ANALISIS DE COLESTEROL Y TRIGLICERIDOS

Ao 2013

FACULTAD:
INGENIERIA GEOGRAFICA, AMBIENTAL Y ECOTURISMO

ESCUELA:
INGENIERIA AMBIENTAL

CURSO:
BIOQUIMICA

TEMA: Anlisis de Colesterol y Triglicridos

INTEGRANTES:
BELLIDO CRUZ KEVIN CORONEL DURAN ADALI CRUZ CHAVEZ SABINA DE LA CRUZ MORALES SOFIA EGUIZABAL SIU CYNTHIA JULCA CURI MAYORI MELLADO DELGADO GABRIELA - TA TICLLA HUAMAN JUAN VASQUEZ RONCEROS EVELIN YAPUCHURA COARITA LOURDES

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INTRODUCCIN

El siguiente informe muestra la evaluacin dada a diferentes muestras de sangre con el fin de determinar el nivel de triglicridos y colesterol presentes en cada una. En el informe se muestra detalladamente el procedimiento dado para la evaluacin, en el laboratorio y luego para los clculos requeridos con las frmulas planteadas con anterioridad.Dichas frmulas se necesitan para encontrar los niveles exactos de colesterol y triglicridos. Se requirieron para ello el uso de distintos reactivos y adems el espectrofotmetro. Finalmente con las frmulas predispuestas y los resultados del espectrofotmetro obtuvimos resultados respecto al nivel de triglicridos y colesterol presentes en las muestras evaluadas.Aquellos resultados nos revelaron la situacin de cada uno de los donantes, si estuvieron sobre el nivel normal o si presentaban algn tipo de anomala en dichos niveles, ya sea en demasa o minora.

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MARCO TERICO

Colesterol El colesterol es una molcula biolgica extremadamente importante que tiene papeles en la estructura de la membrana celular as como tambin en ser un precursor para la sntesis de las hormonas esteroides y de cidos biliares. Tanto el colesterol de la dieta como el que se sintetiza de nuevo se transportan en la circulacin en partculas de lipoprotenas. Lo mismo es verdad para los steres del colesterol, la forma en la cual el colesterol se almacena en clulas. El colesterol que se encuentra en los tejidos corporales y en el plasma sanguneo de los vertebrados. Se presenta en altas concentraciones en el hgado, mdula espinal, pncreas y cerebro. Pese a tener consecuencias perjudiciales en altas concentraciones, es esencial para crear la membrana plasmtica que regula la entrada y salida de sustancias que atraviesan la clula.

Colesterol en el plasma sanguneo El colesterol viaja a travs de la sangre para ser utilizado en las diversas partes del organismo. El nivel de colesterol normal en sangre est entre 150 y 200 ml. Cuando la concentracin es mayor se produce una hipercolesterolemia, es decir, un exceso de colesterol en sangre. En la sangre, el colesterol es transportado formando parte de unos complejos llamados lipoprotenas, que son las lipoprotenas de baja densidad (LDL) y las lipoprotenas de alta densidad (HDL). Las LDL son las encargadas de transportar el colesterol a las clulas para que puedan utilizarlo para realizar las funcione, de manera que su exceso en sangre es perjudicial. El colesterol malo se encuentra en la carne de res, cerdo, en el tocino, costilla y en el pollo frito.

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Las HDL se encargan de recoger el colesterol de la sangre y transportarlo al hgado para ser eliminado. Los alimentos rico en colesterol bueno son los aguacates, las almendras, aceite de olivar y nueces

Estructura qumica El colesterol es un compuesto alicclico cuya estructura comprende: Un ncleo ciclopentanoperhidrofenantreno formado por un anillo de fenantreno completamente reducido, unido a un ciclo de cinco tomos de carbono, formando cuatro anillos fusionados que se identifican con las letras A, B, C y D, Un solo grupo hidroxilo en el C-3, Un doble enlace entre los C-5 y C-6, Una cadena hidrocarbonada ramificada de ocho carbonos unida al anillo D en la posicin 17, Un grupo metilo (designado C-19) unido a la posicin 10 y otro grupo metilo (designado C-18) unido a la posicin 13. La posicin de los sustituyentes en los anillos est relacionada con el grupo metilo unido al C10. ste se proyecta hacia arriba del Este tipo de unin se representa con lnea llena, en cambio los sustituyentes ubicados por debajo del plano se denominan (alfa) y se indican con lnea punteada.

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Degradacin del colesterol En el ser humano no puede metabolizar la estructura del colesterol. El ncleo intacto de esterol se elimina del cuerpo convirtindose en cidos y sales biliares las cuales son secretadas en la bilis hacia el intestino para desecharse por heces fecales. Parte de colesterol intacto es secretado en la bilis hacia el intestino el cual es convertido por las bacterias en esteroides neutros.

Regulacin del colesterol La produccin en el humano del colesterol es regulada directamente por la concentracin del colesterol presente en el retculo endoplsmico de las clulas, habiendo una relacin indirecta con los niveles plasmticos de colesterol presente en las lipoprotenas de baja densidad. Una alta ingesta de colesterol en los alimentos conduce a una disminucin neta de la produccin endgena y viceversa. El principal mecanismo regulador de la homeostasis de colesterol celular aparentemente reside en un complejo sistema molecular centrado en las protenas. Alguna de las funciones del colesterol es: 1. El colesterol es sumamente importante en cuanto a su funcin estructural por el hecho de que es un componente basico de las membranas plasmticas. Aunque se encuentra en una pequea cantidad en las membranas, su funcion es vital. 2. Precursor de la vitamina D, es decir, es indispensable para el metabolismo del calcio. 3. Es sumamente importante para las hormonas sexuales, por la progesterona, estrgenos y testosterona. 4. Precursor de las hormonas corticoesteroidales, el cortisol y la aldosterona. 5. Principal componente de las sales biliares, imprescindible en la absorcin de algunos nutrientes lipdicos. 6. Precursor de las balsas de lpidos.
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OBJETIVO GENERAL
El alumno integrar aspectos bioqumicos concernientes al tema de lpidos, conocer mtodos para determinar el colesterol y los triglicridos estableciendo su relevancia metablica, con el anlisis de la muestra de sangre del donante obeso, con la ayuda de reactivo de colesterol y reactivo triglicridos.

OBJETIVO ESPECFICOS
Identificar por medio del examen de la muestra de sangre el consumo excesivo o no excesivo de carbohidratos(sntesis de cidos grasos) y grasas(colesterol y triglicridos) Reconocer el rango permisible de colesterol y triglicridos en la muestra de sangre del donante.

Aprender a utilizar los reactivo de colesterol y reactivo de triglicridos para los siguientes trabajos que se realizaran en el laboratorio. Aprender a manejar de manera adecuada y diestra la centrifugadora en el laboratorio de bioqumica. Hallar la absorbancia de la nuestra de sangre centrifugada con sus respectivos reactivos para hallar los niveles de colesterol y triglicridos, y verificar si esta en un rango normal. Determinar todos los instrumentos utilizo en el laboratorio para la diferenciacin especifica de los instrumentos y materiales de la prctica de colesterol y triglicridos.

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MATERIALES Y METODOS
MATERIALES:
INSTRUMENTOS:

Centrifugador

Espectrmetro

MATERIALES:

Tubos De Ensayo, Gradilla, Micropipetas de shaly

Pipetas

Jeringas

Cubetas

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Alcohol

Colesterol - LS

Triglicridos Mono SL new

METODOLOGA:

Se tom muestras de sangre para el respectivo anlisis del colesterol en tubos de ensayo. El reactivo especfico a utilizar estuvo a la temperatura adecuada as como las pipetas y tubos de ensayo a usar. El colesterol se determin por accin de las enzimas del reactivo Colesterol Ester hidrolasa que libera el colesterol de los esteres de

colesterol y Colesterol oxidasa oxida el colesterol libre producindose perxido de hidrogeno, el cual en presencia de la enzima peroxidasa reacciona con el sistema cromogenico dando origen a un compuesto coloreado a absorber a una longitud de onda de 505nm.

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PROCEDIMIENTO
Procedimiento para la valoracin del colesterol en la sangre. En primer lugar, se debe tener la muestra con sangre 5ml, la cual se extraer hacia un tubo de ensayo. La sangre se extraer con las medidas higinicas necesarias.

Se ubic la zona para la extraccin de la muestra de sangre.

Se retiraron todo tipo de impureza de la zona de la extraccin con alcohol y algodn.

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Extraccin de sangre

Hacia el tubo de ensayo

Luego se centrifugo la sangre para separar el plasma.

Luego se absorbe de la muestra de sangre 0.03ml de suero sanguneo con ayuda de la Micropipeta de Shally, colocndola en otro tubo de ensayo.

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Luego, con la pipeta de 5ml se absorbi 3 ml de Reactivo Colesterol LS.

Los 3 ml de reactivo se colocaron en el tubo de ensayo que contena los 0.03ml de suero sanguneo. Se agito para luego proceder a calentar con la mano la muestra durante diez minutos hasta llegar a 37C.

Luego en otro tubo de ensayo se extrajo 1ml de, de Reactivo Colesterol

LSel cul fue nuestra Muestra en Blanco.

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Obteniendo nuestra muestra patrn: El Reactivo Colesterol LSsiempre est acompaado de un Reactivo Patrn, el cual nos servir para la obtencin de nuestra Muestra Patrn. Para ello, se extrajo 0.03 ml del Reactivo Patrn hacia un tubo de ensayo y se agreg 3ml del Reactivo Colesterol LS.

Nuestra muestra patrn nos sirvi para determinar la calidad de nuestra muestra base; es decir, si la muestra base presentara un color ms intenso que la muestra patrn significa que la persona presenta exceso de glucosa en la sangre.

Luego se procedi a hacer la lectura en el espectrofotmetro. .

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Para la determinacin de Colesterol en la sangre: Con la pipeta de 5ml se absorbi 3 ml de Triglicridos Mono SL new

Los 3 ml de reactivo se colocaron en el tubo de ensayo que contena los 0.03ml de suero sanguneo. Se agito para luego proceder a calentar con la mano la muestra durante diez minutos hasta llegar a 37C.

Luego en otro tubo de ensayo se extrajo 1ml de, de Reactivo Triglicridos

Mono SL newel cual fue nuestra Muestra en Blanco.

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Luego los datos obtenidos de cada muestra de colesterol y triglicridos con su respectiva absorbancia sern utilizados para determinar su valor.

RESULTADOS
Para tener idea de nuestros resultados que se mostraran a continuacin veamos la siguiente tabla: Triglicridos Los niveles en sangre son: Deseable: menos de 150 mg/dl (menos de 1,69 mmol/l) Lmite alto: entre 150 400 mg/dl (1,69 4,52 mmol/l) Alto: entre 400 1000 mg/dl (4,52 11,29 mmol/l) Muy alto: ms de 1000 mg/dl (ms de 11,29 mmol/l) Resultados mostrados por el espectrmetro en el anlisis de triglicridos: Blanco: 0.012 Muestra: 0.514 Estndar: 0.384 Concentracin: 200 mg/dl

Con estos datos se determinara la cantidad total de triglicridos presente en la sangre:

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Colesterol Los niveles en sangre son: Nivel deseable: Menos de 200 mg/dl (menos de 5,172 mmol/l) Lmite alto: 200-240 mg/dl (5,17 6,19 mmol/l) Alto: Ms de 240 mg/dl (ms de 6,19 mmol/l) Resultados mostrados por el espectrmetro en el anlisis de colesterol Blanco: 0.251 Muestra: 0.518 Estndar: 0.681 Concentracin: 200 mg/dl

Con estos datos se determinara la cantidad total de colesterol presente en la sangre:

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DISCUSIN DE RESULTADOS

Triglicridos La indicacin en este trabajo, aplicando el mtodo de la observacin fue que si la muestra sobrepasa la coloracin estndar quiere decir que la muestra se encuentra alterada, esto es, que el paciente presenta altos ndices de triglicridos por lo que podra sufrir de alguna enfermedad asociada a estos niveles. En nuestro caso, aparte de este mtodo aplicamos una frmula para poder hallar la cantidad total de triglicridos. El dato arrojado fue de , este resultado nos indic que el paciente tena niveles de triglicridos catalogado como niveles alto. Esto es un claro indicio que el paciente debera iniciar un tratamiento para poder reducir su concentracin de triglicridos, en base a una dieta saludable, de lo contrario en un futuro sufrira de daos al corazn y otras complicaciones. Colesterol La medicin de solo el colesterol srico total tiene valor limitado. El LDLcolesterol, en cuanto ms elevado, mayor es el riesgo de infarto, es conocido como el colesterol malo. Por lo contrario, son deseables niveles elevados de HDL-colesterol, pues cuanto ms alto, menor es el riesgo de infarto, por lo que es conocido como colesterol bueno. Los resultados en este caso fueron totalmente diferentes, arrojando una cantidad total de colesterol de lo que indica q el donador se encuentra en perfectas condiciones de salud en cuanto a los niveles de colesterol presente en su sangre.

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RECOMENDACIONES
Usar suero o plasma libre de hemlisis. Que el donador de la muestra este en ayunas. Que todos los instrumentos estn en buen estado y sobretodo limpios. Usar inmediatamente la muestra para obtener resultados ms exactos. Desinfectar los instrumentos de extraccin de sangre segn la normativa. Tratar de usar los instrumentos requeridos como el Bao Mara para tener resultados precisos. Rotular siempre los recipientes usados. Controlas mejor la cantidad de colesterol que uno consume diariamente.

CONCLUSIN

Al analizar los resultados obtenidos, una vez realizado los procedimientos experimentales, su determinacin contribuye al diagnstico y clasificacin de las posibles daos causados por el exceso de los mismos. El colesterol se determin por accin de las enzimas del reactivo Colesterol Ester hidrolasa que libera el colesterol de los esteres de colesterol y Colesterol oxidasa oxida el colesterol libre producindose perxido de hidrogeno, el cual en presencia de la enzima peroxidasa reacciona con el sistema cromognico dando origen a un compuesto coloreado a absorber a una longitud de onda de 505nm.

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