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AUTOMATIZACIN EN HEMATOLOGA La automatizacin esta establecida firmemente dentro del laboratorio de hematologa.

La hematologa automatizada ha evolucionado de tal forma, que ahora podemos obtener el resultado de una biometra completa en menos de 40 segundos, incluyendo una serie de seales que permiten al analista identificar de manera inmediata las alteraciones hematolgicas de un paciente. La evolucin de la instrumentacin en hematologa se inici a mediados del decenio de 1950. En este tiempo, los profesionales del laboratorio clnico, practicaban manualmente conteos de eritrocitos en el hematocitmetro, hematcritos con centrifugacin, hemoglobinas determinadas espectrofotomtricamente y exmenes microscpicos de frotis de sangre. Existen dos tipos de equipos automatizados segn su funcionamiento; uno por impedancia y el otro por dispersin de luz .Todo equipo automatizado, suministra dos tipos de resultados: un informe numrico y un informe grafico (histogramas), y ambos poseen un software que contiene toda la informacin utilizando abreviaturas en ingles de utilidad en el informe. Instrumentos Automticos Para Conteo De Clulas Sanguneas * Instrumentos de Impedancia El principio de impedancia en el conteo de clulas sanguneas se basa en el aumento de la resistencia producida cuando una clula sangunea con baja conductividad pasa a travs de un campo elctrico. El nmero de intermitencias indica la cifra de clulas sanguneas y la amplitud de cada intermitencia es proporcional al volumen de la clula. Ejemplos de instrumentos con este principio son el Contador Coulter, los instrumentos TOA Sysmex y los instrumentos Abbot Cell-Dyn. Contador Coulter Serie S-Plus En 1983, la Coulter Corporation introdujo el contador Coulter S-Plus IV, un analizador automtico, multiparmetro. El conteo de las clulas sanguneas se basa en el principio Coulter de la impedancia. Estas clulas eran diluidas en un diluyente conductor elctrico y dos electrodos estaban suspendidos en esta dilucin separados por una abertura. Al pasar las clulas individualmente a travs de la abertura hay un aumento en la resistencia entre los electrodos proporcional al volumen de a clula. Se establecen lmites umbrales para el conteo de cada poblacin de clulas con base en el volumen celular. Haba dos cmaras de conteo que operaban simultneamente, una contaba los eritrocitos y las plaquetas y otra los leucocitos. Cada cmara de conteo tiene tres aberturas separadas para efectuar un anlisis por triplicado y comparar internamente los resultados con objeto de identificar errores. Los histogramas se crean para las poblaciones de eritrocitos (eritro), leucocitos (leuco) y plaquetas (PLT) basadas en el volumen celular (fL) y numero relativo de clulas. Estos histogramas permiten la observacin de las poblaciones de clulas, su tamao promedio respecto al resto de la poblacin y su nmero relativo. Los datos obtenidos a partir de la dilucin de eritrocitos/plaquetas incluyen conteo de eritrocitos por medicin directa, VCM, y ADE. El hematocrito se calcula a partir del VCM y de la cifra de eritrocitos. La HCM y la CHCM se calculan con la cifra de eritrocitos y el VCM, y la

concentracin de hemoglobina que se obtiene de la cmara del conteo de los leucocitos. El conteo de plaquetas tambin se obtiene de esta dilucin, as como el VPM y la ADP. Contador Coulter STKS Usa una combinacin de tecnologa para enumerar eritrocitos, plaquetas y leucocitos y para determinar un conteo diferencial de cinco partes. Se emplea el principio bsico de la impedancia para realizar conteos celulares y derivar los histogramas de eritrocitos y plaquetas. El diferencial de cinco partes se determina con tecnologa VCD. El instrumento aspira una muestra de sangre con EDTA y la divide en tres porciones. Los conteos de eritrocitos y plaquetas se determinan dentro de una abertura y los conteos de leucocitos y las determinaciones de la hemoglobina se obtienen por una segunda abertura. Los datos de cada abertura se acumulan y revisan por la computadora. La tercera porcin de la muestra de sangre se enva a una cmara de muestra en donde se prepara una dilucin con el uso de un agente ltico que elimina a los eritrocitos, pero conserva a los leucocitos en un estado casi natural. Tambin se agrega un estabilizador para conservar la integridad de los leucocitos. Esta dilucin es analizada dentro de la celdilla de flujo del transductor triple para obtener el conteo diferencial de cinco partes. Las clulas pasan a travs de la celdilla de flujo una por una mediante enfoque hidrodinmico, incluyendo volumen celular, conductividad celular y las caractersticas de dispersin de la luz de la clula. El volumen de las clulas se determina por impedancia, la conductividad de la clula mediante una sonda electromagntica de alta frecuencia y las caractersticas de dispersin de la luz se determinan por medio de un laser de helio-nen. Se crean diagramas de dispersin bidimensionales y se muestran por el sistema de administracin de datos. Los diagramas de dispersin y los histogramas tambin se pueden usar para detectar anormalidades o subpoblaciones de clulas. La ms nueva tecnologa agregada al instrumento Coulter STKS es el anlisis del reticulocito. Este anlisis usa el colorante supravital, nuevo azul de metileno, para teir al RNA residual. La muestra teida se analiza con tecnologa VCD para determinar la cifra de reticulocitos. Con esta metodologa el Coulter STKS tiene la capacidad de practicar una BHC con cifra diferencial y de reticulocitos. Sysmex NE-8000 Es un instrumento de hematologa completamente automatizado fabricado por TOA Medical Electronics Company. Es capaz de practicar conteos de clulas sanguneas, determinaciones de hemoglobina y diferenciales de cinco partes. El conteo de las clulas sanguneas se basa en el principio de impedancia con conteos celulares e histogramas obtenidos mediante el anlisis de una dilucin de clulas sanguneas. El diferencial se cinco partes se obtiene a travs de una combinacin de tecnologas: impedancia, radiofrecuencia y lisis de clula diferencial. Los eritrocitos y plaquetas se cuentan a partir de una dilucin y la cifra de los leucocitos y determinacin de la hemoglobina se obtienen de una segunda dilucin que contiene un agente levemente ltico.

El agente ltico lisa los eritrocitos y convierte a la hemoglobina en cianometahemoglobina, pero mantiene a los leucocitos. El uso de enfoque hidrodinmico en el proceso del conteo celular minimiza los problemas causados por coincidencia, deformabilidad del eritrocito y recirculacin de la clula ya contadas. En vez de usar lmites de umbral establecidos para efectuar la diferencia de las poblaciones de clulas el NE-8000 usa discriminacin automtica. Los discriminadores automticos (limites flotantes de umbral) permiten que se ajuste la variacin de paciente a paciente con cada muestra y definen por tanto con mayor claridad cada poblacin celular. Adems de los conteos de clulas tambin se generan histogramas para las cifra de eritrocitos y de plaquetas. Al igual que los otros por impedancia, la computadora repasa los datos obtenidos de cada dilucin y deriva o calcula parmetros adicionales de eritrocitos y plaquetas. Los parmetros incluyen: * V-DWER coeficiente de variacin de la amplitud del la distribucin del eritrocito. * SD-DWER la amplitud de la distribucin de la poblacin de eritrocitos. Juntos estos parmetros se usa para la identificacin de anormalidades del eritrocito. La informacin obtenida de los tres bloques de deteccin separados se rene para dar el diferencial de cinco partes. El primer bloque de deteccin usa una combinacin de impedancia y radiofrecuencia para generar un histograma trimodal y dos dispersogramas bidimensionales para representar a las poblaciones de linfocitos, monocitos y granulocitos. La radiofrecuencia da informacin sobre el tamao nuclear y la densidad celular, y la impedancia refleja el tamao de la clula. Los eosinfilos y basfilos se enumeran en bloques de deteccin separados que usan agentes lticos celulares especficos e impedancia, se generan histogramas para estas dos poblaciones celulares. La cifra de neutrfilos se obtiene restar las cifras de eosinfilos y basfilos de la poblacin de granulocitos. * Instrumentos de Dispersin de Luz El principio de la dispersin ptica de la luz en el conteo de clulas sanguneas se basa en las mediciones de la dispersin de la luz obtenidas de una sola clula sangunea que pasa ata travs de un haz de luz (ptico o lser). Estas clulas crean una dispersin hacia delante y lateral las cuales se detectan mediante fotodetectores .El grado de dispersin hacia delante es una mediacin del tamao de la celular mientras que el lateral es una medicin de la granularidad de la clula. Ejemplos de instrumentos que atizan este principio son los Technicon H System. Sistema Technicon H*1 Aspira una muestra de sangre con EDTA y procesa porciones de esa muestra a travs de cuatro canales separados. El canal de eritrocito/plaqueta determina los conteos de eritrocitos y plaquetas por medio del anlisis de las mediciones de la luz esparcida al pasar las clulas diluidas, una por una, a travs de un rayo laser de helio-nen. El diluyente usado para el conteo de los eritrocitos y plaquetas causa formacin esfrica isovolumtrica de

los eritrocitos, la cual elimina errores de volumen celular a causa de variaciones en la forma de esta clula. Los eritrocitos se cuentan y se miden por medio de clculos con dispersin de luz tanto de ngulo alto como de ngulo bajo. La concentracin de la hemoglobina de eritrocitos individuales y el volumen celular se pueden determinar con base en estas mediciones; as como pueden obtenerse el VGM, la CMHG, la ADE y la ADH. Juntas estas mediciones permiten la generacin de un citograma del eritrocito e histogramas del eritrocito, de la concentracin de la hemoglobina y de las plaquetas. Dentro del canal de la hemoglobina se mezcla una porcin de sangre con EDTA con el diluyente de la hemoglobina. Los eritrocitos se lisan y la hemoglobina libre se convierte en cianometahemoglobina. El conteo de los leucocitos y el diferencial de cinco partes se obtienen mediante el uso de dos mtodos distintos y dos canales separados, el canal de peroxidasa y el canal de basfilo/lobularidad. En el canal de peroxidasa se identifican neutrfilos, monocitos y eosinfilos de acuerdo con el grado de positividad y a la cantidad de dispersin. Los linfocitos y las clulas grandes no teidas se identifican por la cantidad de dispersin de la luz y por el hecho de no teirse por tincin citoqumica de peroxidasa. Instrumentos Automticos Para Coagulacin Los primeros instrumentos analizaban el sistema de coagulacin a travs de la deteccin de la formacin del cogulo. El coaguloviscmetro, determin los tiempos de coagulacin al medir el cambio en la viscosidad de la sangre conforme se coagulaba. El cambio en la viscosidad se determina mediante el registro del voltaje contra el tiempo. Un segundo mtodo fue el del nefelmetro el cual fue adaptado para las pruebas de coagulacin. En nefelometra el tiempo de coagulacin se determinaba al medir las variaciones en la transiluminacin registrada por un galvanmetro. Los dos principios de coagulacin basados en cogulos usados actualmente por los instrumentos sobre coagulacin son la densidad electromagntica y la ptica. Otros instrumentos disponibles usan una combinacin de estos principios. * Instrumentos Electromecnicos BBL FibroSystem Este sistema est constituido por un contador del tiempo de coagulacin Fibrmetro, un bloque de preparacin trmica para precalentamiento de los reactivos y las muestras a 37 C y una pipeta automatizada para integrar la cantidad apropiada de muestra o del reactivo al pocillo de la prueba. La sonda del Fibrmetro acta como el detector del cogulo. La sonda esta constituida por dos electrodos sensores un estacionario y un mvil, as como por un pie sonda, el cual es una extensin del electrodo mvil. El electrodo mvil realiza un ciclo a travs de la mezcla de reaccin en un patrn elptico creado por la elevacin y descenso del pie de la sonda. Se vuelve elctricamente activo cuando esta por enzima de la muestra de reaccin, al formarse el cogulo de fibrina este se capta por el gancho pequeo en la punta del electrodo mvil. El electrono estacionario permanece en la mezcla de reaccin y es responsable del establecimiento del potencial elctrico entre los dos electrodos. El circuito elctrico se cierra cuando el electrodo mvil se activa al moverse fuera

de la mezcla de reaccin; la corriente fluye desde el electrodo estacionario a travs de la mezcla de reaccin y el cogulo de fibrina hasta el electrodo mvil. La creacin de este circuito elctrico hace que el contador de tiempo se detenga y se registre el tiempo de coagulacin en segundos. ST-4 American Bioproducts Es un instrumento semiautomtico para pruebas de coagulacin que se basa en el principio de la deteccin electromecnica del cogulo. ste es un instrumento constituido por un incubador de 16 posiciones con cuatro canales de incubacin y contadores de tiempo separados, una pipeta de suministro, pozos de almacenamiento del reactivo con termostato a temperatura ambiente y a 37 C, cuatro celdillas separadas para anlisis de muestra y un sistema de microprocesador. El principio de esta variacin en la deteccin del cogulo se basa en la viscosidad creciente del plasma al formarse el cogulo. La viscosidad creciente se detecta por el movimiento de una bola de hierro situado en el fondo del pocillo de reaccin. Se crea un movimiento pendular de la bola al alterar un campo electromagntico en los lados opuestos del recipiente con el uso de dos impulsores enrollados independientes. Al comenzar la formacin del cogulo la viscosidad del plasma aumenta y hay una disminucin correspondiente en el movimiento de la bola, el tiempo de coagulacin se determina del algoritmo de las variaciones en la amplitud de la oscilacin. Los resultados del tiempo de coagulacin se muestran en el monitor de cristal lquido y se obtienen resultados impresos en la impresora trmica. * Instrumentos de Densidad ptica MLA Electra 9000 Es un instrumento para coagulacin automtico con capacidad para practicar mltiples pruebas de anlisis en acceso aleatorio. Es un instrumento separado constituido por un sistema de transporte de recipientes, un sistema de computacin con dispositivos de monitor y teclado, un sistema de almacenamientos de reactivos y un sistema de calentamiento de reactivos. Este instrumento se basa en un muestreo manual del espcimen del paciente, pero con muestreo automtico de los reactivos. El procedimiento de la prueba se programa por el recipiente coloreado de reaccin especfica. El movimiento de un reactivo se logra por la accin de una bomba peristltica. El sistema de transporte del pocillo mueve al recipiente de reaccin a la posicin adecuada para su vigilancia por un fotodetector. La adicin del reactivo precalentado final inicia el conteo del tiempo. Al iniciarse la formacin del cogulo de fibrina, la cantidad de luz detectada por el fotodetector disminuye y da lugar a un cambio en la produccin de la seal elctrica del detector, la cual es analizada por la computadora para determinar el tiempo de coagulacin. Organon Teknika Coag-A-Mate X2 Es un instrumento automtico que usa el cambio en la densidad ptica producida con la formacin de cogulo como principio para la deteccin de este. El instrumento consiste en un sistema de almacenamiento de reactivo refrigerado, un sistema de calentamiento de reactivo,

placa de prueba para incubacin, sistema de fotodeteccin y sistema de microprocesamiento. La bandeja de la prueba se sita sobre la placa de prueba de incubacin para mantener las muestras en una temperatura fra antes de la prueba. Los reactivos se precalientan al pasar a travs del brazo incubador de reactivos y se vierten en el recipiente apropiado de la prueba. Cuatro recipientes de prueba entran a la zona de calentamiento cada vez. La mezcla de reaccin se calienta a 37 C. La adicin del reactivo final al recipiente de la prueba inicia el contador de tiempo. La clula fotoelctrica detecta el cambio sbito en la densidad ptica producida con la formacin de la fibrina y el contador de tiempo se detiene. Los resultados se imprimen en cinta para impresin. Este instrumento tiene la capacidad de realizar dos pruebas simultneamente: dos pruebas distintas, dos pruebas similares en duplicado o cuatro pruebas similares practicadas por separado. Tambin tiene la capacidad de practicar la mayor parte de los anlisis de la coagulacin basados en cogulo. Sistema Koagu Lab 60-S de Ortho Diagnostic Esta formado por un panel de exhibicin de mensajes, un teclado de membrana, cuatro pozos para reactivos, cuatro bombas de reactivo peristlticas, u brazo de reactivos, un carrusel para muestras con cuatro fotodetectores y una impresora trmica. Las muestras centrifugadas se colocan en el carrusel de muestras del autocarga, y se programan los procedimientos de la prueba por realizarse en cada muestra a travs del autocargador mediante el teclado o con el lector del cdigo de barras. Las muestras se vierten con la pipeta a la bandeja de recipientes desechables. El autocargador tiene la capacidad de practicar diluciones de muestras para anlisis del fibringeno o para anlisis de factor. Cuando se completa la carga de las muestras, se inicia el ciclo de la prueba al presionar la tecla RUN. Despus del periodo de incubacin apropiado, los reactivos refrigerados se recalientan a 37 C al pasar a travs del brazo del reactivo antes de verterse en los recipientes de las pruebas. Con la adicin del reactivo final en el recipiente de prueba se inicia el mecanismo del contador de tiempo. Una celdilla fotodetectora detecta el cambio en la densidad ptica al producirse la formacin del cogulo y el tiempo se detiene. La formacin de los cogulos se vigila durante la totalidad de la reaccin y proporciona una representacin grafica de la turbidez de la reaccin respecto del tiempo de reaccin de cualquier anlisis en proceso. La firma del cogulo del tiempo de protrombina se puede usar para dar una medicin cualitativa del fibringeno. La mayor parte de los anlisis de coagulacin basados en cogulo se pueden practicar en este instrumento. * Instrumentos de Deteccin de Cromgeno/Cogulo MLA Electra 1000C Es un instrumento para coagulacin completamente automtico constituido por dos unidades, un MLA Electra 900C y un tubo primario automtico para muestreo. El instrumento es capaz de practicar anlisis basados en cogulo y anlisis cromgenos. El instrumento se programa para practicar el anlisis cromgeno especfico con el uso del modo de seleccin de prueba. El tubo primario de muestreo suministra la cantidad apropiada de la muestra del paciente en el recipiente de reaccin y coloca el recipiente en la banda de transporte. Cuando el recipiente de reaccin alcanza la estacin de prueba, se agrega el reactivo mediante la accin de una bomba peristltica. Un fotodetector vigila la velocidad de cambio en la densidad ptica al formarse el producto colorido. La reaccin entre el sustrato del reactivo y el material analizado libera la paranitroanilina cromfora que se mide a 405 nm.

El instrumento toma una serie de lecturas y determina la linearidad de los datos y el cambio en la absorbancia por minuto. Este cambio en la absorbancia se compara con la curva de calibracin de referencia programada en el instrumento por el laboratorio. El resultado final se determina a partir de esta curva y se informa en las unidades apropiadas. Instrumetation Laboratory ACL 3000 Es un instrumento de coagulacin centrifuga, completamente automtico capaz de practicar anlisis basados en cogulo y anlisis cromgenos. Las muestras del paciente se cargan en la bandeja, el suministro por pipeta de las muestras y los reactivos se vierten con pipeta a los recipientes desechables de reaccin sobre un rotor. Inicialmente la muestra y los reactivos estn separados por un borde, pero cuando el rotor gira a una velocidad de 1,200 rpm y la temperatura de reaccin se estabiliza a 38.5 C, el movimiento centrfugo fuerza a las muestras y reactivos a unirse en el pozo exterior del recipiente de reaccin. La centrifuga se detiene bruscamente una vez obtenida una muestra homognea de reaccin. El sistema de medicin del anlisis es la nefelometra y el tiempo de coagulacin se determina a partir e la curva de coagulacin, mientras que el sistema de medicin para el anlisis cromgeno es la fotometra. Los resultados del paciente se calculan con base en la comparacin y se informa en las unidades apropiadas. Citometra de Flujo Fue introducida en el laboratorio clnico en el decenio de 1980. La informacin obtenida a travs del anlisis citomtria de flujo ha mejorado la capacidad para el diagnostico de ciertos estados patolgicos para el establecimiento de sus etapas, y para vigilar sus intervenciones teraputicas. * Principios Bsicos La citometra de flujo es el anlisis de las caractersticas de las clulas que pasan una a una en una suspensin liquida a travs de un haz de luz. La luz esparcida y la intensidad de la fluorescencia se miden por un conjunto de fotodiodos, los datos coleccionados por los fotodiodos se transmiten a la computadora para su procesamiento subsecuente y la produccin de datos. Los componentes bsicos de un citmetro de flujo con el sistema lquido, el sistema ptico, el sistema detector de seal y el sistema de manejo de los datos. El sistema lquido tiene la responsabilidad del movimiento de la muestra a travs de la cmara de flujo desde su aparicin hasta su descarte como desecho. Mediante enfoque hidrodinmica se crea una suspensin de clulas simples dentro de la vaina liquida, al aspirarse la muestra, una presin diferencial entre el flujo de la muestra y el flujo de la vaina liquida crea una corriente central con la muestra rodeada por la vaina liquida y evita la mezcla de la muestra con el liquido de la vaina. Las clulas pasan a travs del haz laser en fila nica a una velocidad de 5,000 clulas por segundo. En el laboratorio clnico la fuente se luz comnmente usada para citometra de flujo es el laser de ion de argn. Las caractersticas importantes de la luz laser son su alta radiacin, estabilidad

y pureza espectral. La ventaja de la luz laser es la capacidad de enfocar el haz de luz monocromtica en un rea igual a las dimensiones de la clula. En enfoque del laser se logra por una serie de lentes que dan forma de haz. Al pasar la clula a travs del haz laser, dispersa la luz y los fluorocromos la absorben y la emiten nuevamente a una longitud de onda distinta. La luz se esparce en ngulos diferentes; la dispersin hacia delante (ngulo bajo) define el tamao de la clula, y la lateral (ngulo de 90) la granularidad o estructura nuclear. La intensidad de la fluorescencia es proporcional a la cantidad de fluorocromo presente sobre o dentro de ella. La coleccin de la luz dispersa y de la emisin fluorescente se logra a travs de un conjunto de filtros de interferencia o de espejos bicrticos, o de ambos que dirigen la luz a los fotodiodos y a los tubos fotomultiplicadores (TFM) son tiles en la coleccin y amplificacin de la luz dispersa y de las emisiones fluorescentes laterales mas dbiles. El citmetro de flujo tiene un detector de dispersin lateral y un detector de fluorescencia. El nmero de detectores de fluorescencia depende del nmero de longitudes de onda distinta por detectarse. La mayor parte de los citmetros de flujo usados en el laboratorio tienen la capacidad de realizar anlisis ya sea de dos o tres colores. El procesamiento de la seal del componente electrnico convierte a las seales electrnicas en pulso de voltaje y los procesa para eliminar ruidos de fondo o dispersos. Los voltajes mximos para cada clula analizada se envan al sistema de manejo de datos. Los datos se pueden almacenar por la computadora o analizarse a travs del uso de histograma. Puede obtenerse informacin especfica sobre una poblacin celular por medio del uso de un histograma de dos variables o diagrama de puntos. * Aplicaciones Clnicas * En hematologa: Contaje celular, frmula leucocitaria, contaje reticulocitario, anlisis de mdula sea. * En farmacologa: Estudios de cintica celular. * En inmunologa: Subpoblaciones T, tipaje tisular, estimulacin linfocitaria. * En oncologa: Diagnstico/pronstico, monitorizar tratamiento. * En microbiologa: Diagnstico bacteriano y vrico, sensibilidad a antibiticos.

Quin no ha solicitado un estudio hematolgico y quin no lo ha interpretado? Esta dcada es reconocida por el gran auge tecnolgico, en especial en el rea de hematologa, donde se aprecia gran cantidad de equipos cada da ms tecnificados con mayor exactitud en los resultados y menor riesgo biolgico por su diseo de bioseguridad. Es menester por lo tanto conocer en qu consiste un informe automatizado hematolgico, ya que su correcta interpretacin brinda una valiosa ayuda en el diagnstico y evolucin de un paciente. Desafortunadamente, toda la informacin suministrada por la citometra hemtica automatizada es subutilizada, ya que muchos mdicos se limitan a revisar solo las cifras de hemoglobina, leucocitos y plaquetas, menospreciando la utilidad de este estudio en la aproximacin diagnstica. Constituye un anlisis que est al alcance de cualquier persona del rea de salud y por ende de muy fcil difusin e interpretacin, siempre y cuando las muestras sean recolectadas con la exactitud y recomendaciones sugeridas para reducir al mnimo los errores clrigos. La correcta interpretacin de una hematologa automatizada orienta hacia cualquier patologa hematolgica, corroborada por el estudio hemoperifrico, es decir, suministra informacin detallada sobre las tres series hematopoyticas a saber; serie roja, serie blanca y serie plaquetaria y si estos resultados obtenidos son interpretados plenamente constituyen una aproximacin directa al diagnstico definitivo. La presente revisin es para demostrar que su correcta interpretacin constituye una herramienta invaluable en el diagnostico y evolucin de pacientes con enfermedades hematolgicas, correlacionado en el contexto clnico del paciente en estudio y por ende la necesidad o no de solicitar estudios ms especializados o en ltima instancia su referencia a la consulta especializada para corroborar las diversas impresiones diagnsticas realizadas por el mdico; funcin primordial de un servicio de referencia. Equipos automatizados Existen dos tipos de equipos automatizados segn su funcionamiento; uno por impedancia y el otro por dispersin de luz .Todo equipo automatizado, suministra dos tipos de resultados: un informe numrico y un informe grafico (histogramas), y ambos poseen un software que contiene toda la informacin utilizando abreviaturas en ingles de utilidad en el informe numrico (es recomendable encontrar valores de referencia propios para cada poblacin en estudio). En el histograma se utilizan grficas de frecuencias de volmenes celulares representados en el eje X graficado contra un numero relativo representado en el eje Y; por ser relativo, no tiene un equivalente numrico real. El eje X se expresa en femtolitros (fl.). En condiciones normales, en el informe se observan curvas cnicas o cncavas, que en su mayora son modales, excepto la de plaquetas.

Ilustracin 1. Reporte numrico y grfico (histograma)

Equipos automatizados por impedancia. Principio. El principio de impedancia en el conteo de clulas sanguneas se basa en el aumento de la resistencia producida cuando una clula sangunea con baja conductividad pasa a travs de un campo elctrico. El nmero de intermitencias indica la cifra de clulas sanguneas y la amplitud de cada intermitencia es proporcional al volumen de la clula. Ejemplos de instrumentos con este principio son el Contador Coulter, los instrumentos TOA Sysmex y los instrumentos Abbot Cell-Dyn. Equipos automatizados por dispersin ptica. Principio. El principio de la dispersin ptica de la luz en el conteo de clulas sanguneas se basa en las mediciones de la dispersin de la luz obtenidas de una sola clula sangunea que pasa ata travs de un haz de luz (ptico o lser). Estas clulas crean una dispersin hacia delante y lateral las cuales se detectan mediante fotodetectores .El grado de dispersin hacia delante es una mediacin del tamao de la celular mientras que el lateral es una medicin de la granularidad de la clula. Ejemplos de instrumentos que atizan este principio son los Technicon H System. Para lograr una correcta interpretacin del cuadro Hemtico es necesario recordar la definicin de cada uno de los parmetros utilizados, as tenemos: Serie roja Hemoglobina. Se mide en gramos por decilitro (g/dl) y representa la cantidad de esta protena por unidad de volumen. Valores normales: Hombre. 16+- 2g/dl, Mujer: 14 +-2 g/dl. Este parmetro debe ser el nico que se emplee para definir si hay o no anemia, es decir, solo si las cifras de hemoglobina son inferiores a los valores normales se puede asegurar que existe anemia y si estn por encima hablamos de poliglobulia y/o policitemia. Hematcrito. Se mide en porcentaje (%) y representa la proporcin de eritrocitos en el total de la sangre. Valores normales: Hombre: 47+-6%, Mujer: 40+-6%.Este parmetro no se mide

directamente por los contadores sino que se calcula a partir de la medicin del nmero de eritrocitos y del volumen corpuscular medio. Nmero de glbulos rojos. Se mide en millones por microlitro (millones/L). Valores 3 normales: Hombre: 4.5 a 6.2 millones x mm , Mujer: 4 a 5.5 millones x mm3. Con el uso actual de los contadores permite calcular con gran exactitud este parmetro eritroctico. Cuando no se cuenta con un equipo automatizado es preferible no mencionar este dato, dado el margen de error tan grande en la cuantificacin con mtodos manuales. Volumen corpuscular medio (VCM). Se mide en femtolitros (fl.) o micras cbicas. Valores normales: 83-97fl. Este ndice eritroctico es de gran valor en el diagnostico de las anemias. (Normocticas, macrocticas, microcticas)