Que es el proceso de la fermentacin La fermentacin se utiliza ampliamente en el sector alimentario y farmacutico.

Requiere cultivar un microorganismo identificado (normalmente una bacteria) en un cultivo sumergido como monocultivo en unas condiciones ambientales definidas. El rgimen de incubacin aplicado se disea para maximizar la productividad del organismo en cuestin al crear unas condiciones ptimas para el crecimiento de la poblacin (biomasa). El producto de inters puede ser un metabolito bioactivo o una protena recombinante. Durante el ciclo de incubacin, se aade una fuente de nutrientes (por ejemplo, celulosa), y la biomasa y el producto final se multiplican a medida que la consumen. http://www.eurotherm.es/industries/lifesciences/applications/fermentation/#sthash.PtYCe7nO.dpuf Un proceso de fermentacin tpico es esencialmente un proceso que se lleva a cabo en un recipiente llamado fermentador o en general, biorreactor, mediante el cual determinados sustratos que componen el medio de cultivo son transforma dos por accin microbiana en metabolitos y biomasa. El microorganismo va aumentando en su concentracin en el transcurso del proceso al mismo tiempo que el medio se va modificando y se forman productos nuevos como consecuencia de las actividades catablicas y anablicas. Los dos fenmenos crecimiento y formacin de producto, tienen lugar durante el desarrollo del proceso simultneamente o no segn los casos. http://www.biologia.edu.ar/microind/aspectos%20generales.htm Microorganimos utilizados en los procesos de fermentacin Se debe a que los microorganismos, al realizar procesos de fermentacin, liberan molculas orgnicas al medio donde se desarrollan, algunas de las cuales tienen utilidad para el hombre; es el caso del cido lctico (fermentacin lctica) y el alcohol etlico y CO2 (fermentacin alcohlica). Los microorganismos que realizan fermentacin lctica (bacterias y algunos hongos) son utilizados industrialmente para la obtencin del queso y otros productos lcteos; los que realizan fermentacin alcohlica (levaduras) son utilizados para la obtencin del vino, cerveza y otras bebidas alcohlicas. Fermentaciones lcticas: Fabricacin del queso La elaboracin del queso y otros productos lcteos, como yogurth, cuajada y requesn, se debe fundamentalmente a las bacterias lcticas (Lactobacillus, Streptococus y Leuconostoc) , que se desarrollan en la leche.

Hidrolizan el azcar de la leche, la lactosa, en glucosa; por fermentacin, la glucosa se degrada liberando energa (los 2 ATP de la glucolisis) y como producto final se obtiene cido lctico. Las tcnicas de fabricacin del queso y de las leches fermentadas son muy antiguas y se cree que nacieron como un medio de conservar la leche, ya que el cido lctico acta como un conservante natural, evitando, por el pH cido que origina en la leche, que se desarrollen en ella microorganismos patgenos. La elaboracin del queso se lleva a cabo en tres etapas: Adicin a la leche de renina, tambin llamada cuajo, una enzima que se extrae del estmago de los rumiantes. En combinacin con el cido lctico producido por las bacterias lcticas, la renina provoca la precipitacin de las protenas lcticas formando un producto slido, la cuajada, que se separa posteriormente del componente lquido, el suero lcteo. Separacin de la cuajada del suero mediante un proceso de filtracin. La filtracin se realiza haciendo pasar el suero a travs de telas limpias. A continuacin, se aade sal a la cuajada. Maduracin del queso. Segn el tipo de queso, en esta etapa final intervienen otras bacterias responsables del sabor y el olor propios de cada variedad de queso. En algunas variedades de queso tambin intervienen hongos, como el Penicilliurn roquefort responsable del color, olor y sabor caractersticos del queso de roquefort.

Fermentaciones alcohlicas Se basan en la accin de levaduras (hongos unicelulares) sobre materiales ricos en glucosa. Estas levaduras degradan la glucosa a alcohol etlico, liberando CO 2. Esta degradacin proporciona a las levaduras energa (los 2 ATP de la glucosilis). Fabricacin del vino El vino es un producto que se obtiene de la fermentacin alcohlica del zumo de uva, realizada por levaduras (Sacharomyces ellipsoideus) que estn en la superficie de las uvas. La elaboracin del vino implica los siguientes procesos: Se inicia triturando las uvas en una mquina hasta obtener un zumo rico en glucosa y fructosa llamado mosto. El mosto se trasvasa a grandes cubas, que pueden ser de madera, de acero o de cemento y se espera unos das a que las levaduras degraden la glucosa de la uva en alcohol etlico. El CO2 liberado en la fermentacin se evapora o se elimina artificialmente, excepto

en el caso de algunos vinos espumosos. Posteriormente, el vino se traslada a cubas de sedimentacin donde precipita un residuo orgnico (orujo). El vino decantado contina la fermentacin algn tiempo ms; para aclararlo, es decir, para eliminar la turbidez que puede tener debido a ciertos componentes, se provoca su precipitacin y luego se filtra el vino A continuacin el vino se trasvasa a cubas de roble para su envejecimiento, que tiene como finalidad que el vino adquiera ciertas caractersticas de color, aroma y sabor; este proceso puede durar aos, como es el caso de algunos tipos de vinos. Fabricacin de la cerveza Requiere un proceso ms complicado desde el punto de vista tecnolgico, ya que implica la obtencin previa de la malta: se llama as a los granos de cebada germinados, que se tuestan y a continuacin se muelen. A este material, rico en glucosa, se le aaden levaduras (Sacharomyces cerevisiae), que desarrollarn una fermentacin alcohlica. El sabor amargo de la cerveza se obtiene aadindole las flores de lpulo y el color que caracteriza a cada tipo de cerveza se obtiene tostando ms o menos la malta. Fabricacin del pan Es un proceso que se realiza desde la antigedad. Los microorganismos que intervienen en la fabricacin del pan son las mismas levaduras que se usan en la obtencin de la cerveza (Saccharomyces cerevisiae); de hecho, se obtienen industrialmente como un subproducto en la fabricacin de la cerveza. La elaboracin del pan consiste en mezclar, en un primer paso, harina, agua, sal y levadura. Al entrar en contacto con el agua, las enzimas amilasas presentes en la harina se activan e hidrolizan el almidn liberando glucosa que es fermentada por la levadura. El CO2 resultante queda atrapado en el interior de la masa y forma un gran nmero de pequeas burbujas que determinan el aspecto esponjoso de la misma. La coccin de la masa elimina el etanol producido en la fermentacin y destruye las clulas de levadura. As mismo, tiene lugar una reduccin importante en el contenido de agua. http://www.elergonomista.com/biologiaselectividad/sb22.html

De acuerdo al tipo de fermentacin Tipos de fermentacin

Fermentacin Actica La fermentacin actica es la fermentacin bacteriana por Acetobacter, un gnero de bacterias aerbicas, que transforma el alcohol en cido actico que se encuentra en pocas proporciones en el vinagre. La fermentacin actica del vino proporciona el vinagre debido a un exceso de oxgeno y es considerado uno de los fallos del vino. La fermentacin actica es un rea de estudio dentro de la cimologa. Fermentacin Alcohlica La fermentacin alcohlica es un proceso biolgico de fermentacin en plena ausencia de aire (oxgeno - O2), originado por la actividad de algunos microorganismos que procesan los hidratos de carbono (por regla general azcares: como pueden ser por ejemplo la glucosa, la fructosa, la sacarosa, el almidn, etc.) para obtener como productos finales: un alcohol en forma de etanol (cuya frmula qumica es: CH3-CH2-OH), dixido de carbono (CO2) en forma de gas y unas molculas de ATP que consumen los propios microorganismos en su metabolismo celular energtico anaerbico. Fermentacin Butrica La fermentacin butrica (descubierta por Louis Pasteur) es la conversin de los glcidos en cido butrico por accin de bacterias de la especie Clostridium butyricum en ausencia de oxgeno. Se produce a partir de la lactosa con formacin de cido butrico y gas. Es caracterstica de las bacterias del gnero Clostridium y se caracteriza por la aparicin de olores ptridos y desagradables. Se puede producir durante el proceso de ensilado si la cantidad de azcares en el pasto no es lo suficientemente grande como para producir una cantidad de cido lctico que garantice un pH inferior a 5. Fermentacin Lctica La fermentacin lctica es una ruta metablica anaerbica que ocurre en el cito sol de la clula, en la cual se oxida parcialmente la glucosa para obtener energa y donde el producto de desecho es el cido lctico. Este proceso lo realizan muchas bacterias (llamadas bacterias lcticas), hongos, algunos protozoos y muchos tejidos animales; en efecto, la fermentacin lctica tambin se verifica en el tejido muscular cuando, a causa de una intensa actividad motora, no se produce una aportacin adecuada de oxgeno que permita el desarrollo de la respiracin aerbica. Fermentacin Ptrida

La fermentacin ptrida es un tipo de fermentacin que se lleva a cabo sin gasto de sustrato oxidante. Se basa en la degradacin de sustratos de naturaleza proteica, y produce productos malolientes como escatol, cadaverinas o indol. APLICACIONES DE LA FERMENTACION Fermentacin alcohlica: Una de las mejoras ms estudiadas en la industria es la posibilidad de realizar la fermentacin alcohlica continua con el objeto de obtener mayores cantidades de etanol. Hoy en da el procesamiento industrial de algunas bebidas alcohlicas como puede ser el vino o la cerveza se realizan en ambientes controlados capaces de ofrecer a un ritmo apropiado de estos productos de consumo al mercado. Una organizacin que utiliza este tipo de fermentacin es la empresa brasilea "Ethanolpar", la cual se dedica a la produccin de bioetanol. Fermentacin actica La fermentacin actica del vino proporciona el vinagre. La formacin de cido actico resulta de la oxidacin del alcohol por la bacteria del vinagre en presencia del oxgeno del aire. Estas bacterias, a diferencia de las levaduras productoras de alcohol, requieren un suministro generoso de oxgeno para su crecimiento y actividad. Vinagres Cetrill es una empresa espaola dedicada a la produccin de vinagre de vino y es un claro ejemplo de la utilizacin de fermentacin actica dentro de la industria. Fermentacin butrica Es la conversin de los glcidos en cido butrico por accin de bacterias de la especie Clostridium butyricum en ausencia de oxgeno. Se produce a partir de la lactosa con formacin de cido butrico y gas. Es caracterstica de las bacterias del gnero Clostridium y se caracteriza por la aparicin de olores ptridos y desagradables. Se puede producir durante el proceso de ensilado si la cantidad de azcares en el pasto no es lo suficientemente grande como para producir una cantidad de cido lctico que garantice un pH inferior a 5. Un buen ejemplo de la utilizacin de la fermentacin butrica, es la empresa mexicana PEMEX, la cual contempla entre sus diversas actividades la produccin de cido butrico. Fermentacin lctica Un ejemplo de este tipo de fermentacin es la acidificacin de la leche. Ciertas bacterias (Lactobacillus, Streptococcus), al desarrollarse en la leche utilizan la

lactosa (azcar de leche) como fuente de energa. La lactosa, al fermentar, produce energa que es aprovechada por las bacterias y el cido lctico es eliminado. La coagulacin de la leche (cuajada) resulta de la precipitacin de las protenas de la leche, y ocurre por el descenso de pH debido a la presencia de cido lctico. Este proceso es la base para la obtencin del yogur. El cido lctico, dado que otorga acidez al medio, tiene excelentes propiedades conservantes de los alimentos. La empresa espaola Danone es un buen ejemplo de la utilizacin de la fermentacin lctica en la industria, puesto que esta produce yogurth utilizando el proceso de fermentacin lctica. Fermentacin ptrida: Se basa en la degradacin de sustratos de naturaleza proteica, para obtener productos malolientes como escatol, cadaverinas o indol. Algunas putrefacciones dan lugar a productos poco desagradables, que, por su fuerte aroma y sabor son utilizados en la fabricacin de vinos y quesos, como la que lleva a cabo el Penicillum rocheforti, que es la causa de las manchas verdosas del queso Roquefort. Tambin puede producir gases apestosos como los son el cido sulfhdrico que tiene olor a huevo podrido. http://www.slideshare.net/JudyRosero/fermentacin-5290812 http://www.buenastareas.com/ensayos/Tipos-De-Fermentacion/3806746.html Productos que se obtienen de los diferentes tipos de fermentacin La fermentacin microbiana tiene un sinnmero de usos y aplicaciones en la industria hoy da. Mediante la fermentacin microbiana se ha logrado la elaboracin de diferentes productos como lo son: alimentos, vitaminas, bebidas alcohlicas, productos farmacuticos, qumicos, combustibles, enzimas, biomasa, protenas, entre otros. Los productos antes mencionados se generan por medio de diferentes tipos de fermentacin. La fermentacin lctica (queso, yogurt), fermentacin alcohlica (vino, cerveza, alcohol, cigarrillos, chocolate, pan y otros) y la fermentacin actica (vinagre). Un ejemplo de esta tecnologa es la produccin industrial de eritromicina, antibitico producido por el actinomiceto gram positivo Saccharopolyspora erythraea bajo fermentacin aerbica utilizando aceite de soya como fuente principal de carbono y cido propionico como precursor. La produccin de eritromicina es actualmente llevada a cabo en la planta de Abbott en P.R.

La fermentacin microbiana tambin es un medio de produccin de vitaminas. Entre el grupo de vitaminas generadas por este medio podemos encontrar las siguientes: cido ascrbico, riboflavinas, beta-caroteno, vitamina B12, cido flico y la pro vitamina A. Las de mayor importancia a nivel industrial son: riboflavina, beta-caroteno y vitamina B12. En sus comienzos la vitamina B12 fue obtenida como un subproducto de los estreptomicetos en la produccin de estreptomicina. En la actualidad la produccin de esta vitamina es llevada a cabo por varias bacterias entre estas:Propionibacterium fredenreichii, Propionibacterium shermani y Pseudomonas denitrificans La fermentacin de riboflavina puede llevarse a cabo mediante bacterias, hongos o levaduras. Entre los organismos utilizados: Emerothecium ashbyii y Ashbya gossypii. Los rendimientos ms altos en la produccin del Beta-caroteno se han obtenido mediante la fermentacin del hongo Blakeslea trispora donde se emplean ambas formas sexuales (+ y -). Estas dos formas sexuales no tienen que estar en igual concentracin ya que la encargada verdaderamente de la formacin de betacaroteno es la cepa negativa. Con respecto a las bebidas alcohlicas en la elaboracin de vinos tambin hace uso de esta tcnica. El proceso mediante el cual es producido vino es el siguiente La elaboracin del vino puede tener como materia prima cualquier fruta o vegetal con alto contenido de azcares pero se asocia a los vinos de calidad con uvas. La fermentacin de estas uvas es llevada a cabo por levaduras silvestres (presentes de forma natural en las uvas) o por lo general Saccharomyces cerevisiae. Luego de fermentado estas levaduras son separadas del vino por sedimentacin. El vino se aeja. Como han podido apreciar la tcnica de fermentacin microbiana es una de gran utilidad en la elaboracin de muchos de los productos de nuestro diario vivir. http://www.jrc.es/pages/iptsreport/vol20/spanish/FOO1S206.htm http://edicion-micro.usal.es/Web/SEFIN/MI/tema18MI.html http://www.porquebiotecnologia.com.ar/educacion/cuaderno/ec_53.asp?cuaderno= 53#arriba#arriba

http://www.javierhuertas.com/PTMA-04-01.html Produccin de enzimas Los procesos de produccin de enzimas microbianas se realizan mediante cultivos aerbicos. En general las enzimas se producen en pequeas cantidades durante la fase de crecimiento activo, pero se acumulan en grandes cantidades en la fase estacionaria del crecimiento. Las enzimas inducibles se producen slo cuando en el medio se encuentra el inductor (sustrato). Las enzimas microbianas que se producen en mayor cantidad son proteasas, utilizadas como aditivos en los detergentes para lavar ropa. Tambin los detergentes contienen amilasas, lipasas, reductasas y otras. Muchas de estas enzimas son producidas a partir de bacterias alcalfilas, especialmente de Bacillus licheniforme. Estas enzimas tienen pH ptimo entre 9 y 10, as permanecen activas al pH alcalino de las soluciones de los detergentes. Amilasas, se producen mediante fermentacin y se utilizan en la conversin de cereales en el producto final llamado jarabe de cereales rico en fructosa. Alfa amilasa provoca ataque inicial al polmero, acortando la cadena y reduciendo la viscosidad del polmero, clarificante. Glucoamilasa produce monmeros de glucosa, sacarificante. Glucosa isomerasa realiza la conversin final de glucosa en fructosa, isomerizacin. Invertasa se produce a partir del cultivo de Saccharomyces cerevisiae, se utiliza para impedir la cristalizacin de azcares, pues convierte sacarosa en azcares ms solubles. Tambin se inyecta en el interior de los caramelos. Pectinasas, producidas por cepas de Aspergillus, se utiliza para licuar jugos de frutas. Renina, producida por cepas de Mucorse utiliza para coagular la leche en la produccin de quesos. Proteasas, para ablandar carnes de Bacillus y Aspergillus. Lactasa, de Kluyveromycesfragilis, para evitar la cristalizacin de helados.

ENZIMAS MICROBIANAS Y SUS APLICACIONES APLICACIN ENZIMA FUENTE INDUSTRIA INDUSTRIAL Amilasa Hongos Pan Panadera Bacterias Almidonado en Almidn frio ropa Hongo Ayuda digestiva Farmacutica Bacterias Elimina manchas Detergentes Lipasa Hongos Degradar grasas Lechera, lavandera Celulasa Bacterias Suavizante y Lavandera ablandador de tejidos Proteasas Hongos Pan Panadera Bacterias Ablandador Carnes carnes Bacterias Limpieza de Medicina heridas Bacterias Detergente Lavandera domestico Invertasas Levadura Relleno blando Confitera caramelo Glucoxidasas Hongos Eliminacin de Alimentacin glucosa y Oxigeno http://www.itescam.edu.mx/principal/sylabus/fpdb/recursos/r72267.PDF

MEDIOS DE CULTIVO De manera general se denomina medio de cultivo a cualquier material que presente una adecuada combinacin de nutrientes para permitir el crecimiento o el incremento del nmero de clulas de una poblacin microbiana. En los Laboratorios de Microbiologa se utiliza una gran variedad de medios de cultivos para mantener las cepas, aislar o identificar microorganismos con varias finalidades: determinar la existencia de contaminacin de alimentos, medicamentos o cosmticos; diagnosticar alguna enfermedad, elaboracin de vacunas bacterianas, etc. CONSTITUYENTES BSICOS DE LOS MEDIOS DE CULTIVO

1. FUENTES DE ENERGA 1.1 Orgnicas: carbohidratos, protenas, polisacridos, grasas, cidos orgnicos, etc. 1.2 Inorgnicas: Ej. amonio, nitritos, azufre, etc. 1.3 Luz. 2. COMPONENTES ESTRUCTURALES CELULARES 2.1 Componentes principales: Carbono, hidrgeno, oxgeno, nitrgeno, azufre, fsforo, potasio, magnesio, calcio, hierro y sodio. 2.2 Elementos trazas: Cobalto, zinc, molibdeno, cobre y manganeso. 2.3 Factores de crecimiento: Se llama as a cualquier compuesto orgnico que un microorganismo requiere como precursor o constituyente de su material orgnico celular, pero que no puede sintetizarlo a partir de sus fuentes de carbono ms simples, por lo que se le debe proporcionar como nutriente. Ej. aminocidos, purinas, pirimidinas y vitaminas. Ciertas bacterias patgenas requieren sangre o heme. Ej. Gnero Haemophilus. 3. AGUA CLASIFICACIN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO 1. Segn su estado fsico. 1.1 Lquidos Usualmente se denominan caldos ya que contienen los nutrientes disueltos en agua. Permiten obtener suspensiones con un elevado nmero de microorganismos. Ej. Caldo nutritivo. 1.2 Solidos Se pueden preparar a partir de medios lquidos a los cuales se les aaden agentes solidificantes como agar, gelatina o slica gel. Se utilizan con frecuencia en el aislamiento y antenimiento de los microorganismos en el laboratorio. Ej. Agar nutritivo.

2. Segn la naturaleza de sus constituyentes 2.1 medios naturales o complejos Estn constituidos por sustancias complejas de origen animal o vegetal y usualmente se complementan con el aadido de minerales y otras sustancias. No se conocen todos los componentes del medio de cultivo, ni las cantidades exactas en que estn presentes. Ej. Extracto de carne, extracto de levaduras. 2.2 medios sintticos o qumicamente definidos Se preparan a partir de ingredientes qumicamente puros y por lo tanto se puede conocer exactamente su composicin cuali y cuantitativa. Por su costo slo se emplean en procedimientos especiales. 3. Segn sus propsitos de uso 3.1 medios de enriquecimiento Se llama enriquecimiento a cualquier cultivo en medio lquido que resulte en un incremento en el nmero de un tipo dado de microorganismo en relacin con el nmero de otros tipos de microorganismos que puedan estar en el inculo. Un medio de enriquecimiento puede contener sustancias que favorezcan el crecimiento del microorganismo que nos interesa o que inhiban el crecimiento de los otros tipos de microorganismos presentes. La selectividad de un cultivo de enriquecimiento no est determinada nicamente por la composicin qumica del medio usado, sino que en un medio dado puede ser variada significativamente modificando otros factores tales como: temperatura, pH, fuerza inica, iluminacin, aireacin etc. Ej. Caldo tetrationato utilizado para el enriquecimiento de las especies del gnero Salmonella provenientes de muestras de heces, orina, agua o alimentos. 3.2 Medios selectivos Bsicamente iguales a los de enriquecimiento, se diferencian por ser medios slidos y estn diseados para el aislamiento de microorganismos especficos.

Ej. Agar desoxicolato citrato utilizado para el aislamiento de patgenos entricos.

3.3 Medios diferenciales No contienen sustancias inhibidoras, es decir, permiten el crecimiento de muchos tipos de microorganismos, pero si contienen indicadores de productos derivados de la actividad metablica de los microorganismos sobre algunos de los componentes del medio. Se utilizan para la identificacin de los microorganismos. Ej.: Agar base rojo fenol utilizado para detectar fermentacin de carbohidratos. 3.4 Medios selectivos diferenciales A veces se combinan en un mismo medio las caractersticas de ser selectivo y diferencial. Ej.: el agar Mac Conkey contiene sales biliares y cristal violeta, que inhiben el crecimiento de las bacterias gram positivas. Pero como tambin contiene lactosa y un indicador de pH permite distinguir entre las bacterias fermentadoras de lactosa y las que no lo son. REQUERIMIENTO DE NUTRIENTES EN LA FERMENTACIN Los requerimientos nutricionales estn determinados por el tipo de metabolismo celular, ya sea autotrfico, que corresponde a los microorganismos que obtienen el Carbono del C02 como las algas y algunas bacterias, y los heterotrficos que necesitan compuestos orgnicos como fuente de carbono. Otro factor esencial est determinado por las condiciones del cultivo, si es aerobio o anaerobio. El 02 es uno de los oxidantes ms comunes en el metabolsmo energtico. En la ausencia del 02, el N03 o S04 son utilizados como aceptores de electrones por algunas bacterias. Las bacterias metanognicas son auxtrofos anaerobios que utilizan H2 para reducir el C02 a CH4 para obtener energa. Otros protistas obtienen su energa, en condiciones anaerobias por reaccin de xido-reduccin realizadas sobre compuestos orgnicos. Las fuentes de carbono cumplen tambin el rol de ser fuente de energa.

Otro requerimiento nutricional est constituido por las fuentes de nitrgeno que pueden ser de naturaleza inorgnica u orgnica. El nitrgeno es utilizado para la biosntesis de protenas, cidos nucleicos y polmeros de la pared celular. Para la sntesis de protena se requieren en general L-aminocidos, aunque tambin son necesarios algunos aminocidos de la serie D como D-alanina y D-asprtico para su incorporacin a la pared de la clulas. En algunos casos se requieren tambin pptidos de histidina. Los requerimientos de otros macronutrientes como el P y el S son suministrados en forma de P04H y S04 (o aminocidos azufrados). El fsforo se incorpora en cidos nucleicos, y polmeros celulares. El S es asimilado para la sntesis de aminocidos azufrados, y adems se necesita para la biotina, coenzima A, tiamina y otros componentes. Los requerimientos de K y Mg son tambin esenciales. Una parte importante del primero est unida al RNA de manera que los requerimientos de K aumentan con los factores que influyen en el aumento del RNA de las clulas, como la velocidad de crecimiento. El in K actua como coenzima y probablemente acta como catin en la estructura aninica de varios componentes celulares. El in Mg es esencial para la estabilidad de los ribosomas y actua como cofactor en numerosas reacciones del metabolismo. Tanto el K como el Mg se incorporan a los medios en forma de sales como fosfato y sulfato. Con respecto a los micronutrientes se distinguen 2 categoras: a) Los que son frecuentemente esenciales para el crecimiento como Ca, Mn, Fe, Co, Cu y Zn y b) los que son raramente esenciales como B, Na, Al, Si, Cl, V, Cr, Ni, As, Se, Mo, Sn, e I. En general los requerimientos de trazas de elementos son conocidos cualitativamente. A veces es difcil demostrar un requerimiento de un micronutriente porque generalmente est presente en suficiente cantidad como impureza de los componentes principales. Los requerimientos de stos compuestos pueden aumentar varias veces cuando el cultivo ha estado sujeto a "strees", como por ejemplo por aumento de temperatura por encima de un valor ptimo. Los requerimientos de factores de crecimiento comprenden ciertos aminocidos y vitaminas del grupo B como tiamina, riboflavina, cido pantottico, niacina, etc., que representan para muchas bacterias y levaduras factores esenciales en los medios sin los cuales no se

produce crecimiento celular. La mayor parte de las vitaminas son constituyentes de co-enzimas. Otros factores de crecimiento son las purinas, poliaminas, putrescinas, etc. En algunos procesos existe la necesidad de efectuar otros agregados, a parte de los nutrientes requeridos por los microorganismos y que representan los requerimientos especficos del proceso considerado. Un ejemplo es el caso de los precursores que constituye la base de una molcula que debe ser sintetizada por el microorganismo, como el cido fenil actico para la penicilina. Otro ejemplo es el agregado de ciclo dextrinas en procesos de produccin de Bordetella pertussis que puede actuar como complejante de inhibidores de crecimiento celular. El agregado de cloruros o bromuros en el caso de algunos antibiticos como cloro y bromotetraciclinas, tetraciclidas producidas por el Streptomyces aureofaciens, responde tambin a requerimientos especficos para inhibir la sntesis de productos no deseados, como ocurre tambin con el agregado de mananos y barbitricos en la produccin de estreptomicina por S. griseus. El agregado de sulfato, en el proceso de fermentacin alcohlica, que favorece la formacin de glicerol, es otro ejemplo de un requerimiento especfico. El diseo correcto tiene que ver con las caractersticas bioqumicas propias y evolucin de los parmetros de cada proceso. Por ejemplo, un proceso caracterizado por un descenso continuo de pH, debido al uso de una sal de amonio como fuente de nitrgeno, obliga a considerar en su diseo algn agregado que no corresponda a una exigencia nutricional, como es el caso del control de pH del mismo. Este puede efectuarse por agregados al medio de agentes "buffer" como mezclas de fosfatos o de carbonato de calcio o como ms generalmente se hace, con agregados peridicos de soluciones alcalinas que pueden efectuarse en forma ms conveniente mediante un control automtico de pH. El diseo de un medio especfico para la produccin de cido ctrico debe considerar la influencia negativa que para el proceso tiene un exceso de hierro en su composicin; por lo tanto dicho medio debe disearse de manera tal que su preparacin (a partir de diversas materias primas) considere una eliminacin total del hierro y posterior agregado del mismo en cantidades controladas.

MATERIAS PRIMAS FUNDAMENTALES Las materias primas ms importantes corresponden a fuentes de carbono y de nitrgeno. Las fuentes de carbono pueden ser: 1. Hidratos de carbono como glucosa o dextrosa, sacarosa, lactosa, almidn, dextrina. 2. Alcoholes como el glicerol y manitol. 3. Hidrocarburos como hexadecano, octadecano y otros. Son muy importantes tambin por su disponibilidad y costo reducido otras materias primas que contienen hidratos de carbono como granos, melazas, celulosas, suero de queso, etc. Tambin se pueden emplear otros subproductos o efluentes de industrias que por su contenido en fuentes de carbono son interesantes para algunos procesos como las vinazas de destilera, alpechn y residuos sulfiticos, que son sin embargo solamente tiles para procesos de produccin de biomasa destinados al consumo animal, ya que si bien contienen hidratos de carbono y otras fuentes de carbono asimilables por los microorganismos, tambin contienen muchas impurezas que impiden su utilizacin en otros procesos por las dificultades y costo elevado que presentan las operaciones de separacin y purificacin de los productos. Las fuentes de nitrgeno de naturaleza inorgnica ms comunes son el amonaco o las sales de amonio. Las orgnicas estn representadas por varios productos, como ser: Hidrolizados de protenas (Peptonas) que son obtenidas por hidrlisis cida o enzimtica de distintas fuentes proteicas como carne de diferentes rganos y animales, pescado, casena, gelatina, harina de soja, algodn, girasol, etc.. Mediante ajuste de la relacin enzimasustrato y variando tiempo de hidrlisis es posible variar el tamao de la cadena de polipptidos. Aparte de su funcin como fuente nitrogenada, las peptonas aportan algunas vitaminas y sales inorgnicas como fosfatos y suministran tambin algunos micronutrientes como Ca, Zn, Fe y Cu. Extracto de carne, que se obtiene por extraccin acuosa y concentracin posterior variando su tipo de acuerdo a la calidad de carne, tiempo de extraccin y temperatura de la misma.

Extracto de levadura, que es disponible en forma de pasta o polvo, y puede ser obtenida mediante autlisis o plasmlisis de la levadura, es bsicamente una mezcla de aminocidos, pptidos, vitaminas solubles en H2O y carbohidratos. Extracto de malta, que es el extracto soluble en H2O de la malta de la cebada y "Cornsteep", el agua de maceracin de la industria del maz tiene mucha importancia por su utilizacin como componente esencial de los medios para la produccin de varios antibiticos y enzimas. Es muy importante tambin la correcta eleccin de una determinada fuente cuando se presentan varias alternativas posibles. En este sentido deben considerarse los costos, la disponibilidad y el problema de impurezas que puede acompaar a las distintas materias primas utilizadas.

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