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DETERMINACIN PRELIMINAR DE METABOLITOS EN HOJAS Y CORTEZA DE CAMU CAMU (Myrciaria dubia (H.B.K.

) Mc Vaugh) EN TRES ETAPAS FENOLGICAS


Cecilia Luque Portillo1 Hctor Enrique Gonzles Mora2 Graciela Egoavil Cueva Glvez 3
RESUMEN

El Camu camu arbustivo (Myrciaria dubia) es una promisoria planta nativa de la Amazona Peruana. Durante muchos aos ha venido siendo utilizada por las poblaciones locales de la selva baja como medicina natural contra afecciones respiratorias y fracturas. Aunque su cultivo masivo e investigaciones referentes a la produccin de frutos son recientes, el aspecto medicinal de la planta ha sido desatendido. Mediante el mtodo de "Marcha Fitoqumica" se identific siete grupos de metabolitos secundarios en las hojas y corteza de esta planta, cuya presencia no vari en las tres etapas fenolgicas de la misma (floracin, fructificacin y dormancia): flavonoides, quinonas, saponinas, lactonas sesquiterpnicas, compuestos grasos (aceites esenciales), taninos y azcares reductores. Asimismo, se identific cuatro flavonoides a los que posiblemente se les pueda atribuir sus propiedades teraputicas: quercetina, isoquercetina, kaemferol y genistena. Siendo la quercetina constante en las tres etapas pero la de menor concentracin (0.412 mg %), mientras que la genistena fue la de mayor concentracin (4.201 mg %) pero slo se present en una muestra (hojas en floracin). Palabras clave: Camu camu, flavonoides, metabolitos secundarios, principios activos.
SUMMARY

Camu camu (Myrciaria dubia) is a promising shrub native to Peruvian Amazon. For many years it has been used by local populations as a natural medicine against respiratory disease and fractures. Even though its large-scale cultivation and the research related to the fruit production is recent, the medicinal aspect of the plant has always been unattended. By the Phytochemical screening method, seven groups of secondary metabolites had been identified present in the bark and leaves of camu camu ( M. dubia): quinones, sesquiterpenes lactones, saponins, fatty compounds (volatile oils), reducing sugars, tannins and flavonoids; all these were present along three phenological stages: flowering, fruiting and dormancy (no flowers nor fruits). Likewise, four flavonoids were characterized by UV spectroscopy: quercetin, isoquercetin, kaempferol and genistein. With the quercentin being constant in the three stages but with the lowest concentration (0,412 mg %) while the genistein with the highest concentration (4.201 mg %) but it was present in only one sample (leaves at flowering). Key words: Active ingredients, Camu camu, flavonoids, secondary metabolites.
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Bachiller en Ingeniera Forestal. Ph.D., Profesor Principal, Facultad de Ciencias Forestales, UNALM Mg. Sc., Profesor asociado, Facultad de Ciencias Forestales, UNALM

I.

INTRODUCCION

El camu camu (M. dubia), un arbusto perteneciente a la familia de las Myrtacas, fue en un principio utilizado por las poblaciones locales de la amazona como alimento para los peces, pero tambin en la elaboracin de diversos productos en base a su pulpa, especialmente bebidas y licores, los que tambin podan ser elaborados con otras de sus partes, como las hojas o la corteza, sobre todo para la preparacin de medicinas naturales. Un estudio bromatolgico de su fruto encontr que la pulpa posee un alto contenido de cido ascrbico (3000mg/100g pulpa fresca, aproximadamente), un excelente antioxidante natural, propiciando que el camu camu se popularizara a nivel mundial y que el gobierno de turno promoviera su cultivo en la Amazona Peruana. Convirtindose, los departamentos de Loreto y Ucayali en los principales centros de investigacin y reproduccin de este fruto, siempre buscando mejorar su cultivo, manejo, adaptacin a diferentes pisos ecolgicos y de conseguir la mayor concentracin de cido ascrbico. El aspecto medicinal de la planta sin embargo, y a excepcin del poder antioxidante de la pulpa, qued siempre desatendido. En zonas donde este fruto es cultivado, las hojas son empleadas en la preparacin de brebajes para contrarrestar los males respiratorios. Asimismo, su corteza es empleada en macerados y emplastos para curar las enfermedades respiratorias y fracturas, respectivamente. Sin embargo, aquellos compuestos responsables de tales propiedades teraputicas, conocidos como principios activos, no han sido identificados an en camu camu, s en otras especies como el araz (Eugenia spp.) y la guayaba (Psidium guajava), tambin miembros de la familia Myrtaceae y muy relacionados en cuanto a hbitat y propiedades curativas con dicho arbusto. En estas dos especies, se han determinado la presencia de metabolitos como pectinas, aldehdos, carbohidratos, compuestos fenlicos, terpenoides, entre otros, en diferentes partes de la planta, especialmente las hojas. As mismo, los compuestos fenlicos ms comunes en estas dos Myrtceas son los taninos y flavonoides, entre estos ltimos la quercetina, a quien junto con terpenos como el -pineno y el cineol, se sealan como los responsables de las propiedades curativas de ambas especies. Es sabido tambin que los metabolitos secundarios (o principios activos de las plantas medicinales) suelen variar en concentracin y presencia con los diferentes periodos vegetativos y reproductivos de las plantas, ya que estos compuestos no son esenciales para las mismas, mas s le ayudan a adaptarse a diferentes situaciones de estrs o supervivencia. El camu camu presenta tres estados fenolgicos marcados: floracin, fructificacin y dormancia (sin flores ni frutos). Esta marcada fenologa no permite a los productores obtener ingresos continuos por la venta del fruto, por lo que el resto del ao deben buscar la manera de suplir esta carencia. A diferencia del fruto, las hojas y la corteza estn presentes todo el ao, y de encontrarse en ellas compuestos activos de importancia medicinal o industrial, su aprovechamiento permitira hacer un uso ms completo de la planta, permitindole a los agricultores mayores ganancias por ellas. La presente investigacin pretende por lo tanto, proporcionar un primer registro de metabolitos presentes tanto en las hojas como en la corteza del camu camu y determinar si stos varan en sus tres etapas fenolgicas, completando as la informacin ya existente sobre la planta y permitiendo a la vez establecer marcadores qumicos que ayuden a identificar la especie y sus variedades, as como su lugar de procedencia. Del mismo modo, permite dar un vistazo preliminar sobre los compuestos que le proporcionan a la planta sus propiedades curativas, los mismos que al tener cierta importancia para la industria farmacetica y/o

cosmtica, le permitan a los productores dedicados al cultivo de esta especie aprovechar algo ms que el fruto, que es estacional. De esta manera el camu camu se establece como una planta multipropsito que no slo mantiene el suelo ocupado cuando el terreno est inundado, sino que adems se puede obtener ms de un producto beneficioso cuando esto ocurre.

II. REVISION DE LITERATURA


1. Metabolitos secundarios:

Lock (1988) los describe como compuestos qumicos de estructura relativamente compleja y de distribucin ms restringida y caracterstica a cada planta . Estos compuestos, de acuerdo con Lock (1988), Valencia (1995) y Garca (2006), no son indispensables para el funcionamiento celular de las plantas y, generalmente, son stos los responsables de la accin teraputica de las mismas. Lock (1988) los denomina por ello artculos de lujo de la planta y Valencia (1995) agrega que dichos productos no son finales ya que posteriormente pueden sufrir ms cambios.

Figura 1. Ruta biosinttica de tres grupos de metabolitos secundarios: Alcaloides, fenoles y terpenos. FUENTE: Taiz et al (2006)

Su presencia o ausencia en la planta est determinada por varios factores: el suelo, las condiciones climticas, la estacin, el momento del da, etc. De acuerdo con Garca (2006) a finales del perodo vegetativo y antes del perodo de floracin ocurre la mayor concentracin de principios activos; y Garca (2006) aade que el mejor momento para la recoleccin de

muestras es por las tardes o las noches, pues a estas horas la planta ya ha realizado sus procesos metablicos bsicos y puede dedicarse a producir sus compuestos de lujo o metabolitos secundarios. Si bien estos metabolitos no son esenciales para el funcionamiento celular, s cumplen otras funciones especficas para cada planta donde se presentan: como mecanismos de defensa, como agentes polinizadores, como sustancias de reserva, como cicatrizantes para sus propias heridas, etc. Algunos de estos metabolitos, con reconocida accin teraputica son: alcaloides, terpenos y terpenoides, saponinas, quinonas, taninos, flavonoides, etc. 2. Anlisis Fitoqumico:

Garca (2006) seala que la palabra fitoqumica proviene del griego Phyton-planta es decir qumica de las plantas; por tal razn, Valencia (1995) la define como el estudio de los constituyentes qumicos de las plantas y dicho estudio, tal como seala tambin Garca (2006), abarca la biosntesis, metabolismo, distribucin natural, funcin biolgica, aislamiento, purificacin y determinacin de la estructura qumica de tales compuestos. Cabe resaltar que autores como Domnguez (1973), Lock (1988) y Valencia (1995) sealan que no existe un esquema definido para la realizacin de un anlisis fitoqumico y que cada estudiante, profesor o investigador, debe utilizar todas las herramientas y esquemas a su alcance y realizar su propia secuencia de investigacin con la que se sienta ms cmodo de trabajar. 3. Anlisis Fitoqumicos en Myrtaceae:

Si bien este tipo de estudios en la planta de camu camu son escasos o nulos, en otras especies tales como el araz (Eugenia spp.) y la guayaba (Psidium guajava), son ms comunes. Dichas especies no slo pertenecen a la misma familia que el camu camu, sino que adems morfolgicamente son muy parecidas a l; se les suele encontrar compartiendo el mismo hbitat y se les ha reportado propiedades curativas similares. (Brack 1999 y Vsquez 2000).

A)

Anlisis fitoqumicos en guayaba (Psidium spp.) a) Psidium guajava Diferentes anlisis fitoqumicos se han realizado con ella. Uno de ellos, el de Huaman y Ruiz (2005), produjo el siguiente resultado:

Cuadro 1. Ensayo fitoqumico al azar de las hojas de guayaba (Psidium guajava)


Ensayo Metabolito Resultado

Molish Gelatina Dragendorff FeCl3 Shinoda

Carbohidratos Taninos Alcaloides Comp. Fenlicos Flavonoides

+ + +

Presencia lignina FUENTE: Huaman y Ruiz (2005)

b) Psidium guineense A esta especie tambin se le han atribuido propiedades medicinales; por esta razn Neira, junto con otros investigadores, realizaron en el 2005 un estudio fitoqumico a diferentes partes de esta planta -entre ellas las hojas- encontrndose diferentes metabolitos secundarios como los flavonoides (avicularina, guayaijaverina y quercetina), pero estos ltimos en el fruto. (Neira et al 2005). Cuadro 2. Tamizaje fitoqumico de las hojas de Psidium guineense
Ensayo Metabolito Resultado

Fehling Legal FeCl3 Legal Liebermann-Buchard Dragendorff Shinoda FeCl3

Aldehidos Lactonas insaturadas Fenoles Cetonas - metil cetonas Esteroides y triterpenos Alcaloides Flavonoides Taninos

+ + + + + +

Antrona Glicsidos FUENTE: Neira et al (2005)

B) Anlisis fitoqumicos en araz (Eugenia spp.) a) Eugenia uniflora Schmeda et al y Hayashi et al, citados por Surez (1995), encontraron flavonoides presentes en esta especie tales como quercitina, quercetina, miricetina y miricetrina, los mismos encontrados para la guayaba (Psidium guajava). b) Eugenia acrantha Un estudio fitoqumico realizado por Payo, Oquendo y Oviedo (1997), produjo los siguientes resultados:

Cuadro 3. Tamizaje fitoqumico de hojas y tallos de Eugenia acrantha


Metabolito H T

Alcaloides Saponinas Taninos Aminas Fenoles Cumarinas Flavonoides Esteroles B Esteroles D Glicsidos B Glicsidos D

+ + t t +

+ + + + t t t

H: Hojas; T: Tallos; t: trazas.

FUENTE: Payo et al (1997).

III. MATERIALES Y MTODOS


La fase de campo fue realizada en el casero 7 de Junio del distrito de Yarinacocha, provincia de Coronel Portillo, departamento de Ucayali, Pucallpa-Per; la fase experimental en el Laboratorio de Pulpa y Papel de la Facultad de Ciencias Forestales de la Universidad Nacional Agraria La Molina y el anlisis de los flavonoides en el Centro de Productos Naturales del Centro Nacional de Investigaciones Cientficas de La Habana, Cuba. La presente investigacin estuvo dividida en tres fases correspondientes a los tres estadios fenolgicos: floracin/fructificacin, fructificacin y dormancia (sin flor ni fruto); cada una, dividida en cuatro etapas: obtencin del material, preparacin y evaluaciones fsicas, marcha fitoqumica y caracterizacin de metabolitos. A. Obtencin del material biolgico:

Las hojas y corteza correspondiente a cada etapa fenolgica, se obtuvieron de la parcela del Ing. Pablo Villegas, productor de Camu camu arbustivo (M. dubia). Se tomo el material de la parte inferior del arbusto de las ramas nuevas o jvenes, que no estuvieran en produccin o con flores. En esta etapa se realiz una primera seleccin de las hojas y ramas, descartndose aquellas enfermas o atacadas por algn insecto o plaga. Las ramas cortadas y hojas fueron transportadas en sacos de yute para harina de 50 Kg. Se incluy como parte de las muestras el ritidoma de las cortezas. B. Preparacin

Las hojas fueron oreadas por uno o dos das, luego para las tres etapas fenolgicas se separo las hojas ms frescas para la obtencin de aceites esenciales, descartndose aquellas con dao o ataque de plagas o enfermedades. En cuanto a la corteza, se seleccion aquellas sin dao por hongos o insectos, y procedi desbastarlas. Ambas muestras, hojas y corteza, incluido el ritidoma, fueron molidas y pasadas a travs de un tamiz de 20mm de lado. Se pes aproximadamente 500 g de hojas (de cada fase fenolgica) y guardaron en bolsas ziploc para evitar su oxidacin; del mismo modo se procedi con el material restante (hojas enteras).

El total de la corteza tambin fue molido y almacenado, as como las hojas seleccionadas para el ensayo de aceites esenciales. Se obtuvo seis muestras, para realizar los ensayos fsicos respectivos: Hojas de floracin Corteza de floracin Hojas de fructificacin Corteza de fructificacin Hojas de dormancia Corteza de dormancia C. Ensayos fsicos:

Contenido de humedad, de acuerdo al procedimiento descrito en la NTP 251.010 2004. Para las hojas se realiz el contenido de humedad mediante el mtodo secado en estufa y azeotrpico. Para la corteza el mtodo de secado en estufa. Cenizas, Segn Norma de la AOAC de Mtodos oficiales para Anlisis Cenizas totales (Norma N 942.05). Cenizas solubles en Agua (Norma N 900.02 D). Cenizas insolubles en HCl (Norma N 900.02 D). Solubilidad, determina el grado de alcohol al cual los diferentes metabolitos secundarios son ms solubles. El procedimiento est descrito en la norma NRSP 309. Se hizo una prueba de solubilidad para cada muestra de hojas y corteza de cada etapa fenolgica, con cinco diferentes grados de polaridad: alcohol de 30, 50, 70, 90 y agua. D. Tamizaje fitoqumico:

Se tom como referencia el Tamizaje fitoqumico segn la ruta crtica de la OMS para extractos de plantas (OMS 1998), para identificar: Alcaloides (Dragendorff, Wagner y Mayer), Quinonas (Borntrger), Saponinas (Espuma).Flavonoides (Shinoda), Lactonas sesquiterpnicas (Baljet), Compuestos grasos (Sudn III). Azcares (Molish), azcares reductores (Fehling), Taninos/fenoles (FeCl3). Se identific el grado de alcohol en el que los metabolitos son ms solubles, luego se enumeraron 11 tubos de ensayo, uno para cada prueba, y en cada uno se coloc aproximadamente 1 mL de la solucin (alcohol + extracto). Luego, se procedi a la identificacin de los grupos de metabolitos mediante los diferentes ensayos escogidos. Como se trabaj con un solvente orgnico, algunos ensayos requirieron que se evaporara previamente el alcohol, antes de aplicar el reactivo correspondiente; tal es el caso de las pruebas de: Dragendorff, Mayer, Wagner, Borntrger, Baljet y Fehling. La calificacin asignada al trmino de cada prueba fue la siguiente: +++ ++ + E. : Reaccin muy evidente. : Reaccin evidente. : Reaccin poco evidente pero aceptable. : No hubo reaccin / reaccin negativa. Caracterizacin de metabolitos secundarios:

Para los aceites esenciales se escogi el mtodo de Destilacin por arrastre de vapor de agua utilizando un equipo Clevenger, descrito por Domnguez (1973). Para la caracterizacin

de los flavonoides se emple el mtodo de Toms-Barbern (1992) y de Mabry et al. (1970), este ltimo para la espectroscopia UV, ambos descritos por Vit (1993). Su identificacin se hizo con un equipo Shimadzu QP-20- UV, del Centro de Productos Naturales del Centro Nacional de Investigaciones Cientficas, La Habana, Cuba; y su semicuantificacin se hizo por densitometra, mediante el programa segn la Ley de Lambert-Beer (COSY-UV-RDF) de Merck, en el mismo Centro.

IV. RESULTADOS Y DISCUSION


1. Humedad:
35 30 25 % Hum 20 15 10 5 0
Hojas flo racion Hojas fructificacion Ho jas do rmancia C o rteza flo rac in C o rteza fructificaci n C orteza dormancia

Hum. gravimtrica

Hum. azeotrpica

Figura 2.

Comparacin resultados Humedad gravimtrica vs. Humedad azeotrpica

Los valores obtenidos en la prueba de contenido de humedad azeotrpica son menores que los de contenido de humedad gravimtrica, para las muestras de hojas, esto podra deberse a que en stas existen compuestos voltiles que con el mtodo gravimtrico se pierden junto con el agua. Fig. 1 Asimismo, la muestra de hojas en fructificacin present el mayor porcentaje de humedad en los dos mtodos. Probablemente se deba a la poca del ao en que fueron obtenidas (mediados de mayo). La muestra de hojas en dormancia present el menor porcentaje de humedad con el mtodo azeotrpico, mas no hubo diferencias entre esta muestra y la de hojas en floracin con el mtodo gravimtrico (ambas resultaron 11.5%). En cuanto a las muestras de corteza, el mayor contenido de humedad se reporta para la muestra de corteza en floracin. Esto se explica porque las ramas de donde se obtuvo la muestra permanecieron sumergidas en agua para facilitar el desbastado, por la dificultad de realizar esta operacin con la cuchilla. Aunque para las tres fases se realiz el humedecimiento, las ramas de floracin permanecieron ms tiempo en el agua que las otras dos muestras. Por esta misma razn los contenidos de humedad de las muestras de corteza presentan porcentajes ms altos que las hojas; aunque en general, los contenidos de humedad para las seis muestras estn dentro del rango apropiado para la ciudad de Lima (entre 11 14% de C.H.).

2. Cenizas:
Cuadro 4. Resultados de cenizas en hojas de Camu camu (Myrciaria dubia)
Hojas fructificacin Hojas dormancia

Ensayo

Hojas floracin

Promedio

% CT prom % CsH2O % CiHCl

3.60 9.03 0.00

4.30 5.37 0.00

5.80 9.15 1.30

4.57 7.85 0.43

% CT prom: Porcentaje de cenizas totales promedio. % CsH2O: Porcentaje de cenizas solubles en agua. % CiHCl: Porcentaje de cenizas insolubles en cido clorhdrico.

Cuadro 5. Resultados de cenizas en corteza de Camu camu (M. dubia)


Ensayo Corteza floracin Corteza fructificacin Corteza dormancia Promedio

% CT prom % CsH2O

6.50 9.27

6.60 7.15

6.90 7.00 0.00

6.67 7.81 0.30

% CiHCl 0.20 0.70 % CT prom: Porcentaje de cenizas totales promedio. % CsH2O: Porcentaje de cenizas solubles en agua. % CiHCl: Porcentaje de cenizas insolubles en cido clorhdrico

El porcentaje de cenizas totales promedio es mayor en la corteza que en las hojas debido a que stas, al ser un tejido vivo y el principal rgano fotosinttico de las plantas, tienen un mayor intercambio de sustancias minerales y orgnicas, debido a las funciones metablicas que la planta realiza durante el da. Adems, en las hojas el porcentaje de cenizas es variable, a diferencia de la corteza donde los resultados son ms homogneos (alrededor de 6%). Los cuadros 4 y 5 reflejan que el contenido de las cenizas totales lo conforman compuestos polares, ya que el contenido de cenizas solubles en agua, tanto en hojas como en corteza (a excepcin de las hojas en fructificacin) es alto, superior al 7%; mientras que el contenido de cenizas insolubles en HCl es muy bajo o casi nulo en los seis casos, por lo que se puede concluir que en esta planta el contenido de slice (Si) es bastante bajo. 3. Solubilidad: El grado alcohlico donde se concentran la mayor cantidad de slidos totales siempre es variable entre muestras, por lo que no sorprende la disparidad de resultados. Adems, como ya se explico anteriormente, la presencia y concentracin de los metabolitos secundarios puede variar en el da, en el ao, entre localidades, etc.

Cuadro 6. Grado alcohlico al que se obtuvo mayor cantidad de Slidos totales


Muestra % Slidos totales Grado Alcohol

Hojas floracin Corteza floracin Hojas fructificacin Corteza fructificacin Hojas dormancia Corteza dormancia

3.31 9.47 3.42 2.50 2.57 5.97

70 30 50 50 70 50

4. Tamizaje fitoqumico: Cuadro 7. Resultados del tamizaje fitoqumico en hojas y corteza de Camu camu (Myrciaria dubia)
Muestra Floracin Fructificacin Dormancia
Dragendorff

H +++ ++ ++

C ++ Fl

Mayer H C + + Floracin

Wagner H C + Fr

Brntrager Baljet H C H C +++ ++ +++ + ++ ++ ++ +++ +++ +++ +++ +++ H Hojas

ENSAYOS Sudn Fehling H C H C + + + +++ + + +++ +++ +++ + +++ +++ C Corteza

Espuma H C +++ +++ +++ +++ +++ +++

Fe3Cl H C +++ +++ +++ +++ +++ +++

Shinoda H C +++ +++ +++ +++ +++ +++

Molish H C + +++

Fructificacin

El tamizaje fitoqumico confirm la presencia de quinonas, lactonas sesquiterpnicas, compuestos grasos, azcares reductores, saponinas, taninos y flavonoides, tanto en hojas como en corteza, para las tres etapas fenolgicos; es decir, estos grupos de metabolitos estn presentes todo el ao en la planta de camu camu (Myrciaria dubia). Los alcaloides, sin embargo, no estn presentes en el camu camu dado que slo las muestras de hojas de floracin dieron resultados positivos al reactivo Dragendorff. Del mismo modo, el ensayo de Molish tambin result negativo para las muestras de hojas y de corteza de fructificacin, demostrando que slo en las muestras de corteza de floracin y dormancia hay presencia de azcares libres. Estos resultados no difieren de lo reportado para la familia de las Myrtaceae y especficamente para guayaba (Psidium spp.) y araz (Eugenia spp.): Watson y Dallwitz (2000) destacan que no se han reportado alcaloides en las Myrtceas, y que los azcares suelen ser transportados como disacridos u oligosacridos; Bernal y Correa (1998), as como Taylor (2005) indican la presencia de compuestos grasos, especficamente aceites esenciales

en las hojas de guayaba (P. guajava y P.guineense). Autores como Huaman y Ruiz (2005), Neira et al (2005) y Taylor (2005) confirmaron la presencia de compuestos fenlicos, principalmente flavonoides y taninos tanto en las hojas como en la corteza de guayaba ( P. guajava y P.guineense). Payo et al (2005), en un tamizaje fitoqumico aplicado a hojas y tallos de Eugenia acrantha (araz) hallaron saponinas presentes en los tallos y compuestos fenlicos (taninos y flavonoides) en ambas muestras. Finalmente, el tamizaje fitoqumico realizado por Neira et al (2005) a hojas de Psidium guineense (guayaba) tambin seala un resultado positivo a la prueba de Fehling. El tamizaje fitoqumico aplicado al Camu camu ( M. dubia), por lo tanto, ha presentado resultados conforme a lo esperado, dados los antecedentes arriba mencionados. 5. Aceites esenciales:
0,20

0,15

Rdmto %

0,10

0,05

0,00 Hojas Floracin Hojas Fructificacin Hojas Dormancia

Figura 3. Rendimiento de aceites esenciales en hojas de Camu camu (M. dubia) de tres etapas fenolgicas distintas

La destilacin de las muestras de hojas por el mtodo de arrastre de vapor de agua, corrobor los resultados obtenidos con la prueba del reactivo Sudn III (cuadro 12), comprobando la presencia de aceites esenciales en las hojas de Camu camu ( M. dubia) en las tres etapas fenolgicas. En la figura 2 se observa que la muestra de hojas en floracin present una ligera mayor cantidad de aceites esenciales (0.17%), en comparacin con las muestras de fructificacin y dormancia, que presentaron el mismo rendimiento (0.15%) comprobndose as que la produccin de aceites esenciales est ligada a una estrategia de la planta por atraer polinizadores. Con el mtodo empleado el rendimiento de aceites esenciales nunca es alto; sin embargo, el promedio obtenido para el camu camu (0.16%) est por debajo del mnimo aceptable (0.5%). 6. Caracterizacin de flavonoides: Con los extractos etanlicos de las seis muestras se obtuvieron 28 espectros con el Espectofotmetro UV. El anlisis de los mismos revel los siguientes resultados:

Cuadro 8. Flavonoides identificados en las hojas y corteza de Camu camu (M. dubia).
Tipo de muestra Flavonoide Quercetina Isoquercetina Genistena Kaemferol

Hojas floracin Corteza floracin Hojas fructificacin Corteza fructificacin Hojas dormancia Corteza dormancia

Del cuadro 8 se observa que la quercetina est presente en las tres muestras de hojas y en la muestra de corteza en dormancia; mientras que su ismero est presente de forma inversa: en las tres muestras de corteza y en las muestras de hojas en dormancia. Aparentemente, al momento en que las muestras de dormancia fueron colectadas se estaba desarrollando la isomerizacin de la quercetina y por eso est presente en ambas muestras. Tambin se aprecia que, salvo las muestras de corteza en floracin y corteza en fructificacin, se presentan dos tipos de flavonoides en las muestras restantes.

Figura 3. Estructura molecular de la genistena.

Figura 4. Estructura molecular del kaemferol.

FUENTE: www.wikipedia.com

Figura 5. Estructura molecuar de la quercetina. FUENTE: Carrasco, P. (s.f.)

La quercetina, el flavonoide que se present en las tres etapas (junto con su ismero) es comn de encontrar en la familia de las Myrtceas -lo mismo que el kaemferol- y es a quien diferentes investigadores han atribuido las propiedades medicinales de la guayaba ( Psidium spp.) y el araz (Eugenia spp.). As lo demuestran diversos anlisis realizados por Surez (1995), Watson y Dallwitz (2000), Neira et al (2005), Taylor (2005), Vargas et al (2005), entre otros. La concentracin de cada flavonoide en las muestras fue la siguiente: Quercetina 0.412 mg % Kaemferol 0.892 mg % Genistena 4.201 mg %

La genistena, aunque slo se encontr en una sola muestra (hojas de floracin) fue la que se present en mayor concentracin; la quercetina en cambio, fue la de menor concentracin pero la ms repetitiva; el kaemferol tuvo una concentracin intermedia entre estas dos y tambin se present en una sola muestra (hojas de fructificacin).

V. CONCLUSIONES
Se identificaron 7 grupos de metabolitos secundarios presentes en las tres etapas fenolgicas de camu camu (Myrciaria dubia): quinonas, lactonas sesquiterpnicas, compuestos grasos (aceites esenciales), azcares reductores, saponinas, taninos y flavonoides. El rendimiento de aceites esenciales hallados en las hojas de camu camu ( M. dubia) es bajo a pesar del mtodo empleado. La caracterizacin de flavonoides identific tres de importancia medicinal: Quercetina, gensteina y kaemferol. La quercetina se present en ambas muestras, hojas y corteza (ismero) en las tres etapas fenolgicas; mientras que la genistena slo en las hojas de floracin pero en mayor concentracin que la quercetina. El kaemferol slo se hall en las hojas de fructificacin. La quercetina -y su ismero- sera la responsable de la accin teraputica de las hojas y la corteza del camu camu (M. dubia).

VI. BIBLIOGRAFIA
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