IDENTIFICACIN DE RHIZOCTONIA

El gnero Rhizoctonia se caracteriza por la produccin de esclerocios en una textura uniforme con redes hifales que unen el micelio con plantas. Esto ha provocado la clasificacin de muchos hongos en el gnero Rhizoctonia. Rhizoctonia solana se caracteriza por: Pigmentos marrones oscuros de las hifas Ramificacin cerca del septo central en la hifa vegetativa joven . Estrangulamiento de la hifa y formacin de septos a una corta distancia del punto donde se originan las ramas hifales Septos doliporos Clulas multinucleadas en la hifa vegetativa joven. Nunca aparecen: Conexiones clamp Conidios, esclerocios diferenciados dentro de la corteza y de la mdula y pigmentos distintos al marrn. Los diferentes Rhizoctonia se diferencian por el color del micelio, el n de ncleos por clula, y la morfologa de los teleomorfos. Ascomicetes: septos transparentes, con poros grandes centrales y 2 o ms cuerpos de Woronin. Basidiomicetes: septos con 3 capas Ustomicetes: septos con doliporos y parentosoma no perforado p vesiculado. Los anamorfos de Rhizoctonia son heterogneos. R. solani comprende varias especies representativas de varios estados teleomrficos.

Medios de aislado, identificacin y preservacin de Rhizoctonia spp

Los propgalos de Rhizoctonia sobreviven en el suelo en hifas melanizadas y esclerocios con restos vegetales, en los primeros 25-20 cm del suelo. Pueden ser patgenos o saprfitos, colonizando plantas y materia orgnica fresca. Los propgalos pueden ser aislados directamente de los restos vegetales hacindolos flotar despus de sumergir el suelo en agua. Los no patognicos se aslan de plantas sanas o de restos en el suelo. Los micorricnicos se aslan de las races de las orqudeas o de otras plantas colonizadas por Rhizoctonia no patognicos.

Aislado mediante tcnicas de cebo Con plantas de cebo vivas Las semillas son un hospedante para testar cualitativa y cuantitativamente el Rhizoctonia spp del suelo. El potencial inoculante se puede evaluar cuantificando la incidencia de Dumping-off en judas, algodn, se utiliza el ndice DSI (ndice de severidad de la enfermedad) DSI= 0 . no hay sntomas DSI= 5 . todos los tallos se anillan y la planta muere. Para el aislamiento, la muestra incluye porciones necrticas y vivas cuya superficie se esteriliza con hipoclorito de sodio al 1% durante 1 m. Se enjuagan con agua destilada y se transfieren con una pipeta a agar con 250 g/ml de cloramphenicol Se incuba de 24 a 48 horas a 24-27 C Las hifas de Rhizoctonia se transfieren a PDA. Mtodo del plato Se cogen discos de papel de filtro de 6,35 mm de , se sumergen en la solucin de Richards, en 1 l de agua: KnO3.10 gr Kh2PO4..5 gr Mg SO4 . 7 H2O..0,25 gr Fe CL3..0,02 gr Sucrose...50 gr Rosa bengal.100 mgr Cloramphenicol250 mg Cu SO4..5 mg Benomylo...5 mg Los discos se secan y almacenan en un desecador. Los platos de aluminio ( 7,6 X 10,2 cm) se agujerean con 3 filas de agujeros de 4mm de , 6 agujeros por fila. Los discos se colocan sobre los agujeros y se tapan con una tapa de vinilo. Los platos se atoclavan y se insertan en el aislado de suelo 5-7 das. Se elimina el exceso de suelo y los discos se colocan con agar + cloramphenicol. El porcentaje de colonizacin se determina a las 24-48 h. Muestras biolgicas del suelo en tubos Se utilizan tubos de plstico para centrifugadora a los cuales se les hace agujeros de 5mm en espiral a travs de sus paredes. El espacio entre4 agujeros es variado. Los agujeros en espiral se tapan con cinta aislante. Los tubos se rellenan con agar y nutrientes (PDA) , se taponan con algodn y se autoclavan. Se agujerea la cinta aislante con una aguja esterilizada. Los tubos se incuban en el suelo durante 4-6 das. Posteriormente se extraen del suelo y de cada agujero se transfiere a un medio de agar apropiado (PDA). Utilizando este mtodo obtenemos una positiva correlacin entre el porcentaje de agujeros que han sido colonizados por R.solani y la incidencia de la enfermedad en las plantas.

Colonizacin saproftica de segmentos de plantas o semillas

Se utiliza para evaluar la habilidad saproftica. Se coge 1 gr de semillas de remolacha autoclavazas Se mezclan con 100 gr de muestra de suelo (a un 50% de capacidad de campo) Se coloca en placas petri de 9 cm Se incuban 48 h a 24-26 C Se recolectan las semillas con una criba de 1,4 cm Se lavan en agua corriente Se colocan en toallitas de papel y se colocan en agar lquido (2%), acidificado con cloramfenicol (250 g/ml) en placas petri Se incuban 24 h, a veces ms tiempo Las hifas se transfieren a PDA

Aislamiento para R. zeae Se cogen segmentos de tallos de algodn de 100 mm y se autoclavan 10 m. Se sumergen 2 h en una suspensin de: Benomilo 100 g+ 500g a.i/ml de metalaxil . O solo benomilo a 1,00 g a.i/ml Se secan Se cogen 20 segmentos de algodn y se les aade 150 gr de la muestra de suelo a capacidad de campo, en una cubeta de 600ml que se tapa con papel de aluminio Se incuban 72 h a 22-27C Se extraen los segmentos y se lavan con agua de grifo Se colocan en papel esterilizado y se ponen en un medio selectivo en placas petri Despus de 24-48 h se examinan los discos para ver el micelio. Las hifas se transfieren a PDA

Mtodo de partculas de suelo se cogen 100 gr de muestra de suelo y se mezcla con 2,5 l de agua se deja reposar la suspensin 30 seg y se decanta en una malla de 0,25mm se repite este paso varias veces las partculas retenidas en la malla se lavan con un fuerte chorro de agua se colocan entre dos capas de papel estril, se dejan secar se colocan en agar lquido (2%) acidificado o agar lquido con 25 g/ml de cloramphenicol, en placas petri 7. se incuban 48 h a 24-26 C 8. se examinan las hifas de Rhizoctonia se pueden pasar a PDA 1. 2. 3. 4. 5. 6.

Mtodo de criba hmeda 1. las muestras de suelo se mezclan perfectamente y se recogen en submuestras para la identificacin 2. se recogen 3 muestras de 50 gr que han sido obtenidas tras cribarlas a 0,355 mm (n 45) 3. los residuos tamizados se lavan dentro de una cubeta con agua y los residuos se retiran 4. las partculas se dispersan uniformemente en papel de filtro que se pone en un sistema de filtrado Buchner 5. se utilizan de 6 a 8 papeles por muestra 6. el agar lquido (1%) se calienta a 52 C 7. se acidifica con cido lctico para prevenir el cre4cimiento bacteriano 8. se vierte en placas petri en una capa de 2,5 mm de profundidad 9. inmediatamente despus de echar el agar cada papel de filtro es invertido en el agar y se agita para mezclar las partculas 10. las placas petri se almacenan a temperatura ambiente 24 h y las colonias que crezcan se transfieren para su identificacin.

Mtodo del montn 1. Se mezclan muestras de suelo con agua destilada, se compactan con una esptula y se distribuyen en 10 montones en un medio selectivo en placas petri (el medio se describe ms adelante). 2. para cada muestra utilizaremos 5 discos 3. analizaremos los permetros del montn de suelo con el microscopio con el objetivo 10X despus de 24 a 48 h de incubacin a 28C. 4. determinaremos el n de montones en los que emerge Rhizoctonia y determinaremos el n de propgulos por gr de suelo Mtodo por flotacin de muestras tamizadas 1. se cogen muestras de suelo de 30 a 80 gr y se agitan en una batidora con 100 ml de una disolucin acuosa con 0,2% de H2O2 durante 30 seg a 3000 rpm 2. filtramos la suspensin en una malla de 50 mesh 3. lavamos las partculas con agua corriente 4. repetimos el proceso si es necesario con las partculas que permanezcan en el filtro 5. estas partculas se sumergen en una disolucin acuosa de H2O2 al 0,2% 6. se separan en un embudo con un vigoroso vibrado 7. los esclerocios flotantes y las partculas se recogen en un papel de filtro, en un embudo de vaco Buchner 8. se lavan y se dispersan uniformemente para analizar al microscopio 9. los esclerocios se ponen en agar para ver el % de viabilidad

Suelo empildorado El multipeletizador de muestras de suelo es un plato que contiene 15 tubos de acero inoxidable de 5mm de y 28 mm de profundidad. Unos pistones o mboilos de acero se acoplan en los tubos. Los mbolos se apoyan en la posicin ms elevada en primavera. Los suelos que se meten en el peletizador se ajustan a un 11 o 15% de capacidad de campo. Se meten 30 gr de muestra de suelo en placas petri de 9cm de La superficie del suelo se presiona apretando y aplanando con una esptula El suelo se presiona dentro de los tubos golpeando el tubo suavemente La superficie del suelo en el borde del tubo se nivela con una esptula esterilizada y la muestra se coloca en un soporte en anillo en el fondo del disco petri que contiene agar lquido ( acidificado o con 250 g/ml de cloramfenicol Se presiona la muestra 2-4 veces de manera que los pellets de suelo se liberen en la superficie del agar (4 discos por replicacin, cada 15 pelets) Otros pelets se secan para ver el peso seco de la muestra La muestra de los tubos se baa en etanol y se flamea Tras 24 h de incubacin se examinan los pelets para ver la presencia de Rhizoctonia Aplicamos la siguiente frmula para estimar el n de propgulos por gr de suelo por n de pelets colonizados: Loge 1/1-X o X= proporcin de pelets colonizados Se supone que la distribucin de Rhizoctonia es uniforme. Tambin se puede utilizar una pistola de amalgama de dentista, los pelets son ms pequeos (2mm X 5 mm de largo) los pelets se colocan uno por uno en los discos de agar.

Medio selectivo El medio desarrollado por Ko y Hora para aislamiento cuantitativo de R.solani del suelo tiene los siguientes ingredientes por litro: KH2PO.1gr MGSO4 . 7H2=.0,5 gr KCL0,5 gr Agar...................................20 gr Despus se autoclava y se aade: cido glico.0,4 gr Fenamilsulfuro (Dexon 70% w.p)..60 mg Estreptomicina50 mg Se puede sustituir el cido glico por tnico. Otra receta por litro: KH2PO40,5 gr MgSO4 . 7H2O..0,5 gr KCL0,5 gr FeSO4 .7H2O..10 mg NaNO2..0,2 gr

Cloramfenicol.0,05 gr Agar20 gr Despus se autoclava y se aade: cido glico.0,4 gr Fenamilsulfuro (dexon 70% wp)..0.06 gr Fosetil-al (alliete 80% wp)..0.25 gr Estreptomicina0,05 gr La adicin de prochloraz (1- [N- propyl-N-[2-4-6] triclorofenoexoetileno] en emulsin concentrada a 5 1/l al medio Ko y hora facilita una mejora del suelo donde crece Rhizoctonia Tambin la adicin de GA3 nos sirve El medio GG (Yanhopahyay y Grover) + imazalil (2,5mg/l) nos permite un aislamiento selectivo de R.solani en presencia de R.cerealis El medio GG + pencycuron (20-50 mg/l) y triadimefon (2,5-5mg/L) asla R.cerealis de R.solani Medio Ferris y Mitxchell modificado para ver R.solani y Rhizoctonia spp binucleados. Por litro: KNO3.0,2 gr Agar30 gr Despus de autoclavar: Enfriar a 50C y aadir: o etanol ..53ml o metalaxil (Ridomil 2E).0,38 ml o prochloraz (40EC).0,02 ml o obramicina.10 mg o estreptomicina300 mg o Utilizar el medio fresco Medio Windhan y Lucas para aislar R. zeae. Por litro: Agar20 gr Benomilo.100 mg Metalaxil..10mg Sulfato de estreptomicina50 mg Penicilina G50 mg

Teido del ncleo La determinacin del n de ncleos de las clulas de las hifas vegetativas es importante para identificar Rhizoctonia spp. El gnero se divide en 2 especies con clulas hifales vegetativas binucleadas o multinucleadas Azul de anilina o azul de tripano Las muestras se acidifican con CLH al 1%. Azul de anilina al 5% en glicerina o 0,5% de azul de anilina o azul de tripano en lactofenol. Se coloca directamente una hifa joven crecida en medio. Se cubre con el cubre objetos y se observa a 400X en una placa petri o una porcin de agar con hifas. El ncleo se tie de azul o prpura. Geimsa HCL 1. Las superficies de las capas de los bloques de agar que contienen hifas se fijan con una mezcla de 3/1 de etanol y cido glacial durante 10 m 2. se lavan en etanol al 70% durante 10 m 3. se hidrolizan en una disolucin 1N de CLH durante 10m a 60C 4. se lavan en agua destilada 5. se colocan en una disolucin de Geimsa durante 30 m 6. la solucin de Geimsa se hace aadiendo 2 gotas de Geimsa por cada ml de solucin tampn ( fosfato9 (ph 6,8) 7. el material teido se lava en agua destilada durante 5 m y se transfiere a un porta 8. se pone el cubre y se presiona suavemente para dispersar el material teido 9. el ncleo se tie de azul.

Orceina 1. Las hifas contenidas en el agar se fijan con formalina:cido actico:etanol durante 24 h 2. se lavan con cido actico al 50% 3. se hidrolizan con una disolucin 1N de CLH a 65C durante 20-30 m 4. se lavan con cido actico al 50% 5. se tien durante 7h en orceina al 2% en cido actico al 50% 6. el ncleo se tie de rojo DAP 1. las hifas se colocan en cubres cubiertos de agua de agar (2%) y se fijan mediante inmersin en formaldehdo al 3% durante 2 m 2. se aclaran con agua destilada 1 m 3. se sumergen las hifas en 1g/ml de DNA 4,6-diamino-2phenylindole (DAPI) durante 5 a 10 m 4. se aclaran con agua destilada 3-5m 5. se elimina el exceso de agua 6. se aade una gota de glicerina y se coloca el cubre 7. para ver la hifa hay que usar microscopio de fluorescencia.

Naranja de acridina 1. se tien las hifas con una solucin de naranja de acridina al 0,0025% W/V 2. la solucin tamponada se prepara con 50 ml de una disolucin de acetato de veronal (acetato de sodio 0,971gr + diethyhbarbiturate de sodio 1,471 gr y 50 ml de agua destilada) + 74 ml de cido hydrochcloric 0,001M y 100 ml de agua destilada 3. los especimenes se ven con microscopio de fluorescencia con el filtro BG38 y el filtro barrera 53 y 47 o 65 y 50 4. el ncleo aparece verde brillante o naranja dependiendo de los filtros utilizados. Safranina O 1. se extrae una pequea cantidad de hifa del medio de cultivo y se coloca en un porta en una solucin consistente en: 1 gota de Safranina alcalina + 1 gota de KOH al 3% 2. la solucin de Safranina se compone de: 6 ml de Safranina O al 0,5% W/v en agua destilada 10 ml de KOH al 3% en agua destilada 5 ml de glicerina 75 ml de agua destilada 3. se pone el cubre y se observa al microscopio 4. el ncleo se tie de rojo Un mtodo desarrollado por Yamamoto Y Uchida utiliza aislados que crecen durante 24-48 h en membranas de dilisis que flotan en agua de agar V8 al 2% Posteriormente se tien de Safranina O al 0,5% colocando una gota en un lado y en el otro una gota de KOH al 3% Se observa el ncleo teido en el rea donde las 2 gotas convergen.

Fusin de hifas (anastomosis) Los aislados de Rhizoctonia se pueden asignar a diferentes grupos de anastomosis, si los pares aislados que se testan son capaces de crecer y fusionarse hifalmente. Los aislados se emparejan en (A) agua de agar en placas petri Se coloca un papel de celofn en medio del agar Se dejan correr capas de agar en el cubre y se colocan en papel de filtro o en placas petri con agar Se coloca un cubre en cmara hmeda La observacin al microscopio nos permite ver las parejas que se teiran para ver la anastomosis hifal. Se tien con azul de algodn 0,001% w/v diluido en lactofenol/agua (relacin 1/9 v/v) Se pueden teir con floxina B o azul de anilina en lactofenol (0,5% w/v)

Hay 3 tipos de fusin hifal : perfecta, imperfecta y fusin de contacto La fusin perfecta incluye fusin de las clulas de las pareced y citoplasmas, se crea una continuidad en el citoplasma. La fusin perfecta se observa en aislados de hifas del mismo aislado.

La fusin entre diferentes aislados suele ser una plasmolisis o fusin de clulas o una fusin imperfecta Independientemente, la transferencia de material gentico via anaotomosis ha sido demostrada. El contacto entre hifas sin lisis de las paredes celulares en el lugar de contacto no se considera anastomosis. El trmino frecuencia de fusin se determina con la siguiente formula :

% FF= A(100)/B A = suma de puntos de fusin en 15 muestras B = suma de puntos de contacto en 15 muestras Una FF de 50% es alta. De 30-50% moderada y < 30% baja Induccin de teleomorfos Los factores especficos ambientales que influyen en la formacin de teleomorfos de Rhizoctonia todava no estn muy claros. Humedad La alta humedad es esencial para la fructificacin de Rhizoctonia Sin embargo los diferentes aislados pueden requerir diferentes humedades. Un ptimo de humedad relativa suele ser un 40-60%. Incluso un 100%. La humedad es importante para la formacin de teleomorfos en el suelo. Se ha observado una fuerte esporulacin al incrementar la humedad. Aireacin Es necesaria para la esporulacin de Rhizoctonia , as como mover el CO2 de la respiracin. Temperatura El ptimo para la formacin de teleomorfos es entre 20 y 30C. La fructificacin se da a 20C pero no a 15C, 25 o 30C segn Sims. Las fluctuaciones entre da y noche pueden tener efecto. Por la noche 14-18C y de da 23-26C inducen a la formacin de teleomorfos. Luz Las altas esporulaciones se dan por la noche, la fructificacin se reduce durante el da. La luz estimula la formacin de himenios pero inhibe la maduracin de basidios. Unas condiciones ptimas son 12-16 h de luz. Inculo La edad y el tamao tienen influencia. Se ha observado que la fructificacin se da con suspensiones miceliares pero no con redes miceliares cuando se inoculan plantas. Sustrato Los teleomorfos se pueden formar en el suelo, en plantas y en agua de agar. Los aislados requieren de varios sustratos para fructificar: arena de ro, marga marrn, marga arcillosa, marga de aluvin roja.

Los tejidos vegetales como algodn, Altermanthera philoxeroides, patata, remolacha de azucar, son buenos sustratos para inducir la esporulacin. El agua de agar, extracto de suelo en agar se han utilizado como soporte. La adicin de N en el medio de agar puede afectar a la esporulacin. Plantas y partes de plantas La transferencia de himenio a partes de plantas en cmaras hmedas, estimula la fructificacin durante algunos das. Se puede inducir la formacin de basidiosporas de R. solani colocando segmentos de tallo de algodn en agua de agar. El micelio de R.solani crece en dextrosa de patata con caldo de carne que ha sido lavada en agua destilada y aadida atrocitos de raz de Altermanthera philoxioides, el himenio con basidiosporas aparece en las tallitos. La esporulacin en remolacha de azcar se da a temperaturas clidas y a alta humedad. El himenio aparece como un polvo gris-blanco solo en las zonas centrales de las hojas. Se pueden obtener teleomorfos inoculando races de remolacha azucarera de 2 cm de u hojas que crezcan en suelo estril con asilados de R.solani de diferentes hospedantes. La inoculacin de las plantas se hace en cmaras hmedas al 100% con T en oscuridad de 21C y de da de 24C. Se puede inducir la formacin de basidiosporas de R.solani inoculando plantas de algodn, Altermanthera, patata o remolacha azucarera, con una suspensin miceliar que halla crecido en caldo de carne con patata + 5 g/l de sucrosa. Las plantas inoculadas se incuban a 20C y alta humedad bajo tarros de cristal. Transferencia de un medio rico en nutrientes a uno pobre Para formar basidiosporas, se hace crecer R.solani en un medio rico durante 17 das y luego se transfieren porciones de micelio a papel de filtro en pequeos matraces. Se en agua de agar. Tambin se induce la formacin de basidiosporas en las paredes de matraces de cristal haciendo crecer el micelio en solucin sinttica de Coon, primero obtenemos crecimientos vigorosos del micelio en un medio rico y luego se transfieren a uno menos nutritivo. Se puede inducir la fructificacin de R.solani simplemente haciendo crecer aislados en PDA durante 10 das y luego transfiriendo el micelio en cuas a agua de agar. Los aislados de Rhizoctonia crecen en PDA suplementado con 1g/l de xtracto de levadura durante 4-6 das a 25C, para la esporulacin se transfieren cuas a extracto de agar de suelo. - 1 kg de suelo seco autoclavado 30 m con 1l de agua. - Despus esperar una noche y lo que sobrenada se filtra con papel de filtro, a esto se aade: 1 gr de dextrosa 0,1 gr de extracto de levadura KH2PO4 20 gr de agar se rellena a 1l , se estabiliza a ph 6,8 y se autoclava. Los cultivos se incuban a 22-23C

Se producen esporulaciones en aislados que hacedmos crecer en platos paretidos con un medio rico en nutrientes (glucosa, N y agar GNA) y en la otra parte un medio bajo en nutrientes (sales de tiamina y agar STA) Las sales de tiamina contienen: K2PO41,0 gr KH2PO4..0,78 gr MGSO4 . 7H2O0,75 gr CaCl2.37,0 gr FeCl3 .6H2O..1,0 gr ZnSO4 .7H2O.0,9 gr CuSO4.5H2O..0,8 gr Na2 MoO4.H2O..0,3 gr Tiamina-HCL0,15 gr Difco bacto agar.20 gr Agua destilada1000ml

El GNA incluye: D-glucosa.10 gr NaNO3.0,25 gr Se aade las sales de tiamina agar

Agar con marmita Se utiliza para calcular el ndice de esporulacin de R.solani de los grupos AGs 1, 21,2-2,4 y 5 Se les hace crecer en el medio OPDMA Extracto de patata15 gr Extracto de malta de marmite..40 gr Dextrosa7,5 gr Agar20 gr Agua destilada1000 ml Ajustar a Ph 5,3 O en el medio ODMA Marmite..25 gr Dextrosa..12,5 gr Agua destilada.1000 ml Ajustar a ph 5.2 Se cogen los bloques de agar de los mrgenes de los cultivos que han crecido 3 das a 26C y se transfieren a agua de agar Posteriormente se incuban bajo luz difusa. Las fructificaciones aparecen a los 7-12 das En un procedimiento similar los aislados de R.solani crecen durante 2-3 das a temperatura ambiente en el segundo medio: Extracto de levadura marmite.1 gr Dextrosa..20gr

Agar..20gr Agua destilada.1000ml

En el cual se empapan 25 gr de rodajas de patata durante 1h a 60C. Se cogen pequeos bloques de agar (2-3mm) que contengan algunas hifas y se transfieren (de la parte marginal) a platos con agua de agar. Murria enfatiza la importancia de una buena aireacin en los medios de dextrosa, extracto de levadura. Es importante anotar que los aislados requieren cantidades de inculo de 1mm a 20 X3 mm para esporular. Agar con fungicida Para inducir la formacin de teleomorfos de R. solani de los grupos AG1 y AG 2-2 pero no AG3,4,5 Se utilizan discos de papel de filtro de 15mm de empapados en una solucin acuosa de mancozeb al 5% Se colocan en agua de agar en placas petri a 2-3 cm de la periferia del disco Se cogen tacos de agar de 5mm cortados de los mrgenes de viejos cultivos de R. solani Se colocan en el agar a 3 cm del papel de filtro Los cuerpos fructferos aparecen a los 10-15 das de incubacin a 25-30 C. Los aislados de remolacha azucarera representativos de los grupos AG2-2 IV, exhiben intensa ramificacin con este procedimiento pero no se ven basidiosporas. Agar con avena Los himenios de Rhizoctonia se forman en una decoccin de avena con agar despus de 12 das de incubacin a 24-26C: Se autoclavan granos descascarillados de avena (50gr) en 1 l de agua destilada Se ajusta a ph 7.2 despus del autoclavado En placas petri se ponen 20 ml de este medio Se corta un disco de 1cm de del margen de un cultivo de 10 das de Rhizoctonia en PMYDA Se coloca en el centro del disco

Agar con V8 La luz de fluoresce4ncia blanca (4700 erg/seg/cm) estimula la formacin de basidios de las especies de Rhizoctonia binucleadas en agar con jugo V8, pero inhibe la formacin de basidiosporas. Jugo de V810% CaCO32 gr Agar.18 gr Agua desionizada..900 ml Los cultivos crecen 20 das a 24C

Suelo con planta colonizada El himenio de Rhizoctonia spp se puede observar en la superficie de suelos que se colocan sobre sustratos infestados de micelio. Los asilados se hacen crecer en agua-dextrosa-patata. Los cultivos se maceran con arena esterilizada y una mezcla de suelo que previamente se ha esterilizado 30 m a 71C para eliminar del suelo Rhizoctonia Los culti9vos se incuban a 23-26C con 14-16h de luz a 10-440 ft-c La humedad se mantiene regando el suelo 1-3 veces al da dejando que drene. La fructificacin se produce a los 12-14 das. Otra receta Los aislados se hacen crecer en placas petri en el medio PYDA: Extracto de patata..4 gr Extracto levadura5 gr Dextrosa..5gr Bacto agar17 gr Agua destilada..1000ml Despus del autoclavado el medio se deja a ph 4,5 con cido lctico. Despus de algunos das de incubacin a 27C, cuando la hifa llega a loa mrgenes de la placa petri el cultivo se tapa en su contorno con agregados de suelos secados al aire de 3-5mm de . Se aade agua destilada 1- 3 veces al da, dejando que percole el exceso. Los cultivos se incuban a temperatura ambiente con las tapas petri quitadas. El himenio se observa a los 3-14 das. Este mtodo es apropiado para muchos aislados binucleados y multinucleados. Morfologa y citologa de Rhizoctonia En un medio de cultivo las jvenes ramificaciones de Rhizoctonia spp se dirigen en la direccin del crecimiento e invariablemente parecen constreidas al punto de unin de la hifa principal. Se forma un septo en la zona cercana a la constriccin. En hifas maduras se observan crecimientos en 90 de la hifa principal, tambin en 45. Frecuentemente la mayora de las clulas de la hifa principal se desarrollan en una nueva rama cerca del fin distal, as el septo de la hifa principal est cerca de la ramificacin. Esto vara a veces. Duggar observ que no haba septo (o solo uno) en la hifa principal cerca de la ramificacin. Hay septos secundarios que se forman en hifas viejas. El septo primario es grueso en la unin con la clula de la pared, mientras que el septo secundario es fino en esta localizacin. Las hifas jvenes de R. solani son hialinas y se extienden en hifas corredoras en la superficie de las plantas y en el medio de agar. Las ramificaciones de esta hifa empiezan a acortarse y dar lugar a esclerocios o grupos de infeccin. Las hifas en el sustrato o en hospedante tienden a permanecer hialinas, pero la areas o las superficiales pueden ser amarillas o marrones por la acumulacin de melaninas en las paredes celulares.

La hifa madura de R. zeae y R. oryzae son blancas o teidas de color salmn. El color de R. repens es blanco. Las dimensiones de las clulas hifales varan en diferentes aislados de R. solani. El dimetro entre 3-17 m, la longitud celular vara entre 50 a 250 m. las hifas binucleadas de Rhizoctonia son usualmente ms finas que las multinucleadas. La longitud del radio de la clula de las hifas vegetativas es generalmente superior a 5:1. Clulas monilioides Muchos aislados de R. solani y Rhizoctonia spp binucleadas producen cadenas simples o ramificadas (clulas monilioides), cuya longitud con respecto al radio es 1-3:1. Estas clulas pueden ser hialinas o marrones y varan en su forma: lobadas, piriformes, irregulares y en forma de barril. Las clulas monilioides tambin se llaman clulas doliformes, clulas en forma de barril, clulas cortas, clamidiosporas y clulas esclerticas.

La formacin de nuevas clulas monilioides ocurre en diferentes partes de la hifa vegetativa. Surgen de brotes en los finales de clulas preexistentes. Se produce una constriccin en los septos entre clulas monilioides. Sus tamaos varan de 10 x 20 a25 x4 m. Las cadenas de las clulas monilioides poseen varios lugares, principalmente por debajo de la superficies del hospedante y/o del sustrato, pero tambin pueden estar en los tejidos del hospedante. Pueden ser escasas y dispersas, formando masas semicompactas de diversos tamaos, que se pueden agregar formando esclerocios. Los esclerocios se componen usualmente de masas compactas de clulas monilioides. Algunos esclerocios no estn formados de clulas monilioides pero tienen una hifa indiferenciada. En la formacin de los esclerocios no hay un patrn claro de organizacin de la hifa, resultando una construccin desorganizada. El color de los esclerocios de R. solani es marrn de varias tonalidades. Los de R. zeae son rojizos y los de R. oryzae asalmonados. La forma y tamao vara segn los Rhizoctonia. R. zeae son pequeos, regulares y con forma de baln. R.solani del grupo AG1-IA son alargados y de forma redondeada. Los de AG 1-1c son pequeos y redondeados. Los esclerocios de otros grupos son de forma irregular y de diferentes tamaos de 1 a 5-8 mm de . Los esclerocios se suelen formar en la superficie de los hospedantes y tambin dentro de los tejidos o en restos vegetales. Teleomorfos Los aislados de Rhizoctonia spp pueden esporular cuando se exponen a condiciones ambientales especficas. Las clulas de las hifas cortas se bifurcan frecuentemente y producen una densas maraas don de se forman los basidios. La forma de los basidios y su tamao puede variar. Pueden ser cilndricos, ovales o esfricos. El esterigma aparece junto a los basidios, su nmero , forma y tamao tambin varan. El nmero de esterigmas por basidio est en un rango de 1 a 7, lo normal es 4.

Las basidiosporas son esfricas, ovales o piriformes. En algunas especies la germinacin se produce en basidiosporas secundarias, se llaman basidiosporas repetitivas. La forma, nmero y tamaote basidios, esterigmas y basidiosporas as como la morfologa del himenio es importante para la clasificacin de Rhizoctonia spp. Citoplasma La observacin de las hifas de Rhizoctonia solani bajo microscopio revela a las jvenes clulas hifales en su actividad de crecimiento en los cultivos. Hay un citoplasma denso con conspicuas vacuolas. Las vacuolas son largas y aparecen adems en los extremos hifales. En las clulas maduras pueden aparecer ; citoplasma denso, grandes vacuolas o puede aparecer totalmente vaco. En las clulas monilioides, los esclerocios pueden contener glbulos de aceite. Las estructuras internas observadas en las clulas de Rhizoctonia solani incluyen: ncleo, mitocondria, vacuolas, retculo endoplasmtico, ribosomas, inclusiones de lpidos, grnulos (probablemente de glucgeno), microtbulos, lomasomas, vesculas citoplasmticas, paredes de hifas, poros y septos. La organizacin del citoplasma es diferente segn la edad de las clulas hifales.

Paredes de clulas Las paredes celulares de Rhizoctonia solani cerca del extremo hifal consisten en una simple capa de 80 de espesor. Con la edad se depositan centrpetamente capas adicionales. Algunas de 1 m. En este estado loas paredes empiezan a mecanizarse. La pared del septo se compone de dos zonas densas elctricamente, que continan en paredes laterales. El septo puede contener de 1 a varias lamelas dependiendo de la edad. Poro del septo En Rhizoctonia solani el poro del septo mide sobre 1-0,2 m de . Un anillo anular amorfo cerca del centro del septo y estructuras alrededor del poro del septo. El parentosoma es una capa perforada membranosa en el poro que est en cada septo formando una estructura abultada. La membrana del plasma es continua de una clula a la siguiente, pasando a travs del hinchamiento septal y del poro. El poro no se cierra con el cfrecimiento del hinchamiento septal. Cuando se cierra es porque el poro del septo se tapona. La morfologa del doliporo y el parentosoma del septo en los basidiomicetos es una estructura especfica de cada especie. La figura 6 resume las formas de los parentosomas en diferentes grupos taxonmicos. La citologa del poro del septo nos sirve para separar Rhizoctonia de ascomicetos, ustomicetos, holobasidiomicetos y heterobasidiomicetos. Los ascomicetos tienen un septo transparente con un gran poro central y 2 o mas cuerpos de Woronin. El septo de los basidiomicetos est triplemente estratificado. Los ustomicetos tienen un septo simple y poros pequeos con bordes acusados Los holobasidiomicetos tienen un septo dolporo con parentosomas y vesculas no perforadas.

Membranas El plasma de la membrana de Rhizoctonia solani se compone de capas electrocondensadas con una regin conductora de electrones. El grosor de la membrana vara de 60 a100 . El tonoplast ? Y el plasma de la membrana son ms gruesos que las membranas del ncleo, el retculo endoplasmtico o la mitocondria. Retculo endoplasmtico En Rhizoctonia solani es ms abundante en la hifas jvenes y , adyacente al poro del septo. En hifas viejas o en esclerocios es fragmentado o ausente. El retculo endoplasmtico se compone de 2 capas ms o menos paralelas formando un sistema de cisternas cerrado. Usualmente es continuo con el parentosoma alrededor del poro del septo y se ramoifica a travs del citoplasma. Aparece en diferentes formas en lminas continuas o en cisternas porosas, en formas enrolladas, en pilas lamelares, tubular o en forma de cisterna no asociada. Tambin se lomasones adyacentes a las paredes del septo o en los septos hinchados. El aparato de Golgi no se ha encontrado en Rhizoctonia solani. Ncleo Las clulas de R.repens , Epulorrhiza (Rhizoctonia) anaticula, y Ceratorrhiza spp (Rhizoctonia binucleadas), contienen 2 ncleos. Las clulas de Rhizoctonia solani , R. zeae y R. oryzae son multinucleadas. El n de ncleos en las especies puede variar de 3 a 28 en clulas jvenes. El n de ncleos es bajo en clulas viejas probablemente por la formacin de septos secundarios. El n de ncleos en las clulas monilioides es similar al de las clulas hifales jvenes. El ncleo tiene forma oval y los ncleolos se observan claramente en microscopio de contraste. La membrana del ncleo a veces tiene poros y conexiones con el retculo endoplasmtico. El contenido del ncleo puede aparecer variegado, pero usualmente se observa una matriz homognea. En Rhizoctonia solani durante la formacin del teleomorfo las clulas probasidias empiezan a binuclearse emparejndose los ncleos y formando un septo secundario. Los 2 ncleos haploides se fusionan y forman uno diploide que se divide en meiosis para formar 4 ncleos haploides. Cuando el esterigma empieza a alcanzar su tamao final, los ncleos alongados migran al esterigma de una basidiospora. En los primeros estadios de la germinacin de las basidiosporas las clulas son uninucleadas, aunque a veces se observan binucleadas. 6 pares de cromosomas se se observan durante la meiosis de Rhizoctonia solani. Mitocondria En Rhizoctonia solani las mitocondrias son polimrficas en relacin a otros hongos y plantas superiores. En las clulas jvenes tienen forma de barra y en las viejas empiezan a acortarse y se cierran en forma de esferoide. La organizacin ultraestructural de la mitocondria en Rhizoctonia es similar a la de otros basidiomicetes. La membrana exterior cubre la mitocondria, en el interior existe una membrana con repliegues (crista). Los crista tienen forma de plato y se distribuyen en forma dispersa en la mitocondria.

Vacuolas Las vacuolas de Rhizoctonia solani aparecen en la pared celular, antes de las puntas de las hifas. Los lpidos se almacenan en las clulas viejas, en las monilioides y en los esclerocios. Se pueden observar inclusiones esfricas alrededor de la periferia del protoplasto. Las inclusiones de lpidos son transmisores de electrones despus de la fijacin con KMn O4.

Clave citomorfolgica para Rhizoctonia spp. Los criterios citomorfolgicos del n de ncleos celulares (CNN) en la hifas jvenes y el ancho de las hifas corredoras se utilizan para dividir Rhizoctonia en dos grandes grupos, binucleadas y multinucleadas. Las caractersticas morfolgicas de las especies dentro de estos grupos se resumen en esta clave dicotmica: 1. CNN en las terminales de las hifas jvenes normalmente 2 (menos frecuentemente 1-3), la anchura de la hifa principal corredora es normalmente menos de 7 m. Rhizoctonia binucleada (3) 2. la CNN en las hifas terminales jvenes es mayor de 2. la anchura de la hifa principal corredora es mayor a 7 m Rhizoctonia Multinucleada (13)

3. colonias blancas a amarillo crema en PDA, hifa vegetativa de 3.0-4,5 m de dimetro. Clulas monilioides (16 X 22 X 11-15 m) pueden formar agregados de 100-300 m de dimetro. Esclerocios grises a la luz marrn, redondos a 1 mm de R.callae Teleomorfo. Indeterminado 4. Colonias blancas a la luz marrn en PDA, ausencia de zonacin colonizadora, hifas de 3,8 m de dimetro. Clulas monilioides de 15-30 X 7-12 m esclerocios blancos a marrones < 0,5-3,0 mm de dimetro. R. cereales Teleomorfo : Ceratobasidium gramineum (= C. cereales)

5 . Colonias blancas a color ante en PDA, hifa de 3.7 m de dimetro. Clulas monilioides (18-22 X 9-12,5 m) pueden formar agregados de 0,5-0,75 mm de . Esclerotios marrones, 2-10 mm de dimetro R. endophyta Teleomorfo: C. cornigerum (= C.ramicola)

6Colonias blancas a color ante en PDA, ausencia de zonacin. Hifas de 3,6-8,7 m de dimetro. Clulas miniliodes 6,7-17,7 X 11,1- 3,45 m, esclerocios poco comunes de 0,1-0,3 mm de dimetro. R.fragariae Teleomorfo: C. cornigerum (= C.ramicola) 7Colonias blancas a amarillo blancas en PDA. Hifas de 4-8 m de dimetro. Clulas monilioides de 7-10 X 10-20 m. Esclerocios en plantas de arroz marrones a grismarrn de 0,3-2,5 mm de dimetro, a veces no se producen esclerocios en cultivo. R. fumigata (= Sclerotium fumigatum) Teleomorfo: C. Sateriae (= Hypochnus setariae) 8Colonias gris oliva a marrn prpura en PDA. Las colonias maduras teidas de lavanda. Hifas 3,7-9,9 m de dimetro. Ausencia de clulas monilioides y esclerocios. R. ramicola 9 Colonias blancas a marrn plido en PDA. Hifas de 5-7 m de dimetro. Esclerocios irregulares globosos de 0,5-3mm de dimetro. Compuestos de clulas de 13-30 mde lado. C Clulas monilioides de 21-37 X 6-11 m. R.oryzae-sativae (= S.oryzae-sativae) Teleomorfo: C. Oryzar-sativae. 10 Hifas hialinas, lisas, con paredes finas, tortuosas, reptantes, irregulares en anchura ( 2-3,5 m de dimetro crecimiento lento <3 mm/da. Esclerocios diminutos, sumergidos, desparramados, dispuestos en racimos poco apiados. Con clulas monilioides con paredes finas, hialinas, elipsoides a esfricas 13-18 X 8-17 m, en cadenas, ramificadas o no ramificadas. R.repens [=R.globularis (nombre invalidado) renombrado. Epulorrhiza repens] Teleomorfo: Tulasnella calospora. 11 similar a R.repens excepto que las clulas moniliodes son de elpticas a claviformes, con esptulas en el contorno 14-18 X 7-10 m, con clulas adyacentes conectadas con conexiones anchas de 14-18 m. La clula terminal de la cadena prolifera avanzando en cortos o largos picos de proyeccin. R.. anaticula Renombrado con Epulorrhiza anaticula. Releomorfo :Tulasnella sp. 12 especies de Rhizoctonia binucleadas o con otras caractersticas Anamorfos: R. alpina, R. candida, R. endophyta var endophyta, R. floccosa, R. fraxini, R. fuccosa, R. goodyetae-repentis, R. muneratii, R. pini-insignis, R. quercus, Sxclerotium deciduum.

Se asignan a anamorfos de Rhizoctonia con teleomorfos de cetotobasidium a Ceratorrhiza: R cereales = C. cereales R. fragariae= C. fragariae R. goodyerae-repentis = C. goodyerae repentis R. ramicola = C. Ramicola Especies binucleadas dudosas: R. muscorum, R.solani var fucchsiae, R. stahlii. Teleomorfos: Ceratobasidium spp ( o llamados incorrectamente como Coticium sp, Hypochnus sp, Koleroga sp y Tulasnella sp. 13 micelio coloreado de amarillo claro, regular, pequeo, con forma de baln, con esclerocios coloreados de rojizo. R. zeae Renombrado como Moniliopsis zeae Teleomorfo: Waitea circinata ( grupo anastomisis WAG-Z) Otros anamorfos descritos en este grupo: R. endophyta var filicata, Sclerotium oryzocola. 14 Micelio blanco amarillento usualmente, con esclerocios coloreados irregularmente de color salmn. R.oryzae Renombrado como Monuiliosis oryzar Teleomorfo : Waitea circinata (grupo anastomosis WAG- O)

Clave dicotmica pata teleomorfos de Rhizoctonia spp Los teleomorfos cuyos micelios presentan caractersticas de Rhizoctonia se asignan a basidiomicetes, clase Hymenomycetes, subclase Phragmobasidiomycetydae y Holodasidiomycetidae Subclase Phragmobasidiomycetyda 1 metabasidios globosos, piriformes, clavados o raramente con forma de huso. Longitudinalmente u oblicuamente septados o ( cruciate ?) septados. Tremellares (2) 2 basidios no catenulados protosterigma no deciduo, esporas apiculadas, borde del esterigma a simtrico o apiculado. Tremellaceae(3) 2 esterigma robusto , septado basalmente, gloeocistidios con contenidos amarillos Metabourdotia Monotropo: M. tahitiensis 4 basidiocarpo cartilaginoso a coriceo, raramente gelatinoso-creo, firme a duro, resupinado u ocasionalmente lobado, encostrado. Sebacina (5) 5 basidiosporas largas a vermiformes (30-60 X 1,0-2,5 m). Probasidios que forman cadenas o basidios parcialmente fusionados (fig 7) . (Sebacina vermifera) Basidios y basidiosporas. Bar = 10 m Subclase Holobasidiomycetidae

1 basidios subesfricos y anchos con slidas estructuras en forma de dedos, o esterigmas inflados, esporas reiterativas. Tulasnellales 2 esterigma relativamente pequeo, no inflado, esporas no reiterativas. Cuerpo de fructificacin que se desarrolla en gimnocarpo, himenio unilateral o anfgeno, liso o dentado , que procede de la lnea de los tubos Aphyllophorales

Tulesnales
1 protosterigma fuertemente hinchado y esporas subglobosas, elipsoides o piriformes. Al principio empiezan a elongarse apicalmente dentro de un soporte fusiforme o subfusiforme llamado espculo, interrumpido en la base desde el metabasidio por un septo adventicio a menudo decduo. Clulas de la hifa binucleadas. Tullasnaceae Esta familia solo tiene un gnero, Tulasnella. (Sinnimo : Glo0eotulasnella, Muciporus, Pachysterigma, Prototremella). Anamorfo: Rhizoctonia repens. 2 protosterigma slido, subcilndrico o fusiforme ms o menos recto y digitado, no decduo , raramente desarrolla septos adventicios y no en la base. Ceratobasidiae (4) 3 basidiocarpos efusos o discoides a coronados, himenforo plano, meruloide ( con bordes frtiles en los pliegues), tuberculazo, dentado ( con puntas estriles en los dientes), o pseudodentado ( con fascculos emergentes estriles que surgen de la hifa originados en capas profundas), sin setae ?, con o sin clamps, con cistidios cortos, gloeocistidios e hifidios presentes o ausentes, esporas usualmente hialinas o coloreadas de claro, lisas o ornamentadas amiloides o no. Cortinaceae 4 metabasidios 2-3 veces el ancho de la hifa que los soporta o los pedicelos (6) 5 metabasidios igual de la hifa que los soporta o los pedicelos (7) 6 basidios subglobosos o piriformes, abruptamente sujetos a los pedicelos, gloeocistidios y cistidios ausentes, hifa con clulas binucleadas. Ceratobasidium 7 basidios cortos , subcilndricos a forma de barril u ovoides. Basidiosporas elipsoides con una cara lisa o raramente piriforme u obovada , hialina a coloreada de marrn. Clulas de las hifas multinucleadas. Thanatephorus Sinnimo: Pellicularia Los siguientes nombres genricos han sido mal empleados para Thanatephorus: Botryobasidium, Ceratobasidium, Corticium e Hypochnus. Anamorfo:_ Rhizoctonia solani.

8 metabasidios que son ms anchamente clavados que Thanatephorus en relacin a la hifa que los soporta. Esterigma (1-) 2 Ypsilonidium Basidios cilndrico clavados, basidiosporas tpicamente biapiculadas, fusiformes, citriformes, elipsoides, hialinas a amarillentas. Saprobitico de madera muerta y desechos. No se conocen esclerocios. Uthatobasidium 10 basidios ovados a redondeados con un pedicelo, gloeocistidios y/0 cistidios usualmente presentes, ausencia de esclerocios, saprobitica del suelo. Oliveonia Sinnimo: Heteromyces, Hidrabasidium

Corticiaceae (Aphyloforales) con anamorfos de Rhizoctonia

1 basidios constrictor, subuniformes, subbasidios ramificados frecuentemente en volutas i ciliados. 4 esterigmas no especialmente slidos o alongados con una substancial longitud. Basidiosporas oblongas, elipsoides y lisas. Ausencia de cistidios, hifa sin clamps, clulas de la hifa multinucleadas, esclerocios rosas o castaos (fig b8) Anamorfos: Rhizoctonia zeae, grupo anastomosis WAG-Z, Rhizoctonia oryzae Grupo anastomosis WAG-O 2 subbsasidios tpicamente ramificados, no ciliados, esterigma (4-) 6 (-8), esporas amigdaliformes , fusiformes o subnaviculares, cistidios presentes o ausentes, hifa con clamp o no, ausencia de esclerocios, , conidios, odio Rhizoctonia o Hifa multinucleada . Con apariencia de Rhizoctonia, normalmente no patognica (no ha sido bien estudiado). Botryobasidium

Tulasnella
1 probasidios esfricos, espcula de 7-10 (-22) m de larga. Basidiosporas de 24-28 (52) X3 -4,5 m . Fig 9 a T.calospora Sinnimo: Gloeotulasnella calospora. Anamorfo: Rhizoctonia repens. 2 probasidios ovados a subclavados. Espcula de 8-15 m de larga. Basidiosporas de 6-8 (-10) X 2,5-3 m, curvadas (fig 9 b) T. allantospora 3 probasidios ovados, clavados, espcula de 2,5-5 m de larga. Basidiosporas de 4,5-6,5 X 4.5- 5,5 m , subesfricas, ovadas (fig 9 c) T. violea 4 probasidios ovados a subclavados, con un largo pedicelo , protosterigma de variado tamao, unilateral, ecuatorial o irregular. Basidiosporas de 11-14 X 4,5 -5 m

fig 9 d T. irregularis 5 probasidio globoso o clavado, frecuentemente asimtrico. Espcula de 3-18 X 1,5-2 m, cnico cilndrica, basidiosporas de 6,5 -10 X 3,5-5,5 m con una de las caras inflada (Fig 9 e) T. asimtrica 6 probasidios pedunculados con forma esfrica, espcula de 20 (-74) m de largo con 12 septos. Basidiosporas 12-18 X 3,5-4,5 m (fig 9 f) T. cruciata

Thanatephorus
1 esterigma constante en nmero (2). Basidiosporas subcilndricas, curvadas 12-17 X 4,5-6 m (fig 10 a) T. sterigmaticus 2 esterigma (1-) 4 (-7) en nmero, esporas oblongas, elipsoides a ovadas, usualmente anchas hacia el final distal (3) 3 hifa de 12 (-17) m de dimetro, micelio que en cultivo tiene un tinte marronceo, 4 esterigmas del mismo tamao que los metabasidios o ms cortos. Esporas de 7-10 (-12) X 4-7 m , subhimenio que se ramifica T.cucumeris 4 hifas de ms de 9 m, micelio blanco en cultivo, harinoso, despus marrn grisceo . Esterigma (1) 3 (4) , usualmente mucho ms largo que el metabasidio. Basidiosporas 79 X 4-6 m. Subhimenio ramificado, a menudo racemoso (fig 10 c) T. praticola Sinnimo: Ceratobasidium pratcola, Corticium praticola, Pellicularia praticola, Estas especies a menudo se incluyen errneamente en T. cucumeris. 5 Hifa marrn oscuro, la hifa crece despacio y dispersa en cultivo, fructifica rpidamente, marrn siempre en la juventud, ms de 17 m de dimetro. Metabasidios (13) 16-21 X 9-11 m, esterigma 4,9 -12 X 7-8,5 m , lisas. (fig 10 d) T. orchidicola 6 hifa dispersa, hialina al principio , color marrn camello, , plana , con color blanco o marrn claro la hifa area, en matas flocosas e irregulares. Metabasidio 10-12 X 7-7,5 m. Esterigma 4, 6-9 m de largo, curvado en horquilla . Basidiosporas globosas. 5-9 6-8 m de dimetro, apiculadas, no repetitivas (fig 10 e) T. pennatus 7 hifas de 3-8,8 m de dimetro, color amarillo claro, esclerocios pequeos, sueltos, marrn cinamomo a marrn Marte en PDA, himenio gris blanquecino, ramificaciones subcimosas, basidios de 8,6-15 X 5,8-10 m, piriformes, clavados con forma de cabeza al final. Esterigma (2-) 4 (-5) por basidio, 6,3-12,5 m de largo0 y 1,3-2,5 m de ancho en la base, divergentes, curvados un poco como cuernos. Basidiosporas a veces septadas (fig 10 f) T. crochorus.

Aquathanetephorus
1 parecida a thanatephorus pero los basidios son pequeos, esterigma (usualmente 2) o protosterigma hinchados con una curva interior (fig 11) A.pendulus

Ypsilonidium
1 fructificaciones dispersas y coloreadas de claro con basidios dispersos y basidiosporas septadas (fig 11) Y. anomalum 2 fructificaciones un poco gruesas y coloreadas de marrn con basidios cerrados en empalizada, basidiosporas septadas. Y langlei-regis 3 basidiosporas subcilndricas, largamente atenuadas hacia la base , basidiosporas no septadas. Y. sterigmaticum

Ceratobasidium
1 esterigma (1-) 2 (3) 2 4 esterigmas (6) 3 basidiosporas globosas a subglobosas de 11-15 X 10-12 m. Esterigma 11-12 X 3,4 m. Los esclerocios se forman en el hospedante y son esferoides, compuestos por clulas alongadas. C. setariae Sinnimos: Hypochnus setariae Anamorfo: R. fumigata Sclerotium fumigatum 4 basidiosporas globosas a subglobosas 9-17 X 9-16 m. Esterigma muy slido de 1223 X 4,5 -5 m. Esclerocios producidos en el hospedante globulares o cilndricos, compuestos por clulas esferoides cercanas (fig 12 a) C. oryzae-sativae Anamorfo: R. oryzae-sativae 5 basidiosporas estrechamente ovadas a estrictamente elipsoides. C. bicomo 6 basidiosporas esfricas (9) 7 basidiosporas cilndrico-subcilndricas (11) 8 basidiosporas elipsoide-ovadas (14) 9 basidiosporas de 6,5-9 m de dimetro (fig 12 b)

C. sphaerosporum 10 basidiosporas 10-12 m de dimetro (fig 12 c) C. globisporum 11 basidiosporas de 8-11 X 3,5-4 m la longitud 2 veces ms grande que la anchura C. pseudocornigerum

12 basidiosporas de 11-14 m de largo C. angostiporum 14 metabasidios con una prolongacin apical papilada C. papillatum 15 metabasidios sin prolongacin apical papilada (16)

16 metabasidios de ms de 18 m de largo (fig 12 e) C. obscurum 16 metabasidios usualmente menores de 18 m de largo (18) 18 basidiosporas anchamente fusiformes a elipsoide-ovadas con una cara hinchada 6,510 X 3,5-6 m. la longitud es de 1-2 veces que la anchura (fig 12 f) C. cornigerum 19 metabasidios 7,3-19.7 m de largo, basidiosporas 6,2-12,7 X 3,2-6,3 m. C. gramineum Sinnimo: C.cereale, Corticium gramineum Anamorfos: Rhizoctonia cereales 20 metabasidios de 10-18 m de largo, basidiosporas de 9-13 X 5-7,5 m (fig 12 g) C. anceps Sinnimo: Ceratobasidium vagum, Corticium anceps, Tulasnella 21 metabasidios de 2,0-16,5 m de largo, basidiosporas de 5,2-10,5 X 3-6,9 m C. ramicola Anamorfos: R.candida, R. endophytica var endophytica, R. frgariae, R. ramicola.

Trminos utilizados en la clasificacin de teleomorfos de Rhizoctonia

Abaxial: (relativo a las basidiosporas), la cara sobre el eje largo del basidio Adaxial: la cara prxima al eje largo del basidio, usualmente con el espculo Amiloide: (relativo a esporas) se tornan azules con el yodo en presencia de almidn. Apical: (esporas) que tienen una corta proyeccin en el final, una proyeccin donde puede estar fijado el esterigma Apiculado: que tienen apculo Basidiospora: espora que surge del basidio Basidium: incluye el metabasidio, el esterigma y el espculo Probasidio: la parte de basidio donde ocurre la cariogamia. Primera clula basidial Metabasidio: la parte del basidio donde ocurre la meiosis Esterigma: la parte del basidio entre el metabasidio y las basidiosporas, se compone de filamentos basales o una parte inflada ( el esterigma) y un punto apical, el espculo Holobasidio: basidio no septado, tpico de holobasidiomicetes Phragmobasidio: basidio dividido en septos Heterobasidio: basidio de heterobasidiomicetes , usualmente un Phragmobasidio Estrichchobasidio: cilndrico, con hilos nucleares longitudinales Chiastobasidio: clavado, con hilos nucleares a lo largo del basidio al mismo nivel Autobasidio: con esporas no apiculadas, con el borde simtrico en el esterigma. Epibasidio: una estructura que est entre el probasidio y el esterigma (o una espora esterigmtica) Hypobasidio: basidio con esterigma y esporas Pleura basidio: relativamente ancho en la base y con races bifurcadas en hilos Protrobasidio: basidio primitivo, opuesto al metabasidio en el sentido de que es un basidio degenerado Blastospora: espora que ha brotado, una clula germinada. Los blastos son generalmente mucilaginosos pero el conidio de cladosporium puede ser un Blastospora seca.

Circinado: enrollado, en ovillo Clavado: en forma de porra, en direccin a la base Obclavado: dirigido al pice Subclavado: no perfectamente dirigido al pice Cimado: un racimo determinado o de tipo centrfugo especialmente ancho o liso Cistidio: rgano estril y generalmente claro, prismtico, cnico, cilndrico, al final de una hifa no vesicular. En el himenio ( o en otra parte) en basidiomicetes. Gloeocistidios: con paredes finas, usualmente irregulares, con contenidos altamente reflectantes, hialinos o amarillentos. Oleocistidios: que tienen exudados o residuos resinosos Liocistidios: cnicos o cilndricos, con paredes muy gruesas, la pared se estrecha abruptamente en el pice, sin incrustaciones, poco coloreado. Digitado: con divisiones en forma de dedos Fusiforme: con forma de huso, dirigido hacia el final. Subfusiforme: no completamente fusiforme Globoide: globoso, esferoide o semejante Globoso: con forma de baln Subgloboso: no completamente esfrico Hilum: una marca o muesca en la espora, en el punto de fijacin de la conidiospora con el esterigma. Himenio: la superficie esporal del cuerpo de fructificacin Hipochnoide: fuertemente resupinado, seco, como en Tomentella. Metabasidio: (basidio, Hypobasidio, probasidio) el rgano de los basidiomicetes que despus de la cariogamia y la meiosis, soporta los basidios. Ovado: con forma de huevo, dirigido hacia fuera Ovovado: inverso a ovado, dirigido hacia la base Papila: suavemente redondeado Pedicelo: un tallo pequeo

Pleura: cara a cara Pleurosporo: que tiene esporas en las caras, por ejemplo los basidios de los uredinales. Pruinoso: con forma de harina en la superficie Piriforme: con forma de pera Obpiriforme: con forma de pera Subpiriforme: el reverso de la forma de pera Repandado: (el pleo) con forma de ola Repetitivo: (germinacin de esporas) produciendo esporas desde el principio Resupinado: (los cuerpos fructferos) con sustrato liso y con el himenio en el otro lado Extendido: (del estpite) muy largo comparado con la anchura. Esferoide: esferoidal, subesfrico (la espora) , cercano a la forma de esfera. Espculo: el punto apical del esterigma Esterigma: compuesto por el protosterigma y el espculo, el proceso en el que el basidio forma las basidiosporas. Tortuoso: inclinado, revuelto en varias direcciones. Truncado: con el final abrupto, parece que el final se ha cortado. Tulasnelceo: perteneciente a las Tullasnaceae, con las siguientes caractersticas: heterobasidios no septados, con Hypobasidio ms o menos piriforme, 2,4 u 8 epibasidios ventrudos separados del Hypobasidio por paredes que se cruzan. Meiosis en el Hipobasidio. Ventricoso: hinchado en la mitad de una cara, inflado. Volvado: enrollado hacia fuera Involvado: enrollado hacia dentro

Grupos de anastomosis de Rhizoctonia spp binucleados

Los aislados de Rhizoctonia spp de Japn, excepto Rhizoctonia Repens y Rhizoctonia Anaticula han sido asignados a 17 grupos de anastomosis designados AG A a AG Q. Lo0s aislados de Norteamrica se asignan a 7 grupos de anastomosis de CAG 1 a CAG 7. Los grupos norteamericanos corresponden a los grupos japoneses excepto CAG5 y CAG7 que son designados como AG-R y AG-S respectivamente. Recientemente Ogoshi asign aislados de Rhizoctonia Repens a 2 grupos que previamente se les haba asignado como no decritos (R.r 1 y R.r 2) Las asociaciones entre anamorfos de los grupos de anastomosis y teleomorfos binucleados de Rhizoctonia se resumen en la tabla 1

Grupo de Rhizoctonia repens

Los aislados de Rhizoctonia repens se dividen en 2 grupos incompatibles (anastomosis) R.r 1 y R.r2. En relacin a la fusin hifal los miembros se designan en 2 grupos: Los aislados capaces de la fusin hifal con miembros R.r 1 pertenecen al grupo de anastomosis R.r 1. El aislado utilizado como testigo es el ATCC76153 accesin OR-810, aislado de Spirantes sinensis en Aichi, Japn.

Los aislados capaces de la fusin hifal con miembros del grupo R.r 2 forman el grupo anastomosis R.r 2 El testigo es el aislado Atcc76153 accesin N-322 aislado de Liparis kumokiri en Hokkaido, Japn.

Otros Rhizoctonia spp binucleados (Ceratorrhiza spp)

Los Rhizoctonia binucleados distintos de Rhizoctonia repens se dividen en grupos incompatibles (por anastomosis) y grupos capaces de fusin hifal. AG-A Estos aislados son capaces de fusin hifal entre miembros AG-A y CAG-Z. El testigo es el aislado ATCC76133 accesin C-157 aislado de Soja en Japn. Anamorfos descritos en este grupo Rhizoctonia candida, R. endophytica var endophytica, R. fragariae, R. ramicola. Teleomorfo: Ceratobasidium cornigerum, (Sin: C. ramicola) AG-B Estos aislados son capaces de fusin hifal con miembros AG-B. El grupo de subdivide en relacin a la frecuencia de anastomosis y caractersticas de cultivo. AG-Ba Estos aislados son capaces de fusin hifal con una frecuencia mayor o igual al 50% con AG-Ba y con una frecuencia menor al 30% con AG-Bb y/o AG-B. Esclerocios irregulares ( no esfricos) y grisceos. El testigo utilizado en la anastomosis es el ATCC 76134 , accesin C- 484 aislado en Miyagi, Japn. Anamorfo de este grupo: R. fumigata (= Sclerotium fumigatum) Teleomorfo desconocido AG-Bb Estos aislados son capaces de fusin hifal en alto porcentaje ( mayor o igual al 50%) con los miembros de AG-Bb y de baja frecuencia con AG-Ba y/o AG-B(0). Esclerocios esfricos y marrones. El asilado para testar la anastomosis es el ATCC 76135 accesin C-455 aislado en arroz en Fukuoka, Japn. Anamorfos descritos en este subgrupo: R. oryzae-sativae. (sinnimos: Sclerotium oryzae-sativae) teleomorfo: Ceratobasidium setariae (Sin: Hypochnus setariae) AGB(0) Estos aislados son capaces de fusin hifal a baja frecuencia con AG-Ba y/o AG-Bb. Las caractersticas de cultivo y morfologa son variables, pero difieren de AG-Ba y AG-Bb. La anastomosis se testa con el aislado ATCC 7616, accesin SIR-2, aislado de patata en Tokoshima, Japn.

AG-C Estos aislados son capaces de fusin hifal entre miembros AG-C y a veces AG-I. El testigo de anastomosis es el ATCC 76137 accesin OR-706, aislado de Gymmadenia conopsea en Hokkaido, Japn. Anamorfo: R. globulares Teleomorfo: Ceratobasidium cornigerum. AG-D Estos aislados son capaces de fusin hifal con AG-D y CAG 1. El aislado empleado para la anastomosis es el Atcc76138 accesin W-12 aislado en trigo en Hokkaido, Japn. Anamorfo: R.cereales Teleomorfo: Ceratobasidium gramineum /sin: C. cereale, Corticium gramineum) AG-E Estos aislados son capaces de fusin hifal entre miembros AG-E, CAG3 Y CAG&. El aislado de anastomosis es el ATCC76139, accesin F-18 aislado de Lino en Hokkaido, Japn. Anamorfo: R. mumenatii Teleomorfo: Ceratobasidium sp AG-F Estos aislados son capaces de fusin hifal entre miembros AG-F y CAG-4 y a baja frecuencia con AG-6. R. solani (fig 13) El aislado es ATCC 76140 accesin AH-6 aislado de cacahuete en Chiba, Japn. Teleomorfo: Ceratobasidium sp AG-G Estos aislados son capaces de fusin hifal entre miembros AG-G. El testigo es el ATCC76141 accesin AH-9 aislado de cacahuete en Chiba, Japn. AG-H Se fusionan con AG-. El aislado e el ATCC 76142 accesin , aislado en Tochigi, Japn. Teleomorfo : Ceratobasidium SP AG-I Se fusionan con AG-I y ocasionalmente con AG-C. El aislado e el ATCC 76143 accesin AV-2 , aislado en Artemisia, en Tokio, Japn. Anamorfo: R. fragariae Teleomorfo desconocido

AG-J Se fusionan con AG-J. El aislado es el ATCC 76432 en Kanto, Japn. Teleomorfo : Ceratobasidium sp. AG-K Se fusionan con AG-K. El aislado es el ATCC76142 cebolla en Hokkaido, Japn. Teleomorfo: Ceratobasidium sp. AG-L Se fusionan con AG-L. El aislado es el ATCC 76146 accesin FKO-2_26, aislado en el suelo en Fukuoka, Japn. Teleomorfo: Ceratobasidium sp AG-M Se fusionan con AG-M. Teleomorfo Ceratobasidium sp AG-N Se fusionan con AG-N. . El aislado es el ATCC 76148 accesin STc-43 , aislado en el suelo en Tochigi, Japn Teleomorfo desconocido AG-O Se fusionan con AG-O. El aislado es el ATCC 76149 accesin FKo-6-2 , aislado en el suelo en Fukuoka, Japn. Teleomorfo: desconocido AG-P Se fusionan con AG-P . El aislado es el ATCC 76150 accesin C-578 , aislado en T en Shizuoka, Japn Teleomorfo: Ceratobasodium cornigerum AG-Q Se fusionan con AG-Q. El aislado es el ATCC 76151 accesin C-620 , aislado en Grama en Chiba, Japn Teleomorfo: Ceratobasidium cornigerum accesin AC-1 , aislado en accesin , aislado en el suelo

AG.R Se fusionan con AG-R y CAG5 . El aislado es el ATCC 76144 accesin BN-37, aislado en meln en Georgia, USA Teleomorfo: Ceratobasidium sp AG-S Se fusionan con AG-S, CAG7 . El aislado es el ATCC76147 585) , aislado en Pitosporum en Florida , USA Teleomorfo: Ceratobasidium sp accesin Bn22 (FTCC

Grupo de anastomosis en Rhizoctonia spp multinucleados

Las especies multinucleadas de Rhizoctonia incluyen R. solani, R. zeae, R. oryzar. A esta fecha los aislados de Rhizoctonia solani se asignan a grupos de anastomosis AG y los aislados de Rhizoctonia zeae y Rhizoctonia oryzare han sido asignados a un grupo cada uno. La asociacin entre grupos de anastomosis, anamorfos y teleomorfos de Rhizoctonia spp se resumen en la tabla 2. Los aislados que representan grupos de anastomosis de Rhizoctonia multinucleados se pueden obtener en el American Type cultur collection 12301 Parklawn, Rockville MD 20852 USA El grupo de Rhizoctonia solani Los asilados de Rhizoctonia solani se asignan en relacin a la incompatibilidad de los grupos basados en la fusin hifal entre miembros de cada grupo. Bajas frecuencias entre grupos, por ejemplo AG3 y 8 se pueden usar para comparar relaciones genticas entre grupos de anastomosis (fig 14) Estas relaciones suponen que la secuencia de bases del DNA presenta homologas dentro y entre los grupos. Los aislados de Rhizoctonia solani han sido descritos utilizando los siguientes: Anamorfos: R. alba, R. aderholdii, W. alli, R. anomala = R.borealis, (renombrado como Moniliopsis anomala) , R.betae, R. brassicarum, R.dauci, R. dichotoma, R. dimorpha, R.fusca, R. gossipi, R. macrosclerotia, R. melongena, R. microsclerotia, R. napae, R. napaeae, R. napi, R.potomacensis, R. pratcola, R. rapae, R. solani var ambigua, R solani var brassicae, R. solani var cedri-deodare, R. solani var Cichoreii-endiviae, R. solani var hortensis, R-solani var lycopersicea, R.solani vat tytpica. Teleomorfos : Thanatephorus cucumeris (sin: Pellicularia sp) Los teleomorfos que han sido incorrectamente descritos bajo los nombres: Botryobasidium, Ceratobasidium, Costicium, Hypochnus. AG1-IA Se caracterizan por tener esclerocios relativamente esfricos y muy grandes 1-3 mm de dimetro. Homologa de la secuencia de bases del 98-100% entre miembros AGI-IA (tipo Sasaki) y baja homologa (50-56%) entre miembros AGI-IB . AGI-IA representa a AGI tipo 2. El testigo para la anastomatosis es el ATCC 76121, accesin CS-KA, aislado de arroz en HOkkaido, Japn Anamorfos: Sclerotium irregulare

Teleomorfo: T. cucumeris ( sin: Corticium sasaki, Hypochnus sasaki, Pellicukaria sasaki)

AGI-IB Esclerocios de forma irregular, pequeos, homologa de las bases de DNA alta (96%) entre miembros AH-IB y baja (50-56%) con AGI-AI AG-I-IB representa a ASGI tipo I La anastomosis se testa con ATCC 76122, accesin B-19 en Hokkaido, Japn. Anamorfo: R. microsclerotia, Teleomorfo: T cucumeris AGI IC Posee eclerocios redondeados, pequeos (0,2-0,8mm de dimetro). Las homologas entre bases de DNA son entre AG-I-IA y AGI-IB y no se4 ha determinado bien entre AGI-IC que representa al Ag1 DE Sherwood. El testigo para la anastomosis es el atcc76123, accesin BV-7, de remolacha azucarera en Hokkaido, Japn. Teleomorfo: T. Cucumeris AG2 Se fusionan con AGH2, AG-BI y a baja frecuencia con AG 8 Teleomorfo: T. cucumeris AG2 se divide en varios grupos: AG-2-1 La fusin hifal se da con frecuencia alta (mayor o igual al 50%) en tre AG 2-1 y baja (menor al 30%) entre AQG-2-2 Son autrtofos de Tiamina y exiben una homologa de las bases del DNA con AG-2-1 del 100% y una homologa baja ( 37,6 al 40%) entre AG2-IIIB y AG2-2IV (43-49%) La anastomosis se testa con el aislado ATCC 76168 accesin P-S 4 aislado de guisante en Tokushima, Japn. Anamorfos: R.solani, var brassicae AG-2-2IIIB Se fusionan a alta frecuencia con AG2-2 y a baja con AG 2-1. Son autrtofos de Tiamina. Los cultivos crecen a 35C. La homologa d elas bases de DNA es del 98% con AG-2 2-IIIB, baja (68-79%) con AG2- 2IV y muy baja (38-40%) con A 2-1. Se testa con el ATCC76124, accesin C-96, aislado en Ubakari, Japn AG3 Son auttrofos de Tiamina y se fusionan con AG3 y AGBI y a baja frecuencia con AG8. Poseen una homologa de las bases de DNA del 100% con AG3 El testigo es ATCC 76167 accesin 5X.11-6, aislado en patata en Hokkaido, Japn. Anamorfo : R. solani var typica Teleomorfo : T cucumeris.

AG4 Son auttrofos de Tiamina y se fusionan con AG4 Anamorfos: R.- pratcola, R. solani var cichoii-endiviae. Telemorfos: T. pratcola ( sin : Ceratobasidium pratcola, Corticium pratcola, Pellicularia pratcola) AG4 se divide en varios grupos: AG4-HG-I Esclerocios marrn oscuros en PDA, alta homologa de las bases de DNA (89-93%) y baja (31-48%) con AG4-HG-II El testigo es ATCC 76126 accesin AH-I aislado en cacahuete en Chiba, Japn. AG4 HG-II Los esclerocios son gris o blancos en PDA, alta homologa de las bases de DNA (89100%) entre su grupo y baja (31-48%) con AG4-HGI El testigo es ATCC 76127 accesin Rh-165 aislado en remolacha de azcar en Hokkaido, Japn.

AG-5 Son auttrofos de Tiamina, se fusionan con AG5. Alta homologa de las bases de ADN con su grupo. El testigo es ATCC 76128, accesin GM-10 aislado de soja en Pagano, Japn. Teleomorfo : T. cucumeris AG6 Aislados auttrofos de Tiamina, capaces de fusionarse con su grupo y a baja frecuencia con AG8 y AGBI o con R. solani y AGF o Rhizoctonia spp binucleados Teleomorfo: T.cucumeris AG6 se divide en varios grupos: AG6 HG-I Homologa del 92-98% y baja (48-63%) con AG6GV. El testigo es ATCC 76129, accesin OHT-I-I, aislado del suelo en Hokkaido, Japn. AG6 GV Homologa con su grupo del 48-63%. Grupo heterogneo. El testigo es ATCC 76130 accesin NKN-2-1, aislado del suelo en Hokkaido, Japn. AG7 Son auttrofos de Tiamina y se fusionan solo con los de su grupo. Homologa del 99%. El testigo es ATCC 76131, accesin HO-1556, aislado del suelo en Kagawa, Japn.

AG8 Se fusiona a alta frecuencia (mas del 50%) con su grupo. A baja (menos 30%) con AG3, AG6 y AGBI y AG2. El testigo es ATCC 76106, accesin W-5651 , asilado en trigo en Washington, USA Teleomorfo: T. cucumeris AG9 Se fusiona solo con su grupo. El testigo es ATCC 62804, accesin 521 aislado del suelo en Palmer, Alaska, USA Teleomorfo: T. cucumeris AG9 se divide en varios grupos: AG9TP Auttrofo de Tiamina y alta homologa (94%) con su grupo. Baja (78-87%) con AG9TX AG9TX Auttrofo de Tiamina, alta homologa (94%) con su grupo y baja (78-87%) con AG9TP AG10 No est bien estudiado, solo se fusiona con su grupo. Testigo ATCC 76107, accesin W-399, aislado de cebada en Washington, USA Teleomorfo T.cucumeris AGBI Auttrofos de Tiamina, alta homologa (91-97%) con su grupo. Se fusiona con AGBI y AG2, AG3, AG6 y AG8. El aislado es el ATXCC 76132, accesin TS-2-4, aislado del suelo en Hokkaido, Japn. Otros Rhizoctonia spp binucleados

WAG-Z Se fusionan con su grupo. El testigo es ATCC 76155, accesin C-505, aislado de arroz en Yamagata, Japn. Anamorfo: Rhizoctonia oryzicola. Teleomorfo: Waitea circinata A veces decrito como: Rhizoctonia endophytica var filicata, Sclerotium oryzicola. Teleomorfo: Waitea circinata WAH-O Se fusionan con su grupo. El testigo es el ATCC 76154 accesin C-521 aislado en el suelo en Fukuy, Japn. Anamorfo: Rhizoctonia oryzae ( renombrado como Moniliopsis oryzae). Teleomorfo: W. circinata

Rhizoctonia dudosos Los siguientes aislados asignados a Rhizoctonia se consideran dudosos . Especies excluidas Las siguientes especies se excluyen de Rhizoctonia porque incluyen caracteres morfolgicos que no entran en el concepto de gnero

VII Caractersticas comunes de aislados de grupos de anastomosis de Rhizoctonia spp

Los aislados que comnmente se asignan a los grupos de anastomosis pueden variar considerablemente en relacin al hospedante, muchos aislados pueden no ser patgenos. En contraste los aislados a signados a diferentes grupos provocan los mismos sntomas en los hospedantes ms comunes. Por ejemplo, algunos aislados de Rhizoctonia fragariae pertenecientes a AG-G y algunos AG-I son Rhizoctonia spp binucleados. Sin embargo hay algunas caractersticas comunes a los aislados dentro del grupo de anastomosis. Lo describiremos a continuacin: Rhizoctonia repens y Rhizoctonia anaticula forman asociaciones con micorrizas de orqudeas AG-A (==CAG2) Son patgenos que causan pudricin de la raz en fresa, dumping off en remolacha azucarera, juda, tomate, meln, girasol, espinacas, pepino, lechuga, enmarronamiento en vainas de cacahuete y daos en patata. Algunos aislados micorrizan con orqudeas AG-Ba Son patgenos que causan daos en arroz, en Echinochloa crusgalli subsp submitica var typica y en mijo. AG-Bb Son patgenos del arroz, mijo AG-B-(0) (otros) Patgenos del arroz AG-C Tambin llamado ACI, patgenos poco importantes, algunos micorrizan orqudeas. Se han aislado en remolacha azucarera, trigo y trbol AG-D (=CAG1) Patgenos que atacan a cereales, gramneas, trigo, remolacha azucarera, cebada, trbol, cebollas y guisantes. Lesionan tallos de tomate, algodn y soja. Atacan a Juncos effusus y se han asilado en mijo y trbol.

AG-E (=CAG3,6) Patgeno que ataca a juda, guisante, cebolla, lechuga, patata, tomate, rbano, soja, cacahuete, remolacha azucarera azalea, y camping off en plntulas de pino. Algunas forman micorrizas con orqudeas. Se ha aislado en arroz AG-F (=CAG4) Patgenos de juda, rbano, cebolla, cacahuete, lechuga, tomate y guisante. Se ha asilado de trbol y rbano, tomate, algodn AG-G Patgenos que afectan a fresa, camping off en remolacha azucarera, juda, guisante, tomate, meln y girasol. Los aislados atacan a las vainas del cacahuete. AG-H No se han descrito plagas en este grupo AG-1 Antes se llamaba AGC. Son patgenos de fresa. Se ha aislado en remolacha azucarera. Algunos forman micorrizas con orqudeas. AG-J No se han descrito plagas en este grupo AG-K No se han descrito plagas en este grupo. Estos hongos se han aislado en plntulas de remolacha azucarera, rabanitos, tomate , zanahoria, cebolla y cereales. AG-L No se han descrito plagas en este grupo AG-M No se han descrito plagas en este grupo AG-N No se han descrito plagas en este grupo AG-O No se han descrito plagas en este grupo AG-P provoca daos en hojas de t. Los basidiosporas no son repetitivas AG-Q Patognicos de csped AG-R patognico de juda, guisante, rbano, cebolla, soja AG-S No se han descrito plagas en este grupo. Se ha aislado en azalea WAG-Z Causa daos en trigo y arroz, en mijo, en plntulas de pino, en csped. Necesita 33C para criar bien. Rhizoctonia oryzae WAG-O Causa daos en arroz, en hojas de trigo y en el sorgo. Ataca a cereales y gramneas. Necesita ptimos de 32C para crecer

Rhizoctonia solani AG1-1 A (= AG tipo1) Crece rpidamente, 30 mm/da a 28-30C. Su ptimo es a 30C AG 1 IC (AG1 TIPO 3) Patgeno virulento que se cra en climas fros, causa camping off a zanahoria, alforfn, lino soja y pino AG 1 inespecfico Patgeno de remolacha azucarera, col, repollo, judas y soja. AG2-1 Este grupo tiene crecimiento lento (13mm/da a 25C). Son patgenos de cultivos de invierno formando esclerocios rojos en forma de anillo. Causa camping off en crucferas, fresa, tabaco japons, tulipn y en trbol subterrneo AG2-2IIIB Es un grupo que crece a altas temperaturas (ptimo aproximadamente 30C). Son patognicos de arroz, jengibre, gladiolos, csped, trigo, remolacha azucarera, batata y provoca camping off en plntulas de rboles, crisantemos y batata china. AG2-2IV Patgeno de remolacha azucarera, csped AG2-2-2 (inespecfico) AG3 Crece unos 12mm/da a 25C. Patgeno de patata, tomate y tabaco. AG-4 Se define como tipo pratcola. Segn algunos autores representa a algunas especies (R. pratcola. Teleomorfo: T. pratcola). Se suele aislar del suelo con plantas infectadas en pases de clima hmedo. Ataca a tomate, guisante, espinaca, patata. Camping off en pinos y otros hospedantes en estado de plntula, cebolla, guisante, patata y juda. Hay aislados no patgenos que protegen a rabanitos, zanahoria, algodn, patata y trigo de camping off, estimulando el crecimiento de la planta. AG-5 Patgenos dbiles de patata, csped, juda, soja y azuki. Algunos se micorrizan con orqudeas

AG-6 No son patgenos, algunos micorrizan a orqudeas. AG-7 no son patgenos AG-8 Patgeno de cereales AG-9 Patgeno de crucferas, patata pero menos patognicos que AG-3 AG-10 Probablemente no son patgenos AGBI no son patgenos AGUNK Patgeno de de arroz, no se fusionan con ningn grupo.

IX Rhizoctonia spp asociadas a orqudeas

La asociacin de Rhizoctonia Spp con orqudeas surge pronto en el desarrollo de estas plantas, hay 3 grupos de orqudeas que son micorrizadas. La asociacin de orqudeas de Rhizoctonia spp es esencial en muchos casos para la germinacin de las semillas y el consiguiente desarrollo de la planta. Ha sido observado que con adicin de fsforo y otros minerales, a asociacin del hongo provee a las pequeas semillas de recursos de carbono, as como de vitaminas y factores de crecimiento. En algunos casos se observa que las hifas de Rhizoctonia Es degradada en las clulas de la orqudea. No est claro si es una forma de proteccin de la planta de la patognesis o si es un mecanismo de absorcin de nutrientes. El balance entre la orqudea y la Rhizoctonia es muy delicado en muchos casos las semillas o las plntulas son matadas por el hongo. Los aislados de Rhizoctonia spp constituyen un gran grupo de endositos asociados con las races de las orqudeas . Pero muchos de ellos no han sido bien identificados como especies o grupos de anastomosis. Se han asignado endositos parecidos a Rhizoctonia con orqudeas australianas a 5 grupos de anastomosis (Ramsey 1987) Rhizoctonia repens (Tulasnella calospora) ha sido identificada como ubiquista y como micorriza de orqudeas ( Warcup,1981) Otras Rhizoctonia binucleadas spp como R. goodyerare-repentis (Ceratibasidium cornigerum) en Goodyer repens y otras especies. Tambin hay Rhizoctonia spp multinucleadas (R.Solani, Thanatephorus cucumeris, T. pennatus) han sido identificados como micorrizas de orqudeas. Rhizoctonia anaticula, que es similar a R. repens se ha aislado en races de orqudeas en Canad. Rhizoctonia stahii y R. mucoroides en especies de Dactylorrhiza. Se han identificado un considerable nmero de teleomorfos de Rhizoctonia spp asociados con orqudeas australianas : Tulasnella allantospora, T. asimtrica, T. calospora. T.crociata, T. irregularis, T. Violea. Cerartobasidium angustiforium, C. cornigerum, C. glkobisporum, C. sphaerosporum, C. obscurum, C. Papillatum, Thanatephorus cucumeris, T. sterigmaticus, T. orchidicola, Ypsilonidum anomalum, Y. sterigmaticum y Y. langlerregis. Una simple raz puede ser micorrizada por varios hongos de diferentes especies. Los hongos aislados de Calypso bulbosa incluyen R. anaticula, Rhizoctonia spp no identificados y Thanatephorus pennatus. La especificidad de la asociacin micorrcica se da en distintos niveles, desde especies a subtribus. Todas las especies de la familia Caldeninae se asocian con Sebacina vermifera excepto Lyperathus que se asocia con un amplio rango de hongos. Las orqudeas Microtus y Prasophyllum se asocian con diferentes endositos a pesar de ser las dos Prasiphyllinae.

Muchos aislado de Rhizoctonia spp que establecen relaciones micorrcicas exhiben una especificidad con el hospedante, mientras otros tienen un amplio rango. Se ha documentado una considerable especificidad entre muchas orqudeas y sus endositos. Tulasnella calospora se asocia con Thelymitra y Dendrobium. Ceratobasidium cornigerum se asocia con Prrasophyllum y Pterostylis Otro Ceratobasodium spp se asocia con Sarcanthinae. Sebacina vermifera con Caladenia. La especificidad no es absoluta y varios Rhizoctonia spp pueden asociarse solos o con otros endositos. Algunas orqudeas se asocian con un amplio rango de endositos. La no especificidad se ha encontrado en aislados de Rhizoctonia solani, R. repens, Y R. stahlii aislados de 15 especies de diferentes orqudeas. Todas ellas forman asociaciones micorrcicas con plntulas de Blassolaelioca talega en Japn. En otro estudio 54 aislados de C. cornigerum, R. repens y Rhizoctonia solani se obtuvieron de 20 especies de orqudeas con xito. Un asilado de C. cornigerum (AG-C) se obtuvo de Gymmadenia camschatica prob ser una efectiva simbiosis con Spiantis sinensis. Rhizoctonia stahlii es simbitica de Dactylorrhiza spp. Varios aislados de Rhizoctonia spp que micorrizan orqudeas y otros hospedantes han sido evaluados para ver sus efectos en la germinacin de semillas de 10 orqudeas norteamericanas y europeas. Ceratobasidium cereale estimula la germinacin de 4 especies . Sin embargo Thanatephorus pennatus y C. obscurus no son efectivas.