ESPECTROFOTOMETRIA MOLECULAR

I. OBJETIVOS Determinar la longitud de onda adecuada (longitud de onda mxima de absorcin) y los niveles de concentracin tambin adecuados para el anlisis cuantitativo por espectrofotometra.

II.

FUNDAMENTO La espectrofotometra es uno de los mtodos de anlisis que se emplean con mas frecuencia dentro del anlisis de los alimentos: las regiones de los espectro mas usados en dicho campo son las ultravioleta y el visible, y en algunos casos el infrarrojo cercano. A = a.b.c Donde: A = Absorbancia, o extincin o densidad ptica a = Absortividad b = Longitud de paso o recorrido de luz c = Concentracin Esta expresin muestra que existe una relacin lineal entre la absorbancia (A) y la concentracin (c) de una solucin dada, siendo contraste la longitud de trayecto ptico y la longitud de onda. Esta relacin se cumple y por lo tanto el anlisis espectrofotomtrico cuantitativo se puede aplicar cuando: A) Todos los cuantos de energa tienen la misma posibilidad de ser absorbidos por la sustancia, es decir, la luz empleada debe ser monocromtica y a la de mxima absorcin. B) Todas las molculas de la sustancia deben tener la posibilidad de absorber los cuantos de energa, es decir, la sustancia debe estar lo suficientemente diluida para que ninguna molcula quede oculta o a la sombra de otra. Se estima como promedio una concentracin de 1x 10-2 mol/L.

De no cumplirse estos requisitos, se estara produciendo desviaciones de la ley de Beer obtenindose en consecuencia resultados errneos o inexactos en la determinacin cuantitativa. III. MATERIALES Y METODOS 3.1 Materiales y Equipos - Espectrofotmetro UV VIS Marca Tuner. - Celda de Cuarzo. - Fiolas de 250 ml, 100 ml y 5ml. - Embudo de vidrio. - Papel filtro. - Papel Tissue. - Pizeta con agua destilada. - Azul de metileno/ Dicromato de potasio 3.2 Mtodos 3.2.1 Manejo de espectrofotmetro Se siguen las instrucciones del manual del equipo 3.2.2 Procedimiento a) Determinacin de la longitud de onda de mxima absorcin. Pesar 0.1 gramos de azul de metileno. Colocar a una fiola de 100 ml. Y aforar con agua destilada. Hacer diluciones de 1.0 ppm, 1.5 ppm, 2.0 ppm, 3.0 ppm. Preparar blanco Leer la absorbancia vs longitud de onda desde 400 700 nm. Graficar la absorbancia vs la longitud de onda para cada una de las concentraciones realizadas.

b) Determinacin del rango de concentracin adecuado. Trabajar con seleccionada. Preparar el rango suficiente de concentraciones (hasta donde se desvi la ley de Beer). Leer absorbancia vs [ ] a . Graficar Fijar el rango ptimo o adecuado. c) Determinar el coeficiente de extincin molar ().
Donde: = coeficiente de extincin molecular Concentracin molar Espesor de la cubierta = Densidad ptica de extincin

IV.

RESULTADOS Azul de metileno PPm 2 4 6

1 0.9 0.8 0.7 Axis Title 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 0 2 4 Axis Title 6 8 abs. Linear (abs.) Linear (abs.) y = 0.1833x - 0.2053 R = 0.9994

abs. 0.156 0.538 0.889

Dicromato de potasio PPm 2 4 6 abs. 0.024 0.077 0.108

0.12 0.1 0.08 Axis Title 0.06 0.04 0.02 0 0 2 4 Axis Title 6 8 y = 0.021x - 0.0143 R = 0.9776 246 Linear (2 4 6)

V.

CUESTIONARIO A) Qu tipo de soluciones no cumplen la ley de Lambert Beer? La ley de Bourguer Lambert Beer predice, para una longitud de onda constante y paso ptico fijo, una relacin lineal entre Absorbancia y Concentracin con pendiente e l b e intercepto cero. Sin embargo esta ley slo se cumple estrictamente o est limitada para soluciones diluidas, generalmente concentraciones menores o iguales que 10-2M. La suposicin de que e es independiente de la concentracin de una sustancia para una longitud de onda dada, slo se cumple en soluciones diluidas ya que no es constante para soluciones concentradas sino que depende del ndice de refraccin de la solucin.

B) De acuerdo al color de la sustancia analizada, cul sera la longitud de onda ms apropiada para realizar la lectura espectrofotomtrica? La longitud de onda apropiada para espectrofotomtrica: En el azul de metileno es de 664,5 nm. realizar la lectura

En el dicromato de potasio es de 340 nm.

C) Consulte aplicaciones industriales de espectrofotometra de absorcin. Anlisis de aguas pues se puede determinar los metales pesados como el cromo y plomo. Determinacin de la fertilidad de los mismos y la presencia de residuos de placiguidas. determinar la cantidad de potasio en productos como la leche en polvo, frutas, etc. En la arqueologa, es de utilidad para establecer los elementos metlicos a travs de una tabla peridica. Determinacin de la glucosa en sangre en un laboratorio de anlisis qumico.

Tambin es utilizado en caracterizacin de aceites crudos de petrleo para la determinacin exacta de petrleo crudo propiedades fsicas y qumicas es fundamental no slo para la caracterizacin y produccin de un yacimiento, sino tambin para el diseo y acabados, conexiones submarinas e instalaciones de la superestructura. Esta tcnica es cada vez ms empleado para aplicaciones en el campo, para estudios de laboratorio de los aceites de petrleo crudo y asfltenos).

VI.

CONCLUSION

Por lo expuesto anteriormente podemos decir que la espectrofotometra de

absorcin es el mtodo de anlisis ptico ms usado en las investigaciones qumicas y biolgicas, puesto que es el ms efectivo, el cual ha sido de mucha ayuda a personas como fsicos, qumicos e ingenieros para hallar valores muy precisos.

VII.

BIBLIOGRAFIA Borfost R. y Scholz, M.1964. Spektroskopische Methoden in der organischen. Chemie. Berlin. Snchez, D.1995. instrumentacin en Bioqumica. Consejo nacional de Ciencia y Tecnologia (CONCYTEC). Lima. Walton y Reyes. 1978. Anlisis qumico e instrumental moderno. Editorial Reverte S.A. Espaa.