Universidad Autnoma del Estado de Mxico Facultad de Qumica Laboratorio de Hematologa Eduardo Gonzlez Nieto; Grupo 72

Prctica #2: Recuento de Reticulocitos

Objetivo Adquirir la habilidad y capacidad de interpretacin para la cuenta de reticulocitos mediante su coloracin con azul de cresil brillante para observarlos y reconocerlos morfolgicamente. Introduccin El reticulocito es la ltima fase del eritrocito inmaduro. En condiciones normales, un reticulocito pasa dos das en la mdula sea u un da en la sangre perifrica antes de convertirse en un eritrocito maduro. El reticulocito contiene remanentes citoplasmticos de RNA y organelas como mitocondrias y ribosomas. El recuento de reticulocitos se usa para evaluar la actividad hematopoytica de la medula sea. Principio La sangre entera, anticoagulada con EDTA, se tie con un colorante supravital como el nuevo azul de metileno. Todo eritrocito no nucleado que contenga dos o ms partculas de material granulofilamentoso de color azul despus de la tincin con azul de metileno nuevo, se define como un reticulocito. [1] Los reticulocitos son la llave de la clasificacin inicial de cualquier anemia, ya que proporciona una medida de la respuesta medular. En situacin basal suponen del 1 al 2% del total de las clulas rojas. El porcentaje de reticulocitos aumenta siempre que hay una anemia debido a que su denominador disminuye (% de reticulocitos =reticulocitos/eritrocitos), por lo que hay que hacer una primera correccin respecto al hematocrito normal: ( )( )

Ya que en caso de anemia los reticulocitos abandonan precozmente la mdula sea, su vida media aumenta por lo que hay que realizar una ulterior correccin. La vida media se alarga aproximadamente 1.5-2-2.5 das con un hematocrito del 35-25-15%, respectivamente, por lo que la frmula vara:

Un IPR inferior a dos sugiere que hay un defecto en la proliferacin en la mdula sea o en la maduracin de algn precursor. Un paciente con un hematocrito menor al 30% responde con un IPR de 2 a 3. En las anemias hemolticas severas y crnicas el IPR puede ser de hasta 5 o 6. [2]

Patologas Anemias E l trmino anemia se usa habitualmente para referirse a una reduccin por debajo de lo normal en uno o ms de los siguientes parmetros hemoglobina, hematocrito o nmero de glbulos rojos (GR). [3] Anemias aplsticas o hipoplsticas: pueden ser congnitas o adquiridas y se caracterizan por un dficit o detencin de la proliferacin y maduracin de los progenitores celulares hematopoyticos. Las anemias adquiridas de este tipo se relacionan frecuentemente con sustancias qumicas o frmacos (cloramfenicol, AINES, hipoglucemiantes orales, fenitoina, y otros) que desarrollan la anemia como un grave efecto adverso. Anemias hemolticas, por destruccin excesiva de glbulos rojos: estas anemias ocurren por anormalidades constitutivas del glbulo rojo, alteraciones primarias o secundarias de la membrana eritroctica, a veces determinadas genticamente, como en la deficiencia congnita de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa, sickle cell anemia, esferocitosis o eliptocitosis hereditaria, la hemoglobinuria paroxstica nocturna o microangioptica. Las anemias hemolticas tambin pueden ser producidas por la accin adversa de frmacos, o de origen autoinmune, por enzimopatas o hemoglobinopatas. Anemias por dficit o produccin inadecuada de eritropoyetina: en este grupo de anemias se incluyen la anemia de la insuficiencia renal crnica, anemias de enfermedades crnicas (cncer, graves infecciones crnicas, artritis reumatoidea, malnutricin del SIDA, y otras), anemia de endocrinopatas como el hipotiroidismo). Son anemias de tipo hipoproliferativo, normocrmicas, normocticas por insuficiente produccin de eritropoyetina en la insuficiencia renal crnica. [4] Anemia ferropnica: Se define como aquella producida como consecuencia del fracaso de la funcin hematopoytica medular al no disponer de la cantidad necesaria de hierro (Fe) para la sntesis de hemoglobina (Hb). [5] Anemia por disminucion de la eritropoyesis: se debe a deficiencias especficas de factores hematopoyticos. Anemias Macrocticas: Se deben a deficiencias de vitamina B12 o folatos. Se caracteriza por la presencia en la sangre de un porcentaje variable de macrocitos, o sea eritrocitos de un tamao mayor que el normal y frecuente por grados variables de granulocitopenia y trombocitopenia. [6]

Humes H D. (1992). Clasificacin de las anemias. Recuperado de: Medicina interna 2 Edicin

Metodologa Agrgar 0.3 mL de sangre bien Homogenizada a un tubo de ensaye con EDTA

Adicionar 0.3 mL de colorante, cubrir y mezclar perfectamente

Preparar un frotis y dejar secar, para su posterior observacin al microscopio

Dejar reposar de 15-20 minutos a temperatura ambiente

Contar el nmero de reticulocitos que se encuentran en 1000 eritrocitos

Resultados Conclusiones Referencias Bibliogrficas 1. 2. 3. Rodak F. (2004). Hematologa: Fundamentos y Aplicaciones Clnicas. 2 Edicin. Editorial Mdica Panamericana. Buno Aires, Argentina. pp 166. Ruza F. (2002). Tratado de Cuidados Intensivos Peditricos. 3 Edicin. Ediciones Norma. Madrid, Espaa. pp 1510. Gonzlez M, Druetta M, Braidot G, Negro L. Anemias. Publicacin digital de la 1ra Ctedra de Clnica Mdica y Teraputica y la Carrera de Posgrado de especializacin en Clnica Mdica. Facultad de Ciencias Mdicas - Universidad Nacional de Rosario. Rosario - Santa Fe - Repblica Argentina: 1-15 Valsecia M. Farmacologa de la Hematopoyesis: 26-46. Disponible en:

4.

http://med.unne.edu.ar/catedras/farmacologia/temas_farma/volumen4/cap2_anemi as.pdf 5. Belsa L. C. Anemia Ferropnica. Centro de Salud Serreira II. Pediatra Integral 2008;XII(5):457-464
6. Pontificia Universidad Javeriana. Fisiologa en Hemates, Fisiopatolgicas en Anemia y Policitemia. Colombia: 16-20