Los viroides de los cítricos:

Enfermedades y control

Núria Duran-Vila
Departamento de Protección Vegetal y Biotecnología
Instituto Valenciano de Investigaciones Agrarias

INSTITUTO VALENCIANO DE INVESTIGACIONES AGRARIAS

 LOS VIROIDES DE LOS CITRICOS

• El descubrimiento de los viroide como

agentes patógenos de citricos está
ligado a su propagación por injerto.

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Historia de los cítricos injertados (1)
España 1850: Utilización de plantas injertadas
en lugar de plantas de semilla. Elección de un
buen patrón (cidro, limonero, naranjo dulce,
naranjo agrio,....

España 1862: La mayoría de patrones resultaron

ser sensibles a Phytophthora.

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 Phytophthora gummosis
on sweet orange seedling tree,
Bijayachap, Nepal, 1994

Daños producidos por Phytophthora

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Historia de los cítricos injertados (2)
España 1862: La mayoría de patrones resultan ser
sensibles a Phytophthora. EL NARANJO AGRIO
resultó ser resistente.

España 1870: Auge del naranjo agrio como patrón

tolerante en España, los países de la cuenca del
Mediterráneo, California y América del Sur.

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Una nueva enfermedad en árboles
injertados en naranjo agrio: Tristeza

1904. Declinamiento de
árboles en Sudáfrica.
1930. Declinamiento rápido
de árboles en Argentina.
1937. La misma enfermedad
en Brasil.
1939. La misma enfermedad
en California.
Declinamiento rápido afectaba los árboles sobre naranjo
agrio, pero no los árboles sobre otros patrones. Riverside,
California.
Una nueva enfermedad en árboles
injertados en naranjo agrio: Tristeza
1946. La enfermedad es trasmisible por injerto
Probablemente causada por un virus
Los pulgones actuan como vectores
1963. Se observa el virus (CTV) por EM
 Control de la Tristeza
CTV:
Afecta la combinación de dos individuos: patrón
(naranjo amargo) y variedad (naranjo dulce,
mandarino y otros)

Búsqueda de patrones alternativos que den

combinaciones tolerantes:
Poncirus trifoliata y sus híbridos (citranges,
citrumelo), naranjo, mandarino Cleopatra,
tangelos, limón rugoso, lima Rangpur,
Citrus volkameriana,…
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Problemas asociados con la sustitución
del naranjo amargo (1)

Exocortis (California, 1948)

Scaly butt (Australia, 1949)
Rangpur lime disease (Brazil, 1956)

Descamaciones: P. trifoliata,
citranges, citrumelos (?), lima
Rangpur, .....

Un viroide es el agente causal: CEVd

Problemas asociados con la sustitución
del naranjo amargo (2)

Xiloporosis (Palestina, 1934)

Caquexia (Florida, 1950)
Acanaladuras y exudación de goma
en algunos patrones: lima dulce de
Palestine, tangelo Orlando, lima
Rangpur, C. macrophylla
Variedades: mandarinas, clementinas,
satumas, ....
Un viroide es el agente causal: HSVd
¿Qué son los viroides?

Los viroides no son virus

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 Viroides
• Moléculas circulares de RNA monocatenario.
• Pequeño tamaño (246 y 401 nt.)
• Los viroids no codifican para proteínas.
• Replicación autónoma.
• Fósiles moleculares de un mundo precelular.
• Agentes fitopatógenos.
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 Viroides
• Moléculas circulares de RNA monocatenario.
• Pequeño tamaño (246 y 401 nt.)
• Los viroids no codifican para proteínas.
• Replicación autónoma.
• Fósiles moleculares de un mundo precelular.
• Agentes fitopatógenos.
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 Viroides
• Moléculas circulares de RNA monocatenario.
• Pequeño tamaño (246 y 401 nt.)
• Los viroids no codifican para proteínas.
• Replicación autónoma.
• Fósiles moleculares de un mundo precelular.
• Agentes fitopatógenos.
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 Diagnóstico de viroides
• No EM
• No serología
• Análisis de ácidos nucleicos

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 Diagnóstico de viroides
• No EM
• No serología
• Análisis de ácidos nucleicos

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 Diagnóstico de viroides
• No EM
• No serología
• Análisis de ácidos nucleicos

exocortis

caquexia- xiloporosis

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Estructura secundaria de los viroides

• Auto-complementaridad.
• Estructura secundaria en forma de varilla.
• Apareamiento de bases alternando con bucles.
• Estabilidad.
• Transmisión mecánica.
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Estructura secundaria de los viroides

• Auto-complementaridad.
• Estructura secundaria en forma de varilla.
• Apareamiento de bases alternando con bucles.
• Estabilidad.
• Transmisión mecánica.
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Criterios de clasificación

• Pospiviroidae (PSTVd)
• Avsunviroidae (ASBVd)
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 Viroides de cítricos
Familia Género Especie
Pospiviroidae Pospiviroid CEVd
Hostuviroid HSVd
Cocadviroid CBCVd (CVd-IV)
Apscaviroid CBLVd (CVd-I)
Apscaviroid CDVd (CVd-III)
Apscaviroid “CVd-OS”
Apscaviroid “CVd-V”
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Viroides de cítricos
CEVd
CBLVd
HSVd
CDVd
CVd-IV

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Viroides de cítricos
CEVd
CBLVd
HSVd
CDVd
CVd-IV

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 Enfermedades
producidas por viroides
Viroide Enfermedad
CEVd Exocortis
HSVd Caquexia (xiloporosis)
CBCVd
CBLVd
CDVd
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 Enfermedades
producidas por viroides

• Exocortis producida por CEVd

• Caquexia producida por HSVd
• Efecto de otros viroides
• Métodos de control
• Otras enfermedades atribuidas a viroides

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CEVd es el agente causal de exocortis
Descamaciones de la corteza en P. trifoliata
 Exocortis
•Clementino injertado en Poncirus trifoliata
•Escamas en el patrón Poncirus trifoliata
•Enanismo acusado
Enanismo INSTITUTO VALENCIANO DE INVESTIGACIONES AGRARIAS
Exocortis: Citranges INSTITUTO VALENCIANO DE INVESTIGACIONES AGRARIAS
Exocortis: Citranges INSTITUTO VALENCIANO DE INVESTIGACIONES AGRARIAS
Exocortis: Citranges INSTITUTO VALENCIANO DE INVESTIGACIONES AGRARIAS
Exocortis: Clementino / C. carrizo
Exocortis: Navelina / C. carrizo
Síntomas en lima Rangpur INSTITUTO VALENCIANO DE INVESTIGACIONES AGRARIAS
Síntomas en lima Rangpur INSTITUTO VALENCIANO DE INVESTIGACIONES AGRARIAS
HSVd es el agente causal de caquexia
Exhudaciones de goma en tangelo Orlando
Síntomas en Citrus macrophylla
Síntomas en C.macrophylla como
patrón de limonero
Síntomas en clementino
 Cachexia

No-cachexia

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Síntomas de cachexia en
mandarino Parson’s INSTITUTO VALENCIANO DE INVESTIGACIONES AGRARIAS
¿Qué producen los otros viroides?
Otros síntomas causados por
viroides en P. trifoliata

CEVd HSVd CVd-IV

Estos síntomas están asociados con
síntomas en corteza y madera
 Resumen
Alteraciones en P. trifoliata
Viroide Escamas Grietas Enanismo

CEVd + + Acusado
CBLVd - - Leve
CVd-III - - Moderado
CVd-IV - + -
HSVd - + Leve

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Other alterations:
Enanismo
 El enanismo causado por viroides
conduce a una reducción de la cosecha
Enanismo Cosecha

Control - 100%
CEVd Acusado 54%
CBLVd Leve 81%
CDVd Moderado 66%
CVd-IV - 99%
HSVd Leve 98%
Disminución de la cosecha
Las plantaciones de cítricos

Cualquier árbol sobre Poncirus trifoliata,

lima Rangpur, citrange Troyer o Carrizo es
sensible a exocortis y a otros viroides.
Cualquier árbol sobre C. macrophylla
es sensible a caquexia – xiloporosis.
Todos los mandarinos, clementinos,
satsumas e híbridos sobre cualquier patrón
son sensibles a caquexia – xiloporosis
El material vegetal en relación a estas
enfermedades

Disponibilidad de plantas libres de viroides

(viveros autorizados)
Distribución de plantas portadoras de viroides
(viveros clandestinos)
Coexistencia de plantaciones antiguas sobre
naranjo amargo que aunque no manifiestan
síntomas son portadoras de viroides
Control
 Epidemiología

• No se conocen vectores
• No hay transmisión por semilla
• Dispersión de las enfermedades:
Propagación de material infectado
Transmisión mecánica

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Las plantas portadoras de viroides son
reservorios desde los que pueden ser
transmitidos a plantas inicialmente sanas

Modo de transmisión:
• Propagación
• Sobreinjerto
• Transmisión mecánica
 Control de las enfermedades
producidas por viroides

• Utilizar material de propagación sano

• Utilizar yemas procedentes de plantas

sanas para el sobreinjerto

• Evitar la difusión de viroides mediante

transmisión mecánica
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 Control de las enfermedades
producidas por viroides
Uso de material libre de viroides para la
propagación
Se necesitan métodos de detección
Se necesitan métodos de saneamiento
Cuarentena y certificación

Evitar la transmisión mecánica

Viveros
Plantaciones comerciales INSTITUTO VALENCIANO DE INVESTIGACIONES AGRARIAS
 Métodos de detección
Bioensayo
Transmisión a plantas indicadoras
Observación de síntomas
Detección por métodos de laboratorio
Análisis de ácidos nucleicos
Detección biológica + laboratorio
El cidro actua como amplificador
Análisis de ácidos nucleicos
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 Bioensayo

Bioensayo de exocortis
Uso de cidro Etrog como indicator
Se detectan los otros viroides

Bioensayo de caquexia
Mandariono Parson’s Special

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Respuesta del cidro Etrog
• Inoculation por injerto del cidro Etrog
• Incubación a 28-32ºC durante 3-6 meses
• Observación de síntomas
CEVd HSVd
 Respuesta del mandarino Parson’s Special
• Inoculación por injerto del mandarino Parson’s
propagado sobre un patrón vigoroso.
• Incubación a 28-32ºC durante 9-15 meses
• Observación de síntomas en la unión
Métodos de diagnóstico

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Métodos de diagnóstico

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Métodos de diagnóstico

Hibridación Northern

RT-PCR

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 Evitar la transmisión mecánica

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Otras enfermedades atribuidas a
viroides
“Quebra galho”

Corteza gomosa (“gummy bark”)

Bolsas de goma-acanaladuras gomosas

(“Gum pocket - Gummy pitting”)

Enfermedad de Kassala (“Kassala disease”)

 “Quebra-galho”
Desorden observado en limón Persa
“Quebra-galho”: CEVd

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“Quebra-galho”: CEVd

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“Quebra-galho” no es “Wood pocket”
 “Gummy bark”
Desorden descrito en naranjo dulce

Descrita en países del este del Mediterráneo,

Norte de Africa and Oriente próximo.
“Gum pocket - Gummy pitting”
Desorden descrito en P. trifoliata

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 “Kassala disease”
Desorden observado en toronja

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Dra. Carmen Fagoaga
Dr. Juan Romero Durbán
Dra. Ana Palacio Bielsa
Dr. Mohammed Chaffai
Dr. Ziad Ghaleb Nimer Fadda
Dra. Mónica Gandía
Dra. Cristiane de Jesús Barbosa
Dra. Karelia Velázquez
Dra. Lucía Bernad Palomares
Dr. Pedro Serra Alfonso
Mehdi Beni Hashemian, becario
Nubia Murcia, becaria
Esther Debón, becaria
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Dra. Carmen Fagoaga Dolores Abanto Peiró
Dr. Juan Romero Durbán Margarita Bazzi
Dra. Ana Palacio Bielsa Ana Gabriela Pagliano
Dr. Mohammed Chaffai José María Corvera
Dr. Ziad Ghaleb Nimer Fadda Llúcia Martinez Priego
Dra. Mónica Gandía
Dra. Cristiane de Jesús Barbosa
Dra. Karelia Velázquez
Dra. Lucía Bernad Palomares
Dr. Pedro Serra Alfonso
Mehdi Beni Hashemian, becario
Nubia Murcia, becaria
Esther Debón, becaria
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