CIENCIA Y SOCIEDAD

La poblacin cantbrica de oso pardo

La huella gentica obtenida a partir de muestras no invasivas, como heces y pelos, permite seguir el rastro de los individuos y los genes en la poblacin

a poblacin cantbrica de oso pardo (Ursus arctos) es la nica poblacin de osos autctonos de la pennsula Ibrica. Consta de un centenar de individuos distribuidos en dos subpoblaciones: la oriental (Cantabria, Asturias y Castilla-Len) y la occidental, ms numerosa y con mejores perspectivas de supervivencia (Galicia, Asturias y CastillaLen). Debido al reducido censo de su poblacin, el oso se ha considerado una especie en peligro de extincin en el Catlogo Nacional de Especies Amenazadas. Uno de los primeros pasos en la conservacin de una especie amenazada con-

siste en valorar su diversidad gentica actual y la distribucin de esa diversidad en la poblacin. Desde nales del ao 2004, hemos venido analizando la estructura gentica de la poblacin cantbrica, dentro de un convenio con el Principado de Asturias y con la colaboracin de la Junta de Castilla y Len y el Parque Nacional de los Picos de Europa. Inicialmente, se pusieron a punto las tcnicas de muestreo no invasivo (sin capturar ni molestar el animal) para obtener el ADN de los osos a partir de heces y pelo recogidos en el campo. Una vez extrado el ADN de la muestra, se

realiz el perl gentico de los individuos respecto a varios marcadores microsatlite y se estudi la estructura gentica de la poblacin. Los marcadores microsatlite son secuencias de ADN altamente polimrcas en las que un fragmento, de uno a seis nucletidos, se repite de manera consecutiva. La variacin en el nmero de repeticiones crea diferentes alelos. Estos se distinguen entre s por la longitud total del fragmento, con lo que es posible obtener una huella dactilar gentica de cada individuo. Esas tcnicas son similares a las empleadas en humanos para la identicacin forense y las pruebas de paternidad.

COMO SE OBTIENE EL PERFIL GENICO DE UN OSO? 1 TOMA DE MUESTRA. La muestra no invasiva (heces, en este caso) se recoge en el campo y se conserva en alcohol para su traslado.

OSO PARDO

2 ALMACENAMIENTO.
Una vez en el laboratorio, se pasa la muestra a otro tubo con gel de slice, donde permanecer almacenada hasta su anlisis.

3 EXTRACCION
DEL ADN. Se realiza mediante un kit comercial diseado para trabajar con muestras de heces.

5 SEPARACION.
Mediante electroforesis capilar se separan los marcadores por tamaos.

4 AMPLIFICACION.
Mediante la tcnica de la reaccin en cadena de la polimerasa se amplican 18 marcadores microsatlite y un marcador de sexo.

G10X

Mu61

G10O

6 IDENTIFICACION DE LOS MARCADORES.

Se realizan mediante uorescencia.
G10B Mu09

7 IDENTIFICACION DE INDIVIDUOS. El perl gentico permite identicar a los individuos de la poblacin.

Perl gentico (genotipo parcial) de una muestra obtenido a partir de cinco de los 18 marcadores analizados.

INVESTIGACION Y CIENCIA, mes, ao

Dado que permiten reconocer individuos concretos, se pueden aplicar en los estudios sobre la demografa y otros aspectos de la biologa de la especie. Adems, en gentica forense, sirven para descubrir los animales causantes de daos, estudiar casos de infanticidio, etctera.

Diversidad y estructura gentica

La diversidad gentica de la poblacin cantbrica es inferior a la descrita en otras poblaciones de oso consideradas en buen estado de conservacin. Este hecho tendra su explicacin ms plausible en la fuerte disminucin del tamao poblacional iniciada hace unos 300 aos, cuando la poblacin peninsular qued restringida al mbito cantbrico, disminucin que se agudiz durante el siglo pasado. Cuando se analiza la estructura gentica de la poblacin, se pone de maniesto la elevada diferenciacin gentica entre las subpoblaciones oriental y occidental, separadas por poco ms de 30 kilmetros. La distancia gentica entre ambas es comparable a la observada en la poblacin no fragmentada de osos de Norteamrica, entre reas separadas por miles de kilmetros. Este resultado indica que las discontinuidades en el hbitat, como las deforestaciones, las carreteras o las minas, ejercen un efecto ms importante en la diferenciacin gentica que la distancia geogrca. La diferenciacin gentica en la regin cantbrica no slo se debe al aislamiento de las subpoblaciones, sino tambin al tamao extraordinariamente pequeo de la subpoblacin oriental. Esta presenta uno de los valores de diversidad de la especie ms bajos hallados en la bibliografa. La fragmentacin, unida al reducido censo de la poblacin, supone una amenaza para la supervivencia. Para evitar la extincin del oso en la regin sera necesario, por un lado, facilitar la conexin entre subpoblaciones y, por otro, impedir la muerte de ejemplares y la destruccin de su hbitat.

2. LA MIGRACION DEL OSO PARDO favorece el ujo gentico entre las dos subpoblaciones cantbricas de la especie.

Conectividad entre subpoblaciones

Aunque los datos apuntan a una ausencia de intercambio gentico entre subpoblaciones desde que quedaron aisladas, hace unos 100 aos, en el presente trabajo se ha detectado la migracin de individuos entre ambas regiones, todos
INVESTIGACION Y CIENCIA, mes, ao

ellos machos. En concreto, a partir de muestras recogidas entre los aos 2004 y 2006, se constat en la zona oriental la presencia de tres individuos con un genotipo correspondiente a la subpoblacin occidental. Adems, un macho de genotipo oriental que se haba identicado en abril de 2006 en su propia rea de distribucin, se identic de nuevo en noviembre de 2006 en la zona de Ancares, dentro de la subpoblacin occidental. Entre la primera y la ltima identicacin, el mismo individuo fue detectado otras dos veces, de modo que pudimos reconstruir el camino recorrido en su migracin hacia el oeste.

Tal hallazgo nos ayuda a descubrir posibles corredores naturales sobre los que intensicar los esfuerzos destinados a favorecer la comunicacin entre subpoblaciones. Sin embargo, quedaba an por determinar si las migraciones observadas eran efectivas en trminos de ujo gentico, es decir, si los individuos migrantes llegaban a reproducirse. Los clculos apuntan a que la migracin efectiva, aunque escasa (1 o 2 migrantes por generacin), sera suciente para evitar los enormes efectos de la deriva gentica en la subpoblacin oriental, a pesar de su reducido tamao. 3

Individuo genotipo intermedio Macho genotipo intermedio

Hembra genotipo occidental Macho genotipo occidental

Hembra genotipo oriental Macho genotipo oriental

Subpoblacin occidental Lugo

Asturias Subpoblacin oriental 10/08 4/09 Cantabria

2. Distribucin actual del oso pardo en la cordillera Cantbrica y localizacin geogrca de algunas de las muestras analizadas. Gracias a ellas, se identicaron los individuos migrantes, as como los que presentaron un genotipo intermedio entre el oriental y el occidental.

Len 11/06 7/06 5/06

4/06 Palencia

La existencia de intercambio gentico entre ambas subpoblaciones se conrm hace poco con el hallazgo de dos muestras en Caso (en la zona oriental) a nales del 2008: correspondan a dos individuos, posiblemente hermanos (uno macho y otro de sexo no determinado) que presentaban un perl gentico intermedio entre el oriental y el occidental. El macho se detect adems en Len

en 2009, dentro tambin de la zona oriental. Sus padres ms probables son un macho migrante, procedente de la poblacin occidental y localizado en Fuentes Carrionas, y una hembra oriental localizada en Cantabria. Mediante el seguimiento de la poblacin, esperamos conrmar que el ujo gentico observado entre ambas subpoblaciones no corresponde a un hecho ais-

lado, sino que continuar. En prximos trabajos, mediante el uso de estas tcnicas genticas, nos proponemos ofrecer estimaciones ms precisas del tamao de la poblacin y su evolucin en el futuro. Esperamos contribuir as al conocimiento cientco indispensable para la recuperacin y conservacin de esta especie emblemtica de los montes cantbricos.
Trinidad Prez Universidad de Oviedo Javier Naves Estacin Biolgica de Doana. CSIC Ana Domnguez Area de Gentica de la Universidad de Oviedo

INVESTIGACION Y CIENCIA, mes, ao