Bioelectricidad II

Dr. Ulate
Bioelectricidad Cap.4: Canales Inicos

Por Laura Rojas Los canales inicos son protenas integrales, tienen que atravesar de lado a lado y entonces, como son protenas, les reza lo de la estructura primaria, secundaria, terciaria y cuaternaria. Los canales inicos tienen selectividad, quiere decir que cuando compare la permeabilidad a los diferentes iones, generalmente existe mayor permeabilidad para un tipo de in que para otro, algunos son ms selectivos que otros. Hay unos que no son tan especficos que son especficos para cationes pero que dentro de los cationes no muestran mucha selectividad. Los podemos clasificar adems segn el tipo de in que dejan pasar, tambin dependiendo del estmulo que aumenta su probabilidad de apertura (Po). Tenemos canales operados por voltaje, por estiramiento (que tambin se llaman mecanosensibles), por mensajeros extracelulares (que tambin se llaman receptores inotrpicos), por mensajeros intracelulares o por el contenido dentro de los almacenes, sobre todo de calcio. Los canales adems de poderse clasificar segn el estmulo que aumenta la Po tambin los podemos clasificar dependiendo de su comportamiento en las curvas IV, una curva IV se construye cuando en el eje Y ponemos como cambia la corriente que fluye a travs de un canal dependiendo de cmo cambia el voltaje de la membrana, que es lo que va en X. I de corriente y V de voltaje. Si esa relacin es lineal, recta de pendiente constante, se dice que el canal tiene un comportamiento hmico porque se comporta de acuerdo a la ley de ohm. Pero si no obedece a una funcin lineal de pendiente constante y tiene ms o menos pendiente, decimos que es un canal rectificador. Los canales inicos como son protenas transmembranales, resultan, que cuando la protena atraviesa la membrana, la bicapa, ah los aminocidos toman una conformacin de alfa hlice, entonces cada vez que atraviesa la bicapa esa conformacin de alfa hlice la representamos como un cilindro. Los canales en su estructura cuaternaria estn conformados por varias subunidades y las subunidades en la mayora de las veces tienen varios segmentos transmembrana. Por ejemplo, un canal puede estar conformado por cuatro subunidades de un tipo, dominios o motivos, cuando es cuatro motivos o dominios, es una sola secuencia de aminocidos que tienen 24 segmentos transmembrana en grupitos de seis, a cada grupito de seis se le llama dominio. La parte principal del canal es donde est el poro, por donde van a pasar los iones. Si nos vamos a la estructura ms especifica ya sea de un dominio o de una subunidad, tenemos que existen seis segmentos transmembrana y que cuando ese canal es operado por voltaje, lo que quiere decir que su probabilidad de apertura aumenta ante un cambio del potencial de membrana de la clula, encontramos que en el segmento transmembranal 4 hay aminocidos que

generalmente son argininas (R) o lisinas (K) y que debido al pH al que estn sometidos en ese entorno tienen carga positiva. Generalmente se necesitan de 3 a 4 aminocidos para dar cada vuelta. En total unos 20 aminocidos. El nmero de vueltas que da, ms o menos, son 6. En el sensor de voltaje en el segmento transmembranal 4, cada 3 o 4 aminocidos hay una arginina o una lisina, lo que pone a todos esos aminocidos que estn cargados positivamente mas en lnea. Esas cargas positivas sufren movimiento cuando se modifica el potencial de membrana. Al moverse esas cargas positivas se cambia la conformacin de la subunidad o del dominio. Ese cambio de conformacin hace que la parte que forma el poro cambie de conformacin y entonces el lugar por donde tiene que pasar el ion se abra. Debido a esto vamos a dividir a la subunidad o al dominio en dos partes, todos los primeros cuatro segmentos transmembrana se les llama dominio sensor de voltaje (S1S4) y a los otros dos segmentos transmembranales (S5-S6) se les llama el dominio del poro. Realmente quien sensa es S4 pero lo que pasa es que por ah hay algn que otro aminocido cargado positivo que de alguna forma le ayuda a S4 y por eso a todos esos 4 juntos se les llama el dominio sensor de voltaje. Pero el sensor real, la parte ms importante, est en S4 que es donde mas argininas y lisinas hay. Cuando se sensa el voltaje, por medio del asa, (en esta asa hay otra alfa hlice), el asa que pega S4 con S5 hace que el otro dominio cambie de conformacin. El dominio poro que est conformado por el dominio transmembranal 5 y el dominio transmembranal 6, entre ellos dos existe una asa, una secuencia de aminocidos que tambin tiene otra alfa hlice pequeita y esa asa se internaliza dentro de la bicapa. (Tengo 4 subunidades o motivos, tengo 4 asas y estas 4 forman el poro). Qu es lo que pasa cuando se va a abrir el poro? Donde se empez a estudiar esto es en el canal de una bacteria, en un canal para potasio, resulta que ese canal para potasio en realidad no tiene dominio sensor de voltaje, est formado por 4 subunidades y cada una lo que tiene es el S5 y el S6, nada ms. Los Kir en el ser humano son igualitos a este canal que est en la bacteria, M1 es como el S5 y M2 como el S2. El canal est conformado por 4 subunidades y cada subunidad tiene el dominio del poro, por ende no es sensible al voltaje, tendr otras cosas que aumenten su Po, por ejemplo, tal vez est abierto bastante al potencial de membrana de reposo, puede ser que tambin est bloqueado y lo que se necesita es que se quite el bloqueo de ah, realmente no es voltaje dependiente. Lo que ahora se sabe es que los que si son voltaje dependientes y los que no son voltaje dependientes, funcionan igual cuando se tiene que abrir el poro y lo que pasa es lo siguiente, cuando est cerrado S5 y S6 estn inclinados y los cuatro S6 son los ms inclinados y por dentro los cuatro S6 estn enroscados unos con otros. Existe un aminocido clave en el centro de los M2, o sea en los S6, que es una glicina que es la que permite que cuando se d, en el caso de los canales voltaje dependientes, se sense el cambio de voltaje, o en el otro caso se sensen alguno de los otros estmulos que lo abren como la fosforilacin, esta glicina es la que permite que los M2 se quiebren al medio y al quebrarse al medio la parte que est hacia la parte interna se separe y ms bien abran el canal, al abrir el canal el LEC ingresa y lo que va a entrar junto con el LEC son los iones que en este caso, si es un canal selectivo para potasio lo que va a entrar mas es potasio Por 2

qu? Porque generalmente existe un anillo, en este caso cargado negativamente, que ms bien atrae a los cationes y el catin ah preferencial, el que ms va a existir es el potasio y esto permite que entre el potasio a la cmara anterior del canal, luego viene la parte ms estrecha que es ya el poro propiamente dicho, ah el potasio va a quedar ms aislado, y luego de la cmara anterior y de la parte estrecha ya viene el asa P. En el poro hay 4 asas P, todas esas asas P tienen determinados aminocidos, estos aminocidos forman de nuevo anillos cargados negativamente por grupos carboxilo, esos anillos cargados negativamente le van a ofrecer al potasio la energa suficiente para que se deshidrate, eso es lo que permite que un in ms pequeo como el sodio no pase por ah, pero si el potasio que es ms grande. Por qu si el potasio es ms grande que el sodio, el sodio no pasa por ah si es ms chiquitillo? Porque esos grupos carboxilos no le ofrecen la misma estabilidad al sodio que al potasio y al no ofrecer la misma estabilidad al sodio que al potasio, deshidrata muy bien al potasio pero no deshidratan bien al sodio y entonces aunque el sodio desnudo de aguas es ms pequeo que el potasio desnudo de aguas, el sodio no llega a desnudarse completamente del agua porque no hay quien ofrezca esa estabilidad energtica. El potasio deshidratado tiene un radio mayor que el sodio deshidratado. Un canal puede estar abierto o cerrado (Figura de la izquierda), eso lo mide la Probabilidad de Apertura (Po) eso se mide por medio de una tcnica que se llama el Patch Clamp. La membrana superior est a -70Mv, en la parte inferior est a -20, en cul de los dos registros hay ms Po? En el de abajo. Cuando hago este tipo de experimento me quedo contando el tiempo. Ejemplo, voy a observar el canal durante 3 milisegundos, sumo todos los pedazos abiertos y todos los pedazos cerrados y entonces digo, de todo el tiempo, 3 milisegundos, cunto tiempo estuvo abierto? Entonces tiempo abierto entre el tiempo total me da la Po. Si de los 3 milisegundos solo medio estuvo abierto? 0.5ms/3ms la Po es de 0.166. Pero en cambio lo observ 3 milisegundos y estuvo abierto los 3 milisegundos todo el tiempo. Cul es la Po? 1, es decir, todo el tiempo estuvo abierto. Eso de que el canal pase por diferentes estadios va a depender de la cantidad de energa que tenga ese canal, es como una enzima, va a haber un estado transicional que tiene ms energa que cualquiera de los otros dos ya sea el estado cerrado o el estado abierto.

Cambio de energa durante la transicin conformacional. La curva de la izquierda ocurre a valores de Em cercanos a los de reposo y la de la derecha durante la despolarizacin. Gc: energa en el estado cerrado. G* energa durante la transicin y Ga energa en el estado abierto. Entre menos energa tenga ms estable es la conformacin.

A. Supongamos que esta curva ocurre a B. Supongamos que esta curva ocurre a -70mV. -20mV. A -70mV, es cerrado o abierto como es ms estable? Cerrado. A -20 es cerrado o abierto como es ms estable? Abierto. Entonces B es lo que va a pasar conforme la membrana se me despolarice, luego cuando se repolarice y pase otra vez a -70 este estado, (A- Gc) se va a volver ms estable. Por ltimo, grficos para describir la Po del canal conforme cambia el potencial de membrana; aqu lo importante es que se describe por medio de ellos cual es el E1/2 Cul es el E1/2 de este canal (el de la imagen de la izquierda)? Me voy a Po 0.5 me fijo cual es el voltaje en el cual existe la probabilidad de que me encuentre el 50% abierto. El E1/2 es -40. Suponga que este canal es fosforilado, debido a la fosforilacin la curva se me desplaza hacia la derecha, el E1/2 aumenta o disminuye? Disminuye, eso qu quiere decir? Ese canal fue fosforilado, la curva se me desplaza hacia la derecha, el potencial de membrana est a -40 ahora que est fosforilado hay ms o menos canales abiertos que cuando no estaba fosforilado? Menos. Muchas veces no tengo el registro y no puedo saber la Po como se explic anteriormente, entonces tengo que usar una frmula que utiliza la constante de Boltzmann, que tiene un valor de 1,38*10-23 JK-1 y la frmula para calcular la Po es, Po= Exp: 2.71 e: carga elemental de un electrn o de un protn 1.6x10-19C. 4

z: es la valencia que tengan todos los sensores de voltaje juntitos, si tiene 4 sensores de voltaje, los 4 sensores juntitos, si cada sensor tiene 3 cargas positivas 4*3=+12 y eso es lo que va en z. K: Boltzmann T absoluta

El tipo de pregunta que se va a hacer aqu es el siguiente, Asuma que un canal voltaje dependiente conformado por cuatro subunidades, en cada sensor de voltaje tiene dos cargas positivas, que ese canal est ubicado en una membrana con un Em de 50mV que el E1/2 del canal es de -40mV y todo eso ocurre a temperatura del cuerpo. Cul es la Po de ese canal a ese potencial de membrana? Las probabilidades de apertura pueden ser superiores a 1? Jams, van a estar entre 0 y 1 y mas nada. Si la Po est en 0.99 quiere decir que prcticamente todos los canales estn abiertos todo el tiempo mientras se mantengan las condiciones del problema. Y si la Po me da 0.0001 quiere decir que bajo esas condiciones prcticamente ningn canal est abierto. Curvas IV de los canales Esta (izquierda) es la curva de un canalito de sodio voltaje dependiente, si yo tengo ese canalito de sodio voltaje dependiente en una membrana y el potencial de esa membrana es de -80 ese canalito est bien cerrado y por ende no est pasando ninguna corriente. Ahora yo tengo ese canalito en una membrana que est a -70 Por el est pasando corriente? Todava no. Lo tengo a -60 por el est pasando corriente? Ya un poquito, y por qu en -80 no me pasaba corriente y ah en 60 de pronto me empez a pasar corriente a travs de l? Qu fue lo que pas exactamente en ese punto? En -65 o -68 el canalito pas de estado cerrado a estado abierto. El canalito est bien abierto en -60 -50 y -40, igual de bien abierto, entonces por qu en -40 la corriente es as de grande y en-60 tan pequea? Por qu si en ambos el canalito est bien abierto en -40 deja pasar ms? Porque la FEM es mayor. Si esa curva representara un solo canalito no debera de comportarse as, esta curva si llega un momento en el que de pronto estaba creciendo mucho y de pronto se viene abajo la corriente es porque ya en este momento no se est refiriendo a un solo canal, sino a muchos canales juntos, o sea, es la corriente macroscpica de muchos canales juntos.

Qu es lo que pasa si yo junto no un solo canal sino muchos que estn dentro de una clula todos? La curva IV juntar el comportamiento de muchos canales. Por qu empez creciendo y despus me empez a disminuir la corriente? Porque los canales se estn inactivando. En +60 qu es lo que est ocurriendo? Ah se llega al potencial de reversin, en +60.6 el sodio en forma neta no sale ni entra entonces en ese punto la corriente es cero, y despus de +60.6 que pas? El sodio est saliendo, entonces la corriente se vuelve positiva. Cmo identifico una curva IV de K? Porque el potencial de reversin de este canal est del lado negativo y ms o menos en -96mv. Si la lnea es recta de pendiente constante es hmica, obedece a la ley de ohm, que quiere decir, entre mas diferencia de voltaje, mas FEM, ms corriente. La corriente macro me aumenta por el nmero de canales, no es lo mismo que yo tenga en el segmento inicial solo 10 canales por micra a que tenga 2000, es mucho mayor la corriente cuando tengo 2000. Si ya usted me dice, yo no voy a cambiar el nmero de canales, no cambio el n, ah s, la corriente cambia por probabilidad de apertura o por FEM, porque el nmero es el mismo. Cuando un canal es hmico cada vez que usted cambia de voltaje la membrana en un determinado nmero de milivoltios la corriente cambia exactamente igual. Pero cuando es un rectificador la corriente es diferente cuando el in entra y cuando sale, en el caso del Kir es un rectificador de entrada porque conduce mas cuando el K entra que cuando sale, pero, hay que saber que el potasio no siempre entra en el Kir. Entonces por ejemplo, tengo un Kir en una clula pancretica beta con un potencial de membrana en reposo de -50mV y pasa a -40. A travs de ese Kir, el potasio entra o sale? Sale, es un Kir pero a travs de l si el potencial de membrana pas de -50 a -40 el potasio sali. Entonces para qu sirven stos canales si para que el potasio entre tiene que estar ms all de -96.6? Los Kir sirven para dos cosas, 1. Cuando estn bien abiertos no van a permitir gran salida de potasio, evita que se salga el potasio. Si yo tuviera en esa clula pancretica ese mismo cambio de -50 a -40 pero fuese un hmico se va a salir un montn de potasio, pero como tengo un rectificador sale menos. Evitan prdida excesiva de potasio. 2. Estabilizan el potencial de membrana en reposo para cambios hiperpolarizantes, o sea, suponga que por alguna razn el potencial de membrana

del miocito cardiaco que estaba en -95 se me va a -100 entonces ah el potasio a travs del Kir entra y entonces va a entrar con ganas y lo que haba llegado a -100 lo devuelve hacia 95. NUNCA EL ION SE VA A MOVER EN CONTRA DE SU FEM JAMAS JAMAS JAMAS JAMASISIMO, NUNCA NUNCA NUNCA -Dra. Surez: Por medio de canales. -Dr. Ulate: por medio de canales porque eso es pasivo, obviamente si usted est utilizando ATP moviliza lo que tenga que movilizar porque est gastando energa. La Na/k atpasa est movilizando los 3 sodios en contrsima de la FEM, para eso gasta ATP. Cuando yo acabo de decir nunca nunca nunca me refiero a canales en los que se d el movimiento gracias a la FEM. En canales es gracias a la FEM, si no, no se mueven. Los canales para K son bastante selectivos para dicho catin, pero hay unos canales no tan selectivos, entonces es importante poder conocer cul es la permeabilidad de un ion o de otro. Para estudiar la relacin de permeabilidad empleo la siguiente frmula,

Primero, para poder hacer este experimento de permeabilidades los dos iones tienen que tener la misma valencia no se puede hacer con uno monovalente y otro divalente. Exp: e Z: Aqu la z si estoy evaluando potasio y sodio, z es +1/ Magnesio y calcio +2 /cloruro y bicarbonato -1. F: Faraday Erev: Potencial de reversin. Ahora nos vamos de canales en canales Canales de Sodio Hay dos grupos, Canales de sodio dependientes de voltaje NaV Epiteliales ENaC/degenerinas

Dependientes de Voltaje (NaV)

A veces son heterotrmeros y a veces heterodmeros. Tienen una subunidad con cuatro dominios. En el 4TM est el sensor de voltaje. Adems de la subunidad alfa pueden tener una o dos betas, generalmente dos. Son activados por un cambio en el potencial de membrana, presentan una rpida inactivacin y son selectivos para el sodio. Entre S5 y S6 hay un asa P extracelular que penetra dentro de la membrana, las cuatro asas, de los cuatro dominios, forman el poro. Cada asa forma un anillo por donde va a pasar el sodio. Los S4 son el sensor de voltaje. Los S6 forman la salida citoplasmtica del poro, aqu se une la tetrodotoxina (TTX), esta toxina la produce un dinoflagelado, los peces la acumulan en los genitales, entonces si uno se lo come tiene riesgo de producir cncer. En una misma clula puede haber diferentes subunidades dependiendo de la ubicacin. En la neurona tenemos lo siguiente, En el soma predomina 1.1 y 1.3. Inicio del axn, segmento inicial, 1.1, 1.2, 1.6.

Lo importante es que los que tienen el menor umbral de activacin son los 1.6. En los axones no mielinizados hay 1.2, en las dendritas 1.2 y 1.6. En cuanto a la oncogenia (desarrollo del individuo a lo largo de la vida), Neurona Intrauterina: 1.3 Neurona Extrauterina: 1.1, 1.2, 1.6. Los canales de sodio voltaje dependientes son modulados por la concentracin de calcio en el LEC, de forma tal que la curva se desplaza segn dicha concentracin. Si el calcio aumenta en el LEC la curva se desplaza hacia la derecha y si disminuye se desplaza hacia la izquierda. El E1/2 de los NaV es de aproximadamente -29, entonces si el calcio ionizado disminuye en el LEC (hipocalcemia) los NaV se vuelven ms excitables, entonces, Su E1/2 aumenta o disminuye cuando 8

hay hipocalcemia? Aumenta, y eso quiere decir mayor excitabilidad, por tanto, si tengo hipocalcemia, los NaV se vuelven ms excitables. Eso explica el signo de Trousseau y Chvostek que presenta la contractura de ciertos msculos ya que la neurona que los inerva se vuelve ms excitable y se da la contraccin. ENaC/Degenerinas Los ENaCs se estudian en rin, son importantes en los epitelios, sobre todo en los tbulos renales a travs de los cuales se da la reabsorcin de sodio. Estn conformados por tres a cuatro subunidades con 2TM, el asa P est entre los dos segmentos. Son bastante selectivos para el sodio y en las neuronas existe una forma de ellos que se llaman ASICs, son de sodio y son canales inicos sensibles al cido, los encuentro en ciertos receptores sensoriales y ante disminucin del pH extracelular aumentan su Po, por eso se llaman sensibles al cido. Canales de Potasio Hay muchos tipos de canales de potasio, los vamos a clasificar en cuatro grupos, Dependientes de voltaje Sensibles al calcio Rectificadores de entrada (Kir) Dos poros (K2P)

Dependientes de Voltaje (KV)

Estos canales poseen cuatro subunidades alfa y cuatro subunidades beta, la terminal amino de las alfa se conoce tambin como dominio T1, se llama as con la letra T porque tiene dos funciones, sirve para que se de la tetramerizacin, o sea que se junten las cuatro alfas, y adems, a travs de T1 se une la beta a la alfa, entonces tenemos cuatro alfas que me abren el canal en s y cuatro betas pegadas por la terminal amino (T1), esta conformacin se llama de bola y la cadena, porque la subunidad beta puede inactivar a los canales y esa forma de inactivacin se conoce as, como el modelo de la bola y la cadena.

Estos canales pueden sufrir dos tipos de inactivacin dependiendo de si inactiva la cola carboxilo o la cola amino, cuando es por la cola carboxilo, Tipo C es lenta. Por la cola amino es la Tipo N y es una inactivacin rpida dada el modelo de la bola y la cadena.

Los tipos de corriente que se generan a travs de los canales de potasio voltaje dependientes los clasificamos en cuatro, Corriente rectificadora retrasada Transitoria Tipo M (inhibida por muscarina) Tipo Erg (por la mosca que baila)

Todas estas cuatro corrientes me las producen solo los KV ningn otro canal. 1. Corriente Rectificadora Retrasada Cuando el PA est en la fase de repolarizacin, se da a travs de una corriente retrasada, esta es lenta tanto en apertura como en su inactivacin, como esta ltima es lenta entonces es tipo C. Estos son sensibles a la tetraetilamonio (TEA), este es un qumico que no lo produce nadie. Para los Kv corresponden las familias de genes de la 1 a la 12, antes haba otra clasificacin pero hoy usamos la de los nmeros. La corriente retrasada la producen los Kv 1, 2 Y 3 que son las letras A, B y C. En el cuerpo humano lo que ms hay son canales de K. Parece ser evolutivamente que cuando comparo canales de sodio, calcio y potasio, los de potasio son los ms viejos, luego calcio y el ms nuevito sodio. 2. Corriente Transitoria Se llama as porque su activacin e inactivacin es mucho mas rpida, entonces tiene una inactivacin Tipo N. Es sensible a la toxina 4-aminopiridina (4-AP), esta corriente no la produce un solo tipo familia, se produce en varias y en algunas de sus isoformas, por ejemplo, dentro de la 1 la 1.4 dentro de la 3 la 3.4, dentro de la 4 la 4.1 y la 4.3.

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Esta corriente, en muchas neuronas, es la encargada de manejar la frecuencia de disparo, porque resulta que entre ms rpido se me inactive, ms frecuencia de disparo de esa neurona y recuerden que en las neuronas como siempre tiran los potenciales del mismo tamao no pueden codificar por tamao de potencial, sino que codifican por frecuencia de disparo. 3. Corriente Tipo M M porque se inhibe con muscarina. Su inactivacin es lenta y carece de inactivacin, cuando se activa sigue ah y sigue dejando salir potasio tendiendo as a la hiperpolarizacin, entonces la muscarina me la inhibe, no se sale ese potasio y se recupera de la hiperpolarizacin, se acerca al umbral y se vuelve ms excitable. 4. Corriente Erg Presenta una cintica ms rpida de inactivacin que de activacin, por lo que tambin es transitoria, es generada por la familia KV 11 que tambin la vamos a or en miocitos cardiacos. En los miocitos ventriculares es responsable de la fase 3. Sensibles al Calcio La Po se desplaza a la izquierda cuando hay mucho calcio, se comportan al revs de los de sodio, pero no por el calcio extracelular, aqu la concentracin de calcio que modula es la que est dentro de la clula, esto es en el citosol, en cambio los del sodio es por afuera, aqu es por dentro porque, entre otras cosas, en su terminal carboxilo o tienen un lugar donde el calcio se pega o tienen ah calmodulinas pegadas que cuando el calcio se pega, cambia la Po. Los canales de potasio sensibles al calcio se dividen en dos grandes grupos de acuerdo con la conductancia que presentan al activarse, BKCa Gran Conductancia. SKCa Poca Conductancia.

La principal diferencia es que la subunidad alfa de los BKCa tiene 7TM, por ende la cola amino est afuera y al primer segmento se le da el nmero cero. La otra diferencia en los BKCa es que el calcio se une directamente. En los SKCa lo que hay son calmodulinas, entonces el calcio se pega a stas. Rectificadores de Entrada (Kir) Conformados por cuatro subunidades, con 2TM. Por qu rectifican? Por qu si el potencial pasa de -100 a -120 conducen mejor que si el potencial pasa de -80 a -60? El chiste es que ellos cuando 11

conducen mal es porque estn bloqueados por un magnesio o por unas sustancias orgnicas que se llaman poliaminas, generalmente es magnesio. Entonces si el potencial de membrana est despolarizado, aqu hay un magnesio bloqueando por la boca interna, este magnesio se separa de ah cuando el potencial de membrana se hiperpolariza, mayor de -90mv, cuando se hace mayor que esto, el magnesio se desplaza y cuando el potencial de membrana es inferior a -90mV ese magnesio lo est bloqueando. Poliaminas como la espermina. Canales de 2 poros (K2P) o de Fondo Estn conformados por dos subunidades alfa, cada subunidad con cuatro segmentos transmembranales, (S1, S2, S3 y S4) pero en estos hay dos asas P que juntas me forman dos poros, o sea que un canal 2P contiene dos poros, dos canales, por donde puede pasar el potasio. Son probablemente los que estn ms abiertos en el potencial de reposo de las clulas. En reposo las clulas tienen mayor conductancia al potasio gracias a que hay de estos canales abiertos en reposo. Canales de Calcio Los canales de calcio los dividimos en tres grupos, Dependientes de voltaje Intracelulares Operados por almacenes de calcio

Los Intracelulares estn en la membrana del retculo endoplsmico (sarcoplsmico en msculo) por eso se dice que son intracelulares, porque estn en la membrana de una organela. Dependientes de Voltaje (CaV)

Los canales de calcio voltaje dependientes se clasifican en, Tipo L Tipo P/Q Tipo N 12

Tipo R Tipo T

Si yo empiezo a despolarizar una clula pequea, suponga que estaba a -70 en reposo y es una neurona, empiezo a despolarizar, Cules son los primeros canales que se me abren? Los Tipo T, se llaman los LVA, activados a bajos voltajes. Los dems L, PQ, R y N son HVA, activados a altos voltajes. Los genes CaV 1.1, 1.2, 1.3, 1.4 me codifican para los tipo L. Los CaV 2.1, 2.2, 2.3 me codifican para P/Q, N y R. Los CaV 3.1, 3.2, 3.3 para los tipo T. Los CaV son los mismos T, son los LVA, Cules de estos canales encuentro en sinapsis neuronales, en la terminal pre-sinptica neuronal? Los 2, o sea, P/Q, R y N, sobre todo P/Q y N. Cules se encuentran en los miocitos cardiacos produciendo la fase 2? Los Tipo L. Los HVA estn conformados por 4 o 5 subunidades, alfa 1, alfa 2, la delta y la beta, a veces hay gama y a veces no, por eso los HVA pueden ser tetrmeros o pentmeros, cuando son tetrmeros la que falta es la gama. Gama est en msculo esqueltico y en neuronas. La est unida a la 1 por medio de la interaccin que hace por la primera asa entre los dos dominios. La subunidad delta interacta con la alfa 2 por un puente de disulfuro. Pero esta conformacin heteropentamrica o heterotetramrica le reza a los HVA, porque los LVA (Tipo T) estn conformados por 5 alfas nada ms. Canales de Calcio Intracelulares Estn en la membrana del retculo endoplsmico, Receptores para IP3 (IP3R) Receptores para Rianodina (RyR)

En los IP3R cuando el inositol trifosfato se une en la terminal amino aumenta su Po y el calcio sale del retculo. Este canal receptor tiene cuatro subunidades, cada una con seis segmentos transmembrana. El receptores de rianodina no est muy claro, son molculas muy grandes y no est muy claro cuntos dominios transmembrana tiene, aunque el Boron dibuja cuatro parece que no, parece que tiene entre seis y ocho DTM. El recetor RyR en msculo esqueltico es la isoforma 1, (RyR1), este canal va a aumentar su Po gracias a la interaccin mecnica con el receptor de dihidropiridinas (DHPR). El DHPR es un canal de calcio que prcticamente no abre, cambia su conformacin pero no abre, entonces prcticamente no entra calcio, pero si cuando cambia de conformacin para hablar en trminos de chayotes, le pega una patadita al RyR1 y lo abre. En el msculo liso predomina isoforma RyR3. En el musculo cardiaco RYR2, aumenta por calcio. Operados por almacenes de Calcio (ORAI) Organela almacenadora por excelencia: retculo endoplsmico (RE).

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En el RE la concentracin de calcio es de 1 a 10 milimolar, puede ser aun ms que en el LEC. Cmo funciona el ORAI? Resulta que cuando el calcio en el RE est disminuido en su concentracin, o sea, hay una depauperacin (empobrecimiento) de los almacenes de calcio, una protena, la STIM1 (Molcula de Interaccin Estromal 1) que es transmembranal de la membrana del RE, tiene un dominio con el que censa la cantidad de calcio adentro, si hay poco cambia de conformacin. Esta protena, la STIM1 est haciendo contacto con los ORAI, tanto con la terminal amino como con la carboxilo, entonces ante esta depauperacin modifica el tipo de contacto con ORAI y al hacerlo el ORAI se abre, aumenta su Po. A travs de los ORAI el calcio entra y una vez que entr la SERCA lo introduce al RE, porque va en contra de la FEM. Canales Catinicos Inespecficos Los canales catinicos inespecficos dejan entrar un poco de Na, Ca y K. A -70mV en una neurona se me abre uno de estos canales que deja pasar los tres iones, sodio entra o sale? Sodio entra, calcio entra (requete-entra), potasio sale. Y entonces, la clula se despolariza o hiperpolariza? Se despolariza, Por qu se despolariza si el potasio sale? Porque la FEM ms alta la tiene calcio, luego el sodio y por ltimo la FEM ms chiquitilla es del potasio. Los canales catinicos inespecficos los dividimos en tres, Activados por ligando (Receptores ionotrpicos) Potencial de receptor transitorio (TRP) Activados por nucletidos cclicos

Receptores Ionotrpicos Los vamos a dividir en tres familias Familia Cys-loop o Clase I Receptores ionotrpicos de glutamato o clase II P2X o Clase III

Familia Cys-loop / Clase I Estn el nicotnico para la acetilcolina, el receptor para el GABAA (el GABAB es metabotrpico, para acetilcolina hay dos tipos de receptores, los nicotnicos que son ionotrpicos y los muscarnicos que son metabotrpicos). Pertenece a este grupo tambin el receptor ionotrpico para glicina. Si estoy hablando de receptores ionotrpicos catinicos estoy muy equivocado diciendo esto, porque los receptores para GABA y para glicina son aninicos pero son cys-loop entonces por eso estn aqu aunque no sean para cationes, porque dejan pasar principalmente cloruro. El nicotnico si es para cationes, es catinico inespecfico. El receptor para serotonina, pero el tipo 3, 5HT3, es para cationes. El receptor para el zinc que abre cuando el zinc se une a l que se llama ZAC tambin es para cationes, el zinc es el ligando.

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Los cys-loop tienen cinco subunidades, todas iguales o la mayora de las veces diferentes, cada subunidad tiene cuatro segmentos transmembrana que se nombran de M1 a M4, la pared por donde van a pasar los iones est conformada por los cuatro, M2 a manera de columna y por ah pasan los iones. Receptores ionotrpicos de glutamato o clase II Los de glutamato son inotrpicos, catinicos y todos son para glutamato o aspartato. Receptores para glutamato tambin hay metabotrpicos pero ahora nos interesan los inotrpicos, que se subdividen en tres, AMPA NMDA KAINATO

Estos receptores estn conformados por cuatro subunidades por eso heterotetrmeros, cada subunidad tiene tres segmentos transmembrana (M1, M3 y M4) y un asa que se internaliza pero que no pasa hasta el otro lado y que se llama TM2. El canal NMDA est conformado por dos tipos de subunidades NR1-2. Los de AMPA por las Glur1-4 y los de Kainato por KA1-2 y GluR5-7. P2X o Clase III Conformada por tres subunidades cada una con dos dominios transmembrana, tiene un gran asa entre los dos que es por donde se forma el poro, conformado por siete subunidades distintas desde P2X1 hasta P2X7. Receptor Nicotnico El receptor nicotnico tiene una conformacin en la vida intrauterina y otra en la vida extrauterina, pertenece a la clase cys-loop entonces tiene cinco subunidades iguales o diferentes dependiendo del receptor nicotnico del que se est hablando. En la placa motora, donde hace sinapsis la motoneurona alfa con el msculo esqueltico, el receptor nicotnico es heteropentmero y en la mayora de las veces es heteropentmero, aun en el cerebro, en ste existe una gran diversidad de receptores nicotnicos, y en neuronas, en diferentes ncleos, se han visto receptores nicotnicos conformados por cinco subunidades alfa todas igualitas. Eso se ha visto sobre todo para la subunidad alfa siete, yo puedo tener cinco subunidades 7 conformando el receptor nicotnico, en ese caso el receptor nicotnico es un homopentmero, pero en la placa es heteropentmero, 2, 1, 1 y depende de si estoy en etapa intrauterina gamma o extrauterina psilon (Ver pg. 83). El extrauterino es el que tiene ms conductancia. Receptor NMDA Los receptores NMDA son receptores que funcionan como detectores de coincidencia porque para que ellos se abran adems del ligando que es el glutamato necesito que esa membrana se haya previamente despolarizado, entonces necesito dos seales que activen conjuntamente: glutamato 15

en el receptor y despolarizacin de la membrana, (en ese sentido se comporta como los Kir de potasio) porque si no se ha despolarizado la membrana est bloqueado por un magnesio que se va a quitar de ah cuando la membrana se despolarice. Cuando ya se despolarice y el glutamato se una al receptor ah si se va a abrir. Coincidencia de esas dos cosas, despolarizacin y liberacin de glutamato. La glicina puede actuar como coagonista, muchas veces es necesario tener la glicina para que se abra el canal. Potencial de Receptor Transitorio (TRP) Estn conformados por cuatro subunidades 6DTM cada una, se llamaron transitorios porque se vio que se abran, dejaban entrar cationes y rpidamente se inactivaban, entonces permitan un potencial postsinptico excitatorio o un potencial de receptor excitatorio por muy poco tiempo y por eso se llamaron transitorios. Hay 27 TRPs, estn agrupados en seis clases, TRPA: son canales a los que se les pega la antipirina que tiene que ver con el citoesqueleto y por eso se llaman TRPA, de estos solo hay una isoforma. TRPC: cannicos, fueron los primeros descritos y por eso se describen como canon, (estndar) hay 6. TRPM: activados por melastatina que tiene que ver con el cncer y metstasis, hay 8. TRPML: activados por mucolipinas, hay 3. TRPP: se encontraron en riones poliqusticos hay 3. TRPV: tienen que ver con el dolor, tipo vaniloide, hay 6.

Los canales TRP son activados por mensajeros intra y extracelulares, cambios en el Em leves no son el principal estmulo, hay varios estmulos como fosforilaciones, cambios de temperatura, distensin de la membrana, gradientes qumicos y osmticos. Los canales activados por nucletidos cclicos (CNG) y por hiperpolarizacin y nucletidos cclicos (HCN) Ambos tienen que ver con nucletidos cclicos y en ambos los nucletidos cclicos se unen a ellos, pero los HCN son activados por la hiperpolarizacin. Encuentro los HCN en corazn, sobre todo tienen que ver con las fibras lentas de los marcapasos, con la fase 4 y por ende con las descargas rtmicas. Los CNG responden a despolarizaciones y los HCN a hiperpolarizaciones. La unin del nucletido cclico a los CNG aumenta la magnitud de las corrientes, la unin a los HCN desplaza el E1/2 a potenciales ms despolarizados. Los nucletidos cclicos los voy a encontrar en visin y en olfato. El GMPc es el nucletido cclico que se une en conos y bastones a este tipo de canal y cuando el GMPc se une existe muy buena corriente de entrada, bsicamente sodio y algo de calcio, eso ocurre en la oscuridad, en cambio en la luz es degradado por una fosfodiesterasa. Canales Aninicos

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Son bastante inespecficos y ms bien dejan pasar tiocianato mejor que el cloruro pero, a caso que estamos llenos de tiocianato? Si estuviramos llenos de tiocianato mas bien estaramos viendo las matitas por debajo. Entonces dejan pasar de todo, principalmente lo que tenga una buena FEM, cloruro y bicarbonato, pasa un poco de bromuro tambin. Los dividimos en tres grupos Canales reguladores de la conductancia transmembranal de la fibrosis qustica (CFTR). Canales de Cloruro Receptores ionotrpicos cys-loop para GABA y glicina

Canales de Cloruro Se encuentran en los epitelios y tienen que ver con reabsorcin y secrecin de cloruro, son bastante grandes, conformados por 18 segmentos transmembrana, 17 dentro de la membrana y el otro pegado en la parte de adentro. Cada subunidad tiene un poro y como est conformado por dos de estas, tiene dos poros, pero no son como los K2P. Adems tienen dos compuertas, una ms rpida que es especfica para cada poro y una ms lenta que es la misma para los dos poros. Si el potencial de membrana en donde ellos estn es semejante al ECl- entonces tienden a estabilizar el potencial de membrana. Receptores ionotrpicos cys-loop para GABA y glicina GABAA conformado por cinco subunidades, dejan pasar cloruro.

Tarea
Yo abro un canal de cloruro en una neurona que tiene un potencial de membrana de -70, esa neurona se despolariza o hiperpolariza? Siempre con concentraciones normales de cloruro de la tabla. ECl: -70 En una neurona que est con un Em de -70 y abro canales de cloruro, el cloruro entra o sale? Nada, no sufre despolarizacin ni hiperpolarizacin. Msculo esqueltico a -90mV abro canales para cloruro, esa membrana, se despolariza o se hiperpolariza? El cloruro sale, esa membrana va a sufrir una despolarizacin. En cambio yo tengo una membrana cuyo potencial est en -50Mv, abro un receptor para GABAA esa neurona se despolariza o se hiperpolariza? Se hiperpolariz y por eso GABA es inhibitorio. En cambio glutamato me despolariza.

You were born to win, but to be a winner, you must plan to win, prepare to win, and expect to win. Zig Ziglar.

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