Practicario del UVWinLab

El UVWinLab es una programa que se ejecuta con una computadora personal PC, que sirve para controlar las operaciones bsicas del espectrofotmetro uv/vis serie Lambda 10 y 20 de Perkin-Elmer. Se asume que la persona que opere dicho sistema ya est familiarizada con programas en Windows y con el mouse. El Manual del Programa UVWinLab da una descripcin mas detallada de las funciones utilizadas en cada prctica.
Material

Se va a utilizar acetona, polvo de gis y los colorantes Fuchsina Bsica y Orange G. Los detalles se mencionan en cada prctica.
Como iniciar

Se debe de encender la computadora personal y el espectrofotmetro. En la pantalla aparecen varios conos, se debe de hacer doble clic en el que dice Lambda y el programa se iniciara, a continuacin se muestra como.

Dentro del programa aparecer esta pantalla

Scan (Barrido)
Se usa para establecer los parmetros que controlan el barrido del espectro. Se puede entrar haciendo click en su cono y tambin con la opcin de Scan que est en el men Application.

Para aprender a usar este mtodo se va a hacer una prctica con acetona. Se debe de preparar una solucin de acetona diluida en agua con la proporcin de 1:200. Lo primero que se debe de hacer al abrir el mtodo de Scan es llenar los datos de la pgina Scan tal y como se muestra a continuacin.

A continuacin se hace click en la etiqueta Inst. que se encuentra en la parte baja de la pantalla. Tambin se pone lo mismo que se muestran a continuacin.

Por ltimo se hace click en la etiqueta de Sample y se le da un nombre a la muestra.

Ya que se tiene la seguridad de que todos los datos estn correctos se hace click en File y se elige la opcin de Save as para darle el nombre de acetona al mtodo. Despus se oprime Setup para que la computadora actualice la informacin y cuando est listo el instrumento para trabajar el botn de Start cambia a color verde. Se oprime Start y se espera a que aparezca la siguiente leyenda.

Se coloca el blanco (en este caso agua) en el portaceldas del espectrofotmetro y se hace clic en Aceptar.

Al acabar de leer el blanco el instrumento pide que se inserte la muestra, en este caso la solucin de acetona.

Se hace clic en Aceptar y aparece en la pantalla una grfica de longitud de onda (nm) vs. Absorbancia.

Para arreglar fcilmente la escala de la grfica del espectro, se hace clic en el cono de Radar y aparece una pantalla mas pequea en donde se debe de marcar con la ayuda del mouse el rea que se desea observar del espectro.

En el mtodo de Scan tambin se puede hacer el barrido de varias muestras al mismo tiempo, lo nico que se tiene que hacer es darle el numero de muestras

en la pgina de Sample que anteriormente usamos. Esto se tiene que hacer antes de que empiece a trabajar el instrumento. A continuacin se muestra el espectro de la acetona a diferentes concentraciones 1:100, 1:200 y 1:400.

Para encontrar los picos de mxima absorcin se debe de hacer click en el icono Find peaks y oprimir en el botn de OK, esto se hace para cada espectro.

Una vez encontrados los picos se le puede agregar un texto haciendo clic en el icono de Text.

Finalmente queda as el espectro y est listo para imprimirse con la opcin de Print que se encuentra en el men de File.

Tambin es muy importante guardar tanto los resultados como el mtodo creado esto se hace con la opcin de Save as que est en el men de File.
Time Drive (manejo del tiempo)
Se usa para establecer los parmetros que controlan las mediciones que se hacen en un periodo de tiempo. Se puede entrar tambin con la opcin de Time Drive que est en el men Application.

Para esta prctica vamos a utilizar una solucin de gis en polvo disuelto en 10 ml de agua. Se agita la solucin y se llena una celda para su medicin. En la pgina de Timed. se deben de establecer las mismas condiciones que se muestran abajo.

A continuacin se hace click en la etiqueta de Inst. y se establece lo siguiente.

A continuacin haciendo click en la etiqueta de Sample se debe establecer el nombre de la muestra y del archivo en donde se quedaran almacenados los resultados.

Ya que se tiene la seguridad de que todos los datos estn correctos se hace click en File y se elige la opcin de Save as para darle el nombre de gis al mtodo. Despus se oprime Setup para que la computadora actualice la informacin y cuando est listo el instrumento para trabajar el botn de Start cambia a color verde. Se oprime Start y se siguen las instrucciones que da el programa primero insertando en el portaceldas el Blanco y despus la muestra. En esta prctica es importante agitar bien la muestra antes de que el instrumento la empiece a medir. Al terminar aparece en la pantalla una grfica como la siguiente y para calcular la pendiente de la grfica se hace clic en Data calculator que esta en el men Data handing.

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Esta pantalla aparece cuando se selecciona en Dataset el archivo con el que estamos trabajando que es gis.td. Tambin en Algorithm se debe de escoger la opcin de Slope al igual que en Function.

Se tiene que dar el rango de la escala para calcular la pendiente y se puede hacer fcilmente haciendo click en el icono del cursor y llevando el puntero del mouse a la grfica y haciendo click en donde se crea conveniente; al terminar se oprime OK. Finalmente se hace clic en Calculate.

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Inmediatamente el programa calcula la pendiente y da el resultado numricamente como a continuacin se muestra.

Wave Prog (programacin de longitudes de onda).

Se usa para establecer los parmetros que controlan las mediciones a varias longitudes de onda. Se puede entrar tambin con la opcin de Wave Prog que est en el men Application. Para esta prctica se van a usar dos colorantes Fuchsina Bsica (rosa) y Orange G (amarillo). Se pesa aprox. 1 mg de cada muestra y se disuelve en 20 ml de agua. De la solucin madre se toma una alcuota de 3 ml y se disuelve nuevamente en 17 ml de agua, con esta solucin se trabaja. Se puede hacer un barrido de los colorantes en Scan para ver los picos de mxima Absorcin, obteniendo una grfica como la siguiente.

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En el mtodo de Wave Prog vamos a analizar una mezcla de los dos colorantes anteriores y vamos a medir la Absorbacia en las dos longitudes de onda en que tienen su pico mximo; en este caso 478.3 y 543.5. En la pgina de Wavep se deben de establecer las mismas condiciones que se muestran abajo.

A continuacin se hace click en la etiqueta de Inst. y se establece lo siguiente.

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A continuacin haciendo clic en la etiqueta de Sample se debe establecer el nombre de la muestra y del archivo en donde se quedarn almacenados los resultados.

Ya que se tiene la seguridad de que todos los datos estn correctos se hace click en File y se elige la opcin de Save as para darle el nombre de mezcla al

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mtodo. Despus se oprime Setup para que la informacin y cuando est listo el instrumento para cambia a color verde. Se oprime Start y se siguen programa, primero insertando en el portaceldas Muestra

computadora actualice la trabajar el botn de Start las instrucciones que da el el Blanco y despus la

Finalmente en la pantalla aparece una tabla con los resultados de la medicin.

Conc (concentraciones)
Se usa para establecer los parmetros que controlan la medicin de concentraciones. Se puede entrar tambin con la opcin de Conc que est en el men Application. Para esta prctica vamos a utilizar el colorante Orange G (amarillo) y se van a preparar varias disoluciones a diferentes concentraciones. Se pesa 1 mg de Orange G y se disuelve en 20 ml de agua. De la solucin madre se toma una alcuota de 1, 3, 5 y 7 ml y se disuelven cada uno en 10 ml de agua, con estas soluciones se va a trabajar. Se puede hacer un barrido de las muestras en Scan para ver los picos de mxima Absorcin, obteniendo una grfica como la siguiente.

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En la pgina de Conc se deben de establecer las mismas condiciones que se muestran abajo.

A continuacin se hace click en la etiqueta de Inst. y se establece lo siguiente.

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En la pgina de Refs. se debe de dar toda la informacin de las muestras que preparamos, porque estas se van a usar para construir una curva de calibracin que nos va a servir para determinar la concentracin de una muestra problema. La siguiente imagen muestra exactamente como se deben de establecer los datos para esta prctica.

A continuacin haciendo click en la etiqueta de Sample se debe establecer el nombre de la muestra problema y del archivo en donde se quedarn almacenados los resultados.

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En la pgina de Output se recomienda nicamente seleccionar la opcin de Autosave.

Ya que se tiene la seguridad de que todos los datos estn correctos se hace click en File y se elige la opcin de Save as para darle el nombre de amari al mtodo. Despus se oprime Setup para que la computadora actualice la informacin y cuando est listo el instrumento para trabajar el botn de Start cambia a color verde.

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Se oprime Start y se siguen las instrucciones que da el programa insertando en el portaceldas el Blanco. Despus se pide que se inserten las muestras para la curva, es muy importante que lleven el mismo orden que se estableci en la pgina de Refs.

Cuando el instrumento termina de leer todas las muestras aparece en la pantalla de la computadora una grfica de calibracin como la siguiente.

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Tambin se despliega una tabla en donde se comparan los valores exactos de Absorbancia y Concentracin. En la tabla se incluye la ecuacin de la lnea que satisface estos puntos y tambin el coeficiente de correlacin.

Despus de estos resultados el programa da varias opciones para mejorar la curva de calibracin creada y aparece un recuadro en donde se puede volver a analizar una muestra con Reanalyze, aadir una nueva con Add borrar una existente con Delete. Tambin es posible cambiar el tipo de curva seleccionada con Change Calibr. Function para mejorar el coeficiente de correlacin. Una vez que se esta satisfecho con la curva de calibracin se oprime Analyse Sample para que el instrumento analice la muestra problema. A continuacin se muestra el resultado de este anlisis.

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Este mtodo se puede utilizar posteriormente slo para analizar muestras problema, lo que se tiene que hacer es guardar la curva de calibracin haciendo click en Use existing calibration que esta en la pgina de Refs.

Como Salir del Programa

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Para salir del programa UV WINLAB hacer clic en FILE y elegir EXIT. Aparecer una pantalla donde nos pregunta si queremos almacenar resultados, grficos y mtodos obtenidos en la sesin que deseamos finalizar. Se hace clic en SAVE ALL si queremos guardar todo lo establecido y obtenido durante la sesin de trabajo. Si slo se desea guardar algunos mtodos, resultados o grficas se hace clic en SAVE SELECTED y elegir la informacin que deseamos almacenar.

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INDICE: Pg Repaso de cmo iniciar la sesin en Windows ................................................ 1

Scan (Barrido) ...................................................................................................

Time Drive (Manejo del tiempo) ...................................................................... Wave Prog (Programacin de longitudes de onda)... Conc (Concentraciones) Como salir del programa .

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