenlasracesdelasplantas. 2)Demostrarcmosellevaacabolaabsorcindeaguaporlatranspiracin. 3)Demostrarculessonlostejidosresponsablesdeltransportedelagua. MATERIAL 3 Plantasdegirasol,jitomatede2mesesounaespecieleosa. 3 Mangueradeltex,trozosde5cm. 3 Tubodevidriode60100cm. Navajadeafeitar
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Solucindeazuldemetilenoal.0.1% SolucindeNaCIal10% Ligas 4Ramasdetrueno Navajasderasurar Vaselina 4Tubosdeensaye Palitosdemaderaparaaplicarvaselina PROCEDIMIENTO Presinderaz.Seleproporcionarntresplantasdejitomate,girasolounaleosa.Riegue abundantementecadaunadelasiguienteforma: a)Aguadelallave.b)Solucin10%deNaCI Corte el tallo a tres cm del suelo y elimnelo. Coloque sobre cada mun un trozo de manguera de ltex del dimetro del tallo y amrrelo. Agregue unas gotas de azul de metileno y conecte despus un tubo de vidrio en el otro extremo de la manguera, amarrndolobien.

Figura7.Distanciarecorridaporlasolucineneltubocapilar

Para mantener el tubo capilar en posicin vertical, sujtelo a un palito de madera enterradoenelsuelodelamismamacetaoaunsoporteuniversal.Cada15minutosmida ladistanciarecorridaporlasolucineneltubocapilarhastacompletar60min. Vuelva a medir a las 2 y 3 horas despus de efectuado el experimento (Fernndez y Johnston, 1986). Anote las distancias recorridas por la solucin en el tubo capilar en el siguientecuadro.
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Tiempo
15 30 45 60 120 180

Distancia

Presin

Cuadro9.Distanciarecorridaporlasolucineneltubocapilar. Calcule y anote en la tabla anterior en cada Intervalo la presin que se est desarrollando tomandoencuentaqueacada1029.5cm(aprox.)correspondeunaatmsfera. B)Tensinportranspiracinytejidosconductores. Tome cuatro ramas de trueno que se hayan conservado en agua. Crteles un poco del tallo y vuelva a colocarlas en el agua. A dos de las ramas elimneles 3 cm de corteza a partirdelazonadelabase. Sumerjalasramasentubosdeensayoconaguaconformealossiguientestratamientos: a)Ramatestigo,sinvaselina. b)Ramacubiertaconunabolsadeplstico.Tallosinvaselina. c)Ramaconvaselinaenlacorteza. d)Ramaconvaselinaenlamadera. Midaelconsumodeaguaatravsdelaalturadeestaeneltubodeensayo. Comparelostratamientos. BIBLIOGRAFA. Fernndez. G. y M: Johnston. 1986. Fisiologa Vegetal Experimental. Inst. Interamericano deCooperacinparalaAgricultura(IICA),SanJos,CostaRica

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PRACTICANo.24 TITULO:ACTIVIDADOSMTICADELASACAROSAYELALMIDN
OBJETIVO Comprobar la actividad osmtica de la sacarosa (un cristaloide) en comparacin con el almidn(uncoloide). MATERIAL Almidndeyuca Sacarosa(azcarcomn) Doszanahoriasgrandes Dosbeakersde100mlorecipientessimilaresCuchillo Esptula. PROCEDIMIENTO Por el extremo ms grueso de las zanahorias haga un hueco cnico de 3 a 4 cm de profundidad en el corazn de cada una de ellas, dejando paredes delgadas (aproximadamente 0.5 cm de espesor) pero cuidando de que no sean perforadas por el cuchillo. Lleneelhuecodeunazanahoriaconazcaryeldelaotraconalmidnyluegocolquelas verticalmenteenvasosobeakers.Anotaloscambiosquesufrenlaszanahorias,elazcary elalmidn. Tiempo Zanahoriaconsacarosa Zanahoriaconalmidn
2horas 1da 3das

Cuadro10.Actividadosmticadelasacarosayelalmidn Presenteunadiscusindelporquedelosresultados. BIBLIOGRAFIA SARH, Subsecretara de Agricultura y Operacin, 1917. Fertilizacin en funcin del anlisis del suelo (por el mtodo de Morgan). Servicio de Orientacin Tcnica al usuario, hoja de Divulgacin.No.21,Mxico. Salisbury,F.B.yC.W.Ross.1979.PlantPhyslology.2a.Ed.Wadsworth,Salmont,California.

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PRACTICANo.25 TITULO:REDISTRIBUCINDEAGUAENELINTERIORDELAPLANTA
OBJETIVO Demostrar que el agua se mueve de sitios de almacenamiento a las hojas cuando las condicionesasloexigen. MATERIAL 1ramadenaranjaconfrutos. 1ramadenaranjasinfrutos 1calibradortipovernier PROCEDIMIENTO Deje en las dos ramas aproximadamente el mismo nmero de hojas y colquelas en un lugardellaboratorioparaquesemarchiten. Tomeeldimetrodelosfrutos. Observecualdelasdosramassemarchitprimero Durante los siguientes das vuelva a tomar el dimetro de los frutos para comprobar si hubocambios.
Dimetro Inicial2o.Da4o.Da8o.Da

Cuadro11.Redistribucindeaguaenelinteriordelaplanta BIBLIOGRAFIA Wallace,T.1961.Thediagnosisofmineraldeficienciesinplantbyvisualsymptoms,acolor atlas.HerMajesty'sStationaryOffice,London.

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PRACTICANo.26 TITULO:ELASCENSODELAGUAENLASPLANTAS
INTRODUCCIN Desdequeseiniciaelprocesodegerminacindelassemillas,seestableceuncontinuode agua entre el suelo, el sistema capilar de las plantas (tejido vascular) y la atmsfera. Este continuo es dinmico y sigue un patrn parecido al de "fuente y demanda", en donde el sueloeslafuenteprincipalylaatmsfera,lademandadeagua. E movimiento de agua a travs de estos tres sistemas (suelo, plantaatmsfera), obedece alosplanteamientosdelasegunda leydelatermodinmica,lacualestablecequeelagua siempre sedesplazarhacia abajo de las "colinas", es decir, de una regin en donde tiene una gran energa potencial a otra regin de menor energa potencial, provocando una disminucin de energa potencial. Por tanto, la energa potencial del agua en el suelo y alrededordelasraces,esmayorquelaenergapotencialenlashojasyenelaire. Para evitar hablar de energa potencial, los fisilogos vegetales hacen referencia al concepto de "potencial de agua" expresado con la letra griega psi (). De tal manera que ahora el flujo de agua se llevar a cabo hacia abajo de un gradiente de potencial de agua. Es importante aclarar que un gradiente de potencial de agua existe siempre y cuando el potencial de agua en un punto es diferente del potencial de agua de otro punto. El potencial de agua es un concepto termodinmico relacionado al potencial qumico del agua,asuvez,sterelacionadoalaenergalibredelagua. Las diferencias de potencial de agua (A) determinan el movimiento del agua en el sentido: sueloplantaatmsfera, aunado a las fuerzas de cohesin de las molculas de agua,lascualespuedensoportarunafuerzadetensinhastade350bariasprovocadapor la continua evaporacin del agua en las hojas y permiten que las columnas de agua en el sistemavascularnoserompan. OBJETIVO Demostrar que el ascenso de agua en las plantas se puede explicar en la misma manera queelmovimientodeaguaenunsistemafsico. MATERIAL Soporteuniversal Probeta Manguera capilar de 0.1 mm de dimetro, copa porosa (sta puede ser de barro o parecidaalasqueseusanenlaspeceras). PROCEDIMIENTO Arme su dispositivo, pegue la copa porosa a la manguera capilar del largo que desee. Compruebe que forma un continuo, sumergiendo la parte libre de la manguera en agua y succionandoporlacopaporosa. Despus,coloquelapartelibredentrodelaprobetagraduadaylapartedelacopaporosa sostngalatanaltocomoseaposibleconlaspinzasdelsoporte.Llenelaprobetaconagua, lacolumnadelamangueraylacopaporosaporsuccin.Unavezlogradoesto,marqueel
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niveldelaguaenlaprobetaytomelecturasdelaprdidadeaguaendiferentesintervalos (por ejemplo, cada dos o tres horas). Si desea, cree condiciones extremas para favorecer el desprendimiento ms rpido de molculas de agua de la copa porosa, sea mediante un ventilador o incrementando la temperatura del lugar. Anote la velocidad con que el agua es absorbida y desprendida. Fije condiciones extremas con el fin de saber si es posible romperlacolumnadeagua. Elabore grficos con datos que muestren la prdida de agua por la copa porosa, debido a losdiferentestratamientosquehayaestablecido.

Fig8.Dispositivoparademostrarelascensodelaguaenlasplantas. BIBLIOGRAFIA Rovalo, Merino, M. y Rojas Garcidueas, M. 197. Experimentos de Laboratorio de FisiologaVegetal.ITESM,Monterrey,Mxico. Richter,G.1972.FisiologadelMetabolismodelasPlantas.TraduccindeL.Miller,IICAde laOEA.CECSA,Mxico,DF.
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PRACTICANo.27 TITULO:MTODOSPARAMEDIRLATRANSPIRACIN
INTRODUCCIN La transpiracin fue uno de los primeros fenmenos fisiolgicos descritos en plantas. Se puede definir como la prdida de agua en forma de vapor que ocurre en las plantas; depende del suministro de energa y del gradiente de presin entre la superficie evaporanteyelaire. Se puede considerar a la transpiracin como el proceso dominante en las relaciones hdricas de las plantas, debido a que produce el gradiente de energa, principal causa del movimiento de agua dentro y a travs de la planta y, por lo tanto, controla la tasa de absorcin y el ascenso del agua. La tasa de transpiracin depende del suministro de energa para evaporar agua, el gradiente en concentracin o presin de vapor y la magnituddelaresistenciaalolargodeltejidovasculardelaplanta. La transpiracin o evaporacin de agua se puede llevar a cabo a travs de lenticelas, estomas y de la cutcula de las hojas. Sin embargo, la mayor parte del vapor de agua escapaatravsdelosestomasdelashojas. Se emplean diferentes mtodos para determinar la transpiracin pero, en general, todos ellos estiman el cambio de peso o la prdida de vapor de agua de una planta o de alguna partedeella. OBJETIVO Estimar la transpiracin en diferentes especies de plantas mediante cinco tcnicas diferentes. MATERIAL Plantasdejitomatecalabaza,tabacouotrotipo Balanza,campanadevidrio Manguera Clorurodecalcioencartuchos Bombapequea Clorurodecobaltootiosanatodecobalto Portaobjetos,tirasdepapelengomado Estufa Pipetagraduadade2ml SoporteconpinzasytirasdepapelfiltroWhatmannm.1. PROCEDIMIENTO Prdidaenpesodeunaramadurantedeterminadoperiodo Corte dos ramas semejantes de cualquiera de las plantas sealadas. Selle con parafilm u otro material la parte en donde se hizo el corte. Pese inmediatamente y anote la hora. Coloque la rama en las condiciones que desee de humedad relativa, temperatura, luz, etctera. Cada cinco minutos pese hasta completar 30 minutos. Grafique tratamientos
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contrastantes utilizando prdida de peso cm2 de hoja contra tiempo. Como ejemplo de condiciones contrastantes se sugieren las siguientes: con luz, con alta o baja humedad relativa,altaobajatemperatura,etctera. Transpiracinporunaplantacrecidaenmaceta Se requieren plantas de jitomate, tabaco u otro tipo, crecidas en macetas. Riguelas bien. Cubra con un plstico, papel aluminio u otro tipo de material, la parte de suelo que est en contacto con el aire y deje libre nicamente el tallo. Despus, pese la maceta con planta, anote este peso inicial. Coloque la planta en un lugar soleado y psela cada hora, hasta que se oculte el sol. Grafique entonces la cantidad de agua que pierde cada hora contralahoradelda. Si lo considera conveniente, compare dos macetas, cada una en condiciones contrastantes. Clorurodecalciocomocolectordeaguaquesetranspira. Coloqueunaovariasplantasdentrodeunacampanaypermitaqueunacorrientedeaire fluyaimpulsadaporunabombapequea.Alsalirelairedelacampanallevarconsigoaire hmedo producto de la transpiracin. Este aire, al pasar por los cartuchos de cloruro de calcio se secar. Como se anot el peso inicial de los cartuchos, la diferencia con el peso inicial despus de una hora, dar idea de la cantidad de agua transpirada. El experimento puederealizarsetanrpidocomosedeseeyexpresarsecomomgH2/cm2dereafoliar/h. Sepuedeponerunatrampadehumedadantesdequeelairelleguealacampana.

Figura9.Sistemaparamedirlacantidaddeaguaquesetranspira. Seutilizaclorurodecalcio. Clorurodecobaltocomoindicadordeaguatranspirada Este mtodo se basa en la propiedad del CoCI2 para cambiar de azul a rosa reversiblemente de acuerdo con la humedad existente. Esta tcnica semicuantitativa indica el grado de apertura estomtica, si se acepta que por ah se pierde la mayor cantidad de agua. Henderson cre una gama de tonos que van entre el azul y el rosa, usando azul de metileno y eosina. Use tiras de papel Whatman nm. 1 que se tian con CoCI2 durante breve tiempo y se almacenan en un lugar fro y seco. Para usarlas,
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colquelas apoyadas con pana objetos y stos con papel engomado. De acuerdo con la transpiracin, los pedazos de papel cambian de color de azul, cuando estn secos, a rosa, cuandosehumedecen;anoteeltiempoquetardanencambiardecolor. Papeldeclorurodecobalto Portaobjetos Figura10.Medicindelatranspiracinempleandopapeldeclorurodecobalto. Medicindelaguatranspiradaconunpormetro. Utilice plantas trgidas. Haga un corte bajo el agua en la base del tallo o rama e insrtela inmediatamenteenlamanguera(figura11).Procurequequedeunaburbujadeaireoque el agua de la pipeta se estabilice en una porcin legible. Seale su momento cero con un cronmetro y anote a intervalos la cantidad de agua que consume. Finalmente, mida el reafoliarytraceunagrficademl.deH2Ocm2dehoja,contratiempo.

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Figura11.Pormetrosencilloparamedirlatranspiracin. BIBLIOGRAFIA Ting.I.P.1982.PlantPhyslology.AdisonWesleyPublishing.Co.U.S.A. Vaver,R.J.1980.Reguladoresdelcrecimientodelasplantasenlaagricultura. Trillas,Mxico.


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PRACTICANo.28 TITULO:TRANSPIRACINYFOTOSNTESIS:IRGAYELSENSORDEHUMEDAD
INTRODUCCIN Se presenta un dilema a nivel estomtico debido al sistema de cierre y apertura. Si los estomassemantienenabiertos,sepierdeagua,perohaymsdisponibilidaddebixidode carbono(CO2).Siporelcontrariosecierran,laprdidadeaguaesmnima,perolafijacin de CO2 prcticamente se anula. Los estomas como sensores ideales de niveles de CO2 se abren o cierran, esto depende de la disponibilidad de este gas, como ya se indic. Tambin los niveles de agua endgenos pueden afectar el grado de apertura estomtica. Surgenuevamenteeldilema:prdidadeaguamenosfijacinCO2oahorrodeaguaiguala pobreza de fijacin de CO2. Existen aparatos capaces de medir el nivel de CO2 fijado, se conocenconelnombredeIRGA(analizadordegasesenelespectroinfrarrojo). PROCEDIMIENTO El principio bsico de la construccin de estos aparatos es el siguiente. Las molculas de gasqueestnconstituidaspordiferentestomos(heteroatmicas),absorbenradiacinen la regin del espectro infrarrojo y cada gas tiene un espectro de absorcin caracterstico. Se ha utilizado el IRGA para identificar y cuantificar una amplia gama de molculas heteroatmicas como: CO2, CO, S02, H2 O (vapor de agua) e hidrocarburos gaseosos. La bandademayorabsorcindelCO2esten=4.25mconunpicosecundarioen=2.66, 2.77Y14.99J.mUsualmente,lanicamolculaheteroatmicapresenteenelaireconun espectro de absorcin que se sobrepone con el de CO2 es el del vapor de agua (H2O); ambas molculas absorben radiacin infrarroja en la regin de 2.7m, por tal motivo, se necesita hacer algunas modificaciones, como ya se mencion, para poder diferenciar las dos molculas. La tcnica para estimar la tasa de fijacin de CO2 prdida de agua consiste en enclaustrar la planta o parte de ella, en una cmara que permita controlar el flujo de gas que entre y/o salga. Dicha cmara debe estar hecha de tal manera que tambin permita mantener una temperatura constante y el paso de luz lo ms cercana al espectronatural. Debe introducirse por las vlvulas de intercambio gaseoso un flujo constante del cual se conoce el nivel de humedad y de CO2 al microambiente de la planta. La calidad de flujo la alterarnicamenteeltejidovegetal,quealserllevadofueradelacmara(flujodesalida IFsl), se estimar el grado de cambio con respecto al flujo de entrada (Fe), detectados en elIRGA. Demaneraque: Flujodeentrada(Fe)=CO2yhumedadconocidos Flujodesalida(Fs)=CO2yhumedadconocidos FsFe=a)DiferenciaenlosnivelesdeCO2 =b)Diferenciaenlosnivelesdehumedadrelativa Si los niveles de CO2 en el Fs son mayores que en el Fe, entonces se estar en posibilidad dedecirquehaydesprendimientodeCO2poreltejido(porejemplo,enlaobscuridad).En caso contrario, se podr decir cunto CO2 se est fijando por el tejido vegetal (por ejemplo,CO2cm2delminafoliar).
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De la misma manera, se puede estimar la humedad que se est perdiendo por transpiracin. Lospasosquesesiguenparadeterminarlatranspiracinsonlossiguientes: 1.Humedaddesalidahumedaddeentrada=D 2.DXvelocidaddeflujo=E 3.EX60(min.)=F(mgH2O/h) 4.F=reafoliar=G(mgH2Odm2/h) 5.G=360000=H(mgH2Ocm2/seg.)=velocidaddetranspiracin BIBLIOGRAFIA Vaver,R.J.1980.Reguladoresdelcrecimientodelasplantasenlaagricultura.

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PRACTICANo.29 TITULO:FACTORESQUEAFECTANLAVELOCIDADDETRANSPIRACION

INTRODUCCIN. La transpiracin est controlada por tres factores: a) el gradiente de presin de vapor entre la hoja y la atmsfera, b) la resistencia que ofrezca la hoja y c) la resistencia que ofrezca el aire. El gradiente de presin de vapor que existeentre la hoja y la atmsfera es muyfuerteydependemsquenadadelatemperaturadelmedio,queasuvezcontrolala humedad relativa. Es por esto que cuando aumenta la temperatura se presenta tambin un Incremento de la transpiracin: La resistencia de la hoja tiene varios componentes, siendo dos, de los principales la cutcula y los estomas. De estas dos, la resistencia de los estomasesvariable,yaquepuedenocurriraperturayelcierredestos(Kramer.1974).El funcionamiento de los estomas est controlado bsicamente por los niveles de hidratacin de sus tejidos y por los niveles de CO2. Otros factores que influyen en el comportamiento de los estomas, como la luz, temperatura y viento lo hacen indirectamenteatravsdelosdosmencionadosanteriormente(SalisburyyRoss,1978).EI ltimo factor es la resistencia que ofrezca el aire, determinada .por la denominada capa limtrofe. La capa limtrofe es una capa de aire que rodea a la hoja y que tiene propiedades diferentes las que presenta el esto, de la atmsfera. Principalmente tiene mayorcontenidodehumedadymenorconcentracindeCO2.Aslapresenciadeunacapa limtrofe bien definida puede Impedir en ciertogrado la transpiracin. Si sta desaparece, lo que ocurre cuando hay viento, aumenta la transpiracin (Kramer. 1974). La mayor cantidaddeaguasepierdeatravsdelosestomas. Como podemos ver la influencia de factores como la luz, temperatura o el viento sobre la transpiracinocurreavariosniveles.

OBJETIVO. Determinar la velocidad de transpiracin en varias condiciones del medio ambiente (Temperatura,vientoyluz).

MATERIAL 4Potmetros 1Calefactor 3Termmetros 1Ventilador 1Lmpara Ramasdeunaplanta(trueno,etc.)

Para llevar a cabo la medicin de la transpiracin se utilizar un potmetro. Note que en este aparato se mide el agua absorbida a travs del tallo pero, como sabemos la cantidad de agua transpirada corresponde al agua absorbida. El potmetro que se utilizar aqu es eldiseadoporCocklin(1973).(Figura11).

Sigalosincisosacontinuacin: a)MonteeldispositivodelaFigura11tantasvecescomocondicionesdelmedioquevaya aprobar.

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b) Verifique en cunto tiempo la rama consume 0.2, 0.4 Y 0.6 ml de agua para cada condicin del medio ambiente en los casos que se requiera, mida la temperatura (luz, medio ambiente, calefactor). Repita 2 3 veces el ensayo y obtenga un promedio de tiemporequeridoparaconsumir0.2mldeagua. Con los datos de volumen de agua, tiempo y rea foliar calcule, para cada tratamiento la cantidad de agua perdida por unidad de superficie foliar por unidad de tiempo. Para la determinacin del rea foliar de las ramas utilice un planmetro o mida el largo (L) y el ancho(A)decadahojaycalculeelrea(A)conlasiguienteecuacinA=LxAx0.68llene consusdatoselsiguientecuadro.
TRATAMIENTO Testigo Calefactor Luz Ventilador

mlDEAGUA

TIEMPO

AREAFOLIAR

TRANSPIRACIONml AGUA/cm2/t

Cuadro12.Transpiracinenvariascondicionesdelmedio

Discutasusresultadosdeacuerdosilainfluenciaquepresentecadafactor. Actividadparalela Como actividad paralela a esta practica pueden obtener impresiones de los estomas de la planta que se est trabajando. Estas impresiones pueden lograrse usando barniz transparente de uas, colodin, etc. En este caso de se recomienda el mtodo de E.M. Engleman(nopublicado)queusaelpegamentodenominadoKolaloka.Secolocaunagota del pegamento en un portaobjetos limpio, se oprime ste contra la superficie de la hoja y se deja secar durante 5 minutos. Desprenda el portaobjetos. Observe al microscopio. Puedenhacersepreparacionesdelhazydelenvsycompararlas. BIBLIOGRAFA. Cocklin,R.E.1973.Anunbreekeablepotometer.EnC.J.Clegg(Ed.)Plant Physlology.ASELab.Books.London.

Kramer,P.J.1974.RelacionesHdricasdeSuelosyPlantas.EDUTEX.Mxico.

Salisbury,F.B.,yC.Ross.1994.FisiologaVegetal.Gpo.Edit.Iberoamrica,Mxico.
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PRACTICANo.30 TITULO:RESPIRACION;MEDICIONDELARESPIRACIONENSEMILLAS
INTRODUCCION La respiracin es el proceso de oxidacin de diversos sustratos (almidn, sacarosa u otros azcares, grasas, cidos orgnicos y, en ciertas condiciones, Incluso protenas, pueden servir como sustratos respiratorios) para producir CO2, H2O y liberacin de energa. Parte de esta energa se pierde en forma de calor y parte se almacena en forma de ATP, compuestoqueseutilizaendiversosprocesos,comoelcrecimientodelaplanta(Salisbury yRoss,1994). Cuando las semillas se someten al proceso de hidratacin y germinacin presentan por lo regular,encuantoahidratacinyrespiracin,unpatrnsemejantealdelaFigura1(Ting, 1982). Estecomportamientosehadivididoentresfasesyson: ProcesofsicodehidratacinImbibicin. Estabilizacindelpeso,iniciodemetabolismocelular,aumentodelarespiracin. Iniciodelagerminacin,crecimientoderadiculasereiniciaabsorcindeagua. OBJETIVO. Determinar la velocidad de respiracin de las semillas en diferentes tiempos de imbibicin. MATERIAL Semillasdechcharo,frjol,etc.2030gcon0,24,36Y48horasderemojo. Aparatoderespiracin(verFigura12) Hidrxidodebario0.025M HCL0.1N Indicadordefenoftalena Bombadevaco Buretade50ml Soporteuniversalypinzasparabureta Bombadevaco MatrazKitasato2 Tapndehule,perforado2 PROCEDIMIENTO A travs de la bomba de vaci (Figura 12) arrastre el aire del fondo del matraz durante 1.52 horas. Agregue 50 ml de Ba(OH) a 0.025 M en el otro matraz. Agregue unas 3 4 gotas de fenoftalena. El CO2 de la respiracin se combina con el Ba(OH)2 en la siguiente relacin: Ba(OH)2+CO2BaCO3+H2O
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Despus de transcurrido el tiempo pertinente titule con NaOH 0.1 N la cantidad de Ba(OH)2quesobr.Monteundispositivoigual,perosinsemillas;estesereltestigo

Figura12.Dispositivoparamedirlarespiracinporarrastredegases CalculeelCO2desprendidoatravsdelasiguientefrmula:
Respiracin=(mgCO2min_1g1)(mlHClcontrolmlHCsemilla)x2(Tiempoxpesodesemillas)1

Comparelosresultadosparacadatiempoderemojo. BIBLIOGRAFA. Machies, L. and J. G. Torrey. 1956. Plants in Action. A Laboratory Manual of Plant Physiology.W'.H.FreemanandCompany.SanFrancisco.282p.

Roberts, J. Y D.G. Whitehouse. 1976. Practical Plant Physiology. Laboratory Manuals. LongnonGroup,GreatBritain.155p.

Ting.I.P.1982.PlantPhyslology.AdisonWesleyPublishing.Co.U.S.A.

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PRACTICANo.31 TITULO: RESPIRACION LA PRUEBA DEL TETRAZOLIO PARA DETECTAR LA ACTIVIDADDELASDESHIDROGENASASYVIABILIDADDELASSEMILLAS.


INTRODUCCION Se puede definir como germinacin en una semilla al inicio del crecimiento activo del embrinqueresultaenlarupturadelatestayemergenciadelanuevaplanta. La viabilidad se puede definir como el grado en el cual una semilla est viva, metablicamenteactivayposeelasenzimascapacesdecatalizarlasreaccionesnecesarias paralagerminacinycrecimientodeIaplntula. Existen varias pruebas para determinar la viabilidad de las semillas, dentro de stas la prueba del tetrazolio es ampliamente utilizada y es un medio preciso de estimar la viabilidad de las semillas. Este mtodo se desarroll en los 1940 en Alemania, por el profesorGeorgeLakonyyactualmenteesunapruebaderutinaenmuchoslaboratoriosde semillas.Lapruebadeltetrazoliodistingueentretejidosviablesymuertosdelembrinen base a velocidades relativas de respiracin, cuando las semillas estn hidratadas. Aunque son varias las enzimas que se activan durante la respiracin, la prueba utiliza la actividad de las deshidrogenasas como un ndice de la actividad respiratoria y viabilidad de la semilla. Las deshidrogenasas actan en reacciones de xidoreduccin permitiendo la liberacin de iones hidrgeno que pueden reaccionar con la solucin oxidada incolora de sal de tetrazolio la cual cambia a formazn (color rojo) cuando se reduce por los iones de hidrgeno. La viabilidad de las semillas se interpreta de acuerdo al patrn topogrfico de tincin del embrineintensidaddelacoloracin. OBJETIVO. Obtenerelporcentajedeviabilidadygerminacindelaespecieasignada. MATERIAL 3Cajaspetri Solucindeclorurodetetrazolioal0.1% Semillasdeespeciesdeclimatempladoydeclimaclido 1Frascodevidriocontapa 1Pinzadediseccinoagujadediseccin. 1Microscopioestereoscpico. 1.Utilice3gruposde50semillas.Enelcasodesemillasgrandesutilicesolamente25. PROCEDIMIENTO 2.Primergrupodesemillas. 2.1. Al primer grupo djelo en Imbibicin durante 24 hrs. Despus de transcurrido este tiempo corte longitudinalmente la semilla abarcando el eje del embrin; deseche una mitadylaotracolquelaenunacajadepetriquecontenga3mIdesolucindeclorurode tetrazolio.Elejedelembrindebeestarencontactoconlasolucin.
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2.2.Despusdeunahoraconunaagujadediseccinoconunapinzavolteelamitaddela semillayobservesisehacoloreado.Cuenteelnmerodesemillascoloreadas.Obtengael %deviabilidaddelasiguientemanera: %deviabilidad=No.desemillascoloreadasx100x(No.totaldesemillas)1 3.Segundogrupodesemillas. 3.1. Desinfecte sus semillas. En un frasco de vidrio con una solucin de hipoclorito de calcio al 3% deposite sus semillas, cierre el frasco agite y desheche la solucin del hipocloritoylaveconaguaesterilizada23veces. 3.2. En una caja de petri esterilizada la cual tendr algodn tendr 5 ml de agua tambin esterilizada,coloquesussemillasdistribuyndolasadecuadamente. 3.3.Etiquetesucajadepetriconsugrupo,equipoyespecialidad.Colquelaenunaestufa a2Cunloteyotrolotedjeloatemperaturaambiente. 3.4. Observe su material diariamente y anote el nmero de semillas germinadas por da. Aada agua segn sea necesario. Con sus resultados elabore una grfica (tiempo vs. nmerodesemillasgerminadas). 3.5. Una vez teniendo la suma de las semillas germinadas. Obtenga el % de germinacin delasiguientemanera: %germinacin=No.desemillasgerminadasx100(No.totaldesemillas)1 Comparelosvaloresde%deviabilidadygerminacin BIBLIOGRAFA Ross, C. W. 1974. Laboratory Physlology Laboratory Manual. Wadsworth. Pb. Co.Belmont, California.

Machles. L. and J. G, Torrey. 1956. Plants in Action. ALaboratory Manual of Plant.Physiology.W.H.FreemanandCompany.SanFrancisco.282p.

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PRACTICANo.32 TITULO:RESPIRACIONLAINUNDACINYLAFORMACINDE AERENQUIMAENARROZ


INTRODUCCIN. Durante el desarrollo de una planta puede haber ocasiones en que sta est sometida a perodosmsomenoslargosdeexcesodeagua,loquellevaaundesplazamientodelaire del suelo y en consecuencia a una falta de oxgeno. La falta de oxigeno produce a su vez unainhibicindelciclodeKrebsenlarespiracinyseacumulaentoncesacidopirvico,el cual se transforma mediante la formacin de acetaldehdo, en alcohol, finalmente si el alcohol se acumula en exceso, pueden alcanzar entonces niveles txicos que aadan a la raz(Medina,1977). Sabemossinembargoquelasplantasterrestrespuedendiferenciarseporsutoleranciaal., exceso de agua o inundacin. Este tipo de tolerancia puede ser de dos tipos: tolerancia morfolgicaytoleranciametablica(Medina,1977)."" Conrespectoalprimertipodetoleranciapuedemencionarsequeencasitodaslasplantas terrestreshayunflujodeO2desdelaparteareadelaplantahastalasraces,peroporlo general en las plantas tolerantes a la inundacin la conductividad de los gases desde el tallo hasta la raz es mucho mayor. Esta conductividad mayor se debe a que en el parnquimadeestasracesytallossepresentancavidadesqueformancanalespordonde circula el aire, debido a esto el tejido se describe mejor con el nombre de aernquima. Cuando una planta crece en condiciones de falta de oxgeno se ha observado que se presentan incrementos en los niveles de la enzima celulosa que comienza a destruir algunas de las clulas del parnquima para dar origen al aernquima. En consecuencia si observamos unos cortes transversales de una raz sometida a inundacin y otros de una raz con aireacin, la primera presentar espacios vacos carentes de clulas y la segunda presentarunparnquimauniformesinorificios. De esta manera la tolerancia de cultivos agronmicos y hortcolas a suelos con poco oxgeno puede depender, al menos en parte, de su habilidad para desarrollar sistemas conductoresdeaire;sehadetectadoaernquimaencebada,trigo,maz(Kawase,1979)y enpartesdegirasolytomate(KawaseyWhitmoyer,1980)yenarroz. OBJETIVO. Observar cortes transversales de las races de una planta resistente a la inundacin (con aernquima)ydeunaplantaconmenortoleranciaaesta(conparnquimauniformeenla corteza). MATERIAL Races de arroz crecido en condiciones de inundacin y de otra especie ms susceptible a esta(arrozyjitomate,porejemplo). 2Navajasderasurar. Mduladesaucootrozosdepapa 1CajadePetri
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1Agujadediseccin 2Portaobjetos 2Cubreobjetos 1Goteroconsolucindeazuldetoluidina 1Microscopioptico PROCEDIMIENTO Seleccione una porcin de raz que haya estado sometida a inundacin y otra que haya tenidoaireacin.Colquelasenmediodedostrozosdemduladesaucoodepapayhaga cortes lo ms fino posible con la navaja de rasurar. Monte los cortes con agua en los portaobjetosycubreobjetos.Observelasestructuras,diferenciandounasdeotrastiendo conelazuldetoluidina. Esquematicelasestructurasencontradas. BIBLIOGRAFIA. Medina,E.1977.IntroduccinalaEcologiaVegetal.SecretaraGeneraldela OrganizacindelosEstadosAmericanos.Washington.

Kawase, M.1979. Pole of cellulase in aerenchyma development in sunflower. Amer.J. Bot. 66(2):183190.

KawaseyWhitmoyer,R.E.1980.Aerenchymsdevelopmentinwaerologged.plant.Amer.J. Bol.67(1):1822. '.:.

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PRACTICANo.33 TITULO:TCNICADEIMPRESINDEESTOMAS
INTRODUCCIN Los estomas son poros formados por un par de clulas especializadas llamadas clulas guarda y se encuentran en la epidermis de las partes areas de la mayora de las plantas terrestres OBJETIVO Dominarlatcnicadeimpresindeestomas MATERIAL Plantasdemazyverdolaga,portaobjetosycubreobjetosconcolalocaymicroscopio. PROCEDIMIENTO En el porta objeto coloque cuatro gotas de cola loca e impresione el haz de las hojas presionando fuerte durante un minuto, posteriormente retire la hoja cuidadosamente y procedaaobservarenelmicroscopio. Mediante la impresin de estomas se puede observar como estn distribuidos y en que situacin se encuentran cerrados o abiertos. Tambin se pueden calcular el nmero promedio de estomas. En monocotiledneas se disponen en lneas paralelas y en dicotiledneasselocalizandispersos. BIBLIOGRAFIA Salisbury,F.B.yC.W.Ross.1979.PlantPhyslology.2a.Ed.Wadsworth,Salmont,California.

Ting.I.P.1982.PlantPhyslology.AdisonWesleyPublishing.Co.U.S.A.

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PRACTICANo.34 TITILO:DISEODEEXPERIMENTOSDEFISIOLOGIAVEGETAL
OBJETIVO ComprobarqueelcierredelosestomasafectalaentradadeCO2,alinteriordelashojasy sedisminuyelaintensidaddelafotosntesis. PROCEDIMIENTO Consultando manuales de laboratorio de Fisiologa Vegetal, disee un experimento para comprobarlaimportanciadelosestomasenlafotosntesis EFECTODELTIPODELUZSOBRELAFOTOSNTESIS OBJETIVO Determinar cual tipo de luz (segn su longitud de onda) es la ms utilizada en la fotosntesis. PROCEDIMIENTO Siguiendo el mismo procedimiento del ejercicio se pide disear un experimento que permitamedir como seafectala intensidad delproceso fotosinttico segn la longitud de ondadeluzquerecibalaplanta. BIBLIOGRAFIA Bidwell, R.G.S. 1979. Plant Physiology. 2a.de. Mac Millan, New York. Devlin, R.M. 1975. Fisiologa Vegetal. Ed. Omega. Barcelona, Espaa. Hall, D.O. y K.K. Rao. 1978. Fotosntesis. De.Omega.Barcelona,Espaa.

Cocklin,R.E.1973.Anunbreekeablepotometer.EnC.J.Clegg(Ed.)Plant Physlology.ASELab.Books.London.

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PRACTICANo.35 TITULO:FERTILIZACINFOLIAR
INTRODUCCIN La fertilizacin foliar es una tecnologa complementaria a la fertilizacin edfica que, permite ajustar los requerimientos nutricionales en funcin del estado del cultivo y aportar nutrientes en momentos en que los requerimientos no pueden ser cubiertos por lacapacidaddeabsorcinodebidoalimitantesambientalestalescomounPHextremoso. OBJETIVO Evalulosefectosdelafertilizacinfoliarenplantasctricas MATERIAL Aspersora,fertilizantefoliar,aguayplantasctricas PROCEDIMIENTO Modo de preparacin: en un litro de agua agregue 50grs de fertilizante foliar y aplique a lasplantasquelonecesiten(ctricos). BIBLIOGRAFIA Fernndez, H.y E. Arios. 1989. Estimacin del rea Foliar en Plantas de Cultivo. Porte 1. Agrotecnica de Cu. 15 148. de Resenss, Suelos y Agroqumica. La habana. Cuba. Harl .P.H.1965.Ainthegridlosestimatingcreaofgrassleaves.AgronJ.57(e):634. Cook,R.L.yC.E.Millar.1949.PlantNutritiondeficiencies.Agr.Exp.Sta.Specialbull355

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PRACTICANo.36 TITULO:MADURACINDEFRUTOS
INTRODUCCIN Histricamente son tres los caminos que han conducido al establecimiento del etileno como una hormona vegetal: A) las antiguas observaciones de que los frutos maduran rpidamente si se les encierra en un cuarto con humo, B)el hecho deque enel cultivo de pia y mango se inicien incendios aledaos a los cultivos a fin de que el humo inicie la floracin, C) la induccin de la cada de las hojas de los rboles a partir del gas desprendidoenlaslmparasutilizadasparalailuminacinpublica. OBJETIVO Estimarelperiododemaduracin MATERIAL Campanaybasedevidrio Grasa Pltanosverdesymaduros PROCEDIMENTO Coloque dentro de la campana los pltanos verdes y maduros por separados y selle la campana con grasa, este experimento demostrara la capacidad que tienen algunos frutos deaportarhormonasdecrecimientoomaduracinsinnecesidadderecurriraotros. BIBLIOGRAFIA Abeles,D.S.1973.EthyleneinPlantBiology.AcademicPress.NewYork.London HiII, T.A. 1977. Hormonas Reguladores del Crecimiento Vegetal. Omega, Barcelona, Espaa.

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PRACTICANo.37 TITULO:POSICINDELOSESTOMASENHOJASDEDIFERENTESAMBIENTES
INTRODUCCION El ambiente lumnico tiene un efecto profundo sobre las plantas y en especial sobre la estructura y el funcionamiento de las hojas. Su influencia puede ser observada a nivel morfolgico, anatmico o fisiolgico, sea sobre las hojas que crecen en diferentes posiciones de la copa de un mismo individuo, o entre ecotipos de una misma especie que crecenenambientesdiferentes(Boardman1977).Estascaractersticasdistintivashansido utilizadas como un criterio ms paraclasificar las especies forestalesengrupos ecolgicos detoleranciaalasombraoengruposdesucesin. OBJETIVO Determinar la posicin de los estomas en plantas hidrfitas, mesfitas y xerfitas. De tal manera que se pueda conocer como el agua ha sido un factor evolutivo importante en la ubicacindelosestomas. MATERIAL Hojasdecaf,loto(liriodeaguayhabano(neriumoleander) placasportaobjetosycubres zanahorias cuchillasnuevas platosdepetri agujasdediseccin microscopiocompuesto PROCEDIMIENTO Con ayuda de pedazos de zanahoria haga cortes bien finos de las hojas de los diferentes ambientesycolque1asenlosplatosdepetriconagua.Conlaagujadediseccincoloque los cortes ms delgados en portaobjetos agregndoles una gota de agua. Pngalos en cubreobjetosyobsrvelosalmicroscopio. Determine la posicin de los estomas en la epidermis del haz o del envs. Ubique la posicindelosestomasenelcasodequeseencuentrenencavidadesocriptas. Encadacasohagadibujosilustrativosdelestomaconlacmarasubestomtica. BIBLIOGRAFIA Arditti, J. y A. Dunn. 1969. Experimental Plant Physlology. Holt, Rinehart y Winston, New York

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PRACTICANo.38 TITULO:CMOCONSTRUIRUNPORMETRO
INTRODUCCIN Existen varias tcnicas para medir la apertura estomtica. En 1901, Buscaloni seal la tcnica de microscopia en que se utilizan rplicas de una pasta plstica que se esparce sobre las hojas. Las rplicas se pueden examinar en el laboratorio, adems de que son preparaciones permanentes. Esta tcnica es sencilla, aunque muy poco precisa. Su principal limitante es que, en muchas ocasiones, la apertura del estoma (poro) est ms alldelalcancedelapastaplstica. Existen tcnicas indirectas para estimar el grado de apertura de los estomas. Se basan en determinar la capacidad de las hojas. Estas dos son ms sensibles para detectar cambios quelasmedicionesenelmicroscopio. Bsicamente, existen dos tipos de instrumentos que miden la resistencia o conductancia de las hojas. Ambos se basan en la capacidad de los esto ms para conducir gases: pormetrosdeflujodemasasypormetrosdedifusin. Los pormetros de difusin estiman la velocidad de difusin de vapor de agua de las cavidades subestomticas hacia la atmsfera. El mtodo consiste en aislar momentneamente una porcin de la hoja y medir su tasa de transpiracin en determinado ambiente. Para ello, en la hoja se coloca un sensor que responda a los cambiosenlahumedadcausadaporlatranspiracin. Lospormetrosdeflujodemasasfuerzanelairedelaparteexternahaciaelinteriordela hoja. La resistencia de sta o bien, la tasa de flujo, es un indicador de la apertura o cierre de los estomas. Este tipo de pormetros es efectivo con hojas anfiestomticas porque cuando el aire bajo presin se aplica a una carade la hoja (parte abaxialo adaxial),el aire entra a travs del estoma, atraviesa el espacio intercelular del mesfilo, y sale de la hoja por los estomas del lado opuesto. Por tanto, el flujo depende de la resistencia de los estomasdeambosladosdelmesfilo.En1911,DarwinyPertzhicieronporvezprimeraun pormetro de flujo, prototipo de todos los pormetros, slo que la manera de medir el flujodeaireatravsdelashojassehamejoradonotablemente. OBJETIVO Construirunparmetrodeflujodemasas MATERIAL Manguera de hule, trampa de vidrio, probeta, tubo de vidrio con un dimetro 0.5 cm, papel milimtrico, soporte universal, tapones de hule, trozos de termmetro y plantas de mazdeaproximadamentemesymedio.
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PROCEDIMIENTO Monte el pormetro, la nica salida del flujo de aire a lo largo del sistema es a travs del tapn, el cual se ajusta a la hoja por medio de otro tapn horadado. Esta salida de aire estarregulada por el grado de apertura de losestomas, de tal maneraque si stosestn totalmente abiertos, todo el flujo de aire saldr a travs de ellos, pero si estn parcial o totalmente cerrados, el flujo de aire se desviar parcial o totalmente hacia el tubo de vidrioymoverlacolumnadeagua.Silosestomassevuelvenaabrir,lacolumnadeagua semoverenelsentidocontrario.

Figura13.Porometrodeflujodemasa. BIBLIOGRAFIA Ting.I.P.1982.PlantPhyslology.AdisonWesleyPublishing.Co.U.S.A.

Vaver,R.J.1980.Reguladoresdelcrecimientodelasplantasenlaagricultura. Trillas,Mxico.

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INTRODUCCIN. Los anlisis de sales minerales en el suelo y los tejidos vegetales pueden ayudar a determinar siunaplantatieneunsuministroadecuadoparasatisfacersusnecesidadesypueden,adems, evitareldesperdiciodelosmaterialesfertilizantes(Luntetal.,1965). En el caso de los anlisis semicuantitativos de Morgan se miden la cantidad de sales solubles tanto del suelo como de los tejidos vegetales; este ltimo caso es posible debido a que las plantas absorben mayor proporcin de nutrientes de los que requieren siempre y cuando stos existan en cantidades altas. Esto permite una acumulacin, (Cook y Miller, 1949). En el mtododeMorganelplangeneralesobtenerunextractodelsueloodelostejidosvegetales, transferir pequeas cantidades a una placa de vidrio o a tubos de ensaye y agregar reactivos apropiados para desarrollar un color o una turbidez, segn la prueba de que se trate (Lunt et al., 1965). Para calcular la cantidad de sales minerales se diseo una tabla de 4 colores o de 4 lineas de visibilidad (ver mas adelante) que Indican otros tantos rangos de concentracin en ppm. De este modo el color desarrollado o la turbidez de nuestro extracto puede compararse con las tablas. Es posible disear tablas que Incluyan ms o menos pasos a la escala de acuerdoalaexactitudquesedesee(Luntetal.,1965). Una de las aplicaciones del mtodo del anlisis del suelo ser el clculo de las dosis de fertilizacintalycomolohizolaSARHenunfolletopublicadoen1977(SARH,1977).Endicho folleto se utilizan solo tres valores en la escala de concentraciones de los elementos y se les denomina B, M y A (Bajo, Medio y Alto). De acuerdo a sto al analizar el suelo en los elementos N, P y K las concentraciones de los mismos pueden tener los valores bajo, medio y alto. LoimportanteyqueinteresaresaltaraquesqueenelfolletoseIncluyeunatablaqueindica, para diferentes cultivos la dosis de Kg de elemento que deben aplicarse por hectrea (Cuadro 1)paracadacondicin.
CULTIVO
FRESA FRIJOL GARBANZO

PRACTICANo.39 TITULO:DETECCIONSEMICUANTITATIVADESALESMINERALESPOREL METODODEMORGAN.

B7127

ANALISISNPK

CULTIVO
GLADIOLA


B712

ANALlSISNPK
7

M5105 A040 B4106 M084 A040 B4106 M084 A040

M5105 A000 B101210 M68 A44 B126 M1050 A 64 0 6 0 4

LINAZA MAIZ

Cuadro13.DosisdefertilizacindeacuerdoalasproporcionesdaN.PYKexistentesenelsuelo. Cadavalordebemultiplicarsepor10yalresultadoIndicaalnumerodekgdelelementoque debenagregarseporha(SARH.1977)


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Si se habla del muestreo de los tejidos es til recordar que existen cuadros donde se indican las partes ms convenientes que deben muestrearse en diferentes cultivos. Un ejemplodestoeselCuadro14.
CULTIVO
MAIZ FRIJOL FRIJOLSOYA PAPA GERANIO GRAMINEAS

NITRATO
Tallocercadelsuelo Pecolodelahoja Pecolodelahoja Pecolodelahojao tallo Pecolodelahoja Tallo

FOSFORO
Tallocerca delsuelo Pecolode lahoja Pecolode lahoja Pecolo(dehoja Tallo) Pecolodehoja Tallo

POTASIO
laminade lahoja pecolode hoja Pecolode hoja Pecolode hojatallo Pecolodehoja tallo

Cuadro14.Partesmasapropiadasparamuestrearenalgunoscultivos(CookeyMillar,1949)

EnelcasodegramneasMorgan(Lunt,elal.,1965)recomiendaelusodelashojas. Para mas detalles acerca de estos temas consultar a Lunt, et al. (1965), Cook y Miller (1949)yBould(1967). OBJETIVO Verificar los niveles de nutrientes en el suelo y en tejidos vegetales en cultivos o en plantasdeornato.

MATERIAL Paraobtenerelextractodelsuelo(a)odelostejidos(b): a)1Embudodevidrio b)Navajaderasurar CucharadeplsticoCarbnactivado 1Pipetade10mlTubodeensaye Papelfiltro Embudodevidrio Gotero Pipetade10ml SolucinextractoradeGotero Morgan(verapndice)Papelfiltro
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Parallevaracabolasdeterminacionesdelosnutrientesseusanlosmismosreactivospara losextractosdelsueloydelosdetejidos. Placaporcelanaounvidrioconfondoblanco. 2Agitadoresdevidrio 1Vasodeprecipitado250mlconaguadestilada Toallaotrapoparasecar 2Tubosdeensayedefondoplano Tabladeescaladeconcentraciones ReactivoAparaNitrgenoNtrico. ReactivoBparaNitrgenoNtrico ReactivodeNessierparaNitrgenoAmoniacal ReactivoAparaFsforo. ReactivoAparaPotasio ReactivoBparaPotasio. ReactivoparaCalcio ReactivoAparaMagnesio ReactivoBparaMagnesio(verapndice). PROCEDIMIENTO ObtencindelExtracto. Paraelsuelo: a)Coloqueelpapelfiltroenelembudo. b)Agregueunacucharaditarasadesuelo.Depreferenciasecadoalsol,nuncaenlaestufa. c) Agregue 10 ml de solucin extractora de Morgan. Djese filtrar todo el lquido. a1 retirar el filtro del embudo comprmase suavemente para extraer tejido el liquido que seaposible. d) Quite el embudo y ponga el gotero en el recipiente donde se haya recibido el extracto.Paralostejidos a)Cortarlamuestrafinamenteconlahojaderasurar.Mezclarbienelmaterial. b)Tomarconunacucharitaunamuestradelmaterial(unvolumenaproximadode2.5 ml) yponerloenuntubodeensaye. c)Agregar7.5mldelasolucinextractoradeMorgan(9mlparapastos)ylapuntadeuna cucharadita de carbn activado. Se agita durante 1 minuto y se filtra. Esta solucin se usa en los ensayos de la misma forma que los extractos del suelo. La nica diferencia es al utilizar las tablas ya que en elcasode las mediciones d los extractos de tejidos vegetales los valores obtenidos deben multiplicarse por 3 y para pastos multiplicarse por 3.6 (Lunt etal.,1965).

Estimacionesdelassalesminerales. NitrgenocomoNitrato: Ponga 3 gotas del extracto del suelo en una depresin de la placa. Agregue 2 gotas del Reactivo A para nitratos y 7 gotas del Reactivo B. Mezcle bien. La lectura debe hacerse
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inmediatamente o unos cuantos segundos despus o una vez que hayan transcurrido de 12a15minutos.Compareloscoloresconlalminacorrespondiente. NitrgenoAmoniacal: Ponga 4 gotas del extracto en la placa, agregue gotas del reactivo de Nessier y deje reposarunminuto.Agiteycompareelcoloramarilloyanaranjadoresultanteconlaescala decolorescorrespondiente. Fsforo: Ponga 10 gotas del extracto en la placa. Agregue 1 gota del reactivo A y 2 gotas del reactivo B. Agtese, deje reposar 1 minuto (no ms de esto) y compare la intensidad del colorconlaescalacorrespondiente. Potasio: Ponga 10 gotas delextracto enel tubo de fondo plano, agregue 1 gota del reactivo A y 12 gotas del reactivo B. Djese reposar 1 minuto, agtese suavemente y mantngase en reposo otros 2 minutos. Estime la cantidad de precipitado amarillo utilizando la escala de comparacindeturbidezdelasiguienteforma: Coloque el tubo de fondo plano en posicin vertical directamente sobre las lneas de la escalayaunadistanciade6.2mmdelasmismas.Vaseporencimadeltubocomparando con los diferentes grupos de lneas hasta encontrar el grupo que apenas se perciba la cantidaddepotasioeslaquecorrespondeaestegrupodelneas. Calcio: Ponga10gotasdelextractoeneltubodefondoplano,agregueunagotadelreactivopara calcio, agite vigorosamente y deje reposar 5 minutos. Estime la turbidez en la misma formaqueelpotasio. Magnesio: Ponga 10 gotas del extracto en la placa agregue 1 gota de reactivo A para Magnesio y 3 gotas del reactivo B. Agite, deje reposar 1 minuto y compare la coloracin con la escala correspondiente. En este ensayo slo se miden algunos elementos. Ensayos para otros elementos como aluminio, manganeso, fierro, azufre, nitrgeno en forma de nitrito, sodio, etc., pueden encontrarse en el trabajo de Lunt et al. (1965). Reporte sus resultados apuntando los datosobtenidosenelCuadro1delApndice. BIBLIOGRAFA. Bould,C.1968.Leafanalysisasadiagnosticmethodandadvisoryaldincrop Nutrition.Exp.Agriculture.4:1727.

Cook,R.L.yC.E.Millar.1949.PlantNutritiondeficiencies.Agr.Exp.Sta.Specialbull355.

Lunt, H.A., H.G. M. Jacobson y C.L.W. Swanson. 1950. El sistema Morgan para anlisis de suelos. Boletn 541, Mayo. Estacin Agr. Exp. Connecticut New Haven, USA. Este folleto
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fue traducido y adaptado en la UACh con el nombre de Qumica Agrcola Aplicada por Ojeda,O.D.yDelgadodeG.Z.enelaode1965,dedondesetomaronlosdatos. SARH, Subsecretara de Agricultura y Operacin, 1917. Fertilizacin en funcin del anlisis del suelo (por el mtodo de Morgan). Servicio de Orientacin Tcnica al usuario, hoja de Divulgacin.No.21,Mxico. Wallace,T.1961.Thediagnosisofmineraldeficienciesinplantbyvisualsymptoms,acolor atlas.HerMajesty'sStationaryOffice,London ANEXOS SolucinextractoradeMorgan Agregue 100 gramos de acetato de sodio (NaC2H302) a 500 ml de agua (10%). Despus quelasalsedisuelvaagregue30mldecidoacticoglacial(3%)yaforea1litro. ReactivoparaNenformadeNitrato Disuelva 0.05 g de Difenilamina en25 ml de cido sulfrico concentrado. Gurdese en un gotero de color mbar. La solucin resultante no debe tener ninguna sombra de color azul; y tampoco deber producir ninguna coloracin cuando se agreguen 4 gotas de la mismaaunagotadeaguadestilada.Siocurreestareaccinpreparedenuevoelreactivo. Lasolucinessumamentecorrosivaynodebeestarencontactoconhule. ReactivoparaNenlaformadeAmoniacoReactivodeNessier Disuelva 5 g de KI en .15 ml de agua destilada. Agregue una solucin saturada de cloruro mercrico hasta que comience a formarse un precipitado. A continuacin ponga 40 ml de solucindeNaOHal80%.Aforea100mldjeseasentarduranteunasemana,decntesey gurdese en un frasco de color mbar. Dos gotas de este reactivo agregadas a 4 gotas de lasolucinextractivanodebernproducirprcticamenteningunacoloracin. ReactivoparaFsforo ReactivoA.Disulvase12.5gdemolibdatodesodio,calentadopocoapoco,en100mlde agua destilada. Mzclense 50 ml de cido actico glacial con 350 ml de agua destilada en un vaso de 600 ml. Agrguese la solucin de molibdato de sodio lentamente y agitando continuamentealasolucindecidoactico.Gurdeseenunfrascodecolormbar. Estereactivonodebecontenermsdeunsedimentomuyligero.Sielmolibdatotieneuna tendenciadefinidaaprecipitarse,deberdesecharse. Reactivo B. Solucin de Oxalato Estaoso. Este reactivo debe prepararse en el mismo da de su utilizacin. Marque con lpiz una lnea a una distancia de 3 a 5 mm del extremo ancho de un palillo de dientes. Todo el oxalato Estaoso que pueda tomarse con esa porcindelpalilloseagregaa10mldesolucindeMorgan.Mzclesebiendemaneraque todalasalsedisuelvaperfectamenteantesdeemplearelreactivo.
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ReactivoparaPotasio Reactivo A. Disuelva 5 g de Nitrato de Cobalto (CoCNO3)2 CH2O) en 47.5 ml de agua destilada y 2.5 ml de cido actico glacial. Gurdese en un frasco de color mbar. Disulvanse 30 gr de Nitrito de Sodio (NaNO2) en agua destilada y dilyase a 59 ml tambin con agua destilada. Gurdese en otro frasco obscuro. Mzclense estas dos soluciones en partes Iguales por lo menos 24 horas antes de usarse. Cbrase el recipiente delamezclademaneraquelosgasesvenenososdexidontricopuedanescapardurante la noche. Fltrese si es necesario y gurdese en un frasco de color mbar y con tapn de vidrio esmeralizado. Esta Solucin final de cobaltinitrito de sodio puede descomponerse enunascuantassemanassinoseguardanenunrefrigerador.

Reactivo B. Mzclense 90 ml de alcohol isopropilico con 10 ml de formaldehdo neutro. Consrveseestereactivoenunfrascodetapaderoscaqueajustebien.

ReactivoparaCalcio Mezcle 10 g de Oxalato de Sodio con 100 ml de agua destilada. Djese reposar 24 horas y decantelasolucinclaraquesobrenadaamedidaquevayanecesitando.

ReactivoparaMagnesio Reactivo A. Disuelva 0.02 de Tiazol amarillo en 100 ml de agua destilada. Gurdese en un frascocolormbar.

ReactivoB.Disuelva15gdeNaOHen100mLdeaguadestilada.

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PRACTICANo.40 TITULO:SNTOMASDEDEFICIENCIAYTOXICIDADMINERAL
INTRODUCCION EncuantoalosFertilizantes,stosdebenestarenproporcionesequilibradas.Elexcesode uno puede producir la carencia o la toxicidad de otro. Un ejemplo sera la interaccin nitrgenopotasio que, muy frecuentemente, deben estar en proporciones iguales. Otra interaccin es la del potasiocalciomagnesio en la que el exceso de uno produce la carencia de los otros dos; en muchos casos, deberan estar en proporciones 4K:2Ca:1Mg. El exceso de fsforo puede impedir la absorcin de zinc, hierro y cobre. Es decir, una carencia puede ser causada por la inexistencia del elemento en el substrato o por el excesodeotroelemento,apesarqueexistierancantidadessuficientesdelprimero. PRIMERA PARTE: Presentacin de diapositivas correspondientes a deficiencias y toxicidadesdenutrimentosmineralesendiferentescultivos. OBJETIVO Observacin de la sintomatologa de deficiencias y toxicidades de elementos minerales encultivosdeyucaypastostropicales. PROCEDIMIENTO a) Presentacin de diapositivas sobre: Sntomas de deficiencia de macronutrientes y nutrimentossecundariosenpastostropicales b)presentacindediapositivassobre:Sntomasdedeficienciasdemicronutrientesyde toxicidadmineralenpastostropicales a)Presentacindediapositivassobre:"DesrdenesnutricionaldePlantadeyuca b)Presentacin de diapositivas alusivas a sntomas deficiencias de macronutrimentos y micronutrimentos en ctricos, caf, cacao, ajonjol, man, papa, palma africana, coliflor, remolacha,repolloyalgunasplantasornamentales. GUIADEDISCUSIONSOBRELASDIAPOSITIVASPRESENTADOS 1.Clasifiqueloselementosmineralessegnsumovilidadporelfloema 2.Culesdelosmacronutrimentosymicronutrimentoscausanclorosis uniformeogeneralyculesclorosisintervienen? 3.Cmosediferencialadeficienciadenitrgenodeladeazufre? Ladenitrgenodeladefsforo? 4.Describalossntomascausadosporlasdeficienciasdecalcioymagnesio 5.CmosediferencialadeficienciadeMndeladeFe? BIBLIOGRAFIA Bould,C.1968.Leafanalysisasadiagnosticmethodandadvisoryaldincrop Nutrition.Exp.Agriculture.4:1727. Cook,R.L.yC.E.Millar.1949.PlantNutritiondeficiencies.Agr.Exp.Sta.Specialbull355.
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PRACTICANo.41 TITULO: EFECTO DE SOLUCIONES NO BALANCEADAS SOBRE EL CRECIMIENTODEPLNTULAS

OBJETIVO l. Observar el efecto de soluciones nutritivas no balanceadas en el crecimiento de plntulas. 2.Comprobarelefectodelatoxicidaddesalesdemetalespesadosobre Algunasplntulas. PROCEDIMIENTO Preparacindesolucionesnutritivas: l. a) Prepare un litro de una solucin nutritiva completa. Pero en vez de 5 ml de a disolucinmadredenitratodepotasio,agregue15ml. b) Prepare un litro de solucin que contenga solamente 5 ml de la disolucin madre de nitratodepotasio. 2.a)Prepareunlitrodelasolucinnutritivacompletayagregue1mldeunadisolucinde su1fatodecobreal0.01M. b) Prepare una solucin que consista de 1 ml de la disolucin de sulfato de cobre al 0.01M,agregadoaunlitrodeaguadestilada. Vace las soluciones en diferentes frascos, coloque las plntulas en las ranuras de de los tapones. Fjelaseinserteestosenlosfrascos Cuando en algunos tratamientos las plantitas hayan alcanzado una altura de 20 a 25 cm comparesuaparienciaentodoslostratamientosyanote.Cosechelasp1ntu1asysepare elvstagodelasraces.Midaellargodeltallojuntoconlashojasylarazmslarga.Seque las races con papel absorbente y pselas lo mismo que el vstago. Trabaje rpidamente. Calculeelpromediodelasmedidasdelastresp1ntu1asdecadafrasco.Enformasimilar aladelexperimentoanterior,sequelasplntulasyanoteelpesoseco. BIBLIOGRAFIA MULLER, L. E. Manual de laboratorio de fisiologia vegetal. Turialba. Costa rica. IICA. 1964. 165p.

PEQUEO PEREZ, J. Prcticas de Fisiologa Vegetal. La habana. Cuba. Editorial pueblo y educacin.1972.133p.

ROJASGARCIDUEAS,M. Experimentos de Laboratorio para el curso de Fisiologia Vegetal.Monterey,Mexico.InstitutoTecnologicoydeestudiossuperiores.S.f.51p.


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PRACTICANo.42 TITULO:CULTIVOSHIDROPNICOS
INTRODUCCION Desde el punto de vista hortcola, la finalidad de cualquier medio de cultivo es conseguir una planta de calidad en el ms corto perodo de tiempo, con costes de produccin mnimos. En este sentido los cultivos sin suelo, tambin denominados cultivos hidropnicos, surgen como una alternativa a la Agricultura tradicional, cuyo principal objetivoeseliminarodisminuirlosfactoreslimitantesdelcrecimientovegetalasociadosa las caractersticas del suelo, sustituyndolo por otros soportes de cultivo y aplicando tcnicasdefertilizacinalternativas. OBJETIVO Cultivarhortalizasenunasolucinnutricincompleta. MATERIAL Sustrato:arena,carbonilla,gravadero,etc. 4materasgrandesocanaletas Solucionesnutritivas PROCEDIMIENTO Lave el sustrato con agua limpia varias veces hasta que el agua salga clara. Agrguele una solucin de hipoclorito de sodio al 0.5% y djela por 2 horas o ms. Lave de nuevo el sustrato hasta que desaparezca el olor a hipoclorito Llene las materas o canaletas con el sustrato; siembre las semillas previamente seleccionadas o transplante si hizo un semillero. Rieguediariamenteconlasolucinnutritivacompletaquesepreparasegnseindicaenel Cuadrosiguiente: a)Solucindeelementosmayores Componentes gramos/litro _____________________________________________________________ Nitratodecalcio 0.70 0.65 Nitratodepotasio Superfosfatotriple 0.20 Sulfatodemagnsio 0.50 ______________________________________________________________ b)Solucindeelementosmenores ______________________________________________________________ Salgramos/litro ______________________________________________________________ SulfatoferrosoFeS04.7H2O 0.00273
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SulfatodemagnesioMnSO4.2H2O 0.00564 AcidobricoH3Bo3 0.00420 SulfatodecobreCuSO4 0.00030 ______________________________________________________________ Cuadro15.Preparacindelasolucinnutritivacompleta BIBLIOGRAFIA WITHAM, F.H. et al. experiments in plan physiology. New York, Van Nostrand Reinhold Company.1971.245p.

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PRACTICANo.43 TITULO:NUTRICIONMINERAL
INTRODUCCION Las investigaciones sobre nutricin mineral han hecho muchos progresos al fabricarse compuestos qumicos con un alto grado de pureza, al mismo tiempo de poner en prctica mtodos de cultivos hidropnicos, con soluciones de composicin qumica definida, que aseguren el crecimiento normal de las plantas y que permiten un control preciso del suministro de iones nutritivos a las races. Probablemente Woodward en 1699, realiz los primeros experimentos en cultivo de plantas en medio lquido, sin usar ningn sustrato slido. En 1804, de Saussure realiz uno de los primeros intentos de analizar los factores implicados en el cultivo de plantas en medios nutritivos, estableciendo la necesidad de suministrar nitrato a la solucin de cultivo. Determinacin de materia seca y cenizas en tejidosvegetales. OBJETIVO Determinarcuantitativamentelamateriasecaylascenizasenmaterialvegetal. MATERIALES Bolsasdepapel Hornoconcirculacindeaire Balanzaanaltica Crisolde30mls Materialvegetal(semillas,tubrculos,hojas,etc.) Mortero Mufla Acidontricoconcentrado PROCEDIMIENTO a)Materiaseca Coloque 100 gramos de material vegetal fresco que puede ser: semillas, tubrculos, tallos y hojas en una bolsa de papel previamente pesado y llvelos a un horno con temperatura 90100Cpor24horasohastaqueenelmaterialnohayacambioenelpeso.
NOTA:Laspesadasrespectivassepuedenhacerconelmaterialfroparalocualluegodesacarlo delhornosedebecolocarenundesecadorparaqueenfresincaptarhumedaddelaire.

Determineelporcientodemateriasecayeldeagua. b)Cenizas Luego de determinar materia seca, macere la muestra en un mortero hasta que quede finamente molida. De esta muestra tome la cantidad suficiente para llenar el crisol de porcelana, previamente pesado, hasta las 2/3 partes. Vuelva a pesar el crisol con el contenido. Lleve el crisol a una mufla con temperatura entre 400 y 500C Y deje el material hasta que la ceniza est libre de cualquier color negro o gris. Si persiste el color
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gris, enfre, humedezca cuidadosamente la ceniza con 1 2 mls de cido ntrico concentrado y contine calentando. Luego de la obtencin de las cenizas, enfre (use un desecador)yvuelvaamedirelpesodelcrisolysucontenido. Determineelporcientodecenizas. BIBLIOGRAFIA Weaver, R.J. 1980. Reguladores del Crecimiento de las Plantas en la Agricultura. Trillas, Mxico. Wallace,T.1961.Thediagnosisofmineraldeficienciesinplantbyvisualsymptoms,acolor atlas.HerMajesty'sStationaryOffice,London.

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PRACTICANo.44 TITULO:FOTOMORFOGNESISLALUZENELDESARROLLODELAS PLNTULASYLALIGNIFICACIONDELOSTALLOS.


INTRODUCCIN. Alcontroldeldesarrollopormediodelaluzseledenominafotomorfognesis.Losefectos de la luz sobre el desarrollo de las plantas abarcan diversos aspectos, desde la germinacin de las semillas, el crecimiento de las plntulas, hasta la floracin y formacin de rganos de reproduccin y la preparacin de la planta para entrar en el reposo. Particularmente en el crecimiento de las plntulas la influencia de la luz se ve en la produccindeclorofila,laexpansindelashojas(enmenormedidaenmonocotiledneas que en dicotiledneas), el tamao del tallo y las partes que crecen en el mismo, la presencia de un gancho en el pice de las dicotiledneas (Salisbury y Ross, 1994) y la cantidad de depsitos de Iignina en las clulas de la corteza del tallo (Maynard y Bassuk, 1996). Esteltimoaspecto,laIignificacindelasclulasenpresenciadelaluz,hasidoestudiado en relacin a la capacidad de enraizamiento de las estacas de diversas especies. Por ejemplo, Maynard y Bassuk (1996) mencionan que la Iignificacin acentuada y el fuerte desarrollo de las fibras y esclereidas de la vaina perivascular de las dicotiledneas est correlacionada con una capacidad de enraizamiento pobre, ocurriendo algo semejante en especies forestales, en donde las especies de enraizamiento pobre presentan una fuerte lignificacin de las fibras del floema, ms desarrollo de esclereidas un cambio menos activo y menos clulas de los radios en crecimiento activo, lo que produce un anillo continodeesclernquima.Sinembargosehavistoqueesteaspectopuedeser manejado a travs de la etiolacin, ya que el desarrollo de las plantas en ausencia de luz provoca un retraso en la formacin de las esclereidas y la disminucin de la vaina perivascular, lo que ha coincidido con un aumento de la capacidad de enraizamiento del material tomado de las plantas, notndose que junto a la reduccin de estas caractersticas hay un aumento de la capacidad meristemtica de los radios, concluyndose de manera general que, aunque no se ha establecido la causa de este fenmeno,alparecerhayunarelacinentrelapresenciadetejidoesclerenquimatosoyla reduccindelacapacidaddeformarraces'(MaynardyBassuk,1996). OBJETIVOS. 1) Evaluar los cambios morfolgicos y de crecimiento de plntulas crecidas en la luz y la obscuridad. 2) Observar las diferencias de Iignificacin de las clulas del tallo entre plantas desarrolladasenlaluzyenlaobscuridad. MATERIAL Semillasdechicharo,frjolymazotrigo. 2Frascosdevidriode11.5Its.
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Papelaluminioocartnnegro. Navajasderasurar. Portaobjetosycubreobjetos Microscopioptico Algodn PROCEDIMIENTO Coloque en el fondo de los frascos de vidrio una capa de algodn, humedzcala y escurra el exceso de agua. Siembre las semillas (2 3 d cada especie) ytape uno los frascos con la cartulinanegra de modo que no penetre la luz. Mantenga los frascos en un sitio fresco, donde reciban la luz durante 10 12 das al cabo de los cuales abra los frascos y tome los siguientesdatos: Alturadelaplanta Sitiosdeltalloquecrecieron(epicotlioohipocotilo) Lugarendondeseencuentranloscotiledones(ensucaso)Anchodelashojas Formaenlaqueseencuentraelpice. Anchodelashojas(enlasplantasdondesepuedamediresto)Colordelaplanta. Hagauncuadroquecomparelascaractersticasentrelasplantasdeluzysombra. Una vez: tomados los datos anteriores haga cortes transversales del tallo de frjol de las plantas de luz y sombra y observe en el microscopio ptico. Dibuje las diferencias anatmicas entre ambos tipos de tallo. Discuta estas en funcin de la capacidad de enraizamientodelostalloscmolostratamientosdeetiolacinseusancomomtodode facilitarelenraizamientodealgunasespecies. BIBLIOGRAFA. Maynard, B.K. N.L. Bassuk. 1996. Effects of stock plant etiolation, shading, bandingand shoot development on histology and cutting propagation of Carpinus betulus L. fastigiata. J.Amer.SocHort.Sci.12(5):853860.

Salisbury.F.B.yC.W.Ross.1994.FisiologaVegetal.Gpo.Edit.Iberoamrica,Mxico.D.F.

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PRACTICANo.45 TITULO:EFECTODELALUZSOBREELDESARROLLODELAPLNTULA.
INTRODUCCION La captacin de energa lumnica la realiza el cloroplasto a travs de bloques de sistemas depigmentos(clorofila,carotenosyxantofilas)denominados"antenas"queasociadoscon protenas configuran los complejos cosechadores de luz (CCL). Las reacciones que explicaremos a continuacin se desarrollan en sendos centros: en el fotosistema I y II, cuyoscomponentesfotoactivossonlaclorofilaa,denominadosrespectivamenteP700y P680.LaletraPsignificapigmentoylosnmerosserefierenalaslongitudesdeondade laluzabsorbida OBJETIVO Comprobarquelaluzincidenotablementeenlamorfognesisdelasplntulas. MATERIAL Plntulasdemazydefrjolgerminadasen: a)Luznormal,b)luzdeficiente,c)oscuridad. Regla PROCEDIMIENTO Examine plntulas de maz y frjol que han sido germinadas en luz normal luz deficiente y oscuridad. Observe su coloracin y haga mediciones del tallo, hojas, etc. Segn el Cuadro Siguienteparacadaespecie.

Plntula Maz
grosordeltallo largopromediodehojascm. anchopromediodehojas,cm. largodelmesocotilo,cm. Colordehojas consistenciageneral Frjol grosordeltallo,Mm. largopromediodehojas,cm. anchopromediodehojas,c.

Luznormal

Luzdeficiente

Oscuridad

Cuadro16.Efectosdelaluzsobreeldesarrollodelaplntula

Hagaunadiscusindecmoafectalaluzlamorfognesisdelaplanta.
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BIBLIOGRAFIA ALVIM,PaulodeT.cursoInternacionaldeBasesFilolgicas delaProduccinAgrcola.Vol. 11. Practicas de Laboratorio. Lima, Per. IICA. Zona andina. 1959. (sin paginacin consecutiva).

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PRACTICANo.46 TITULO:ALGUNASPROPIEDADESDELASCLOROFILAS.
INTRODUCCION Utilizando tcnicas cromatogrficas se han identificado un grupo de sustancias en las plantas verdes llamadas clorofilas, siendo las representantes la a y b. La clorofila a esta integrada por un ncleo de Mg, 4N, C y H. Para que se pueda formar la clorofila es indispensablelapresenciadelFe.Lasformulasdelaclorofilason: Clorofilaa:C55H72O5N4Mg Clorofilab:C55H70O6N4Mg OBJETIVOS: Observaryanalizarlafluorescenciaylafotodescomposicindelasclorofilas. MATERIAL Extractodeclorofila Fuenteluminosa:proyector Vasodeladosplanos Beakerde250ml. PROCEDIMENTO A.Fluorescencia EnunfrascoconladosplanosviertapartedelextractodeclorofilaIlumnelopormediode un haz paralelo (por ejemplo el que emite un proyector). Observe fluorescencia de las clorofilas. B.Fotodescomposicin Compareelcolordelextractodeclorofilasconeldelextractoquehasidodejadoporms de 12 horas a la luz. Mida en cada uno la absorbancia a 660 nm calibrando el fotocolormetroconacetonaal80%.
Extractofresco Extractodemsde12hrs. Color Absorbanciaa660nm

Cuadro17.Algunaspropiedadesdelasclorofilas

BIBLIOGRAFIA Michell, J.W., et al. Test Methods with plant_ regulating chemicals. Agriculture handbook No.126.utitedstatesdepartmentoagiculture.Washitong,D.C.1958.68p.

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PRACTICANo.47 TITULO: PIGMENTOS NO FOTOSINTETICOS: CAMBIOS DE COLOR DE LOS PIGMENTOSFLAVONOIDES


INTRODUCCION Las antocianinas (griego anhtos, flor y ciano, azul oscuro) son pigmentos coloreados que por lo comn se encuentran en flores rojas, azules y prpuras. Tambin se presentan en muchasotraspartesdelaplanta,comoenciertosfrutos,tallos,hojaseinclusoraces.Con frecuencia,losflavonoidesseencuentranconfinadosaclulasepidrmicas.Lamayorade los frutos y muchas flores deben sus colores a las antocianinas, aunque algunos, como varias flores amarillas y los frutos del tomate, son coloreados por carotenoides. Los coloresbrillantesdelasenotoosedebenengranpartealaacumulacindeantocianinas endasfrosybrillantes OBJETIVO En este experimento se comprobara que las diferencias de coloracin no se deben exclusivamente a la presencia de uno u otro pigmento flavonoide, o a un cierto tipo de mezcladeestos,sinotambinalareaccindeljugocelular.Unosolodeestospigmentos es capaz de desarrollar diferentes coloraciones segn el pH celular, correspondiendo los coloresrojo,violetayazulareaccincida,neutraybsica,respectivamente. MATERIAL Razderemolacha Floresrojas,azules,blancasyamarilla Dosbeakersde250ml Doscampanasdevidrio Hidrxidodeamonioconcentrado Acidoclorhdricoconcentrado Acidoactico0.2N Hidrxidodesodio0.1N PapelindicadordepH. PROCEDIMIENTO A.EfectodelpHenelcolordelabetacianina(pigmentodelaremolacha).

Prepare un extracto del pigmento de la remolacha en la siguiente forma: hierva por unos minutos de 20 a 30 gramos de un raspado de raz de remolacha con unos 100ml de agua destilada.Enfrielextractounpocoyfiltre. Del extracto filtrado tome 5 ml en un tubo de ensayo. Por medio de un papel indicador determinesupH.Despusagreguegotaporgota,unadisolucindecidoacticoal0.2N. Tan pronto como se note un cambio en el color (compare continuamente con el extracto original)noagreguemscido.

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Efecte luego una nueva determinacin del pH. Agregue otras gotas del cido para ver si ocurrenotroscambiosdelcolor. Tratamiento Color pH Extractooriginal Conlaadicindelcidoactico Conlaadicindehidrxidodesodio En otro tubo de ensayo repita el procedimiento, aadiendo en lugar de cido una disolucin de hidrxido de sodio al 0.1 N. En este caso deben ocurrir varios cambios sucesivoshastaqueladisolucinadquierafinalmenteuncoloramarillo. Expliquelacausadelosresultados Tratamiento Color pH
Extractooriginal Conlaadicindelcidoactico Conlaadicindehidrxidodesodio

Cuadro18.Pigmentosnofotosintticos:cambosdecolordelospigmentosflavonoides B.Cambiosdecolorenlasfloresbajoatmsferascidasobsicas. En dos beakers con agua coloque flores rojas, azules, blancas y amarillas. Coloque junto a cadabeakersunplatodepetri.Enunplatoviertahidrxidodeamonioconcentradoytape todo el conjunto con una campana para crear una atmsfera de vapores de amonaco alrededordelasflores. Repita el procedimiento con el otro conjunto pero vierta un poco de cido clorhdrico concentradoenelplatodepetri.
Cambiosdecolorobservadosenlasflores Tratamiento Rojas Conanhdridodeamonio Concidoclorhdrico Azules Blancas Amarillas

Cuadro19.Observeloscambiosdecolordelasfloresencadacaso. Hagaunanlisisdelarazndelosresultados. BIBLIOGRAFIA Bldwell, R.G.S. 1979. Plant Physiology. 2a.de. Mac Millan, New York. Devlin, R.M. 1975. Fisiologa Vegetal. Ed. Omega. Barcelona, Espaa. Hall, D.O. y K.K. Rao. 1978. Fotosntesis. De.Omega.Barcelona,Espaa. Salisbury,F.B.yC.Ross.PlantPhyslology.2nd.De.WadsworthPublishingCo. Inc.Cal.U.S.A.
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PRACTICANo.48 TITULO: EFECTO DE LA INTENSIDAD DE LA LUZ Y DE LA CONCENTRACIN DELCO2ENLAFOTOSNTESIS.


OBJETIVO Teniendo en cuenta la ley de los Factores Limitantes cientficamente comprobada para la fotosntesis, se trata de demostrar que si se aumenta la intensidad de la luz, la planta no puede aprovechar para la fotosntesis esa mayor energa disponible a menos que la concentracin del CO2 aumente al mismo tiempo proporcionalmente, siempre que los demsfactoresnosean1imitantes. Esta corre1acin fcilmente se presenta en el campo de ah la importancia de conocer los puntosdecompensacindeluzydeCO2. PROCEDIMIENTO Siguiendo la bibliografa consultada para los ejercicios inmediatamente anteriores se pide disear un experimento que permita interpretar el aumento de intensidad de la luz y el contenidodeCO2enrelacinalaintensidaddefotosntesisdeunaplantacualquiera. BIBLIOGRAFIA Arditti, J. y A. Dunn. 1969. Experimental Plant Physlology. Holt, Rinehart y Winston, New York.

Richter,G.1972.FisiologadelMetabolismodelasPlantas.TraduccindeL. Miller,IICAdelaOEA.CECSA,Mxico,D.F.

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PRACTICANo.49 TITULO: PIGMENTOS FOTOSINTETICOS SEPARACIN, ESPECTRO DE ABSORCIONYFLUORESCENCIA


INTRODUCCIN. Lasplantascontienenvariospigmentosqueabsorbenlaenergadelaluz. Entre stos los que se encuentren en mayor proporcin son la clorofila a de color verde azulado y la clorofila b de color verde amarillento, en ambas es diferente la estructura qumicalaadsorcinylasolubilidad. Los carotenoides son pigmentos de color amarillo y anaranjado Si contienen oxigeno en su molcula reciben el nombre de xantofilas; mientras que los carotenos solo estn constituidos por carbono e hidrgeno. Sin embargo, no son estos todos los tipos de pigmentosfotosintticos,enelcuadroacontinuacinseproporcionaunalistadeellos:
PIGMENTO Clorofilaa Clorofilab Clorofilac Clorofilad Protoclorofila Bacterioclorofila Bacterioviridina Ficocianina ficoeritrina Carotenosy xanthofilas ORGANISMOSENLOSQUESEPRESENTA Todaslasplantasverdes Plantasverdes Algascafs,diatomeas Algasrojas Plantasetioladas Bacteriaprpura Bacteriaverdessulfurosas Algasazulverdes Algasrojas lamayoradelasplantas,bacteria LUZADSORBIDA Rojoyazulvioleta Rojoyazulvioleta Rojoyazulvioleta Rojoyazulvioleta Rojocercanoazulvioleta Rojocercanoazulvioleta Naranjarojo Verde Azuly AzulyAzulverde

Cuadro20.Pigmentosfotosintticos.(Biwell,1993) Laextraccindelospigmentosdehojasresultamejorcuandoselestrituraendisolventes orgnicos, tales como acetona alcohol y otros similares (Richter, 1972). La separacin se haceatravsdelecromatografa. En la cromatografa de papel la mezcla a separar se aplica 10 gotas en el mismo sitio, esperando a que seque en cada aplicacin y se desarrolla el cromatograma. La distancia viajadaporuncompuestoparticularbajocondicionesconstantesdetemperatura,sistema de solventes, direccin del flujo y otros es caracterstico y puede ser utilizado para identificarlo. La relacin entre la distancia viajada por un compuesto y la del solvente se conocecomovalorRf(ArdittiyDunn,1969).ElRfsecalculacomosigue: Rf=distancia(desdeelorigen)Queviajelcompuesto/distancia(desdeelorigen)queviajelsolvente
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PIGMENTOS Caroteno Feofitina Xantofilas Clorofilaa Clorofilab

COLOR Amarillo Gris Amarillo Verdeazul Verdeamarillo

VALORESSOLVENTEA 0.98 0.44 0.350.10 0.28 0.17

RFSOLVENTEB 0.90 0.28 0.22 0.11 0.10

Cuadro 21. Valores Rf para cromatografa en papel, con solventes (a) 100 partes de ter de petrleo con 20 partes de acetona pura y (b) 100partes de ter de petrleo con 12 partes de acetona pura (modificacin de clegg.1973).

Para obtener un espectro de absorcin, primero se extrae el pigmento y despus se determinaqulongitudesdeondadelaluzabsorbedichopigmento. Las clorofilas presentan dos mximos de absorcin, uno en la parte rojay otro en la parte azul. Mientras que los carotenoides (carotenos y xantofilas) solamente absorben en la parte verdeazul y violeta del espectro visible. Cuando los pigmentos fotosintticos en la clula absorben luz los electrones acceden a niveles superiores de energa en donde son capturadosporunaseriedecompuestosreceptoresdeelectrones,porlocualseconserva la energa luminosa, convirtindola en energa qumica. Sin embargo cuando los pigmentos estn aislados (o aun dentro de la hoja completa, sana) a veces los electrones regresan a su estado basal y emiten la energa absorbida en forma de luz, fenmeno al queselellamafluorescencia(Bldwell.1979).

OBJETIVO. 1. Extraccin de los pigmentos fotosintticos ms importantes por medio de solventes orgnicosylaseparacineidentificacindelosmismosconayudadelacromatografaen papel. 2.Determinarelespectrodeabsorcindelospigmentosfotosintticosextrados. 3.Demostrarelfenmenodefluorescenciaenlaclorofila. MATERIAL A)CromatografaBaoMariaBa)espectrodeAbsorcin 1Micropipeta1embudo1vasodeprecipitado 1Vasodeprecipitadode100mlTachueladel00ml 1Morteroypistilopapelfiltrol0mldeacetona 2Tubosdeensayegrande5gdematerialvegetall0mldeterdepetrleo 2Taponesdehule5g30mldeacetonabencinadepetrleo 1Gradilla PROCEDIMIENTO
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Tomar 8 ml de solvente (pueden usarse 100 partes de ter de petrleo y 1 parte de benceno (Rovalo y Rojas, 1977) observe que para el primer caso se tienen los valores Rf, paracomparar,paraelsegundo,No). 1TiradepapelfiltroWhatmanNo.1,de2x20cm LmparadeluzUV 1.Obtencindelextracto.Muelalashojasenelmorterohastaextraerlospigmentosdela hoja. Filtre el extracto y recbalo en el vaso de precipitado. Concentre el extracto en el baoMariaafuegolento,procurandoquenohierva 2. Obtencin del cromatograma. Monte el dispositivo de la Figura 19. Con ayuda de la micropipeta, coloque 2 3 gotas del extracto en la lnea Inicial (marcada con lpiz). De preferencia corra el cromatograma en la obscuridad. Espere 20 30 minutos y marque con un lpiz las distancias corridas por el solvente y por los pigmentos. Obtenga los valoresRfparacadauno.

Figura14.Espectrodeabsorcin

B) EspectrodeAbsorcin De las tiras de cromatografa en papel obtenidas anteriormente, recorte las partes que contienencadaunodelospigmentosysecolocanporseparadoenunvasodeprecipitado quecontenga10mldesolventeadecuadoparacadapigmento. Pigmento ClorofilaaClorofilabCaroteno
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Solvente Acetona Acetona BencinadePetrleoterdepetrleoterde Mezclar perfectamente hasta disolver los pigmentos, retire el papel y coloque el extracto coneltubodelespectrofotmetroparadeterminarelespectrodeabsorcin. Determinacindelespectrodeabsorcin. Siguiendo las Instrucciones de manejo del espectrofotmetro realizar lecturas de absorbancia de 340 a 700 nm en Intervalos de 20 nm. Grafique Ia longitud de onda vs. La absorbanciaparacadapigmento. C)FluorescenciadelosPigmentosFotosintticos Con el resto del extracto de la parte B observe primero su color con la luz solar y luego obsrveloconunalmparadeluzultravioleta(tengacuidadoenevitarqueestaluzllegue asusojos,yaquepuedequemarlos). BIBLIOGRAFA. Arditti,J.yA.Dunn.1969.ExperimentalPlantPhyslology.Holt,Rineharty Winston,NewYork. Bldwell, R.G.S. 1979. Plant Physiology. 2a.de. Mac Millan, New York. Devlin, R.M. 1975. Fisiologa Vegetal. Ed. Omega. Barcelona, Espaa. Hall, D.O. y K.K. Rao. 1978. Fotosntesis. De.Omega.Barcelona,Espaa.

Clegg,C.J.1973.PlantPhysiology:JohnMurray,AlbemarieSteet,(London.ASELab.Books.

Miller,IICAdelaOEA.CECSA,Mxico,D.F. Richter,G.1972.FisiologadelMetabolismodelasPlantas.TraduccindeL.

Rovalo, Merino, M. y Rojas Garcidueas, M. 197. Experimentos de Laboratorio de FisiologaVegetal.ITESM,Monterrey,Mxico.

Salisbury,F.B.yC.Ross.PlantPhyslology.2nd.De.WadsworthPublishingCo. Inc.Cal.U.S.A..

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PRACTICANo.50 TITULO:IDENTIFICACINDEPLANTASC3YC4
INTRODUCCIN Los aspectos morfolgicos de las plantas estn estrechamente relacionados con los aspectos fisiolgicos y estos a su vez dependen del medio ambiente en donde se desarrollalamisma.EstasmodificacionessehandivididoenlostiposfotosintticosC3,C4 y MAC xerfitas. Estos tipos de plantas han agregado el ciclo bsico de fijacin de CO2. UnaformadediferenciarlasplantasC3YC4esatravsdesuanatoma,yaquelasplantas C3 presentan tpicamente clulas de parnquima en empalizada mientras que las plantas C4tienenclulasdelhazdelavainayclulasdelmesfilo. OBJETIVO IdentificarplantasC3yC4atravsde:Cortesanatmicosfijos MATERIAL PreparacionesfijasdeplantasC3YC4. HojasfrescasdeplantasC3yC4(verdolaga,frjol,maz,). UtensiliosparabaoMaria. Vasoprecipitadode100ml. Alcohol80%. Lugol. Microscopioestereoscopico PROCEDIMIENTO Se le proporcionar un juego de preparaciones fijas para observar al microscopio. Para retirarlaclorofiladelashojasyteirconLugolprocedecomosigue: a)sumerjalahojaenaguahirviendodurante1minuto b) transfiera la hoja a alcohol 80% en un vaso de precipitado. Ponga todo a bao mara hastaquetodoelcolordesaparezcadesta. c) coloque la hoja en una caja de petri con agua para que adquiera una consistencia flexible. d) tire el agua y agregue unas gotas de Lugol sobre la hoja. Despus de 5 minutos lavela. Observe a coloracin y su distribucin en la lmina foliar utilizando un microscopio estereoscpico. BIBLIOGRAFIA Salisbury, F.R.y C .W. Ross. 1944. Fisiologa vegetal. Gpo. Edit. Iberoamericano, Mxico, D.F.

Medina, F.R.1977. Introduccin a la Ecofisiologia Vegetal. Secretaria General de la OEA, Washinton.

104

BIBLIOGRAFIAGENERAL 1. Abeles,D.S.1973.EthyleneinPlantBiology.AcademicPress.NewYork.London. 2. Arumagan, S. And K.G. Shanmgavelu. 1975. Studies of sarcotesta on the seed germinationofpapaya(Cariespapaya).SeedResearch.3(2):7:780. 3. Arditti,J.yA.Dunn.1969.ExperimentalPlantPhyslology.Holt,RinehartyWinston, NewYork. 4. Burd, D. Y Lomas, J. 1976. Mtodos de medicin del rea foliar: un estudio de precisin y rapidez. WMO Sympoolum de Agrometeorologia del Cultivo de Maz. lowaSlalaUniversity,Amea,lowa.TraducingdeE.,SolrzanoV. 5. Bould, C. 1968. Leaf analysis as a diagnostic method and advisory ald in crop Nutrition.Exp.Agriculture.4:1727. 6. Bidwell, R.G.S. 1979. Plant Physiology. 2a.de. Mac Millan, New York. Devlin, R.M. 1975.FisiologaVegetal.Ed.Omega.Barcelona,Espaa.Hall,D.O.yK.K.Rao.1978. Fotosntesis.De.Omega.Barcelona,Espaa. 7. Cocklin, R.E. 1973. An unbreekeable potometer. En C. J. Clegg (Ed.) Plant Physlology.ASELab.Books.London. 8. Cook, R.L. y C.E. Millar. 1949. Plant Nutrition deficiencies.Agr. Exp. Sta. Special bull 355. 9. Clegg, C.J. 1973. Plant Physiology: John Murray, Albemarie Steet, London. Lab. Books. 10. Fernndez, H.y E. Arios. 1989. Estimacin del rea Foliar en Plantas de Cultivo. Porte 1. Agrotecnica de Cu. 15 148. de Resenss, Suelos y Agroqumica. La habana. Cuba. Harl .P.H.1965. A in the grid los estimating crea of grass leaves. Agron J. 57(e):634. 11. Gherardi, E. y I.F.M. Valio. 1976. Ocurrence of promoting inhibitory substances in theseedarilsofCaricapapayaL.J.Hort.Science.51:114. 12. Gaiston, A.W. y Davies, P.J. 1970. Control Mechanims in Plant Development. PrenticeHall,EnglewoodCliffs,NewYersey. 13. HiII,T.A.1977.HormonasReguladoresdelCrecimientoVegetal.Omega,Barcelona, Espaa.
105

14. Halevy, A.H. y Kofranetz, A.M. 1977. Silver treatment of carnation flowers for reducing ethylene damage and extending longevity. J. Amer. Soc. Hort. Sci. 102 (1):7677. 15. Hartman, H.T. y D.F. Kester. 1971. Propagacin de Plantas. Traduccin de Antonio MiranoAmbrosio,C.E.C.S.A.Mxico. 16. Kestah, Z. Carshy, J. y Jarvis, P.G. 1971. Plant Photosynthetic Production Manual of Methods.W.JunhN.V.theHague. 17. Kramer, P.J. 1974. Relaciones Hdricas de Suelos y Plantas. EDUTEX. Mxico. Salisbury,F.B.,yC.Ross.1994.FisiologaVegetal.Gpo.Edit.Iberoamrica,Mxico. 18. Kramer. P.J. 1974. Relaciones Hdricas de suelos y Plantas (versin en espaol de edicinde1969).L.Tejada(trad.)Edutex.Mxico,D.F. 19. Luckwill, L.C. 1981. Growth regulators in crop production. Edward Arnold, Great Britain. 20. Primo.Y.E.yR.Cuat.1968.HerbicidasyFitoreguladores.Edit.Aguilar.Espaa. 21. Lunt, H.A., H.G. M. Jacobson y C.L.W. Swanson. 1950. El sistema Morgan para anlisis de suelos. Boletn 541, Mayo. Estacin Agr. Exp. Connecticut New Haven, USA. Este folleto fue traducido y adaptado en la UACh con el nombre de Qumica AgrcolaAplicadaporOjeda,O.D.yDelgadodeG.Z.enelaode1965,dedondese tomaronlosdatos. 22. Maynard, B.K. N.L. Bassuk. 1996. Effects of stock plant etiolation, shading, bandingand shoot development on histology and cutting propagation of Carpinus betulusL.fastigiata.J.Amer.SocHort.Sci.12(5):853860. 23. Machlis, L. y J.G. Torrey. 1956. Plants in Action. A Laboratory Manual of Plant Physiology.W.H.Freeman,SanFrancisco. 24. Montes Meneses, J. 1969. Correlacin de la longevidad de las semillas de maz y frjolconlaspruebasdetetrazolioygerminacin.Tesis,Fitotecnia,UACH. 25. Mosqueda, V. R. 1969. Efecto de diversos tratamientos aplicados a la semilla de papayasobresupodergerminativo.AgriculturaTcnica.2(11):487491. 26. Machies, L. and J. G. Torrey. 1956. Plants in Action. A Laboratory Manual of Plant Physiology.W.H.FreemanandCompany.SanFrancisco.282p.

106

27. Mitchell, R.C. 1970. Crop Growth and culture. Lowa State University Press. Ame, lowa. 28. Patio, V.F. y Y. Villagmez A. 1976. Los anlisis de semillas y su utilizacin en la propagacin de especies forestales. S.A.G.; S.F.F.; Instituto Nacional de InvestigacionesForestales.BoletnDivulgativoNo.40. 29. Pierre. W.H., Kirkham. D., Pesek. J. y .Shaw, .R. (Edo.) 1996. Plant Enviroment and EfficientWalwUse.4a.Reimpresin(1961). 30. Ross. W.C. 1974. Plant Physlology Laboratory Manual. Wadsworth. Belmont, California. 31. Roberts, J. Y D.G. Whitehouse. 1976. Practical Plant Physiology. Laboratory Manuals.LongnonGroup,GreatBritain.155p. 32. Reid, M.S., D.S. Farnham y E.P. McEnrva. 1980. Effecto of silverthiosulfata and preservativa solutions on the vase lIte of miniature carnations. Hort Science 15(6):807808. 33. Rovalo, Merino, M. y Rojas Garcidueas, M. 197. Experimentos de Laboratorio de FisiologaVegetal.ITESM,Monterrey,Mxico. 34. Richter,G.1972.FisiologadelMetabolismodelasPlantas.TraduccindeL.Miller, IICAdelaOEA.CECSA,Mxico,D.F. 35. Rojas, G. M. 1976. Manual Terico Prctico de Herbicidas y Fitoreguladores. Ed. Limusa.Mxico. 36. Salisbury, F.B. Y W.C. Ross. 1978. Plant Physiology. 2a. Ed. Wadsworth. California Iberoamrica,Mxico,D.F. 37. Salisbury F.B. y C.W. Ross. 1994. Fisiologa Vegetal. Gpo. Edit. Iberoamrica, Mxico.D.F. 38. SARH, Subsecretara de Agricultura y Operacin, 1917. Fertilizacin en funcin del anlisisdelsuelo(porelmtododeMorgan).ServiciodeOrientacin 39. Tcnicaalusuario,hojadeDivulgacin.No.21,Mxico. 40. Salisbury, F.B. y C.W. Ross. 1979. Plant Physlology. 2a. Ed. Wadsworth, Salmont, California. 41. Ting.I.P.1982.PlantPhyslology.AdisonWesleyPublishing.Co.U.S.A.
107

42. Vaver, R.J. 1980. Reguladores del crecimiento de las plantas en la agricultura. Trillas,Mxico. 43. Weaver, R.J. 1980. Reguladores del Crecimiento de las Plantas en la Agricultura. Trillas,Mxico. 44. Wallace,T.1961.Thediagnosisof mineraldeficienciesinplantbyvisualsymptoms, acoloratlas.HerMajesty'sStationaryOffice,London.

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