Talleres

de Biologa- Ciclo Introductorio

MDULO I: AGUA, SOLUCIONES Y PH (talleres 1-4)

Departamento de Bioqumica Facultad de Medicina 2013

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Preguntas y Problemas

La adquisicin de conocimientos es un proceso gradual que, como cualquier otra actividad, necesita ser ejercitada. Las preguntas y problemas que siguen a continuacin tienen como objetivo contribuir a la adquisicin de los conocimientos y destrezas considerados necesarios para este curso y los prximos. La mejor forma de aprovechar este material es que el estudiante, una vez que haya comprendido el tema en el libro de texto, intente contestar las preguntas y resolver los problemas antes de las clases de discusin grupal, de manera de poder aprovechar esa instancia docente para consultar las dificultades encontradas. El estudiante debe tener en cuenta que conocer la respuesta de un ejercicio no necesariamente significa saber resolver el mismo. El objetivo de los mismos solo se alcanza cuando se sabe cmo resolverlo. Es importante destacar que este material forma parte del contenido del curso y por lo tanto, la capacidad del estudiante de resolver estos ejercicios u otros similares ser evaluada en las pruebas parciales. Al iniciar el curso el estudiante deber tener nociones de nomenclatura qumica, bases tericas de estructura, enlace qumico y reaccin qumica. I. Agua, Soluciones y pH Objetivos generales: o o Comprender las bases fsicas y qumicas de los procesos biolgicos. Comprender los principios bsicos que determinan la estructura molecular y la reactividad qumica de las biomolculas sencillas.

Objetivos especficos Al finalizar el tema, el estudiante podr reconocer y describir los fundamentos tericos referidos a: La estructura y propiedades fisicoqumicas del agua. Definicin de enlace de hidrgeno y ejemplos de cmo se forman. Estudiar las interacciones del agua con otras molculas. Disociacin del H2O y producto inico. Definicin de pH. Definicin y escala de pH. cidos fuertes y cidos dbiles. Calculo de pH. Curva de titulacin. Sistemas amortiguadores. Soluciones. Medidas de concentracin: molaridad, normalidad, %. Propiedades coligativas. Osmosis y osmolaridad.

Adems, debe estar capacitado para: - Emplear adecuadamente la terminologa. - Calcular la composicin y concentracin de sistemas en solucin. - Realizar clculos para determinacin de pH. - Definir un sistema buffer e identificar sus componentes.

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I. Agua 1. La molcula de agua tiene naturaleza dipolar: a) explique este concepto. b) Teniendo en cuenta la naturaleza dipolar de la molcula de agua y apolar de la molcula de aceite explique por qu no son miscibles el agua y el aceite. 2. Qu es un enlace de hidrgeno (o puente de hidrgeno)? Nombre 4 grupos funcionales de la Tabla 1 que puedan formar enlaces de hidrgeno con la molcula de agua. Justifique utilizando la tabla de electronegatividades de los elementos. Para la interaccin con cada uno de los grupos funcionales seleccionados indicar cul es el aceptor y el dador de hidrgenos. 3. Qu tipo de interaccin presentan los compuestos que no pueden formar enlaces de hidrgeno con el agua? Nombre 3 ejemplos de de los grupos funcionales que aparecen en la Tabla 1 que no puedan formar puentes de hidrgeno con el agua. Justifique utilizando la tabla de electronegatividades de los elementos. 4. Defina qu es una interaccin carga-dipolo y cmo se forma. Nombre 3 grupos funcionales de la Tabla 1 que puedan formar interacciones tipo carga-dipolo con la molcula de agua. 5. Los enlaces de hidrgeno son importantes en las interacciones entre las biomolculas. En cul o cules de las siguientes interacciones se forman enlaces de hidrgeno? entre dos hidrgenos unidos a tomos de carbono un tomo de nitrgeno y un hidrgeno unido a un tomo de carbono un tomo de nitrgeno y un hidrgeno unido a un tomo de oxgeno 6. Las tres molculas representadas en la figura contienen varios de los grupos funcionales ms importantes en biologa. Identifique esos grupos y sus nombres. Analice la capacidad de formar puentes de hidrgeno, interacciones inicas e hidrofbicas de cada uno de ellos.

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7. Los enlaces de hidrgeno estabilizan las biomolculas en estado slido o lquido haciendo ms elevado su punto de ebullicin. Teniendo en cuenta esta caracterstica, ordene segn sus puntos de ebullicin y en sentido creciente, las siguientes sustancias: - agua (H2O) - metanol (CH3-OH) - ter metlico (CH3-O-CH3) - perxido de hidrgeno (HO-OH). Busque los valores de puntos de ebullicin de estas molculas para confirmar su ordenamiento. Cul es la definicin de solucin? Cmo define la concentracin de una solucin? Qu se entiende por molaridad, normalidad y osmolaridad? II. Soluciones- Medidas de concentracin 8. Cuntos moles de: KCl hay en 15 g? NaCl hay en 9 g? H2SO4 hay en 3 g? Glucosa hay en 90 g? 9. Qu molaridad tendr una solucin de NaCl de: 9 g por litro de solucin? 50 g en 250 ml? 2 g en 400 ml? 10. Qu molaridad tiene una solucin de glucosa al 5% (w/v)? 11. Una solucin contiene en 250 ml, una mezcla de 3 moles de A y 2 moles de B. Calcular la concentracin molar de ambas sustancias. 12. Cuntos gramos de NaOH contienen 1 litro de solucin 50 mM? 13. Para realizar una solucin de Na2HPO4 100 mM a partir de 5 g del slido, en que volumen debo realizarla? 14. Calcular la concentracin normal de las siguientes soluciones: a) HCl 0,5 M b) KOH 1 M c) H3PO4 0,3 mM d) H2SO4 2 M 15. Calcular la osmolaridad de las siguientes soluciones: a) KCl 0,5 M b) MgCl2 2M

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c) HCl 3 mM 16. Ordene las siguientes soluciones por orden creciente de osmolaridad: a) Sacarosa 200 g/L b) Albmina 200 g/L c) Glucosa 200 g/L d) ZnCl2 200 g/L e) CaCl2 200 g/L 17. Existe una gran variedad de iones y molculas disueltas en el plasma que son responsables de su osmolaridad. Los de mayor peso (debido a su concentracin e importancia clnica) son los iones de sodio, potasio glucosa y urea. Entre los datos que se obtienen en las pruebas de laboratorio se encuentran los valores de concentracin de Na+, K+, Glucosa y urea (o el Nitrgeno ureico sanguneo, BUN). A partir de estos datos, el clnico puede calcular la osmolaridad del plasma del paciente usando alguna de las siguientes frmulas (equivalentes): Osm plasma =(Na + K) (mmol/L) x 2 + Glicemia/18 (mg/dL) + urea/6 (mg/dL) Osm plasma =(Na + K) (mmol/L) x 2 + Glicemia/18 (mg/dL) + BUN/2.8 (mg/dL) Valores normales (unidades convencionales y SI) Glucosa, 64-107 mg/dL; 3,9-5,6 mmol/L Nitrgeno ureico (BUN), 5-20 mg/dL; 0,8-3,3 mmol/L Osmolalidad, 285-295 mOsmol/kgH2O Osmolaridad, 280-300 mOsmol/L Potasio, 3,5-5,0 mEq/L; 3,5-5,0 mmol/L Sodio, 135-145 mEq/L; 135-145 mmol/L Urea, 10-40 mg/100 mL; 1,7-6,7 mmol/L Calcule la osmolaridad plasmtica (segn esas formulas) de un paciente con los siguientes datos de laboratorio: Glucosa: 310 mg/dL Urea: 35 mg/dL Na+: 140 mEq/L K+: 4.5 mEq/L Cmo sera la condicin de este paciente, teniendo en cuenta estos datos?

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Complete la siguiente tabla Tabla 2 NaOH NaH2PO4 KCl CuNO2 K2SO4 Molaridad 2 M 200 mM 500 mM Masa de Soluto 3 g 100 mg 20 g Volumen de Solucin 2 L 600 mL 500 mL 1 L

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Complete la siguiente tabla

Tabla 3 KOH H3PO4 HCl NaOH Masa Soluto 6 g 500 mg Volumen Solucin 200 mL 300 mL 1 L Molaridad Normalidad 200 mN Osmolaridad w/v (%) 4 Osm 2 %

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Cmo se define la constante de disociacin del agua y qu relacin tiene con el pH? Cmo se definen los cidos y las bases? Que diferencias hay entre un cido dbil y un cido fuerte? Cmo se calcula en pH de una solucin de un cido fuerte? y de un cido dbil?

III. pH, cidos y Bases 20. Calcular la concentracin de H+ en una solucin cuya concentracin de OH- es 0.01M. 21. Calcular la [H+], la[OH-], el pH y el pOH en cada una de las siguientes soluciones a ) solucin de HNO3 0.035 M b ) solucin de KOH 0.15 M c) solucin de H2SO4 0.02 M d) solucin de Ca (OH)2 0.02M e) solucin de HCl 0.0004 moles/mL f) solucin de KOH 0.002 moles/L g) solucin de NaOH 0.01 M h) solucin de Ca(OH)2 0.01 mmoles/dL i) solucin de HCl 0.1M j) solucin de NaOH 0.2 moles/100mL k) una solucin de pOH 6.6 l) una solucin de pH 7.4 22. Se prepara una solucin de HCl disolviendo 0.05 moles en 150 mL de solucin. Calcule el pH y el pOH de esa solucin. 23. Se prepara una solucin de NaOH disolviendo 0.55 gramos de NaOH en 2.5 L de solucin. Calcular la [H+], [OH-], el pH y el pOH de la solucin. 24. Calcule el pH de una solucin de NaCl 0.5 M y de una 1M. Explique su resultado. 25. La concentracin de una serie de soluciones de HCl es la siguiente: A...............................................1 x10-4 M B...............................................2 x 10-2 M C...............................................1 x 10-8 M D...............................................1 x 10-3 M a) Cul es la que tiene mayor concentracin de H+? b) Cul es el pH de cada una de ellas? c) Cul es la concentracin de OH- en cada una de ellas?

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26. El pH del agua es 7,0 y el pH del plasma es 7.4. Si el pH del plasma desciende a 7.0 el individuo experimenta gravsimos trastornos con prdida de la conciencia. a- Calcule cuntas veces ms concentrada es la concentracin de H+ en el agua pura que en el plasma. b- Explique la razn formal por la cual la gran diferencia en concentracin de hidrogeniones se corresponde con una pequea diferencia en la escala de pH. 27. Sabiendo que el pKa del cido actico (CH3COOH) es de 4,76 a. cul ser su constante de disociacin? b. Calcular el pH de una solucin 0,01M de cido actico 28. Cul ser el pH de una solucin preparada mezclando 100 ml de una solucin de cido actico (CH3COOH) 0,05 M con 250 ml de acetato de sodio (CH3COONa) de igual molaridad? 29. Defina sistema buffer Por qu mecanismo un sistema buffer amortigua el aumento o la disminucin de la concentracin de H+? Por qu mecanismo amortigua el agregado de OH-? 30. Dadas las siguientes soluciones: NaCl 0,155 M NaHCO3 0,100 M CH3COOH 0,100 M KCl 0,300 M a) Cul o cules tiene(n) pH cido? b) Cul o cules tiene(n) pH bsico? c) Cul o cules pueden constituir un sistema buffer acidificando o alcalinizando apropiadamente la solucin? d) Cul o cules tiene(n) la misma osmolaridad que el plasma? 31. Realice en forma esquemtica la grfica de la curva de titulacin del cido actico (tal como se muestra en la figura) e indique: a) punto inicial, y final de la titulacin b) el pKa. c) En cada uno de estos puntos y en las zonas intermedias definidas por los mismos, indique cul o cules especies moleculares o inicas

estn presentes. Si hay ms de una especie indicar la relacin de concentraciones entre ellas (en trminos de mayor, menor o igual). d) Cules son las diferencias con la curva de titulacin de un cido fuerte como el cido clorhdrico? Represntela sobre los mismos ejes. 32. Realice la grfica de la curva de titulacin del cido fosfrico e indique: a) punto inicial, y final de la titulacin de cada uno de los protones disociables cada uno de los pKas. b) En cada uno de estos puntos y en las zonas intermedias definidas por los mismos, indique cul o cules especies moleculares o inicas estn presentes. Si hay ms de una especie indicar la relacin de concentraciones entre ellas (en trminos de mayor, menor o igual). 33. Los aminocidos son cidos dbiles poliprticos. El aminocido glicina (H2NCH2COOH) tiene dos grupos ionizables: el grupo carboxilo (cido carboxlico, - COOH) y el grupo amino (grupo bsico, -NH3+) Agregando NaOH a una solucin de glicina (pH=1) obtenemos la curva de titulacin del aminocido. a) escriba las expresiones de disociacin del cido carboxlico y del grupo amino (expresin del tipo: AHA- + H+) b) Indique las especies inicas predominantes en cada uno de los puntos: inicial, pKa1, PI (punto isoelctrico), pKa2 y punto final.

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34. Actividad prctica: Soluciones amortiguadoras. Los indicadores colorimtricos de pH son sustancias que permiten estimar el pH de una solucin mediante un viraje en su color. De esta forma, estas sustancias no permiten determinar el pH exacto de la solucin problema, pero si determinar si se trata de una solucin cida, neutra o alcalina. No todos los indicadores sirven para todos los rangos de pH, sino que debe seleccionarse el ms indicado para nuestro experimento segn su punto especfico de viraje. Aqu se puede ver un tabla de los principales indicadores de pH y sus distintos colores y puntos de viraje: En este prctico vamos a trabajar con el rojo fenol que es un indicador de pH que presenta un color entre magenta y rojo a pHs alcalinos, y amarillo a pH cidos (con un rango de viraje entre 6.6 a 8.0). Utilizando este indicador de pH vamos a evaluar 4 sistemas amortiguadores (buffers) distintos: 1) Buffer preparado mezclando 54,4 mg de KH2PO4 y 69.7 mg de K2HPO4 y llevando la solucin a 4 mL de volumen final. 2) Buffer preparado utilizando 40 mL del buffer 1 y llevando a 4 mL de volumen final. 3) Buffer preparado mezclando 2 mL de una solucin de H3PO4 0.8 OsM, con 2 mL de una solucin 27.2 mg/mL de KH2PO4. 4) Una dilucin 1/100 del buffer 3. Utilizando los conocimientos previos y los valores de pKa del cido fosfrico (ver ejercicio 32) calcule la concentracin total de fosfato (suma de las dos especies) y el pH de cada una de estas soluciones amortiguadoras.

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* Sern estos sistemas buenos amortiguadores? En que rango de pH amortiguar cada uno? * De que depende la capacidad amortiguadora de un sistema buffer? Ser alguno ms efectivo amortiguando los cambios de pH que otro? * Que pasar al agregar una gota del indicador de pH rojo fenol a cada uno de los buffers? de qu color quedara la solucin? * Y si agregamos una gota de una base fuerte (NaOH) concentrada a cada tubo habr algn cambio en el color del indicador de pH? Contestadas estas preguntas completa las dos primeras columnas de la siguiente tabla, e intenta predecir los resultados obtenidos al agregar una gota del indicador de pH rojo fenol, y posteriormente una gota de NaOH concentrada: Color de la solucin Color de la solucin Concentracin al agregar una gota pH al agregar una gota de Buffer de NaOH de Rojo Fenol concentrado Buffer 1 Buffer 2 Buffer 3 Buffer 4

IV. Sistemas amortiguadores En el Taller IV realice el experimento en clase, complete nuevamente la tabla y discuta si los resultados obtenidos concuerda con los resultados esperados: Color de la solucin Color de la solucin Concentracin al agregar una gota pH al agregar una gota de Buffer de NaOH de Rojo Fenol concentrado Buffer 2 Buffer 3 Buffer 4 Ciclo Introductorio 2013 Buffer 1

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Sistemas amortiguadores fisiolgicos La concentracin de protones es una de las constantes del medio interno que debe mantenerse dentro de lmites muy estrechos, siendo el rango de pH normal de 7.40 0.04. Para controlar el equilibrio cido-base del medio interno, los seres vivos disponen de un conjunto de sistemas amortiguadores. Los sistemas amortiguadores fisiolgicos pueden clasificarse en dos grupos: los inorgnicos y los orgnicos. Entre los amortiguadores inorgnicos ms importantes se encuentran el sistema fosfato dibsico (H2PO4)/ fosfato monobsico (HPO42) y el sistema cido carbnico (H2CO3)/bicarbonato (HCO3). Entre los amortiguadores orgnicos se encuentran los aminocidos y protenas intracelulares, en particular la hemoglobina. El principal producto cido del metabolismo celular es el dixido de carbono (CO2) que representa un 98% de la carga cida total. Aunque no se trate de un cido, pues el CO2 no contiene H+, se trata de un cido potencial ya que su hidratacin mediante una reaccin reversible catalizada por la anhidrasa carbnica genera un cido, el cido carbnico (H2CO3): CO2 + H2O H2CO3 HCO3 + H+ El metabolismo genera adems una serie de cidos no voltiles (cidos fijos) que representan el 1-2% de la carga cida y cuya principal fuente es el catabolismo oxidativo de los aminocidos. Mientras que el CO2 (g) es eliminado casi totalmente por los pulmones, el rin es el principal rgano responsable en la eliminacin de los cidos fijos. La sucesin de mecanismos es: 1. amortiguadores intra y extracelulares, 2. compensacin respiratoria y 3. compensacin renal. 35. Sabiendo que los pKa del cido fosfrico son pKa1= 2,12; pKa2= 6.8 y pKa3= 12,67. a. Calcula las proporciones de las siguientes especies H3PO4, H2PO4, HPO42 y PO43 a pH fisiolgico de 7,4. Considera que el fosfato es un buen amortiguador intracelular para cidos? y para bases? c. La concentracin de fosfato inorgnico total en el lquido extracelular es de 2mEq/L , mientras que la concentracin intracelular es de 113 mEq/L. Si asumimos que el pH en ambos medios es de 7.4, calcule la concentracin de las distintas especies en cada uno de los compartimentos. Ciclo Introductorio 2013

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36. La gasometra arterial es una prueba de laboratorio que permite determinar el pH, la concentracin de O2 (presin parcial de O2) y de CO2 (presin parcial de CO2) en sangre. En el caso de un paciente que consult en emergencia se constatan los siguientes valores: pH= 7.42, pO2 = 95 mmHg, pCO2= 39 mmHg . Como el CO2 disuelto se hidrata rpidamente es considerado la forma cida del sistema amortiguador H2CO3/HCO3-. La concentracin de CO2 depende de su constante de solubilidad (0.03 mM.mmHg-1) por la presin parcial de CO2 (en mmHg). a. Sabiendo que el sistema tiene un valor de pKa de 6,1, calcule la concentracin de HCO3- plasmtica. El rango normal de concentracin es entre 22-28 mEq.L-1. b. A pesar de que su pKa est muy alejado del pH fisiolgico (7,4), este es un sistema muy eficaz debido a que es un sistema abierto. Explique por qu se le denomina abierto. 37. Si consideramos a la hemoglobina como un sistema amortiguador podemos plantear que: HbH+ Hb + H+ Las propiedades amortiguadoras de la hemoglobina desempean un papel fundamental en el transporte sanguneo del CO2 tisular hasta su eliminacin pulmonar. Explique cul es esta relacin y como se denomina este fenmeno.

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