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Original

Polimorsmo 3UTR +62G>A del gen RETN codicante de resistina n con componentes del s ndrome metabo lico y asociacio
Nailet Arraiz a,b,*, Carolina Escalona a, Carem Prieto a, Valmore Bermudez c, Endrina Mujica a, a Patricia Sanchez b y Andrea Mujica a Mar
a n de la Seccio n de Biologa Molecular, Centro de Investigaciones Endocrino-Metabo licas Dr. Fe lix Go mez, Facultad de Medicina, Universidad del Zulia, Coordinacio Maracaibo, Estado Zulia, Venezuela b lisis, Facultad de Medicina, Universidad del Zulia, Maracaibo, Estado Zulia, Venezuela Escuela de Bioana c n de la Seccio n Me dica, Centro de Investigaciones Endocrino-Metabo licas Dr. Fe lix Go mez, Facultad de Medicina, Universidad del Zulia, Maracaibo, Coordinacio Estado Zulia, Venezuela

N DEL ARTI CULO INFORMACIO

R E S U M E N

Historia del artculo: Recibido el 12 de marzo de 2012 Aceptado el 12 de julio de 2012 On-line el xxx Palabras clave: Resistina RETN 3UTR 62G/A rs3745368 ndrome metabo lico S

Fundamento y objetivo: Diversos polimorsmos del gen de la resistina (RETN) se han asociado con licas. En este estudio se evaluo la asociacio n entre el polimorsmo 3UTR +62G>A alteraciones metabo ndrome metabo lico. del gen RETN y elementos del s todo: La poblacio n de estudio (n = 218) fue distribuida en 3 grupos: control, sin alteraciones Sujetos y me licas aisladas (n = 94); y SM, con s ndrome licas (n = 77); AMnS, con alteraciones metabo metabo por PCR-RFLP. lico (n = 47). El polimorsmo 3UTR +62G>A se analizo metabo n ma s frecuentemente descrita tanto en el grupo AMnS Resultados: La obesidad central fue la alteracio nas de alta (56,4%) como en el SM (91,5%), seguida de bajos niveles de colesterol unido a lipoprote n arterial (85%) en el grupo SM. La densidad (colesterol HDL) (42,6%) en el grupo AMnS e hipertensio n fue del 20,2%. El genotipo G/A fue ma s frecuente en los frecuencia del genotipo +62G/A para la poblacio n ale lica fue grupos SM (38,3%) y AMnS (17%) que en el grupo control (13%). La distribucio signicativamente diferente entre grupos control (+62G = 0,94, +62A = 0,06) y SM (+62G = 0,81, asociacio n signicativa entre el genotipo G/A y valores elevados +62A = 0,19) (p = 0,0001). Se encontro n arterial sisto lica (p = 0,003). de circunferencia abdominal (p = 0,047), glucemia basal (p = 0,02) y presio n del genotipo RETN +62G/A con valores elevados de n: Los resultados sugieren una asociacio Conclusio lica, hiperglucemia y obesidad central. La asociacio n con estas alteraciones parece n arterial sisto presio n en el contexto de s ndrome metabo lico. ser independiente de posibles efectos de agrupacio a, S.L. Todos los derechos reservados. 2012 Elsevier Espan

3UTR +62G>A polymorphism of the RETN gene coding resistin and its association with metabolic syndrome components
A B S T R A C T

Keywords: Resistin RETN 3UTR 62G/A rs3745368 Metabolic syndrome

Background and objective: The polymorphism of the resistin gene (RETN/RSTN) has been associated with metabolic alterations. In this study the association between the 3UTR +62G>A polymorphism and metabolic syndrome components was evaluated. Subjects and methods: The population (n = 218) was distributed in 3 groups: the control group with no metabolic alterations (n = 77), nSMA group with isolated metabolic alterations (n = 94) and MS group with metabolic syndrome (n = 47). The 3UTR +62G>A polymorphism was analyzed by PCR-RFLP. Results: Central obesity was the most frequent alteration in both nSMA (56.4%) and MS (91.5%) groups followed by low c-HDL levels in the nSMA group (42.6%) and arterial hypertension in the MS group (85%). The frequency of the +62G/A genotype was 20.2% in the population. The G/A genotype was more frequently found in the MS (38.3%) and nSMA (17%) groups than in the control group (13%). The allelic distribution between the control group (+62G = 0.94, +62A = 0.06) and MS group (+62G = 0.81, +62A = 0.19) was signicantly different (P = .0001). Signicant associations between the G/A genotype

* Autor para correspondencia. nico: narraiz1@gmail.com (N. Arraiz). Correo electro a, S.L. Todos los derechos reservados. 0025-7753/$ see front matter 2012 Elsevier Espan http://dx.doi.org/10.1016/j.medcli.2012.07.020

mo citar este art culo: Arraiz N, et al. Polimorsmo 3UTR +62G>A del gen RETN codicante de resistina y asociacio n con Co ndrome metabo lico. Med Clin (Barc). 2012. http://dx.doi.org/10.1016/j.medcli.2012.07.020 componentes del s

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and high values of abdominal circumference (P = .047), basal glycemia (P = .02) and systolic arterial pressure (P = .003) were found. Conclusion: The ndings suggest the association between the G/A genotype and high values of systolic arterial pressure, basal glycemia and abdominal circumference. This association was independent of the metabolic syndrome context. a, S.L. All rights reserved. 2012 Elsevier Espan

n Introduccio Actualmente se reconoce el papel del tejido adiposo como rgano endocrino, paracrino y autocrino, que participa activao ntesis de enzimas y hormonas involucradas en mente en la s ltiples funciones reguladoras del metabolismo y otros procesos mu gicos. Todo ello mediado por la produccio n de adipocitosiolo cinas, tales como leptina, adiponectina, factor de necrosis tumoral n en los valores plasma ticos de alfa (TNF-a) y resistina. La alteracio nesis de estas adipocitocinas parece estar involucrada en la patoge ndrome metabo lico y diversas alteraciones relacionadas con el s sus complicaciones14. ltimos an os, diversos estudios en humanos han En los u n entre los valores plasma ticos de la demostrado la asociacio hormona resistina y la resistencia a la insulina, obesidad, diabetes n inducida por resistencia a la insulina59, y se ha e hipertensio n de resistina podr a ser utilizada como alado que la concentracio sen n, predictor de ateroesclerosis coronaria10. marcador de inamacio n del gen codicante Paralelamente se ha comunicado que la expresio ticos, de resistina (RETN) pudiera estar inuenciada por factores gene lo cual ha sido valorado en diferentes estudios11,12. En el gen RETN, localizado en el cromosoma 19p13.2 y extendido n de aproximadamente 1.369 pb (NC_000019.9), se han en una regio detectado al menos 96 single nucleotid polymorphisms (SNP, nico nucleo tido), localizados en regiones polimorsmos de un u nicas y 3 no traducida (3UTR) del gen1113, de los promotora, intro cuales al menos 25, con valores de minor allele frequency (MAF, frecuencia del alelo minoritario) > 0,05, han sido evaluados en n con obesidad, diabetes, hipertensio n y riesgo estudios de asociacio de enfermedad cardiovascular. Sin embargo, se ha descrito una amplia variabilidad en los resultados, que incluye desde la ausencia n hasta asociaciones muy signicativas, de biles o muy de asociacio neas con diversas alteraciones metabo licas, con poca heteroge tnicos1119. reproducibilidad en diferentes grupos e Debido a la potencial importancia de la 3UTR del gen RETN en la n fenot pica de algunas alteraciones metabo licas, en este expresio la asociacio n de las versiones ale licas del SNP estudio se evaluo 3UTR +62G>A (rs3745368) del gen RETN con componentes ndrome metabo lico, para individuales asociadas o no con s ticas asociadas a riesgo de enfermedad identicar variantes gene n del municipio Maracaibo (Venecardiovascular en una poblacio zuela).

n del polimorsmo 3UTR +62G>A del Para evaluar la asociacio licas individuales o combinadas, gen RETN con alteraciones metabo ndrome metabo lico, los pacientes fueron en el contexto de s 77 pacientes que clasicados en 3 grupos. El grupo control incluyo an alteraciones metabo licas ni antropome tricas, ni anteno ten cedentes personales de las mismas. Por otra parte, los pacientes licas fueron clasicados como AMnS con alteraciones metabo licas, no sindro mico) y SM (s ndrome (alteraciones metabo lico). El grupo AMnS inclu a a 94 individuos que ten an metabo licas o antropome tricas individuales, pero que alteraciones metabo an criterios diagno sticos de SM. El grupo SM se conformo no cumpl an alteraciones metabo licas o antropocon 47 pacientes que ten tricas, que de forma combinada cumpl an por lo menos 3 de los me stico de SM, de acuerdo con el consenso de IDF/ criterios diagno AHA/NHLBI21. Los participantes rmaron un documento de consentimiento, n de los objetivos del estudio. El protocolo de previa informacio n fue aprobado por el Consejo de Desarrollo Cient co investigacio stico de la Universidad del Zulia y se cumplieron los y Human n de Helsinki en su revisio n de octubre postulados de la Declaracio de 2008. n de s ndrome metabo lico o sus Los criterios de denicio componentes individuales se especican en la tabla 1. Se stico de hipotiroidismo, hipertiexcluyeron pacientes con diagno as y trastornos autoroidismo, enfermedad renal, coagulopat inmunes. n de para metros cl nicos, antropome tricos y de La evaluacio a cabo de acuerdo con el protocolo esta ndar del laboratorio se llevo n lineamientos especicados previamente20. CIEM, segu nico nucleo tico (rs3745368) del gen Genotipeo de polimorsmo de un u RETN n de ADN se realizo a partir de 5 ml de sangre La extraccio n, segu n la te cnica combinada de obtenida por venopuncio n de ADN salting out22. La amplicacio n de la regio n extraccio rca del gen RETN se llevo a cabo por polymerase chain polimo n en cadena de la polimerasa), utilizando reaction (PCR, reaccio tidos y condiciones de reaccio n descritas previaoligonucleo lisis de restriccio n de la regio n polimo rca se mente23. El ana a cabo por digestio n del producto PCR de 249 con la enzima llevo BseRI, que genera fragmentos de 238 pb y 11 pb cuando el alelo presente, y la ausencia del corte pone de maniesto la +62A esta n fueron presencia del alelo +62G. Los productos de digestio n con analizados en geles de poliacrilamida al 12%, mediante tincio nitrato de plata. lisis estadstico Ana

todo Sujetos y me n muestral Poblacio En el presente trabajo se analizaron 218 pacientes adultos de os, ambos sexos con edades comprendidas entre 18 y 73 an pertenecientes a la cohorte del Programa de Prevalencia de ndrome Metabo lico (PreSiMe) de la poblacio n del municipio S Maracaibo, que se desarrolla en eI Centro de Investigaciones licas (CIEM) Dr. Fe lix Go mez, desde noviembre Endocrino-Metabo o 2007 hasta el presente20. Los pacientes fueron selecciodel an s del instrumento de generacio n de datos aleatorios nados a trave de SPSS1 v17 para Windows, de un total de 1.850 pacientes.

n normal de las variables se comprobo mediante La distribucio las pruebas de Kolmogorov-Smirnov. Se describieron medidas de n media para variables de distribucio n tendencia central y dispersio n no normal, y mediana y rango para variables con distribucio normal. Las diferencias de las medias se analizaron mediante t de n de Tukey en las Student y ANOVA de un factor con la correccio n normal, y la prueba U de Mann-Whitney variables con distribucio n no normal. en aquellas variables que exhibieron una distribucio

mo citar este art culo: Arraiz N, et al. Polimorsmo 3UTR +62G>A del gen RETN codicante de resistina y asociacio n con Co ndrome metabo lico. Med Clin (Barc). 2012. http://dx.doi.org/10.1016/j.medcli.2012.07.020 componentes del s

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N. Arraiz et al / Med Clin (Barc). 2012;xx(x):xxxxxx Tabla 1 stico de s ndrome metabo lico utilizados Criterios de diagno Coexistencia de 3 de los siguientes criterios Circunferencia abdominal elevada ridos Valor alto de triglice Valor bajo de colesterol HDL n Hipertensio Alto valor de glucosa en plasma Varones > 94 cm, mujeres > 80 cm stico previo  1,7 mmol/l (150 mg/dl) o seguir un tratamiento de acuerdo con el diagno < 1,0 mmol/l (40 mg/dl) en varones, < 1,3 mmol/l (50 mg/dl) en mujeres lica  130 mmHg, diasto lica  85 mmHg o seguir un tratamiento de acuerdo con el diagno stico previo Sisto Glucosa en plasma en ayunas  5,6 mmol/l (100 mg/dl) o diabetes tipo 2 ya diagnosticada 3

nas de alta densidad. Colesterol HDL: colesterol unido a lipoprote Fuente: Alberti et al.21.

la correlacio n de las variables mediante el coeciente Se determino n de Pearson (para variables con distribucio n normal) de correlacio n no normal). Se y de Spearman (para las variables con distribucio la prueba de ji al cuadrado para determinar el equilibrio de utilizo n genot pica o Hardy-Weinberg. Los ana lisis se realidistribucio stico SPSS1 v17 (SPSS Inc., Chicago, IL, zaron en el paquete estad n de la muestra, con EE.UU.) para Windows, al igual que la seleccio un nivel de conanza de 95%. Un valor de p < 0,05 se considero sticamente signicativo. estad

Resultados la posible asociacio n del polimorsmo En este estudio se evaluo licas 3UTR +62G/A (SNP: rs3745368) con alteraciones metabo ndrome metabo lico aisladas (grupo AMnS) o en el contexto del s (grupo SM) en 218 pacientes pertenecientes a la cohorte del n del municipio Maracaibo20. El Programa PreSiMe de la poblacio 50 pacientes del sexo femenino y 44 del grupo AMnS incluyo os, con un masculino, con edades comprendidas entre 17 y 63 an os, mientras que el grupo SM promedio (DE) de 35,8 (16,5) an 19 pacientes del sexo femenino y 28 del masculino, con incluyo os, con un promedio de 38,9 edades comprendidas entre 19 y 65 an os. El grupo control estuvo constituido por 32 pacientes (19,7) an del sexo femenino y 45 del masculino, con edades comprendidas os, con un promedio de 34,88 (11,98) an os. No entre 18 y 62 an hubo diferencias signicativas en las variables edad y sexo de los grupos evaluados. sticas antropome tricas y En la tabla 2 se muestran las caracter licas de la poblacio n evaluada. Las medias y medianas de metabo stico de s ndrome metabo lico, a saber, los 5 criterios para el diagno circunferencia abdominal, glucemia basal, hipertrigliceridemia, nas de alta densidad valores de colesterol unido a lipoprote n arterial, resultaron signicativamente (colesterol HDL) y presio superiores en los grupos AMnS y SM comparados con el grupo control, aunque para el grupo AMnS no hubo diferencias sticamente signicativas en los valores de presio n arterial estad lica y diasto lica con respecto al grupo control. sisto
Tabla 2 sticas antropome tricas y metabo licas de la poblacio n de estudio Caracter stica Caracter Circunferencia abdominal (cm)a ridos (mg/dl)b Triglice Colesterol HDL (mg/dl) PAS (mmHg) PAD (mmHg) Glucemia basal (mg/dl) Insulina basal (U/ml)b HOMA-IRb IMC (kg/m2)b Colesterol LDL (mg/dl)b Grupo control (n = 77), media (DE) 78 70,73 58,79 110,33 70,29 87,2 9,40 1,38 23,2 101,91 (RI 71-86) (26,26) (13,9) (10,19) (7,58) (6,43) (2,67) (0,39) (3,51) (29,84)

s de estas alteraciones, que forman parte de los criterios Adema n de s ndrome metabo lico, tambie n se muestra que de evaluacio metros considerados de gran intere s en la evaluacio n de otros para riesgo cardiovascular, tales como el modelo de resistencia a la insulina (HOMA-IR), el colesterol total y el colesterol unido a nas de baja densidad (colesterol LDL), se encontraron lipoprote signicativamente elevados en los grupos AMnS y SM con respecto al grupo control (p < 0,05). ndice de masa Se debe destacar que los valores elevados de corporal (IMC) reejan que el sobrepeso y la obesidad son alteraciones reiteradas en los grupos de estudio, con valores promedio de IMC de 27 y 32 kg/m2 para los grupos AMnS y SM, respectivamente, con predominio de obesidad central, de acuerdo con los valores promedio de circunferencia abdominal de 83 (rango lico 79-93) para el grupo AMnS y 107 (rango intercuarintercuart lico 96,5-117) para el grupo SM, superando este u ltimo los puntos t de referencia considerados de riesgo por la IDF/AHA/NHLBI. El predominio de la obesidad central se evidencia igualmente al tricas y metabo licas enconevaluar las alteraciones antropome n, tanto de manera tradas con mayor frecuencia en la poblacio ada de individual en el grupo AMnS, como formando parte de la tr ndrome metabo lico (tabla 3). Se encontro que el alteraciones del s 56,4% de los individuos del grupo AMnS presentaron valores elevados de circunferencia abdominal (CABDelev), comportamiento que es muy marcado para el grupo SM, donde 43 (91,5%) de los 47 individuos tuvieron valores de circunferencia abdominal por encima de los puntos de corte propuestos para el ndrome metabo lico. s a entre ambos grupos de La prevalencia de las alteraciones var rquico de frecuencia mostrado estudio, siguiendo un orden jera en la tabla 3: CABDelev > HDL bajo > hiperglucemia > HTA > hipertrigliceridemia para el grupo AMnS, con valores de 56,4; 42,6; 13,8; 10,6 y 7,4%, respectivamente, para estas variables, mientras que en el grupo SM, el orden de frecuencia observado fue CABDelev > HTA > HDL bajo > hipertrigliceridemia = hiperglucemia (91,5; 85,1; 74,5 y 68%, respectivamente). n permiten establecer el orden de Los datos de la tabla 3 tambie frecuencia de alteraciones discriminadas por sexo en cada grupo de

Grupo AMnS (n = 94)/grupo SM (n = 47), media (DE) 83 (RI 79-93)/107 (RI 96,5-117) 93 (51,6)/242,43 (176,45) 49,7 (9,2)/39,77 (9,5) 128,41 (21,45)/182,4 (21,7) 78,79 (12,9)/84,5(13,8) 120,14 (62,4)/150,7 (9,4) 13,4 (7,9)/21,7(9,38) 2,38 (1,2)/3,84 (1,8) 27,90 (7,3)/32,3 (7,55) 110,58 (23,7)/136,6 (31,7)

p 0,0001/0,0001 0,038/0,0001 0,019/0,0001 0,147/0,0001 0,174/0,0001 0,001/0,0001 0,03/0,007 0,003/0,0001 0,002/0,0001 0,06/0,001

licas, no sindro mico; Colesterol HDL: colesterol unido a lipoprote nas de alta densidad; Colesterol LDL: colesterol unido a lipoprote nas de baja AMnS: alteraciones metabo n esta ndar; IMC: ndice de masa corporal; PAD: presio n arterial disto lica; PAS: presio n arterial sisto lica; SM: s ndrome metabo lico. densidad; DE: desviacio a lico (RI) por presentar una distribucio n no normal. Se describen mediana y rango intercuart b transformacio n logar tmica. Se aplico

mo citar este art culo: Arraiz N, et al. Polimorsmo 3UTR +62G>A del gen RETN codicante de resistina y asociacio n con Co ndrome metabo lico. Med Clin (Barc). 2012. http://dx.doi.org/10.1016/j.medcli.2012.07.020 componentes del s

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Tabla 3 Frecuencia de alteraciones en los grupos de estudio diferenciadas por sexo n Alteracio Mujeres (N = 50), n (%) CABD elevado Hipertrigliceridemia Colesterol HDL bajo HTA Hiperglucemia 29 2 25 4 4 (58) (4) (50) (8) (8) Grupo AMnS (N = 94) Varones (N = 44), n (%) 24 5 15 6 9 (54,5) (11,4) (34) (13,6) (20) Total (%) 53 7 40 10 13 (56,4) (7,4) (42,6) (10,6) (13,8) Mujeres (N = 19), n (%) 17 11 17 17 13 (89,5) (57,9) (89,5) (89,5) (88,4) Grupo SM (N = 47) Varones (N = 28), n (%) 26 21 18 23 19 (92,9) (75%) (64,3) (82,1) (67,9) Total (%) 43 32 35 40 32 (91,5) (68,0) (74,5) (85,1) (68,0)

licas, no sindro mico; CABD: circunferencia abdominal; Colesterol HDL:colesterol unido a lipoprote nas de alta densidad; HTA: hipertensio n AMnS: alteraciones metabo ndrome metabo lico. arterial; SM: s

estudio. Los individuos del sexo femenino exhiben casi la misma tendencia en grupos AMnS y SM, siendo CABDelev > HDL bajo  HTA  hiperglucemia > hipertrigliceridemia. lisis en individuos del sexo masculino con Al hacer el mismo ana ndrome metabo lico, se encuentra que despue s de la adiposidad s n encontrada con mayor frecuencia es abdominal, la alteracio n arterial (82,1%), seguida de hipertrigliceridemia la hipertensio ltimos lugares se ubican la (75%), mientras que en los u ndose hiperglucemia y valores bajos de colesterol HDL, destaca n en la tendencia observada en el grupo de mujeres una desviacio una mayor frecuencia de del grupo SM, en la cual se percibio alteraciones en los valores de colesterol HDL y menor frecuencia de hipertrigliceridemia. Para los individuos del sexo masculino del grupo AMnS se n CABDelev > hiperglucemia > HDL bajo > HTA > observa un patro hipertrigliceridemia, casi equivalente al observado para el grupo AMnS, incluyendo las participantes del sexo femenino. metros Concordando con lo observado, para cada uno de los para n ma s frecuentemente encontrada en los evaluados, la combinacio ndrome metabo lico denido fue la tr ada CABDelev/ casos de s HTA/HDL bajo, presente en 22 (46,8%) casos del grupo SM, seguida de combinaciones CABDelev/HTA/hipertrigliceridemia en 19 casos (40,4%); HDL bajo/HTA/hipertrigliceridemia en 18 casos (38,3%); CABDelev/HDL bajo/hipertrigliceridemia en 17 casos (36,2%) y CABDelev/HTA/hiperglucemia en 15 casos (32%). n del polimorsmo Para establecer la posible asociacio rs3745368 (3UTR +62G/A) del gen de la resistina, se analizo n genot pica y ale lica de la poblacio n. La frecuencia la distribucio pica para la poblacio n total (218 pacientes) fue de 20,2% genot para el genotipo heterocigoto +62G/A y de 78,8% para el genotipo homocigoto +62G/G (tabla 4), mientras que el genotipo

n homocigoto A/A no fue detectado en el estudio. La distribucio pica en la poblacio n para este locus se encuentra en genot equilibrio de Hardy-Weinberg, con un valor de ji al cuadrado de 2,746 (p = 0,174). s frecuente en el grupo El genotipo G/A fue 2,95 y 2,25 veces ma SM (38,3%) comparado con grupos AMnS (17%, p = 0,05) y control (13%, p = 0,03), respectivamente. n ale lica, se observo una frecuencia Con respecto a la distribucio n de 0,90 para el alelo +62G y 0,10 para el alelo +62A en la poblacio n ale lica fue signicativamente total (tabla 5). La distribucio diferente entre los grupos control (+62G = 0,94, +62A = 0,06) y SM (+62G = 0,81, +62A = 0,19), donde se destaca que el alelo +62A s frecuente en el grupo SM que en el grupo control es 3 veces ma n es signicativa en el grupo (p = 0,0001). Esta diferencia tambie AMnS con respecto al grupo control (p = 0,035) (tabla 5). n de las medias de los valores para los criterios La comparacio ndrome metabo lico se realizo para considerados componentes de s cada genotipo, tanto en el grupo AMnS como en el SM, a n de n del genotipo con alteraciones metabo licas evaluar la relacio n en el contexto de s ndrome de manera aislada o en combinacio lico (tabla 6). Se observo que los valores de las medias de la metabo a de los para metros evaluados en el grupo AMnS fue mayor superior en los individuos portadores del genotipo G/A, excepto para valores de colesterol HDL, insulina basal y HOMA-IR, donde se un ligero incremento en las medias de estos para metros en observo el grupo con genotipo homocigoto GG (p = 0,065), pero el hallazgo s importante del estudio es la asociacio n estad sticamente ma signicativa encontrada entre el genotipo heterocigoto 3UTR +62 n arterial G/A y CABDelev (p = 0,047), glucemia basal (0,02) y presio lica (0,003), como variables aisladas independientes del sisto ndrome metabo lico. contexto de s

Tabla 4 pica del polimorsmo +62G>A del gen RETN en pacientes control y con alteraciones metabo licas Frecuencia genot Genotipo n G/G G/A Total 67 10 77 Grupo control (N = 77) Frecuencia (%) 87 13 100 n 78 16 94 Grupo AMnS (N = 94) Frecuencia (%) 83 17 100 n 29 18 47 Grupo SM (N = 47) Frecuencia (%) 61,7 38,3 100 n total (N = 218) Poblacio n 174 44 218 Frecuencia (%) 79,8 20,2 100

licas, no sindro mico (AMnS) frente a control (p = 0,09), grupo con s ndrome metabo lico (SM) frente a control (p = 0,03), SM frente a AMnS Grupo con alteraciones metabo (p = 0,05).

Tabla 5 lica de +62G y +62A del gen RETN en pacientes control y con componentes del s ndrome metabo lico Frecuencia ale Alelo N G A Total 144 10 154 Grupo control Frecuencia 0,94 0,06 1,00 N 172 16 188 (94) Grupo AMnS Frecuencia 0,91 0,09 1,00 (1,00) N 76 18 94 Grupo SM Frecuencia 0,81 0,19 (1,0) N 392 44 436 Total Frecuencia 0,90 0,10 1,00

licas, no sindro mico; SM: s ndrome metabo lico. AMnS: alteraciones metabo n: grupo control frente a AMnS (p = 0,035), y control frente a SM (p = 0,0001). Frecuencia del alelo A. Signicacio

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N. Arraiz et al / Med Clin (Barc). 2012;xx(x):xxxxxx Tabla 6 n de las variables antropome tricas y metabo licas entre versiones polimo rcas de regio n 3UTR +62 G>A del gen RETN (rs3745368) Comparacio metro Para GG CABDa Trigliceridemia (mg/ml)b Colesterol HDL (mg/ml) PAS (mmHg) PAD (mmHg) Glucemia basal (mg/dl) Insulina basal (U/ml)b HOMA-IRb IMC (kg/m2)b Colesterol LDL (mg/dl)b 83 92,7 49,3 112,6 72,94 91,8 16,56 2,4 25,2 109,1 (RI 78-87,5) (45,5) (9,6) (13,7) (8,2) (10,8) (9,5) (0,9) (4,9) (22,2) Grupo AMnS, media (DE) (n = 94) GA 89,5 98,8 48,1 122,4 74,4 113,4 14,93 2,3 28,7 115,5 (RI 81,71-103,75)* (32,1) (7,3) (16,4)** (9,6) (46,4)*** (4,3) (0,7) (10,4) (30,4) GG 107 238,4 40,9 128,8 82,9 144,9 20,3 3,75 30,5 134,2 (RI 91,5-116) (81,44) (9,7) (19,9) (13,1) (38,7) (8,3) (2,3) (8,5) (38,7) Grupo SM, media (DE) (n = 47) GA 107 200,5 38,0 142,4 87,1 153,6 24,3 4,0 32,1 137,7 (RI 98,36-122,75) (65,8) (9,17) (23,6)**** (14,9) (52,3) (12,0) (2,4) (6,2) (32,6) 5

licas, no sindro mico; CABD: circunferencia abdominal; Colesterol HDL: colesterol unido a lipoprote nas de alta densidad; Colesterol LDL: AMnS: alteraciones metabo nas de baja densidad; DE: desviacio n esta ndar; IMC: ndice de masa corporal; PAD: presio n arterial diasto lica; PAS: presio n arterial sisto lica; SM: colesterol unido a lipoprote lico. ndrome metabo s a lico (RI) (distribucio n no normal). Se describen las medianas y el rango intercuart b la transformacio n logar tmica para ser tratadas como variables con distribucio n normal. Se utilizo * p = 0,047. ** p = 0,003. *** p = 0,02. **** p = 0,036.

n del genotipo G/A con hipertensio n tambie n fue La asociacio observada en el grupo SM, indicando que este componente del ndrome metabo lico se asocia invariablemente a la presencia s mico o de manera aislada en la del alelo A en contextos sindro n evaluada (tabla 6). En el grupo SM no se encontro poblacio metros diferencia signicativa entre las medias de otros para evaluados entre los individuos portadores de genotipos G/G y G/A. asociacio n signicativa de polimorsmos Tampoco se encontro metros metabo licos evaluados, tales 3UTR +62 G/A con otros para na A, insulina, ndice de como valores de colesterol LDL, lipoprote insulinorresistencia (HOMA-IR) y metabolismo basal, al analizar n total. los grupos de estudio individualmente o en la poblacio n Discusio n de polimorsmos del gen Con el n de evaluar la asociacio ndrome RETN codicante de resistina con componentes del s lico, en este estudio los pacientes fueron distribuidos en metabo grupos de individuos exhibiendo diversas alteraciones en valores tricos o metabo licos en contextos sindro mico y no antropome mico. sindro ltimo consenso publicado para la A pesar de que en el u n de s ndrome metabo lico21 se prescindio de la adiposidad denicio se abdominal como un criterio obligatorio, en nuestro estudio s como uno de los determinantes para la denicio n de dicho empleo ndrome, siguiendo las recomendaciones previas de la IDF24, como s stica lo revela el hecho de que CABDelev fue una caracter recurrente en el 91,5% de los individuos que presentaban stico de comorbilidades consideradas como criterios de diagno ndrome metabo lico, lo cual apoya la recomendacio n de la IDF de s n de la circunferencia abdominal como seguir utilizando la medicio n para la prevencio n del riesgo cardioherramienta de evaluacio vascular. n importante relacionada con las caracter sticas Una observacio licas de los grupos evaluados es que despue s de la metabo n frecuente fue la disminucio n adiposidad abdominal, una alteracio en los valores de colesterol HDL, ocupando el segundo y tercer mico (grupo AMnS) y sindro mico lugar en contextos no sindro ltimo se (grupo SM), respectivamente; sin embargo, en este u n arterial como la alteracio n ma s frecuente destaca la hipertensio (85%). s resaltantes de este estudio fue la Uno de los hallazgos ma n signicativa encontrada entre el genotipo 3UTR asociacio ndrome metabo lico y con algunos +62G>A del gen RETN con el s

n de de sus elementos individuales. Diversos estudios de asociacio SNP del gen RETN con obesidad, diabetes e insulinorresistencia y, ndrome metabo lico, han arrojado resultados en general, con s n hasta inconsistentes que van desde la ausencia de asociacio neas con diversas alteraciones metabo asociaciones muy heteroge s investigado del licas18,19,23,25. Por ejemplo, el polimorsmo ma n gen RETN es el -420C/G (rs1862513), localizado en la regio promotora para el cual se ha encontrado un incremento en los valores de resistina y riesgo de diabetes tipo 21517. Sin embargo, lisis diversas publicaciones, incluyendo un reciente metaana utilizando las bases de datos Medline, EMBASE y Cochrane, n de esta variante -420C/G con el describen la ausencia de asociacio riesgo de desarrollo de diabetes tipo 2 y enfermedad cardiovascu ltimos an os se ha dirigido la lar13,26,27, de manera que en los u n a otras variantes del gen RETN, por ejemplo de la regio n atencio 3UTR12,13, tal como el polimorsmo 3UTR +62 G/A investigado en este trabajo. n encontrada en este estudio del alelo 3UTR La posible asociacio licas +62A del gen RETN en pacientes con alteraciones metabo n diere sustancialmente de resultados obtenidos en una poblacio mayor riesgo de alteraciones en en China, donde se encontro individuos portadores del alelo +62G23. Tan et al. (2003) encontraron un bajo riesgo para el desarrollo de diabetes tipo 2 s, que los individuos en portadores del alelo +62A y, adema ticos con genotipo +62G/G ten an ma s alta prevalencia de diabe n, sugiriendo que la variante 3UTR +62A se asocio a una hipertensio n del riesgo de hipertensio n relacionada con resistencia disminucio s, no encontraron diferencias signicativas con a la insulina; adema metros tales como glucemia basal y dislipidemias, al otros para n total23. evaluar la poblacio s En nuestro estudio, el alelo 3UTR +62A fue 3 veces ma ndrome metabo lico con respecto al frecuente en pacientes con s grupo control, y los individuos portadores del alelo +62A n arterial sisto lica signicativamente exhibieron valores de presio superiores a aquellos con genotipo 3UTR +62G. Esta tendencia fue metro en observada independientemente al evaluar este para grupos AMnS o SM. n china y A diferencia de lo observado en la poblacio consistente con los resultados de nuestro estudio, otros autores n signicativa del alelo +62A con valores describen una asociacio n arterial sisto lica y diasto lica, aunque no elevados de presio n de este polimorsmo con diabetes tipo 2, observaron asociacio nas en una poblacio n de IMC elevado y altos valores de lipoprote Alemania18.

mo citar este art culo: Arraiz N, et al. Polimorsmo 3UTR +62G>A del gen RETN codicante de resistina y asociacio n con Co ndrome metabo lico. Med Clin (Barc). 2012. http://dx.doi.org/10.1016/j.medcli.2012.07.020 componentes del s

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Adicionalmente, en el presente estudio, el genotipo heteroci con CABDelev e hiperglucemia, y esta goto +62G/A se correlaciono n no resulta de un efecto de agrupacio n de componentes asociacio ndrome metabo lico, debido a que los resultados obtenidos de s n entre la para el grupo AMnS permiten sugerir una relacio presencia del alelo +62A y estas alteraciones de manera n sindro mica. independiente del efecto de la agrupacio n entre alado una asociacio En diversas investigaciones se ha sen rica y deso rdenes el incremento en los valores de resistina se licos, incluyendo obesidad, resistencia a la insulina, metabo diabetes tipo 2 y aterosclerosis1,2,12,2830. Por ejemplo, en una n japonesa se encontro una fuerte asociacio n entre valores poblacio n de triglice ridos, bajos de resistina e IMC elevado, concentracio valores de colesterol y resistencia a la insulina12. Y en un estudio s reciente llevado a cabo en Finlandia se encontro transversal ma ndrome que los valores de resistina se asocian positivamente con s lico, en particular con circunferencia abdominal, TNF a y metabo resistencia a la insulina, e inversamente con colesterol LDL y HDL30. n del alelo 3UTR +62A De acuerdo con lo anterior, la asociacio ndrome metabo lico (rs3745368) con los componentes del s a estar relacionada con encontrada en el presente trabajo podr n del gen de resistina por mecanismos que una mayor expresio n, la traduccio n o el involucren mayor eciencia de la transcripcio tido A se incremento en la estabilidad del ARNm cuando el nucleo n, ubicada a una distancia de 62 pb encuentra en esta posicio ltima base del codo n de terminacio n y a 10 corriente abajo de la u tidos precediendo la secuencia sen n, al de poliadenilacio nucleo n UTR no traducida del gen RETN. AATAAA de la regio rica y es No fue posible cuanticar los valores de resistina se cil sustentar la hipo tesis de mayores valores de expresio n del dif ndose en hallazgos de la literatura me dica debido a la gen basa escasa reproducibilidad de los resultados, ya que algunos autores n de resistina no diere entre publican que la concentracio portadores 3UTR +62G y 3UTR +62A18. a El efecto de polimorsmos sobre los valores de resistina podr ticos y factores estar inuido por otros determinantes gene tnicos. En el caso particular ambientales en diferentes grupos e de la variante 3UTR +62G/A, su efecto sobre los valores de resistina a estar inuido por otros SNP en la regio n 3 no traducida del podr se gen RETN, tales como rs4804765 y rs1423096, para los cuales s n con la concentracio n de resistina ha demostrado una asociacio rica13. No fue posible evaluar la contribucio n de otras regiones se rcas del gen RETN sobre los valores de resistina se rica y su polimo n con componentes del s ndrome metabo lico. asociacio La resistencia a la insulina ha sido considerada como una n central del s ndrome metabo lico capaz de desencadenar alteracio ltiples anormalidades, tales como disfuncio n endotelial e mu nicas sobre el endotelio vascular, y se contrainuencias mitoge pone al efecto vasodilatador de la insulina al promover la n de o xido n trico. Sin embargo, en nuestro estudio, de liberacio lisis de HOMA-IR como medida de resistencia a acuerdo con el ana evidencia que sugiera que las la insulina, no se encontro n con el genotipo menos alteraciones observadas en asociacio frecuente sean atribuibles a una resistencia a la insulina. n puede desencadenarse como consecuencia de La hipertensio n endotelial, estre s oxidativo y remodelado vascular. Se disfuncio n vasoconstrictora de la resistina para ha propuesto la accio n de concentracio n elevada de resistina e explicar la posible relacio n, entre ellos, incremento en la expresio n de mole culas hipertensio n, endotelina 1, metaloproteasas y otros mediadores de adhesio n endotelial31. potenciales de disfuncio n endotelial es una caracter stica Efectivamente, la disfuncio n en pacientes diabe ticos e hipertensos, asociada a inamacomu n e incremento en los niveles de mole culas de adhesio n. Se ha cio n positiva de los niveles de resistina demostrado una correlacio rica con mole culas de adhesio n VCAM-1 en pacientes diabe ticos se

hipertensos y, de acuerdo con esto, la resistina puede ser un n endotelial32, lo cual podr a explicar marcador de disfuncio n del polimorsmo rs3745368 con parcialmente la asociacio n observada en este estudio, pero ante la limitacio n hipertensio n de valores de resistina se rica para de no contar con la informacio cil sugerir posibles mecanismos involucrados cada genotipo, es dif ticas e hipertensio n, as como con las otras entre las variantes gene alteraciones identicadas. n para interpretar la inuencia del polimorsmo Otra limitacio 3UTR +62A en ausencia del alelo G es que en este estudio no se el genotipo homocigoto 3UTR +62A/A, por lo cual, nuestros detecto n ser conrmados en posteriores hallazgos preliminares debera o de la muestra para aumentar la estudios, incrementando el taman probabilidad de evaluar la inuencia del alelo +62A, el cual exhibio o, equivalente al un MAF de 0,06, un valor relativamente pequen registrado en las bases de datos dbSNP y dbHAPMAP (0,058/73), e n, con valores MAF intermedio entre poblaciones de Europa y Japo de 0,00230 y 0,09212, respectivamente. s de este estudio se encontro un incremento en la A trave n 3UTR del gen RETN en frecuencia del alelo +62A de la regio ndrome metabo lico y una asociacio n signicativa individuos con s n arterial, entre el genotipo heterocigoto +62G/A e hipertensio hiperglucemia y CABDelev, como alteraciones individuales e ndrome metabo lico. independientes de s n Financiacio n recibio nanciacio n del Consejo de Desarrollo La investigacio co y Human stico de la Universidad del Zulia, Venezuela Cient (Grant N8 CC-0397-10). Conicto de intereses n concto de intereses. Los autores declaran no tener ningu Agradecimientos co y Human stico de la Al Consejo de Desarrollo Cient n Universidad del Zulia por el conanciamiento de esta investigacio (Programa N8 CC-0397-10). a Bibliograf
1. Hallikainen M, Kolehmainen M, Schwab U, Laaksonen DE, Niskanen L, Rauramaa R, et al. Serum adipokines are associated with cholesterol metabolism in the metabolic syndrome. Clin Chim Acta. 2007;383:12632. 2. Norata GD, Ongari M, Garlaschelli K, Raselli S, Grigore L, Catapano AL. Plasma resistin levels correlate with the determinants of metabolic syndrome. Eur J Endocrinol. 2007;156:27984. lez Sagrado M, Conde R, Romero E. Inuence 3. de Luis DA, Aller R, Izaola O, Gonza of G308A polymorphism of tumor necrosis factor alpha gene on insulin resistance in obese patients after weight loss. Med Clin (Barc). 2007;129:4014. rez A, Blanco-Vaca F. Adiponectin: a new link between obesity, 4. Palomer X, Pe insulin resistance and cardiovascular disease. Med Clin (Barc). 2005;124: 38895. 5. Adeghate E. An update on the biology and physiology of resistin. Cell Mol Life Sci. 2004;61:248596. 6. Gandhi H, Upaganlawar A, Balaraman R. Adipocytokines: the pied pipers. J Pharmacol Pharmacother. 2010;1:917. 7. Hivert MF, Sullivan LM, Fox CS, Nathan DM, DAgostino Sr RB, Wilson PW, et al. Associations of adiponectin, resistin, and tumor necrosis factor-alpha with insulin resistance. J Clin Endocrinol Metab. 2008;93:316572. 8. Chen BH, Song Y, Ding EL, Roberts CK, Manson JE, Rifai N, et al. Circulating levels of resistin and risk of type 2 diabetes in men and women: results from two prospective cohorts. Diabetes Care. 2009;32:32934. 9. Heidemann C, Sun Q, van Dam RM, Meigs JB, Zhang C, Tworoger SS, et al. Total and high molecular-weight adiponectin and resistin in relation to the risk for type 2 diabetes in women. Ann Intern Med. 2008;149:30716. 10. Reilly M, Michael L, Wolfe M, Rohatgi A, Lazar M, Rader D. Resistin is an inammatory marker of atherosclerosis in humans. Circulation. 2005; 111:9329.

mo citar este art culo: Arraiz N, et al. Polimorsmo 3UTR +62G>A del gen RETN codicante de resistina y asociacio n con Co ndrome metabo lico. Med Clin (Barc). 2012. http://dx.doi.org/10.1016/j.medcli.2012.07.020 componentes del s

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N. Arraiz et al / Med Clin (Barc). 2012;xx(x):xxxxxx 11. Cho Y, Youn B, Chung S, Kim K, Lee H, Yu K, et al. Common genetic polymorphisms in the promoter of resistin gene are major determinants of plasma resistin concentrations in humans. Diabetologia. 2004;47:55965. 12. Asano H, Izawa H, Nagata K, Nakatochi M, Kobayashi M, Hirashiki A, et al. Plasma resistin concentration determined by common variants in the resistin gene and associated with metabolic traits in an aged Japanese population. Diabetologia. 2010;53:23446. 13. Hivert MF, Manning AK, McAteer JB, Dupuis J, Fox CS, Cupples LA, et al. Association of variants in RETN with plasma resistin levels and diabetes-related traits in the Framingham Offspring Study. Diabetes. 2009;58:7506. 14. Engert JC, Vohl MC, Williams SM, Lepage P, Loredo-Osti JC, Faith J, et al. 5 anking variants of resistin are associated with obesity. Diabetes. 2002;51: 162934. 15. Osawa H, Yamada K, Onuma H, Murakami A, Ochi M, Kawata H, et al. The G/G genotype of a resistin single-nucleotide polymorphism at -420 increases type 2 diabetes mellitus susceptibility by inducing promoter activity through specic binding of Sp1/3. Am J Hum Genet. 2004;75:67886. 16. Ochi M, Osawa H, Hirota Y, Hara K, Tabara Y, Tokuyama Y, et al. Frequency of the G/G genotype of resistin single nucleotide polymorphism at -420 appears to be increased in younger-onset type 2 diabetes. Diabetes. 2007;56:28348. 17. Osawa H, Tabara Y, Kawamoto R, Ohashi J, Ochi M, Onuma H, et al. Plasma resistin, associated with single nucleotide polymorphism -420, is correlated with insulin resistance, lower HDL cholesterol, and high-sensitivity C reactive protein in the Japanese general population. Diabetes Care. 2007;30:15016. 18. Gouni-Berthold I, Giannakidou E, Faust M, Kratzsch J, Berthold HK, Krone W. Resistin gene 3-untranslated region +62G>A polymorphism is associated with hypertension but not diabetes mellitus type 2 in a German population. J Intern Med. 2005;258:51826. 19. Ochi M, Osawa H, Onuma H, Murakami A, Nishimiya T, Shimada F, et al. The absence of evidence for major effects of the frequent SNP +299G>A in the resistin gene on susceptibility to insulin resistance syndrome associated with Japanese type 2 diabetes. Diabetes Res Clin Pract. 2003;61:1918. dez V, Marcano RP, Cano C, Arra iz N, Amell A, Cabrera M, et al. The 20. Bermu Maracaibo city metabolic syndrome prevalence study: design and scope. Am J Ther. 2010;17:28894. 21. Alberti KG, Eckel RH, Grundy SM, Zimmet PZ, Cleeman JI, Donato KA, et al. Harmonizing the metabolic syndrome: a joint interim statement of the 7

22. 23.

24.

25.

26.

27.

28.

29. 30.

31. 32.

International Diabetes Federation Task Force on Epidemiology and Prevention; National Heart, Lung, and Blood Institute; American Heart Association; World Heart Federation; International Atherosclerosis Society; and International Association for the Study of Obesity. Circulation. 2009;120:16405. Miller S, Dykes D, Polesky H. A simple salting out procedure for extracting DNA from human nucleated cells. Nucleic Acids Res. 1988;16:12158. Tan MS, Chang SY, Chang DM, Tsai JC, Lee YJ. Association of resistin gene 3untranslated region +62G>A polymorphism with type 2 diabetes and hypertension in a Chinese population. J Clin Endocrinol Metab. 2003;88:125863. Alberti KG, Zimmet P, Shaw J, IDF Epidemiology Task Force Consensus Group. The metabolic syndromea new worldwide denition. Lancet. 2005;366: 105962. Utzschneider KM, Carr DB, Tong J, Wallace TM, Hull RL, Zraika S, et al. Resistin is not associated with insulin sensitivity or the metabolic syndrome in humans. Diabetologia. 2005;48:23303. Wen Y, Lu P, Dai L. Association between resistin gene -420 C/G polymorphism and the risk of type 2 diabetes mellitus: a meta-analysis. Acta Diabetol. 2010 [consultado 20 Feb 2012]. Disponible en: http://www.springerlink.com/content/qp70p8l42x287228/?MUD=MP Chi S, Lan C, Zhang S, Liu H, Wang X, Chen Y, et al. Association of -394C>G and 420C>G polymorphisms in the RETN gene with T2DM and CHD and a new potential SNP might be exist in exon 3 of RETN gene in Chinese. Mol Cell Biochem. 2009;330:318. Ohmori R, Momiyama Y, Kato R, Taniguchi H, Ogura M, Ayaori M, et al. Associations between serum resistin levels and insulin resistance, inammation, and coronary artery disease. J Am Coll Cardiol. 2005;46:37980. Lazar MA. Resistin- and obesity-associated metabolic diseases. Horm Metab Res. 2007;39:7106. ho nen M, Nieminen MS, et al. Resistin Malo E, Ukkola O, Jokela M, Moilanen L, Ka is an indicator of the metabolic syndrome according to ve different denitions in the Finnish Health 2000 survey. Metab Syndr Relat Disord. 2011;9:20310. Bo S, Cavallo-Perin P. Hypertension: shall we focus on adipose tissue? J Am Soc Nephrol. 2010;21:10678. Lozano-Nuevo JJ, Estrada-Garcia T, Vargas-Robles H, Escalante-Acosta BA, Rubio-Guerra AF. Correlation between circulating adhesion molecules and resistin levels in hypertensive type-2 diabetic patients. Inamm Allergy Drug Targets. 2011;10:2731.

mo citar este art culo: Arraiz N, et al. Polimorsmo 3UTR +62G>A del gen RETN codicante de resistina y asociacio n con Co ndrome metabo lico. Med Clin (Barc). 2012. http://dx.doi.org/10.1016/j.medcli.2012.07.020 componentes del s