MEIOS DE CULTURA EM PLACA MEIO OBJECTIVO Diferenciar as bactrias Gram negativo que fermentam lactose Diferenciar as bactrias Gram

positivo que fermentam manitol) COR INICIAL Vermelho escuro SELECTIVO Sim (s crescem Gram negativas) DIFERENCIAL Sim (se fermentam ou no a lactose) INDICADOR INIBIDOR OUTROS REAGENTES NaCl (permite equilbrio inico) RESULTADO POSITIVO Colnicas vermelhas Bactrias Lac + (pH cido) RESULTADO NEGATIVO Colnicas mbar Bactrias Lac (pH neutro ou bsico)

MacConkey

Vermelho neutro

Cristal violeta e sais biliares

Manitol

Vermelho vivo

Sim (s crescem Gram positivas)

Sim (se fermentam ou no o manitol)

Vermelho de fenol

NaCl (impede crescimento tambm de algumas Gram positivas)

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Colnias amarelas Bactrias Manitol + (pH cido)

Colnias vermelhas Bactrias Manitol (pH bsico)

CLED

Diferenciar bactrias que fermentam lactose ou no

Verde No

Sim (se fermentam ou no a lactose)

Azul de bromotimol

Fraco contedo electrlitos impede crescimento de Proteus

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Colnias amarelas Bactrias Lac + (pH cido)

Colnias verdes ou azuisesverdeadas Bactrias Lac (pH bsico)

Gelose de gar

Crescimento de bactrias no muito exigentes nutricionalme nte

Para Gram positivas: colnias circulares, opacas Incolor No No ---------Gram negativas: pequenas, circulares, com margem inteira

(continuao) MEIO OBJECTIVO COR INICIAL SELECTIVO DIFERENCIAL INDICADOR INIBIDOR OUTROS REAGENTES RESULTADO RESULTADO POSITIVO NEGATIVO -hemlise (hemlise total) halo transparente ao redor das colnias

Gelose de sangue (Hemlise)

Distinguir bactrias com diferentes hemolisinas

Vermelho No

Sim (distingue o tipo de hemlise)

-hemlise (hemlise parcial) halo esverdeado ao redor das colnias ----------

-hemoltica (sem hemlise) sem halo ao redor das colnias

DNase

Identificar bactrias com a enzima DNase

Incolor No

Sim (distingue bactrias com DNase e identifica Staphylococcus)

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HCl 1N (umas gotas)

Halo transparente (DNA degradado e no ocorre precipitao com HCl)

Sem halo/tudo opaco (DNA intacto precipita com HCl)

MEIOS DE CULTURA SLIDOS EM RAMPA MEIO OBJECTIVO COR INICIAL SELECTIVO DIFERENCIAL INDICADOR OUTROS REAGENTES COMO INOCULAR RESULTADO POSITIVO RESULTADO NEGATIVO

Kligler

Permite estudar a formao de H2S e a fermentao de acares

Vermelho

No

Sim (diferencia os que fermentam lactose-mt, glucose-pc, produzem H2S e CO2+H2-presena de hidrogenliase frmica)

Vermelho de fenol

Citrato de ferro amoniacal reage com H2S originando pp preto de FeS Tiossulfato de sdio fonte de S pra produo de H2S

Faz-se picada central (nico!) e a seguir estria superfcie na rampa

APP

Identificar bactrias que produzem cido fenilpirvico (APP)

Amarelado No

Sim (as bactrias que possuem fenilalanina desaminase produzem APP, que forma um complexo de cor verde com o io frrico)

1- Lac-/Glu2- Lac-/Glu+ 3- Lac-/H2S+/Glu? 4- Lac+/Glu+/CO2 e H2+ 5- Lac+/H2S+/Glu Cor verde na Sem alterao rampa de cor

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4 a 5 gotas de reagente APP (cloreto de ferro)

Estria superfcie na rampa

Citrato de Simmons

Identificar bactrias que usam o citrato como fonte de carbono, possuindo, assim, a enzima citrase

Verde Sim (mostra se as bactrias usam a via do citrato como fonte de carbono) Azul de bromotimol

No

Citrato de sdio, que reage com o CO2 na presena de H2O, levando formao de produtos alcalinos (Na2CO3) e consequente cor azul

Cor azul ou verde com crescimento na rampa Estria superfcie na rampa

Mantm a cor verde

MEIOS DE CULTURA LQUIDOS MEIO OBJECTIVO COR INICIAL SELECTIVO DIFERENCIAL INDICADOR OUTROS REAGENTES MR- 5 gotas do indicador vermelho de metilo ---VP-6 gotas de -naftol e 2 gotas de KOH 10% Com ansa (testa-se primeiro o glucosado; se der negativo, no se testa o lactosado) Mantm a cor vermelha alaranjada inicial Com ansa COMO INOCULAR RESULTADO POSITIVO Cor vermelha RESULTADO NEGATIVO Mantm-se incolor

MR-VP

Permite-nos saber se a bactria segue a via dos cidos mistos (MR) ou a via do butilenoglicol (VP)

Incolor

No

Sim (o MR mostra que a bactria produz cidos fortes; o VP mostra que h produo de acetona)

Anel vermelho

Caldo Glucosado/ Lactosado

Permite verificar se a bactria fermenta glucose ou lactose e se produz ou no gs

Vermelho alaranjado No

Sim (diferencia bactrias que fermentam lactose e glucose e que tm hidrogenliase frmica) Sim (positivo para bactrias que fermentam lactose e para as que tm gentipo Lac+ e -galactosidase mas lhes falta uma permease)

Vermelho de fenol

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1-bactria Lac+ e CO2 e H2+ 2- bactria Lac+ Amarelo Mantm-se incolor

ONPG

Identificar bactrias com gentipo Lac+ e galactosidase

Incolor No

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Papel de ONPG

Com ansa (fazer a suspenso em gua e no soro)

(continuao) MEIO OBJECTIVO Avalia a produo de indol a partir de triptofano, mediada por triptofanases COR INICIAL Amarelado Sim (diferencia bactrias que tm triptofanases) 5 gotas de reagente de Erlich SELECTIVO DIFERENCIAL INDICADOR OUTROS REAGENTES COMO INOCULAR RESULTADO POSITIVO Anel vermelho RESULTADO NEGATIVO Mantm-se a cor amarelada

gua de Peptona

No

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Com ansa

Nitratos

Estudar bactrias que podem realizar respirao anaerbia, tendo como aceitador final de electres o anio nitrato

Amarelo claro

No

Sim (distingue bactrias que tm nitrato redutase, e se se formam nitrtos, nitritos ou azoto)

1 - 5 gotas do reagente A e 5 gotas do reagente B ---Com ansa

Nitritos + Nitrato redutase +

Fazer 2 parte

Azoto + Nitrato redutase +

2 - 1 esptula de zinco em p

Presena de nitratos Nitrato redutase -

(continuao) MEIO OBJECTIVO COR INICIAL SELECTIVO DIFERENCIAL INDICADOR OUTROS REAGENTES COMO INOCULAR RESULTADO POSITIVO Roxo (verificar se houve crescimento; se no tiver havido, o resultado considerado negativo porque nem ocorreu fermentao) RESULTADO NEGATIVO Amarelo (ausncia de descarboxilases que reduzam o pH do meio depois da fermentao)

ODC/LDC

Permite demonstrar a existncia de descarboxilases dos aminocidos ornitina e lisina

Roxo

No

Sim (diferencia as bactrias que possuem ornitinas descarboxilases e lisinas descarboxilases das que no tm)

Prpura de bromocresol

Usar parafina lquida sobre o meio para promover a fermentao da glucose

Com ansa

Coagulase

Estudar bactrias que possuam coagulases e que, por isso, so patognicas

Plasma de coelho No

Sim (diferencia bactrias que tm coagulases das que no tm)

Coagulase + ------Com ansa

Coagulase -

MEIO

OBJECTIVO Detectar a presena de catalase, que degrada H2O2 Detectar a presena de citocromo c oxidase

Catalase

Oxidase

COR INICIAL Gotas de H2O2 numa lmina Feito num slide em branco (Dry Slide)

SELECTIVO

DIFERENCIAL

INDICADOR

OUTROS REAGENTES 3 gotas de H2O2

COMO INOCULAR Com ansa

No

Sim

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RESULTADO POSITIVO Com bolhas de gs

RESULTADO NEGATIVO Sem bolhas

No

Sim

Tetrametilpfenildiamina

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Com um palito estril

Roxo

Incolor

MEIOS DE CULTURA SEMI-SLIDOS MEIO OBJECTIVO COR INICIAL SELECTIVO DIFERENCIAL INDICADOR OUTROS REAGENTES COMO INOCULAR RESULTADOS

OF

Permite distinguir a via de degradao da glucose usada pela bactria, at produo de piruvato (tem-se que regenerar os tubos por fervura antes da inoculao, a fim de expulsar o O2 do meio)

Verde Sim (distingue se as bactrias seguem a via fermentativa ou a via oxidativa) Usar parafina lquida sobre o meio de um dos tubos para se criar um ambiente de anaerobiose

No ocorreu nenhuma reaco em nenhum dos tubos

No

Azul de bromotimol

Por picada central

A bactria realiza fermentao e,possivelmente, oxidao tambm (anaerbio facultativo)

A bactria apenas realiza oxidao (aerbio estrito) Citrato de ferro amoniacal reage com H2S originando pp preto de FeS ---Tiossulfato de sdio fonte de S pra produo de H2S 5 gotas de reagente de Erlich Por picada central 1 produo de H2S 2 produo de indol (anel vermelho) 3 - bactria imvel 4 bactria mvel

SIM

Usado para observar a produo de H2S e de indol a partir de triptofano (mediada por triptofanases), e a mobilidade da bactria

Amarelado No

Sim (distingue se as bactrias produzem H2S,se possuem triprofanases e se possuem flagelos)