Sistemas SYNCHRON Hoja de Informacin Qumica

Para uso diagnstico In Vitro REVISION ANUAL Revisado por: Fecha Revisado por:

AMY7

Amilasa
REF A71607

Fecha

PRINCIPIO
USO INDICADO El reactivo AMY7, junto con los sistemas SYNCHRON LX y los sistemas UniCel DxC 600/800, se usa para la determinacin cuantitativa de la actividad total de amilasa en el suero, el plasma o la orina humanos. IMPORTANCIA CLINICA Los valores de amilasa se utilizan principalmente en el diagnstico y tratamiento de pancreatitis. METODOLOGIA El reactivo AMY7 se utiliza para medir la actividad de la amilasa a travs de un mtodo de tasa enzimtica.1 En la reaccin, la amilasa se descompone en 4,6-etilideno(G1)-4-nitrofenil(G7)--(1 4)-Dmaltoheptasido (sustrato protegido de etiledeno = EPS, del ingls Ethyledene Protected Substrate) y las hidrlisis posteriores de todos los productos de la degradacin se descomponen en p-nitrofenol con la ayuda de la -glucosidasa. El Sistemas SYNCHRON dispensa en forma automtica los volmenes apropiados de muestra y reactivo en una cubeta. La proporcin es una parte de muestra a 30 partes de reactivo. El sistema controla el cambio de absorbancia a 410 nanmetros. Este cambio de absorbancia es directamente proporcional a la concentracin de AMY7 en la muestra y es usado por el sistema para calcular y expresar a actividad de la AMY7 total. El uso de este producto generar valores de ensayo compatibles con los mtodos recomendados por la Federacin Internacional de Qumica Clnica (IFCC, del ingls International Federation of Clinical Chemistry)2

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ESQUEMA DE LA REACCION QUIMICA

MUESTRA
TIPO DE MUESTRA Las muestras de lquidos corporales se deben obtener siguiendo los mismos procedimientos que para cualquier otro anlisis de laboratorio.3 Son preferibles las muestras de suero o plasma recin obtenidas. Tambin puede utilizar orina recin recogida para el anlisis. Los anticoagulantes que se pueden utilizar se recogen en la seccin de NOTAS PROCEDIMENTALES de esta hoja de informacin qumica. No se recomienda la sangre completa para las muestras. Cuando manipule muestras, evite la contaminacin por estornudos o saliva. ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD DE LA MUESTRA 1. Los tubos de sangre deben estar tapados y en posicin vertical en todo momento. Se recomienda separar fsicamente el suero o el plasma de contacto con las clulas dentro de las dos horas de obtenidos.4 2. El suero o el plasma separados no deben permanecer a temperatura ambiente ms de 8 horas. Si los anlisis no se completan dentro de 8 horas, las muestras se deben almacenar entre +2C y +8C. Si los anlisis no se completan en 48 horas, o las muestras separadas se deben almacenar ms de 48 horas, se deben congelar entre -15C y -20C. Las muestras deben descongelarse slo una vez. Puede haber deterioro del compuesto en muestras congeladas y descongeladas repetidamente. 4 3. Se recomienda que los anlisis se realicen dentro de las 2 horas despus de recoger la orina. Para las muestras de orina perdica, el recipiente de muestras se debe mantener en el refrigerador o en hielo durante el perodo de recogida. No se requieren conservantes. 5 REQUISITOS ADICIONALES DE ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD DE LAS MUESTRAS ESPECFICOS LABORATORIO:
AL

VOLUMEN DE MUESTRA El volumen ptimo cuando se usa una copa de muestras de 0,5 mL es 0,3 mL. Para los volmenes ptimos de muestra en tubos primarios y volmenes mnimos, consulte la Plantilla de muestras para tubos primarios de su sistema. CRITERIOS PARA EL RECHAZO DE MUESTRAS Consulte la seccin NOTAS DE LOS PROCEDIMIENTOS de esta hoja de informacin qumica para detalles sobre las muestras no aceptables.
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CRITERIOS DEFINIDOS POR EL LABORATORIO PARA EL RECHAZO DE MUESTRAS:

PREPARACION DEL PACIENTE INSTRUCCIONES ESPECIALES

PARA LA PREPARACIN DE PACIENTES ESPECFICAS AL LABORATORIO:

MANIPULACION DE LA MUESTRA INSTRUCCIONES ESPECIALES

PARA LA MANIPULACIN DE MUESTRAS, ESPECFICAS DEL LABORATORIO:

REACTIVOS
CONTENIDO Cada estuche contiene los siguientes elementos: Dos cartuchos de Reactivo AMY7 (2 x 200 anlisis) VOLUMENES POR ENSAYO
Volumen de muestra Volumen de muestra ORDAC Volumen total del reactivo Volmenes del cartucho A B C 175 L 35 L 7 L 3 L 210 L

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INGREDIENTES DEL REACTIVO

COMPONENTES REACTIVO glucosidasa (microorganismo) 4,6-etilideno (G1)-4-nitrofenil (G7)-(14)-Dmaltoheptaosido (Substrato protegido por etilideno = EPS) Cloruro de sodio Cloruro de calcio Cloruro de magnesio 9700 U/L 11 mmol/L

87 mmol/L 0,08 mmol/L 12,6 mmol/L

Adems, otras substancias no reactivas necesarias para el funcionamiento ptimo del sistema.

AVISO Evite todo contacto con el reactivo. La transpiracin y la saliva contienen amilasa. Se recomienda usar guantes cuando se manipulan los cartuchos de reactivo. Tenga cuidado al volver a tapar los cartuchos. Las tapas de la Mezcla de Reactivo y del Reactivo iniciador no deben intercambiarse para evitar la contaminacin del reactivo.

El conservante azida sdica puede formar compuestos explosivos en las lneas de desage metlicas. Consulte la publicacin del Instituto Nacional de Salud y Seguridad Ocupacional (NIOSH),EE.UU.: Explosive Azide Hazards (Peligros de explosin de las azidas (8/16/76).
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS CON EL ESTUCHE DE REACTIVOS Al menos dos niveles de material de control. Solucin salina PREPARACION DEL REACTIVO No requiere preparacin. RENDIMIENTO ACEPTABLE DEL REACTIVO La aceptabilidad de un reactivo est determinada asegurando que los resultados de control de calidad cumplen con los criterios de aceptacin de su laboratorio. ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD DEL REACTIVO El Reactivo AMY7, almacenado sin abrir entre +2C y +8C, tendr la vida til indicada en la etiqueta del cartucho. Una vez abierto y almacenado entre +2C y +8C, permanece estable 21 das, o hasta la fecha de caducidad, si sta es anterior. NO CONGELAR. LUGAR DE ALMACENAMIENTO DEL REACTIVO:

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CALIBRACION
CALIBRADOR NECESARIO No requiere calibracin. TRAZABILIDAD AMY7 el ensayo est certificado por el mtodo de referencia primario de la IFCC.

CONTROL DE CALIDAD
Se debe analizar diariamente un mnimo de dos niveles de material de control. Adems, estos controles deben procesarse con cada nuevo cartucho de reactivo, y despus de procedimientos especficos de mantenimiento o localizacin de fallos, tal como se detalla en el manual correspondiente al sistema. El uso ms frecuente de controles o el uso de controles adicionales se deja a eleccin del usuario y debe basarse en buenas prcticas de laboratorio o en los requisitos para acreditacin del laboratorio y las leyes pertinentes. Los siguientes controles deben ser preparados y usados segn se describe en los prospectos. Los resultados de control de calidad discrepantes deben ser evaluados por el laboratorio. TABLA 1 MATERIAL DE CONTROL DE CALIDAD
NOMBRE DEL CONTROL TIPO DE MUESTRA ALMACENAMIENTO

PROTOCOLO ANALITICO
1. Si es necesario, cargue el reactivo en el sistema. 2. Programe las muestras y los controles para anlisis. 3. Despus de cargar las muestras y los controles en el sistema, siga los protocolos para operacin del sistema. Para procedimientos de anlisis detallados, consulte el Manual de Operacin SYNCHRON LX o el manual Instrucciones para el uso (IFU) del Sistema UniCel DxC 600/800.

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CALCULOS
El Sistemas SYNCHRON har todos los clculos internamente para producir el resultado final presentado. El sistema calcular el resultado final para diluciones de muestras realizadas por el operador cuando se introduce un factor de dilucin en el sistema durante la programacin de muestras.

INFORME DE RESULTADOS
Foi estabelecida a equivalncia entre os Sistemas SYNCHRON LX e UniCel DxC 600/800. Os resultados das anlises qumicas obtidos por estes sistemas so concordantes. Podem ser mostrados dados de sistemas representativos. INTERVALOS DE REFERENCIA Cada laboratorio debe establecer sus propios intervalos de referencia en base a la poblacin de pacientes. Los lmites de referencia listados a continuacin provienen de la literatura. 6 TABLA 2 INTERVALOS DE REFERENCIA
INTERVALOS Literatura TIPO DE MUESTRA Suero o plasma Orina (hombres) Orina (mujeres) TIPO DE MUESTRA UNIDADES CONVENCIONALES 28 100 U/L 16 491 U/L 21 447 U/L UNIDADES S.I. 0,47 1,67 kat/L 0,27 8,18 kat/L 0,35 7,45 kat/L UNIDADES DEL S. I.

INTERVALOS Laboratorio

UNIDADES CONVENCIONALES

Consulte la Bibliografa (7,8,9) para las instrucciones sobre cmo establecer los intervalos de referencia especficos para su laboratorio. INFORMACIN ADICIONAL SOBRE EL INFORME DE RESULTADOS, ESPECFICA AL LABORATORIO:

NOTAS SOBRE EL PROCEDIMIENTO

RESULTADOS DE ANALISIS CON ANTICOAGULANTES 1. Los siguientes anticoagulantes fueron evaluados por el anlisis de regresin de Deming con 52 muestras acopladas de suero y plasma humanos. Los valores de suero (X) de 8,0 a 1203,3 U/L se compararon con los valores de plasma (Y) y rindieron los siguientes resultados.

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TABLA 3 ANTICOAGULANTES COMPATIBLES

ANTICOAGULANTE Heparina de litio Heparina de sodio NIVEL ANALIZADO DE INTERFERENCIA IN VITRO 14 Unidades/mL 14 Unidades/mL ANALISIS REGRESION DE DEMING Y = 0,996X + 1,21 r = 1,000 Y = 1,000X + 0,85 r = 1,000

LIMITACIONES No se ha identificado ninguna limitacin. INTERFERENCIAS 1. Las siguientes sustancias fueron analizadas para determinar su interferencia en esta metodologa: TABLA 4 INTERFERENCIAS
SUSTANCIA Bilirrubina (no conjugada) Bilirrubina (total) Hemoglobina Lipemia Acido ascrbico Glucosa FUENTE Bovina Porcina Hemolizado de eritrocitos Intralipidb Humano ND
c

NIVEL ANALIZADO 30 mg/dL 5,7 mg/dL DBIL 15 mg/dL TBIL 250 mg/dL 500 mg/dL Indice srico 11 200 mg/dL 2000 mg/dL

EFECTO OBSERVADO NISa +8,6 U/L or 7% -8,6 U/L or 7% NIS NIS NIS NIS

ND

2. Las muestras que den seales de hemolisis pueden provocar errores en los resultados. 3. Para las interferencias en las muestras de orina, consulte la Referencia (10), para el resto de las interferencias causadas por frmacos, enfermedades y variables preanalticas, consulte las Referencias (10, 11, 12).

CARACTERISTICAS OPERATIVAS
Rango analitico El mtodo Sistemas SYNCHRON para la determinacin de este analito proporciona el siguiente rango analtico: TABLA 5 RANGO ANALTICO
TIPO DE MUESTRA Suero/Plasma/Orina Suero/Plasma/Orina (ORDAC)d UNIDADES CONVENCIONALES 5 1200 U/L 1000 2000 U/L UNIDADES S.I. 0,08 20,00 kat/L 16,67 33,34 kat/L

Las muestras con actividades que excedan el lmite superior del rango analtico se deben volver a procesar con ORDAC activado o diluirse con solucin salina y volverse a analizar.

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RANGO DEL LABORATORIO (determinado en la sede): TABLA 6 RANGO DEL LABORATORIO

TIPO DE MUESTRA UNIDADES CONVENCIONALES UNIDADES S.I.

SENSIBILIDAD La sensibilidad se define como la menor concentracin medible que se puede distinguir de cero con un grado de confianza del 95%. La sensibilidad para la determinacin de AMY7 es de 5 U/L (0,08 kat/L). EQUIVALENCIA La equivalencia se determin mediante anlisis de regresin de Deming de las muestras de pacientes con mtodos clnicos aceptados.
Suero o plasma (en el rango de 10.0 a 1089,0 U/L): Y (Sistemas SYNCHRON DxC) N MEDIA (Sistemas SYNCHRON DxC) MEAN (reactivos definido por el usuario en SYNCHRON DxC) COEFICIENTE DE CORRELACIN (r)
e

= 1,081X - 3,4 = 83 = 211,8 = 199,1 = 1,0000

Orina (en el intervalo de 9,7 a 534,4 U/L): Y (Sistemas SYNCHRON DxC) N MEDIA (Sistemas SYNCHRON DxC) MEAN (reactivos definido por el usuario en SYNCHRON DxC) COEFICIENTE DE CORRELACIN (r) = 1,039X - 0,70 = 78 = 192,8 = 186,2 = 0,9997

Consulte la Bibliografa (13) para las instrucciones sobre cmo realizar la prueba de equivalencia. PRECISION Un Sistemas SYNCHRON en buen estado de funcionamiento debe exhibir valores de precisin inferiores o iguales a los siguientes: TABLA 7 VALORES DE PRECISIN
TIPO DE PRECISIN Intraserie Total TIPO DE MUESTRA Suero/Plasma/Orina Suero/Plasma/Orina (ORDAC) Suero/Plasma/Orina Suero/Plasma/Orina (ORDAC) U/L 3,0 ND
g

1 D.S. kat/L 0,05 ND 0,08 ND

VALOR DE TRANSICIONf U/L 85,7 ND 85,7 ND kat/L 1,43 ND 1,43 ND

% C.V. 3,5 10,0 5,3 15,0

4,5 ND

Los datos del desempeo comparativo para el Sistema SYNCHRON DxC evaluado con la directiva EP5A2 aprobada por el CLSI/NCCLS se presentan en la tabla a continuacin. 14 Cada laboratorio debe calificar el rendimiento de su propio instrumento con fines comparativos.
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TABLA 8 MTODO DE PRECISIN ESTIMADA (CLSI/NCCLS EP5-A2)

TIPO DE IMPRECISION TIPO DE MUESTRA No. de sistemas 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 No. de datosh 80 80 80 80 80 80 80 80 80 80 80 80 Valor medio del anlisis (U/L) 78,7 913,6 1775,4 56,5 168,4 1181,0 78,7 913,6 1775,4 56,5 168,4 1181,0 Clculo de datos conforme a EP5A2 D.S. %CV 1,0 1,3 4,5 0,5 8,7 0,5 0,7 1,2 0,9 0,5 6,0 0,5 0,8 1,1 5,5 0,6 11,0 0,6 0,7 1,2 1,1 0,7 55,5 4,7

Intraserie

Total

Suero/Plasma Suero/Plasma Suero/Plasma Orina Orina Orina Suero/Plasma Suero/Plasma Suero/Plasma Orina Orina Orina

Nivel 1 Nivel 2 (ORDAC) Nivel 1 Nivel 2 (ORDAC) Nivel 1 Nivel 2 (ORDAC) Nivel 1 Nivel 2 (ORDAC)

AVISO Estos grados de precisin y equivalencia se obtuvieron en procedimientos de anlisis tpicos en el Sistema SYNCHRON DxC y no intentan representar las especificaciones de rendimiento para este reactivo.

INFORMACION ADICIONAL
Para obtener informacin ms detallada sobre el manejo de los Sistemas SYNCHRON LX o UniCel DxC, consulte el manual correspondiente a su sistema. DAOS DE EMBARQUE Si recibe un producto daado, notifique al Centro de Apoyo Tcnico de Beckman Coulter en su localidad. Historial de revisiones REVISIN AB Se ha actualizado la direccin corporativa. REVISIN AC Se ha aadido el historial de revisin. REVISIN AD Se ha revisado la seccin Interferencias. REVISIN AE Se ha aadido un nuevo idioma: checo y coreano. REVISIN AF Se ha revisado la seccin Interferencias.
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REFERENCIAS
1. Approved Recommendation on IFCC Methods for the Measurement of Catalytic Concentrations of Enzymes Part 9. IFCC method for -Amylase (1,4--D-Glucan 4-Glucanohydrolase, EC 3.2.1.1), Clin Chem Lab Med 36(3) pages 185-203 (1998). 2. IFCC Primary Reference Procedure for the Measurement of Catalytic Activity Concentrations of Enzymes at 37C, Clin Chem Lab Med 44(9) pages 1146 - 1155 (2006). 3. Burtis, C. A., Ashwood, E. R. and Bruns, D. E., eds., Tietz Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics, 4th Edition (ISBN 978-0-7216-0189-2), Elsevier Saunders, St. Louis, MO (2005). 4. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI, formerly NCCLS), Procedures for the Handling and Processing of Blood Specimens, Approved Guideline-Third Edition. NCCLS document H18A3 (ISBN 1-56238-555-0). Wayne, PA (2004). 5. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI, formerly NCCLS), Urinalysis, Approved Guideline - Third Edition, CLSI document GP16-A3 (ISBN 1-56238-687-5), Wayne, PA (2009). 6. Junge, W., et al., "Development and Evaluation of Assays for the Determination of Total and Pancreatic Amylase at +37C According to the Principle Recommended by the IFCC", Clin. Biochem., 34 pp 607 615 (2001). 7. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), Defining, Establishing, and Verifying Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline--3rd Edition, (Wayne, PA, 2008). CLSI document C28-A3 (ISBN 1-56238-682-4). 8. Burtis, C. A., Ashwood, E. R. and Bruns, D. E., eds., Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry 6th Edition (ISBN: 978-0-7216-3865-2), Saunders Elsevier, St. Louis, MO (2007). 9. McPherson, R. A. and Pincus, M. R., eds., Henry's Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods 21st Edition (ISBN 978-1-4160-0287-1), Saunders Elsevier, Philadelphia, PA (2006). 10. D. S. Young, Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, 5th Edition (Washington, D.C: AACC Press, 2000). (ISBN 1-890883-24-7) 11. D. S. Young and R. B. Friedman, Effects of Disease on Clinical Laboratory Tests, 4th Edition (Washington, D.C.: AACC Press, 2001). (ISBN 1-890883-45-X) 12. D. S.Young, Effects of Preanalytical Variables on Clinical Laboratory Tests, 3rd Edition, (Washington, D.C.: AACC Press, 2007). (ISBN 978-1-59425-068-2) 13. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI, formerly NCCLS), Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples , Approved Guideline - 2nd Edition, NCCLS publication EP9-A2 (ISBN 1-56238-472-4) Wayne, PA (2002). 14. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI, formerly NCCLS), Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods , Approved Guideline - 2nd Edition, NCCLS document EP5-A2 (ISBN 1-56238-542-9) Wayne, PA (2004).

Beckman Coulter Ireland, Inc., Mervue Business Park, Mervue, Galway, Ireland 353 91 774068
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Beckman Coulter, Inc., 250 S. Kraemer Blvd., Brea, CA 92821 U.S.A.

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NOTA DE PIE DE PAGINA a b c d NIS = No hay interferencia significativa (dentro de 6,0 U/L o 7%). Todas las marcas comerciales pertenecen a sus propietarios respectivos. ND = No disponible. Deteccin y correccin de valores por encima del rango analtico. Consulte el SYNCHRON LX Manual de operacin del UniCel DxC 600/800 System Instrucciones para el uso para detalles adicionals sobre esta funcin. Un producto de Thermo Fisher Scientific Inc. Cuando la media de la prueba de precisin es inferior o igual que el valor de transicin, compare la DS del ensayo a la DS gua indicada anteriormente para determinar la aceptabilidad de la prueba de precisin. Cuando la media de la prueba de precisin es mayor que el valor de transicin, compare el % de CV del ensayo al % de CV gua indicado anteriormente para determinar la aceptabilidad de la prueba. Valor de transicin = (DS gua/CV gua) x 100. ND = No disponible. El clculo de datos se basa en datos reunidos de un sistema, funcionando veinte das, dos veces por da, con dos observaciones por cada procesamiento, en un instrumento operado y mantenido de acuerdo con las instrucciones del fabricante.

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