Manual de prcticas Laboratorio de Bioqumica Presentacin del manual

El manual de prcticas Laboratorio de Bioqumica ha sido diseado para que el estudiante desarrolle habilidades en el Laboratorio aplicando el conocimiento adquirido en el aula y lo correlacione con las actividades extra-clase. Dichas prcticas sern

realizadas con materiales y equipos bsicos usados en los laboratorios clnicos destacando la importancia de conocer el fundamento y la utilidad del anlisis bioqumico en la clnica. Las prcticas se desarrollarn de acuerdo al programa terico, teniendo como eje conceptual la relacin del hombre y su ambiente por lo que en cada prctica se obtendrn muestras biolgicas tomadas bajo condiciones controladas. En el laboratorio raramente se manejan reactivos, muestras o productos en grandes cantidades, de lo contrario, se trabaja con miligramos, microgramos, microlitros, etc. Los resultados sern analizados y empleados para interpretar el estado metablico de los estudiantes reflejando as el aprendizaje obtenido en cada una de las prcticas. El estudiante encontrar la programacin y las condiciones en las que debe ser tomada su muestra, experimentarn el convertirse en paciente, lo que le permitir valorar la relacin mdico paciente, as como identificar los problemas ms frecuentes al practicar la flebotoma. El estudiante al concluir satisfactoriamente la asignatura de bioqumica, tendr las bases para continuar con su programa formativo y habr adquirido nuevas actitudes y valores requeridos en un profesional del rea de la salud.

Manual de prcticas Laboratorio de Bioqumica Recomendaciones para tener xito en las prcticas.
1.- El alumno leer la prctica completa y la discutir con el profesor antes de la realizacin de la misma.

2.- El manual y materiales necesarios para el desarrollo de la prctica debern ser colocados en la parte inferior de las mesas de trabajo.

3.- El material con el que trabajar deber ser solicitado al ingresar al laboratorio el cual deber estar perfectamente limpio antes y al trmino de la prctica.

4.- Antes de preparar las mezclas de reaccin etiquetar apropiadamente cada uno de los tubos con un marcador indeleble.

5.- Por ningn motivo alterar el orden de adicin de los reactivos en la prctica.

6.- Utilizar agua destilada en todos los experimentos en los que se solicite agregar agua.

7.- Mantener los frascos de los reactivos tapados para evitar evaporacin o contaminacin de los mismos.

8.- Utilizar slo la cantidad requerida de reactivos para evitar errores en los resultados y el desperdicio de los mismos.

9.- Evitar regresar excedentes de reactivos al frasco de dnde se extrajo el mismo.

Manual de prcticas Laboratorio de Bioqumica Prctica No. 1 Introduccin al Laboratorio

(Reglamento, medidas de seguridad, encuadre al sistema de prcticas)

Reglamento de laboratorio.
1.- El estudiante ingresar al laboratorio con su bata puesta, bien abotonada, la cual debe ser blanca, de manga larga y deber quitrsela antes de salir del laboratorio. 2.- Colocar mochilas y objetos personales en los anaqueles que se encuentran al entrar al laboratorio y solo podr tener en las mesas de trabajo el manual de laboratorio y los materiales necesarios para el desarrollo de su prctica. 3.- El estudiante registrar su asistencia en la bitcora de Laboratorio o en su defecto digitalmente en el sistema, no olvidando anotar la mesa en la que trabajar. 4.- El responsable del equipo recibir del encargado del laboratorio todos los materiales para el desarrollo de la prctica y cada equipo ser responsable de dichos materiales, por lo que antes de iniciar la prctica debern revisar cuidadosamente el material y anotar en el vale cualquier anomala que se observe, ya que de no hacerlo se harn responsables de los daos que presente el material, si por descuido o accidente durante el desarrollo de la prctica algn material se rompe o se pierde, el equipo deber reponerlo en un plazo no mayor a quince das. 5.- Lavarse las manos con agua y jabn tantas veces sean necesarias no olvidando antes de salir del laboratorio hacerlo por ltima vez, como se propone en el Anexo No. 1. 6.- Secar correctamente las manos, ponerse los guantes y equipo de proteccin necesario. 7.- Desinfectar las reas de trabajo antes y despus de cada prctica, as tambin durante el proceso si se ha derramado algn reactivo o muestra biolgica. Al terminar la prctica, el equipo deber dejar la mesa de trabajo limpia y en orden. 8.- Se recomienda tomar la postura ms cmoda para trabajar adecuadamente con el fin de tener control y precisin de los movimientos durante el uso de materiales y equipos de laboratorio. 9.- Utilizar el equipo de proteccin, pinzas o gradillas si se utiliza o transporta objetos calientes as como apagar los mecheros y planchas de calentamiento cuando estas no estn en uso. 10.- No se debe olfatear, probar o tocar los reactivos, ni mirar dentro de un tubo de ensayo que se est calentando, ni apuntar hacia alguna persona porque el contenido podra proyectarse en cualquier momento. 11.- Utilizar pipetores o perilla de goma para la medicin de los lquidos corrosivos, cidos, bases, sustancias voltiles, venenos, entre otros y nunca aspirar con la boca.

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12.- Para diluir un cido siempre se har vertiendo el cido en agua y nunca agregar agua al cido, emplear bao de agua fra o de hielo seco. 13.- Tapar los frascos de los reactivos inmediatamente despus de utilizarlos para evitar evaporaciones y contaminacin de los mismos. 14.- Se prohbe ingerir alimentos, fumar, aplicarse cosmticos dentro del laboratorio, jugar, hacer bromas, corillos, abstenerse de recibir visitas, as como sentarse en las mesas de trabajo o realizar cualquier actividad que est fuera de la practica a efectuar. 15.- El estudiante identificar los sitios donde se encuentra localizada la regadera, extinguidores, salidas de emergencia, botiqun de primeros auxilios, botes de basura comn, recipientes para residuos peligrosos biolgico infecciosos los cuales se identificarn, clasificarn y dispondrn de acuerdo a la NOM-087-ECOL-SSA1-2000. Anexo No.2. 16.- Los estudiantes no podrn abandonar el laboratorio hasta que la prctica termine, o cuando sean autorizados por el maestro. S un estudiante abandona el laboratorio sin autorizacin, se har acreedor a la falta de ese da. 17.- Al finalizar todas las prcticas los estudiantes entregarn un reporte por escrito de la prctica, que formar parte de su evaluacin, 18.- Reportar inmediatamente cualquier situacin de riesgo o que pueda ocasionar un accidente para que se tomen las medidas apropiadas.

Reglas de seguridad en el laboratorio de bioqumica.

El manejo inapropiado de sustancias, materiales y equipos que se encuentran en el laboratorio, representa peligro tanto a la salud de las personas, como a la integridad de las instalaciones y equipo de trabajo. Es por ello que se deben obedecer las Reglas de Seguridad que se enlistan a continuacin, clasificadas en los siguientes grupos.

1.- Sustancias Qumicas.

Cada sustancia debe tener etiqueta de identificacin, si no es as no los utilice. Antes de utilizar una sustancia, verifique que se trata del reactivo correcto y que tiene la concentracin requerida. Identifique la naturaleza de la sustancia y el tipo de peligro que implica su manejo de acuerdo a la clasificacin C.R.E.T.I.B. Corrosivo, Reactivo, Explosivo, Txico, Inflamable o Biolgico infeccioso. Evite el contacto o exposicin innecesaria con sustancias qumicas, utilice el equipo de proteccin adecuado y disponible; bata de manga largo, lentes, guantes, Cubrebocas, campana extractora, etc.

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No pipetee sustancias qumicas directamente, siempre utilizar pipetores o perilla de goma. Evite inhalar productos qumicos y sus vapores. Trabaje y mantenga bajo la campana extractora los reactivos corrosivos o voltiles. Los hidrocarburos ligeros y solventes deben manejarse lejos del fuego u otras fuentes de calor. Emplee bao mara para calentarlos. Para diluir los cidos, estos deben verterse lentamente en el agua, agitando cuidadosamente. No vierta agua directamente sobre el cido porque provocar salpicaduras. No deje sobre la mesa tapones de frascos de cidos u otras sustancias corrosivas porque se pueden contaminar o dejar residuos corrosivos que podran causar quemaduras.

2.- Material Biolgico.

Para el manejo de estos materiales protjase adecuadamente segn sea el caso. Maneje cuidadosamente los fluidos corporales (sangre, orina, saliva, etc.) considrelos como potencialmente infectantes. Todo material biolgico, equipos etc. Debern ser depositados en sus respectivos contenedores.

3.- Material de Vidrio.

Debe examinar todo el material de vidrio antes de utilizarlo, para identificar grietas o roturas, en caso de que el material este quebrado o defectuoso, reprtelo de inmediato al encargado del laboratorio para que se lo cambie. No use material de vidrio con orillas cortantes, con cuarteaduras o en mal estado. Debe transportar, mover o manipular slo la cantidad de material de vidrio que pueda manejar con seguridad. Use pinzas, franela o guantes de asbesto para transportar o mover recipientes de vidrio calientes. Nunca deje material roto para ser lavado, reprtelo y deschelo como material punzocortante. No deje vidrios rotos sobre la mesa o en cualquier otro lugar en donde puedan causar accidentes. 5

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Al calentar recipientes de vidrio, use llama suave al iniciar el calentamiento. Limpie inmediatamente los materiales que goteen o se derramen, mediante el uso de franelas u otros materiales para embeber el lquido y evitar que se disperse. En caso de lquidos txicos derramados, protjase adecuadamente y ventile el rea.

4.- Equipo Elctrico e Instalaciones de Gas.

No use equipo elctrico defectuoso. Verifique que los enchufes y conexiones estn en buenas condiciones, en caso de que existan cables desnudos o en mal estado, reprtelos inmediatamente. Maneje el equipo elctrico y sus conexiones con las manos secas y cercirese que el piso se encuentra seco, mantenga seco el espacio alrededor del equipo elctrico. Antes de encender el mechero, revise que tanto ste como la manguera se encuentran en buen estado, verifique que est adecuadamente conectado a la tubera de gas (tubo de color amarillo) Anexo No. 3. Retire todo material inflamable cercano al mechero. En caso de accidente, retrese inmediatamente y cierre la llave de paso que se encuentra arriba de la tarja de cada mesa.

5.- Orden y Limpieza.

Una vez verificado el buen estado del material de vidrio, lvelo para asegurar su limpieza. Mantenga siempre limpia y en orden su rea de trabajo. No intercambie el contenido de los frascos de reactivo. Use slo los tapones de los recipientes correspondientes. Cuando requiera volver a llenar sus frascos de reactivos, transfiera del frasco de almacenamiento la cantidad necesaria a travs de un vaso de precipitados, no devuelva el sobrante al envase original.

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Acciones que se deben tomar en caso de accidente.

1.- En caso de que exista contacto de cidos o bases con la piel, ojos o boca. Se recomienda enjuagar el rea con abundante agua con el propsito de disminuir su accin por dilucin, para ello en laboratorio cuenta con regaderas y tarjas especiales. 2.- En caso de ingestin de corrosivos NUNCA provocar vmito. Si existe ingestin de cidos hacer beber inmediatamente una solucin de bicarbonato de sodio (2 cucharadas soperas en un vaso de agua); en caso de ingestin de soluciones custicas (hidrxido de sodio o de potasio) ingerir una cucharada de vinagre o 25ml de jugo de limn en agua. 3.- Al ingerir otras sustancias qumicas hacer vomitar a la persona accidentada. Vigilar que exista una ventilacin adecuada y mantener las vas areas permeables mientras se le asiste por l personal mdico. 4.- Si existe derramamiento de un cido, neutralizar agregando bicarbonato de sodio y en caso de bases agregar cido actico (vinagre). NUNCA tratar de adicionar agua, emplear bata, guantes y gafas durante la limpieza. 5.- En caso de accidentes con objetos punzocortantes deber lavar el rea afectada con abundante agua y jabn, llenar el formato REPORTE DE PUNCIONES Y LESIONES ACCIDENTALES (Anexo No.4), tomar las medidas preventivas y de seguimiento del caso.

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Encuadre al sistema de prcticas.

1.- Los estudiantes tendrn con anticipacin el manual de prcticas, as como la programacin de cada una de ellas. 2.- Durante las sesiones de prctica cada equipo de trabajo deber contar con el siguiente material: Franela, marcador para cristal, guantes desechables de ltex, Cubrebocas, jeringas desechables de 5 ml, algodn, alcohol isoproplico al 70 %. 3.- Los estudiantes que lleguen despus del perodo de tolerancia (10 min.), tendrn falta y no podrn permanecer en el laboratorio, no hay retardos. 4.- Cuando sea necesario tomar muestra para la realizacin de la prctica, el equipo se pondr de acuerdo en quin ser el donador. 5.- Al finalizar todas las prcticas cada estudiante entregar un reporte, el cual contendr los siguientes datos: Manual de Prcticas. Nmero de equipo. Nombre del estudiante. Fecha de entrega. Fecha de realizacin de la prctica. Cuestionarios resueltos, incluyendo reacciones y clculos si fuera el caso. Registro de resultados (tablas, cuadros, grficos, etc.) Elaboracin de datos experimentales (clculos, conversiones, etc.) Discusin y conclusiones de la prctica. Bibliografa consultada.

6.- Los estudiantes que no entreguen el reporte de prcticas, en forma y momento que se les solicite, se harn acreedores a una calificacin de cero en esta parte de su evaluacin. 7.- Los estudiantes que hayan entregado en tiempo y forma su reporte de prcticas lo recibirn calificado a ms tardar dos das posteriores a la entrega. 8.- Al da siguiente de cada sesin de prctica, en el saln de clase se realizar la discusin de resultados, para lo cual los estudiantes debern contar con los datos experimentales. 10.- El reporte de prcticas equivale hasta el 10 % de la calificacin, evaluandose lo siguiente. Puntualidad en la entrega La veracidad de la informacin, orden limpieza y disciplina en el Laboratorio. Respuesta de cuestionarios. Elaboracin de clculos. Bibliografa consultada. Participacin en la sesin de discusin.

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Anexos. Anexo 1: Lavado de Manos

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Anexo 2: Separacin y Envasado R.P.B.I Norma Oficial Mexicana NOM-087-ECOL-SSA1-2002, Proteccin ambiental Salud ambiental - Residuos peligrosos biolgico-infecciosos - Clasificacin y especificaciones de manejo.
Para efectos de esta Norma Oficial Mexicana se consideran residuos peligrosos biolgico-infecciosos los siguientes: Los tejidos, rganos y partes que se extirpan o remueven durante las necropsias, la ciruga o algn otro tipo de intervencin quirrgica, que no se encuentren en formol. Las muestras biolgicas para anlisis qumico, microbiolgico, citolgico e histolgico, excluyendo orina y excremento. Los cadveres y partes de animales que fueron inoculados con agentes enteropatgenos en centros de investigacin y bioterios.

Envasado de los Residuos Peligrosos Biolgico Infecciosos

Bolsa Roja: (Residuos no Anatmicos) Los recipientes desechables que contengan sangre lquida. Los materiales de curacin, empapados, saturados, o goteando sangre o cualquiera de los siguientes fluidos corporales: lquido sinovial, lquido pericrdico, lquido pleural, lquido Cfalo-Raqudeo o lquido peritoneal. Los materiales desechables que contengan esputo, secreciones pulmonares y cualquier material usado para contener stos, de pacientes con sospecha o diagnstico de tuberculosis o de otra enfermedad infecciosa segn sea determinado por la SSA mediante memorndum interno o el Boletn Epidemiolgico. Los materiales desechables que estn empapados, saturados o goteando sangre, o secreciones de pacientes con sospecha o diagnstico de fiebres hemorrgicas, as como otras enfermedades infecciosas emergentes segn sea determinado por la SSA mediante memorndum interno o el Boletn Epidemiolgico. Materiales absorbentes utilizados en las jaulas de animales que hayan sido expuestos a agentes enteropatgenos.

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Contenedores rgidos: (objetos punzo cortantes)

Los que han estado en contacto con humanos o animales o sus muestras biolgicas durante el diagnstico y tratamiento, nicamente: tubos capilares, navajas, lancetas, agujas de jeringas desechables, agujas hipodrmicas, de sutura, de acupuntura y para tatuaje, bisturs y estiletes de catter, excepto todo material de vidrio roto utilizado en el laboratorio, el cual deber desinfectar o esterilizar antes de ser dispuesto como residuo municipal.

Contenedores rgidos: (Residuos no Anatmicos Lquidos)

El tejido hemtico con todos sus elementos.

Anexo 3: Cdigo de Colores

Norma oficial mexicana: NOM-028-STPS-1994. Seguridad cdigo de colores para la identificacin de fluidos conducidos en tuberas.

Fluido Agua Fra Agua Caliente Gas Vapor Combustible Lquido Aire Comprimido u Oxgeno Vaco

Color Azul Rojo Amarillo Blanco Morado Verde Naranja

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Anexo 4:

Reporte de Punciones y Lesiones Accidentales

1. Nombre: __________________________________ Fecha de herida: ___ /___ / ___ . Da Mes Ao 2. Ocupacin (marque solo una) ___ Encargado del laboratorio ___ Intendente ___ Estudiante ___ Estudiante Instructor ___ Profesor ___ Visitante 3. Dnde ocurri la herida? ___ Laboratorio ___ Almacn General ___ Almacn Temporal de R.P.B.I. ___ Oficinas ___ Sanitarios ___ Pasillos, Escaleras, etc. Otro, describa: ____________________________________________ 4. Se conoce la situacin o estado actual del lesionado? ___ S ___ No ___ Desconocido 5. Fue el lesionado el usuario original del objeto punzocortante? ___ S ___ No ___ Desconocido

___ No Aplica

___ No Aplica

6. El objeto punzocortante, estaba: ___ Contaminado (tuvo contacto con fluidos corporales del paciente o equipo contaminado) ___ No contaminado (antes de usar el objeto o instrumento) ___ Desconocido 7. Con qu propsito fue usado el objeto punzocortante? ___ Para obtener muestra sangunea (venosa, arterial, capilar) ___ Obtencin de sangre para gasometra ___ Para puncionar dedo ___ Para contener muestras (objetos de vidrio) ___ Otros, describa: _________________________________________ 8. Cundo ocurri la herida? ___ Antes de usarlo (el objeto se rompi, cayo, etc.) ___ Durante su uso (el objeto se resbal, el paciente se movi, etc.) ___ Durante un procedimiento de varios pasos (pasando instrumentos, etc.) ___ Desconectando un equipo o instrumento 12

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___ Preparando un objeto, para rehus (manejo, desinfectndolo, esterilizando) ___ Otro, despus de su uso, antes de desechar (limpindolo, se encontr en piso u otro lugar inadecuado) ___ Por un objeto dejado encima o cerca de un contenedor de desechos ___ Mientras se colocaba el objeto en un contenedor de desechos ___ El objeto perfor un lado del contenedor (caja de cartn, botella de plstico) ___ Despus del desecho, el objeto sobresala de la bolsa de basura o de un contenedor inadecuado ___ Otro, describa: _________________________________________ 9. Qu equipo, objeto o instrumento caus la herida? Refirase a la lista siguiente y escriba el nmero que corresponde: ____________ En caso de que el objeto est en listado como "otro" (7, 13 o 25) por favor descrbalo: ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ "Probables objetos causantes de la herida": 1.- Agujas 2.- Jeringa desechable 3.- Jeringa especial para gasometra 4.- Otro tipo de jeringa (o no se sabe qu tipo) 5.- Tubo para recoleccin de sangre al vaco 6.- Aguja (no est seguro que tipo) 7.- Otras (descrbalo en la pregunta 9) Instrumentos quirrgicos y otros objetos punzocortantes 8.- Lancetas 9.- Pipetas (plstico) 10.- Tijeras 11.- Grapa 12.- Probeta, tubo de ensayo (plstico) 13.- Objeto filoso (no est seguro de qu tipo) 14.- Otro (descrbalo en la pregunta 9) Objetos de vidrio 15.- Ampolleta 16.- Frasco 17.- Pipetas 18.- Tubo al vaco Vacutainer 19.- Tubo de ensayo 20.- Probeta 21.- Matraces 22.- Tubo capilar 23.- Porta objetos 24.- Cubre objetos 25.- Objeto de cristal (no reconocido) 26.- Otro objeto de vidrio (descrbalo en la pregunta 9)

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10. Fue una aguja o jeringa de seguridad lo que caus la herida? ___ S ___ No ___ Desconocido 11. Marque el sitio de la herida:

__ No Aplica

12. La herida fue: ___ Superficial (poco o nada de sangrado) ___ Moderada (perfor piel, sangrado medio) ___ Severa (cortada o puncin profunda, mucho sangrado) 13. Describa las circunstancias que provocaron o propiciaron la herida: ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ 14. Se report este incidente al INDRE o al CONASIDA? ___ S ___ No 15. Toma las medidas de seguridad en el laboratorio o en su departamento? ___ S ___ No Por qu? __________________ 16. En algn momento se le ha negado por parte de la Direccin equipo de seguridad? ___ S ___ No Quin?___________ Cundo?_________ 17. Se le ha capacitado en el uso de equipo de seguridad y de la importancia de ste? ___ S ___ No Cundo?_______________________

------------------------------------------------------------------------------Firma del Lesionado

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