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Mircoles, 02 de octubre de 2013


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Anticuerpos para todos


El rotavirus es un virus muy resistente e infeccioso que produce diarrea sobre todo en los nios, con riesgos altos en zonas carenciadas. Un grupo de investigadores trabaja en el desarrollo de una vaca transgnica que produzca leche con los anticuerpos que permiten combatirlo y prevenirlo.
Por Leonardo Moledo Qu es lo que quiere averiguar? Nosotros empezamos el grupo de investigacin del rotavirus en la dcada del 90. Es un virus que produce diarrea en los individuos jvenes de muchas especies naturales y tambin en los humanos. Es el principal causal de diarrea en nios menores de 5 aos y produce bastantes muertos en pases subdesarrollados y zonas carenciadas, donde hay problemas de desnutricin infantil. Qu es un rotavirus? Un virus que est formado por protenas y es muy resistente al medio ambiente. Es un virus desnudo. Qu significa eso? Que cuando brota la clula no se lleva membrana celular, es todo protena. Por eso es muy resistente: es muy estable, de modo que cuando cae en el ambiente puede permanecer infeccioso hasta cuatro meses. Eso produce diarrea en los chicos, que se van contagiando unos a otros por contacto fecal-oral. Cmo funciona? El virus, al ser ingerido, se multiplica en el intestino, en el duodeno, en las microvellosidades intestinales, y las destruye. Eso es lo que produce la diarrea. Y qu hacen ustedes? En un primer momento, trabajbamos con el rotavirus de los terneros y desarrollamos vacunas para las vacas. Antes de tener al ternero, vacunbamos a las vacas para que el ternero cuando naciera estuviera protegido. Luego nos dimos cuenta de que con las vacunas no alcanzaba para solucionar el problema, y entonces planteamos terapias complementarias. ...? En este caso, uno multiplica los virus en laboratorio, se inactivan... Cmo? Qumicamente. Se mezclan con alguna sustancia que rompe su ADN o, en este caso, su ARN, pero no altera las protenas. Entonces queda la partcula intacta, proteicamente bien, pero no infecciosa. Y as se inyecta y se generan los anticuerpos. Se tiene que mezclar el virus con sustancias que se llaman adyuvantes que modulan la respuesta inmune y ayudan a que se genere una buena respuesta anticuerpos. Esos anticuerpos en el caso de la vaca se concentran en el calostro, y ese calostro que toma el ternero cuando nace es lo que lo protege de la diarrea. Qu quiere decir que un virus est inactivado? Que se le sac la capacidad de infectar. Ese es un proceso qumico que se hace en el laboratorio antes de inocularlo. El virus pierde la capacidad, as, de generar la enfermedad. Uno tambin puede hacer, como en el caso de los nios con el rotavirus, vacunas atenuadas. Es una vacuna que se le da al nio, que multiplica el virus en el intestino sin generar una enfermedad
Reconstruccin computacional de un rotavirus.

Anticuerpos para todos Por Leonardo Moledo

ES CRIB EN HO Y
Beatriz Vignoli Bernardo Kliksberg Cecilia Hopkins Claudio Socolsky Cristian Vitale Diego Fischerman Elena Llorente Francisco Dos Reis Horacio Gonzlez Javier Aguirre Javier Lewkowicz Jos Maggi Juan Carlos Tizziani Laura Vales Leonardo Moledo Michele Adamo Pascual Calicchio Ral Kollmann Rupert Cornwell Santiago Rial Ungaro Sebastin Fest Silvina Friera Stella Maldonado Vctor Maini Washington Uranga Werner Pertot

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sino en forma atenuada. Y la respuesta inmune del nio a esta vacuna lo protege. Qu significa atenuar? Hace que se multiplique pero de una manera mucho ms leve que la que emplea cuando enferma. Opera sobre el ADN? S, causa una mutacin que hace que el virus quede menos daino en esa especie. En forma emprica, uno lo que hace es pasarlo por otros animales para que se atene en el humano. Ahora, con los avances de la ingeniera gentica, uno se fija en qu lugares crticos puede mutar el genoma del virus para atenuarlo. Hay mucha gente que se dedica a estudiar esto nada ms. Entonces, usted me deca que vieron que las vacunas... Si bien vimos que eran muy buenas, pensamos que tenamos que desarrollar herramientas complementarias. Nos surgi la idea de usar camlidos sudamericanos, que tienen unos anticuerpos diferentes de los rumiantes comunes, que se llaman anticuerpos de cadena pesada. Que son... Esos anticuerpos pueden expresar su parte variable, la que se engancha al virus, como una protena recombinante y se genera un anticuerpo monoclonal recombinante. Qu es? Una lnea de anticuerpos todos iguales. Se llama recombinante porque se expresa sintticamente en un reactor, ya no necesito utilizar un animal, un ratn, y hacer hibridomas. Lo expreso como una protena sinttica. Y descubrimos que uno de esos anticuerpos es capaz de neutralizar la infeccin por todos los rotavirus que afectaban a humanos y animales. Eso fue tan raro que lo pudimos patentar. A partir de all, empezamos a hacer estudios preclnicos en modelos animales para ver si podemos desarrollar una terapia de inmunidad pasiva (es decir, en lugar de vacunas al animal para que genere anticuerpos, le doy anticuerpos ya hechos). Luego dijimos: cul sera la mejor manera de llegar a la poblacin carenciada que necesita estos anticuerpos? Hacer una leche que tenga esos anticuerpos y que se pueda distribuir de forma masiva. Y eso fue lo que intentamos desarrollar. Estos anticuerpos que vienen de camlidos ya sintetizados, no provocan rechazo? No son vistos como algo extrao? No. Los anticuerpos son muy chiquitos, se los llama nano-anticuerpos. Al administrarse oralmente, no hay respuesta inmune del husped. De hecho, los modelos animales que probamos en cerdos ya demostraron funcionar bien. De modo que es una terapia amigable y digna de probarse, porque al no pasar directamente a la sangre no se produce respuesta inmune del husped. Al menos por los estudios que hemos hecho hasta ahora. Y ahora en qu punto estn? Ahora, con el apoyo del Ministerio de Ciencia y Tecnologa y la empresa BioSidus, estamos tratando de generar una vaca transgnica que genere esos anticuerpos en su leche. Ese es el desafo ms grande que tenemos. Cmo va eso? Estamos recin empezando. Por ahora diseamos el cassette que luego va a ir a las vacas... El cassette? Es un plsmido, un pedazo de genoma, donde uno coloca el gen de este anticuerpo y transfecta clulas de glndula mamaria y se fija si una clula de glndula mamaria lo puede producir. Hasta ahora hemos visto que s se producen. Este es el paso previo a empezar a hacer las vacas transgnicas. Y ese anticuerpo combate a todos los rotavirus? Aparentemente, s. Neutraliza a todos, al menos con lo que estuvimos probando.

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O sea que para el... 2018, aproximadamente, el virus quedara muy reducido. Si esa leche fuera accesible para la poblacin en riesgo, ira disminuyendo mucho la incidencia de las diarreas. Sera bueno que fuera utilizado en los planes de los gobiernos provinciales o el gobierno nacional para combatir esta enfermedad. La idea es que llegue a toda la poblacin que la necesita. Difundir lo que estn haciendo es una buena manera de empezar. Sin lugar a dudas.

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