Qumica Experimental I Trabalho Final - Relatrio

Ttulo Obteno do Licopeno e do -caroteno a partir da polpa de tomate.

Alunos: Dayana Coval Felipe Costa

Professoras: Lgia Nanci

Junho de 2012

1. Introduo: Neste experimento vamos separar o -caroteno (Figura 1) e o Licopeno (Figura 2), respectivamente, pigmentos vermelho e amarelo do extrato de tomate. Eles sero extrados primeiramente com etanol e depois com diclorometano. Os dois carotenoides sero separados na cromatografia em coluna.

Figura 1: estrutura do -caroteno

Figura 2: estrutura do Licopeno

O extrato de tomate utilizado no experimento foi o elefante da Knorr (Figura 3), por ser o extrato comercial com menor teor de gua em sua composio. Os carotenoides so pigmentos sintetizados por vegetais. O caroteno um carotenoide provitamina A, o que significa que pode ser convertido em retinol pelo nosso corpo, composto importante para o crescimento sseo e para a viso. O Licopeno por sua vez tem forte ao antioxidante no combate aos radicais livres com efeito anticancergeno sobre a prstata.

Figura 3: O extrato utilizado no experimento

2. Metodologia:

2.1.Solubilizao em Etanol Em um Erlenmeyer de 125 mL foram pesados 10 g de extrato de tomate com auxlio de uma esptula. No Erlenmeyer contendo o extrato de tomate foram adicionados 10 mL de etanol 95%, a mistura foi aquecida e agitada sobre uma placa de aquecimento at alcanar 40C, para no reduzir a quantidade de lcool da mistura. Depois de solubilizada a mistura quente foi filtrada atravs de um funil contendo um tufo de algodo para um Erlenmeyer de 50 mL. O resduo slido no funil foi pressionado com a parte plana da esptula at no sair mais filtrado amarelo. O Erlenmeyer contendo o filtrado foi guardado em um local protegido pela luz.

2.2.Solubilizao com Diclorometano O resduo slido foi posto em um balo de 100 mL, ao qual foram adicionados 10 ml de diclorometano e aquecido sob refluxo por 4 minutos. Utilizando uma pipeta Pasteur a parte solubilizada, que possua uma colorao avermelhada, foi transferida para um Erlenmeyer de 125 mL, aps retirar todo o lquido foram adicionados mais 10 mL de diclorometano ao balo, que foi agitado manualmente e sem aquecimento, para lavar o resduo slido, novamente a parte solubilizada foi retirada e adicionada quela j presente no Erlenmeyer. O filtrado com etanol da seo 2.1. foi adicionado ao obtido com diclorometano e agitado brevemente para uma melhor homogeneizao.

2.3.Extrao A mistura foi transferida para um funil de separao e, a para ajudar na separao das fases, foram adicionados 25 mL de soluo de cloreto de sdio saturado. O funil de decantao foi tampado, agitado levemente e teve a vlvula aberta na posio vertical para diminuir a presso, quando o rudo caracterstico dessa diminuio de presso no foi mais ouvido o funil foi posto em posio vertical para as fases se separarem. A fase orgnica, mais densa (diclorometano mais denso que a gua), foi transferida para um Erlenmeyer de 125 ml ao qual foi adicionado sulfato de sdio anidro. Este processo elimina a gua da soluo. A soluo foi filtrada para um balo de 100 mL.

2.4. Evaporador rotatrio O balo contendo a mistura foi acoplado a um evaporador rotatrio onde, sob ao de vcuo e aquecimento em Banho Maria, foi rotacionado at a total evaporao do solvente, sobrando apenas os carotenoides secos no balo (Figura 3). O balo foi tampado e guardado sob abrigo de luz, pois os carotenoides podem sofrer degradao se expostos luz ou ao ar.

Figura 3: Balo contendo carotenoides secos

2.5.Preparao da coluna cromatogrfica O carotenoide puro foi cromatografado em uma coluna de 18 cm de comprimento e 1 cm de dimetro, contendo slica preparada com hexano como solvente. Um pequeno pedao de algodo foi posto no fundo da coluna seca sobre a vlvula. Para preparar a fase estacionria, a slica foi coletada com uma esptula e posta em um becher ao qual foi adicionado hexano suficiente para umedecer toda a slica, o becher foi agitado at formar uma pasta fluida e seu contedo vertido com auxlio de um funil para a coluna, cuja vlvula reguladora foi aberta e o lquido passou para Erlenmeyer de 50 mL. Esse processo foi repetido at a slica na coluna alcanar 10 cm, durante o processo bateu-se de leve na coluna para deixar a superfcie da slica plana. No foi permitido que a coluna secasse, adicionando o solvente constantemente. Este mtodo fluido elimina bolhas de ar da slica. O excesso de solvente foi extrado at atingir a superfcie da slica. A vlvula foi fechada. O carotenoide foi dissolvido com o mnimo de hexano e a soluo foi transferida para a coluna com uma pipeta Pasteur, o mais rente possvel da parede para no danificar a superfcie da slica. O balo ficou com resqucios dos carotenoides para realizao da cromatografia de camada delgada. A vlvula foi aberta e o material colorido passou pela coluna. Quando o topo da coluna ficou quase seco, ainda com uma pipeta Pasteur, mais hexano foi adicionado para lavar as paredes da coluna e esse processo foi contnuo at o trmino da corrida cromatogrfica. Os efluentes incolores (hexano) foram

reutilizados na corrida. As fases amarela (-caroteno), intermediria e vermelha (Licopeno) foram coletadas em trs Erlenmeyers de 50 mL diferentes.

2.6.Cromatografia de camada delgada As fases separadas foram transferidas, cada uma, para um balo de 50 mL. Os bales contendo cada fase foram acoplados ao evaporador rotatrio seo 2.4. para dissolver maior parte do solvente e aumentar a concentrao dos carotenoides em cada balo. Neste caso o solvente no foi evaporado completamente. A placa cromatogrfica foi preparada utilizando slica suspensa em clorofrmio como fase estacionria sobre uma placa de alumnio. Quatro amostras (trs purificadas pela coluna cromatogrfica e uma impura) foram colocadas na mesma placa. A cuba cromatogrfica foi preparada com hexano (fase mvel). Fazer CCD da amostra antes da cromatografia de coluna e com as fraes obtidas aps a cromatografia de coluna (um ponto para cada), para averiguar se houve uma boa separao dos dois materiais pela tcnica da coluna. Os valores Rf de cada ponto foram observados.

Bibliografia

Lide D. R. - HandoBook of Chemistry and Physics 87 Edition Pavia D. L.; Lampman G.M.; Kriz G.S. Introduction to Organic

Laboratory Techniques - 1976

http://www.bbquimica.com.br/bbq/produtos/content/cloreto_metileno.

pdf - 04/6/2012 - 22:26

http://www.indukern.com.br/arquivosUp/184_SULFATO_DE_S%C3

%93DIO_ANIDRO.pdf - 04/6/2012 - 22:49

http://www.daneto.com.br/components/com_pedidos/docs/Slica%20G

el.pdf - 04/6/2012 - 23:09

http://www.santalc.com.br/imagens/hexano.pdf - 04/6/2012 - 23:18 http://laboratoriosescolares.net/docs/ManualSegurancaLabsEscolares/f

ichasdeseguranca/16_benzeno.pdf - 04/6/2012 - 23:32

http://training.itcilo.it/actrav_cdrom2/es/osh/ic/110827.htm

04/6/2012 - 23:38