Microscopio compuesto

Objetivos de un microscopio moderno.

Un microscopio compuesto tiene ms de una lente objetivo. Los microscopios compuestos se utilizan especialmente para examinar objetos transparentes, o cortados en lminas tan finas que se transparentan. Se emplea para aumentar o ampliar las imgenes de objetos y organismos no visibles a simple vista. El microscopio ptico comn est conformado por tres sistemas:

El sistema mecnico est constituido por una palanca que sirve para sostener, elevar y detener los instrumentos a observar.

El sistema de iluminacin comprende un conjunto de instrumentos, dispuestos de tal manera que producen las ranuras de luz.

El sistema ptico comprende las partes del microscopio que permiten un aumento de los objetos que se pretenden observar mediante filtros llamados "de antigel subsecuente".

Parte mecnica del microscopio[editar editar fuente]

Esquema de un micoscopio ptico.

La parte mecnica del microscopio comprende el pie, el tubo, el revlver, el asa, la platina, el carro y el tornillo micromtrico. Estos elementos sostienen la parte ptica y de iluminacin; adems, permiten los desplazamientos necesarios para el enfoque del objeto.

El pie y soporte: contiene la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene por lo general forma de Y o bien es rectangular.

La columna o brazo: llamada tambin asa, es una pieza en forma de C, unida a la base por su parte inferior mediante una bisagra, permitiendo la inclinacin del tubo para mejorar la captacin de luz cuando se utilizan los espejos. Sostiene el tubo en su porcin superior y por el extremo inferior se adapta al pie.

El tubo: tiene forma cilndrica . El tubo se encuentra en la parte superior de la columna mediante un sistema de cremalleras, las cuales permiten que el tubo se mueva mediante los tornillos.

El tornillo macromtrico o macroscopico: girando este tornillo, asciende o desciende el tubo del microscopio, deslizndose en sentido vertical gracias a un mecanismo de cremallera. Estos movimientos largos permiten el enfoque rpido de la preparacin.

El tornillo micromtrico o microscopico: mediante el ajuste fino con movimiento casi imperceptible que produce al deslizar el tubo o la platina, se logra el enfoque exacto y ntido de la

preparacin. Lleva acoplado un tambor graduado en divisiones de 0,001 mm, que se utiliza para precisar sus movimientos y puede medir el espesor de los objetos.

La platina: es una pieza metlica plana en la que se coloca la preparacin u objeto que se va a observar. Presenta un orificio, en el eje ptico del tubo, que permite el paso de los rayos luminosos a la preparacin. La platina puede ser fija, en cuyo caso permanece inmvil; en otros casos puede ser giratoria; es decir, mediante tornillos laterales puede centrarse o producir movimientos circulares.

Las pinzas: son dos piezas metlicas que sirven para sujetar la preparacin. Se encuentran en la platina.

El revlver: es una pieza giratoria provista de orificios en los que se enroscan los objetivos. Al girar el revlver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en posicin de trabajo, lo que se nota por el ruido de un pin que lo fija.

Sistema ptico[editar editar fuente]

Es el encargado de reproducir y aumentar las imgenes mediante el conjunto de lentes que lo componen. Est formado por el ocular y los objetivos. El objetivo proyecta una imagen de la muestra que el ocular luego ampla.

El ocular: se encuentra situado en la parte superior del tubo. Su nombre se debe a la cercana de la pieza con el ojo del observador. Tiene como funcin aumentar la imagen formada por el objetivo. Los oculares son intercambiables y sus poderes de aumento van desde 5X hasta 20X. Existen oculares especiales de potencias mayores a 20X y otros que poseen una escala micromtrica; estos ltimos tienen la finalidad de medir el tamao del objeto observado.

Los objetivos: se disponen en una pieza giratoria denominada revlver y producen el aumento de las imgenes de los objetos y organismos, y, por tanto, se hallan cerca de la preparacin que se examina. Los objetivos utilizados corrientemente son de dos tipos: objetivos secos y objetivos de inmersin.

Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre ellos y la preparacin. En la cara externa llevan una serie de ndices que indican el aumento que producen, la abertura numrica y otros datos. As, por ejemplo, si un objetivo tiene estos datos: plan 40/0,65 y 160/0,17, significa que el objetivo es planacromtico, su aumento 40 y su apertura numrica 0,65, calculada para una longitud de tubo de 160 mm. El nmero de objetivos vara con el tipo de microscopio y el uso a que se destina. Los aumentos de los objetivos secos ms frecuentemente utilizados son: 4X, 10X, 20X, 40X y 60X.

El objetivo de inmersin est compuesto por un complicado sistema de lentes. Para observar a travs de este objetivo es necesario colocar una gota de aceite de cedro entre el objetivo y la

preparacin, de manera que la lente frontal entre en contacto con el aceite de cedro. Generalmente, estos objetivos son de 100X y se distingue por uno o dos crculos o anillos de color negro que rodea su extremo inferior.

Sistema de iluminacin[editar editar fuente]

Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal manera que ilumine la preparacin u objeto que se va a observar en el microscopio de la manera adecuada. Comprende los siguientes elementos:

Fuente de iluminacin: se trata clsicamente de una lmpara incandescente de tungsteno sobrevoltada; en versiones ms modernas con leds. Por delante de ella se sita un condensador (una lente convergente) e, idealmente, un diafragma de campo, que permite controlar el dimetro de la parte de la preparacin que queda iluminada, para evitar que exceda el campo de observacin produciendo luces parsitas.

El espejo: necesario si la fuente de iluminacin no est construida dentro del microscopio y ya alineada con el sistema ptico, como suele ocurrir en los microscopios modernos. Suele tener dos caras: una cncava y otra plana. Goza de movimientos en todas las direcciones. La cara cncava se emplea de preferencia con iluminacin artificial, y la plana, para natural (luz solar). Los modelos ms modernos no poseen espejos sino una lmpara que cumple la misma funcin que el espejo.

Diafragma: est formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos luminosos sobre el plano de la preparacin, formando un cono de luz con el mismo ngulo que el del campo del objetivo. El condensador se sita debajo de la platina y su lente superior es generalmente planoconvexa, quedando la cara superior plana en contacto con la preparacin cuando se usan objetivos de gran abertura (los de mayor ampliacin); existen condensadores de inmersin, que piden que se llene con aceite el espacio entre esa lente superior y la preparacin. La abertura numrica mxima del condensador debe ser al menos igual que la del objetivo empleado, o no se lograr aprovechar todo su poder separador. El condensador puede deslizarse verticalmente sobre un sistema de cremallera mediante un tornillo, bajndose para su uso con objetivos de poca potencia.

Condensador: el condensador est provisto de un diafragma-iris, que regula su abertura para ajustarla a la del objetivo. Puede emplearse, de manera irregular, para aumentar el contraste, lo que se hace cerrndolo ms de lo que conviene si se quiere aprovechar la resolucin del sistema ptico.

Trayectoria del rayo de luz a travs del microscopio[editar editar

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El haz luminoso procedente de la lmpara pasa directamente a travs del diafragma al condensador. Gracias al sistema de lentes que posee el condensador, la luz es concentrada sobre la preparacin a observar. El haz de luz penetra en el objetivo y sigue por el tubo hasta llegar al ocular, donde es captado por el ojo del observador. Propiedades del microscopio

Poder separador. Tambin llamado a veces poder de resolucin, es una cualidad del microscopio, y se define como la distancia mnima entre dos puntos prximos que pueden verse separados. El ojo normal no puede ver separados dos puntos cuando su distancia es menor a una dcima de milmetro. En el microscopio viene limitado por la longitud de onda de la radiacin empleada; en el microscopio ptico, el poder separador mximo conseguido es de 0,2 dcimas de micrmetro (la mitad de la longitud de onda de la luz azul), y en el microscopio electrnico, el poder separador llega hasta 10 .

Poder de definicin. Se refiere a la nitidez de las imgenes obtenidas, sobre todo respecto a sus contornos. Esta propiedad depende de la calidad y de la correccin de las aberraciones de las lentes utilizadas.

Ampliacin del microscopio. En trminos generales se define como la relacin entre el dimetro aparente de la imagen y el dimetro o longitud del objeto. Esto quiere decir que si el microscopio aumenta 100 dimetros un objeto, la imagen que estamos viendo es 100 veces mayor linealmente que el tamao real del objeto (la superficie de la imagen ser 1002, es decir 10.000 veces mayor). Para calcular el aumento que est proporcionando un microscopio, basta multiplicar los aumentos respectivos debidos al objetivo y el ocular empleados. Por ejemplo, si estamos utilizando un objetivo de 45X y un ocular de 10X, la ampliacin con que estamos viendo la muestra ser: 45X x 10X = 450X, lo cual quiere decir que la imagen del objeto est ampliada 450 veces, tambin expresado como 450 dimetros.

Campo del microscopio[editar editar fuente]

Paramecium aurelia. Microscopio ptico. El mejor conocido de los ciliados. Las burbujas que se ven son vacuolas. Todo el cuerpo est cubierto de cilios, que se ven borrosos debido a sus rpidos movimientos.

Se denomina campo del microscopio al crculo visible que se observa a travs del microscopio. Tambin podemos definirlo como la porcin del plano visible observado a travs del microscopio. Si el aumento es mayor, el campo disminuye, lo cual quiere decir que el campo es inversamente proporcional al aumento del microscopio. Para medir el dimetro del campo del microscopio con cualquiera de los objetivos se utiliza el micrmetro, al que se har referencia en el siguiente punto.

Tipos de microscopios[editar editar fuente]

Existen diversas clases de microscopios, segn la naturaleza de los sistemas de luz, y otros accesorios utilizados para obtener las imgenes. El microscopio compuesto u ptico utiliza lentes para ampliar las imgenes de los objetos observados. El aumento obtenido con estos microscopios es reducido, debido a la longitud de onda de la luz visible que impone limitaciones. El microscopio ptico puede ser monocular, y consta de un solo tubo. La observacin en estos casos se hace con un solo ojo. Es binocular cuando posee dos tubos. La observacin se hace con los dos ojos. Esto presenta ventajas tales como mejor percepcin de la imagen, ms cmoda la observacin y se perciben con mayor nitidez los detalles. Microscopio estereoscpico: el microscopio estereoscpico hace posible la visin tridimensional de los objetos. Consta de dos tubos oculares y dos objetivos pares para cada aumento. Este microscopio ofrece ventajas para observaciones que requieren pequeos aumentos. El ptimo de visin estereoscpica se encuentra entre 2 y 40X o aumento total del microscopio. Microscopio de campo oscuro. Este microscopio est provisto de un condensador paraboloide, que hace que los rayos luminosos no penetren directamente en el objetivo, sino que iluminan oblicuamente la preparacin. Los objetos aparecen como puntos luminosos sobre un fondo oscuro. Microscopio de fluorescencia. La fluorescencia es la propiedad que tienen algunas sustancias de emitir luz propia cuando inciden sobre ellas radiaciones energticas. El tratamiento del material biolgico con flurocromos facilita la observacin al microscopio. Microscopio de contraste de fases. Se basa en las modificaciones de la trayectoria de los rayos de luz, los cuales producen contrastes notables en la preparacin.

El microscopio electrnico[editar editar fuente]

Artculo principal: Microscopio electrnico.

Invencin del microscopio electrnico[editar editar fuente]

En 1932, Bruche y Johnsson construyen el primer microscopio electrnico a base de lentes electrostticas. Ese mismo ao Knoll y Ruska dan a conocer los primeros resultados obtenidos con un microscopio electrnico Siemens, construido con lentes magnticas. As nace el microscopio electrnico. Para 1936 ya se ha perfeccionado y se fabrican microscopios electrnicos que superan en resolucin al microscopio ptico. Estos logros no slo representan un avance en el campo de la electrnica, sino tambin en el campo de la Biologa, pues son muchas las estructuras biolgicas que se han descubierto y que revelan detalles inusitados, al observarlas al microscopio electrnico.

Funcionamiento del microscopio electrnico[editar editar fuente]

El microscopio electrnico utiliza un flujo de electrones en lugar de luz. Consta fundamentalmente de un tubo de rayos catdicos, en el cual debe mantenerse el vacio. El ctodo est constituido por un filamento de tungsteno, que al calentarse elctricamente emite los electrones, los cuales son atrados hacia el nodo por una diferencia de potencial de 50.000 a 100.000 voltios. La lente del condensador enfoca este haz y lo dirige hacia el objeto que se observa, cuya preparacin exige tcnicas especiales. Los electrones chocan contra la preparacin, sobre la cual se desvan de manera desigual. Se acostumbra a utilizar el trmino microoscopicos para las fotografas tomadas a travs del microscopio ptico y micrografa o electromicrografa para las que se toman en el microscopio electrnico. Los aumentos mximos conseguidos en el microscopio electrnico son del orden de 2.000.000X mediante el acoplamiento al microscopio electrnico de un amplificador de imagen y una cmara de televisin. En resumen, el microscopio electrnico consta esencialmente de:

Un filamento de tungsteno (ctodo) que emite electrones. Condensador o lente electromagntica, que concentra el haz de electrones. Objetivo o lente electromagntica, que ampla el cono de proyeccin del haz de luz. Ocular o lente electromagntica, que aumenta la imagen. Proyector o lente proyectora, que ampla la imagen. Pantalla fluorescente, que recoge la imagen para hacerla visible al ojo humano.

Tipos de microscopios electrnicos[editar editar fuente]

Existen varios tipos de microscopios electrnicos, que cada da se perfeccionan ms. El microscopio electrnico de transmisin que utiliza un haz de electrones acelerados por un alto voltaje (cien mil voltios). Este haz ilumina una seccin muy fina de la muestra, sean tejidos, clulas u otro material.

El microscopio electrnico de barrido se utiliza para el estudio de la morfologa y la topografa de los elementos. Estos instrumentos utilizan voltajes cercanos a los 20.000 voltios. Las lentes magnticas utilizan un haz muy fino de electrones para penetrar repetidamente la muestra, y se produce una imagen ampliada de la superficie observada en la pantalla de un monitor. El microscopio electrnico mixto tiene propiedades comunes con el de transmisin y con el de barrido y resulta muy til para ciertas investigaciones. Hay otros microscopios analticos que detectan seales caractersticas de los elementos que constituyen la muestra. Con estos poderosos instrumentos, que utilizan el flujo de electrones y las radiaciones electromagnticas as como la aplicacin de tcnicas histoqumicas y bioqumicas, adems del empleo de marcadores radiactivos, se han logrado grandes avances en la biologa celular.

Microscopio electrnico de barrido[editar editar fuente]

Artculo principal: Microscopio electrnico de barrido.

El microscopio electrnico de barrido est situado a la izquierda del operador, y las imgenes computarizadas de la muestra se ven en la pantalla de la derecha. Aunque un microscopio electrnico de transmisin puede resolver objetos ms pequeos que uno de barrido, este ltimo genera imgenes ms tiles para conocer la estructura tridimensional de objetos minsculos.

Microscopio quirrgico[editar editar fuente]

El empleo de microscopios quirrgicos ha permitido que los cirujanos lleven a cabo intervenciones que parecan imposibles, como la reimplantacin de un miembro y la ciruga de los ojos y odos. Estos microscopios son en especial tiles cuando es necesario realinear para unir o reparar fibras nerviosas y vasos sanguneos individuales. Se usa para operaciones dificultosas.

Medicin a travs del microscopio[editar editar fuente]

Muchas veces interesa al observador conocer el tamao real de los objetos o microorganismos que est observando a travs del microscopio. Para estas mediciones pueden utilizarse varios mtodos. Mtodo de los micrmetros. Se utiliza para esto un micrmetro de platina o de objetivo, que consiste en un portaobjetos en cuyo centro se halla una escala graduada (de 2 mm de longitud), con separaciones, entre cada divisin, de una centsima de milmetro. Adems se utiliza un micrmetro ocular que lleva una escala graduada en dcimas de milmetros. Se coloca el micrmetro objetivo sobre la platina y se enfoca el microscopio hasta que las lneas de la escala graduada aparezcan ntidas. Luego se hace superponer la escala del ocular y se toma como referencia las primeras divisiones en que una lnea del micrmetro objetivo y una lnea del micrmetro ocular coincidan o se superpongan exactamente.

Luego, por simple regla de tres, se calcula el valor en mieras de cada divisin ocular. Veamos un ejemplo. Si 9 divisiones del micrmetro objetivo (0,09 mm) equivalen a 30 divisiones del micrmetro ocular, cada divisin del ocular equivaldr a: 0,09 mm/30 = 0,003 mm = 3 m Quiere decir que para el objetivo calibrado y el ocular utilizado, cada divisin del micrmetro ocular equivale a 3 m. Una vez obtenido este dato para cada objetivo en la forma que hemos expuesto, teniendo el microscopio ocular podran hacerse todas las mediciones que se deseen. Para medir, por ejemplo, un Paramecium de una preparacin, procedemos as: haremos coincidir los extremos del microorganismo con las divisiones del micrmetro ocular. Si la longitud del organismo es de 75 divisiones del micrmetro ocular, y cada divisin equivale a 3 m, la longitud del Paramecium ser 75x3= 225 m. Tambin se pueden efectuar mediciones en el microscopio con cmara clara y utilizando una regla. En realidad, estas medidas no son tan exactas como cuando se utilizan micrmetros por errores que se introducen superponiendo imgenes.

Mantenimiento del microscopio[editar editar fuente]

El microscopio debe estar protegido del polvo, humedad y otros agentes que pudieran daarlo. Mientras no est en uso debe guardarse en un estuche o gabinete, o bien cubrirlo con una bolsa plstica o campana de vidrio. Las partes mecnicas deben limpiarse con un pao suave; en algunos casos, ste se puede humedecer con xilol para disolver ciertas manchas de grasa, aceite de cedro, parafina, etc. Que hayan cado sobre las citadas partes. La limpieza de las partes pticas requiere precauciones especiales. Para ello debe emplearse papel de ptico que expiden las casas distribuidoras de material de laboratorio fotografa o utilizar un pao de algodn. Para el polvillo se puede utilizar un perilla con pincel de pelo de camello. Nunca deben tocarse las lentes del ocular, objetivo y condensador con los dedos; las huellas digitales perjudican la visibilidad, y cuando se secan resulta trabajoso eliminarlas. Para una buena limpieza de las lentes puede humedecerse el papel de ptica, envolviendo un palillo con algo de punta con una solucin de ter/alcohol (70-30 %) y luego pasarlo por la superficie cuantas veces sea necesario. La limpieza de la ptica ha de realizarse en espiral, desde el centro hacia el exterior. El aceite de cedro que queda sobre la lente frontal del objetivo de inmersin debe quitarse inmediatamente despus de finalizada la observacin. Para ello se puede pasar el papel de ptica impregnado con una gota de xilol. En caso de estar seco debe ponerse la zona a remojo con la solucin sealada. Para guardarlo se acostumbra colocar el objetivo de menor aumento sobre la platina y bajado hasta el tope; el condensador debe estar en su posicin ms baja, para evitar que tropiece con alguno de los objetivos. Gurdese en lugares secos, para evitar que la humedad favorezca la formacin de hongos.

Ciertos cidos y otras sustancias qumicas que producen emanaciones fuertes, deben mantenerse alejados del microscopio.

Conclusiones[editar editar fuente]

Dos lentes convexas bastan para construir un microscopio. Cada lente hace converger los rayos luminosos que la atraviesan. Una de ellas, llamada objetivo, se sita cerca del objeto que se quiere estudiar. El objetivo forma una imagen real aumentada e invertida. Se dice que la imagen es real porque los rayos luminosos pasan realmente por el lugar de la imagen. La imagen es observada por la segunda lente, llamada ocular, que acta sencillamente como una lupa. El ocular est situado de modo que no forma una segunda imagen real, sino que hace divergir los rayos luminosos, que al entrar en el ojo del observador parecen proceder de una gran imagen invertida situada ms all del objetivo. Como los rayos luminosos no pasan realmente por ese lugar, se dice que la imagen es virtual...

Microscopio ptico

Microscopio ptico.Descripcin:A) ocular, B) objetivo, C) portador del objeto, D) lentes de la iluminacin, E) sujecin del objeto, F) espejo de la iluminacin.

Un microscopio ptico es un microscopio basado en lentes pticos. Tambin se le conoce como microscopio de luz, (que utiliza luz o "fotones") omicroscopio de campo claro. El desarrollo de este aparato suele asociarse con los trabajos de Anton van Leeuwenhoek. Los microscopios de Leeuwenhoek constaban de una nica lente pequea y convexa, montada sobre una plancha, con un mecanismo para sujetar el material que se iba a examinar (la muestra o espcimen). Este uso de una nica lente convexa se conoce como microscopio simple, en el que se incluye la lupa, entre otros aparatos pticos.

Historia[editar editar fuente]

1608 Zacharias Jansen construye un microscopio con dos lentes convergentes. 1611 Kepler sugiere la manera de fabricar un microscopio compuesto. 1665 Robert Hooke utiliza un microscopio compuesto para estudiar cortes de corcho y describe los pequeos poros en forma de celdas a los que l llam "clulas". Publica su libro Micrographia.

1674 Leeuwenhoek informa su descubrimiento de protozoarios. Observar bacterias por primera vez 9 aos despus.

1828 W. Nicol desarrolla la microscopa con luz polarizada. 1838 Schleiden y Schwann proponen la teora de la clula y declaran que la clula nucleada es la unidad estructural y funcional en plantas y animales.

1849 J. Quekett publica un tratado prctico sobre el uso del microscopio. 1876 Abb analiza los efectos de la difraccin en la formacin de la imagen en el microscopio y muestra cmo perfeccionar el diseo del microscopio.

1881 Retzius describe gran nmero de tejidos animales con un detalle que no ha sido superado por ningn otro microscopista de luz. En las siguientes dos dcadas l, Cajal y otros histlogos desarrollan nuevos mtodos de tincin y ponen los fundamentos de la anatoma microscpica.

1886 Carl Zeiss fabrica una serie de lentes, diseo de Abb que permiten al microscopista resolver estructuras en los lmites tericos de la luz visible.

1908 Khler y Siedentopf desarrollan el microscopio de fluorescencia. 1930 Lebedeff disea y construye el primer microscopio de interferencia. 1932 Zernike inventa el microscopio de contraste de fases. 1937 Ernst Ruska y Max Knoll, fsicos alemanes, construyen el primer microscopio electrnico. 1952 Nomarski inventa y patenta el sistema de contraste de interferencia diferencial para el microscopio de luz.

Partes del microscopio ptico y sus funciones[editar editar fuente]

Tubo, cremallera de enfoque y tornillo macromtrico.

Oculares intercambiables de diferentes aumentos.

Tornillos macro y micromtrico.

Objetivos desmontados.

Diafragma - Condensador.

Platina y base.

Revlver.

1 * Ocular: lente situada cerca del ojo del observador. Capta y ampla la imagen formada en los objetivos. 2 * Objetivo: lente situada en el revolver. Ampla la imagen, es un elemento vital que permite ver a travs de los oculares. 3 * Condensador: lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparacin. 4 * Diafragma: regula la cantidad de luz que llega al condensador.

5 * Foco: dirige los rayos luminosos hacia el condensador. 6 * Tubo: es la cmara oscura que porta el ocular y los objetivos. Puede estar unida al brazo mediante una cremallera para permitir el enfoque. 7 * Revlver: Es el sistema que porta los objetivos de diferentes aumentos, y que rota para poder utilizar uno u otro, alinendolos con el ocular. 8 * Tornillos macro y micromtrico: Son tornillos de enfoque, mueven la platina o el tubo hacia arriba y hacia abajo. El macromtrico permite desplazamientos amplios para un enfoque inicial y el micromtrico desplazamientos muy cortos, para el enfoque ms preciso. Pueden llevar incorporado un mando de bloqueo que fija la platina o el tubo a una determinada altura. 9 *Platina: Es una plataforma horizontal con un orificio central, sobre el que se coloca la preparacin, que permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminacin situada por debajo. Dos pinzas sirven para retener el portaobjetos sobre la platina y un sistema de cremallera guiado por dos tornillos de desplazamiento permite mover la preparacin de adelante hacia atrs o de izquierda a derecha y viceversa. Puede estar fija o unida al brazo por una cremallera para permitir el enfoque. 10 *Brazo: Es la estructura que sujeta el tubo, la platina y los tornillos de enfoque asociados al tubo o a la platina. La unin con la base puede ser articulada o fija. 11 * Base o pie: Es la parte inferior del microscopio que permite que ste se mantenga de pie.

Sistema de iluminacin[editar editar fuente]

La fuente de luz (1), con la ayuda de una lente (o sistema) (2), llamada colector, se representa en el plano del diafragmairis de abertura (5) del condensador (6). Este diagrama se instala en el plano focal anterior del condensador (6) y puede variar su abertura numrica. El diagrama iris (3) dispuesto junto al colector (2) es el diafragma de campo. La variacin del dimetro del diafragma de campo permite obtener su imagen igual al campo visual lineal del microscopio. La abertura numrica del condensador (6) supera, generalmente la de la abertura del objetivo microscpico: es la iluminacin que permite ver mejor lo que queremos observar como las clulas o las membranas celulares entre otros

Microscopio ptico compuesto[editar editar fuente]

Artculo principal: Microscopio compuesto.

Un microscopio compuesto es un microscopio ptico con ms de un lente. Se utilizan especialmente para examinar objetos transparentes, o cortados en lminas tan finas que se transparentan.

Principales elementos de un microscopio bsico[editar editar fuente]

Diagrama simple de la ptica de un microscopio.

Los microscopios de este tipo suelen ser ms complejos, con varias lentes en el objetivo como en el ocular. El objetivo de estas lentes es el de reducir la aberracin cromtica y la aberracin esfrica. En los microscopios modernos el espejo se sustituye por una lmpara que ofrece una iluminacin estable y controlable. Los microscopios compuestos se utilizan para estudiar especmenes delgados, puesto que su profundidad de campo es muy limitada. Por lo general, se utilizan para examinar cultivos, preparaciones trituradas o una lmina muy fina del material que sea. Normalmente depende de la luz que atraviese la muestra desde abajo y usualmente son necesarias tcnicas especiales para aumentar el contraste de la imagen. La resolucin de los microscopios pticos est restringida por un fenmeno llamado difraccin que, dependiendo de la apertura numrica (AN o ) del sistema ptico y la longitud de onda de

la luz utilizada ( ), establece un lmite definido ( ) a la resolucin ptica. Suponiendo que las aberraciones pticas fueran despreciables, la resolucin sera:

Normalmente, se supone una la

de 550 nm, correspondiente a la luz verde. Si el medio es el aire,

prctica mxima es de 0,95, y en el caso de aceite de hasta 1,5.

Ello implica que incluso el mejor microscopio ptico est limitado a una resolucin de unos 0,2 micrmetros.

Poder separador, objetivos de inmersin y aumento til[editar editar fuente]

Poder separador

De la teora de la difraccin sobre la formacin de imgenes mediante un microscopio se obtiene que la distancia mnima entre dos puntos visibles por separado es:

Donde es la longitud de onda de la luz monocromtica en la que se observa el objeto y A es la abertura del microscopio.

Objetivos de inmersin

El medio ptico lquido que rellena el espacio entre el objeto y el objetivo se le denomina lquido de inmersin. El ndice de refraccin de este es prximo al del vidrio (se utiliza agua, glicerina, aceites de cedro y de enebro, monobromonaftalina, entre otros).1

Correcciones[editar editar fuente]

Tipos de objetivos y sus caractersticas.

Aunque todos los componentes que constituyen un microscopio son importantes, los objetivos son de suma importancia, puesto que la imagen, en definitiva, depende en gran medida de su calidad. Los mejores objetivos son aquellos que estn corregidos para las aberraciones.

Las aberraciones[editar editar fuente]

Son alteraciones pticas en la formacin de la imagen debidas a las propias lentes del objetivo.

aberraciones geomtricas (efecto Keystone)2 aberraciones cromticas

Correccin de las aberraciones[editar editar fuente]

Para evitar las aberraciones geomtricas se construyen los llamados objetivos planos o planticos, lo cual suele estar indicado en el propio objetivo con la inscripcin PLAN. Los objetivos que estn corregidos para las aberraciones cromticas se denominan acromticos (corregidos para el rojo y el azul), semiapocromticos (corregidos para el rojo y el azul y tienen una mayor apertura numrica) y finalmente los apocromticos (que son de mayor calidad y estn corregidos para el rojo, el azul y el verde).

Aplicaciones del microscopio ptico[editar editar fuente]

Este instrumento ha sido de gran utilidad, sobre todo en los campos de la ciencia en donde la estructura y la organizacin microscpica es importante, incorporndose con xito a investigaciones dentro del rea de la qumica (en el estudio de cristales), la fsica (en la

investigacin de las propiedades fsicas de los materiales), la geologa (en el anlisis de la composicin mineralgica y textural de las rocas) y, por supuesto, en el campo de la biologa (en el estudio de estructuras microscpicas de la materia viva), por citar algunas disciplinas de la ciencia. Hasta ahora se da uso en el laboratorio de histologa y anatoma patolgica, donde la microscopa permite determinadas aplicaciones diagnsticas, entre ellas el diagnstico de certeza del cncer, numerosas estructuras cristalinas, pigmentos, lpidos, protenas, depsitos seos, depsitos de amiloide, etctera.