Telmerasas

Cromosomas, control celular y cncer:

una cuestin de telomerasas

Las telomerasas, enzimas indispensables para la reproduccin de los extremos de los cromosomas, han sido relacionadas con enfermedades en las que las clulas se dividen en forma descontrolada, como el cncer.
Eugenia Flores Figueroa y Hctor Mayani

INTRODUCCIN

odos los seres vivos, desde las bacterias hasta los humanos, almacenan su informacin gentica en estructuras denominadas cromosomas, formadas por cido desoxirribonucleico (ADN) de doble cadena y protenas. A diferencia de las bacterias, y en general de los organismos procariontes (cuyas clulas no tienen ncleo definido), los cromosomas de los eucariontes (incluidos los humanos, cuyas clulas tienen un ncleo delimitado por una membrana) son lineales y no circulares (figura 1). Los cromosomas lineales se encuentran divididos por una estructura central llamada centrmero, la cual es fundamental en el proceso de divisin celular (mitosis). El centrmero divide al cromosoma en dos regiones: la regin p (brazos cortos) y la regin q (brazos largos). En sus extremos, los cromosomas presentan unas estructuras denominadas telmeros, que le confieren estabilidad estructural. Sin embargo, recientemente se ha demostrado que los telmeros determinan, adems, el nmero de divisiones posibles de una clula, limitando su reproduccin, a travs de un mecanis-

mo denominado reloj mittico (Ishikawa F, 2000). El estudio de este proceso es de gran relevancia en el diagnstico, pronstico y tratamiento del cncer, por lo que en esta revisin se pretende dar un panorama general acerca del conocimiento actual de la biologa de los telmeros y su aplicacin en la prctica clnica.
LA REPLICACIN DEL
ADN

EN LOS

EXTREMOS DE LOS CROMOSOMAS

Las polimerasas, enzimas involucradas en la duplicacin (replicacin) del ADN, poseen dos caractersticas importantes: 1) requieren de una molcula o molde de ARN (cido ribonucleico) para iniciar la sntesis de ADN. Este molde, al terminar la replicacin, es destruido por enzimas especficas denominadas ARNasas. 2) Llevan a cabo la sntesis de ADN, nicamente de manera unidireccional. La replicacin se
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inicia cuando un molde de ARN de 8 a 12 nucletidos se une con la cadena de ADN (figura 2), paso necesario para que la polimerasa de ADN comience a fabricar la cadena complementaria. Una vez que el molde de ARN ha cumplido su papel, es destruido; y debido a que las polimerasas son incapaces de copiar este tramo de ADN perdido por el molde de ARN, los tramos finales de los cromosomas no son replicados, y por tanto se pierden progresivamente (con el resultado de que los cromosomas se van acortando). Este hecho ha sido documentado en una gran variedad de tipos celulares, observndose que en cada divisin celular ocurre un acortamiento de las secuencias de ADN del telmero (entre 50 y 100 nucletidos en clulas humanas).
EL RELOJ MITTICO

telmero brazo p

A principios del siglo XX, se estableci que las clulas de los vertebrados eran inmortales. Sin embargo, 60 aos ms tarde se demostr que las ccentrmero lulas humanas en cultivo tienen una capacidad proliferativa finita, y entran en un estado de nodivisin (quiescente) denominado senescencia o brazo q etapa M1. Este estado se caracteriza por un camtelmero bio en la expresin de los genes. La senescencia Cromosoma lineal Cromosoma circular replicativa depende del nmero de divisiones cehumano bacteriano lulares, y es independiente del tiempo metablico o cronolgico, indicando que la proliferacin se encuentra limitada por un reloj mittico. Hace un dcada se propuso que los telmeros estn involucraFigura 1. Esquema de un cromosoma circular bacteriados con el envejecimiento celular, indicando que las clulas se no y de un cromosoma lineal humano. El cromosoma vuelven senescentes cuando ocurre un acortamiento progresibacteriano no presenta telmeros, debido a que es una estructura cerrada. El cromosoma lineal se subdivide vo durante cada divisin. Lansdorp y colaboradores comprobaen dos regiones, separadas por una estructura central ron que existe un acortamiento de los telmeros con el paso del llamada centrmero. La parte ms larga del cromosoma se conoce como brazo largo o q, y la parte ms petiempo. Analizando a las clulas madre o precursoras hematopoquea como brazo corto p. Puede observarse que las yticas (que dan origen a todas las clulas sanguneas) de hgaregiones telomricas se localizan en los extremos del cromosoma tanto en su brazo q como p. do fetal, cordn umbilical y mdula sea de adulto, los autores encontraron que las clulas madre hematopoyticas del hgado fetal presentaban telmeros de mayor tamao, seguidos por los de cordn umbilical, y finalmente que las clulas de la mdula sea presentaban telmeros ms pequeos, lo que demuestra que los telmeros de los tejidos se van acortando con la edad. Los mecanismos moleculares del reloj mittico que desencadenan la etapa M1, cuando la clula ha alcanzado su nmero lmite de divisiones, involucran un mecanismo que registra el nmero de divisiones celulares y que bloquea irreversiblemente el avance del ciclo celular. Es decir, la clula

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detecta que ha llegado al nmero final de divisiones a travs del monitoreo del acortamiento de sus telmeros, y dispara un mecanismo para detener el ciclo celular. El segundo mecanismo se lleva a cabo principalmente por la accin de dos protenas denominadas p53 y Rb. Las funciones de ambas protenas se encuentran interconectadas, y llevan a la regulacin positiva de una protena inhibidora del ciclo celular. El objetivo principal es inhibir 5 a la accin de otras protenas Cadenas parentales (ciclina D y las cinasas de3 pendientes de ciclina Cdk4 5 b y Cdk6), para evitar el avanCadena Templado de ARN 5 3 sintetizada ce del ciclo celular. Hasta el 3 momento se desconoce cADN polimerasa mo es que el acortamiento 5 c de los telmeros activa la ARN asas 5 3 maquinaria antiproliferativa 3 de la etapa M1. Se ha sugerido que los telmeros del 5 d cromosoma 17, en donde se Extremo 3 5 no replicado codifica la protena p53, 3 sean el sitio en donde se activa este mecanismo; es decir, que la longitud de los telmeros en el cromosoma 17 sea la Figura 2. Representacin esquemtica de la replicaresponsable del reloj mittico. El hecho de que los telmeros cin de ADN en los extremos de los cromosomas (telmeros). Para que comience la replicacin, las cadenas en el cromosoma 17 son los ms cortos de todos los cromosode ADN deben abrirse para permitir que un molde de ARN mas apoyan esta teora. se una a la cadena de ADN en un sitio llamado origen de Se ha observado en experimentos de transformacin celular la replicacin (a). La replicacin se lleva a cabo en ambas cadenas, pero con el fin de facilitar el esquema se in vitro, que muchos virus causantes de cncer alteran la va de ejemplifica nicamente la replicacin de una cadena. regulacin de las protenas p53 y Rb. La clula puede salir de la Utilizando el molde de ARN, la polimerasa comienza a sintetizar la cadena complementaria (b). Una vez que etapa M1 de senescencia, gracias a que las protenas del virus el molde de ARN ha cumplido su papel, es destruido por secuestran a las protenas p53 y Rb, lo que permite a la cluARNasas (c), y debido a que las polimerasas son incapaces de copiar este tramo de ADN por carecer de un la extender su lmite de divisiones hasta por 30 o 40 veces ms molde de ARN, los extremos quedan sin replicar, y se despus de haber llegado a la etapa M1. La alteracin de la etagenera un extremo saliente (d). pa M1 no inmortaliza a las clulas; nicamente extiende su nmero de divisiones, pero despus de un nmero limitado, la clula entra en la etapa M2, o etapa de crisis. Las clulas que se encuentran en la etapa M2 poseen telmeros sumamente cortos, y sus cromosomas presentan una alta inestabilidad. Despus de algunas divisiones, la gran mayora de las clulas muere. Sin embargo, algunas de ellas encienden un mecanismo que les permite mantener la longitud de sus telmeros y dividirse indefinidamente, convirtindose en lo que se considera como una clula transformada, o cancerosa. Este mecanismo implica la
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activacin de la telomerasa, una enzima capaz de extender y mantener la longitud de los telmeros.
LOS TELMEROS

Muller nombr a estas estructuras telmeros, del griego telos (final) y meros (parte)

Loop T

En la tercera dcada del siglo XX, Barbara McClintock y Hermann J. Muller encontraron que los cromosomas portaban en sus extremos un componente especial que les confera estabilidad. Muller nombr a estas estructuras telmeros, del griego telos (final) y meros (parte). Los estudios de McClintock revelaron que, sin estas estructuras terminales, los cromosomas se adheran unos a otros, sufran cambios estructurales y presentaban comportamientos extraos. Todos estos cambios afectaban la supervivencia y fidelidad en la replicacin de los cromosomas. Posteriormente se encontr que los telmeros del protozoario Tetrahymena contenan una secuencia de nucletidos muy corta, compuesta de dos tipos de nucletidos: timina (T) y guanina (G) que se repetan muchas veces al final de los cromosomas (TTGGGG) y que no servan para fabricar ninguna protena. A partir de esa fecha se han estudiado los telmeros de muchos organismos, y se ha encontrado que su secuencia de nucletidos es muy similar entre diversas especies.
ESTRUCTURA DE LOS TELMEROS

Cadenas de ADN

Extremo 3 saliente

TRF 1 TRF 2

Figura 3. Esquema de la estructura del telmero. En los extremos de los cromosomas, el ADN final no permanece en forma lineal, ya que podra ser destruido por diferentes nucleasas, y ello podra causar que los cromosomas se fusionaran o que el ADN fuera confundido por la maquinaria celular con ADN daado. Por lo tanto, el ADN se pliega sobre s mismo gracias a la ayuda de protenas que se unen al ADN de doble cadena, as como a protenas que se unen a ADN de cadena sencilla (que se adhieren al extremo saliente). El ADN telomrico se dobla sobre s mismo formando una estructura conocida como asa T, lo que permite protegerlo. El extremo saliente invade la doble cadena del tramo telomrico repetido y se une a una de las cadenas, desplazando a la otra y formando un asa ms pequea, conocida como asa D.

El componente de ADN de la regin telomrica se divide en tres subregiones: 1) ExLoop D tremo saliente, que consiste en las secuencias no replicadas, y que quedan libres en forma de cadena sencilla despus de la replicacin (figura 3). El extremo saliente permite que la regin telomrica adquiera una estructura secundaria (es decir, que se repliegue sobre s misma), lo que permite la unin de protenas especficas que evitan que estas secuencias sean confundidas por la maquinaria celular como ADN daado. 2) Tramos telomricos repetidos: son secuencias muy conservadas entre las especies, que consisten en tramos repetidos, ricos en los nucletidos G y T. La secuencia telomrica de los mamferos consiste en tramos repetidos con la siguiente secuencia: (TTAGGG)n. En la mayora de las especies los tramos repetidos consisten de 6 a 8 nucletidos, o pares de bases; su longitud vara entre especies y entre los distintos cromosomas dentro de una clula. En el caso de clulas de ratn, la regin telomrica comprende hasta 60 mil nucletidos, y en humanos miden en

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promedio 25 mil nucletidos. 3) Secuencias asociadas al telmero: reas que se encuentran entre la primera secuencia identificable de un gen y los primeros tramos telomricos repetidos. La longitud de las secuencias asociadas al telmero puede variar entre los distintos cromosomas. En el humano, comprenden varios cientos de miles de nucletidos (figura 3). Las regiones telomricas no incluyen nicamente ADN; tambin se encuentran asociadas varias protenas (figura 3). Actualmente se conocen dos protenas humanas que se unen al ADN de doble cadena en la regin telomrica. El llamado factor 1 de unin al tramo telomrico repetido (TRF1, por sus siglas en ingls), es una protena cuyo gen se localiza en el cromosoma 8 y que acta como un represor de la enzima telomerasa. El TRF1 permite la formacin de estructuras secundarias en forma de asas (figura 3). Gracias a la formacin de las asas T, el ADN telomrico puede enmascararse y evitar la accin de varias enzimas, en particular de enodonucleasas (enzimas que destruyen a los cidos nucleicos), protegiendo a los cromosomas. En sistemas experimentales se ha demostrado que, en clulas que fabrican un exceso de la protena TRF1, se presenta una disminucin gradual del telmero, con una prdida de entre 3 y 11 nucletidos por ciclo de replicacin. Por otra parte, la inactivacin de esta protena causa que el telmero se extienda 35 nucletidos por cada divisin. El gen de la protena llamada factor 2 de unin al tramo telomrico repetido (TRF2, por sus siglas en ingls) se halla en el cromosoma 16. La protena TRF2 evita que los cromosomas se fusionen, unindose al extremo saliente y permitiendo la formacin de una estructura secundaria en forma de asa (asa D), al permitir que se enrolle el extremo saliente dentro de la doble cadena (figura 3). Al perderse la funcin de TRF2, comienzan a aparecer anormalidades en el nmero y estructura de los cromosomas, provocando fusiones entre cromosomas que llevan a la clula a su muerte por apoptosis (o suicidio celular). Existen otras protenas asociadas a la regin telomrica. Al parecer, su funcin principal es la estabilizacin de las regiones telomricas o la cooperacin para formar plegamientos de las regiones telomricas.
FUNCIN DE LOS TELMEROS

mente es importante su longitud, sino tambin su secuencia de nucletidos. Por ejemplo, el reemplazo de las secuencias del telmero en el ciliado Tetrahymena impide la divisin nuclear, por lo que se sugiere que la estabilizacin de los cromosomas por medio de los telmeros involucra un correcto reconocimiento y unin entre la secuencia del telmero y protenas especficas de unin al telmero (probablemente TRF1 y TRF2), lo que favorece la formacin de un plegamiento especfico (figura 3). Los telmeros tambin desempean un papel importante durante la profase temprana (una de las primeras etapas de la divisin celular), agrupndose por debajo de la envoltura nuclear, y en algunas clulas cerca de los centrosomas. Al parecer la funcin de los telmeros en el ncleo antes de la mitosis (divisin celular) es facilitar la interaccin entre los cromosomas homlogos para la recombinacin y apareamiento, lo que implica un papel directo en el movimiento de los cromosomas en el ncleo. Realizando estudios con la levadura Saccharomyces cerevisiae se ha observado que si experimentalmente se relocalizan genes en zonas

Dentro de las primeras funciones conocidas del telmero se encuentra su papel en la estabilidad y proteccin de los cromosomas

Los telmeros son vitales en la clula. Dentro de las primeras funciones conocidas del telmero se encuentra su papel en la estabilidad y proteccin de los cromosomas. Se ha observado que para que los telmeros lleven a cabo esta funcin no solajulio-septiembre 2003

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cercanas a los telmeros, dichos genes tienden a ser silenciados mediante un proceso de heterocromatinizacin, es decir, la formacin de una estructura de cromatina (ADN unido a protenas) altamente compacta, que se origina a partir del telmero. Esto se debe a que en las regiones telomricas se acumulan protenas represoras que impiden la expresin gentica, por lo que de manera normal no se encuentran genes activos en estas zonas. Dentro de las funciones ms recientemente descritas para los telmeros se encuentra su papel como regulador del reloj mittico celular y por lo tanto del mecanismo de senescencia celular. Este ltimo mecanismo toma gran importancia al estar implicado en diversas enfermedades degenerativas y en el cncer.
CMO MEDIR LA LONGITUD DE LOS TELMEROS

Dentro de las funciones ms recientemente descritas para los telmeros se encuentra su papel como regulador del reloj mittico celular y por lo tanto del mecanismo de senescencia celular

Uno de los primeros mtodos que se emplearon para estudiar el tamao de los telmeros consisti en extraer el ADN de las clulas en estudio e incubarlo con enzimas especficas, que lo cortan en sitios cercanos a los telmeros, siempre en un punto especfico, pero no cortan a los telmeros mismos. Los fragmentos liberados se colocan en una especie de gelatina (gel de agarosa) que es sometido a un campo elctrico, lo que permite separar los fragmentos de ADN por tamaos. A continuacin, los telmeros se marcan utilizando una sonda (fragmento de ADN cuya secuencia de nucletidos es marcada radiactivamente) complementaria a la secuencia del telmero. El resultado puede ser observado en una autorradiografa y se mide en kilobases (miles de bases de ADN, o nucletidos). Uno de los problemas de esta tcnica es que no puede identificar la longitud de los cromosomas en clulas aisladas, obtenindose nicamente la longitud media de los telmeros de todos los cromosomas de la clula. En 1994 Meyne y colaboradores publicaron una tcnica de hibridacin in situ para el estudio de los telmeros, con la que se resolva el problema de la cantidad de clulas, y permita el anlisis de cromosomas individuales. Sin embargo, exista una alta probabilidad de que la hibridacin pudiera ocurrir no slo entre el ADN celular y la sonda, sino entre las mismas cadenas de ADN, por lo que la eficiencia de la hibridacin con los tramos telomricos repetidos no era la suficiente para llevar a cabo estudios cuantitativos. Pocos aos despus surgi una modificacin a esta tcnica, que permiti que el anlisis fuera cuantitativo. La modificacin consiste en el uso de nucletidos modificados, en donde el grupo fosfato del esqueleto de desoxirribosa es reemplazado por una molcula sin carga; a esta molcula se le conoce como PNA (cido nuclico sinttico, por sus siglas en

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ingls). El uso de estos fragmentos cortos de PNA favorecen la unin ADN y PNA e inhiben la reunin entre cadenas de ADN, por lo que el mtodo es lo suficientemente reproducible y sensible para llevar un anlisis cuantitativo de la longitud de los telmeros por cromosoma. La tcnica se denomina hibridacin in situ cuantitativa (Q-FISH); (figura 4). Esta tcnica puede ser combinada con el uso de un citmetro de flujo si se marca la sonda con un colorante fluorescente (rodamina, fluorescena) y se mide el nivel de fluorescencia de cada clula. Es muy til para saber el promedio del tamao del telmero de una clula, en una determinada poblacin.
LA TELOMERASA

Debido al reloj mittico que se encuentra en cada una de las clulas, stas tienen un nmero de replicaciones finitas, lo que permite regular la proliferacin celular y restringirla para evitar un crecimiento descontrolado. Hipotticamente, este mecanismo sera un impedimento para la transformacin cancerosa de una clula, ya que al llegar a la etapa M2, finalmente morira por apoptosis. Sin embargo, como se mencion anteriormente, algunas clulas logran traspasar la etapa M2 mediante la fabricacin de una enzima llamada telomerasa. Esta enzima es la encargada de alargar y mantener los telmeros mediante la sntesis de novo de la regin telomrica, permitiendo que la clula se divida por un nmero infinito de veces. La telomerasa fue descrita por primera vez en el microorganismo ciliado Tetrahymena por Elizabeth Blackburn y Carol Grieder. Varios aos despus, Gregg Morin encontr que las clulas humanas cancerosas y las clulas humanas de la lnea germinal posean telomerasa, mientras que las clulas somticas normales no expresaban dicha enzima. Esto sugiri que la telomerasa podra tener un papel importante en el proceso que da origen al cncer (carcinognesis). La telomerasa fue identificada como una ribonucleoprotena (molcula formada por cido ribonucleico y protenas) capaz de fabricar ADN usando un molde de ARN. La telomerasa posee su propio molde de ARN interno, para fabricar los tramos telomricos repetidos.
RATONES DEFICIENTES EN TELOMERASA

Figura 4. Tcnica de hibridacin in situ cuantitativa (Q-FISH). Fotografa en donde se muestran los telmeros de los distintos cromosomas. El cariotipo fue hibridado con una sonda de PNA (cido nuclico sinttico) fluorescente. Como se puede observar, el tamao de los telmeros (proporcional a la intensidad de la fluorescencia) difiere entre los distintos cromosomas. Fotografa tomada de: www.swmed.edu/home_pages/ cellbio/shay-wright/intro/gallery/pna20fish.jpg.

Con el objetivo de estudiar el papel funcional in vivo de la telomerasa, recientemente, Blasco y colaboradores crearon experimentalmente ratones con una mutacin que elimina la expresin del gen que codifica la fraccin de ARN de la telomerasa
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Es bien sabido que el cncer es una enfermedad que se origina a partir de la transformacin maligna de una sola clula

capen de este punto de crisis. Para comprobar si la telomerasa era esencial para que se diera una transformacin cancerosa, se transform genticamente a clulas provenientes de estos ratones, que no tenan telomerasa y que posean telmeros acortados, y se observ que eran capaces de producir tumores en ratones inmunosuprimidos (cuyo sistema inmunitario estaba inactivado, conocidos como ratones desnudos). Esto fue sorprendente, pues se sabe que ms del 80 por ciento de los tumores contienen telomerasa. En este modelo, la telomerasa no fue requerida para mantener la viabilidad de las clulas con telmeros cortos. Las clulas sin telomerasa, que escapan al control de la senescencia, tal vez pueden estar manteniendo la longitud de sus telmeros por medio de otro mecanismo. Uno de los mecanismos alternativos para el alargamiento de los telmeros es la recombinacin. El modelo de ratn debe ser analizado con cautela, ya que presenta grandes diferencias con respecto al sistema humano: los cromosomas humanos tienen telmeros ms pequeos que los de ratn, adems de que las clulas de ratn se transforman espontneamente y con mayor facilidad que las humanas.
TELMEROS Y TELOMERASA: IMPLICACIONES EN EL CNCER

(ratones conocidos como knock-out). En estos ratones no fue detectada ninguna actividad de esta enzima, lo que apoya la idea de que existe slo un gen que codifica para el componente de ARN de la telomerasa en el genoma del ratn. Utilizando la tcnica de Q-FISH se observ que estos ratones tenan telmeros acortados, a una tasa de 4.8 2.4 miles de nucletidos por generacin. Fueron frecuentes las aneuploidas (alteraciones en el nmero de cromosomas) y fusiones entre cromosomas de las regiones terminales en cultivos de clulas de estos ratones, lo cual comprueba el papel de los telmeros en la proteccin de los cromosomas, y que dicho papel ya no puede llevarse a cabo cuando los telmeros se acortan. En los ratones deficientes de telomerasa se observ que la longitud de sus telmeros no es un factor determinante primario de la crisis de senescencia, y que la actividad de telomerasa no se requiere para que las clulas de ratn es-

Es bien sabido que el cncer es una enfermedad que se origina a partir de la transformacin maligna de una sola clula, cuya progenie presenta alteraciones muy severas en sus mecanismos de proliferacin, diferenciacin y muerte celular programada (apoptosis). En este sentido, el estudio de diversos genes involucrados en la regulacin de dichos procesos ha sido muy importante para entender esta enfermedad. Al descubrirse que varias lneas celulares cancerosas, como las llamadas clulas HeLa, posean telomerasa, y que la inmortalizacin de las clulas in vitro ocurra a la par de la activacin de esta enzima, llevaron a pensar en la importancia del papel de la telomerasa en el proceso de carcinognesis. La gran mayora de clulas somticas carecen de telomerasa, por lo que tienen una capacidad limitada para replicarse. Esto podra ser una importante barrera natural para impedir el desarrollo y proliferacin de clulas malignas. Sin embargo, los tumores malignos tienen una capacidad proliferativa infinita, lo cual se debe, entre otros mecanismos, a que sus clulas poseen telomerasa, y esto les permite una expansin progresiva e ilimitada. En la mayora de los casos, la falta de control proliferativo por el proceso de senescencia es un prerrequisito indis-

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pensable para el desarrollo de clulas malignas. Esto sugiere que existe una intensa presin selectiva durante la progresin de la malignidad que favorece el desarrollo de clulas que posean telomerasa. En relacin a lo anterior, el Cuadro 1 muestra la expresin de la telomerasa en diversos tejidos neoplsicos.
VALOR CLNICO DEL ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD DE TELOMERASA

La gran mayora de los tumores humanos poseen telomerasa. Diversos estudios han corroborado que la telomerasa se detecta en un 80 y 90 por ciento de los tumores cancerosos, y en una menor proporcin en tumores benignos (Cuadro 1). La actividad de telomerasa ha sido detectada en carcinomas colorrectales, pero no en plipos adenomatosos, lo cual sugiere que la telomerasa es un buen indicador de progresin. En un estudio de neuroblastomas, los tumores que presentaban una alta expresin de telomerasa tenan un pronstico menos favorable que los que la tenan baja o nula. Los diversos trabajos indican que es de mayor utilidad un estudio cuantitativo de la actividad de telomerasa que permita evaluar sus niveles de expresin, que nicamente evaluar si est o no presente esta actividad. Por ejemplo, algunas clulas hematopoyticas (precursoras de las clulas sanguneas) presentan normalmente la actividad de telomerasa; sin embargo, cuando se presenta una enfermedad, dicha actividad se incrementa. Es importante destacar, no obstante, que a pesar de que la telomerasa se detecta en la mayora de los distintos tipos de cncer estudiados, existe una proporcin de tumores que mantienen la longitud de sus telmeros mediante mecanismos distintos a la telomerasa.
VALOR CLNICO DEL ESTUDIO DE LA LONGITUD DE LOS TELMEROS

En donde se ha observado una mayor correlacin clnica ha sido en las leucemias (cncer de clulas de la sangre). En pacientes con leucemia mieloide crnica y con leucemia linfoide, la presencia de telmeros cortos es un indicador de progresin maligna, y en el caso de leucemia mieloide crnica, tambin de una mala respuesta al tratamiento. Posiblemente, con las nuevas tcnicas de anlisis de longitud de los telmeros en cromosomas y en clulas individuales, se descubra una mejor correlacin clnica.
PERSPECTIVAS

Independientemente de su gran valor en el estudio bsico de la fisiologa celular, la investigacin sobre la estructura y funcin de los telmeros y la telomerasa ha adquirido gran relevancia en la biomedicina, pues, como se ha descrito en este trabajo, existen implicacio-

CUADRO 1.
ACTIVIDAD DE TELOMERASA EN DISTINTOS TEJIDOS. Tejido
Carcinoma gstrico Metaplasia gstrica Carcinoma colorectal Adenoma colorectal Cncer de pulmn Carcinoma de mama Fibroadenoma Carcinoma de prstata Carcinoma de clulas renales Osteosarcoma Mieloma Sndrome mielodisplsico Leucemia mieloide aguda
Tomado de Dhaene K., 2000

% positividad
87 (61-89) 22 83 (75-100) 36 (15-60) 80-100 90 45 (11-67) 82 (47-92) 65 (56-63) 85 0 33 81

A diferencia de la importancia que tiene la actividad de la telomerasa por su valor pronstico, el estudio de la longitud de los telmeros en diferentes neoplasias no ha mostrado una gran utilidad clnica. La longitud de los telmeros en clulas malignas es muy variable. En algunos tipos de cncer, como en los carcinomas de clulas renales, la longitud de los telmeros de las clulas malignas no presenta cambios, o bien, los telmeros son ms grandes que lo normal. En otras neoplasias, como el cncer de mama, los tumores cerebrales y la mayora de las leucemias, las clulas cancerosas presentan telmeros acortados.

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nes muy importantes en el estudio y tratamiento de enfermedades como el cncer. Debido a que la telomerasa est presente en la mayora de los tumores y a que aparentemente es necesaria para la progresin maligna, se ha planteado como un blanco ideal en la terapia contra el cncer. De hecho, ya existen protocolos experimentales en los que se considera el uso de molculas que contrarrestan la actividad de esta enzima. Esta lnea de investigacin es, sin duda, una de las ms promisorias. Por otra parte, considerando que la senescencia celular est involucrada en mltiples enfermedades, stas podran remediarse si se logra extender el tiempo de vida de las clulas de los tejidos afectados. Algunos ejemplos incluyen la atrofia de las clulas de la piel y la arteriosclerosis, as como diversas enfermedades neurodegenerativas. Finalmente, incrementar el tiempo de vida de las clulas tambin tiene aplicaciones para el estudio in vitro de diversos tipos celulares. Por ejemplo, las clulas humanas normales que posean telomerasa podran utilizarse con mayores ventajas para el estudio de varios procesos tanto bioqumicos como fisiolgicos, ya que seran clulas sin anormalidades cromosmicas y sin estar transformadas. Estas clulas tambin podran ser utilizadas en bioingeniera y en terapia gnica.
Bibliografa Blackburn, E. H. (1994), Telomeres: No end in sight, Cell. 77 (3):621-623. Blasco, M. A. et al. (1997), Telomere shortening and tumor formation by mouse cells lacking telomerase RNA, Cell. 91:25-34. Dhaene, K., E. Van Mark y R. Parwaresch (2000), Telomeres, telomerase and cancer: an up-date, Virchows Archives 437:1-16. Greider, W. C. y E. H. Blackburn (1996), Telmeros, telomerasa y cncer, Investigacin y Ciencia, abril: 20-26. Ishikawa, F. (2000), Aging clock: the watchmakers masterpiece, Cellular and Molecular Life Sciences, 57:698-704.

Kim, N. W. (1994), Specific association of human telomerase activity with immortal cells and cancer, Science, 266:2011-2014. Lansdorp, P. M. (1995), Telomere length and proliferation potential of hematopoietic stem cells, Journal of Cell Science, 108:1-6. Lansdorp, P. M. et al. (1996), Heterogeneity in telomere length of human chromosomes, Human Molecular Genetics, 5 (5): 685-691. Lansdorp, P. M. (1997), Lessons from mice without telomerase, Journal of Cell Biology. 139 (2):309-312. Ramakrishnan, S. et al. (1997), Characterization of human telomerase complex, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 94:10075-10079.

Eugenia Flores Figueroa obtuvo el ttulo de biloga, con mencin honorfica, en la Escuela Nacional de Estudios Profesionales Iztacala, de la Universidad Nacional Autnoma de Mxico (UNAM), siendo becaria del programa de alta exigencia y de la Fundacin UNAM. Realiz la maestra en ciencias con especialidad en biologa celular en la Facultad de Ciencias de la misma universidad. Actualmente cursa el doctorado en ciencias biomdicas en la Facultad de Medicina de la UNAM, y es becaria del Consejo Nacional de Ciencia y Tecnologa, la Direccin General de Estudios de Posgrado de la UNAM y del Instituto Mexicano del Seguro Social. Ha publicado varios artculos en revistas especializadas internacionales. kenaff@hotmail.com Hctor Mayani es bilogo por la Facultad de Ciencias de la UNAM, donde tambin estudi la maestra en ciencias en biologa, e hizo su doctorado en biomedicina en la Universidad de Alberta, en Edmonton, Canad. Llev a cabo su posdoctorado en el Laboratorio Terry Fox, en Vancouver, Canad, y fue investigador visitante en la Universidad de Gales, Cardiff, Gran Bretaa. Ha publicado artculos en revistas especializadas internacionales y nacionales. Es miembro del Sistema Nacional de Investigadores y de la Academia Mexicana de Ciencias. Es jefe de la Unidad de Investigacin Mdica en Enfermedades Oncolgicas, Instituto Mexicano del Seguro Social. Su investigacin est enfocada al estudio de la hematopoyesis (mecanismos de formacin de las clulas sanguneas). hmayaniv@sni.conacyt.mx

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