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(datos Laboratorio) (integrantes equipo)

BITCORA

LABORATORIO BIOQUMICA CLNICA. 1807 GPO. ____ SEM. 2014-1 PROF. ANA MARGARITA ZAVALA ORTIZ PROF. MARISOL HERNNDEZ SALAS

REGLAS LABORATORIO BIOQUMICA CLNICA. FACULTAD DE QUIMICA.


El alumno debe: 1. Usar bata blanca limpia, lentes de seguridad y guantes como equipo mnimo de proteccin.

2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9.

Se prohbe comer, beber y fumar dentro del laboratorio. El tiempo de tolerancia para llegar al laboratorio es de 20 minutos. Solo en casos justificados se podr realizar la prctica. Los telfonos celulares debern permanecer en modo vibrador en el horario de clase. En exmenes parciales no podrn ser utilizadas calculadoras de celulares. El primer da se formarn equipos que sern permanentes durante el semestre. Traer los materiales que se le soliciten para las prcticas. (franela pequea, celdas de plstico, plumn, etc.) Las instrucciones para la realizacin de la prctica deben ser ledos con anterioridad, aclarando nicamente dudas durante la sesin correspondiente. Tener las copias correspondientes a las Normas que se revisarn en la asignatura, las cuales tambin se encuentran en internet.

10. El equipo de alumnos se har responsable del material y equipo de laboratorio, entregando el material limpio y en buen estado. 11. Revisar el material que se le proporciona y verificar que funcione correctamente, una vez pasados 10 minutos son los responsables del mismo. 12. Cualquier material roto es responsabilidad del equipo y debe ser repuesto a la semana siguiente. No se podr presentar examen parcial si no ha sido repuesto el material. 13. No desechar sustancias al drenaje, los residuos de las prcticas debern ser colocados en el lugar indicado y en el frasco correspondiente, para su posterior tratamiento. 14. En las cubetas con HIPOCLORITO que se encuentran en las mesas de trabajo depositar EXCLUSIVAMENTE PUNTAS que ya fueron UTILIZADAS. 15. Colocar la basura en el bote correspondiente, aprendiendo a separarla, no cinta adhesiva (masking tape) en las tarjas, NO PUNTAS en LAS TARJAS. 16. Evitar accidentes siguiendo las normas de manejo de residuos peligrosos, biolgico infecciosos. 17. Lavarse las manos con jabn lquido antes de retirarse del laboratorio para evitar alguna intoxicacin con los reactivos que haya utilizado. 18. Anotar los datos requeridos en la bitcora de los equipos, verificar que el equipo quede apagado y limpiar su rea de trabajo. 19. Notificar al laboratorista o profesor la falla que se diera en cualquier equipo y anotarlo en la bitcora con la finalidad de darle mantenimiento. 20. Registrarse en la bitcora correspondiente para el uso del can, recordar dejarlo ENFRIAR ANTES DE APAGARLO. 21. Memorizar la ubicacin de los controles de llave de gas, electricidad y agua, as como la UBICACION de EXTINGUIDORES y PUERTAS DE SALIDA.

Lineamientos y evaluacin en el Laboratorio de Bioqumica Clnica.


La evaluacin final estar dada por los siguientes puntos:

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Manual-Bitcora 20 % Participacin y asistencia 20 % Evaluaciones 60 % MANUAL-BITCORA. 1. Debe imprimirse del correo electrnico. 2. Contiene las instrucciones a seguir de las distintas prcticas o actividades durante el semestre. 3. Las distintas actividades y su correspondiente teora deben ser ledas y estudiadas con anterioridad a realizar la prctica. Habr exmenes rpidos para corroborar que se revis, cuya calificacin contar en la participacin. 4. Contiene cuestionarios que deben ser contestados y entregados en las fechas que aparecen en el calendario. 5. En la portada debe aparecer el nombre de la materia, profesores, grupo, horario, nmero de equipo e integrantes con su firma correspondiente. Adems del nombre del laboratorio clnico y logo correspondiente (cada equipo es un laboratorio con su razn social). 6. Debe tener los siguientes anexos: a. Reglas a seguir en el Laboratorio de Bioqumica Clnica, b. Lineamientos y evaluacin de la materia c. Reglamento de Higiene y seguridad para los Laboratorios de la Facultad de Qumica de la UNAM*. 7. El ndice de la bitcora estar basado en el calendario de prcticas. 8. Todas las sesiones tanto tericas como prcticas deben ser reportadas en la bitcora, con fecha y firmadas por el responsable del laboratorio asignado en el equipo. 9. Para las sesiones exclusivamente tericas se har un resumen con las indicaciones y/o cuestionario correspondientes. 10. En las sesiones prcticas el reporte debe tener los siguientes incisos: a. Nombre de la prctica. b. Fecha c. Introduccin (resumen corto en donde se hable de las patologas relacionadas al analito en cuestin). d. Fundamento de la prctica e. Procedimiento f. Datos obtenidos g. Clculos h. Resultados i. Grficos cuando sean requeridos. j. Firma del que proces la muestra y Vo. Bo. del responsable del Laboratorio k. Conclusiones. l. Cuestionario (cuando proceda). 11. Para dar por terminada la prctica deben tener los datos, clculos y resultados revisados y con firma de una de las profesoras y haber anotado sus resultados en la tabla correspondiente. 12. Se evaluar contenido, resultados, limpieza, orden y presentacin.

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PARTICIPACIN Y ASISTENCIA. 1. La participacin ser evaluada con una o ms de las siguiente formas: a. Exmenes rpidos b. Exposiciones por equipo c. Revisin del procedimiento que se va a realizar d. Desempeo prctico e. Revisin de resultados f. Disciplina g. Inters 2. Dando cumplimiento a las Reglas de Higiene y Seguridad, no se permitir realizar la prctica a los alumnos que no traigan bata, lentes de seguridad y guantes, en caso de no conseguirlos su calificacin de la prctica ser cero. 3. El tiempo de tolerancia para llegar al laboratorio es de 20 minutos . Solo en casos justificados se podr realizar la prctica. 4. Las exposiciones frente a grupo de temas asignados tendrn una calificacin de participacin y con un tiempo mximo de 15 minutos. 5. El equipo de trabajo estar formado por dos o tres integrantes nombrando a un Responsable de Laboratorio. 6. El correo electrnico ___________________ contrasea _______________ ser el sitio comn en donde se subir calendario, reglamento, presentaciones o datos obtenidos que deban de ser compartidos. En el caso que algn equipo no lo haga a tiempo perder parte de su participacin en la prctica. 7. Cualquier falta de asistencia injustificada tendr como consecuencia cero en la participacin de ese da a menos que se presente un justificante por escrito. EVALUACIONES. 1.- Se presentaran dos evaluaciones parciales tericas y una prctica. 2.- En la evaluacin prctica se tomar en cuenta: resultado, reporte y forma de trabajar.
* http://www.quimica.unam.mx/IMG/pdf/cuatro.pdf http://www.quimica.unam.mx/IMG/pdf/reglamentogeneral.pdf http://www.quimica.unam.mx/IMG/pdf/residuos.pdf

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Lunes o mircoles 16:00 a 19:00 hrs Profesoras: Ana Margarita Zavala Ortiz Marisol Hernndez Salas

MES

DIA

TEMA 7 Presentacin. Equipos. Material. Normas internacionales ISO 9001-2008, ISO15189-2007. 14-21 NOM 007-SSA3-2011 (Sustituye a NOM-166-SSA1-1997) NOM 087. NOM 077. NOM 078. TALLER 28 Toma de muestra. Control de calidad. Espectrofotometra. Automatizacin en Bioqumica Clnica. 4 Tipos de reacciones en Qumica Clnica. Precisin. Control de calidad en condiciones ptimas. Determinacin de Protenas en muestras biolgicas. Funcin Renal Determinacin de Urea, Creatinina y cido rico Metabolismo seo. Determinacin de Calcio, Fsforo y Magnesio. Examen parcial. Equilibrio electroltico. Determinacin de cloro. Examen General de Orina. Carbohidratos y Lpidos. Automatizacin. Determinacin de Glucosa, Colesterol y Triglicridos. Funcin Heptica. Determinacin de Albmina, ALT, ALP, GGT. Funcin cardiovascular. Determinacin de LDH, AST, CK. Examen Parcial Proyecto Laboratorio. Proyecto Laboratorio. Examen Prctico (Primera parte) Entrega de reporte Proyecto Laboratorio Examen Prctico (Segunda parte) Entrega de reporte Entrega de calificaciones.

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ndice

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TEMA
NORMATIVIDAD CONTROL DE CALIDAD TOMA DE MUESTRA SANGUNEA (FLEBOTOMA) ESPECTROFOTOMETRA. AUTOMATIZACIN. SPIN 120 DETERMINACIN DE PROTENAS. PRECISIN DETERMINACIN DE UREA DETERMINACIN DE CREATININA DETERMINACIN DE AC. RICO DETERMINACIN DE CALCIO DETERMINACIN DE FSFORO DETERMINACIN DE MAGNESIO DETERMINACIN DE CLORO EXAMEN GENERAL DE ORINA DETERMINACIN DE GLUCOSA DETERMINACIN DE COLESTEROL DETERMINACIN DE TRIGLICRIDOS
DETERMINACIN DE LBUMINA Determinacin de alp Determinacin de ggt DETERMINACIN DE ALT DETERMINACIN DE AST DETERMINACIN DE LDH DETERMINACIN DE CK Apndices

PAG .

FECHA: 21-agosto-2013

NORMATIVIDAD
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INTRODUCCION.
El 13 de enero del 2000 se public en el Diario Oficial de la Federacin la NOM-166-SSA1-1997, primera Norma Oficial Mexicana dirigida expresamente a la Organizacin en los Laboratorios Clnicos en Mxico, con lo cual fue el inicio de la normatividad tendiente a la homogenizacin en los servicios del laboratorio clnico que es uno de los servicios auxiliares de diagnstico ms importantes en el sector salud. El 27 de marzo de 2012, finalmente, despus de varios aos de actualizaciones fue publicada en el Diario Oficial de la Federacin la NOM-007-SSA3-2011. Para la organizacin y funcionamiento de los laboratorios clnicos, que es la norma que sustituye y deja sin efecto la NOM-166-SSA1-1997. Puedes encontrar la lista de Normas Oficiales Mexicanas de inters para el funcionamiento de los laboratorios clnicos en el apndice A, encontrndose en letras negritas las que se revisarn en el laboratorio: NOM-007, NOM-087, NOM-077, NOM-078. 1. NOM 007-SSA3.2011. PARA LABORATORIOS CLINICOSLA ORGANIZACIN Y FUNCIONAMIENTO DE LOS

2. NOM-077-SSA1-1994 ESPECIFICACIONES SANITARIAS DE LOS MATERIALES DE CONTROL 3. NOM-078-SSA1-1994 CALIBRACION. ESPECIFICACIONES SANITARIAS DE LOS ESTANDARES DE

4. NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002 BILOGICO INFECCIOSOS.

PROTECCION

AMBIENTAL-RESIDUOS

PELIGROSOS

5. NOM-178-SSA1-1998, QUE ESTABLECE LOS REQUSITOS MNIMOS DE INFRAESTRUCTURA Y EQUIPAMIENTO DE ESTABLECIMIENTOS PARA LA ATENCIN MDICA DE PACIENTES AMBULATORIOS. En cuanto a las normas internacionales actuales a revisar en la normatividad de un laboratorio clnico estn la ISO 9001:2008 GESTIN DE LA CALIDAD correspondiente con la norma mexicana NMX-CC9001-IMNC-2008 con la cual pueden ser certificados los laboratorios clnicos y para la acreditacin la ISO 15189:2007/ NMX-EC 15189-IMNC-2008 Laboratorios Clnicos-Requisitos particulares para la calidad y la competencia.

ACTIVIDADES.
1.- Se har un taller con la revisin de las normas. Cada equipo pasar al frente y explicar a sus compaeros los puntos principales de cada norma. 2.- Las Normas Oficiales Mexicanas las puedes encontrar en internet y en el correo electronico. Para las normas ISO/NMX podrs encontrar en internet algunos resmenes de las normas y la presentacin en el correo electrnico al respecto.

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CUESTIONARIO 1.
1. Escribe el nombre completo de la norma que sustituye a la NOM-166-SSA1-1997 publicada el 13 de enero del 2000 en el DOF, y la fecha en que fue publicada en el mismo. NORMA Oficial Mexicana NOM-007-SSA3-2011, Para la organizacin y funcionamiento de los laboratorios clnicos. Martes 27 de marzo de 2012 2. Qu significa dicotoma?
Divisin de una cosa o una materia en dos partes o grupos, generalmente opuestos entre s.

3. Menciona los 10 manuales de organizacin con los que debe contar un laboratorio clnico de acuerdo a la NOM-007-SSA3-2011.
Manual de organizacin. Manual de procedimientos administrativos. Manual de todos los mtodos analticos, utilizados en el lboratorio clnico, en idioma espaol. Manual para la toma, identificacin, manejo, conservacin y transporte de muestras. Manual de manejo de equipo en espaol. Manual seguridad e higiene ocupacional y en su caso, seguridad radiolgica. Manual para desechos peligrosos en su manejo. Programa de mantenimiento preventivo y calibracin de instrumentos de medicin y del equipo utilizado. Programa de desinfeccin y desinfestacion del establecimiento.

4.

Qu significa estndar de calibracin y cual es la norma que establece las especificaciones sanitarias de ste?

Se entiende por estndares de calibracin, a los materiales que se emplean en el proceso analtico para asignar valor numrico al componente de inters mdico (presente en el espcimen del paciente), relacionando las lecturas o las respuestas analticas obtenidas en el proceso de medicin, con la concentracin u otra cantidad de medida.

NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-078-SSA1-1994, que establece las especificaciones sanitarias de los estndares de calibracin utilizados en las mediciones realizadas en los laboratorios de patologa clnica. 5. Qu significa material control y cual es la norma que establece las especificaciones sanitarias de ste? NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-077-SSA1-1994, que establece las especificaciones sanitarias de los materiales de control (en general) para laboratorios de patologa clnica.
Material de Control: Preparaciones utilizadas para evaluar la exactitud y la precisin de substancias empleadas en las mediciones de diversos componentes en fluidos, secreciones, excreciones o tejidos corporales. Se utilizan en los programas internos o externos de control de calidad en el laboratorio. Los materiales de control tambin se denominan verificadores.

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6. En dnde deben ser publicadas las Normas Oficiales Mexicanas? Diario oficial de la federacin 7. Cmo define los RPBI (Residuos Peligrosos Biolgico-Infecciosos) la NOM-087-ECOL-SSA12002?
Son aquellos materiales generados durante los servicios de atencin mdica que contengan agentes biolgico-infecciosos (cualquier microorganismo capaz de producir enfermedades cuando est presente en concentraciones suficientes (inculo), en un ambiente propicio (supervivencia), en un hospedero susceptible y en presencia de una va de entrada) y que puedan causar efectos nocivos a la salud y al ambiente.

8. Cmo clasifica los RPBI la NOM-087? La sangre La sangre y los componentes de sta, slo en su forma lquida, as como los derivados no comerciales, incluyendo las clulas progenitoras, hematopoyticas y las fracciones celulares o acelulares de la sangre resultante (hemoderivados). Los cultivos y cepas de agentes biolgico-infecciosos Los cultivos generados en los procedimientos de diagnstico e investigacin, as como los generados en la produccin y control de agentes biolgico-infecciosos. Utensilios desechables usados para contener, transferir, inocular y mezclar cultivos de agentes biolgicoinfecciosos. Los patolgicos Los tejidos, rganos y partes que se extirpan o remueven durante las necropsias, la ciruga o algn otro tipo de intervencin quirrgica, que no se encuentren en formol. Las muestras biolgicas para anlisis qumico, microbiolgico, citolgico e histolgico, excluyendo orina y excremento. Los cadveres y partes de animales que fueron inoculados con agentes enteropatgenos en centros de investigacin y bioterios. Los residuos no anatmicos Son residuos no anatmicos los siguientes: Los recipientes desechables que contengan sangre lquida. Los materiales de curacin, empapados, saturados, o goteando sangre o cualquiera de los siguientes fluidos

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corporales: lquido sinovial, lquido pericrdico, lquido pleural, lquido Cfalo-Raqudeo o lquido peritoneal. Los materiales desechables que contengan esputo, secreciones pulmonares y cualquier material usado para contener stos, de pacientes con sospecha o diagnstico de tuberculosis o de otra enfermedad infecciosa segn sea determinado por la SSA mediante memorndum interno o el Boletn Epidemiolgico. Los materiales desechables que estn empapados, saturados o goteando sangre, o secreciones de pacientes con sospecha o diagnstico de fiebres hemorrgicas, as como otras enfermedades infecciosas emergentes segn sea determinado por la SSA mediante memorndum interno o el Boletn Epidemiolgico. Materiales absorbentes utilizados en las jaulas de animales que hayan sido expuestos a agentes enteropatgenos. Los objetos punzocortantes Los que han estado en contacto con humanos o animales o sus muestras biolgicas durante el diagnstico y tratamiento, nicamente: tubos capilares, navajas, lancetas, agujas de jeringas desechables, agujas hipodrmicas, de sutura, de acupuntura y para tatuaje, bisturs y estiletes de catter, excepto todo material de vidrio roto utilizado en el laboratorio, el cual deber desinfectar o esterilizar antes de ser dispuesto como residuo municipal. 9. De acuerdo a la misma NOM-087 haz un cuadro que resuma las caractersticas y niveles de los establecimientos generadores de RPBI.
NIVEL I NIVEL II NIVEL III Unidades hospitalarias de ms de 60 camas; Centros de produccin e investigacin experimental en enfermedades infecciosas; Laboratorios clnicos y bancos de sangre que realicen anlisis a ms de 200 muestras al da, o Establecimientos que generen ms de 100 kilogramos al mes de RPBI.

Unidades hospitalarias de 1 a 5 Unidades hospitalarias de 6 camas e instituciones de hasta 60 camas; investigacin con excepcin de los sealados en el Nivel III. Laboratorios clnicos y bancos de sangre que Laboratorios clnicos y bancos realicen anlisis de 51 a 200 de sangre que realicen anlisis muestras al da; de 1 a 50 muestras al da. Bioterios que se dediquen a Unidades hospitalarias la investigacin con agentes psiquitricas. biolgico-infecciosos, o Centros de toma de muestras para anlisis clnicos. Establecimientos que generen de 25 a 100 kilogramos al mes de RPBI.

10. A qu se le llama certificacin?


La certificacin, o evaluacin de la conformidad, es la actividad que respalda que una organizacin, producto, proceso o servicio cumple con los requisitos definidos en normas o especificaciones tcnicas.

11. A qu se le llama acreditacin?

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La acreditacin es un proceso voluntario mediante el cual una organizacin es capaz de medir la calidad de sus servicios o productos, y el rendimiento de los mismos frente a estndares reconocidos a nivel nacional o internacional. El proceso de acreditacin implica la autoevaluacin de la organizacin, as como una evaluacin en detalle por un equipo de expertos externos

12. Cmo se llama la nica entidad que puede acreditar tanto a los laboratorios clnicos como a los organismos certificadores? EMA (Entidad Mexicana de Acreditacin) 13. Qu significa IMNC? Instituto Mexicano de Normalizacin y Certificacin.

14. Escriba tres diferencias entre la norma ISO 9001 y la norma ISO 15189.
Las dos son normas ISO (International Organization for Standardization), pero como ISO:9001 no incluye los aspectos tcnicos de un laboratorio sino solamente aspectos administrativos, la misma organizacin ISO decidi hacer una norma especial para laboratorios clnicos que incluyera tambin los aspectos tcnicos: ISO:15189

BIBLIOGRAFIA.
1. http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nomssa.html 2. www.calidad.uady.mx/resources/nosotros/NormaISO90012008.pdf 3. http://www.dof.gob.mx/nota_detalle.php?codigo=5152351&fecha=19/07/2010 4. www.qcnet.com/Portals/75/PDFs/Requerimientos%20Tecnicos.pdf 5. http://www.cap.org/apps/cap.portal?_nfpb=true&cntvwrPtlt_actionOverride=%2Fportlets
%2FcontentViewer%2Fshow&_windowLabel=cntvwrPtlt&cntvwrPtlt%7BactionForm.contentReference %7D=laboratory_accreditation%2Fiso %2Fiso_faq.html&_state=maximized&_pageLabel=cntvwr#accreditation

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Control de calidad
INTRODUCCION.
El trabajo realizado en el laboratorio clnico forma un ciclo desde que se recibe una solicitud generalmente enviada por un mdico, se da la informacin necesaria para las condiciones del paciente o muestra, se da trmite registrando los datos del paciente e ingresando en el sistema de cmputo o manual que maneje el laboratorio, se toma y/o recibe las muestras necesarias para el anlisis, se analizan las mismas en los equipos con los que se cuente, se validan, firman y liberan los resultados, hasta llegar nuevamente stos al mdico tratante. El control de calidad tiene una importancia primordial y similar en cada uno de estos pasos en la obtencin de resultados, tanto en el momento que se obtiene la muestra (si tiene el ayuno necesario, tubos correctos, horario, etiquetado, etc.) como al analizar la muestra (equipo calibrado, tcnico capacitado, separacin correcta, datos ingresados correctamente al equipo, etc.), como al reportar los resultados (valores de referencia adecuados, clculos, unidades, nombre del paciente). El laboratorio clnico debe tener distintos cuidados para controlar cada una de las etapas del proceso como son la preanaltica, analtica y postanaltica. El laboratorio tambin se compromete a llevar el proceso de Control de Calidad Interno (CCI) en el cual podr asegurar que tiene la precisin necesaria para dar resultados confiables y tendr que corroborarlo en un programa de Evaluacin Externa de la Calidad (EEC) en el cual se compara con los otros laboratorios con lo que califica su exactitud.

ACTIVIDADES.
1. Despus de revisar la presentacin de control de calidad que se encuentra en el correo electrnico o escuchar la misma durante clase escribe 5 puntos principales en cada una de las etapas del anlisis, y contesta el cuestionario correspondiente.

ETAPA PREANALTICA.
Procedimientos anteriores a la ejecucin del anlisis tanto fuera como dentro del laboratorio. Factores que afectan a cada paciente Edad Sexo Ciclo menstrual Actividad fsica Ingesta alcohol Postura Origen tnico Embarazo Ayuno y dieta Tabaco

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Muestra Caractersticas Tiempo de separacin de plasma o suero Condiciones de centrifugacin


Tiempo de muestreo por ritmos biolgicos Ritmo menstrual Ritmo cardiaco Monitoreo de drogas Muestras microbiologicas Manejo, almacenamiento y transporte Intervalo entre obtencin y anlisis Evaporacin de muestra Exposicin a la luz Descomposicin de analitos por tiempo y temperatura Variacin temperaturas Rechazo de muestra Protocolo operativo de aceptacin y rechazo Identificacin errnea Volumen inadecuado Uso de tubos inadecuados Hemolisis Transporte inadecuado

ETAPA ANALTICA.
Fuentes de variacin Reactivos Material y limpieza Medicin de volmenes Mezclado Tiempo y temperatura de reaccion Interferencias Equipos Tcnicas de pipeteo Tcnica directa Tcnica inversa Ajuste de volumen Expulsin de puntos Calibracin Almacenamiento Mantenimiento Precisin Exactitud Oportunidad

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ETAPA POSTANALTICA.
Fuentes de variacin post-analitica Errores en los clculos: anotaciones errneas, omisin de factor de dilusion, errores matemticos, unidades mal empleadas, transportacin de nmeros. Errores en los reportes: registro o nombre, transcripcin, reporte telefnico. Valores de referencia no adecuados para el mtodo y la poblacion

CUESTIONARIO 2.
1. Define precisin.
Es parte de los criterios de confiablidad los cuales se refieren a la evolucin de los parmetros de desempeo del procedimiento. La precisin es la concordancia entre los valores de una serie repetida de ensayos, para su determinacin se deben realizar mediciones repetidas y aplicar los conceptos estadsticos fundamentales como: media, desviacin estndar, desviacin estndar relativa, coeficiente de variacin y la varianza. Otra definicin de precisin es el grado para obtener el mismo valor para una serie de repeticiones de una misma muestra.

2. Define exactitud La exactitud tambin forma parte de los criterios de confiabilidad y se define como el grado en que una medicin se acerca al valor verdadero.

3. Se puede tener exactitud sin tener precisin? Explica tu respuesta. No, porque como se muestra en la imagen la exactitud debe estar cercana al valor real para eso se debe de contar con precisin ya que debe de haber una secuencia de valores similares de lo contrario al encontrarse dispersos los valores al valor real no habra no habra precisin y tampoco exactitud por lo que no puede haber exactitud sin tener precisin. 4. Se puede tener precisin sin tener exactitud? Explica tu respuesta. Si, porque como se muestra en la imagen hay una serie de valores que concuerdan para una misma muestra aunque estos no se encuentren cerca del valor real que es como se define la exactitud por lo que se puede decir que si se puede tener precisin sin ser exacto.

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5. Explica brevemente que es lo que se hace en un control de calidad interno. El control de calidad en un laboratorio clnico se refiere al control del proceso de anlisis y forma parte de la preservacin, as como de asegurar proporcionar resultados confiables al usuario. Para saber si los resultados son realmente correctos, los analistas comienzan por implementar un Control de Calidad Interno (CCI), basado en la utilizacin de muestras especialmente preparadas para cumplir el rol de muestras testigo, testigos del procedimiento de anlisis. Estas muestras pueden prepararse ex profeso en el mismo laboratorio o adquirirse comercialmente, cumplimentando los siguientes requisitos:

Asemejarse lo ms posible a las muestras de los pacientes que habitualmente se procesan en el laboratorio, provenir del mismo origen biolgico en que se encuentra el analito en medicin: suero, plasma, orina, sangre total, distintos exudados, etc. Preparar muestras de distintas concentraciones del analito para analizar el comportamiento del procedimiento de medicin a concentraciones bajas, medias y elevadas, cubriendo las reas clnicamente importantes en la toma de decisin clnica. Esto es, las zonas de valores normales y de valores patolgicos. Contar con un nmero adecuado de muestras iguales para colocarlas a repeticin, en los sucesivos ensayos de la misma especie. Que puedan conservarse en buenas condiciones durante tiempos prolongados, para abarcar numerosos ensayos sucesivos. Pueden congelarse o liofilizarse. 6. Investiga el costo de estar inscrito por un ao en un Programa de Evaluacin Externa en tres secciones del laboratorio. 7. Investiga al menos tres analitos que se alteren debido al ejercicio fsico previo a la toma de muestra. CPK, DHL, K, glucosa, lactato, hormona de crecimiento, proclatina, cortisol y renina

BIBLIOGRAFIA.
1. Henry J.B. El laboratorio en el Diagnstico Clnico. 20. Edicin. Espaa. Ed. Marbn. 2005. 2. Castillo de Snchez ML. Fonseca Yerena ME. Mejora continua de la calidad. Gua para los laboratorios de Amrica Latina. Mxico. Ed. Mdica Panamericana - COLABIOCLI, 1995.

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FECHA:

FLEBOTOMA
INTRODUCCION.
Se llama flebotoma a la toma de muestra sangunea y es un factor fundamental en el trabajo del laboratorio, constituye el primer contacto entre el laboratorio y sus pacientes. Es de primordial importancia la obtencin de una muestra de calidad para su anlisis. La sangre tiene cuatro componentes principales: plasma, eritrocitos, leucocitos y plaquetas. Su anlisis suministra indicios claves para el diagnstico de distintas enfermedades. La etapa preanaltica es muy importante e incluye desde las indicaciones precisas para que el paciente se presente en condiciones adecuadas a la recoleccin de la sangre, las condiciones del paciente antes y durante la obtencin de la muestra, la posicin en que se encuentra durante la toma, tiempo que dura puesto el torniquete, el tiempo y la temperatura durante el transporte de la muestra si este es necesario, tiempo y velocidad de centrifugacin.

MATERIAL NECESARIO.
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. Jabn lquido Isodine 1% Alcohol al 70% Algodn Ligadura Tubos al vaco Adaptador tubos al vaco Agujas para tubos al vaco calibre 20, 21 22. Gradilla Recipiente rgido para desecho de punzocortantes

PROCEDIMIENTO
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Utilizar aditamentos de proteccin necesarios (bata, guantes, lentes). Leer cuidadosamente la solicitud con los anlisis requeridos. De acuerdo a los anlisis requeridos escoger los tubos necesarios. Etiquetar o verificar coincidencia entre el nombre del paciente y los tubos etiquetados. Preguntar al paciente si tiene el ayuno necesario Colocar adecuadamente al paciente teniendo fcil acceso a la vena. Localizar la vena en el pliegue antecubital de preferencia la vena cubital mediana y ceflica. Desinfectar la zona con isodine y alcohol al 70%, comenzar en el sitio de puncin y limpiar hacia afuera con movimientos circulares. 9. Aplicar el torniquete unos centmetros arriba del lugar de puncin y pedir al paciente cerrar el puo 10. Con el bisel hacia arriba se introduce la aguja suave pero firmemente siguiendo la direccin de la

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vena. Se introduce el tubo en el adaptador sujetando ste para que no se mueva. Cuando comience a fluir la sangre quitar el torniquete. Quitar el tubo cuando cese el flujo. Si las pruebas requieren varios tipos de tubo se saca el primero y se introduce el siguiente teniendo cuidado de sostener el adaptador, tomando en cuenta el orden que debe seguirse de los tubos con y sin anticoagulante. Se retira el tubo y posteriormente el adaptador teniendo una torunda lista para presionar en el punto de puncin. Si el tubo tiene anticoagulante, mezclar suavemente para que se incorpore el anticoagulante. NO ENCAPUCHAR NUEVAMENTE LA AGUJA Desechar en un recipiente rgido para punzocortantes. Para las muestras sin anticoagulante se debe esperar a que coagulen alrededor de 15 minutos. Centrifuga la muestra de 10 a 15 minutos a 3000 rpm. Separar el suero y hacer alcuotas (5 a 6 tubos eppendorf son suficientes para las diferentes pruebas).

SUGERENCIAS ADICIONALES
1. 2. 3. 4. 5. El flebotomista debe infundirle confianza al paciente por lo que debe estar lo ms tranquilo posible. Darle una explicacin breve sobre la maniobra a realizar Hablar o tratar de platicar cuando el paciente se encuentra muy nervioso. El material debe estar listo y al alcance del flebotomista El paciente debe estar en una posicin confortable y en un sitio con buena iluminacin.

ACTIVIDADES.
Despus de ver la presentacin y escuchar la explicacin detallada de las profesoras debes de realizar una toma de muestra ya sea en algunos de tus compaeros voluntarios o en el brazo mecnico, si el tiempo no es suficiente para que todos lo hagan debes observar cuidadosamente cuando sea realizado y de ser posible practicar la puesta del torniquete y la forma en que puedes soltarlo con una sola mano.

OBSERVACIONES.

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CUESTIONARIO 3.
1. Menciona si lograron tomar muestra y si lo hicieron en brazo mecnico o brazo humano. Si, se logro sacar la muestra de sangre, en este caso se realizo con el brazo mecanico. 2. Investiga en que orden se deben de tomar los diferentes tubos con anticoagulante. Color tapon Aditivo / Anticoagulante Efecto Azul Citrato de sodio Agente quelante atrapa Ca++ Rojo Ninguno Amarillo Gel sdico Separacin sueros Verde Heparina Inhibe trombina Lila EDTA Agente 3. Tenas alguna experiencia en la toma de muestra? Si 4. Investiga que venas se prefieren para la venopuncin. Baslica, mediana cubital y ceflica 5. Las agujas tienen un soporte de color que nos indica el calibre, Qu color tienen las de calibre 21? Negra 6. Menciona por lo menos 5 factores en la etapa preanaltica que afecten los resultados (factores antes, durante y despus de la toma de muestra). Edad Sexo Origen tnico Ciclo menstrual embarazo anticoagulante y sin Hemocultivo P. coagulacin Qumica sangunea Qumica sangunea Linfocitos

7. Cules son los tres tipos de puncin sangunea? Venosa, capilar y arterial

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8. Investiga en algn laboratorio cual es el costo de una biometra hemtica completa y de una qumica sangunea x 4.

$539.00 pesos

BIBLIOGRAFA.
1. Morn V L. Obtencin de muestras sanguneas de calidad analtica mejora continua de la etapa preanaltica. Mxico. Ed. Panamericana. 2001 2. Henry J.B. El laboratorio en el Diagnstico Clnico. 20. Edicin. Espaa. Ed. Marbn. 2005.

FECHA:

espectrofotometra
INTRODUCCION.
La gran mayora de las determinaciones realizadas en el laboratorio clnico, especialmente en qumica clnica se basan en medidas de la energa radiante absorbida o transmitida para medir la concentracin de sustancias en disolucin. El instrumento utilizado para medir esta energa luminosa es el espectrofotmetro. El espectro de frecuencias de la radiacin electromagntica va desde valores muy bajos desde las ondas de radio hasta la luz visible, alcanzando valores ms elevados de la luz ultravioleta, rayos X y rayos gamma. La longitud de onda de la luz es la distancia entre picos sucesivos. La frecuencia es el nmero de ondas que pasan por un determinado punto en la unidad de tiempo. La longitud de onda es inversamente proporcional a la frecuencia y a la energa, cuanto menor sea la longitud de onda, mayores son la frecuencia y la energa. En el laboratorio clnico, las longitudes de onda de principal inters en las medidas espectrofotomtricas son las que van desde los 150 nm hasta los 2500 nm. Esto corresponde con las regiones del UV, visible y cerca del infrarrojo (IR). La regin visible abarca desde 400 nm hasta 700 nm, el color violeta alrededor de los 400 nm y el rojo a los 700 nm.

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FUNDAMENTO.
Las mediciones en un espectrofotmetro se basan en la Ley de Beer-Lambert, que establece que la concentracin de una sustancia es directamente proporcional a la cantidad de luz absorbida o inversamente proporcional al logaritmo de la luz transmitida. Esta ley puede expresarse segn la siguiente ecuacin:

A = abc = 2-log%T
En donde A = absorbancia a = absortividad molar (capacidad de absorcin del compuesto bajo condiciones estndar) b = distancia que sigue la luz para atravesar la solucin c - concentracin del compuesto %T= porcentaje de transmitancia Debido a que la distancia del paso de luz y la absortividad molar son constantes para una determinada longitud de onda tenemos que: Absorbancia es directamente proporcional a la Concentracin
ESTUDIO DE LA LINEALIDAD DEL FOTMETRO: XXXXXX LABORATORIO: XXXXXXX FECHA: XXXXX
2.0 1 .8 1 .6 1 .4 1 .2 1 .0 0.8 0.6 0.4 0.2 0.0 0 50 1 00 1 50 200 250 300 350 400 450 500 550 CONCENTRACIN DE DICROMATO DE POTASIO EN mg/dl

Ideal ESPECTROFOTMETRO

TEORA.
Las partes principales de que consta un espectrofotmetro son las siguientes:

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1. LAMPARA O FUENTE.- Dispositivo emisor de radiacin electromagntica. Lmpara de tungsteno espectro continuo de 360 a 950 nm, se utiliza en visible y parte de UV. Lmpara de hidrgeno regin UV 220-360 nm. 2. SELECTOR DE LONGITUD DE ONDA.- Pueden ser filtros o monocromadores (intervalo ms estrecho de longitud de onda). Utilizan prismas, juegos de espejos, rejillas de difraccin. 3. CELDA O CUBETA.- Recipiente de 1 cm. de lado en donde se coloca la muestra. Son de vidrio, plstico o cuarzo. Las de cuarzo son utilizadas en UV. 4. DETECTOR O TRANSDUCTOR.- Dispositivo electrnico que traduce el impulso elctrico en unidades de potencia radiante transmitida o absorbida. Se utilizan fototubos en visible, fotomultiplicador en UV y termopares en IR. 5. REGISTRADOR O ESCALA DE LECTURA.- En los antiguos la lectura era en % de transmitancia y/o absorbancia. Los actuales tienen una pantalla digital que nos puede dar la absorbancia o el valor de la concentracin de la sustancia. Los espectrofotmetros y autoanalizadores son equipos del laboratorio clnico que deben ser calibrados y verificados con regularidad ya que de ellos depende la confiabilidad de los resultados de la mayora de los analitos determinados en el laboratorio. El fundamento de los autoanalizadores es el mismo que el de un espectrofotmetro, la diferencia principal radica en que adems de estar programado para determinar automticamente la longitud de onda a la que se va a leer dependiendo de la sustancia que se programe, realiza otras tareas como la medicin y toma de muestra, medicin y toma de reactivo, mezclado, temperatura adecuada, tiempo de incubacin, lectura, clculo de datos e impresin de resultados. Para cada sustancia existe una longitud de onda que se le denomina de MXIMA ABSORCIN, a la cual la sustancia por analizar absorbe el mximo de la energa radiante y de esta forma el anlisis que se efecta da resultados ptimos, respuesta lineal y que obedece la ley de Lambert y Beer

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ACTIVIDADES.
Localiza en el espectrofotmetro, la zona de encendido, programacin de longitud de onda, lectura, lugar en que debe ser puesta la celda o cubeta. Revisa las bitcoras que se encuentran al lado de los espectrofotmetros.

CUESTIONARIO 4.
1. Investiga el costo de un espectrofotmetro (Thermo Scientific Genesys) y el de un autoanalizador (spin 120). Si no encuentras la informacin de estas marcas investiga otras y especifica sus datos. 2. Haz una lista de los pasos a seguir en una tcnica manual como las que vas a realizar utilizando el espectrofotmetro para su medicin, e indica cuales las realiza el equipo automatizado.

3. Investiga en www.spinreact.com las longitudes de onda a las cuales se leen los siguientes
analitos: glucosa, urea, creatinina, cido rico, colesterol, triglicridos, calcio, fsforo, magnesio, LDH, CK. GGT, PT, albmina, AST y ALT. Define si corresponde a una longitud de onda visible o UV. Si encuentras ms de una tcnica con diferente longitud de onda anota ambas, especificando el mtodo.

ANALITO

MTODO

LONGITUD DE ONDA

ZONA DE LECTURA

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BIBLIOGRAFIA.
1. Bishop ML, Fody EP, Schoeff LE, Clinical Chemistry Principles, Procedures, Correlations, 5tha Ed. Lippincott Williams. USA. 2005. 2. Henry J.B. El laboratorio en el Diagnstico Clnico. 20. Edicin. Espaa. Ed. Marbn. 2005.

3. http://arturobola.tripod.com/spectro/xxx.htm
4. http://www.labequip.com/thermo-scientific-genesys-10-vis-uvvisible-scanning-spectrophotometer.html

FECHA:

AUTOMATIZACIN. Autoanalizador SPIN 120.


INTRODUCCIN.
El autoanalizador spin 120 es un equipo automatizado con las siguientes caractersticas:

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100 pruebas por hora, 28 posiciones para reactivos y 8 para muestras refrigeradas. 8 segmentos de 5 celdas de reaccin Limpieza automtica de la cnula, deteccin del nivel de lquidos y proteccin contra golpes. 8 longitudes de onda 340-670nm. Dilucin automtica en muestras anormales. Lector de cdigo de barras opcional. Capacidad para utilizar tubo primario: peditricos y tubos de 12x68 a 13x100. Rango fotomtrico 0 a 3.5 Abs. Modo mono y birreactivo. Capacidad para realizar pruebas turbidimtricas. Bajo costo de mantenimiento. Control de calidad integrado con grficos de Levey-Jennings y reglas de Westgard. No requiere instalacin especial. Los equipos automatizados presentan varias ventajas con respecto a los mtodos manuales, como un mayor nmero de muestras en unidad de tiempo, mnima intervencin del operador, mayor precisin, mayor productividad y eficiencia, menor costo por prueba en grandes volmenes y menor utilizacin de reactivos (aprox. 300 microlitros).

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Algunos autoanalizadores tienen integrado el equipo de cmputo o estn conectados a una computadora con un software especial como sucede con el SPIN 120 para la administracin de pacientes, pruebas, calibracin, control de calidad, estadsticas, configuracin, parmetros y mantenimiento de equipo.

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BIBLIOGRAFIA. www.spinreact.com Equipo Spinreact 120 perteneciente a UNAM. Facultad de Qumica. Laboratorio Bioqumica Clnica. Fotos tomadas por: Ana Margarita Zavala Ortiz

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FECHA:

PRECISIN EN CONDICIONES PTIMAS fotometra Protenas totales


INTRODUCCION.
La precisin en el laboratorio es la reproducibilidad de los valores de una serie de mediciones. Se define como la Cercana o proximidad de los resultados de anlisis repetidos realizados a un mismo material. Se expresa en trminos de desviacin estndar (DE) o coeficiente de variacin (CV%). Los fabricantes, generalmente, aseguran una precisin de pipeteo entre 0.1% a 1.0%. Es importante que las pipetas se graden cuando son nuevas y a intervalos regulares en adelante. No hay que asumir nunca la precisin de las graduaciones de fbrica. La variacin analtica fortuita de una pipeta manual automtica puede ser establecida mediante el pipeteo repetitivo de una solucin radioactiva y contando la actividad de cada muestra. Se hacen clculos para determinar la desviacin media y estndar de las cuentas. El material control se emplea para verificar la reproducibilidad y debe realizarse de acuerdo con las recomendaciones del fabricante. Dependiendo de los valores que se manejen debe utilizarse material control en dos niveles, normal y patolgico, en algunas ocasiones es necesario utilizar tres. La media de los valores de los controles se determina mediante ensayos repetidos y el empleo de mtodos estadsticos. Se necesita un mnimo de 20 repeticiones de un ensayo para poder establecer lmites estadsticos. Si los resultados del control varan o son errneos, debe tomarse accin para remediarlo y documentarse. Los errores que afectan los procedimientos analticos se clasifican en aleatorios y sistemticos. Los factores que contribuyen al error aleatorio, son los que afectan la precisin o reproducibilidad de la medicin. Entre estos se incluyen: 1. Inestabilidad del instrumento, 2. Variacin temperatura 3. Estabilidad de reactivos y calibradores 4. Variabilidad en el pipeteo, mezcla y tiempo de incubacin 5. Variabilidad operador El componente de variacin dentro de una corrida (intracorrida) llamado tambin en condiciones ptimas es mucho menor que en condiciones de rutina (intercorrida), y es causado por la precisin en el pipeteo y variaciones a corto plazo de la temperatura y la estabilidad del instrumento. La variacin en condiciones ptimas (VCO) es la menor variacin que se obtiene en un mtodo analtico concreto en un laboratorio individual. Deben realizarse alrededor de 20 anlisis, el objetivo es intentar repetir los anlisis en las condiciones analticas tan ideales y constantes como sea posible. Han de aplicarse estrictamente todas las medidas preventivas necesarias, como: Usar el mismo aparato para todas las determinaciones, usar reactivos recin preparados, realizar los anlisis sobre un material homogneo y estable, verificar las lecturas del instrumento y los clculos, realizar los anlisis en el menor intervalo de tiempo posible, evitar cambios bruscos en las condiciones ambientales; luz, temperatura, humedad, asegurarse de que todos los reactivos estn correctamente mezclados.

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ACTIVIDADES. 1.- Determinacin de precisin por gravimetra


El procedimiento es el siguiente: 1. Pesar un vaso de precipitado vaco y no tocarlo una vez que haya sido pesado. 2. Registrar la temperatura del agua y anotar su densidad (ver el cuadro inferior). 3. Agregar 10 veces un volumen de 1 ml. anotando el peso cada vez que se agregue. 4. Calcular el volumen agregado en cada alcuota por diferencia y utilizando la densidad. 5. Calcular el % de error = (Volumen supuesto volumen medido)*100/Volumen supuesto 6. Calcular el coeficiente de variacin, promedio y desviacin estndar. TEMPERATURA C 17 18 19 20 21 22 23 24 25 ALICUOTA 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 PESO (g) DENSIDAD (g/ml) 0,99880 0,99862 0,99843 0,99823 0,99802 0,99780 0.99756 0.99732 0.99707 VOL. MEDIDO VOL. SUPUESTO % ERROR PROMEDIO DESVIACIN EST. COEF. DE VARIAC.

VOLUMEN (ml)

2.- Determinacin de precisin en base a la repeticin de la medicin de protenas totales cuya tcnica aparece a continuacin (si hubiera cambio en la determinacin del analito se te dar la tcnica correspondiente).

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FUNDAMENTO.
Las protenas en presencia de sales de cobre en medio alcalino dan un intenso color violeta azulado, con yoduro como antioxidante. La intensidad del color formado es proporcional a la concentracin de protena total en la muestra.

SIGNIFICADO CLINICO.
Las protenas son compuestos orgnicos macromoleculares, ampliamente distribuidos en el organismo. Actan como elementos estructurales y de transporte y se dividen en dos fracciones, albmina y globulinas. Su determinacin es til en la deteccin de: Hiperproteinemia producida por hemoconcentracin, deshidratacin o aumento en la concentracin de protenas especficas. Hipoproteinemia por hemodilucin debida a un defecto en la sntesis proteica, prdidas excesivas (hemorragia) o catabolismo proteico excesivo. El Diagnstico clnico se debe hacer en base a los datos clnicos y de laboratorio.

PROCEDIMIENTO (Mtodo de Biuret, colorimtrico).


1. Condiciones Longitud de onda.540 nm Celda ..1cm Temperatura...37C/15-25C 2. Ajustar el espectro a 0 frente a agua destilada (esto es para checar la funcionalidad del espectrofotmetro). 3. Pipetear Blanco Patrn Muestra R (mL) 1,0 1,0 1,0 Patrn ( L) ------25 --------Muestra (L) --------------25 4. Mezclar e incubar por 5 min a 37C o 10 min a Temperatura ambiente. 5 .Leer absorbancia (A) del patrn y la muestra, frente al blanco de reactivo. El color es estable como mnimo 30 min. La prctica es individual, se determinar la precisin de cada quin en base a la repeticin de esta tcnica preparando 14 tubos de muestra (en este caso material control) por persona, se utilizar el mismo blanco y estndar para todo el equipo.

CLCULOS
((A) Muestra / (A) Patrn) * 7 (concentracin patrn) = g/dL de PT Calcular la media de la concentracin de las 14 repeticiones. Calcular la desviacin estndar. 1807. MANUAL LABORATORIO BIOQUMICA CLNICA. SEMESTRE 2014-1
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Calcular el % del coeficiente de variacin. Obtn media, desviacin estndar y % del coeficiente de variacin para el equipo. Obtn media, desviacin estndar y % del coeficiente con los valores medios de cada uno de los alumnos del grupo.

RESULTADOS
ABS. BCO. STD. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 MEDIA D.E. %CV
Nota: Adapta tu tabla segn el nmero de individuos en el equipo

CONC.

ABS.

CONC.

ABS.

CONC.

GRFICAS
Utilizando la media y desviacin estndar de cada caso realiza grficas de Levey Jennings: 1) Por individuo (2 3 dependiendo del nmero por equipo) 2) Por equipo (poniendo primero los datos de una persona, enseguida los de la segunda y si hubiera una tercera). 3) Por grupo (la media de cada individuo se dar en clase o se subir al correo electrnico).

VALORES DE REFERENCIA
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Estos deben ser determinados dependiendo de la poblacin a la que se aplican. Adultos: 6,6 8,3 g/dL Recin nacidos: 5,2 9,1 g/dL

CUESTIONARIO 5.
1. De acuerdo a tus resultados como calificas tu precisin (por individuo y por equipo). 2. De acuerdo a tus resultados que factor o factores crees que hayan tenido mayor influencia en la variacin. 3. De acuerdo a lo aprendido menciona en qu condiciones trabajaste: Condiciones ptimas o de rutina?

4. Qu contiene el reactivo de Biuret? 5. De acuerdo a la tcnica de Spinreact verifica cual es la sensibilidad analtica. 6. Revisa en la misma tcnica que sustancias interfieren en la determinacin de Protenas Totales.

BIBLIOGRAFIA
1. Bishop ML, Fody EP, Schoeff LE, Clinical Chemistry Principles, Procedures, Correlations, 5tha Ed. Lippincott Williams. USA. 2005. 2. Henry J.B. El laboratorio en el Diagnstico Clnico. 20. Edicin. Espaa. Ed. Marbn. 2005.

3. http://www.spinreact.com.mx/public/index.html 4. http://depa.fquim.unam.mx/amyd/curso.php?curso=338 5. http://www.seh-lelha.org/calidad.htm

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FECHA:

FUNCIN RENAL. DETERMINACIN DE UREA, CREATININA Y AC. RICO


INTRODUCCION.
El sistema renal es un conjunto de rganos encargados de la eliminacin de los residuos del metabolismo. Est compuesto por dos riones, dos urteres, la vejiga urinaria y la uretra. Los riones estn implicados en muchas funciones corporales importantes, regulan el equilibrio hidroelectroltico y cido-base, mediante la filtracin de la sangre, seguido por una secrecin y reabsorcin tubular selectiva. Los riones son esenciales para la eliminacin de productos de desecho, y la alteracin de la funcin renal es una de las causas ms frecuentes de toxicidad por frmacos, debida a una inadecuada excrecin de los medicamentos y sus metabolitos. Los riones tienen, adems, una funcin endocrina, participando en la regulacin del metabolismo mineral y seo (1,25-(OH); vitamina D), en la hematopoyesis (eritropoyetina) y en la funcin adrenal (renina). La unidad funcional del rin es la nefrona. Cada rin est compuesto por aproximadamente un milln de nefronas. La porcin inicial de la nefrona el glomrulo, realiza una filtracin selectiva de la sangre. Entre las funciones del rin se encuentra la excrecin de productos de desecho o productos finales del metabolismo como el de protenas, creatina muscular y purinas que corresponden a la urea, creatinina y cido rico. La urea y creatinina son los principales componentes de la orina, cuando el rin no tiene un funcionamiento adecuado estas sustancias aumentan su concentracin en sangre lo cual es una indicacin de un problema en la funcin renal.

urea
FUNDAMENTO (Urea UV ureasa).
El amonaco formado se incorpora al -cetoglutarato por accin de la glutamato deshidrogenasa (GLDH) con oxidacin paralela de NADH a NAD+

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La disminucin de la concentracin de NAD+ en el medio es proporcional a la concentracin de urea de la muestra ensayada.

SIGNIFICADO CLINICO.
La urea es el resultado final del metabolismo de las protenas; se forma en el hgado a partir de su destruccin. Puede aparecer la urea elevada en sangre (uremia) en dietas con exceso de protenas, enfermedades renales, insuficiencia cardiaca, hemorragias gstricas, hipovolemia y obstrucciones renales.

MUESTRAS
- Suero o plasma heparinizado: No usar sales de amonio o fluoruro como anticoagulantes. - Orina: Diluir la muestra al 1/50 con agua destilada. Mezclar. Multiplicar el resultado obtenido por 50 (factor de dilucin).

PROCEDIMIENTO
1. Condiciones del ensayo: Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 340 nm Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .1 cm paso de luz Temperatura. . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . 37C / 15-25C 2. Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada. 3. Pipetear en una cubeta: Blanco Patrn Muestra RT (mL) 1,0 1,0 1,0 Patrn (L) -10 -Muestra (L) --10 4. Mezclar y leer las absorbancias a los 30 s (A1) y a los 90 s (A2). 5. Calcular: A= A1 A2.

CLCULOS

Factor de conversin: mg/dL x 0,1665 = mmol/L.

VALORES DE REFERENCIA
Suero: de 15 a 45 mg/dL (2.49-7.49 mmol/L) Orina: de 20 a 35 gr/24 horas

DATOS OBTENIDOS

CALCULOS
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RESULTADOS

FUNDAMENTO (Urea 37 Ftalaldehdo).


La urea presente en la muestra reacciona con el o-ftalaldehido en medio cido originando un complejo coloreado que puede cuantificarse espectrofotomtricamente: Urea + o-ftalaldehdo
H+

Isoindolina

La intensidad del color formado es proporcional a la concentracin de urea en la muestra ensayada.

PROCEDIMIENTO
1. Condiciones del ensayo: Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . 510 nm (500-550) Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .1 cm paso de luz Temperatura : . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37C 2. Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada. B) Punto final 1. Pipetear en una cubeta: R1 (mL) Patrn (L) Muestra (L) Blanco 1,0 Patrn 1,0 25 Muestra 1,0 25

2. Mezclar y aadir: R2 (mL) Blanco 1,0 Patrn 1,0 Muestra 1,0

3. Mezclar e incubar 15 minutos a 37C. 4. Leer la (A) del patrn y la muestra, frente al Blanco de reactivo. Clculos

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10 mg/L urea BUN dividido por 0,466 = 21 mg/L de urea = 0,36 mmol/L urea Factor de conversin: mg/dL x 0,1665 = mmol/L.

DATOS OBTENIDOS

CALCULOS

RESULTADO

Creatinina
FUNDAMENTO.
El ensayo de la creatinina esta basado en la reaccin de la creatinina con el picrato alcalino descrito por Jaff. La creatinina reacciona con el picrato alcalino formando un complejo rojizo. El intervalo de tiempo escogido para las lecturas permite eliminar gran parte de las interferencias conocidas del mtodo. La intensidad del color formado es proporcional a la concentracin de creatinina en la muestra ensayada.

SIGNIFICADO CLNICO.
La creatinina es el resultado de la degradacin de la creatina, componente de los msculos y puede ser transformada en ATP, fuente de energa para las clulas. La produccin de creatinina depende de la modificacin de la masa muscular. Vara poco y los niveles suelen ser muy estables. Se elimina a travs del rin. En una insuficiencia renal progresiva hay una retencin en sangre de urea, creatinina y cido rico. Niveles altos de creatinina son indicativos de patologa renal. El diagnstico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clnicos y de laboratorio.

MUESTRAS QUE SE PUEDEN UTILIZAR


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PROCEDIMIENTO.
REACTIVOS
R 1 Reactivo Pcrico R 2 Reactivo Alcalinizante CREATININAE CAL cido pcrico 17,5 mmol/ L Hidrxido sdico 0,29 mol/L Patrn primario acuoso de Creatinina 2 mg/dL

1. Condiciones del ensayo: Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . 492 nm (490-510) Temperatura. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37C (15-25C) 2. Ajustar el espectro a cero frente a agua 3. Pipetear en una cubeta:

Blanco RT (mL) Patrn ( L) Muestra ( L) 1,0 -

Patrn 1,0 100 -

Muestra 1,0 100

4. Mezclar y poner en marcha el cronmetro. 5. Leer la absorbancia (A1) al cabo de 0 segundos y al cabo de 90 segundos (A2) de la adicin de la muestra. 6. Calcular A=A2-A1

CLCULOS.

VALORES DE REFERENCIA.
Suero o plasma: Hombres 0,7 - 1,4 mg/dL 61,8 - 123,7 mol/L 1807. MANUAL LABORATORIO BIOQUMICA CLNICA. SEMESTRE 2014-1
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Mujeres 0,6 - 1,1 mg/dL 53,0 - 97,2 mol/L Orina: 15-25 mg/Kg/24 h Hombres 10 - 20 mg/Kg/24 h 88 - 177 mol/Kg/24h Mujeres 8 -18 mg/Kg/24 h 71 - 177 mol/Kg/24 h

DATOS OBTENIDOS

CALCULOS

RESULTADO

cido rico
FUNDAMENTO.
El cido rico es oxidado por la uricasa a alantona y perxido de hidrgeno (2H 2O2) que en presencia de peroxidasa (POD), 4-aminofenazona (4-AF) y 2-4 Diclorofenol Sulfonato (DCPS) forma un compuesto rosceo: cido rico + 2H2O + O2 Alantona + CO2 + 2H2O2

2H2O2 + 4-AF + DCPS Quinonaimina+ 4H2O La intensidad de quinonaimina roja formada es proporcional a la concentracin de cido rico presente en la muestra ensayada.

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SIGNIFICADO CLINICO.
El cido rico y sus sales son el producto final del metabolismo de las purinas. En una insuficiencia renal progresiva hay una retencin en sangre de urea, creatinina y cido rico. Niveles altos de cido rico son indicativos de patologa renal y generalmente se asocia con la gota.

MUESTRAS
- Suero o plasma: Estabilidad 3-5 das a 2-8C y 6 meses a 20C. - Orina (24 h): Estabilidad 3 das a temperatura ambiente a pH > 8. Diluir la muestra al 1/50 en agua destilada. Mezclar. Multiplicar el resultado obtenido por 50 (factor de dilucin); Si la muestra es turbia, calentarla a 60C 10 min para disolver los precipitados de urato y cido rico. No refrigerar.

PROCEDIMIENTO
1. Condiciones del ensayo: Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . .520 nm (490-550) Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .1 cm paso de luz Temperatura . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37C / 15-25C 2. Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada. 3. Pipetear en una cubeta: RT (mL) Patrn (L) Muestra (L) Blanco 1,0 Patrn 1,0 25 Muestra 1,0 25

4. Mezclar e incubar 5 minutos a 37C 10 min. 15-25C. 5. Leer la absorbancia (A) del Patrn y la muestra, frente al Blanco de reactivo. El color es estable como mnimo 30 minutos.

CLCULOS
Suero o plasma

Orina 24 h

Factor de conversin: mg/dL x 59,5= mol/L. 1807. MANUAL LABORATORIO BIOQUMICA CLNICA. SEMESTRE 2014-1
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VALORES DE REFERENCIA
Suero o plasma: Mujeres 2,5 6,8 mg/dL 149 405 mol/L Hombres 3,6 - 7,7 mg/dL 214 458 mol/L Orina: 250 - 750 mg/24 h 1,49 - 4,5 mmol/24 h

DATOS OBTENIDOS

CALCULOS

RESULTADO

CONCLUSIONES:

CUESTIONARIO 6.
1. Funciones en las que participa el rin. 2. Cul es la unidad funcional del rin? 3. En dnde se produce la urea?, A partir de qu se sintetiza? En que cantidad es excretada en la orina? 4. En la determinacin de urea por el mtodo UV lo que el espectro mide es la desaparicin de un analito la cual es proporcional a la cantidad de urea presente. Escribe la reaccin que se lleva a cabo y cual es el analito que se mide.

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5. Qu coloracin obtuviste en la determinacin de urea y que problemas tuviste? 6. Menciona una patologa que presente valores altos de urea y creatinina. 7. En qu medio debe de hacerse la reaccin en la determinacin de creatinina? 8. Investiga que significa BUN y cual es el factor de conversin entre urea y BUN. Cul es la relacin normal urea:creatinina. 9. La depuracin de creatinina es una medida indirecta fidedigna de la filtracin glomerular en donde se requiere recolectar orina de 24 hrs.Investiga su frmula y de acuerdo a ella define que datos necesitas para su determinacin. 10. La determinacin de cido rico por el mtodo enzimtico utiliza una enzima llamada uricasa. Cual es el analito final cuya concentracin es medida en el espectrofotmetro? 11. Menciona una patologa producida por niveles altos de cido rico. 12. Qu significa azoemia?

BIBLIOGRAFIA http://www.spinreact.com.mx/public/lineas/UREA%20UV.pdf Schultz A. Uric acid. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1261-1266 and 418.

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FECHA:

METABOLISMO SEO. CALCIO, FSFORO Y MAGNESIO.


INTRODUCCION.
El esqueleto es un rgano metablicamente activo que sufre remodelacin a lo largo de la vida. Este remodelamiento es necesario para mantener tanto su estructura integral como para servir a las funciones metablicas como almacn de fsforo y calcio. En los ltimos aos se ha realizado un avance muy significativo sobre nuestro conocimiento acerca de los mecanismos ntimos del metabolismo seo y sus minerales, as como las patologas que se derivan del l. Al mismo tiempo ha habido una considerable mejora de la tecnologa para medir el calcio, fsforo, magnesio y los marcadores del recambio seo. El calcio, fsforo y magnesio se relacionan fisiolgicamente siendo sus funciones ms importantes: Como constituyentes del esqueleto. Sales solubles que ayudan a controlar la composicin de los fluidos corporales. Complementos esenciales para la actuacin de muchas enzimas y otras protenas. Los riones desempean un papel importante en la regulacin de los niveles de calcio. En el fallo renal, los niveles de calcio tienden a caer, mientras que los niveles de fosfato aumentan correspondientemente. El calcio es el catin ms abundante en el cuerpo, 1 kg a 1,3 kg, el 99% en forma de hidroxiapatita en el esqueleto. El calcio forma complejos con el fosfato en distintas formas, dependiendo del estado de ionizacin del fosfato. Las afecciones alcalinas estimulan la deposicin de calcio en el hueso, mientras que las afecciones cidas estimulan la salida de calcio del hueso. As la alcalosis favorece la hipocalcemia mientras que la acidosis estimula la hipercalcemia. Existe un equilibrio entre el fosfato clcico soluble y el insoluble en el hueso. Existe una relacin inversa entre el Ca y el P. Los estados hipocalcmicos casi siempre se acompaan de estados hiperfosfatmicos y viceversa. El calcio del plasma srico existe en tres formas distintas: 1) libre o ionizado, que es la forma fisiolgicamente activa, y supone el 50% del calcio srico; 2) aproximadamente un 10% del calcio 1807. MANUAL LABORATORIO BIOQUMICA CLNICA. SEMESTRE 2014-1
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est unido a una serie de aniones como el bicarbonato, lactato, fosfato o citrato; 3) el resto, un 40% del calcio, est unido a protenas plasmticas, principalmente a albmina. La concentracin del calcio, fosfato y magnesio en el plasma dependen del efecto neto de la formacin y reabsorcin sea, la absorcin intestinal y la prdida renal. Las principales hormonas que lo regulan son la hormona paratiroidea, la calcitonina y el 1,25-dihidroxicolecalciferol.

El fsforo contribuye a la formacin de huesos y dientes, interviene en la utilizacin de carbohidratos y grasas, sntesis de protena y en la conservacin y reparacin de clulas y tejidos. Adems es fundamental para la produccin de ATP y participa en la contraccin de msculos, el funcionamiento de los riones, regula los latidos del corazn y la conduccin nerviosa. El Magnesio est distribuido fuera y dentro de las clulas, ms de la mitad se encuentra en huesos y dientes mientras que una tercera parte del magnesio corporal forma parte de los msculos y otros tejidos. El Magnesio interviene en la contraccin y relajacin muscular, regula el funcionamiento de diversos sistemas enzimticos como cofactor, participa en la produccin y trasporte de energa, interviene en la sntesis de protenas y de cidos nucleicos, inhibe la liberacin de acetilcolina y ayuda a la absorcin y metabolismo del calcio entre algunas de sus funciones.

CUESTIONARIO 7.
1. Cual es el sistema encargado de absorber el calcio fosforo y magnesio de los alimentos? 2. El calcio y el fsforo son dos de los elementos minerales ms abundantes en el cuerpo humano y se encuentran fundamentalmente formando el esqueleto mineral, en forma de un compuesto llamado 3. Cul es la funcin de la hormona paratiroidea en el metabolismo del calcio? 4. Menciona 3 funciones del calcio en el organismo.

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5. En la determinacin de Calcio, la o-Cresolftalena complexona se une al calcio, para formar una coloracin prpura. Indica la longitud de onda ptima de absorcin y el medio en que lo hace. 6. El fsforo es esencial para 7. Menciona 3 funciones importantes del fsforo en el organismo. 8. Para qu es til la cuantificacin de Magnesio en la sangre? 9. Cules son los sntomas que se presentan cuando hay una deficiencia de Magnesio?

BIBLIOGRAFIA. 1. Bishop ML, Fody EP, Schoeff LE, Clinical Chemistry Principles, Procedures, Correlations, 5tha Ed. Lippincott Williams. USA. 2005. 2. Henry J.B. El laboratorio en el Diagnstico Clnico. 20. Edicin. Espaa. Ed. Marbn. 2005. 3. Gaw A, Murphy M. Clinical Biochemistry. 3er. Ed. Churchill Livingstone. China. 2004. 4. Beckett G, Walker S., Clinical Biochemistry. Blackwell Publishing. 7th Ed. India. 2005.

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FECHA:

Examen general de orina


INTRODUCCION.
El anlisis de orina desempea un papel esencial en el diagnstico clnico. Se puede obtener una gran cantidad de informacin a travs del mismo. Nos permite evaluar el funcionamiento del aparato urinario permitiendo detectar afecciones tanto funcionales como estructurales, as como patologas de tipo endcrino o metablico en base al hallazgo de metabolitos en la orina. El examen de orina fue uno de los primeros en ser utilizado como un medio de diagnstico. Se han encontrado registros de observaciones de la orina de 2000 a 1000 aos A.C. En el ao 500 A.C. Hipcrates haca sus observaciones en la orina respecto a la presencia de espuma y la asociaba con enfermedad. En los siglos XIV y XV los mdicos inspeccionaban la orina en diferentes vasos a contraluz para hacer el diagnstico. Hasta la dcada de los 60s era comn hacer las pruebas qumicas con reacciones individuales. En la actualidad se utilizan distintas marcas de tiras reactivas que utilizan qumica seca para cada uno de los analitos que se determinan, as como equipos semiautomatizados para la lectura de las mismas. Es importante realizar algunas de las pruebas complementarias para evitar algunos falsos positivos. Antes de proceder al examen se debe evaluar la muestra de orina para ser aceptada: etiquetado adecuado, espcimen y conservacin apropiada, ausencia de contaminacin y posibles retrasos en el transporte que pueden causar un deterioro en la muestra. Cada laboratorio debe contar con guas escritas para la aceptacin o rechazo de los especmenes. Los elementos que constituyen la orina pueden variar con la dieta, actividad y consumo de medicamentos entre otros. Debido a ello, es importante proporcionar las indicaciones adecuadas a los pacientes, para que se lleve a cabo una correcta recoleccin de la muestra. El examen general de orina consta de: examen fsico, qumico y microscpico. Las caractersticas fisicoqumicas incluyen apariencia (color y turbidez), gravedad especfica, pH y 1807. MANUAL LABORATORIO BIOQUMICA CLNICA. SEMESTRE 2014-1
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constituyentes qumicos como glucosa, bilirrubina, cetonas entre otros. En el examen microscpico del sedimento urinario se busca cristales, clulas, leucocitos, eritrocitos y cilindros principalmente.

SIGNIFICADO CLNICO.
Normalmente la orina es transparente pero puede variar hasta observarse turbia debido a la precipitacin de partculas de fosfato amorfo en orinas alcalinas o de urato amorfo en orinas cidas. Otro factor relacionado con la turbidez de la orina, es por la presencia de leucocitos, clulas epiteliales, bacterias, entre otros elementos formes relacionados con alguna patologa. La presencia de glucosa se relaciona directamente con el nivel de glucosa en sangre, velocidad de filtracin glomerular y grado de reabsorcin tubular, por arriba del umbral plasmtico renal que es de 180 mg/dL de glucosa en sangre. An cuando la proteinuria est asociada con dao renal, puede ser transitoria y estar vinculada a fiebre, ejercicio y deshidratacin. La presencia de bilirrubina en orina est relacionada con aumento de bilirrubina conjugada ya que la no conjugada no se puede filtrar a travs del glomrulo. La presencia de nitritos, est relacionada con el diagnstico temprano de posibles infecciones bacterianas causadas por bacterias gram negativas. Diversas situaciones intervienen en la presencia de hemoglobina en orina como la ingesta de alimentos, frmacos y ejercicio, adems del periodo menstrual en las mujeres, adems de las patologas como cncer de vejiga, y problemas en el rin.

PROCEDIMIENTO.
La muestra debe ser recolectada en un recipiente de plstico transparente (se venden en farmacias o lo proporciona el laboratorio). El etiquetado debe hacerse en el cuerpo del recipiente y nunca en la tapa del mismo, Nombre, Fecha y Hora de recoleccin de la muestra. La primera orina de la maana, es la mejor para el anlisis por ser la ms concentrada, pero se puede utilizar una muestra aleatoria. 1.- EXAMEN FSICOQUIMICO. 1. Volumen. 2. Color 3. Turbidez Anlisis por tira reactiva. Este anlisis nos da resultados semicuantitativos de manera rpida y eficiente. Este mtodo realizado de manera adecuado es sensible, especfico y econmico. La orina debe estar homognea y debe ser realizado en un intervalo de tiempo especificado por el fabricante. Se sumerge la tira reactiva en el recipiente que contiene la orina y se remueve el exceso golpeando ligeramente con el borde del recipiente. Se compara cada zona reactiva con la carta de colores correspondiente. Dependiendo de la marca de las tiras puede cambiar el orden de las determinaciones. 1. Glucosa 2. Bilirrubina 3. Cetonas 4. Gravedad especfica 5. Sangre 6. pH 1807. MANUAL LABORATORIO BIOQUMICA CLNICA. SEMESTRE 2014-1
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7. 8. 9. 10.

Protenas Urobilingeno Nitritos Leucocitos.

2.- EXAMEN MICROSCPICO. 1.-Se homogeniza perfectamente la muestra de orina. 2.-Se vaca en un tubo teniendo un volumen fijo (10 a 15 ml) y se centrifuga durante 5 minutos a 1500 rpm. 3.- Decantar con un solo movimiento rpido o aspirar hasta un volumen fijo que puede ser de 1 0.5 ml. 4.- Resuspender el sedimento con un movimiento ligero. 5.- Poner una gota del sedimento sobre un portaobjeto, cubrirlo con el cubreobjeto. 6.- Observar al microscopio con objetivo 10x e identificar clulas, cristales, cilindros, moco, filamento y otros artefactos. 7.- Cuando ya se tiene localizada alguna clula observar con objetivo 40x para ver sus caractersticas principales.

RESULTADOS. EXAMEN FISICOQUMICO.


PARAMETRO VOLUMEN COLOR TURBIDEZ GLUCOSA BILIRRUBINA CETONA GRAVEDAD ESPECFICA SANGRE pH MANUAL URISPIN

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PROTENAS UROBILINGENO NITRITOS LEUCOCITOS

EXAMEN MISCROSCPICO.
CELULAS LEUCOCITOS ERITROCITOS BACTERIAS CRISTALES CILINDROS

ACTIVIDADES.
Dibuja e identifica de acuerdo a lo observado en el microscopio en tu muestra, en la de tus compaeros o en la bibliografa: a) leucocito, b) eritrocito c) cristal de oxalato de calcio, d) cilindro hialino y e) clula epitelial.

CUESTIONARIO 8.
1. Cules son las posibles causas de una coloracin rojiza en una muestra de orina. 2. Si se encuentran cilindros en la muestra de orina, con que parmetro qumico positivo se relaciona? 3. En qu patologa se tiene una orina con gravedad especfica (densidad) menor a 1.003? 4. Define los siguientes trminos: a) Hipostenuria b) Glicemia c) Glucosuria d) Anuria e) Piuria

BIBLIOGRAFIA.
1. Bishop ML, Fody EP, Schoeff LE, Clinical Chemistry Principles, Procedures, Correlations, 5tha Ed. Lippincott Williams. USA. 2005. 2. Henry J.B. El laboratorio en el Diagnstico Clnico. 20. Edicin. Espaa. Ed. Marbn. 2005.

3. Heintz R, Althof S. El sedimento urinario. Atlas-Tcnicas de estudio-Valoracin. 5. Ed. 1807. MANUAL LABORATORIO BIOQUMICA CLNICA. SEMESTRE 2014-1
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Panamericana. Madrid. 1994. 4. Graff S. Analisis de orina. Atlas color. Panamericana. Madrid. 1987. 5. Gaw A, Murphy M. Clinical Biochemistry. 3er. Ed. Churchill Livingstone. China. 2004.

FECHA:

GASOMETRA arterial
INTRODUCCIN
La gasometra consiste en la extraccin de una pequea cantidad de sangre para medir la cantidad de oxgeno, dixido de carbono y el pH principalmente. Hay dos tipos de muestra til para este anlisis: 1) sangre arterial.- se toma directamente por puncin arterial o por aspiracin de un catter en una lnea arterial, 2) Sangre capilar.- este tipo de muestra se emplea a menudo en cuidados intensivos de neonatos y en pediatra. Para el anlisis de gases en sangre no se recomienda las muestras de sangre venosa perifrica porque proporcionan poca informacin del estado general del paciente. La sangre arterial muestra la composicin antes de que cualquiera de sus componentes sea utilizado por los tejidos del cuerpo, se diferencia de la sangre venosa principalmente por el contenido de oxgeno. El objetivo de la monitorizacin de los gases sanguneos es garantizar un intercambio de gases adecuado as como evaluar enfermedades respiratorias y padecimientos que afectan los pulmones. Tambin suministra informacin acerca del equilibrio cido-base del cuerpo, el cul puede revelar indicios importantes acerca del funcionamiento del pulmn, rin y del estado metablico general del cuerpo. El gasmetro o analizador de gases mide los siguientes parmetros: * pH - se expresa en unidades absolutas * Presin parcial de CO2 (pCO2) - se expresa en mmHg * Presin parcial de O2 (pO2) - se expresa en mmHg A partir de ellos se calcula el bicarbonato sdico (HCO3-), el exceso de bases (EB) y la saturacin de oxgeno (SO2). Los modernos equipos de gasometra suelen incorporar electrodos especficos, in selectivos (ISE) para medida de electrolitos (Na, K, Cl, y Ca ionizado), pudiendo tambin determinar hemoglobina total, hematocrito, glucosa y lactato, con informacin completa, y sobre todo rpida de la oxigenacin, ventilacin, estado cido base, y metabolismo electroltico del paciente grave. Los datos obtenidos de una muestra de sangre slo reflejan el estado del paciente en el momento en que se hizo el anlisis, puesto que esos parmetros pueden cambiar de forma significativa en muy poco tiempo. Por eso, los resultados obtenidos no deben valorarse nunca de forma aislada, sino en el contexto de la situacin clnica del paciente. Dada la importancia de la toma de decisiones, sobre todo en la compensacin rpida de las 1807. MANUAL LABORATORIO BIOQUMICA CLNICA. SEMESTRE 2014-1
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acidosis, se contempla el uso de equipos porttiles que trabajan con sistemas integrados de gasometra por fluorescencia. El principal objetivo en cuidados intensivos es asegurar el suministro suficiente de oxgeno a los rganos y tejidos el cual va a depender de: 1) Captacin 2) Transporte y 3) Cesin de oxgeno

EQUIPO.

Desechos

Lavado Buffer calibradores

BIBLIOGRAFIA.
1.
2. 3. 4. 5. Henry J.B. El laboratorio en el Diagnstico Clnico. 20. Edicin. Espaa. Ed. Marbn. 2005. Gaw A, Murphy M. Clinical Biochemistry. 3er. Ed. Churchill Livingstone. China. 2004. Beckett G, Walker S., Clinical Biochemistry. Blackwell Publishing. 7th Ed. India. 2005. Medline Plus. Gasometra arterial. 2012. http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ ency/article/003855.htm Gasometra arterial. 2012. http://web.udl.es/usuaris/w4137451/webresp/contenidos_docentes/explo racion/pdf_pruebas/gasometria5.pdf

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FECHA:

ELECTROLITOS
Sodio, Potasio, cloro
INTRODUCCION
El sodio, potasio y cloro pueden ser determinados por varios mtodos como son ionselectivo y fotmetro de flama as como tcnicas especficas para cada uno de ellos. El ms utilizado es el de ion-selectivo que se basa en el principio de potenciometra. Se produce un cambio de voltaje entre un electrodo de referencia y uno indicador el cual es proporcional a la actividad del ion que se mide. Los electrodos para medir sodio tienen una membrana de vidrio sensible a los iones de sodio que excluye a los otros cationes y as para cada uno de los otros iones. El sodio, potasio y cloro se encuentran presentes en la sangre y otros lquidos corporales, intervienen en el equilibrio del agua y cido base, as como en otros procesos importantes. Algunos equipos como el Easy Stat tienen para hacer determinacin tanto de gases como de electrolitos.

Se llevar a cabo la determinacin de cloro por el mtodo de tiocianato. Completa tu bitcora con los datos de esta tcnica que se enva. (Fundamento, significado clnico, procedimiento, clculos, valores de referencia).

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FUNDAMENTO.

ACTIVIDADES.
Completa el siguiente cuadro con los valores de referencia y los obtenidos en la prctica: Parmetro Sodio Potasio Cloro Rango Muestra

CUESTIONARIO 10.
1. Cul es el tubo que debe ser utilizado para la toma de muestra para determinacin de sodio, potasio, cloro? 2. Cules son los factores pre-analticos que pueden afectar la determinacin de estos iones? 3. Adems de plasma, qu otro fluido se utiliza para este anlisis? 4. La determinacin de potasio, cloro y sodio permite monitorear la funcin de Qu rganos? 5. Cmo se le denomina a los niveles altos y bajos de sodio, potasio y cloro? 6. Si nos envan una muestra urgente para determinacin de potasio pero est hemolizada debemos de realizar el anlisis? Explica tu respuesta.

BIBLIOGRAFIA
1. Bishop ML, Fody EP, Schoeff LE, Clinical Chemistry Principles, Procedures, Correlations, 5tha Ed.
Lippincott Williams. USA. 2005.

2. Henry J.B. El laboratorio en el Diagnstico Clnico. 20. Edicin. Espaa. Ed. Marbn. 2005. 3. Gaw A, Murphy M. Clinical Biochemistry. 3er. Ed. Churchill Livingstone. China. 2004. 4. Beckett G, Walker S., Clinical Biochemistry. Blackwell Publishing. 7th Ed. India. 2005 1807. MANUAL LABORATORIO BIOQUMICA CLNICA. SEMESTRE 2014-1
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5. Medline Plus Electrolitos 2012.


http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/002350.htm

FECHA:

CARBOHIDRATOS. DIABETES MELLITUS.


INTRODUCCIN.
Los carbohidratos son descompuestos rpidamente por el cuerpo para ser utilizados como energa, se encuentran en alimentos como frutas, leches y sus derivados as como en dulces, azcar comn y refrescos. Son digeridos en el tracto gastrointestinal, convertidos en monosacridos y de esta manera absorbidos. El almidn provee glucosa directamente mientras que la fructosa y la galactosa son absorbidas y convertidas en glucosa. La glucosa es la fuente principal de energa de las clulas siendo qumicamente una Aldohexosa. Se obtiene a travs de la alimentacin, y se almacena principalmente en el hgado, el cual tiene un papel primordial en el mantenimiento de los niveles de glucosa en sangre.

Para que los niveles de glucosa se mantengan y el almacenamiento en el hgado sea adecuado, se precisa la ayuda de la insulina, hormona sintetizada en las clulas beta del pncreas. La glucosa no puede entrar en la mayora de las clulas de los diferentes tejidos en ausencia de insulina. La diabetes mellitus es una enfermedad sistmica, crnico-degenerativa con diferentes grados de predisposicin hereditaria. Se caracteriza por hiperglicemia debido a la deficiencia en la produccin o accin de la insulina. Afecta el metabolismo intermedio de los hidratos de carbono, protenas y grasas. Sus principales sntomas son: poliuria, polidipsia y prdida de peso. De acuerdo a la Secretara de Salud, alrededor de 10 millones de personas viven con diabetes en Mxico, siendo la diabetes la principal causa de muerte con alrededor de 85,000 muertes anuales (datos 2010) y la principal causa de insuficiencia renal crnica terminal adems de 1807. MANUAL LABORATORIO BIOQUMICA CLNICA. SEMESTRE 2014-1
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discapacidad grave, pues a causa de sus complicaciones se reporta la mayor parte de amputaciones de extremidades y de prdida de la visin. Aproximadamente el 40% de los diabticos desconoce que padece la enfermedad. La Diabetes Mellitus se clasifica en 1) Diabetes Mellitus tipo 1, anteriormente conocida como juvenil o insulinodependiente, 2) Diabetes Mellitus tipo 2, 3) Diabetes gestacional y 4) Otros tipos especficos de diabetes de etiologa diversa entre los que destacan los defectos genticos en produccin de insulina o en las clulas beta como sucede en la diabetes tipo MODY (Maturity onset Diabetes of the Young) que es una forma de diabetes monognica caracterizada por una transmisin autosmica dominante. Cuando la insulina acta en los receptores de la clula la glucosa puede penetrar a travs de su membrana y ser utilizada por la misma. En la Diabetes Mellitus tipo 1 no hay produccin de insulina por lo que la glucosa no puede ingresar a la clula, mientras que en la tipo 2 los receptores de la clula estn defectuosos por lo que la insulina no puede actuar lo que evita que la glucosa ingrese a la clula. Los criterios para el diagnstico de diabetes mellitus de acuerdo a la ADA (Asociacin Americana de Diabetes) y al Sistema Nacional de Salud que se encuentran descritos en la Norma Mexicana NOM-015-SSA2-2010 para la prevencin, tratamiento y control de la diabetes son los siguientes: 1. Sntomas de diabetes ms una concentracin de glucosa casual plasmtica >= 200 mg/dL (11,1 mmol/L). Se define casual como cualquier momento del da sin relacin con la hora de la ltima ingestin de comida. Los sntomas clsicos de diabetes incluyen poliuria, polidipsia y prdida no explicada de peso. 2. Glucosa plasmtica en ayunas >= 126 mg/dL (7 mmol/L). Se define ayuno como la no ingestin calrica en por lo menos 8 horas 3. Glucosa plasmtica a las 2 horas poscarga >= 200 mg/dL , durante una curva de tolerancia oral a la glucosa, (carga oral de 75 g de glucosa anhidra disuelta en 300 ml. de agua) El plasma o suero debe separarse mediante centrifugacin tan pronto se recoja la muestra de sangre para evitar la gliclisis que puede dar lugar a subestimar la glucemia. El fluoruro de sodio no previene totalmente la gliclisis. Existen dos estados metablicos intermedios: Intolerancia a la Glucosa, niveles de glucosa 2 horas post carga oral de 75 gramos de glucosa anhidra > 140 y < 199 mg/dl y Glucosa Anormal en Ayuno, glucosa de ayuno > a 100 y < a 125 mg/dl. Se le llama Resistencia a la insulina, a la disminucin de la efectividad de esta hormona ya sea exgena o endgena, en los tejidos muscular, heptico y adiposo. Alteracin de la capacidad de la insulina para estimular la captacin de glucosa En el 2003 el Comit Experto en Diagnstico y Clasificacin de Diabetes Mellitus estableci 1807. MANUAL LABORATORIO BIOQUMICA CLNICA. SEMESTRE 2014-1
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que el valor de referencia mximo para glucosa debe ser menor a 100 mg/dl.

FUNDAMENTO.
La glucosa oxidasa (GOD) cataliza la oxidacin de glucosa a cido glucnico. El perxido de hidrgeno (H2O2), producido se detecta mediante un aceptor cromognico de oxigeno, fenolampirona en presencia de peroxidasa (POD):

La intensidad del color formado es proporcional a la concentracin de glucosa presente en la muestra ensayada.

RESULTADOS.

CUESTIONARIO 11.
1. Explica el mecanismo por el cual la glucosa entra al interior de la clula, que necesita para ingresar y que transportadores participan. 2. A qu se le llama Diabetes Gestacional? 3. Menciona por lo menos dos tipos de diabetes MODY y el defecto gentico correspondiente. 4. Cual es el criterio diagnstico para diabetes de glucosa en ayuno? 5. Cul es el criterio diagnstico para Glucosa Anormal en Ayuno? 6. De acuerdo a la sensibilidad analtica que aparece en la tcnica de spinreact de la glucosa determina la absorbancia aproximada que debe tener un patrn de 100 mg/dL de glucosa. 7. Qu pruebas de laboratorio nos pueden detectar problemas en el metabolismo de los 1807. MANUAL LABORATORIO BIOQUMICA CLNICA. SEMESTRE 2014-1
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carbohidratos? Qu pruebas son tiles en el seguimiento de la diabetes?

BIBLIOGRAFIA.
1. Gaw A, Murphy M. Clinical Biochemistry. 3er. Ed. Churchill Livingstone. China. 2004 2. http://www.revespcardiol.org/sites/default/files/elsevier/pdf/25/25v55n05a13031154pdf001.pd f 3. http://rcmultimedios.mx/sociedad/12120/enfermedades-cronicas-principal-causa-de-muerteen-mexico-jose-ngel-cordova 4. Henry J.B. El laboratorio en el Diagnstico Clnico. 20. Edicin. Espaa. Ed. Marbn. 2005. 5. Diario Oficial de la Federacin. Norma Oficial Mexicana NOM-015-SSA2-2010, Para la FECHA: prevencin, tratamiento y control de la diabetes mellitus.

LPIDOS.COLESTEROL Y TRIGLICRIDOS. ATEROESCLEROSIS.


INTRODUCCIN.
Los lpidos son sustancias insolubles en agua que constituyen una parte importante de la alimentacin. En el organismo forman la principal fuente de energa metablica y son parte estructural de las membranas celulares. El 90% de los lpidos de la dieta estn formados por triglicridos. Los lpidos plasmticos ms importantes desde el punto de vista clnico son el colesterol total, colesterol de alta densidad, colesterol de baja densidad y los triacilgliceroles conocidos clnicamente como triglicridos. El colesterol es un componente estructural importante de membranas celulares y un precursor en la biosntesis de cidos biliares, hormonas esteroides y vitamina D. Los triglicridos forman parte de las grasas neutras y representan la principal forma de almacenamiento de energa del organismo formando el 95% del tejido adiposo.

COLESTEROL

TRIGLICRIDOS

El colesterol y los triglicridos, debido a su insolubilidad en agua, necesitan unirse a protenas para ser transportados en la sangre formando molculas llamadas lipoprotenas, las cuales son macromolculas esfricas que transportan, a travs del plasma, adems de colesterol y 1807. MANUAL LABORATORIO BIOQUMICA CLNICA. SEMESTRE 2014-1
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triglicridos, fosfolpidos, vitaminas y steres de colesterol. Presentan un ncleo hidrofbico no polar formado por triglicridos y steres de colesterol, y una capa hidroflica constituida por fosfolpidos, colesterol libre y apolipoprotenas. Las lipoprotenas se clasifican en base a su tamao, densidad y movilidad electrofortica. Las principales son quilomicrones, lipoprotenas de muy baja densidad (VLDL), de baja densidad (LDL) y de alta densidad (HDL). El transporte reverso del colesterol es un mecanismo por el cual el colesterol que se encuentra en las clulas perifricas regresa al hgado para ser excretado o reutilizado. La ateroesclerosis es un desorden de tipo inflamatorio caracterizado por la formacin de COLESTEROL TOTAL (mg/dL) LDL COLESTEROL (mg/dL) <100 Optimo <200 Deseable 200239 Lmite alto >=240 Alto 100129 Deseable 130159 Lmite alto 160189 Alto >=190 Muy alto placas de tejido fibroso llamadas ateromas que se inician por la acumulacin y subsecuente oxidacin de las LDL depositadas en la capa ntima de la arteria, es una enfermedad multifactorial resultante de la interaccin de factores genticos y ambientales y es uno de los principales procesos que conducen a la enfermedad arterial coronaria. Actualmente en Mxico, de acuerdo a la Secretara de Salud se encuentra dentro de las cinco primeras causas de mortalidad. El Third Report of the National Cholesterol Education Program (NCEP) Adult Treatment Panel (ATP) III establece los niveles de corte que reflejan niveles de decisin clnica (diferentes de los valores de referencia los cuales se obtienen estadsticamente): Los estudios han demostrado que una concentracin de colesterol de 240 mg/dL (5.71 mmol/L) constituye el punto de corte a partir del cual existe riesgo de enfermedad coronaria y por tanto, un valor superior obligara a una decisin de tipo mdico. TRIGLICERIDOS Normal Lmite alto Altos Muy altos NIVELES ATP II <200mg/dL 200 399 mg/dL 400 1000 mg(dL >1000 mg/dL NIVELES ATP III <150 mg/dL 150-199 mg/dL 200 499 mg/dL >= 500 mg/dL

Es importante estandarizar las condiciones bajo las cuales las muestras son preparadas para el anlisis. Lo ideal es que el paciente permanezca en ayunas durante 10 y 12 horas antes de la puncin venosa. En el plasma posprandial hay habitualmente presentes quilomicrones, y segn el tipo y cantidad de alimento ingerido puede aumentar marcadamente la concentracin de triglicridos en plasma: las concentraciones de LDL-colesterol y HDL-colesterol disminuyen de forma transitoria, 1807. MANUAL LABORATORIO BIOQUMICA CLNICA. SEMESTRE 2014-1
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mientras que los quilomicrones son casi completamente eliminados entre unas seis y nueve horas, y su presencia despus de un ayuno de 12 horas se considera anormal. A diferencia de los triglicridos el ayuno tiene poco efecto sobre los niveles de colesterol total en plasma

RESULTADOS.

CUESTIONARIO 12.
1. Haz una tabla con los criterios diagnsticos para sndrome metablico. 2. Cmo se calcula el colesterol LDL en base a las cifras de colesterol total, colesterol HDL y triglicridos? Para que valores de triglicridos no son vlidos? 3. Por su origen los lpidos se clasifican en dos tipos: 4. Debido a su carcter insoluble de los lpidos estos se unen a protenas formando las lipoprotenas, Di los nombres de las distintas lipoprotenas en orden ascendente de su tamao. 5. A qu se le llama transporte reverso del colesterol? 6. Define ateroesclerosis. 7. Qu factores contribuyen a la ateroesclerosis? 8. Qu pruebas de laboratorio se utilizan para detectar problemas en el metabolismo de los lpidos?

BIBLIOGRAFIA.
1. Gaw A, Murphy M. Clinical Biochemistry. 3er. Ed. Churchill Livingstone. China. 2004 2. Henry J.B. El laboratorio en el Diagnstico Clnico. 20. Edicin. Espaa. Ed. Marbn. 2005. 3. Diario Oficial de la Federacin. Norma Oficial Mexicana NOM-015-SSA2-2010, Para la prevencin, tratamiento y control de la diabetes mellitus. 4. http://es.scribd.com/doc/19279902/ATPIII 5. Ganong W. Fisiologa mdica. 18. Edicin. El Manual Moderno. Metabolismo de las grasas. Pgs. 327.339. Mxico 2002. 1807. MANUAL LABORATORIO BIOQUMICA CLNICA. SEMESTRE 2014-1
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FECHA:

Perfil heptico. Determinacin de alt, ggt, ALP, albmina.


INTRODUCCIN.
El hgado es el rgano interno ms grande y es el principal centro de sntesis de protenas plasmticas. Ipidos endgenos, lipoprotenas, colesterol, factores de coagulacin, y glucgeno. En l se metabolizan las drogas liposolubles y otros compuestos txicos, est implicado en el almacenamiento de energa en forma de glucgeno, almacenamiento de hierro y vitaminas A, B y D. El aumento de la actividad de algunas enzimas en el suero es a menudo la primera pista de la existencia de dao heptico. El diagnstico de las enfermedades hepticas es complejo ya que aunque es posible reconocer el dao heptico es necesario conocer la historia clnica y una serie de pruebas de laboratorio adicionales para determinar la etiologa. Las principales pruebas de funcionamiento heptico estn relacionadas con la funcin excretora (bilirrubina y cidos biliares), funcin sinttica (protenas como la albmina, factores de coagulacin), enzimas liberadas en la citlisis de los hepatocitos (ALT, AST), la colestasis (bilirrubinas, fosfatasa alcalina y gamma glutamil transpeptidasa). La GPT o ALT est presente en concentraciones mucho ms elevadas en el hgado que en los dems tejidos. Mientras que la GOT o AST se encuentra aunque tambin se encuentra en hgado tiene concentraciones ms elevadas en msculo cardaco. Varias enzimas como la fosfatasa alcalina, la gamma glutamil transpeptidasa y las 1807. MANUAL LABORATORIO BIOQUMICA CLNICA. SEMESTRE 2014-1
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transaminasas ya mencionadas no son particulares del tejido heptico por lo que va a depender la elevacin de cada una y alteracin relativa entre estas enzimas para poder identificar el padecimiento. Pruebas principales para determinar el funcionamiento heptico: Alanin aminotransferasa (ALT o GPT), Aspartato aminotransferasa (AST o GOT), Protenas totales, albmina, Relacin A/G, Gamma glutamil transpeptidasa (GGT), Fosfatasa alcalina (FA o ALP), Tiempo de Protombina (TP), Bilirrubinas totales, bilirrubina directa (Conjugada).

FUNDAMENTO (ALT, GGT, FA y Albmina). PROCEDIMIENTOS

RESULTADOS.

CUESTIONARIO 13.
1. 2. 3. 4. Enlista algunas de las funciones que el hgado realiza. Menciona las pruebas que se realizan para valorar la funcin heptica. Cmo se forma la bilirrubina conjugada? Que otro nombre recibe la AST?

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5. 6.

Investiga el fundamento de la determinacin de ALT Cul es la relacin AST/ALT para pensar que la hepatitis se debe a alcoholismo?

BIBLIOGRAFIA.
1. Gaw A, Murphy M. Clinical Biochemistry. 3er. Ed. Churchill Livingstone. China. 2004 2. Henry J.B. El laboratorio en el Diagnstico Clnico. 20. Edicin. Espaa. Ed. Marbn. 2005.
3. Bishop ML, Fody EP, Schoeff LE, Clinical Chemistry Principles, Procedures, Correlations, 5tha Ed. Lippincott Williams. USA. 2005. 4. Beckett G, Walker S., Clinical Biochemistry. Blackwell Publishing. 7th Ed. India. 2005

FECHA:

Perfil CARDIACO. Determinacin de aSt, CK, LDH.


INTRODUCCIN.
El infarto agudo al miocardio es una de las causas ms comunes de mortalidad en todo el mundo. Su diagnstico temprano es importante para minimizar los daos celulares miocrdicos e instaurar el tratamiento adecuado. Cuando se produce el infarto se necrosan las clulas del tejido miocrdico lo que da lugar a la liberacin de las enzimas y otras macromolculas del interior de las clulas. El diagnstico y cuantificacin del infarto se hace mediante marcadores bioqumicos los cuales deben de tener entre otras propiedades ser cardioespecfico, tener sensibilidad elevada, tener un perodo diagnstico temprano (2 a 6 hrs), medicin rpida, fcil de hacer, cuantitativa y realizable en un servicio de emergencia. Dependiendo de los diferentes tiempos en que se eleva la cantidad de las diferentes enzimas y macromolculas algunas sern ms importantes para el diagnstico temprano as como el tiempo que duran en circulacin al hacer un diagnstico tardo. Las enzimas ms utilizadas hace varios aos para confirmar el diagnstico clnico del infarto agudo al miocardio o como marcadores suplementarios en el seguimiento o evolucin del paciente son: la creatinin cinasa (CK) y su fraccin MB, aspartato transaminasa (AST) y deshidrogenasa lctica (ALT). 1807. MANUAL LABORATORIO BIOQUMICA CLNICA. SEMESTRE 2014-1
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Actualmente estn propuestos algunos otros marcadores que tienen una alta sensibilidad y especificidad adems de permitir un diagnstico temprano, los principales son la mioglobina y las troponinas.

FUNDAMENTO.
Agregar fundamentos, procedimientos, clculos, etc. de CK, LDH y AST.

RESULTADOS.

CUESTIONARIO 14.
1. Cul es el primer biomarcador que se eleva despus del dao celular miocrdico? 2. Por qu son importantes las Troponinas como biomarcadores miocrdicos? 3. De acuerdo a la grfica Cul marcador es el ltimo en disminuir y se mantiene elevado hasta por casi dos semanas? 4. Explica en breves palabras que es el Infarto Agudo al Miocardio. 5. En la medicin de la enzima deshidrogenasa lctica (LDH) se obtiene un valor de 240 U/L a 25C. Hacer la conversin para saber cual sera la actividad de la enzima a 37C. (Revisar tcnica). 1807. MANUAL LABORATORIO BIOQUMICA CLNICA. SEMESTRE 2014-1
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6. En qu otras enfermedades adems del infarto al miocardio se encuentra elevada la LDH? 7. Que otro nombre y siglas recibe la enzima aspartato amino transferasa (AST)?

BIBLIOGRAFA.
1. Gaw Alan. Clinical biochemistry an illustrated colour text. Churchill livingstone. 2004. 2. Henry J.B. El laboratorio en el Diagnstico Clnico. 20. Edicin. Espaa. Ed. Marbn. 2005. 3. Bishop ML, Fody EP, Schoeff LE, Clinical Chemistry Principles, Procedures, Correlations, 5tha Ed. Lippincott Williams. USA. 2005. 4. Beckett G, Walker S., Clinical Biochemistry. Blackwell Publishing. 7 th Ed. India. 2005

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APENDICE A. LISTA DE NORMAS OFICIALES MEXICANAS DE INTERES PARA EL FUNCIONAMIENTO DE LOS LABORATORIOS CLNICOS.
1. NOM 007-SSA3-2011. PARA LA ORGANIZACIN Y FUNCIONAMIENTO DE LOS LABORATORIOS CLNICOS 2. NOM-056-SSA1-1993 REQUISITOS SANITARIOS DEL EQUIPO DE PROTECCIN PERSONAL 3. NOM-064-SSA1-1993 ESPECIFICACIONES SANITARIAS DE LOS EQUIPOS DE REACTIVOS UTILIZADOS PARA DIAGNOSTICO 4. NOM-077-SSA1-1994 ESPECIFICACIONES SANITARIAS DE LOS MATERIALES DE CONTROL 5. NOM-078-SSA1-1994 ESPECIFICACIONES SANITARIAS DE LOS ESTANDARES DE CALIBRACION 6. NOM-137-SSA1-1995 ESPECIFICACIONES DE ETIQUETADO DE LOS DISPOSITIVOS MEDICOS 7. NOM-168-SSA1-1998 DEL EXPEDIENTE CLINICO 8. NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002 PROTECCION PELIGROSOS BILOGICO INFECCIOSOS AMBIENTAL-RESIDUOS

9. NOM-005-STPS-1998 CONDICIONES DE SEGURIDAD E HIGIENE EN LOS CENTROS DE TRABAJO PARA EL MANEJO, TRANSPORTE Y ALMACENAMIENTO DE SUSTANCIA QUIMICAS PELIGROSAS

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10. NOM-018-STPS-2000 SISTEMA DE IDENTIFICACIN Y COMUNICACIN DE PELIGROS Y RIESGOS PARA SUSTANCIAS QUIMICAS PELIGROSAS EN LOS CENTROS DE TRABAJO 11. NOM-026-STPS-1998 COLORES Y SEALES DE SEGURIDAD E HIGIENE E IDENTIFICACION DE RIESGOS POR FLUIDOS CONDUCIDOS POR TUBERIAS 12. NOM-012-STPS-1999 CONDICONES DE SEGURIDAD E HIGIENE EN LOS CENTROS DE TRABAJO DONDE SE PRODUZCAN, USEN ALMACENEN O TRANSPORTEN FUENTES DE RADIACIONES IONIZANTES 13. NOM-178-SSA1-1998, QUE ESTABLECE LOS REQUISITOS MNIMOS DE INFRAESTRUCTURA Y EQUIPAMIENTO DE ESTABLECIMIENTOS PARA LA ATENCIN MDICA DE PACIENTES AMBULATORIOS

BIBLIOGRAFIA.
5. http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nomssa.html 6. www.calidad.uady.mx/resources/nosotros/NormaISO90012008.pdf 7. http://www.dof.gob.mx/nota_detalle.php?codigo=5152351&fecha=19/07/2010 8. www.qcnet.com/Portals/75/PDFs/Requerimientos%20Tecnicos.pdf 9. http://www.cap.org/apps/cap.portal?_nfpb=true&cntvwrPtlt_actionOverride=%2Fportlets
%2FcontentViewer%2Fshow&_windowLabel=cntvwrPtlt&cntvwrPtlt%7BactionForm.contentReference %7D=laboratory_accreditation%2Fiso %2Fiso_faq.html&_state=maximized&_pageLabel=cntvwr#accreditation 10. Henry J.B. El laboratorio en el Diagnstico Clnico. 20. Edicin. Espaa. Ed. Marbn. 2005. 11. Castillo de Snchez ML. Fonseca Yerena ME. Mejora continua de la calidad. Gua para los laboratorios de Amrica Latina. Mxico. Ed. Mdica Panamericana - COLABIOCLI, 1995. 12. Morn V L. Obtencin de muestras sanguneas de calidad analtica mejora continua de la etapa preanaltica. Mxico. Ed. Panamericana. 2001 13. Henry J.B. El laboratorio en el Diagnstico Clnico. 20. Edicin. Espaa. Ed. Marbn. 2005.

14. Henry J.B. El laboratorio en el Diagnstico Clnico. 20. Edicin. Espaa. Ed. Marbn. 2005. 1807. MANUAL LABORATORIO BIOQUMICA CLNICA. SEMESTRE 2014-1
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15. Bishop ML, Fody EP, Schoeff LE, Clinical Chemistry Principles, Procedures, Correlations, 5tha Ed. Lippincott Williams. USA. 2005. 16. Beckett G, Walker S., Clinical Biochemistry. Blackwell Publishing. 7 th Ed. India. 2005

17. Gaw A, Murphy M. Clinical Biochemistry. 3er. Ed. Churchill Livingstone. China. 2004 18. Henry J.B. El laboratorio en el Diagnstico Clnico. 20. Edicin. Espaa. Ed. Marbn. 2005.
19. Bishop ML, Fody EP, Schoeff LE, Clinical Chemistry Principles, Procedures, Correlations, 5tha Ed. Lippincott Williams. USA. 2005. 20. Beckett G, Walker S., Clinical Biochemistry. Blackwell Publishing. 7th Ed. India. 2005 21.

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