Biotecnologia Ciência & Desenvolvimento - Nº 3

2 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 3 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 3

4 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 4 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento
ENTREVISTA
JOS ISRAEL VARGAS, ministro da Cincia e Tecnologia
A cincia e a tecnologia so as grandes armas de que o Brasil dispe hoje para enfrentar a competitividade da
globalizao econmica que se descortina no prximo milnio. A evoluo tecnolgica vem ocorrendo com tanta velocidade
que as distncias do mundo esto cada vez menores e as fronteiras entre os pases j quase no existem. Para participar dessa
corrida tecnolgica, pases como o Brasil precisam se preparar, investindo cada vez mais na formao de cientistas, em
infra-estrutura de pesquisa adequada, e no desenvolvimento de produtos com qualidade internacionalmente aceita e que
possam competir com os mercados dos grandes blocos econmicos dos pases do Primeiro Mundo.
Para falar do estado da arte da cincia e tecnologia no Brasil de hoje e do futuro, o ministro da Cincia e Tecnologia,
Jos Israel Vargas, concedeu esta entrevista a BIOTECNOLOGIA Cincia & Desenvolvimento, quando destacou os esforos
e as principais linhas de atuao do governo Fernando Henrique Cardoso para promover o desenvolvimento cientfico e
tecnolgico do nosso pas.
Israel Vargas mineiro, natural de Paracatu, formado em qumica pela Universidade Federal de Minas Gerais, onde
foi professor de fsico-qumica de 1964 a 1984, e professor emrito desde 1989. Ele Ph.D. pela Universidade de
Cambridge, na Inglaterra, e vem ocupando vrios cargos importantes em instituies brasileiras e internacionais, tais como:
presidente do Comit de Cincia e Tecnologia da Organizao Internacional do Trabalho - OIT; presidente do Conselho
Executivo da UNESCO, Paris; membro do Conselho Diretor do Clube Internacional de Energia de Moscou; membro da
Comisso Internacional para o Renascimento da Biblioteca de Alexandria, Cairo, Paris (UNESCO) e presidente da Acade-
mia de Cincias do Terceiro Mundo, Trieste, Itlia, entre muitos outros.
O ministro da Cincia e Tecnologia recebeu ainda inmeras condecoraes por sua atuao nas reas de cincia e
tecnologia, no Brasil e no exterior, e membro das Academias de Cincias de Minas Gerais, do Brasil, da Argentina, alm de
integrar o Comit de Honra da Academia Europia de Cincia, Artes e Letras.
Entrevista concedida a
Lucas Tadeu Ferreira e
Maria Fernanda Diniz Avidos
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 5 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 5
BC&D - O Brasil gasta, atualmente,
6% do PIB em educao e 0,7% em
cincia e tecnologia. Que mecanis-
mos o governo federal pretende
adotar, a mdio e longo prazos, para
aumentar os investimentos nesse
campo e, assim, tornar o pas me-
nos dependente de tecnologias?
Israel Vargas - Na verdade, j superamos
esse nmero no final do ano passado: os
dispndios nacionais, tanto do setor p-
blico quanto privado, j passaram de 1%
do PIB, e esperamos que atinjam 1,5%
at o final desta dcada. Isto significa que
mais do que dobraremos os investimen-
tos do pas neste setor fundamental ao
desenvolvimento se lembrarmos que
investamos meros 0,7% no comeo dos
anos 90 e que a maioria dos gastos
provinha do setor pblico. O panorama
mudou para melhor. As empresas, que
investiam tradicionalmente apenas 10%
do total ao qual me referi, atualmente, j
respondem por mais de 25% e espera-
mos que, no final deste perodo, che-
guem a 40% dos investimentos brasilei-
ros em C&T. Temos razes para acredi-
tar que essa expectativa vivel. Pes-
quisa realizada este ano pelo MCT e pela
CNI mostra que, entre mil empresas
consultadas, 38% informam que preten-
dem gastar, nos prximos cinco anos,
entre 2 e 5% de seu faturamento lquido
em pesquisa e desenvolvimento. Outras
28% pretendem investir mais de 5% do
faturamento lquido nesse perodo.
BC&D - O governo Fernando
Henrique Cardoso, atravs do Mi-
nistrio da Cincia e Tecnologia,
pretende criar incentivos fiscais e
subsdios para que o setor empresa-
rial possa investir mais significati-
vamente na corrida tecnolgica?
Israel Vargas - Estes mecanismos j exis-
tem. As leis 8.248/91 e 8.661/93 estabe-
lecem incentivos fiscais para a capacitao
tecnolgica da indstria. Ao mesmo tem-
po, as empresas esto cada vez mais
conscientes de que o mundo mudou e
que os investimentos em C&T so fun-
damentais para podermos competir in-
ternacionalmente. Essa conscientizao
do setor privado reflete-se no fato de
que 60% das empresas ouvidas tm a
inteno de utilizar exclusivamente re-
cursos prprios para seus projetos de
P&D. Outras 30% combinam recursos
prprios com financiamentos pblicos.
Os incentivos fiscais da Lei 8.661/93 tm
por objetivo a capacitao tecnolgica
das empresas industriais e agropecurias
visando gerao de novos produtos e
processos, mediante a realizao de in-
vestimentos privados - o Programa de
Desenvolvimento Tecnolgico Industri-
al (PDTI) e o Programa de Desenvolvi-
mento Tecnol gi co Agropecuri o
(PDTA). J a Lei 8.248/91 - a Lei de
Informtica - permite s indstrias da
rea de informtica abater 50% dos gas-
tos de P&D no imposto de renda, poden-
do tambm beneficiar-se da iseno de
IPI para os bens produzidos segundo
padres de qualidade e em observncia
aos processos produtivos bsicos, desde
que invistam mais de 5% de seu
faturamento em P&D. Veja bem...as duas
leis somadas j induziram investimentos,
com recursos das prprias empresas,
que superam a casa dos trs bilhes de
reais.
BC&D - Com a vinda do presidente
Bill Clinton ao Brasil, vrios acor-
dos de cooperao tcnica foram
assinados com o governo brasilei-
ro. Entre esses acordos, o senhor
poderia citar aqueles que benefici-
am a cincia e tecnologia e por qu?
Israel Vargas - J temos um intercmbio
intenso com os Estados Unidos na rea
tecnolgica. Na rea espacial, por exem-
plo, somos h mais de 20 anos um dos
maiores usurios de imagens por satlite
no mundo...alis, fomos o terceiro pas a
comear a utilizar este recurso da cincia
e tecnologia espaciais, logo aps o Cana-
d e Estados Unidos. Durante a visita do
presidente dos Estados Unidos, firma-
mos um acordo para a participao bra-
sileira na estao espacial internacional,
atravs do INPE - Instituto Nacional de
Pesquisas Espaciais. Ser uma participa-
o importante, especialmente para as
pesquisas brasileiras em um campo novo
- o da microgravidade.
BC&D - A biotecnologia tem se mos-
trado um forte instrumento para
promover o desenvolvimento cien-
tfico e tecnolgico, em nvel mun-
dial. Como o senhor v a situao
do Brasil, hoje, no campo da
biotecnologia, se comparada com a
dos pases de Primeiro Mundo?
Israel Vargas - A engenharia gentica
comeou, no mundo, com uma experi-
ncia realizada por Paul Boyer, na
Califrnia, que conseguiu expressar em
E.coli um gene da insulina humana, em
1973. Na dcada de 70, surgiram os
primeiros grupos de pesquisa no Brasil
ut i l i zando a t ecnol ogi a de DNA
recombinante, enquanto nos Estados
Unidos dezenas de grupos se formaram
na mesma poca. Hoje, existem mais de
mil empresas de biotecnologia nos Esta-
dos Unidos. No Brasil, h cerca de 35
empresas neste setor. importante ob-
servar que no Brasil e no mundo, o
aumento da eficincia na agricultura, por
exemplo, passa necessariamente pela
biotecnologia. Um aspecto, no entanto,
precisa ser ressaltado. Embora a
biotecnologia tenha origem nas desco-
bertas e invenes cientficas patrocina-
das pelo setor pblico, os produtos e
tecnologias hoje so resultado de inves-
timentos expressivos realizados pelo se-
tor privado dos pases desenvolvidos.
Da a necessidade de que o setor produ-
tivo brasileiro intensifique sua participa-
o tambm neste campo.
BC&D - Diante desse quadro, que
importncia o Ministrio da Cincia
e Tecnologia d ao desenvolvimen-
"O PADCT II
(Programa de Apoio
ao Desenvolvimento
Cientfico e
Tecnolgico), um
dos programas do
MCT, elegeu a
biotecnologia como
rea prioritria"
to das pesquisas biotecnolgicas, e
em quais setores o senhor acha que
devem ser estimuladas e como?
Israel Vargas - O setor pblico no Brasil
tem um papel importante no cenrio do
desenvolvimento da biotecnologia:
estamos desenvolvendo a competncia
em cincia e tecnologia, especialmente
a formao de quadros para os setores
pblico e privado e estabelecendo um
ambiente de estmulo aos investimentos
privados em C&T, atravs de programas
de incentivo e de leis adequadas. O
Brasil realizou um notvel esforo na
rea de formao de recursos humanos
nas ltimas duas dcadas. As agncias de
fomento a C&T federais e estaduais tm
priorizado a biotecnologia nos ltimos
quinze anos, com investimentos entre
cinco a dez por cento dos investimentos
globais em C&T no Brasil. O PADCT II
(Programa de Apoio ao Desenvolvimen-
to Cientfico e Tecnolgico), um dos
programas do MCT, el egeu a
biotecnologia como rea prioritria, ten-
do financiado 158 grupos de pesquisa
em biotecnologia no Brasil, 18,3% do
total dos grupos registrados nesta rea
no CNPq.
BC&D - O senhor acha que existem
no Brasil instituies que desenvol-
vam pesquisas de biotecnologia que
possam ser consideradas ponto de
referncia e em condies de com-
petir com as do primeiro mundo?
Israel Vargas - Sim. Diversas instituies,
pblicas e privadas, tm desenvolvido
pesquisas em biotecnologia no Brasil,
com qualidade e resultados comparveis
aos daquelas desenvolvidas em pases
de Primeiro Mundo. Por exemplo, na
rea vegetal, existem empresas fazendo
testes com soja, milho, cana-de-acar e
fumo geneticamente modificados, entre
outros. Na rea da sade humana e
animal, podemos citar pesquisas envol-
vendo insulina recombinante e clonagem
de animais, dentre aquelas desenvolvi-
das no Brasil.
BC&D - Existem tramitando no Con-
gresso Nacional projetos de lei que
visam rotulagem de produtos ge-
neticamente modificados. Como o
Ministrio da Cincia e Tecnologia
se posiciona em relao a essa ques-
to?
Israel Vargas - A Lei 8.974/95, que
estabeleceu normas para o uso de tcni-
cas de engenharia gentica e liberao
no meio ambiente de OGM, regulamen-
tada pelo Decreto 1.752/95, confere
CTNBio competncia para regulamen-
tar quaisquer atividades que envolvam
OGM. Esta legislao enquadra, portan-
to, a questo da rotulagem de produtos
geneticamente modificados. A CTNBio
designou, entre seus membros, um gru-
po de especialistas com a atribuio
especfica de estudar a questo da
rotulagem de OGM e derivados, que
tem analisado extensa documentao
nacional e internacional sobre a matria.
A comisso est representada nas reuni-
es do Codex Alimentarius, no Brasil e
no exterior, alm de se fazer presente
em audincias pblicas, na Cmara dos
Deputados, quando essa questo abor-
dada. Assim, no momento, a CTNBio
est se preparando para definir sua po-
sio sobre esse importante aspecto re-
lacionado s novas tecnologias.
BC&D - A Comisso Tcnica Nacio-
nal de Biossegurana - CTNBio um
rgo integrante da estrutura do
Ministrio da Cincia e Tecnologia,
que tem por misso autorizar o de-
senvolvimento de pesquisas e de
produtos geneticamente aprovados.
O senhor poderia fazer um relato
sucinto das atividades da CTNBio,
indicando quais produtos j foram
liberados para testes no campo e
para comercializao?
Israel Vargas - A CTNBio foi instalada em
junho de 1996, em cerimnia presidida
pelo vice-presidente da Repblica, Mar-
co Maciel. A comisso j elaborou e
votou seu Regimento Interno e publi-
cou, at o momento, nove Instrues
Normativas; emitiu 35 Certificados de
Qualidade em Biossegurana; julgou e
proferiu deciso em 69 processos admi-
nistrativos e autorizou 48 liberaes pla-
nejadas no meio ambiente de OGMs.
Essas liberaes destinam-se avaliao
de gentipos em condies de campo,
em experimentos de pequena escala,
sendo vedada, at o momento, a sua
comercializao. Dentre os produtos que
foram liberados para testes de campo,
destacam-se: o milho transgnico resis-
tente a insetos; o milho transgnico resis-
tente a herbicida; a cana-de-acar
transgnica resistente a herbicida; o fumo
transgnico resistente a vrus; o algodo
transgnico resistente a insetos; a soja
transgnica resistente a insetos e a soja
transgnica resistente a herbicida. Em
outubro deste ano, a CTNBio posicionou-
se oficialmente a favor de solicitao das
indstrias de leos vegetais para a im-
portao de soja em gro, proveniente
dos Estados Unidos, que poder conter
soja transgnica resistente ao herbicida
Roundup, para a finalidade especfica
de processamento industrial.
BC&D - A Lei de Biossegurana pro-
be qualquer manipulao de clu-
las germinais humanas. Entretanto,
sabido que essa manipulao pode
ter aplicao mdica, por exemplo,
na regenerao de tecidos e trans-
plantes de rgos. Existe algum es-
tudo no Ministrio da Cincia e
Tecnologia para estimular essas
pesquisas e contornar as restries
legais?
Israel Vargas - De acordo com a Lei de
Biossegurana e com a Instruo
Normativa n. 8, expressamente veda-
da, nas atividades com seres humanos, a
mani pul ao genti ca de cl ul as
germinativas ou totipotentes, assim como
os experimentos de clonagem radical.
Somente sero consideradas propostas
de interveno ou manipulao genti-
ca em seres humanos aquelas que envol-
vam clulas somticas sem poder
germinativo.
BC&D - A rejeio a produtos gene-
ticamente modificados se deve, em
grande parte, ao pouco conheci-
mento que a sociedade tem sobre o
processo de produo e
licenciamento desses produtos. O
Ministrio da Cincia e Tecnologia
pretende desenvolver alguma cam-
panha de conscientizao nesse
sentido?
Israel Vargas - Tanto a rea privada
quanto o setor pblico tem a responsa-
bilidade de prestar esclarecimentos
sociedade sobre produtos geneticamen-
te modificados. Esta entrevista um
exemplo disso.
"A CTNBio posicionou-se
oficialmente a favor de
solicitao das indstrias
de leos vegetais para
importao de soja em
gro, proveniente dos
Estados Unidos"
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 7
A INOCULAO DE
LEGUMINOSAS
AUMENTO DA PRODUTIVIDADE COM A FIXAO BIOLGICA DE NITROGNIO
O nitrognio um dos aparentes
paradoxos da natureza. Ao mesmo tem-
po que um dos elementos mais abun-
dantes na Terra, pois 81% do ar atmosf-
rico so compostos de nitrognio, um
dos mais escassos nos solos e dos mais
caros, seja para a nutrio vege-
tal, humana ou animal, nestes
dois ltimos sob a forma de pro-
t e nas. Est e apar ent e
descompasso, paradoxal para
nossos padres de raciocnio,
deve-se ao fato de que, na atmos-
fera, o nitrognio encontra-se sob
a forma de N2, uma molcula
formada por dois tomos de ni-
trognio unidos por uma trplice
ligao extremamente estvel e
que requer uma elevada energia
de ativao para que venha a
reagir com outros elementos. As-
sim, de forma natural, o nitrog-
nio atmosfrico s rompido
durante tempestades, onde a ener-
gia das descargas eltricas forne-
ce as condies necessrias para
a quebra da molcula e a combi-
nao do nitrognio com o oxignio,
formando xidos solveis em gua e que
vo formar nitratos, absorvveis pelas
plantas. Em laboratrio ou em indstria,
para romper a molcula e combinar seus
tomos com hidrognio, formando am-
nia e da partindo para outros produtos,
como uria, sulfato de amnia etc.,
necessrio submeter o processo a tem-
peraturas de 5000C e a 250atm de pres-
so. , portanto, um sistema altamente
consumidor de energia, o que torna os
derivados de nitrognio produtos relati-
vamente caros. Freire, J.R.J. Fixao do
Nitrognio pela Simbiose Rhizbio/
Leguminosa. In: Cardoso, E.J.B.N, Tsai,
SM Neves, M.P.C (eds). Microbiologia do
Solo. Campinas, Sociedade Brasileira de
Cincia do Solo, 1992.
Desta forma, plantas e animais,
embora imersos em um ambiente de
nitrognio, tm que ser nutridos com
derivados deste elemento, de alto preo
nos sistemas agrcolas ou pecurios. Na
natureza, entretanto, existe um sistema
natural para transformar o nitrognio
atmosfrico, molecular, em formas aces-
sveis para as plantas e, a partir da, para
os animais. Um nmero restrito de mi-
crorganismos, isoladamente ou em
simbiose, forma uma enzima chamada
nitrogenase, que capaz de realizar a
clivagem da molcula de nitrognio e a
combinao de seus tomos com o hi-
drognio, formando amnia, nas condi-
es ambientes de presso e temperatu-
ra. Alguns destes microrganismos vivem
de forma livre nos solos (Azotobacter,
Beijerinckia, Derxia, Clostridium), outros
vi vem na super f ci e das r a zes
(Azospirillum), outros, ainda, no caule e
f ol has de al gumas pl ant as
(Herbaspirillum, Frankia) E um outro
grupo, no qual vamos nos deter mais
aqui, embora possa viver de forma livre
nos solos, s fixa nitrognio quando em
simbiose com plantas da famlia das
l egumi nosas ( Rhi zobi um e
Bradyrhizobium). Estes microrganismos
constituem o grupo mais bem estudado,
dentro do qual se desenvolveu uma
t ecnol ogi a agr col a denomi nada
inoculao de leguminosas e um produ-
to denominado inoculante, que um
dos modernos insumos utilizados para
se obter altas produes com retorno
financeiro. As bactrias dos gneros
Rhizobium e Bradyrhizobium no pos-
suem a enzima nitrogenase. Vivendo nos
sol os, " pr ocur am" as r a zes das
leguminosas afins e, atravs dos plos
radiculares, penetram nos tecidos da
raiz, provocando uma estrutura
celular diferenciada, que d ori-
gem a um ndulo. No interior
deste ndulo, a bactria vai se
mul t i pl i car e mudar de
mor f ol ogi a, f or mando os
bacterides. Formam-se, tambm,
duas substncias no-existentes
nem na leguminosa e nem na
bact r i a, i sol adament e: a
leghemoglobina e a nitrogenase.
A primeira a responsvel pelo
transporte de oxignio no interi-
or do ndulo, tendo uma estrutu-
r a qu mi ca semel hant e
hemoglobina do sangue, inclusi-
ve com uma cor avermelhada,
que se nota ao se cortar um
ndulo ao meio. J a nitrogenase
a responsvel, como dissemos
acima, pela clivagem da molcu-
la de nitrognio e sua combinao com
o hidrognio. A amnia formada no
interior dos ndulos sofre algumas rea-
es intermedirias, sendo estas subs-
tncias transportadas para toda a planta
pel a sei va, ent rando no pool de
aminocidos. Este sistema tipicamente
simbitico, pois a bactria passa a forne-
cer o nitrognio do qual a planta neces-
sita e recebe desta os carboidratos para
sua sobrevivncia e serve de fonte de
energia para reduzir o N2 do ar a NH3.
As bactrias simbiticas
As bactrias dos gneros Rhizobium
e Bradyrhizobium so especficas para
determinados grupos de plantas. Assim,
Bradyrhizobium japonicum e elkani
nodulam a soja. Rhizobium tropici e
Rhizobium leguminosarum bv phaseoli
nodul am o f ei j oei r o, Rhi zobi um
leguminosarum bv trifolii nodula os tre-
vos. Entretanto, alm desta diviso em
espcie, cada espcie se subdivide em
estirpes, que se diferenciam entre si por
diversas caractersticas, entre elas a de
fixar mais ou menos nitrognio. Assim,
existem estirpes que fixam todo o nitro-
gnio necessrio para a produo nor-
mal da planta e outras que no fixam
praticamente nada. Um dos mais impor-
tantes trabalhos dos pesquisadores da
rea o de selecionar estirpes de eleva-
da eficincia, levando em conta, tam-
bm, out ras caract er st i cas, como
competitividade frente s estirpes exis-
tentes no solo, bom crescimento em
meios industriais, eficincia em uma
ampla gama de cultivares etc. Esta sele-
o realizada, inicialmente, em condi-
es de laboratrio, onde feita uma
primeira triagem em um grande nmero
de isolados. Aps esta primeira triagem,
as de melhor desempenho so testadas
em vasos com solo, em casa de vegeta-
o. Novamente as melhores so levadas
para testes de campo, para a seleo
final. Estes testes, nas leguminosas mais
cultivadas, esto sendo feitos em rede,
com vrias instituies, em locais diver-
sos do pas, realizando os experimentos,
sempre em comparao com as estirpes
tomadas como padro. Finalmente, as
estirpes de melhor desempenho passam
a ser recomendadas ao Ministrio da
Agricultura para serem distribudas s
empresas produtoras de inoculante. Es-
tas estirpes so armazenadas em um
Banco de Estirpes, que a instituio
depositria deste material e a nica auto-
rizada a distribu-lo para as empresas.
No Brasil, o Banco de Estirpes se encon-
tra na FEPAGRO/MIRCEN, da Secretaria
de Cincia e Tecnologia do Rio Grande
do Sul e da Universidade Federal do Rio
Grande do Sul. A recomendao de
estirpes, baseada nos dados experimen-
tais, feita pela Rede de Laboratrios
Recomendador es de Est i r pes de
Rhizobium (RELARE), que se rene com
a presena dos principais pesquisadores
do pas e com as empresas produtoras
de inoculantes.
A produo de inoculantes
Inoculante definido em lei "como
todo o produto base de microrganis-
mo, capaz de favorecer o desenvolvi-
mento de plantas". Assim, os produtos
base de Rhizobium e Bradyrhizobium
so chamados de inoculantes para
leguminosas. A produo industrial de
inoculantes teve incio no Brasil em
1956, com uma empresa do Rio Grande
do Sul, que contou com a assistncia
tcnica do Dr. J.R. Jardim Freire, da
Secretaria da Agricultura do Rio Grande
do Sul. Mas foi a partir da dcada de 70,
com a expanso da cultura da soja no sul
do Brasil e, posteriormente, com seu
cultivo estendido para o Brasil Central,
que a produo de inoculantes teve sua
maior expanso, com o surgimento de
novas empresas. O grfico 1 mostra a
produo deste insumo nos ltimos dez
anos. V-se que h oscilaes, com anos
de acentuada queda na produo. Isto
ocorre nos anos em que a cultura da soja
sofre reduo de rea ou o preo do
produto final desanimador, no esti-
mulando o produtor rural a investir na
sua lavoura. Atualmente, alm das em-
presas nacionais, diversas marcas es-
trangeiras passaram a disputar o merca-
do brasileiro, especialmente as oriundas
da rea do Mercosul. A tecnologia usada
na produo de inoculantes teve origem,
inicialmente, na Secretaria de Agricultu-
ra do Rio Grande do Sul, baseando-se
em pequenos fermentadores de vidro,
com capacidade para 20 litros. No final
da dcada de 60 e incio da de 70, o
Inst i t ut o de Bi ol ogi a e Pesqui sas
Tecnolgicas do Paran (IBPT) desen-
volveu uma tecnologia, inclusive com o
desenho de equipamentos em maior es-
cala, para 250 e 400 litros, que perdurou
durante anos nas empresas brasileiras.
Mas foram as prprias empresas que
passaram a desenvolver sua tecnologia,
desenhando f er ment ador es e
pesquisando os parmetros de fermenta-
o. Em 1984, foram implantados os
primeiros fermentadores de maior porte,
para 1.500 litros, acoplados a um jogo de
fermentadores menores, que servem
como inculos sucessivos. Esta a
tecnologia hoje usada por, praticamente,
todas as empresas brasileiras. Aps o
cultivo, a bactria tem que ser veiculada
em um substrato adequado para propici-
ar sua sobrevivncia, em altas concen-
traes, at o momento do uso pelo
agricultor. Este substrato, usado de lon-
ga data, a turfa, que um solo com
elevado teor de matria orgnica. A turfa
para a produo de inoculantes deve
possuir algumas caractersticas: alto teor
de matria orgnica (acima de 80%),
baixssimos teores de cloretos e ausncia
de areia, pois esta, alm de prejudicar a
sobrevivncia do Rhizobium, ir causar
desgaste nas mquinas semeadeiras. A
turfa, entretanto, como todo o solo, pos-
sui um grande nmero de microrganis-
mos nativos, que podero competir ou
mesmo ser antagnicos ao Rhizobium.
Da a necessidade de se esterilizar a turfa
antes de sua mistura com a bactria. Esta
esterilizao feita com radiao gama,
que deve ser aplicada na dosagem mni-
ma de 5Kgray, embora esta dosagem
possa variar em funo da composio
microbiolgica da turfa. Atualmente, a
esterilizao da turfa passar a ser uma
exigncia da legislao, visando garantir
um produto de elevada qualidade. No-
vos substratos vm sendo testados para
a produo de inoculantes. Existem no
comrcio inoculantes lquidos e em for-
ma de p molhvel. Embora promisso-
res, principalmente por facilitarem o uso
por parte do agricultor, os resultados de
campo destes produtos ainda tm sido
inferiores aos inoculantes turfosos. Da
haver uma recomendao clara dos r-
gos de pesquisa para o uso dos
i nocul ant es base de
turfa.Recomendaes Tcnicas para a
cultura da soja na Regio Central do
Brasil, 1996/97.
Legislao de inoculantes
A produo de inoculantes regida
por legislao especfica, de mbito fe-
deral. O Ministrio da Agricultura e do
Abastecimento o rgo encarregado de
registrar os estabelecimentos produtores
e os produtos. Atualmente, a legislao
exige uma concentrao mnima de 108
clulas de Rhizobium viveis por grama
de produto no momento da fabricao e
de 107 clulas no momento do venci-
mento da validade do produto. Esta
legislao est sendo alterada por reso-
luo do Mercosul e a concentrao
mnima dever ser de 108 clulas em
qualquer momento at o prazo de vali-
dade.
Resultados com o uso de inoculantes
Pode-se dizer que a cultura da soja
no Brasil economicamente vivel gra-
as fixao biolgica do nitrognio.
Sendo uma cultura produtora de prote-
nas, necessita de grandes quantidades
de nitrognio para alcanar elevadas
produtividades. Estima-se que uma la-
voura de soja, para produzir em torno de
3.000kg de gros por hectare, necessite
de cerca de 250kg de nitrognio, ou seja,
mais de 500kg de uria. Isto tornaria
invivel o cultivo econmico desta
leguminosa. Assim, a fixao biolgica,
tirando do ar e incorporando ao sistema
solo/planta o equivalente a 200kg de N/
ha, contribui, somente no caso da soja,
para o aporte de 200kg X 12.000.000ha =
2 bilhes e 400 milhes de quilos de N
por ano (ou 2 milhes e 400 mil tonela-
das). Ao preo de R$ 760,00 a tonelada
de nitrognio, teremos uma economia de
1 bilho e oitocentos milhes de reais.
Ao se fazer este clculo, deve-se levar
em conta, tambm, a enorme economia
de petrleo que o processo traz, pois a
produo de derivados de N por proces-
sos industriais altamente consumidora
de petrleo. Em termos de produtivida-
de, a fixao biolgica do nitrognio, no
caso de algumas leguminosas, j
capaz de proporcionar todo o nitro-
gnio do qual a planta necessita
para expressar sua capacidade ge-
ntica de produo. Hoje pode-se
obter produtividades, em soja, da
ordem de 4.000kg por hectare sem
usar nada de nitrognio qumico,
somente utilizando-se a inoculao.
Os aumentos de produtividade de-
vidos ao uso de inoculante variam
conforme algumas condies: na
cultura da soja, em primeiro ano de
cultivo da leguminosa, o inoculante
decisivo para que se obtenha bom
nvel de produo. Sem inoculao,
muitas vezes nem se chega a colher,
de to baixa que a produo. Em
anos de plantios subseqentes, as
diferenas entre reas inoculadas e
no-inoculadas vai diminuindo, mas,
assim mesmo, ainda h ganhos de
produtividade que podem variar de
4 a 12%, segundo trabalhos de r-
gos de pesquisa. Em feijoeiro, at
pouco tempo, os nveis de fixao
eram muito baixos. Mas a pesquisa se
intensificou nos ltimos anos e foram
selecionadas novas estirpes que hoje j
contribuem eficazmente para bons gan-
hos de nitrognio na cultura-base da
alimentao brasileira.
Como usar o inoculante
A inoculao consiste em colocar
cerca de 80.000 clulas de Rhizobium
sobre cada semente. Logicamente que
isto tem que ser efetuado de uma forma
prtica e rpida, para facilitar o trabalho
do agricultor. Isto feito pela mistura do
inoculante com as sementes umedecidas.
Esta mistura pode ser feita de diversas
maneiras, seja manualmente para pe-
quenas quantidades, seja atravs de be-
toneiras ou de tambores com eixo ex-
cntrico para quantidades maiores. Atu-
almente, existem mquinas desenvolvi-
das especialmente para o tratamento de
sementes, que aplicam primeiro os
fungicidas e, a seguir, o inoculante. O
importante que haja uma distribuio
uniforme do inoculante sobre as semen-
tes, fazendo com que todas fiquem
recobertas com o produto, assegurando
uma uniformidade na nodulao. Atual-
mente, recomendado o uso de acar
na gua com a qual se vai umedecer as
sementes, para aumentar a aderncia do
produto.
Futuro da inoculao
A tendncia moderna no cultivo de
leguminosas o uso cada mais intenso
do inoculante, por ser um produto natu-
ral, de alta eficincia e com uma relao
custo/benefcio muito favorvel para o
lado do benefcio. Nas linhas de pesqui-
sa procuram-se estirpes cada vez melho-
res, para propiciar altas taxas de fixao,
acompanhando o melhoramento genti-
co das plantas, que visam produtivida-
des cada vez maiores. No campo de
seleo de estirpes, j se procura intro-
duzir melhoramento gentico nos mi-
crorganismos, para que se aumente cada
vez mais o nvel de fixao e outras
caractersticas favorveis das bactrias.
O melhoramento gentico das plantas
leguminosas j leva em conta a capaci-
dade de se associar com as bactrias e de
fixar altas quantidades de nitrognio
como uma das caractersticas a serem
introduzidas no melhoramento e na cri-
ao de novas cultivares. No campo da
fixao em outras plantas que no as
leguminosas, uma das metas mais
perseguidas pelos pesquisadores de
todo o mundo incrementar a fixa-
o de nitrognio em plantas de
expresso econmica, mormente as
gramneas, podendo vir a dispensar
ou pelo menos reduzir sensivel-
mente as quantidades de nitrognio
qumico que hoje so utilizadas
nestas culturas. Neste campo o Bra-
sil um dos pases lderes na pes-
quisa, pois a equipe da EMBRAPA
l i der ada pel a Dr a. J ohanna
Dbereiner tem resultados notveis
na pesquisa com Azospirillum,
Acetobacter e Herbaspirillum. Mas
como este assunto j foi objeto de
artigo da prpria Dra. Johanna no
primeiro nmero desta revista, dei-
xaremos de coment - l o aqui .
Dbereiner J. - A importncia da
Fixao Biolgica do Nitrognio
para a Agricultura Sustentvel.
Braslia, Biotecnologia Cincia &
Desenvolvimento, n 1, maio/1997
(Encarte especial, p. 2-3).
A BIOTECNOLOGIA NO TRATAMENTO DE DEJETOS DE SUNOS
Amilcar Tanuri
Chefe do Laboratrio de Virologia Molecular,
Departamento de Gentica, IB-UFRJ
Diviso de AIDS/HIV no CDC, Atlanta, USA.
Ana Carolina Paulo Vicente
Chefe de Laboratrio de Gentica de Microorganismos do
Departamento de Gentica da Fiocruz, Rio de Janeiro, RJ.
Rodrigo de Moraes Brindeiro
Professor e pesquisador do Laboratrio de Virologia
Molecular, Departamento de Gentica, IB-UFRJ.
e-mail: mizuno@usp.br
AIDS
Menos de duas dcadas aps a
i dent i f i cao da S ndr ome da
Imunodeficincia Adquirida (AIDS) e de
seu agente etiolgico, o vrus HIV (Vrus
de Imunodeficincia Humana), a epide-
mia atinge proporo global. Contudo, o
impacto da infeco no igual ao redor
do mundo devido a caractersticas
soci oeconmi cas, cul t ur ai s e
demogrficas. Na verdade, cada pas
enfrenta uma epidemia com caractersti-
cas particulares. Atualmente, 92% dos
novos casos de AIDS ocorrem nos pases
do Terceiro Mundo. O Brasil no foge a
esta regra e apresenta, at o momento,
110.000 casos relatados, e ainda existem
aproximadamente 500.000 portadores
assintomticos do HIV. Estes ltimos
representam um grande problema para a
Sade Pblica porque, desconhecendo
sua condio de portador assintomtico
e atravs de prticas sexuais de risco,
podem transmitir o vrus para um nme-
ro ainda maior de pessoas susceptveis.
O HIV tem como material gentico o
RNA, e classificado como retrovrus em
funo de possuir a enzima transcriptase
reversa. Esta enzima, no estgio inicial
da replicao viral, promove a sntese da
dupla fita de DNA viral a partir de um
molde de RNA. Devido ao fato de no
realizar a editorao da incorporao de
bases durante a sntese do DNA, a
transcriptase reversa responsvel pelo
grande acmulo de mutaes ao longo
do genoma destes vrus, gerando uma
enorme variabilidade gentica, que um
dos obstculos para o desenvolvimento
de uma vacina anti-HIV, assim como no
tratamento base de anti-retrovirais. A
avaliao de isolados virais ao longo do
tempo mostra uma grande diversidade
entre as seqncias de nucleotdeos.
Atualmente, j so conhecidos cerca de
nove subtipos de HIV-1 (de A a I), alm
de amostras altamente divergentes que
constituem o grupo O e de HIV-2. Os
subtipos do HIV encontram-se espalha-
dos pelo mundo, e so classificados
com base nas seqncias dos genes do
envelope ou do gag. Sendo necessria
uma variao acima de 30% entre as
seqncias para que sejam em subtipos
diferentes. Pouco ainda conhecido em
relao s caractersticas biolgicas des-
tes subtipos. Alm disso, muitos traba-
lhos tm mostrado a existncia de se-
qncias virais em que parte do genoma
classificada como pertencente a um
subtipo e outra parte a outro subtipo
distinto seriam recombinantes. No Brasil,
o subtipo dominante o B, porm j
foram identificados tambm os subtipos
C, D e F. Estes outros subtipos podem ser
um problema para o controle da doena,
devido possibilidade dos mesmos apre-
sent ar em novas pr opr i edades
patognicas, assim como novo perfil de
resistncia aos antivirais. A histria da
AI DS se conf unde com a da
biotecnologia. Na verdade, o homem
nunca utilizou tanto desta tecnologia
para entender e combater uma doena
humana. Esta batalha ainda no foi
vencida, mas a comunidade cientfica
deu respostas rpidas e ajudou a com-
preender e estabelecer formas de con-
trolar esta epidemia. Neste artigo, descre-
vemos al gumas apl i caes
biotecnolgicas que esto contribuindo
para o combate AIDS.
Diagnstico
A partir da descoberta do vrus da
AIDS e da possibilidade de infeco via
transfuso sangunea, o desenvolvimen-
to de um kit-diagnstico se tornou
prioritrio. Neste tocante, a engenharia
gentica contribuiu para o rpido desen-
volvimento deste importante instrumen-
to de controle. Vrias protenas virais
foram expressas em sistemas bacterianos,
e graas a este artifcio pde-se desen-
volver rapidamente um kit-diagnstico
conf i vel . Out r o avano f oi a
implementao do teste de dosagem de
carga viral no sangue perifrico, que
essencial dentro dos protocolos de trata-
mento. Uma srie de trabalhos indepen-
dentes mostraram que a quantidade de
vrus circulante o fator que prediz o
desencadeamento da imunodeficincia,
ou sej a, paci ent es que na f ase
assintomtica apresentam carga viral ele-
vada tendem a evoluir para a AIDS muito
mais rapidamente quando comparados
com os outros com cargas virais baixas.
Mais uma vez a medicina pde lanar
mo da biotecnologia para que pudesse
desenvolver um mtodo confivel de
dosagem da carga viral atravs da tcni-
ca de PCR quantitativo. Esta tcnica se
baseia na amplificao de quantidades
nfimas de RNA viral a partir da utilizao
de DNA sinttico (primers) que catalizam
reao de sntese. Esta reao repetida
dezenas de vezes, e a amplificao
exponencial do cido nuclico pode ser
medi da at r avs de t cni cas
imunoqumicas e quantitativas. Foi pos-
svel desenvolver kits quantitativos de
carga viral que esto disposio dos
clnicos para ajudar a decidir as bases do
tratamento com drogas anti-retrovirais.
Neste tocante, o Ministrio da Sade,
atravs do Programa Nacional de DST/
AIDS, organizou, a nvel nacional, uma
rede pblica de laboratrios para dosa-
gem de carga viral. A continuidade desta
rede de suma importncia para o
controle da resistncia viral s drogas.
Outros mtodos foram desenvolvidos
para o controle da resistncia viral s
drogas. Atravs da tcnica de hibridizao
molecular, foi possvel criar uma abor-
dagem simples para identificao de mu-
taes no genoma viral que levam
resistncia aos inibidores da transcriptase
e protease. Assim, da mesma forma que
o antibiograma feito para avaliar a
sensibilidade de bactrias aos antibiti-
cos e, desta forma, eleger aquele ideal
para o tratamento, possvel analisar as
regies-alvo do vrus, o que permite
tomar decises precoces em relao
troca de medicamentos, a fim de manter
a viremia do paciente em um nvel basal
muito baixo.
Vacina
A vacina anti-HIV seria uma arma
eficaz para impedir o avano desta epi-
demia. A engenharia gentica e outras
tcnicas biotecnolgicas possibilitaram
a produo em larga escala de antgenos
virais importantes para o desenvolvi-
mento de uma vacina. Hoje em dia, j
existem prottipos de vacinas com vrias
composies antignicas em fase de tes-
tes clnicos. Infelizmente, o teste de uma
vacina anti-AIDS um processo longo e
muito dispendioso, inibindo assim os
investimentos privados nesta rea. Outro
fator que ameaa o sucesso da vacina
a grande taxa de mutao que o vrus
apresenta nas regies importantes para a
ativao do sistema imunolgico huma-
no. Vrias estratgias foram desenhadas
para criao de uma vacina anti-HIV e
alguns grupos se dedicaram produo
da protena de envelope (gp160) na ten-
t at i va de i nduo de ant i cor pos
neutralizantes contra o HIV. Esses gru-
pos utilizaram vrios sistemas de expres-
so de protenas, tais como baculovrus,
levedura e clulas de mamfero. A em-
presa americana Genetec Inc. desenvol-
veu a expresso da gp160 em clulas de
hmster (CHO), o que possibilitou a
produo de grandes quantidades do
antgeno para testes clnicos da vacina.
Outra indstria americana adotou o
baculovrus como sistema de expresso,
e desenvolveu tambm o antgeno gp160
neste vrus de inseto. Ambos os sistemas
mostraram-se eficazes. Uma outra estra-
tgia a utilizao de vetores vivos, ou
seja, vrus humanos atenuados, tais como
da vaccinia, que foi manipulado geneti-
camente a fim de se induzir a expresso
da gp160 quando inoculados. A fim de
diminuir o risco biolgico desta estrat-
gia, foram manipulados geneticamente
para atuarem como veculos (vetores) de
vacinao. Um exemplo clssico o
vrus da varola de canrios (canaripox),
que foi utilizado como vetor vivo para
expressar a gp160 do HIV-1. Outra abor-
dagem se baseia em introduzir nas clu-
las da derme um DNA que, uma vez em
contato com o ncleo celular, expressa
antgenos virais, e assim induz a imuni-
dade nos indivduos inoculados. Esta
abordagem foi batizada de vacinao a
DNA ou vacinas a DNA, e uma gama
imensa de construes genticas expres-
sando diferentes antgenos de HIV-1 est
sendo testada em animais. A manipula-
o em tubo de ensaio (in vitro) do
genoma do HIV destruindo genes aces-
srios tais como vpu ou nef constitui
outra possibilidade, uma vez que geram
vrus com menor potencial patognico.
O vrus com o gene nef inativado apre-
senta um baixo potencial patognico.
Em experimentos de vacinao utilizan-
do mutantes nef de SIV (vrus parente do
HIV que infecta macaco), estes impedi-
ram a superinfeco com a cepa virulen-
ta letal. Obviamente existem vrias ques-
tes de biossegurana relativas a este
tipo de vacina, principalmente no que
concerne ao potencial de reverso des-
ses v rus e f ormao, at ravs de
recombinao de vrus selvagens, indu-
zindo assim a doena nas pessoas vaci-
nadas. De uma forma geral, houve um
certo desinteresse das grandes indstrias
biotecnolgicas no desenvolvimento de
uma vacina preventiva contra a AIDS.
Este desinteresse foi causado, em parte,
pela gerao de novas drogas potentes
contra o HIV e a dificuldade na organi-
zao dos testes clnicos para vacina.
Teraputica
Como citado anteriormente, o HIV
um retrovrus, e, portanto, utiliza uma
enzima que transforma o seu material
gentico de RNA em DNA. Esta transfor-
mao (transcrio reversa) pode ser
inibida por vrias drogas, sendo as mais
utilizadas o AZT, 3TC, DDI e DDC. Estas
so derivadas de nucleotdeos (blocos
que constituem o RNA e DNA) que quan-
do incorporados transcriptase reversa
viral (TR) na cadeia de DNA, inibem a
reao, o que impede a infeco celular.
Infelizmente, a resistncia a estas drogas
adquirida rapidamente pelo vrus atra-
vs de mutaes estratgicas na seqn-
cia que codifica a TR. Assim, a vantagem
teraputica obtida com este tratamento
rapidamente perdida aps o apareci-
mento dos vrus resistentes que sobre-
pem a populao viral sensvel. Outro
alvo de ataque das dro-
gas anti-HIV a enzima
proteinase, que fun-
damental no processo
de maturao das prote-
nas virais durante o
brotamento da partcu-
la. Sem sua atividade,
partculas defeituosas,
que no conseguem
infectar novas clulas,
so geradas. A partir de
tcnicas de modelagem
molecular, foram desen-
volvidas drogas poten-
tes que conseguem ini-
bir a ao desta enzima
em concent r aes
bai x ssi mas. Est as so chamadas
inibidores de protease (IP) e entraram no
mercado h poucos anos, causando uma
grande revoluo no tratamento da do-
ena. Pela primeira vez, pacientes com-
pletamente desenganados puderam se
recuperar e levar suas vidas normalmen-
te. Infelizmente, existem relatos de muta-
es virais que levam resistncia aos
IP. Na tentativa de impedir o apareci-
mento de vrus resistentes o tratamento
clnico atual utiliza a associao de
antivirais, no somente os IP, mas tam-
bm os inibidores de transcriptase que
constituem o coquetel de drogas que
pode levar a uma queda duradoura da
carga viral. Devido ao alto custo dos
medicamentos, este tratamento ainda no
pode ser disponibilizado para toda a
populao mundial infectada; contudo,
no Brasil, o Ministrio da Sade, atravs
do seu Programa Nacional de DST/AIDS,
vem disponibilizando o coquetel de dro-
gas para um grande nmero de doentes.
O alto custo deste programa e a possibi-
lidade de aparecimento de resistncia
vi r al f azem com que deva ser
implementado um sistema de vigilncia.
Este sistema identificaria vrus resistentes
e aconselharia a melhor combinao de
antivirais para o controle da infeco em
diferentes reas do pas. Novos alvos
moleculares esto sendo pesquisados a
fim de bloquear o ciclo viral, um deles
a enzima integrase que responsvel
pela integrao do genoma viral no n-
cleo da clula infectada. Outros alvos
teraputicos potenciais que vm sendo
pesquisados so os receptores celulares
para betaquimiocinas (CCR5 e CXCR4, ou
fusina), responsveis pela entrada do
vrus na clula, bem como as prprias
betaquimiocinas, que so mediadores
imunolgicos capazes de bloquear tanto
a entrada viral por competio pelo seu
receptor, quanto a produo de novos
vrus pela clula j infectada, por pro-
cesso ainda no bem conhecido. Portan-
to, quanto mais alvos disponveis para a
teraputica anti-AIDS, maior a probabili-
dade de sucesso.
As caractersticas peculiares desta
pandemia faz com que seja fundamental
o engajamento das comunidades cient-
ficas locais para um melhor entendimen-
to dos problemas peculiares de cada
pas onde o HIV circula.
A contribuio da biotecnologia no
controle efetivo desta epidemia tem sido
decisiva, quer seja nos mtodos diag-
nsticos, produo de anti-retrovirais ou
no desenvolvimento de novas vacinas.
NOVAS CONQUISTAS DO INSTITUTO BUTANTAN
Isaias Raw
Presidente da Fundao Butantan
Biotecnologia a Servio
da Sade Pblica
Instituto Butantan inter-
nacionalmente conhecido
pelas suas cobras e pelos
soros ant i peonhent os.
Nos ltimos anos o institu-
to transformou-se no maior produtor
nacional de vacinas, que se tornou pu-
blicamente visvel, quando vacinas
trplices importadas foram recusadas pelo
INCQS por ter nvel de toxicidade acima
do permitido. S as vacinas do Butantan
foram aprovadas. A produo de vacina
trplice foi inspecionada em 1997 e apro-
vada pela Organizao Mundial de Sa-
de.
Dentro do Programa Nacional de
Auto-suficincia, o Brasil espera poder
produzir a maior parte da demanda das
vacinas obrigatrias. Este ano o Instituto
Butantan forneceu 30 milhes de doses
de vacinas, dos quais 10 milhes de
vacina trplice. O Butantan ainda o
nico produtor de toxide tetnico e do
toxide diftrico. A Fundao Nacional
de Sade substituir o toxide tetnico
para adultos pela combinao tetnico-
diftrico. Estaremos assim evitando o
ressurgimento da difteria em adultos, o
que ocorre no
Equador e na
Rssi a, com
c ons i der vel
mortalidade.
A posio
de liderana do
But ant an na
Amrica Latina
se deve princi-
palmente im-
pl ant ao do
seu Centro de
Biotecnologia,
da Diviso de
P r o d u o ,
onde 40 pes-
quisadores, dos
quais 20 dou-
tores, desenvol-
vem e transferem para o setor produtivo
novos processos e produtos. O mais
importante a vacina recombinante con-
tra a hepatite B, j testada pelo Centro de
Sade da Universidade de So Paulo em
Araraquara, tendo confirmado os testes
em camundongos, de ser uma das vaci-
nas contra a hepatite mais imunognicas.
O simples anncio do incio da
produo da vacina contra hepatite B,
em 1998, fez com que as ofertas, que h
anos eram de 8 dlares por dose, cas-
sem para menos de 1 dlar. A partir de
1999, o Butantan fornecer toda a de-
manda brasileira, o que permitir erradicar
a hepatite B na prxima dcada. A capa-
cidade de produo do Butantan de
cerca de 100 milhes de doses por ano.
O Butantan no momento est de-
senvolvendo em colaborao com o Ins-
tituto Adolfo Lutz e a Fiocruz uma poten-
cial vacina contra meningite B/C, e j
logrou conjugar o polissacardeo da
meningite C, o que o torna imunognico
para crianas menores de 2 anos. Essa
nova vacina B/C e a vacina C conjugada
devem resolver o problema da vacina-
o das crianas com menos de 2 anos,
onde a meningite mais prevalente e
mortal. As vacinas atualmente produzi-
das no se mostraram eficazes para a
meningite B e me-
ningite C, e a vaci-
nao abaixo de 2
anos um desper-
dcio de recursos e
de esforos.
Usando basi-
camente a mesma
tecnologia, devere-
mos produzir em
1-2 anos a vacina
conjugada contra
Hemophilus B, e
contra os Pneumo-
coccus mais pre-
valentes no Brasil.
Essas duas bactri-
as so respons-
veis por uma parte
dos casos de me-
ningite bacteriana.
Outra vacina que estar sendo en-
tregue em 1998 a vacina anti-rbica em
cultura celular, mais imunognica (exi-
gindo menos doses) e muito mais segura
do que a atual vacina produzida em
camundongos. A tecnologia de produ-
o de vrus em cultura celular dever
ser aplicada brevemente para produo
de vacinas contra rubola e sarampo.
O aumento do nmero de trans-
plantes no Brasil exige o tratamento das
rejeies que pem em risco a vida dos
pacientes. O Instituto Butantan, em coo-
perao com a Fundao Zerbini, hoje
o nico produtor de soro antitimocitrio
humano e de doi s ant i cor pos
monoclonais que bloqueiam a rejeio.
Mais de 25.000 pacientes renais
aguardam na fila dos transplantes, e para
serem mantidos vivos exigem a adminis-
trao da eritropoetina, hormnio renal
que controla a produo de hemcias. J
no comeo do prximo ano, estaremos
produzindo a eritropoetina evitando que
o SUS gaste vrias dezenas de milhes de
dlares com esse produto.
Talvez a tecnologia de maior im-
pacto venha a ser a produo do
surfactante pulmonar.
Estima-se que 10.8% dos recm-
nascidos sejam prematuros, contribuin-
do para a mortalidade infantil. Alm
disso onera o SUS, com o atendimento
dos prematuros, e a famlia que, perden-
do o beb, tentar nova gravidez, com
custo econmico e psicolgico. Com a
cooperao da Sadia, deveremos utilizar
em torno de 400.000 pulmes de sunos
par a pr oduzi r 400. 000 doses de
surfactante. Esse surfactante ser forne-
cido pelo seu preo de custo ao SUS.
Outro importante projeto a produ-
o de fator anti-hemoflico porcino,
que poder atender, sem risco de AIDS
e hepatite B, os pacientes mais graves,
que se tornam resistentes ao fator VIII
humano.
A BIOTECNOLOGIA NO TRATAMENTO DE DEJETOS DE SUNOS
Masaio Mizuno Ishizuka
Professora titular da Universidade de So Paulo
Faculdade de Medicina Veterinria e Zootecnia
Departamento de Medicina Veterinria Preventiva e Sade Animal
e-mail: mizuno@usp.br
suinocultura brasileira vem
se destacando no cenrio
do comrcio internacional
pela sua elevada qualidade
tcnica e produtividade. O
rebanho nacional de aproxi-
madamente 35 milhes de sunos tem uma
elevada densidade demogrfica nos Esta-
dos do Rio Grande do Sul, Santa Catarina e
Paran, com acelerado desenvolvimento
em So Paulo, Gois, Mato Grosso do Sul,
Mato Grosso e Minas Gerais. Paralelamente
ao crescimento da produtividade, crescem
tambm os problemas decorrentes da dis-
posio dos dejetos e as exigncias interna-
cionais relativas manuteno e promoo
da qualidade ambiental marcada por uma
gesto prpria - a ISO 14.000.
A fim de que se possa ter uma idia
sobre a magnitude do problema, basta
atentar ao fato de que a produo mdia
diria de dejetos de um suno de 2,35kg/
dia, 5,80kg/dia quando acrescido de urina,
podendo atingir a cifra de 8,60kg/dia, se
computado todo o volume lquido descar-
tado (gua de bebida desperdiada, gua
de lavagem etc.). Num estado com um
rebanho, por exemplo, de 3 milhes de
sunos, pode-se estimar a produo de
7.050t de dejetos/dia, podendo atingir at
25.800t/dia de dejetos lquidos. No so-
mente pelo volume anteriormente apresen-
tado, mas tambm pela sua composio
microbiolgica e fsico-qumica, que os
dejetos de sunos representam um potente
poluidor, degradando e contaminando o
solo e mananciais de gua. Dentre os
agentes patognicos mais importantes ca-
pazes de ser veiculados pelos dejetos tem-
se a E.coli, Salmonella sp, Myc.Tuberculosis,
Brucella suis, Streptococcus sp, vrus da
peste suna clssica, da febre aftosa etc.,
podendo alcanar outros hospedeiros, in-
cluindo o homem. Algumas das substnci-
as inorgnicas como o fsforo e o potssio
em alta quantidade nas fezes podem poluir
o meio ambiente. Compostos derivados e
substncias nitrogenadas e hidratos de car-
bono tambm presentes nas fezes e sob
ao de fermentao anaerbia podem
produzir substncias poluentes avaliadas
por indicadores qumicos como DQO (de-
manda qumica de oxignio), DBO (de-
manda biolgica de oxignio), nitrognio
amoniacal, slidos totais etc. Um fator
digno de nota que em ambientes
anaerbios, prprios das esterqueiras, ocorre
a degradao de:
* carboidratos e lipdios em cidos
graxos volteis, aldedos e gs carbnico;
* sulfatos em gs sulfdrico e mercaptan;
* aminocidos e protenas em mercaptan,
fenis, paracresol, indol, escatol, aminas e
amnia;
* uria em amnia;
* material orgnico em gs metano.
O nitrognio presente no solo ou nos
dejetos e em plantas em decomposio
torna-se disponvel para as razes das plan-
tas quando convertido em nitrognio org-
nico ou on nitrato. A fim de que as
bactrias saprfitas do solo desempenhem
sua ao transformando a matria orgnica
ou o nitrognio amoniacal em nitrato, tor-
na-se imperioso o lanamento no solo de
quantidade de dejetos que o solo possa
reter. Sabe-se que em reas de elevada
densidade de sunos, o solo no possui
mais esta capacidade de assimilao e
conseqentemente no apenas o solo,
como tambm mananciais de gua super-
ficial e/ou subterrnea esto contaminados
por microrganismos patognicos e polu-
dos principalmente por fsforo, potssio,
nitritos e nitratos. Estes dois ltimos, alm
de apresentarem alta mobilidade no solo,
so causas de doenas no homem como
cncer, metaemoglobinria, intoxicaes
etc. Adicionalmente, h que se mencionar
efeitos secundrios como intensa prolifera-
o de artrpodes, como moscas e
simuldeos, e destruio de peixes que so
seus inimigos naturais. No Brasil, as
esterqueiras e bioesterqueiras, sistemas de
armazenagem dos dejetos por um perodo
de tempo recomendado pelos rgos res-
ponsveis pela fiscalizao ambiental, so
os mtodos mais utilizados, apesar de
promoverem um acmulo de material sli-
do que, alm no ter destino certo, ainda
promove mau odor devido fermentao.
Com menor freqncia, os sistemas de
tratamento aerbio e anaerbio facultativo
(compostagem, lagoas de estabilizao,
diques de oxidao e digestores) tambm
so utilizados a fim de se tratar os efluentes
lanados nos recursos hdricos e melhor
atender s exigncias dos rgos
fiscalizadores federais. Contudo estes apre-
sentam a desvantagem de terem um alto
custo e, portanto, serem inviveis aos pe-
quenos e mdios.
A BIOTECNOLOGIA NO TRATAMENTO
DE DEJETOS DE SUNOS
Especialistas em tratamento de dejetos
de sunos so unnimes em admitir que,
para que a suinocultura possa ser auto-
sustentvel, h a necessidade de se dispor
ou desenvolver recursos que possam dimi-
nuir o volume de material slido, minimizar
o odor e demais efeitos indesejveis; indi-
cam tambm a necessidade de uma melhor
definio de um sistema capaz de harmo-
nizar a reduo do potencial poluidor
ambiental com as propriedades
biofertilizantes que apresentam os dejetos,
e que sejam compatveis com a realidade
econmica da atividade e dos criadores. A
fim de atender expectativa do aumento da
relao custo/benefcio, aliada ao menor
impacto ambiental, recentes pesquisas en-
SUNOS
Novas Tecnologias
contram na biotecnologia uma excelente
ferramenta de suporte, j que era necess-
rio promover um aumento da degradao
aerbia em efluentes com limitada quanti-
dade de oxignio, reduzindo a quantidade
de material slido e o odor.
A biotecnologia, fruto da integrao de
cincias da bioqumica, microbiologia e
engenharia, j possui uma legislao pr-
pria e classifica os microrganismos utiliza-
dos em quatro classes de acordo com a
magnitude da patogenicidade dos agentes
envolvidos. Assim, classe 1 pertencem
todos os microrganismos que jamais foram
identificados como patognicos e que no
oferecem perigo ao meio ambiente. Hoje, a
biotecnologia reconhecida como uma
indstria segura.
As reas de aplicao da biotecnologia
so incontveis e tendem a aumentar pro-
gressivamente. A explorao animal um
dos setores beneficiados pelos recursos da
biotecnologia, desenvolvidos em outros
pases e que passam a ser disponveis em
nosso meio.
No tocante ao tratamento de dejetos, a
biotecnologia iniciou seu desenvolvimento
a partir da demanda da sociedade direta ou
indiretamente relacionada com a
suinocultura, como: a) a grande quantida-
de de dejetos gerados, dificultando seu
encaminhamento para a agricultura, que
o seu destino mais adequado e b) os maus
odores representando fator de desconforto
aos prprios sunos, comprometendo so-
bremaneira a sua produtividade, e ao ho-
mem que habita as imediaes da criao.
PONTOS FUNDAMENTAIS NO
TRATAMENTO DE DESEJOS
A biotecnologia no tratamento de dejetos
de sunos, aqui mencionada, baseou-se em
pontos fundamentais como a identificao
de bactrias saprfitas capazes de transfor-
mar o ambiente anaerbio em aerbio ou
microaerfilo, facilitando a:
* degradao da matria orgnica, re-
duzindo o teor de amnia;
* oxidao da amnia remanescente
em nitrito e este em nitrato;
* elaborao de enzimas que rompem
as molculas de celulose;
* oxidao de protenas e carboidratos.
Conseqentemente, obtm-se como re-
sultado final dejeto com alto poder fertili-
zante e com reduo:
* do mau odor;
* da quantidade de material slido;
* da quantidade de artrpodes.
Existem disposio dos suinocultores
vrios produtos de biotecnologia para este
propsito. Obviamente, a facilidade de
aplicao um fator importante, a fim de se
evitar operaes adicionais no trabalho de
rotina de uma criao. A aplicao direta
nas esterqueiras e a intervalos razoavel-
mente amplos pode ser considerada como
vantagem interessante.
UM PRODUTO NOVO
Um produto apresentado sob forma de
grnulos, estvel e aplicado a cada 14 dias,
foi testado em uma criao do Estado de
Santa Catarina por um perodo de 2,5
meses, de novembro de 1996 a janeiro de
1997, adotando-se como parmetros de
avaliao dos resultados dois critrios. Um
deles consistiu na avaliao subjetiva do
odor e da quantidade de insetos presentes.
O outro critrio baseou-se na anlise
laboratorial de amostras de dejetos pelas
provas de determinao de pH, slidos
totais, slidos fixos, slidos volteis, DQO,
nitrognio amoniacal, nitrognio total e
fsforo total selecionados dentre os vrios
parmetros de verificao de reduo de
poluentes. Os resultados laboratoriais en-
contram-se reunidos na tabela que se se-
gue. Pela observao e interpretao dos
dados da tabela, pode-se verificar uma
reduo entre o incio e o final do experi-
mento da ordem de:
* 84,10% para os slidos totais - facilida-
de no manuseio dos dejetos;
* 77,5% para os slidos fixos - indicao
de mineralizao;
* 87,9% para os slidos volteis - redu-
o no teor de cidos graxos e amnia e
portanto dos odores;
* 86,7% para o nitrognio amoniacal -
reduo do odor e, conseqentemente, de
nitritos e nitratos;
* 43,3% para o nitrognio total - reduo
de odor e amnia;
* 92,2% para o fsforo total - reduo do
potencial poluidor;
* 91,6% para o DQO - reduo na
concentrao de carbono.
Pelos resultados apresentados, verifica-
se que o criador poder dispor de um
instrumento valioso que venha a atender
no apenas as suas necessidades, como
tambm s exigncias dos rgos
fiscalizadores do meio ambiente e eventu-
almente solicitar certificao de ISO 14.000
pela gesto adequada do meio ambiente,
preservando e at promovendo a qualida-
de de vida dos animais e do homem.
O QUE O CRIADOR ESPERA DE UM
BOM PRODUTO
Finalmente, um produto de
biotecnologia ideal para o tratamento de
dejetos de sunos para atender s necessi-
dades do pequeno e mdio criador seria
aquele que pudesse reunir as seguintes
caractersticas:
* fcil aplicao nas fossas ou
esterqueiras, preferentemente;
* dispensar instalaes adicionais ou
especiais;
* reverter a fermentao anaerbia em
aerbia ou microaerfila;
* reduo do tempo de armazenagem
dos dejetos em esterqueiras ou similar;
* preservar ou aumentar o poder fertili-
zante;
* produo de alto teor de nitrognio
orgnico para aplicao como fertilizante;
* reduo de maus adores resultantes
da presena de produtos de degradao
anaerbia de matria orgnica, protenas,
hidratos de carbono, lipdios etc.;
* reduo da populao de artrpodes;
* facilidade de remoo para a agricul-
tura;
* minimizar a poluio do solo e ma-
nanciais de gua.
Para que produtos desta natureza pos-
sam atingir o efeito esperado, os criadores
tero que internalizar na sua rotina de
trabalho os novos conhecimentos e
tecnologias que esto sendo desenvolvi-
dos para aprimoramento da prpria
suinocultura, o que a mdio e a longo
prazos poder representar abertura de no-
vas fronteiras no comrcio internacional de
carne suna.
Entrevista concedida ao Canal Rural/
SP, no dia 17/09, sobre o mesmo tema. O
produto, com o nome de BIO-409, ser
lanado brevemente no mercado brasilei-
ro.
Com o f enmeno da
globalizao da economia, a par-
ceria entre os pases tem sido
identificada como um dos princi-
pais instrumentos para promover o
desenvolvimento sustentado e o bem-
estar dos povos. No plano cientfico
e tecnolgico, a necessidade de co-
operao ainda mais evidente, j
que ela torna posssvel conjugar
esforos e conhecimento, otimizar
recursos e infra-estrutura para a
realizao de pesquisas, visando
gerar tecnologias, servios e pro-
dutos para atender s demandas
crescentes da comunidade global.
Nesse cenrio, os governos do
Brasil e do Egito pretendem estabe-
lecer um acordo de cooperao
tcnica para o desenvolvimento de
pesquisas agrcolas de interesse
para os dois pases, envolvendo con-
servao e uso de recursos genti-
cos, cont rol e bi ol gi co e
biotecnologia.
O adido agrcola da Embaixa-
da do Egito em Washington, EUA,
Mohamed Abdas Elkalla, visitou o
Centro Nacional de Pesquisa de
Recursos Genticos e Biotecnologia
- Cenargen, da Empresa Brasileira
de Pesqui sa Agropecuri a -
Embrapa, em novembro, para co-
nhecer os trabalhos desenvolvidos
e identificar temas que possam ser
objeto de cooperao.
Mohamed Abdas engenheiro
agrnomo formado pela Universi-
dade do Cairo, mestre em inds-
tria de alimentos pela mesma uni-
versidade, Ph.D. em economia
agrcola, realizado no Egito e nos
Estados Unidos. Nessa mesma oca-
sio, ele concedeu esta entrevista
revista BIOTECNOLOGIA Cincia
& Desenvolvimento, na sede da Em-
baixada do Egito, em Braslia, du-
rante a qual se mostrou muito entu-
siasmado com o trabalho realiza-
do pela Embrapa Recursos Genti-
cos e Biotecnologia e falou das pes-
quisas agrcolas do seu pas, entre
outros assuntos.
BC&D - A agricultura tradicional tem
dado respostas razoveis produo
de alimentos ao longo do tempo, a des-
peito de o uso indiscriminado de
insumos agrcolas representar riscos
ambientais. O senhor acredita que a
biotecnologia capaz de viabilizar a
produo e melhorar a qualidade dos
alimentos, sem agredir o meio ambi-
ente?
Mohamed Abdas - Eu acredito na cincia
e na tecnologia. A biotecnologia ape-
nas uma das ferramentas para promover
o desenvolvimento. Com o passar do
tempo e a realizao de mais pesquisas,
a biotecnologia, assim como a agricultu-
ra tradicional e o controle biolgico, vai
achar o seu caminho para trazer mais
benefcios populao mundial. O cres-
cimento populacional e a fome, no mun-
do, vm ocorrendo de forma assustado-
ra nos ltimos vinte anos, e para chegar-
mos a solues preciso tentar. O ho-
mem chegou Lua porque ousou chegar
l e teve sucesso, poderia no ter tido.
Hoje, no Egito, temos 65 milhes de
bocas para alimentar e os recursos so
limitados. Consideramos importante pre-
servar o meio ambiente, mas a soluo
para a fome tem que estar em primeiro
lugar. Quando h fome, no se pensa em
meio ambiente, ou em religio. Eu vejo a
biotecnologia como um caminho para a
obteno de variedades resistentes a
pragas e doenas. Se no houver inves-
timentos nessas pesquisas, dificilmente
conseguiremos livrar as culturas agrco-
las dessas pestes. A cincia o nico
caminho para a sobrevivncia da huma-
nidade.
BC&D - Quais so as principais insti-
tuies do Egito, pblicas ou privadas,
que trabalham com pesquisa
biotecnolgica?
Mohamed Abdas - Ns temos, no Egito, o
Centro de Pesquisas Agrcolas do Minis-
trio da Agricultura, que o maior do
Oriente Mdio. Dele fazem parte 15 ins-
titutos, que pesquisam todas as ativida-
des agropecurias, de forma integrada.
H cerca de trs anos, foi incorporado a
este centro o Instituto de Pesquisas
Biotecnolgicas, que at o momento
vem trabalhando com cultura de tecidos
de espcies vegetais. Em breve, preten-
demos estender as pesquisas para os
animais de interesse zootcnico e outras
r eas pass vei s de i nvest i gaes
biotecnolgicas. H tambm, no Egito,
vrias empresas privadas desenvolven-
do pesquisas de biotecnologia, inclusive
mantendo parcerias com os rgos go-
vernamentais, alm de vrios institutos e
unidades de pesquisa nas universidades
e faculdades de agronomia.
BC&D - Que interesses motivaram a
visita do senhor Embrapa/Cenargen?
Mohamed Abdas - Eu vim ao Brasil para
estabelecer um forte acordo de coopera-
o agrcola entre os dois pases. Nesse
contexto, estou elaborando um docu-
mento para enviar ao Ministrio da Agri-
cultura do Brasil, propondo a ida de
pesquisadores e tcnicos brasileiros ao
Egito e vice-versa. Essa cooperao ser
muito importante no apenas para o
desenvol vi ment o de pesqui sas
biotecnolgicas, como tambm para a
implementao de programas de melho-
ramento gentico das culturas agrcolas,
alm da formao de joint-ventures, o
BRASIL E EGITO
Parceria na agricultura para enfrentar os desafios do sculo XXI
Entrevista concedida a:
Lucas Tadeu Ferreira e
Maria Fernanda Diniz Avidos
que permitir incrementar as expor-
taes e o agronegcio entre nossos
pases. Esse acordo visa tambm
revitalizar as relaes bilaterais entre
Brasil e Egito, que foram iniciadas
em 1990, e no tiveram continuida-
de. Estamos tambm trabalhando para
firmar acordos de cooperao com
outros pases latino-americanos,
como Argentina, Uruguai e Paraguai,
onde estive antes do Brasil, partici-
pando do encontro anual sobre al-
godo. Eu penso que os pases em
desenvolvimento devem manter es-
treitos laos de cooperao entre si,
mas tambm com os pases desenvolvi-
dos. Como exemplo, nos ltimos sete
anos, engenheiros agrnomos brasilei-
ros tm participado de treinamentos nas
universidades e em instituies de pes-
quisa egpcias.
BC&D - O senhor poderia especificar
com mais detalhes quais as atividades
de pesquisa que mais interessam ao
governo do Egito para celebrar acordo
de cooperao?
Mohamed Abdas - Na verdade, todas as
pesquisas vistas despertaram o meu inte-
resse e so potencialmente importantes
para a celebrao de acordos de coope-
rao com o meu pas. Mas posso desta-
car a biotecnologia, o controle biolgico
de pragas e doenas, o melhoramento
gentico de plantas, a conservao e uso
de germoplasma e o conhecimento de
tcnicas de agricultura tradicional. Ns
consideramos muito importante conju-
gar as tcnicas avanadas com os mto-
dos tradicionais de cultivo. Acreditamos
que s assim estaremos aptos para en-
frentar os desafios de produo de ali-
mentos para o sculo XXI.
BC&D - Como est a situao da pesqui-
sa biotecnolgica e de controle biol-
gico hoje no Egito?
Mohamed Abdas - As pesquisas de
biotecnologia e de controle biolgico de
pragas e doenas ainda esto em fase
inicial. Para increment-las, mantemos
convnios com vrios pases, entre os
quais os Estados Unidos. Volto a ressal-
tar que a cooperao tcnica com o
Brasil nessas reas muito importante
para que nossos povos possam obter
cada vez mais benefcios.
BC&D - Exi ste al gum produto
transgnico ou geneticamente modifi-
cado sendo desenvolvido e/ou
comercializado no Egito. O senhor
saberia dizer quantos e quais?
Mohamed Abdas - No. Ainda no temos
produtos transgnicos, porque o nosso
instituto, conforme eu j disse anterior-
mente, s tem trs anos de existncia.
BC&D - Como a aceitao dos produ-
tos geneticamente modificados pelo
consumidor do Egito?
Mohamed Abdas - A populao do Egito
aceita muito bem qualquer tecnologia
nova que possa trazer benefcios. claro
que a maior parte da populao no
sabe exatamente o que biotecnologia,
mas eles acreditam que a cincia pode
resolver os problemas dos produtores
rurais, aumentando a qualidade e a pro-
dutividade, tornando o pas auto-sufici-
ente na produo de alimentos. claro
que, assim como nos pases da Europa e
nos Estados Unidos, h movimentos
contrrios aos produtos geneticamente
modificados, o que perfeitamente nor-
mal numa sociedade.
BC&D - Os produtos transgnicos que
sero comercializados, no Egito, tero
que possuir algum tipo de selo ou r-
tulo de identificao para informar ao
consumidor que so geneticamente
modificados?
Mohamed Abdas - Na minha opinio, s
por serem geneticamente modificados
no precisam de nenhum selo de iden-
tificao especfico, j que a biotecnologia
deve ser encarada como uma atividade
cientfica normal. Se uma nova varieda-
de obtida pelos mtodos de melhora-
mento gentico clssico, ela no precisa
de identificao. Por que uma gerada
por tcnicas biotecnolgicas precisaria?
claro que a situao diferente para os
medicamentos, que tm que conter avi-
sos sobre os eventuais efeitos colaterais.
BC&D - O governo do Egito desenvol-
veu, ou pretende desenvolver, alguma
campanha de conscientizao da po-
pulao para aceitao de produtos
geneticamente modificados?
Mohamed Abdas - O governo do Egito
vei cul ou uma f ort e campanha de
conscientizao da populao atravs
da mdia, a partir da visita do secre-
trio de Agricultura norte-america-
no ao nosso pas. Essa campanha
most r ou os benef ci os da
biotecnologia e a segurana dos
produtos geneticamente modifica-
dos para a populao. Hoje, o
Egito mantm um forte acordo de
cooperao com os EUA para de-
senvol ver pesqui sas
biotecnolgicas. Nesse campo, os
EUA so o nosso maior parceiro.
BC&D - No Brasil, a Lei de
Biossegurana obriga todas as
instituies pblicas ou privadas a
submeter seus projetos de pesquisa de
biotecnologia aprovao do governo.
No Egito, o governo tambm exerce
esse controle sobre as pesquisas com
transgnicos?
Mohamed Abdas - Claro, o Ministrio da
Cincia do Egito controla e aprova todas
as pesquisas cientficas, com base na Lei
Biolgica egpcia. Essa lei regulamenta a
produo e o consumo dos alimentos,
inclusive os importados. Contudo, se um
produto transgnico j aceito pelas
autoridades americanas e consumido na-
quel e pa s, el e t ambm pode ser
comercializado no Egito. Alis, esse cri-
trio se estende tambm a outros pases
idneos, como o Brasil, por exemplo.
Ns temos que incrementar a produo
de alimentos mesmo que isso implique
riscos.
BC&D - Existe, no Egito, alguma linha
de crdito subsidiada pelo governo
para as pesquisas biotecnolgicas, ou
essas atividades esto sujeitas apenas
ao risco de mercado pelos seus empre-
endedores?
Mohamed Abdas - Sim, o governo egp-
cio tem um oramento destinado cin-
cia e tecnologia que financia as pesqui-
sas biotecnolgicas realizadas pelas ins-
tituies governamentais de pesquisa e
de ensino. As empresas privadas arcam
com as suas prprias despesas e os
riscos de mercado.
BC&D - Como a legislao do Egito,
hoje, para regulamentar o trnsito e a
troca de material gentico com outros
pases?
Mohamed Abdas - Existe um comit tc-
nico altamente especializado dentro do
Centro de Pesquisas Agrcolas do Minis-
trio da Agricultura que fiscaliza, contro-
la e autoriza o trnsito interno e externo
de material gentico. Todos os aspectos
fitossanitrios so rigorosamente obser-
vados, de acordo com os padres inter-
nacionais.
O cacau na Bahia
Vi aj ando para a ensol arada e
paradisaca regio do sul da Bahia, com
as suas praias maravilhosas e seu povo
bastante alegre e receptivo, vamos en-
contrar a principal rea produtora de
cacau, que avana pelo continente aden-
tro, com mais de 2 milhes de habitantes
distribudos em mais de 100 municpios,
e que possui, sem dvida, um dos mais
belos trechos do litoral do Brasil.
At a dcada de 80, esses municpi-
os geraram muita riqueza e divisas para
o pas, com a produo e a exportao
de amndoas de cacau para os merca-
dos interno e externo. Embarcaes par-
tiam do porto de Ilhus carregadas de
amndoas de cacau, que eram exporta-
das praticamente para todo o mundo. O
sul da Bahia chegou a empregar direta-
mente mais de 400 mil trabalhadores nas
lavouras cacaueiras e colocou o Brasil
no ranking dos maiores produtores do
mundo.
Hoje, esses municpios baianos em-
pregam pouco mais de 100 mil trabalha-
dores nas lavouras, muitas, alis, tiveram
perdas de at 100% na produo e esto
experimentando o sabor amargo do cho-
colate. O agronegcio do cacau est
vivendo uma crise sem precedentes na
histria do Brasil. As bruxas esto soltas.
Tempos ureos e vitoriosos da saga
do cacau no sul da Bahia so hoje
apenas lembranas registradas na me-
mria de seus habitantes de um passado
no muito distante, contadas, alis, com
muito sentimento de nostalgia e esperan-
a de melhores dias pelo seu simptico
povo.
Jorge Amado, o escritor brasileiro
contemporneo mais ilustre e conhecido
no mundo, com suas dezenas de obras
literrias, muitas retratadas e vivenciadas
no sul da Bahia, melhor do que nin-
gum, encantou e encanta o mundo, em
quase todos os idiomas, com as suas
estrias mescladas de fico e realidade
passadas na regio cacaueira da Bahia.
Quem no conhece a Gabriela, cravo e
canela?
O declnio da cacauicultura, ocorri-
CACAU
Clones tecnolgicos, a salvao da lavoura do cacau
Lucas Tadeu Ferreira
Fotos: Aguido Ferreira - CEPLAC
do na ltima dcada, se deve principal-
mente ao ataque da praga conhecida por
vassoura-de-bruxa, doena causada pelo
fungo que atende pelo nome de Crinipellis
perniciosa, que migrou da Amaznia
para a regio cacaueira da Bahia, em
1989.
Alm desse fungo, condies cli-
mticas adversas e desfavorveis ao cul-
tivo, baixa cotao do preo do produto
nos mercados interno e externo - j que
nesse perodo a tonelada baixou de mais
de US$ 3,000.00 para pouco mais de US$
1,500.00 -, aumento da produo e oferta
de amndoas por outros pases produto-
res, empurraram a economia cacaueira
dos municpios baianos ladeira abaixo.
Nos tempos gloriosos, a rea culti-
vada com o cacau na Bahia ocupava
mais de 700 mil hectares, distribudos
entre os 100 municpios do sul do
estado, destacando-se como maiores
pr odut or es I l hus, Camac,
Ibirapitanga, Arataca e Itajupe. Para a
Bahia, o cultivo do cacau j foi o
principal produto agrcola gerador de
riqueza, chegando a constituir mais
de 50% das suas exportaes e recei-
tas.
A partir do surgimento da vas-
soura-de-bruxa, detectada no muni-
cpio de Uruuca-BA, em maio de
1989, somada s condies adversas,
a produo de cacau, decorridos quase
dez anos, gera pouco mais de 5% da
arrecadao do estado.
Para se ter uma idia dos prejuzos
socioeconmicos ocorridos na regio
nesse perodo, a produo da safra agr-
cola de 1987/88 era superior a 300 mil
toneladas/ano, em mdia, e passou para,
em 1996/97, 174 mil toneladas, o que
representa perdas de quase 50%. De
outro lado, do total de quase 700 mil
hectares de rea cultivada, 92,7% esto
hoje infectados com o fungo Crinipellis
perniciosa, em nveis diferentes de con-
taminao.
As bruxas esto soltas
A vassoura-de-bruxa (Crinipellis per-
niciosa) provoca total desorganizao e
desequilbrio fisiolgico no cacaueiro,
com tal magnitude que chega a provocar
perdas de at 100% na produo da
planta. Hoje, essa doena est presente
nos pases produtores de cacau, com
maior ou menor grau de contaminao e
de perdas de produo, como Bolvia,
Equador, Colmbia, Guiana, Mxico,
Panam, Peru, Suriname, Venezuela e
ilhas do Caribe.
No Brasil, todos os registros e infor-
maes disponveis dos rgos encarre-
gados da defesa fitossanitria vegetal
indicavam que a vassoura-de-bruxa es-
tava presente somente na regio Amaz-
nica - seu local de origem -, at ser
identificada no sul da Bahia, em l989.
Como ela migrou para as regies
produtoras de cacau de vrios estados,
ningum tem uma explicao cientfica
convincente at hoje. Entretanto, desde
meados deste sculo, medidas preventi-
vas j vinham sendo implementadas para
impedir a migrao desta praga para as
lavouras cacaueiras do sul da Bahia e
demais regies produtoras.
A Comisso Executiva do Plano da
Lavoura Cacaueira - CEPLAC, rgo do
Ministrio da Agricultura e do Abasteci-
mento - MA, criado em 1957, no governo
de Juscelino Kubitschek, contando com
a ativa colaborao e participao de
vrias instituies pblicas e privadas,
criou em 1978 um forte e eficiente servi-
o de defesa sanitria vegetal e instituiu
a Campanha de Controle da Vassoura-
de-bruxa - CAVAB para impedir a entra-
da desse patgeno no Estado da Bahia e
demais regies produtoras.
Para garantir o xito da campanha,
foram instalados postos de fiscalizao e
controle em rodovias, portos, aeroportos
etc. para impedir o trnsito de material
gentico contaminado entre os estados
produtores, a partir da Amaznia, entre
eles, Acre, Rondnia, Par, Bahia, Esp-
rito Santo, Minas Gerais e Sergipe, sendo
cr i ada uma ver dadei r a " mur al ha"
fitossanitria de conteno e defesa con-
tra a vassoura-de-bruxa.
Infelizmente, semelhana do que
aconteceu com outros pases produtores
de cacau da regio Amaznica, Amrica
Central e Caribe, a vassoura-de-bruxa
rompeu a barreira fitossanitria e pre-
sena indesejvel e uma triste realidade
no sul da Bahia, h quase dez anos. A
natureza muitas vezes no obedece os
limites e barreiras impostos pelo homem
e comete desatinos.
Ciclo reprodutivo e sintomas
O fungo Crinipellis perniciosa de-
senvolve seu ciclo de vida em dois
estgios distintos: no primeiro, parasita
os tecidos novos e vivos do cacaueiro,
causando inchamentos, provocando
superbrotaes e anomalias nos frutos e
almofadas florais; no segundo, com maior
virulncia, causa necrose e apodreci-
mento dos tecidos da planta.
A colonizao e o desenvolvimento
do fungo so muito rpidos, iniciando-
se nos tecidos novos e em crescimento,
de onde o Crinipellis obtm nutrientes
das clulas vivas e se estabelece como
parasita. Quando o crescimento do ca-
caueiro detido pela praga, os nutrien-
tes solveis se tornam escassos e indu-
zem o fungo a invadir e necrosar - causar
podrido - nos tecidos, passando assim
a obter energia dos tecidos mortos da
planta. nesta fase de vida do fungo que
aparecem os basidiocarpos - fungos no
formato de cogumelos -, que produzem
muitos esporos e disseminam cada vez
mais a doena.
A liberao dos esporos - processo
reprodutivo do fungo - se d preferenci-
almente noite, estando associada
queda de temperatura e ao aumento da
umidade relativa do ar, sendo dissemi-
nados pela corrente dos ventos. Os
esporos tm vida curta, so sensveis
luz e no vivem mais que uma hora. A
disseminao pode acontecer tambm
pela gua e atravs do transporte de
sementes contaminadas.
O Crinipellis s se desenvolve em
tecido novo, ou seja, tecido em cresci-
mento ou meristemtico (brotamento),
ocorrendo ainda nos ramos, almofadas
florais e nos frutos. O ataque nos ramos,
ou brotos vegetativos, provoca inchao
da parte afetada, acompanhada da pro-
liferao de pequenos brotamentos pr-
ximos uns dos outros, onde se prendem
as folhas grandes, curvadas e retorcidas,
que parecem vassouras-de-bruxa, da o
nome da doena. Nas almofadas florais
infectadas formam-se cachos de flores
anormais que do origem a frutos que
morrem prematuramente.
Os frutos infectados apresentam di-
versos sintomas, dependendo do grau
de contaminao. Quando a infeco se
d atravs da raiz da flor, surgem frutos
com formas parecidas com o morango
que tambm morrem prematuramente.
Se a infeco se d diretamente nos
frutos, eles ficam parecidos com uma
cenoura. Nos frutos jovens, o sintoma
caracterstico o aparecimento de uma
mancha negra, dura e irregular, ficando
as sement es grudadas ent re si e
inaproveitveis.
Clones e tecnologia,
a salvao da lavoura
Para tentar controlar e eliminar a
vassoura-de-bruxa das regies cacaueiras
brasileiras, a CEPLAC, bastante motivada
pelo seu quadro de tcnicos, pesquisa-
dores e demais funcionrios, em tempo
hbil, empreendeu todos os esforos
necessrios e vem travando uma verda-
deira guerra com a vassoura. Firmou
ainda vrios convnios e estabeleceu
parcerias com instituies pblicas e
privadas envolvidas direta e indireta-
mente com o agronegcio do cacau,
como o caso, por exemplo, da Embrapa
- Recursos Genticos e Biotecnologia e
Nestl, e importou da Amrica Central
prognies de clones nativos resistentes
vassoura-de-bruxa.
Assim, a CEPLAC passou a dispor de
colees de clones de Theobroma cacao
tolerantes ao fungo, com nveis diferen-
tes de resistncia, para selecion-las e
adapt-las s regies produtoras. Dentre
as colees conhecidas e amplamente
utilizadas nos pases produtores de ca-
cau da Amrica Central, as da srie
Scavi na, j unt ament e com out r as
introduzidas da regio Amaznica, mos-
traram-se mais resistentes doena, em
testes feitos pelo Centro de Pesquisas do
Cacau - CEPEC, rgo de pesquisa da
CEPLAC.
A partir do cruzamento do clone
Scavina 6, procedente do Peru, com o
ICS1, procedente de Trinidade e Tobago,
a CEPLAC desenvolveu a variedade
Theobahia, que apresenta graus de resis-
tncia e tolerncia ao fungo C.perniciosa,
em nveis bastantes animadores e pro-
missores. Theobahia apenas um nome
comercial escolhido para identificar essa
variedade originada do cruzamento do
SCA6 x ICS1, cujas sementes j vm
sendo amplamente distribudas aos pro-
dutores da regio cacaueira da Bahia
neste ano de 1997.
Como tantas outras manifestaes e
expresses da cultura baiana, este sim-
ptico nome de variedade de cacau
desenvolvida e batizada pela CEPLAC
tambm invoca um pouco da fora dos
orixs baianos, j que "Theo" quer dizer
Deus. Em vrios ensaios realizados, o
Theobahia se mostrou muito produtivo e
bastante resistente vassoura-de-bruxa,
quando comparado a outras variedades
comuns. Veja o quadro comparativo
abaixo, a partir de testes realizados no
CEPEC/CEPLAC:
Alm do Theobahia, que multipli-
cado por sementes, outros cinco clones
resistentes vassoura-de-bruxa, quatro
deles importados da Amrica Central e
um desenvolvido pelo CEPEC/CEPLAC,
tambm esto sendo multiplicados e vo
ser distribudos aos produtores, sob a
forma de mudas, para fins de enxertia
nas plantas doentes. So eles: TSH1188,
TSH516, TSH565, procedent es de
Trinidade; EET397, procedente do Equa-
dor; e CEPEC42, desenvolvido pela
CEPLAC, a partir de prognies resisten-
tes. Em curtssimo espao de tempo, os
cacauicultores tero esses clones tole-
rantes e mais produtivos em suas fazen-
das.
No momento, a CEPLAC est distri-
buindo sementes do Theobahia aos pro-
dutores de cacau, e espera alcanar a
meta de 1.000.000 de sementes neste ano
de 1997. A partir de 1998, a distribuio
de sementes ser multiplicada por qua-
tro, quando sero distribudas 4.000.000
a cada ano, at o ano de 2001. Seqncia
de produo de clones resistentes
vassora-de-bruxa:
Os propgulos, pequenos pedaos
de galhas de mudas obtidos dos clones,
sero utilizados para enxertia nos tron-
cos das plantas doentes. Esse mtodo
reduz o tempo de produo do cacauei-
ro para menos de dois anos, enquanto
que com a propagao vegetativa, a
partir das sementes, a planta comea a
produzir com no mnimo seis anos.
A CEPLAC espera distribuir esses
propgulos, aumentando progressiva-
mente o nmero de mudas, at os anos
2001-2, e disponibilizar mais de 1.500.000
unidades, atendendo, assim, a demanda
dos produtores dos 700.000 mil hectares
de lavoura cacaueira. As projees de
distribuio da CEPLAC esto conside-
rando um aproveitamento mdio de 50%
dos propgulos e de 80% das sementes,
com densidade de 1.100 plantas por
hectare.
A vantagem principal dos propgulos
que eles mantm todo o patrimnio
gentico das prognies (ascendentes),
da a denominao de clones, alm das
caractersticas de resistncia, bvio. Eles
ainda sero enxertados diretamente nas
plantas infectadas com a
vassoura-de-bruxa e, depois
do pegamento, a parte do-
ente da planta acima do en-
xerto decepada e a produ-
o de cacau ocorre antes
mesmo do segundo ano. Essa
tcnica poder ser aplicada
facilmente por qualquer pro-
dutor de cacau, os quais esto receben-
do treinamento e orientao tcnica, a
partir dos demais departamentos da
CEPLAC e do seu Centro de Extenso
Rural - CENEX.
Juntamente com as sementes do
Theobahia e com os propgulos dos
clones tolerantes, a CEPLAC est dis-
tribuindo uma cartilha intitulada Ma-
nual de Recomendaes para o Con-
trole da Vassoura-de-bruxa que, em
linguagem simples e acessvel, os pro-
dutores de cacau sabero como proce-
der em relao remoo de material
infectado pela doena, rebaixamento e
adequao das copas das rvores, po-
ca, intervalo e aplicao de fungicidas,
alm de outras tcnicas de cultivo.
Enfim, a CEPLAC alerta os produtores
para que sigam rigorosamente estas
instrues tcnicas, j que s o manejo
integrado da vassoura-de-bruxa que
ir proporcionar bons ndices de pro-
duo e produtividade.
A CEPLAC, atravs do CEPEC, est
ainda desenvolvendo pesquisas de con-
trole biolgico da vasssoura-de-bruxa,
como mais uma tcnica alternativa para
conter os prejuzos dessa praga. J foi
identificado na natureza um fungo co-
nhecido por Trichoderma viride que ini-
be o crescimento do C.perniciosa, tanto
em condies controladas como em ex-
perimentos realizados no campo. O
CEPEC est tambm realizando pesqui-
sas com t cni cas avanadas de
marcadores moleculares para definir
quais so os melhores padres genticos
de cruzamento entre os clones. Estes
dois trabalhos de pesquisa, em breve,
apresentaro ganhos substanciais de tem-
po, de produo e produtividade nos
cacaueiros, mas ainda esto na fase
inicial.
Paralelamente ao desenvolvimento
e distribuio dos clones e sementes de
cacau resistentes vassoura-de-bruxa, a
CEPLAC est promovendo um amplo
esforo de diversificao de culturas na
regio, com a introduo de outros cul-
tivos, para evitar a monocultura, tais
como manga, abacate, maracuj, dend,
aa, pupunha, banana, seringueira etc.,
e tambm com o incentivo criao de
animais de pequeno e grande portes,
como forma de assegurar outras alterna-
tivas de receita aos produtores rurais.
Com todas essas medidas adotadas
em conjunto, resta a esperana e a con-
vico de que a CEPLAC vai conseguir
resgatar e incrementar a economia da
regio sul da Bahia, como tem feito,
alis, ao longo dos seus 50 anos de
existncia. Em breve, espera-se que a
vassoura-de-bruxa seja apenas mais um
captulo da histria do cacau e uma
pequena lembrana na memria dos
moradores da regio.
Afinal, certa vez, o ex-presidente
Ernesto Geisel resumiu muito bem e em
poucas pal avras a i mport nci a da
CEPLAC para o nosso pas: "Feliz do
Brasil se tivesse vinte ou trinta CEPLAC".
NOVAS PERSPECTIVAS NO DIAGNSTICO IMUNOLGICO
Doena de Chagas
doena de Chagas, ou
tripanosomase americana,
afeta cerca de 17 milhes de
indivduos, de acordo com
estimativas da Organizao
Mundial de Sade. No Brasil, estimam-se
cerca de 6 milhes de pessoas infectadas,
com uma populao de risco em torno
de 20 milhes de habitantes. Esta doena
t em como agent e et i ol gi co o
Trypanosoma cruzi, um protozorio
flagelado. A associao do T.cruzi com
a doena, bem como o ciclo do parasito
na natureza, foi primeiramente descrita
graas ao trabalho de Carlos Chagas no
incio do sculo. O ciclo do T.cruzi na
natureza envolve dois hospedeiros, um
inseto triatomneo (vulgarmente chama-
do de barbeiro ou chupo) e um mam-
fero. Quando o triatomneo, um inseto
hematfago, alimenta-se com o sangue
de um mamfero (que pode inclusive ser
o homem) infectado pelo T.cruzi, o
mesmo i ngere parasi t os na forma
tripomastigota, que a forma que circula
no sangue. Estes tripomastigotas trans-
formam-se em epimastigotas na poro
anterior do intestino do inseto. Diferen-
temente dos tripomastigotas que so for-
mas infectivas e no-replicativas, os
epimastigotas so capazes de se multipli-
car e no so infectivos. Aps vrios
ciclos de replicao, os epimastigotas
migram atravs do intestino do inseto
vetor e, nas pores terminais, diferenci-
am-se em tripomastigotas metacclicos,
que so formas infectivas. Durante o
repasto de sangue do inseto no hospe-
deiro vertebrado, ocorre a dilatao do
abdome do triatomneo e as formas
tripomastigotas metacclicas so libera-
das nas fezes e urina do inseto, pene-
trando no interior do hospedeiro verte-
brado atravs da pele (no local do
ferimento provocado pela picada) ou
atravs de mucosa. Uma vez na circula-
o, os tripomastigotas metacclicos
interiorizam-se em clulas, seja atravs
da f agoci t ose pr omovi da pel os
macrfagos, seja atravs da penetrao
ativa em clulas no-fagocticas, como
clulas musculares. No interior das clu-
las do mamfero, os tripomastigotas
metacclicos transformam-se nas formas
amastigotas. Estas so formas que apre-
sentam um flagelo diminuto e so capa-
zes de se replicar intracelularmente. Aps
vrios ciclos de replicao, quando a
clula do mamfero j est repleta de
amastigotas, ocorre a transformao des-
tas formas em tripomastigotas que so
liberados na corrente sangnea aps a
lise celular. Estas formas tripomastigotas
so capazes de infectar novas clulas ou
podem ser ingeridas, atravs da picada,
por triatomneos durante o repasto de
sangue, e o ciclo recomea.
A observao do ciclo evolutivo do
parasito mostra que atravs do sangue
do mamfero que o triatomneo torna-se
infectado e, portanto, transmissor da
doena de Chagas. Da mesma forma, o
homem pode i nf ect ar - se com o
tripanosoma atravs do contato com san-
gue contaminado. Assim, fundamental
o controle do sangue a ser transfundido
para evitarmos o contgio da doena de
Chagas por via transfusional. No h
dados precisos sobre o nmero de casos
de aquisio de doena de Chagas
transfusional, mas pode-se estimar o
risco se imaginarmos que ocorrem no
Brasil cerca de 6 milhes de transfuses
por ano, com cerca de 5% da populao
portadora do T.cruzi. Assim, o controle
em bancos de sangue, do sangue a ser
transfundido essencial, no s para
evitarmos novos contgios, mas tambm
para que o portador da doena possa ser
devidamente e corretamente informado.
Os mtodos de diagnstico podem
basear-se na deteco direta do parasito
ou na deteco da resposta do hospe-
deiro invaso do parasito. No primeiro
grupo, o mtodo mais comumente utili-
zado o de xenodiagnstico, ou seja,
coloca-se o paciente em contato com o
inseto vetor e aps algumas semanas
busca-se o parasito nas fezes e urina do
inseto. Alternativamente, a amostra de
sangue do paciente colocada em meio
de cultura apropriado e busca-se, aps
algum tempo, a deteco do parasito;
est a t cni ca denomi nada de
hemocultura. Estas tcnicas, embora no
deixem dvidas quando se apresentam
positivas, alm de demoradas, originam
muitos resultados falso-negativos, sem
mencionarmos reaes alrgicas adver-
sas que alguns indivduos podem apre-
sentar picada do triatomneo. Mais
r ecent ement e, f or am descr i t as
metodologias que utilizam a tcnica de
PCR e que devero melhorar as tcnicas
de deteco direta do parasito.
O outro grupo de tcnicas de diag-
nstico baseia-se na deteco de uma
resposta imune do hospedeiro vertebra-
do ao parasito. So estas as tcnicas de
hemoaglutinao, fixao de comple-
mento, imunofluorescncia, western blot
e ELISA. Estas tcnicas permitem resulta-
dos de diagnstico em menor espao de
tempo e em alguns casos automao
(por exemplo, a tcnica de ELISA). Alm
disso, permitem a anlise de um grande
nmero de amostras simultaneamente, o
que vantajoso se imaginarmos a varre-
dura de um banco de sangue. Entretan-
to, elas tambm apresentam limitaes,
como veremos a seguir.
Quando se fala em diagnsti-
co, h dois parmetros importan-
t es: a sensi bi l i dade e a
especificidade do mtodo. A sensi-
bilidade determina a capacidade
de deteco de todos os pacientes
sor oposi t i vos, enquant o a
especificidade determina que s se
detecte os pacientes soropositivos
para a enfermidade investigada. O
mtodo ideal deve permitir valores
mxi mos par a est es doi s
parmetros. Em geral, utilizam-se
parasitos inteiros ou fraes dos mes-
mos como substrato para a deteco de
anticorpos reativos nas amostras de soro
investigadas. O resultado da utilizao
destas misturas complexas que perde-
se em especificidade devido s reaes
cruzadas que ocorrem entre a doena de
Chagas e outras molstias como, por
exemplo, leishmaniose, toxoplasmose,
malria, sfilis ou ainda certas doenas
auto-imunes, resultando em diagnsti-
cos falso-positivos. O ideal seria a utili-
zao de antgenos puros especficos ao
T.cruzi, o que at pouco tempo atrs era
limitante em funo do custo de produ-
o.
Com o advento das tcnicas de DNA
recombinante, tornou-se possvel a ex-
presso e produo em bactrias, ou em
outro microrganismo conveniente, de
protenas heterlogas. O procedimento
bsico consiste em introduzirmos em
bactrias o material gentico (DNA) de
outro organismo de tal forma que as
bactrias agora "transformadas" proces-
saro este DNA como seu prprio mate-
rial gentico. Assim, a partir deste DNA
exgeno introduzido nas bactrias, as
mesmas pr oduzi r o " pr ot e nas
recombinantes". Atravs de manipula-
es adequadas, bactrias foram trans-
formadas com o material gentico do
T.cruzi, sendo gerada uma biblioteca de
genes do parasito em bactria, onde
temos clones de bactrias expressando
diferentes genes do parasito causador da
doena de Chagas. Com o intuito de
detectarmos clones de bactrias que es-
tavam expressando antgenos parasitri-
os com valor no diagnstico, a biblioteca
foi varrida, atravs do uso de tcnicas
imunolgicas apropriadas, com soros de
pacientes portadores da doena de Cha-
gas, de tal forma que foram detectados
diversos clones de bactria que estavam
produzindo protenas do T.cruzi que
reagem (so reconhecidos) por soro de
paciente chagsico. Estes clones foram
posteriormente analisados individualmen-
te frente a sua reatividade com soros
negativos e positivos para a doena de
Chagas. Desta forma, chegamos ao isola-
mento de dois clones de bactria que
estavam expressando protenas de T.cruzi
com elevado valor preditivo de diagns-
tico. O estudo posterior destes genes
mostrou que ambos apresentavam uma
estrutura onde havia a repetio de um
mesmo motivo reconhecido por anticorpo
(epitopo), sendo que um dos antgenos
apresentava uma localizao difusa no
citoplasma enquanto o outro era flagelar.
Em funo de sua estrutura em epitopos
repetitivos e sua localizao, estes
antgenos foram denominados de CRA
("cytoplasmic repetitive antigen" ou
antgeno citoplasmtico repetitivo) e FRA
("flagellar repetitive antigen" ou antgeno
flagelar repetitivo).
A associao do uso de antgenos
recombinantes com a metodologia de
ELISA permitiu o desenvolvimento de
um teste altamente especfico para o
diagnstico sorolgico da doena de
Chagas. De fato, em um estudo coorde-
nado pela Organizao Mundial da Sa-
de (OMS), foram avaliados diferentes
antgenos recombinantes com relao a
sua sensibilidade e especificidade para o
diagnstico da doena de Chagas, sendo
comprovada a excelncia do teste
CRA+FRA. Uma das grandes vantagens
do uso de antgenos definidos o au-
mento da especificidade do teste diag-
nstico, pois elimina-se o problema das
reaes cruzadas com outras doenas,
que pode ocorrer quando se usa extratos
totais ou semipurificados do parasito. No
caso da sorologia chagsica convencio-
nal, so muito freqentes as reaes
cruzadas com pacientes portadores dos
diferentes tipos de leishmanioses (por
exemplo, calazar), com pacientes apre-
sentando parasitoses mltiplas, ou ainda
pacientes portadores de doenas auto-
imunes. Assim, a mistura de antgenos
CRA+FRA capaz de reconhecer o uni-
verso de soros portadores da doena de
Chagas e no reagir com soros de paci-
entes portadores de outras doenas pa-
rasitrias ou auto-imunes.
Quando se fala em produo de kit
para diagnstico, h inmeras vantagens
no uso de um conjunto que utiliza
ant genos recombi nant es. Produzi r
antgenos (recombinantes) a partir de
uma bactria tem um custo muito menor
do que produzi-los e purific-los
atravs do crescimento do parasi-
to. Somando-se a isto, enquanto a
bactria recombinante em princ-
pio incua para o homem, o para-
sito infectivo e inmeros so os
relatos de infeco acidental em
laboratrio. Assim, em termos de
custos e riscos extremamente
vantaj oso o uso de antgenos
recombinantes para o diagnstico
sorolgico da doena de Chagas.
Um aspecto que tambm me-
rece ser destacado trata do avano
tecnolgico representado pelo de-
senvolvimento do trabalho utilizando
antgenos recombinantes para o diag-
nstico da doena de Chagas, j que a
metodologia estabelecida e os conheci-
mentos adquiridos podem ser utilizados
para a melhoria dos reagentes para diag-
nstico de outras doenas parasitrias
ou virais que acometem nossa popula-
o. De fato, de mais em mais a orienta-
o do mercado dirigida para a produ-
o de reagentes de diagnstico por
tcnicas de DNA recombinante, seja pela
especificidade conferida pelos mesmos,
seja pelo menor custo e maior segurana
de produo.
O teste de diagnstico utilizando os
antgenos recombinantes CRA+FRA est
atualmente em vias de produo, e sua
utilizao em bancos de sangue dever
reduzir consideravelmente (se no abo-
lir totalmente) o risco de aquisio da
doena de Chagas por via transfusional.
Finalmente, um ltimo aspecto a ser
considerado que o trabalho que resul-
tou no desenvolvimento deste produto,
de suma importncia para a realidade da
sade pblica do Brasil, foi inteiramente
desenvolvido no pas. Espera-se que o
apoio do governo s instituies de pes-
quisa e ensino superior e o interesse do
setor produtivo privado atividade de
pesquisa possam reverter o quadro atual
de parcos investimentos em cincia e
tecnologia no pas. Afinal, inconceb-
vel o desenvolvimento nacional se no
houver investimento em reas estratgi-
cas, como o caso da biotecnologia.
UPOV
O Brasil e a Conveno Internacional para a Proteo das Obtenes Vegetais (UPOV)
Maria Jos Amstaden Sampaio
Pesquisadora da Embrapa
Desde que assinou o Acordo
TRIPs (Trade Related Intellectual
Property), decorrncia de acordo entre
a OMPI (Organizao Mundial da Pro-
priedade Intelectual) e a OMC (Organi-
zao Mundial de Comrcio), e que
entrou em vigor em janeiro de 1995, o
Brasil vem se esmerando em preparar
e aprovar legislaes que concernem a
propriedade intelectual, seja de inven-
es, modelos de utilidade, desenhos
industriais, marcas, direito autoral e
demais formas de criao do intelecto
humano.
A nova Lei de Propriedade Indus-
trial n 9.279 foi sancionada em maio
de 1996, e entrou em vigor (em sua
plenitude) doze meses mais tarde. De
aplicao para a agricultura, a lei trou-
xe discusso a possibilidade de se
patentear genes modificados atravs
de processo inventivo e microrganis-
mos transgnicos, que por definio
para efeitos da lei passaram a ser
aqueles que expressam caractersticas
normalmente no-alcanveis na na-
tureza, mas somente pela interveno
humana direta em sua composio
gent i ca. Por m a l ei vet a o
patenteamento de plantas e animais.
Tendo assim decidido no paten-
tear plantas, o Brasil ainda precisava
cumprir o disposto no art. 27 do TRIPs,
que demanda que os pases protejam
cultivares ou variedades de plantas
atravs de legislao sui generis.
Avanando nessa linha, a Lei de
Proteo de Cultivares n 9.466 foi
sancionada em abril de 1997, tendo
sido seu Decreto regulamentador n
2.306, que contempla os descritores
das primeiras oito espcies passveis
de proteo no Brasil, publicado em
novembro de 1997. O arcabouo geral
da lei segue o modelo aprovado pela
Conveno Internacional para Prote-
o das Obtenes Vegetais (UPOV),
na sua verso 78, sendo que a filiao
do Brasil a essa conveno foi sem
dvida uma das justificativas mais de-
batidas no Congresso Nacional duran-
te as discusses do projeto de lei.
Na Amrica do Sul, todos os demais
pases j so membros da UPOV. A razo
mais simples para esse fato que, no
mundo globalizado de hoje, a existncia
de uma instituio como a UPOV, que
promove a proteo dos direitos dos
obtentores de novas variedades e a
harmonizao das regras internacionais
para que os pases participantes possam
proteger suas variedades alm de suas
fronteiras, com a reciprocidade de regras
bem detalhadas e conhecidas, traz uma
vantagem muito grande aos pases parti-
cipantes: pertencer UPOV significa
participar de um grupo em que os pa-
ses-membros concordaram previamente
em conceder direitos exclusivos de ex-
plorao aos obtentores em bases inter-
nacionalmente harmonizadas e em nvel
internacional.
O Brasil j possui quase todos os
documentos necessrios para submeter
UPOV seu pedido de adeso. A Lei de
Proteo de Cultivares foi aprovada pelo
Congr esso Naci onal , o decr et o
regulamentador foi recentemente sanci-
onado pelo presidente da Repblica (ver
anexos ao final deste nmero), os
descritores das primeiras oito espcies
que sero protegidas tambm foram
publicados como anexos ao decreto e a
estrutura formal do Servio Nacional de
Proteo de Cultivares (SNPC) foi apro-
vada pelo MARE e publicada no DOU.
Todos esses documentos sero encami-
nhados UPOV assim que o Congresso
Nacional aprove o pedido de adeso,
encaminhado em outubro ltimo pelo
Ministrio das Relaes Exteriores, per-
mitindo ao Executivo pagar as taxas
necessrias. Tambm necessrio ainda
que o Ministrio da Agricultura e do
Abastecimento publique os formulrios
para depsito dos pedidos de proteo e
faa a nomeao das pessoas que ocu-
paro os cargos no SNPC. Espera-se que
o processo possa ser completado ainda
em 1997.
Alm de outras vantagens, a adeso
do Br asi l UPOV per mi t i r aos
melhoristas brasileiros reciprocamente
proteger suas cultivares nos pases vizi-
nhos do hemisfrio e incrementar as
vendas de sementes daquelas cultivares
que possam ser diretamente utilizadas
na agricultura daqueles pases. Essa
uma demanda antiga do setor que inves-
te na criao de variedades e na multipli-
cao de sementes, pois at agora, quan-
do uma variedade passa as fronteiras do
Brasil, pode ser livremente multiplicada
e comercializada, sem qualquer retorno
para o melhorista ou para a instituio
brasileira pblica ou privada que finan-
ciou sua criao.
Embora seguindo os parmetros
principais da verso 78 da UPOV, a lei
brasileira j incorpora a proteo s
variedades essencialmente derivadas,
conceito novo que apareceu na verso
91 para responder s mudanas nos
conceitos de melhoramento trazidas pela
biotecnologia. Incorpora ainda como
exceo ao direito do melhorista o direi-
to dos pequenos produtores rurais de
multiplicar para troca ou doao a ou-
tros pequenos produtores sementes de
cultivares protegidas, alm de um captu-
lo sobre licena compulsria. Na anlise
extra-oficial do texto da lei feita pela
diretoria da UPOV, tais modificaes
foram aceitas. Resta agora saber se os
demais pases-membros aprovaro a
petio do Brasil quando o Ministrio
das Relaes Exteriores completar o pro-
tocolo e encaminhar a documentao
necessria.
A importao de
OGM
FISCALIZAO E MONITORAMENTO DO MINISTRIO DA AGRICULTURA E DO ABASTECIMENTO
Entrevista concedida Lucas Tadeu Ferreira
A Lei de Biossegurana estabelece que
a pesquisa, a produo, a importao, o
trnsito e a comercializao de organismos
geneticamente modificados, tambm co-
nhecidos como OGMs, dependem de auto-
rizao do Poder Pblico. da competn-
cia do Ministrio da Agricultura e do Abas-
tecimento - MA, atravs da Diviso de
Controle do Trnsito e Quarentena Vegetal,
fiscalizar e monitorar todas as atividades e
projetos relacionados a OGMs e seus deri-
vados.
Para desempenhar essa importante mis-
so, o MA, de acordo com a lei, tem que
seguir as decises da Comisso Tcnica
Nacional de Biossegurana - CTNBio, do
Ministrio da Cincia e Tecnologia - MCT,
que o rgo decisrio do governo quanto
produo e uso de OGMs no Brasil. O MA
tem quatro representantes tcnicos nessa
comisso: dois da rea animal e dois da
rea vegetal, sendo dois titulares e dois
suplentes.
Para falar das atribuies da Diviso de
Controle do Trnsito e Quarentena Vegetal
- DTQ, do Ministrio da Agricultura, em
Braslia, principalmente da importao de
OGMs, e outros assuntos correlacionados,
o engenheiro agrnomo Paccelli M. Zahler,
que chefia a diviso desde 1996, concedeu
esta entrevista a BIOTECNOLOGIA Cincia
& Desenvolvimento.
Paccelli formou-se em 1981 pelas Fa-
culdades Unidas de Bag, hoje Universida-
de da Regio da Campanha. Concluiu ain-
da o curso de mestrado em ecologia na
Universidade de Braslia - UnB, em 1986,
onde foi professor de fisiologia vegetal no
perodo de 1987 a 1989. Em Bag, Paccelli
foi ainda professor de economia e adminis-
trao rural, em 1982.
Ingressou no MA, por concurso presta-
do em 1984, onde j trabalhou como fiscal
agropecurio no Aeroporto Internacional
de Braslia e no Setor de Encomendas
Internacionais da Empresa Brasileira de
Correios e Telgrafos; e foi chefe do Servi-
o de Sanidade Vegetal da Delegacia Fede-
ral de Agricultura no Distrito Federal, de
1989 a 1995.
BC&D - A Lei n 8.974, de 5/1/97, conhe-
cida como Lei de Biossegurana, estabe-
lece uma srie de normas e procedimen-
tos que devem ser rigorosamente cum-
pridos para o desenvolvimento, impor-
tao, uso e comercializao de organis-
mos geneticamente modificados - OGMs.
Quais so as obrigaes do Ministrio da
Agricultura em relao a essa lei?
Paccelli - De acordo com essa lei, compete
ao MA realizar a fiscalizao e o monitora-
mento de todas as atividades relacionadas
a projetos de desenvolvimento de organis-
mos geneticamente modificados, bem como
a emisso de autorizao para a entrada no
pas desses produtos e seus derivados, no
mbito de competncia do ministrio. Con-
tudo, todos os pedidos de importao que
chegam ao MA tm que ser submetidos
previamente a parecer da Comisso Tcni-
ca Nacional de Biossegurana - CTNBio, do
Ministrio da Cincia e Tecnologia, que tem
competncia legal para pronunciar-se tec-
nicamente sobre a importao, o desenvol-
vimento e o uso de OGMs no Brasil. Com
base nesse parecer que ns autorizamos
a entrada no pas, atravs das Delegacias
Federais de Agricultura nos estados. Os
pedidos de importao so feitos direta-
mente s representaes estaduais do MA
- Delegacias Federais de Agricultura - DFA's
-, onde so devidamente instrudos sob a
forma de processos, e enviados para a
Diviso de Controle do Trnsito e Quaren-
tena Vegetal - DTQ, a quem compete fazer
com que o trmite siga a Lei de Biossegu-
rana.
BC&D - At a presente data, quantas e
quais permisses de importao de pro-
dutos transgnicos foram emitidas pelo
DTQ do Ministrio da Agricultura?
Paccelli - At agora, liberamos por volta de
25 pedidos de importao de produtos
transgnicos e estamos analisando vrios
outros, que ainda esto em fase de tramita-
o. Os principais produtos liberados fo-
ram: milho (Bt), algodo (Bt), soja, milho,
arroz com resistncia a herbicida; batata e
tabaco resistentes a vrus.
BC&D - O MA j constatou a entrada ilegal
no Brasil de algum produto transgnico?
Em caso positivo, quais so as providn-
cias adotadas e que punies sofre o
infrator?
Paccelli - At o presente momento, a DTQ
no constatou nenhuma entrada ilegal de
produtos geneticamente modificados no
Brasil. Entretanto, se isso vier a acontecer,
a orientao que damos aos fiscais e que
apreendam o material e comuniquem o
fato imediatamente DTQ, a qual solicitar
uma orientao CTNBio. Neste caso, a
CTNBio, depois de avaliar a gravidade da
infrao, vai se pronunciar a respeito e,
provavelmente, solicitar Justia a aplica-
o das penalidades previstas na Lei de
Biossegurana. Dependendo da infrao,
podero ser aplicadas multas, ou mesmo a
deteno do infrator, com penas que vari-
am de trs meses a 20 anos de priso.
BC&D - Quais so os procedimentos tc-
nicos adotados pela DTQ do MA para
identificar se um produto genetica-
mente modificado ou no?
Paccelli - Ainda no estamos aparelhados
tecnicamente para identificar se um mate-
rial transgnico ou no. Ns dependemos
de uma declarao do exportador, de que
o produto geneticamente modificado.
Neste caso, ns temos condies de em-
bargar a entrada do material chegada,
caso ele no tenha parecer conclusivo
favorvel da CTNBio. Se persistir a dvida,
podemos examin-lo e emitir um Termo de
Fiel Depositrio para a empresa. O prximo
passo verificar se ela tem permisso para
trazer esse material. Mas at o presente
momento no aconteceu nenhuma tentati-
va de importao ilegal. Todas as empresas
tm agido com a mxima correo, de
acordo com a legislao vigente, e isso tem
permitido que mantenhamos um controle
eficaz da entrada de OGMs no pas.
BC&D - O MA dispe de pessoal tcnico
qualificado e laboratrios adequados
para realizar exames laboratoriais?
Paccelli - No. No momento, estamos de-
pendendo da infra-estrutura de laboratri-
os e dos pesquisadores da Embrapa para
realizar os exames laboratoriais. Contudo,
dependendo da necessidade, ns podere-
mos solicitar CTNBio que indique labora-
trios credenciados (universidades, institu-
tos de pesquisa), desde que eles possuam
o Certificado de Qualidade em Biossegu-
rana - CQB, previsto na lei, para proceder
s anlises.
BC&D - Existem grupos organizados no
Brasil e no exterior que so totalmente
contrrios ao desenvolvimento e co-
mercializao de OGMs. Como o senhor
v essa questo do ponto de vista do MA?
Paccelli - A nossa preocupao com rela-
o OGMs no Brasil eminentemente
tcnica. A DTQ uma diviso especializa-
da do MA, que tem por objetivo principal
evitar a entrada de pragas quarentenrias
no pas e que possam vir juntas com os
produtos importados. E como ns temos
agora, pela Lei de Biossegurana, a delega-
o de competncia para fiscalizar a entra-
da de material transgnico, ns estamos
procurando desempenhar corretamente
essa funo legal. Essa a nossa misso
tcnica.
BC&D - Sendo o Brasil um pas de dimen-
ses continentais, como exercer um con-
trole eficaz para evitar a entrada de OGMs
ilegais em nossas fronteiras?
Paccelli - Eu reconheo que essa misso,
devido ao tamanho geogrfico do Brasil,
muito difcil. Mas at o momento, como
esses materiais tm sido trazidos por gran-
des empresas, em geral multinacionais, e
considerando que os OGMs envolvem
patentes, isso de certa forma tem facilitado
o controle e a fiscalizao, j que as
empresas s exportam esses materiais para
as suas afiliadas e correspondentes no
Brasil. bvio que, se uma empresa detec-
tar que est havendo entrada ilegal, sendo
ela a detentora ou interessada na patente,
ela mesma ir apresentar uma denncia
formal, e ns vamos agir de acordo com a
lei.
BC&D - Como ser feito o controle e o
monitoramento de produtos alimentci-
os tendo como derivados OGMs?
Paccelli - Produtos alimentcios, tendo como
ingredientes derivados de OGMs, de acor-
do com a lei, so da competncia do
Ministrio da Sade, pois envolvem ques-
tes ligadas sade humana e segurana
alimentar.
BC&D - Foi criado no mbito do Minist-
rio da Agricultura um Ncleo de
Biossegurana. Ele composto de quais
tcnicos e pesquisadores, e se nele tm
acento representantes leigos da socieda-
de civil?
Paccelli - O Ncleo de Biossegurana um
frum estritamente tcnico que conta com
representantes do Centro Nacional de Pes-
quisa de Recursos Genticos e Biotecnologia
- Cenargen, da Embrapa, e de tcnicos dos
demais departamentos da Secretaria de
Defesa Agropecuria do MA. A idia do
ncleo a de promover um frum perma-
nente de debates entre os tcnicos das
empresas e instituies vinculadas ao MA.
Inclusive a assessoria internacional do mi-
nistrio j manifestou o desejo de participar
desse ncleo. E ser muito bem vinda! Ou
seja, como se fosse uma Comisso Inter-
na de Biossegurana do MA. Os represen-
tantes leigos da sociedade civil j fazem
parte da Comisso Tcnica Nacional de
Biossegurana.
BC&D - O senhor acha necessrio o em-
prego de selo de rotulagem de identifica-
o de produtos transgnicos, que iden-
tifiquem a origem e a procedncia dos
insumos?
Paccelli - Pri mei ramente, temos um
posicionamento tcnico que o de seguir
as orientaes da Organizao Mundial do
Comrcio - OMC e as recomendaes da
Comisso Codex Alimentarius da FAO. Se
ambos conclurem que tem que haver uma
harmonizao nesse sentido, no h pro-
blema nenhum, teremos que proceder
rotulagem dos OGMs. Agora, no concor-
do com os rtulos que discriminem produ-
tos substancialmente equivalentes e que
vo contra as determinaes da OMC e do
Codex Alimentarius.
BC&D - O MA pretende desenvolver cam-
panhas para divulgar todos os procedi-
mentos legais relativos ao consumo, pro-
duo e liberao de produtos genetica-
mente modificados no Brasil, j que exis-
te total desconhecimento da populao
em relao a esses temas?
Paccelli - Eu penso que isso funo da
CTNBio e tambm das prprias empresas
interessadas nesses produtos. A comisso
tem inclusive como meta esclarecer a opi-
nio pblica sobre os procedimentos legais
quanto ao desenvolvimento e o consumo
de produtos transgnicos. Para isso, ela tem
em seu quadro representantes da socieda-
de civil. Em relao DTQ, do MA, at
agora no pensamos em desenvolver ne-
nhuma atividade nesse sentido. Contudo,
como a DTQ um rgo de fiscalizao,
pode ser que no futuro tenhamos que
divulgar as orientaes tcnicas, normas,
procedimentos, implicaes legais e a pr-
pria necessidade da existncia de Certifica-
dos de Qualidade em Biossegurana para
o desenvolvimento e a comercializao de
OGMs, previstos na legislao, alm dos
aspectos fitossanitrios que tambm nos
interessam divulgar para a populao.
BC&D - O senhor tem conhecimento de
que produtos transgnicos consumidos
em outros pases causaram algum efeito
colateral na populao?
Paccelli - No. Todos os trabalhos tcnicos
que j li a respeito no trazem nenhuma
referncia a qualquer problema causado
sade da populao. Ao contrrio, toda a
literatura existente sobre a soja transgnica
mostra que ela substancialmente equiva-
lente soja normal.
BC&D - A que o senhor atribui ento esse
excesso de zelo em relao aos produtos
vegetais geneticamente modificados, j
que, aparentemente, eles no tm tanta
diferena dos produtos normais obtidos
pela gentica clssica?
Paccelli - Eu penso que, como se trata de
produtos novos, desenvolvidos em regies
diferentes de nosso pas, pode ser que no
Brasil, onde o clima tropical, esses produ-
tos venham a desenvolver caractersticas
diferentes e que causem alergias ou que
potencialmente interajam com plantas na-
tivas. Dessa forma, preciso todo esse zelo
para evitar possveis danos ao meio ambi-
ente e principalmente sade da popula-
o. Esses cuidados podem parecer exces-
sivos no momento, mas do ponto de vista
tcnico so extremamente necessrios e
indispensveis, alm, claro, dos aspectos
legais que tm que ser cumpridos pelo MA.
BC&D - O Brasil possui a maior
biodiversidade do planeta e centro de
origem de vrias espcies vegetais im-
portantes. Que procedimentos tcnicos
de controle e fiscalizao o MA vai adotar
para evitar cruzamentos de OGMs com
parentes silvestres vegetais prximos?
Paccelli - Este assunto pela lei no da
competncia do MA, e sim do Ministrio do
Meio Ambiente. De acordo com a Lei de
Bi ossegurana, so trs os rgos
fiscalizadores de OGMs: Ministrio da Sa-
de, Ministrio da Agricultura e Ministrio do
Meio Ambiente. Da parte quarentenria e
de importao de OGMs, cuida o MA; da
interao desse material com o meio ambi-
ente, o Ministrio do Meio Ambiente; e da
parte sobre efeitos relacionados com a
sade e com a segurana alimentar, o
Ministrio da Sade.
BC&D - Vrios pases, inclusive o Brasil,
esto pesquisando inmeros produtos
vegetais resistentes a herbicidas. O se-
nhor acha que esses OGMs vo contri-
buir para o aumento do uso
indiscriminado de agrotxicos nas la-
vouras brasileiras?
Paccelli - No. No meu ponto de vista, vai
ser exatamente o contrrio. O fato de a
gente vir a dispor de plantas resistentes a
herbicidas vai permitir um aperfeioamen-
to das tcnicas de manejo integrado de
pragas. Com isso, todas as aplicaes de
herbicidas que eram feitas antes do plantio
podero ser feitas durante o cultivo, nas
pocas mais adequadas; e, dependendo da
terra ou da forma como a cultura se desen-
volve, se ela sombreia bem o solo, e a erva
daninha no se prolifera, este fato pode at
abolir a necessidade do uso do herbicida.
Contudo, eu acredito que essa nova
tecnologia vai permitir uma melhoria no
manejo integrado de pragas com a reduo
substancial do uso de herbicidas. Da mes-
ma forma, o cultivo com plantas contendo
gene do Bt vai permitir um aperfeioamen-
to das tcnicas do manejo integrado de
pragas e uma conseqente reduo do uso
de agrotxicos.
desenvolvimento pionei-
ro da vacina contra a
varola feito por Jenner
h quase dois sculos
marcou, com grande su-
cesso, o incio de uma
nova era para a medici-
na moderna. Desde en-
to, a imunoprofilaxia, ou
vacinao, tornou-se a medida mais efi-
ciente e menos dispendiosa de evitar
doenas infecciosas. A erradicao da
varola, o sucesso do programa de vaci-
nao contra a poliomielite e a reduo
da morbidez e mortalidade causadas por
doenas infecciosas que ocorrem na
infncia so provas contundentes da
importncia da vacinao. Contudo, re-
centemente, a Organizao Mundial da
Sade (OMS), com base em dados
epidemiolgicos, passou a alertar os
governos para o ressurgimento de vrias
doenas infecciosas e para os proble-
mas de sade pblica delas advindos,
principalmente nos pases em desenvol-
vimento. Segundo a OMS, em todo o
mundo nascem por ano em torno de 130
milhes de crianas, sendo que cerca de
12 milhes morrem com idades entre 0 e
14 anos. Aproximadamente 9 milhes
destas mortes so causadas por doenas
infecciosas (dengue, hepatite, meningi-
te, malria, esquistossomose e outras),
sendo 3 milhes contra as quais j exis-
tem vacinas de uso rotineiro (tuberculo-
se, difteria, coqueluche, sarampo e ou-
tras). O desenvolvimento de novas vaci-
nas que evitem, num futuro prximo, o
Clio Lopes Silva
Professor titular e chefe do Departamento de Parasitologia, Microbiologia e Imunologia
- Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto, Universidade de So Paulo
O IMPACTO SOBRE O CONTROLE DAS DOENAS INFECCIOSAS
aumento descontrolado destas e de ou-
tras doenas infecciosas de fundamen-
tal importncia para a humanidade.
As vacinas tm como objetivo fun-
damental a imunizao prvia do indiv-
duo, de modo que ele passe a responder
rpida e eficientemente quando em con-
tato com o agente infeccioso, evitando
assim a ocorrncia ou desenvolvimento
da doena. No decorrer dos tempos,
diversas estratgias foram utilizadas para
o desenvolvimento de diferentes vaci-
nas. As vacinas de primeira gerao, que
se reportam principalmente ao comeo
deste sculo, foram produzidas com
microrganismos vivos e atenuados (como
o caso da vacina BCG contra a tuber-
culose) ou mortos e inativados (como a
vacina contra Bordetella pertussis). Con-
tudo a eficcia dessas vacinas ainda
muito questionada.
Na ltima dcada, os avanos na
tecnologia de desenvolvimento de vaci-
nas permitiu a introduo de novas es-
tratgias para a obteno e produo de
antgenos, assim como foram otimizadas
novas maneiras de se administrar e apre-
sentar esses antgenos para as clulas do
sistema imune. Estas estratgias abriram
caminho para inovaes, particularmen-
te no contexto do desenvolvimento de
vaci nas mai s segur as, ef i cazes e
polivalentes. Entre estas esto as de
subunidades, consideradas de segunda
gerao, constitudas de antgenos puri-
ficados e provenientes de fontes natu-
rais, sintticas ou mesmo recombinantes.
Mais recentemente, surgiram as vacinas
gnicas ou de terceira gerao, onde os
genes ou fragmentos de genes, que co-
di f i cam ant genos pot enci al ment e
i muni zant es, so car r eados por
plasmdeos de DNA.
Atualmente, o isolamento de genes
uma tcnica dominada pela cincia
devido ao grande desenvolvimento da
biologia molecular. Os genes isolados
so ligados a outros fragmentos de DNA
denominados plasmdeos, que permitem
a replicao do gene em bactrias ou
clulas eucariticas. Os plasmdeos usa-
dos em vacinas gnicas possuem se-
qncias de DNA necessrias para sele-
o e replicao em bactrias; promoto-
res especiais para processos de transcri-
o e traduo; genes que conferem
resistncia a antibiticos; e seqncias
especficas que permitem a expresso
gni ca em cl ul as procari t i cas e
eucariticas. Aps a clonagem do gene
no plasmdeo, eles so introduzidos em
bactrias hospedeiras, geralmente uma
Escherichia coli, por um processo deno-
minado de transformao bacteriana, com
a finalidade de se produzir plasmdeos
em larga escala e ter quantidade sufici-
ente de DNA para a vacinao propria-
mente dita.
A primeira demonstrao de que a
injeo intramuscular de um gene pode-
ria ser empregada como vacina gnica
foi feita em 1993, por pesquisadores da
indstria farmacutica Merck. Eles de-
monstraram que a injeo intramuscular
do gene que codifica uma nucleoprotena
do vrus influenza poderia ser utilizada
para imunizao de camundongos con-
tra essa virose. Esse fato causou enorme
repercusso nos meios cientficos e
tecnolgicos envolvidos no desenvolvi-
mento de novas vacinas contra agentes
infecciosos. Desde ento foram desen-
volvidas vacinas gnicas contra uma s-
rie de agentes patognicos em modelos
animais. Em 1994, por ocasio do pri-
meiro encontro sobre vacinas, patroci-
nado pela OMS, tivemos a oportunidade
de apresentar nossos resultados sobre
vacinao contra a tuberculose empre-
gando o gene que codifica o antgeno
protico hsp65 micobacteriano. Algu-
mas dessas novas vacinas, principal-
mente aquelas contra AIDS e influenza,
apresentaram excelente resposta em
primatas, e j se encontram em fase de
testes pr-clnicos em humanos.
A vacinao com DNA pode ser
feita em vrias espcies animais, por
diversas vias e esquemas. Alm da inje-
o intramuscular, que a via mais
utilizada, as vacinas gnicas tambm
podem ser admi ni st radas por vi a
intranasal na forma de aerosol, por via
oral ou por via intradrmica atravs do
bombardeamento de micropartculas de
ouro cobertas com o material gentico.
Aps imunizao por via intramuscular,
o material gentico incorporado s
cl ul as muscul ar es ( mi ci t os) ou
mononucleares como os macrfagos ou
clulas dendrticas que so clulas apre-
sentadoras de antgenos para o sistema
imune. As partculas de DNA que forem
endocitadas pelas clulas no stio da
inoculao permanecem no ncleo ce-
lular sem ocorrer incorporao ao
genoma da clula hospedeira. As vias
metablicas da clula hospedeira so
utilizadas para os processos de transcri-
o do DNA inoculado, e em seguida o
RNA mensageiro traduzido para que
ocorra a sntese do antgeno protico
relacionado ao agente infeccioso. Este
processo ocorre de forma muito seme-
lhante quele observado nas replicaes
vi r ai s. Os ant genos expr essados
endogenamente so processados pelas
clulas apresentadoras de antgenos, e
os fragmentos resultantes complexados
com molculas de classe I que so
codificadas por genes do complexo de
histocompatibilidade. Em seguida, os
peptdeos resultantes da fragmentao
do antgeno so apresentados na super-
fcie celular para o reconhecimento e
ativao especfica de linfcitos T CD8
citotxicos. Alguns dos antgenos pro-
duzidos pelas clulas musculares so
secretados para o espao intercelular,
onde podem tanto estimular linfcitos B
a produzir anticorpos especficos, como
ser endocitados por outras clulas apre-
sentadoras de antgenos. No processo de
endocitose, os antgenos passam do com-
partimento extracelular para o interior
das clulas apresentadoras e, por este
motivo, so considerados antgenos
exgenos e assim processados em com-
partimentos celulares que so diferentes
daqueles realizados quando o antgeno
originado dentro da clula. Os frag-
mentos dos antgenos exgenos so
complexados com molculas de classe
II, codificadas por genes do complexo
de histocompatibilidade, e apresentados
na superfcie das clulas apresentadoras
para o reconhecimento e ativao de
linfcitos T CD4 auxiliares. As vacinas de
DNA so, portanto, capazes de induzir
ambos os tipos de imunidade protetora,
humoral e celular, com estimulao tan-
to de linfcitos T CD4 como de T CD8
citotxicos, sem o risco associado s
vacinas de organismos vivos.
As vacinas gnicas, alm da imuni-
dade humoral e celular especfica, ofe-
recem vantagens adicionais em relao
s vacinas clssicas. Nas vacinas gnicas,
a sntese dos antgenos endgenos ocor-
re com caractersticas estruturais muito
semelhantes molcula nativa sintetiza-
da pelo patgeno, criando epitopos
conf or maci onai s necessr i os par a
induo de uma resposta imune mais
efetiva. A imunidade adquirida persiste
por longo perodo de tempo devido
constante produo do antgeno dentro
da clula hospedeira e capacidade
destes estimularem linfcitos de mem-
ria imunolgica. No plasmdeo contendo
o gene do agente infeccioso pode-se
clonar outros genes, como, por exemplo,
os de componentes estimuladores da
resposta imune (IL-2, IL-12 e IFN-g) que
auxiliam no processo de reconhecimen-
to antignico entre as clulas apresenta-
doras de antgenos e os linfcitos.
Em termos econmicos, o custo de
produo das vacinas gnicas signifi-
cativamente menor do que o custo de
produo das vacinas recombinantes,
peptdeos sintticos e outras. Essa vaci-
na pode ser estocada como sedimento
seco e temperatura ambiente, sendo
que no momento da administrao
necessrio somente a adio de peque-
na quantidade de gua. Estas condies
trazem vantagens econmicas para o
estabelecimento de amplos programas
de imunizaes em regies de difcil
acesso.
VACINA DE DNA CONTRA A
TUBERCULOSE
A tuberculose volta a ser um dos
mais graves problemas de sade pblica
em todo o mundo, principalmente nos
pa ses subdesenvol vi dos. O
Mycobacterium tuberculosis, que o
agente etiolgico dessa doena, infecta
atualmente mais de um bilho de pesso-
as no mundo e responsvel pela morte
de aproximadamente trs milhes de
pessoas por ano. A preveno da tuber-
culose feita em diversas partes do
mundo pela utilizao da vacina BCG. A
eficcia dessa vacina varia de zero a 70%
entre as diferentes populaes do mun-
do submetidas ao teste. Assim, o alto
ndice de mortalidade dessa doena e a
baixa eficincia da vacina BCG justifi-
cam o desenvolvimento de uma nova
vacina.
Para o desenvolvimento de uma
vacina gnica contra a tuberculose, ns
introduzimos nos plasmdeos denomi-
nados pCDNA3 ou pHMG o gene de um
dos antgenos imunodominantes de mi-
cobactrias que a protena de estresse
hsp65. Efetivamente, ambos os promoto-
res dirigem a expresso de genes mico-
bacterianos em clulas de mamferos. Os
plasmdeos contendo o gene micobacte-
riano foram inoculados por via intra-
muscular em camundongos. Todos os
testes de vacinao foram comparados
com um grupo de animais inoculados
somente com BCG intradrmico. A pro-
duo de anticorpos especficos no soro
dos animais imunizados com o gene
hsp65 foi observada duas semanas aps
a terceira dose de DNA. A induo da
resposta imune celular foi detectada por
um teste especfico, que a medida da
capacidadeproliferativa dos linfcitos
presentes nos ndulos linfticos, quan-
do colocados na presena do antgeno
hsp65. Mediadores e reguladores da res-
posta imune, como as interleucinas, tam-
bm foram detectados no sobrenadante
de cultura, ou nos prprios linfcitos
dos animais imunizados, tanto por tcni-
cas de ELISA quanto RT-PCR. Nestes,
estava aumentada a liberao de IFN-g,
IL-2 e IL-12 (que so consideradas cito-
cinas estimulatrias da resposta imune
celular), mas no de IL-4, IL-10 e IL-13
(que so supressoras dessa resposta).
Portanto, o padro de resposta imunol-
gica induzida nos camundongos, pela
imunizao com o gene hsp65, foi con-
siderado do tipo Th1, o qual altamente
favorvel para a eliminao de agentes
infecciosos.
O procedimento utilizado em nos-
sos trabalhos para a imunizao dos
camundongos com o gene hsp65 foi
muito efetivo e protegeu os animais con-
tra posterior infeco com M.tuberculosis
de alta virulncia. A proteo conferida
pela vacina gnica foi bem maior que
aquela apresentada pela BCG. Desta for-
ma, fomos os primeiros a demonstrar
que a imunizao com um nico antgeno
de M.tuberculosis protege efetivamente
contra a tuberculose experimental. Com
base nestes dados, clonamos outros genes
micobacterianos e testamos as suas res-
pectivas atividades protetoras. Os genes
que codificam os antgenos hsp70 e
ESAT-6 tambm induziram proteo sig-
nificativa e similar quela mostrada por
hsp65. Por outro lado, imunizao com
genes que expressam as protenas deno-
minadas hsp10 ou 36 KDa no mostrou
atividade protetora contra infeco por
M.tuberculosis.
Os modelos desenvolvidos em nos-
sos trabalhos tambm permitiram identi-
ficar quais as caractersticas essenciais
das clulas que conferem proteo
i munol gi ca cont r a i nf eco por
M.tuberculosis. O estudo detalhado das
duas pri nci pai s subpopul aes de
linfcitos T mostrou que existem vrios
fatores relacionados com a proteo
contra o bacilo da tuberculose. Assim, os
linfcitos T CD8 estimulados pela vacina
gnica so preferencialmente do tipo
citotxicos, isto , tm a capacidade de
destruir clulas que albergam o bacilo da
tuberculose em seu interior, permitindo
a eliminao dos mesmos. Tanto os
linfcitos T CD8 como os T CD4 secretam
em altas concentraes as interleucinas
estimuladoras do sistema imune, como a
IL-2, IL-12 e IFN-g, as quais ajudam a
manter ativados vrios sistemas respon-
sveis por eliminao de microrganis-
mos da clula hospedeira. A transfern-
cia de linfcitos T CD8 de animais vaci-
nados para animais no-vacinados pro-
tege estes ltimos da infeco pelos
bacilos virulentos, mostrando que estas
clulas so fundamentais para os pro-
cessos de defesa. A maioria dos linfcitos
T CD4 e T CD8 especficos para o antgeno
usado na vacinao apresentava alta
expresso do marcador de superfcie
celular CD44hi, que uma molcula
presente nas clulas de memria. Estas
clulas, com seu respectivo marcador,
puderam ser detectadas por citometria
de fluxo mesmo 18 meses aps a imuni-
zao. Nossos resultados mostraram ain-
da que, quando a imunidade celular
desenvolvida num microambiente con-
tendo altos nveis de IL-4, como aquele
observado aps vacinao com BCG, as
cl ul as T perdem sua capaci dade
citotxica, produzem pouco IFN-g, e h
pouca diferenciao de clulas de me-
mria. Alm disso, estas clulas tornam-
se produtoras de citocinas do padro
Th2, que so supressoras da resposta
imune celular. Estes fatos poderiam ex-
plicar a baixa capacidade protetora da
BCG contra a tuberculose.
Os benefcios prticos e estratgi-
cos resultantes do desenvolvimento de
vacinas gnicas so inmeros, como
mencionado anteriormente, e absoluta-
mente desejveis no mbito da realidade
brasileira. O impacto sobre o controle
das doenas infecciosas que podem ser
prevenidas por imunizao gnica ser,
provavelmente, uma das aquisies mais
importantes advindas do domnio desta
nova tecnologia.
E
Hibridao Somtica em
PLANTAS
A IMPORTNCIA DAS ESPCIES SELVAGENS COMO FONTE DE GENES
Em meados deste sculo, a
produo por hectare de culturas
como o trigo, soja e arroz cresceu
cerca de 100% (tabela 1). Parte
destes incrementos se deve
melhoria das condies de cultivo, po-
rm o avano maior foi decorrente do
aprimoramento dos mtodos de seleo
que permitiram um melhor aproveita-
mento da variabilidade gentica presen-
te nestas espcies.
Por outro lado, a contribuio do
germoplasma selvagem para esses avan-
os foi pequena, embora caracteres do
tipo vigor e resistncia a doenas, adqui-
ridos de espcies no-domesticadas, te-
nham tido um grande impacto na produ-
o da cana-de-acar. Outras culturas,
como o algodo e particularmente o
tomate, provavelmente no estariam sen-
do cultivadas em to larga escala, no
fosse a introduo de genes oriundos de
espcies selvagens. A batata, por exem-
plo, est entre as primeiras culturas que
se beneficiaram do germoplasma exti-
co.
As estratgias que tm sido aplica-
das para expandir a variabilidade gen-
t i ca a par t i r da expl or ao do
germoplasma selvagem so a hibridao
sexual (interespecfica ou intergenrica)
e, recentemente, a engenharia gentica
( at r avs da t ecnol ogi a do DNA
recombinante e das metodologias de
transformao de plantas) e a hibridao
somtica.
A hibridao interespecfica tem sido
extensivamente utilizada, e o sucesso
deste mtodo depende das relaes
filogenticas entre as espcies envolvi-
das no cruzamento. Esta afinidade vai
determinar a fertilidade dos hbridos e
conseqentemente o seu potencial para
utilizao em programas de melhora-
mento gentico. Sucessivas geraes de
retrocruzamento com o parental cultiva-
do so conduzi das no sent i do de
introgredir a caracterstica selvagem no
parent al recorrent e e recuperar a
performance da espcie comercial. En-
tretanto, esse mtodo limitado em cer-
tas espcies por barreiras de incompati-
bilidade: os cruzamentos so incompat-
veis ou ocorre a formao do zigoto,
porm ele abortivo. Uma alternativa
usada para contornar esse problema
implica a exciso do embrio imaturo e
o seu posterior desenvolvimento in vitro.
Esse resgate tem facilitado, por exemplo,
a incorporao de genes exticos na
cultura da batata. As duas outras estrat-
gi as i ncl uem pr ocedi ment os
biotecnolgicos. A transformao gen-
tica de plantas tem sido vantajosa quan-
do se dispe das seqncias de DNA a
serem transferidas, isto , quando os
genes de interesse foram identificados e
clonados em um vetor, permitindo a
produo de plantas transgnicas. Entre-
tanto, ainda so poucos os genes que se
tm disponveis, e muitos deles, embora
j seqenci ados e mapeados,
correspondem a DNAs de tamanho gran-
de, o que dificulta a sua clonagem e
transferncia.
Por outro lado, avanos recentes
em pesquisa sobre cultura de tecidos
vegetais, especialmente sobre a regene-
rao de plantas a partir de protoplastos,
tm possibilitado a introgresso de genes
a partir da fuso de clulas somticas.
Como resultado dessas pesquisas, um
amplo espectro de hbridos com respeito
sua constituio nuclear tem sido pro-
duzido. A hibridao somtica oferece
tambm a oportunidade de se combinar
citoplasmas diferentes na mesma clula.
Essas combinaes no podem ser pro-
duzidas por hibridao sexual, pois o
citoplasma materno preferencialmente
herdado. Al m di sso, avanos na
tecnologia de fuso, incluindo-se a fu-
so assimtrica de protoplastos (o n-
cleo da espcie selvagem fragmentado
antes da fuso), tm contribudo para
uma aplicao mais imediata desta
tecnologia no melhoramento.
Isolamento e cultura de
protoplastos vegetais
Protoplastos so clulas desprovi-
das da parede celular. A remoo da
parede se faz mediante tratamento
enzimtico que, em geral, rene uma
mistura de enzimas capazes de degradar
individualmente a celulose, a pectina, a
hemicelulose ou outros polissacardeos
componentes da parede celular. Alguns
procedimentos so necessrios para se
obter protoplastos viveis e em grandes
quantidades (veja reviso de Fungaro &
Vieira, 1989).
A fonte utilizada para o isolamento
de protoplastos varivel e tem influn-
cia na sua obteno e tambm no pro-
cesso de regenerao da parede e na
freqncia das divises celulares que se
sucedem. Protoplastos podem ser isola-
dos de tecidos vegetais como o mesfilo
f ol i ar , de t eci do cot i l edonar ,
hipocotiledonar, de razes e tambm de
calos e suspenses celulares. A escolha
dessa fonte baseia-se na capacidade de
regenerao destes tecidos, em geral
avaliada em experimentos preliminares.
A condio fisiolgica da planta doado-
ra tambm importante. conveniente
manter uma coleo de plantas in vitro
como f ont e de t eci dos par a
protoplastizao.
Antes do isolamento, o tecido vege-
tal cortado em fatias e plasmolisado em
soluo salina. Esta
soluo, assim como
a mistura enzimtica,
deve ser preparada
cont endo um
e s t a b i l i z a d o r
osmt i co. Est e
estabilizador ( base
de acares, como o
manitol e a sacarose)
impede o rompimen-
t o da membr ana
plasmtica ou, inver-
samente, a sada ex-
cessiva de gua da
clula. Aps o trata-
mento enzimtico, a
mistura sofre lavagens
sucessivas na mesma
soluo salina, segui-
das de centrifugaes
brandas. Aps o iso-
lamento, procede-se
contagem e avalia-
o da viabilidade dos protoplastos usan-
do-se corantes vitais fluorescentes, como
o diacetato de fluorescena (veja Power
& Chapman, 1995).
O cultivo de protoplastos se faz em
meio de cultura rico em componentes
orgnicos e inorgnicos, suplementado
com fitorreguladores e concentraes
adequadas de polissacardeos que fun-
cionam como estabilizadores osmticos.
Este cultivo feito em placa de Petri,
diretamente em meio lquido ou embe-
be-se a mistura protoplastos-meio de
cultura em agarose ou outro agente
gelificante. As densidades de cultivo
devem ser definidas experimentalmente.
Protoplastos embebidos em agarose su-
portam densidades maiores, pois esto
imobilizados, o que no ocorre em meio
lquido, onde as clulas tendem a se
agregar, formando um precipitado. Cul-
turas em agarose tendem a se desenvol-
ver melhor e mais rapidamente.
Aps a regenerao da parede celu-
lar, que deve ocorrer nas primeiras 24h
de cultura, as clulas entram em diviso.
As primeiras divises so observadas em
freqncias que variam dependendo do
gentipo e da espcie que se est traba-
lhando. As condies de cultivo so
igualmente importantes. A osmolaridade
da cultura , ento, progressivamente
diminuda por adio ou substituio de
parte do meio lquido por um meio de
cultivo celular.
Na medida em que se sucedem as
divises celulares, pequenas colnias
vo se formando. Estas so originrias
de uma nica clula. A capacidade de
sustentar divises em cultura medida
por um parmetro chamado plating
efficiency (PE), que dado pela relao
entre o nmero de colnias formadas e
o nmero inicial de clulas que entraram
em diviso. A visualizao das culturas
feita ao microscpio tico invertido.
Regenerao de brotos
Geralmente, aps 28 dias em cultu-
ra, as microcolnias podem ser vistas a
olho nu. Nessa estapa, devem ser
transferidas para meio slido, onde da-
ro origem a calos. A composio desse
meio baseada em formulaes usuais
que incluem sais e vitaminas, alm de
uma fonte de C e de fitorreguladores,
principalmente auxinas. Em geral, a re-
generao de brotos ocorre posterior-
mente formao de calos, sob condi-
es de luz e em meio cuja composio
varia muito entre grupos de plantas, tais
como mono e dicotiledneas, gramneas
e leguminosas, e no h como generali-
z-la. Esse processo de regenerao pode
ocorrer pela via organognica ou por
embriognese somtica. Uma regenera-
o abundante de brotos desejada, o
que ir facilitar estudos posteriores ou a
aplicao do sistema em experimentos
de manipulao gentica de transforma-
o de protoplastos ou hibridao
somtica.
Fuso de protoplastos
A obteno de hbridos somticos
depende fundamentalmente de meca-
nismos eficientes que promovam a fuso
celular. Em plantas, a fuso pode ser
mediada por um agente qumico, como
o polietileno glicol (PEG) ou por cho-
ques de corrente eltrica (eletrofuso).
Na fuso mediada por PEG, protoplastos
de espcies diferentes so colocados em
contato, durante alguns minutos, na pre-
sena deste agente que preparado em
uma soluo rica em ons Ca. Em segui-
da, procede-se lavagem
do PEG, que txico
clula. A partir da, para o
cultivo dos produtos de
fuso, adotam-se os pro-
cedimentos usuais da cul-
tura de protoplastos.
A fuso eltrica ocor-
re em duas etapas. Pri-
meiramente, as clulas
so submetidas a uma
corrente do tipo alterna-
da, gerando um campo
eltrico de alta fora e
f azendo com que os
protoplastos se polarizem,
dirigindo-se para o plo
de maior fora (fenme-
no conheci do como
dieletroforese). A proxi-
midade das membranas
facilita a fuso que
provocada logo em se-
guida aglutinao por
choques de corrente contnua. Estes cho-
ques provocam a abertura reversvel de
poros na membrana plasmtica. Os
rearranjos das membranas eletroporadas
provocam a fuso de clulas adjacentes.
A fuso no um evento dirigido.
Ela pode ocorrer entre protoplastos de
uma mesma espci e, f or mando
homocrios, ou entre espcies diferen-
tes, dando origem aos heterocrios. Tc-
nicas sofisticadas de micromanipulao
ou de citometria de fluxo podem ser
adotadas para a seleo de heterocrios.
Para isso, necessrio utilizar marcadores
morfolgicos que permitam a identifica-
o dos protoplastos oriundos das esp-
cies envolvidas na fuso. Protoplastos
verdes podem ser obtidos a partir de
tecidos clorofilados, e protoplastos in-
colores, a partir de suspenses celulares.
Este o marcador mais usado, e que
tambm permite o clculo das taxas de
fuso nos diversos experimentos.
Os produtos de fuso so cultiva-
dos at a fase de calo e em seguida
colocados em meio de regenerao de
brotos. Nos experimentos onde no hou-
ve seleo prvia de heterocrios, a
seleo pode ser feita na fase de calo ou
de broto. A natureza hbrida do broto
pode ser identificada por anlises
morfolgicas ou cromossmicas. Na fase
de calo, pode-se proceder seleo pela
anlise de padres eletroforticos de
protenas totais e de isoenzimas. Nas
anlises eletroforticas, o padro de ban-
das das espcies parentais caracteriza-
do, procurando-se identificar bandas t-
picas. A mistura fsica das amostras reve-
la um padro que corresponde soma
das bandas parentais que serve como
controle para a identificao dos hbri-
dos somticos verdadeiros. Este um
sistema eficiente para a confirmao da
natureza hbrida e que pode ser usado
tambm na fase de broto.
Aproveitamento comercial de hbridos
somticos
A caracterizao morfolgica e o
estudo do comportamento meitico de
hbridos somticos, assim como avalia-
es de natureza agronmica, vo deli-
near o seu potencial de aproveitamento
em programas de melhoramento genti-
co. Revises sobre este assunto tm sido
publicadas (Waara & Glimelius, 1995;
Dornelas & Vieira, 1996), enfatizando o
aproveitamento de hbridos somticos
no melhoramento de leguminosas,
gramneas e solanceas, particularmente
Nicotiana e Solanum.
A fuso de protoplastos tornou-se
uma tcnica bastante promissora para a
introgresso de genes de interesse em
espcies comerciais de Brassica e Citrus.
Em brssicas, a maior parte dos traba-
lhos tem relatado a transferncia de
caracteres de herana citoplasmtica,
como a macho-esterilidade e resistncia
a herbicidas, e, mais recentemente, fo-
ram obtidos hbridos somticos intertribais
entre Brassica napus, a colza e Thlaspsi
perfoliatum, visando o incremento no
teor de cido nervnico no leo de
B.napus. Amostras de leo extrado de
15 hbridos somticos foram analisadas
e uma quantidade significativamente
maior de cido nervnico foi encontra-
da (Fahleson et al., 1994).
Plantaes de comerciais de Citrus
freqentemente so formadas por plan-
tas com copa e sistema radicular de
gentipos diferentes.Utilizam-se porta-
enxertos mais bem adaptados a um de-
terminado ambiente ou tolerantes a uma
doena de solo, o que se reflete em uma
melhor produo da variedade-copa.
Segundo os especialistas, este sistema
oferece a vantagem de se poder empre-
gar mtodos biotecnolgicos, como a
hibridao somtica, em programas de
melhoramento das variedades porta-en-
xerto, uma vez que a introgresso de
genes de espcies selvagens no interfe-
re nas caractersticas comerciais da vari-
edade-copa. Segundo Grosser et al. (1990)
a tangerina Clepatra (Citrus reticulata)
um porta-enxerto de grande importncia
na Flrida, pois tolerante tristeza,
exocorte, xiloporiose e ao estresse cau-
sado pelo frio e solos salinos. Entretanto,
fat ores como a suscept i bi l i dade a
nematides e podrido do colo limitam
o seu uso. Visando obter um porta-
enxerto com caractersticas complemen-
tares, estes autores regeneraram hbridos
somticos a partir de produtos de fuso
entre protoplastos isolados de C.reticulata
e de Citropsis gilletiana, uma espcie
resistente podrido do colo e ao
nematide Radopholus citrophilus.
As principais caractersticas incor-
poradas via fuso de protoplastos em
batata incluem resistncia a nematides,
a vrus, a Erwinia e tambm ao frio, esta
oriunda de Solanum brevidens, uma es-
pcie diplide sexualmente incompat-
vel com S.tuberosum. Da mesma forma,
em tabaco, foram incorporados, via fu-
so de protoplastos, genes de resistncia
a doenas fngicas e a vrus.
Hibridao somtica em Passiflora, o
gnero dos maracujazeiros
O Brasil o principal produtor de
maracuj, com uma rea de plantio,
atualmente, de 30.000ha, constituda
basicamente de uma nica espcie, o
maracuj amarelo, Passiflora edulis f.
flavicarpa Deg. A monocultura, entretan-
to, favoreceu o desenvolvimento de do-
enas, afetando consideravelmente a sua
produo. Os plantios comerciais de
maracuj tm sido alvo da incidncia de
doenas do sistema radicular e da parte
area, sendo as mais severas a bacteriose
causada por Xanthomonas, a murcha do
Fusarium, e outra de etiologia desconhe-
cida, o definhamento precoce. Em con-
seqncia, os pomares adquiriram, ao
longo das ltimas dcadas, um carter
nmade, prejudicial expanso da cul-
tura, principalmente no Estado de So
Paul o, onde gr ande par t e dos
monocultivos teve incio. Hoje cultiva-
da principalmente no Nordeste. Alm
disso, a cultura exige espaldeiramento
de tal forma que a manuteno do plan-
tio por mais anos, em um mesmo local,
essencial ao produtor. Em vista disso,
considerada uma cultura de alto risco,
com elevado custo de produo, princi-
palmente no que diz respeito ao uso de
defensivos qumicos, uma vez que as
formas cultivadas do maracujazeiro do-
mesticado so susceptveis.
A necessidade de se buscar no
germoplasma selvagem alternativas de
controle s doenas do maracujazeiro
tornou pioneiro o trabalho desenvolvido
por pesquisadores da Unesp/Jaboticabal,
que identificaram fontes de resistncia
em P.giberti, P.macrocarpa, Passiflora sp
( mar acuj - de- cobr a) , P. ni t i da e
P.quadrangularis. Os programas de me-
l hor ament o, vi a hi br i dao
interespecfica, visando a introgresso
de genes de resistncia a partir dessas
espcies, foram iniciados na dcada de
80 na Unesp. Entretanto, os hbridos
interespecficos obtidos apresentaram
baixa fertilidade, mostrando nveis vari-
veis de esterilidade do plen. Devido a
dificuldades metodolgicas (os maracu-
jazeiros so auto-incompatveis), os avan-
os foram limitados nos programas de
retrocruzamento.
No caso especfico do maracujazei-
ro, a hibridao somtica, via fuso de
protoplastos, representa uma alternativa
de t r ansf er nci a de genes do
germoplasma selvagem para a espcie
cultivada. Assim, preliminarmente, pro-
tocolos de regenerao de plantas a
part i r da cul t ura de t eci dos e de
protoplastos de vrias espcies de
Passiflora foram estabelecidos no De-
partamento de Gentica da ESALQ/USP1
. Ensaios de fuso de protoplastos foram
conduzidos e quatro hbridos somticos
foram obtidos, a saber, P.edulis f.
flavicarpa (+) P.amethystina; P.edulis f.
flavicarpa (+) P.alata; P.edulis f. flavicarpa
(+) P.cincinnata e P.edulis f. flavicarpa
(+) P.giberti. Uma vez aclimatadas em
casa de vegetao, as mudas foram leva-
das a campo, onde se desenvolveram .
As plantas tm-se mostrado vigorosas,
com caractersticas morfolgicas inter-
medirias aos pais, florescimento abun-
dante e viabilidade polnica acima de
70%. Anlises da meiose dos hbridos
P.edulis f. flavicarpa (+) P.amethystina e
P.edulis f. flavicarpa (+) P.cincinnata
mostraram que ocorre a formao de
multivalentes. Este tipo de pareamento,
dito homoelogo (entre cromossomos
oriundos de espcies diferentes), permi-
te a ocorrncia de recombinao, via
crossing-over, o que essencial para
que haja introgresso de genes para a
espcie domesticada, a partir do parental
selvagem. Plantas hbridas que formem
preferencialmente bivalentes na meiose
I tendem a ser mais frteis, porm podem
ser el i mi nadas dos programas de
retrocruzamento, uma vez que a possibi-
lidade de haver introgresso, via crossing-
over, baixa; por outro lado, aquelas
nas quais a freqncia de multivalentes
alta tendem a ser incorporadas, embo-
ra possam mostrar fertilidades mais bai-
xas (veja Barbosa & Vieira, 1997).
Os hbridos somticos produzidos
na ESALQ/USP so nicos no Brasil. A
obteno destes hbridos laboriosa, e
evidente a necessidade de avaliar o seu
valor agronmico em programas de me-
lhoramento do maracujazeiro, visando
resistncia a doenas. O seu comporta-
mento vegetativo e reprodutivo est sob
estudo, assim como o seu potencial de
aproveitamento est sendo avaliado.
Devido a sua natureza tetraplide, pres-
tam-se, em princpio, como porta-enxer-
tos, pois mostram caules mais vigorosos
que o parental selvagem resistente.
1 Projetos financiados pela FAPESP e CNPq
importncia da Rio+5, que
aconteceu no incio deste
ano, foi frustrante, devido a
ausncia de um documento
final, porm foi vitoriosa por
apresentar um rascunho da CARTA DA
TERRA, feita por representantes de todos os
continentes, mas que deve ser concluda l
pelo ano 2000. A carta estabelece 18 itens
que indicam a nossa responsabilidade em
manter a magnfica diversidade de vida, j
que somos uma ampla comunidade com
um destino comum. Essa carta da Terra em
seus 18 princpios tem 9 que se aplicam s
abelhas, direta ou indiretamente. Os 4 itens
de aplicao direta so:
1) Respeitar a Terra e toda a vida. Todos
os seres vivos (e, portanto, as abelhas)
possuem um valor intrnseco e tem direito
ao respeito, sem levar em conta seu valor
utilitrio para a humanidade.
2) Cuidar da Terra, protegendo e restau-
rando a diversidade, a integridade e a
beleza dos ecossistemas do planeta (a as
abelhas sem ferro brasileiras estaro sal-
vas). Onde houver risco de dano grave ou
irreversvel ao meio ambiente, uma ao
preventiva deve ser adotada a fim de evitar
prejuzo ( o caso dos meliponneos em
todos os lugares de desmatamentos).
3) Viver de modo sustentvel, promo-
vendo e adotando formas de consumo,
produo e reproduo ( o que estamos
tentando fazer com os meliponneos) que
respeitem e salvaguardem os direitos hu-
manos e a capacidade regeneradora da
Terra.
4) Fazer avanar e aplicar o conheci-
mento cientfico e tecnolgico, que remo-
vam meios de vida sustentveis e protejam
o meio ambiente ( o que tentamos fazer ao
estudar a biologia, reproduo e manejo
dos meliponneos).
Os itens 12, 14, 16, 12,17 e 18 tambm
se aplicam indiretamente para defesa de
nossas abelhas.
IMPORTNCIA DA
MELIPONICULTURA
A importncia da meliponicultura, para
o Pas, independentemente de sua utilida-
de micro-econmica, pode ser avaliada de
5 maneiras: A) a polinizao das plantas
nativas;
B) a produo de mel e plen para
inmeras populaes do norte e nordeste;
C) a elaborao de produtos medici-
nais;
D) uma contribuio biologia, especi-
almente quanto gentica e evoluo dos
Apidae;
E) melhoria do ensino de alunos do
primrio e do secundrio, visto que as
abelhas Meliponneas no tm ferro e
cada espcie muito distinta das outras.
A) POLINIZAO DAS
PLANTAS NATIVAS
Trs espcies de Meliponneos so ma-
nipuladas pelo homem americano mais
que qualquer outra espcie de abelhas
deste continente: A abelha Melipona beechei
(a xanan-cab do Mxico), a Melipona
compressipes (a tiuba do Maranho) e a
Melipona scutellaris (a uruu do Nordeste).
Os indgenas das trs regies domesticaram
e, tanto no Maranho como no Nordeste,
selecionaram para maior produo de mel.
O mel que Pedro Alvares Cabral tomou no
dia 22 de abril de 1500 era da uruu. Porm,
a grande vantagem dos meliponneos bra-
sileiros no a produo de mel e plen
mas sim da polinizao das nossas
fanergamas. De 30% das espcies da
caatinga e pantanal, at 90% em algumas
manchas da Mata Atlntica (Serra do Mar
no Esprito Santo) e algumas partes da
Amaznia, nossas plantas necessitam dos
meliponneos para a polinizao e
frutificao.
Em Mamirau, no obstante a proibi-
o de caa, os macacos uacaris esto
diminuindo em nmero. A razo foi fcil
de ser encontrada: trs espcies de abelhas
grandes e boas produtoras de mel (Melipona
seminigra, Melipona rufiventris e Melipona
crinita) so polinizadoras de centenas de
rvores frutferas. Porm, as populaes
indgenas e ribeirinhas daquela rea cole-
tam mel para servir de meio para tomarem
remdios e mezinhas. No consideram
agresso natureza derrubar um tronco da
rvore que tenha uma colnia; essa colnia
aberta e o mel, o geoprpolis, a gelia
real, as larvas e pupas so utilizados como
veculo para remdios. O que no for
utilizado jogado fora e comido pelas
formigas. A primeira conseqncia ecol-
gica, imediata, a diminuio da
polinizao, da fecundao, dos frutos e
da quantidade destes disponvel para os
uacaris. A segunda que a falta de
polinizao de uma espcie tem efeito
semelhante de um gene letal ou semi-letal
na sua populao. Uma rvore pequena de
Gliricidium sepium produziu 600 sementes
em polinizao aberta contra 13 quando se
evitou a polinizao por abelhas. A impor-
tncia das abelhas cresce ao mesmo tempo
em que no ecossistema aumenta a propor-
o de espcies de plantas bissexuais ou
dioicas e aquelas que so obrigatoriamente
panmticas. Essa proporo aumenta do
Canad at Manaus.
As abelhas buscam seu nctar, plen e
resina em um conjunto de espcies de
plantas, conjunto esse que diferente para
cada espcie de abelha. O mesmo aconte-
ce com as plantas: cada espcie tem um ou
vrios polinizadores (Absi et al., 1984: (Kerr,
1979).
H um equilbrio na floresta em que
est em jogo, dentro da espcie, a gentica
de cada planta e, dentro da interao
ecolgica, sua capacidade de produzir
sementes, a capacidade de germinao
dessas sementes, seu desempenho no de-
senvolvimento e o tempo que levar para
produzir novas sementes, tudo visando a
competio com outras espcies . Os mui-
tos (n) alelos sexuais de auto-esterilidade
(s' at sn) esto em equilbrio de
HardyWeinberg (s= 1/n), e os polinizadores,
na maioria das vezes, fazem a panmixia
regularmente. Porm, o que acontecer se
uma dada espcie perder metade dos seus
polinizadores? Esta falta de abelhas ter o
efeito de um gene detrimental e, como
conseqncia, ter menos sementes, per-
turbando a composio da populao ve-
getal. Em Ribeiro Preto, na rea da Facul-
dade de Medicina, a rvore predominante
era o angico (Piptademia sp), porm com
desmatamento e com a deficincia de
polinizadores, a espcie amendoinzeiro
passou a ser a mais frequente.
B) PRODUO DE MEL
A primeira seleo que o apicultor faz
em seu apirio, quase sem perceber para
maior produo de mel. Isso porque usa
suas colnias mais produtivas para divid-
las ou para produzir suas futuras rainhas.
Todavia, existem alguns tipos de seleo
que so incompatveis. Uma abelha em
uma viagem de coleta raramente coleta
plen e nctar ao mesmo tempo. Assim, se
selecionarmos para coletar mel o apirio
ter o seu nvel de coleta de plen diminu-
do. O Dr. Walter Rothenbuhler constatou
que essa seleo, em algumas reas dos
EEUU, foi levada a tal grau que muitas
colnias no tinham plen para atravessar
o inverno e morriam - era o que chamavam
l de "desapearing desease"- doena do
desaparecimento.
A produo de Melipona compresssipes
durante o ano de 1982 variou de 4 a 18
kilos.
O fato de ser possvel ter colnias que
produzem cerca de 20 kg/ano apresenta a
possibilidade de mais uma fonte de renda
para os nossos camponeses. Mas h tam-
bm a opo de alta produo de plen.
Em Pernambuco e Bahia h vrios apicul-
tores que vendem 10 kg de mel de Apis
acrescentado de I kg de plen de Melipona
scutellaris. O quilo de mel, que custa 4,00
passa para R$40,00 para essa mistura, o que
muito bom negcio.
C) PRODUTOS MEDICINAIS
Todas as indicaes que vou apresen-
tar so de camponezes, de vrios lugares
do Brasil. No conheo pesquisas sobre o
assunto: 1) Omel usado como veculo
para remdios em toda a Amaznia.
2) No Sul usado contra doenas
pulmonares (resfriado, gripe, fraqueza).
3) O mel de Jata, diludo ou no,
usado contra infeces de olhos.
4) A composio da gelia real de
Melipona muito parecida com a da Apis
mellifera. J existem inmeras pesquisas
mdicas e biolgicas para a gelia de Apis
facilmente transferveis para o liquido ali-
mentar das uruus (M. scutellaris).
5) O geoprpolis preparado com um
litro de lcool para 1 kilo de geoprpolis (e
prensado ) aps 10 minutos d a "tintura-
de-geoprpolis" que, diludo, usada como
medicamentos, (sobre os quais nenhuma
pesquisa cientfica existe). A "torta" restante
usada em alimentos para porcos e aves.
D) CONTRIBUIO BIOLOGIA
A diversidade biolgica caprichou nos
meliponneos. Neles encontramos uma es-
pcie com 8 cromossomos, 30 com 9, oito
com 9, uma com 14, sete com 17, uma com
18 cromossomos. Ser poliploidia? Neste
caso os microsatlites sero encontrados
em nmero duplo ou quase duplo nas de
17 cromossomos. Ser processo
Robertsoniano? Neste caso os microsatlites
sero encontrados em mesmo nmero (ou
nmero parecido). preciso que um bra-
sileiro faa isso logo antes que algum
mande material e idias para o hemisfrio
norte.
Os dados biolgicos so de uma diver-
sidade extraordinria:
1) clulas com alimento pastoso em
Melipona bocandei e alimento lquido nas
outras.
2) alimentando-se de animais mortos
ou carne em 3 espcies de Trigona (Camargo,
1995),
3) abelhas ladras em 3 espcies do
gnero Lestrimelitta (e uma espcie africa-
na) e so polinferas e nectarferas nas
demais. Os meliponneos possuem espci-
es com ninhos em forma de cacho
(Frieseomelitta varia) em forma de vrias
cortinas verticais de alvolos em (Nogueira
Neto, 199) e em favos horizontais (raramen-
te helicoidais) nas Melipona e em vrios
Trigonini (lhering 1903 Kerr, 1969). A co-
municao de vrios tipos: h espcies
com comunicao apenas por movimen-
tos excitveis (Frieseomelita, Tetragonisca),
com sons mltiplos (Nannotrigona), com
sons e odor (Partamona), com trilha de
cheiro da fonte at prximo da colmia
(Scaptotrigona, Trigona, Cephalotrigona,
Geotrigona, Oxytrigona), e com sons indi-
cando distncia e uma pequena trilha de
cheiro (Kerr et al., 1963; Kerr, 1994). A
determinao das castas nas espcies do
gnero Melipona aguarda confirmao
biotecnolgica (Figura 1).
A determinao do sexo nas abelhas,
segundo Cunha e Kerr (1957) com as
modificaes posteriores aps o trabalho
de Chaud-Neto (1974), permite as seguintes
generalizaes:
a) A origem da haplo-diploidia tem
maior probabilidade de provir de um Proto-
himenptero xx= fmea e xy= macho, j
que todas as ordens prximas tem fmeas
xx e machos xy, e todas as ordens
haplodiploides tem fmeas xx.
b) Permite a seguinte hiptese: todos os
himenpteros endogmicos sero do tipo
em que, nos haplides (ri) o gene ou genes
feminizantes F tem efeito fisiolgico menor
que o efeito dos masculinizantes M, logo:
M > F = macho nos diplides (2n) os genes
feminizantes sero total ou quase totalmen-
te aditivos (2F) e os masculinizantes sero
total ou quase totalmente no aditivos (M),
logo: 2F>M= fmea.
c) Permite tambm afirmar que um dos
genes F (= xo) mutou e deu a srie xo1 at
xon nos himenpteros panmticos, isto
porque tal gene numa taxa mdia de muta-
o u= 2.6xlO-6 muda para xo1 e quando
acontecer de xo/xol ser hetertico em uma
populao panintica o gene xo se estabe-
lecer automaticamente.
d) Tambm permite prever que dever
existir maior nmero de himenpteros com
o sistema xo1/xon de determinao do
sexo do que o primitivo encontrado nos
endogmicos. Isso j tem uma confirma-
o, pois, at o momento, existe 3 vezes
mais himenpteros panmticos que
endogmicos e todas as espcies de
himenpteros panmticas estudadas tem
sistema xo1/xone todas as endogmicas
estudadas no apresentam machos
diplides.
E) UTILIZAO COMO MATERIAL
DIDTICO
Em 1996, Kerr, Gislene e Vnia listaram
6 razes ecolgicas; (7) econmicas e (5)
culturais importantes para implementar a
criao de meliponneos.
RAZES ECOLGlCAS
1) So responsveis por 30% a 90% da
polinizao da flora nativa, conforme o
ecossistema. Sua salvao ajudar a tornar
permanentes os reflorestamentos com es-
pcies nativas.
2) Das 300 espcies de meliponneos,
mais de 100 esto em perigo de extino.
Sua criao evitar esse drama.
3) A anlise do plen coletado pelas
abelhas um forte indicativo das espcies
remanescentes do seu habitat, que delas
dependem para sua polinizao, auxilian-
do diretamente nos programas de reflores-
tamento e de melhoria do pasto apcola.
4) So partes integrantes do nosso
ecossistema e da biodiversidade mundial.
5) A presena de colnias de
meliponneos numa mata ou capoeira , por
pequena que seja, indica condies de
sobrevivncia para outros seres vivos.
6) Os meliponneos, que so as nossas
principais abelhas nativas sociais, ao
polinizarem as flores nativas promovem
abrigo e alimento a muitas espcies.
As reas geralmente ameaadas so as
margens de usinas hidreltricas, as proxi-
midades de carvoarias, as estradas em
construo e as margens das cidades em
expanso. Nessas reas deveria ser obriga-
tria a extrao das colnias.
RAZES ECONMICAS
1) Sendo sem ferro podero ser utiliza-
das at por crianas na polinizao de
vrias flores de espcies teis ao homem.
2) Devero ser utilizadas por professo-
res, em salas de aula e em demonstraes
prticas. Se em cada Instituto de Ensino
secundrio existissem 10 colnias de
Meliponneos da regio como material de
ensino e pesquisa este simples fato tomaria
a sua criao lucrativa. Cada colnia em
uma colmia custa cerca de R$ 180,00
(novembro 1997).
3) A cada dia necessitamos mais do
estudo farmacolgico dos seus compo-
nentes (mel, geoprpolis, cera, plen, bac-
trias dos alimentos, liquido alimentar) que
h tempos so utilizados pelos ndios e
sitiantes para combater doenas pulmona-
res, deficincia de apetite, infeco dos
olhos, at os derivados do geoprpolis,
usados como fortificantes e agentes
bactericidas.
4) Essas abelhas produzem o melhor
mel que se conhece. Tem apenas 70% de
acar e tem concentrado o perfume da
flor, alm de ser levemente cido, o que
no o torna enjoativo.
5) Incentivo ao desenvolvimento de
tecnologias que aprimoraro a sua criao
como: colmeias racionais, nmero mnimo
de colmias, troca de rainhas,, transporte
de rainhas, meliponicultura migratria, se-
leo gentica, tcnicas de diviso.
6) Seu principal produto, o mel, poder
retomar s mesas como alimento calrico
superior ao acar cristalizado ou refina-
do.
7) Representa uma fonte de renda para
o pequeno produtor se aplicar em reprodu-
o e venda de colmias. No momento
com a venda de 30 colmias por ms a 120
a colnia, um meliponicultor obteria R$
3.600,00 brutos; se gastar 40 por colmia
sobrariam 2.400,00 mensais para sustentar-
se e sua famlia.
RAZES CULTURAIS
1) Trar aos filhos e amigos dos
meliponicultores conhecimentos biolgi-
cos e idias de conservao da natureza.
2) Levar automaticamente a um co-
nhecimento da flora apcola com conseq-
ncias imediatas no amor pela flora nativa,
sua conservao e multiplicao.
3) uma parte da cultura dos nossos
camponeses, que pode ser perpetuada se
incrementada at tornar-se fonte de renda,
de conhecimentos cientficos e de agricul-
tura sustentvel.
4) um excelente material de pesquisa
visto que seu sistema de determinao de
castas em algumas espcies, precisa ser
molecularmente esclarecido; suas enzimas
foram pouco estudadas e seus rgos de
sentido permanecem quase desconheci-
dos. Tudo isso dar um avano nas cinci-
as bsicas e, quem sabe, nas aplicadas.
5) A necessidade de troca de rainhas ou
de fecundao em meliponrios de ami-
gos, representa uma maneira de promover
a amizade e a cooperao. Estamos tentan-
do fazer de cada apicultor um criador de
Meliponneos, pois j sabem lidar com uma
abelha brava e no teriam problemas em
aprender os detalhes do manejo de
meliponneos. Todavia, h uma dificulda-
de: precisam ter mais de 44 colnias. Po-
rm, vale a pena qualquer sacrifcio j que
a destruio das florestas da Amrica Latina
como parte do processo reprodutivo das
nossas florestas, est sendo a maior da
hi st ri a e Pr-hi st ri a j unt as. Os
meliponneos so importantes demais para
deixarmos que peream.
Prezados leitores (as),
Queremos agradecer as milhares de mensagens de felicitaes enviadas atravs de cartas, e-mails e
telefonemas para nossa Redao. Por absoluta falta de espao, estamos publicando somente algumas
poucas. Os leitores que desejarem entrar em contato com BIOTECNOLOGIA Cincia & Desenvolvimento
podero enviar sua correspondncia via Internet, fax ou carta para esta seo. Nossos endereos so:
Redao de BIOTECNOLOGIA Cincia & Desenvolvimento
SRTV/Sul - Quadra 701 - Ed. Palcio do Rdio II, sala 215 - Cep 70340-902 - Braslia - DF - Tel.: (061) 225-
1512 (061) 225-0976 Fax (061) 224-2830
Home-page: http://www.biotecnologia.com.br E-mail: biotecnologia@biotecnologia.com.br
Tenho grande interesse em publicar ar-
tigos a respeito dos aspectos jurdicos
relacionados com a biotecnologia, em
virtude de ser advogado e cursar atual-
mente mestrado em direito econmico
na Faculdade de Direito da Universidade
Federal de Minas Gerais.
Fernando Guilhon
UFMG
Todo e qualquer trabalho relacionado a
biotecnologia poder ser encaminhado
redao, que o submeter ao conselho
cientfico. Convm, antes, entrar em con-
tato com a Diretora de Pesquisa para
certificar-se das normas de publicao.
Fiquei muito satisfeita ao tomar conheci-
ment o da exi st nci a da r evi st a
"Biotecnologia Cincia & Desenvolvimen-
to". Gostaria de saber se possvel e
como obter o exemplar ano I, n 1, pois
tal publicao de extrema importncia
para meus estudos em nvel de doutora-
do.
Snia Ternes
Pesquisadora do CNTIA/EMBRAPA
Campinas - SP
Comunicamos que a nossa primeira edi-
o j se encontra esgotada, contudo, po-
der ter acesso s matrias atravs de
nossa home-page.
Gostaria de pedir, se possvel, que me
enviassem o endereo (pode ser o ele-
trnico) do Dr. Roberto Rogero ou da
Dra. Nanci do Nascimento, pois gostaria
de receber maiores informaes sobre o
trabalho que vem realizando, assim como
a bibliografia utilizada.
Cesar Acconci -Eng. Quimica/UNICAMP
Transcrevemos abaixo o endereo dos Drs.
Jos Roberto Rogero e da Dra. Nanci do
Nascimento: Travessa "R", n. 400, Cidade
Universitria, So Paulo-SP - CEP: 05508-
900
Projetos de pesquisa a serem implanta-
dos, podem ser publicados nesta revista?
Ser dedicado algum captulo para as
tcnicas de cultura de tecidos?
Eduardo Ferreira Rodrigues
Universidade Estadual do Maranho
Sim. Todo e qualquer projeto de pesquisa
poder ser encaminhado apreciao do
Conselho Cientfico que determinar ou
no sua publicao. Com relao tcni-
cas de cultura de tecidos, estas sero
publicadas de acordo com nossa pauta.
Gostaria de sugerir que seja includa na
revista uma seo sobre novos equipa-
mentos e softwares, para a nossa rea
biotecnolgica. Desta forma tambm
acreditamos que podero captar novos
recursos junto s empresas que carecem
de um veculo de divulgao em lngua
portuguesa.
Fernando Caldas
Pesquisador de Diversidade Gentica e
Ecolgica Laboratrio de Gentica
Molecular Vegetal
Universidade Federal do Rio de janeiro
Agradecemos a sua sugesto e informa-
mos que estamos tomando as providncias
pertinentes ao assunto.
Venho por meio desta expressar meus
parabns pela excelente publicao, que
contribuir para o desenvolvimento da
cincia no nosso Pas.
Cleverson Silveira Borba, Ph.D
Pesquisador III da Embrapa Agronomia/
Sementes
Sou Secretrio Executivo do Centro Na-
cional de Referncia em Biomassa -
CENBIO, criado pelo MCT neste ano e
sediado pelo IEE/USP. Gostei bastante
da Revista e gostaria de fazer algumas
resenhas das suas informaes no
"CENBIO Noticias" (jornal do CENBIO) a
ser lanado em breve e divulgar o ende-
reo eletrnico da Revista em nossa
home-page. Parabns pelo trabalho.
Marco Aurlio Vasconcelos de Freitas
Instituto de Eletrnica e Energia da USP
Prezado Sr. Secretrio, agradecemos as
palavras de estima e nos sentimos desde j
honrados com a incluso de nosso endere-
o eletrnico na Home-page de to concei-
tuado Centro.
Em nome dos professores e estudantes
do Cur so de Ps- gr aduao em
Biotecnologia da Universidade Federal
de Santa Catarina, venho agradecer o
recebimento dos exemplares enviados.
Apr ovei t o a opor t uni dade par a
parabeniz-los pela excelente qualidade
da publicao.
Profa. Dra. Margarida M. Mendona
Coordenadora - UFSC
Primeiramente gostaria de parabeniz-
los pela qualidade e sucesso dos dois
primeiros exemplares da revista. Sou
biloga, bolsista de Aperfeioamento da
Universidade Estadual de Ponta Grossa e
est ou t r abal hando na r ea de
biotecnologia. Sendo, assim, gostaria, se
possvel, que me enviassem o endereo
eletrnico do Centro de Cuba, o qual foi
tema de reportagem da 1 edio.
Daniela Macedo de Lima
Ponta Grossa - PR
O endereo eletrnico que temos do Dire-
tor do Centro de Cuba, Dr. Manuel Limonta
Vidal, quem nos concedeu a entrevista. O
endereo manuel.limonta@cigb.edu.cu
Esta revista veio inovar o mundo da
informao na rea de Biologia, princi-
palmente no campo de Tecnologia e
Sade Pblica. Estou encantada com as
reportagens e tenho certeza que as mes-
mas vo contribuir na concluso do meu
curso (Cincias Biolgicas).
Raquel Baraldi Ramos Soares
Araraquara - SP
Gostaria de parabeniz-los pela qualida-
de da Revista Biotecnologia, em todos os
aspectos: as entrevistas, artigos tcnicos
(Tecnologia de Ponta) e sobretudo "A
Pesquisa Cientfica e as Patentes". Esto
ainda de parabns pela facilidade em
acessar todos os artigos atravs da home-
Page.
Roseane Borges da Silva
Santa Catarina - SC
SEO DE CARTAS
PROTEO DE CULTIVARES
DECRETO no 2.366
DE 5 DE NOVEMBRO DE 1997.
E
OS DESCRITORES DAS PRIMEIRAS OITO
ESPCIES QUE SERO PROTEGIDAS
(algodo, arroz, feijo, milho, soja, sorgo e trigo)
DECRETO no 2.366
DE 5 DE NOVEMBRO DE 1997.
Regulamenta a Lei no 9.456, de 25
de abril de 1997, que institui a Proteo
de Cultivares, dispe sobre o Servio
Nacional de Proteo de Cultivares -
SNPC, e d outras providncias
O PRESIDENTE DA REPBLICA,
no uso da atribuio que lhe confere o
art. 84, inciso IV, da Constituio, e
tendo em vista o disposto na Lei no
9.456, de 25 de abril de 1997, D E C R
E T A:
Captulo I DAS DISPOSIES GE-
RAIS Seo I Das Disposies Prelimi-
nares
Art. 1o A proteo de cultivares,
nos termos da Lei no 9.456, de 25 de
abril de 1997, dar-se- em conformida-
de com as normas previstas neste De-
creto.
Art. 2o A proteo dos direitos
relativos propriedade intelectual re-
ferente a cultivar se efetua mediante a
concesso de Certificado de Proteo
de Cultivar, considerado bem mvel
para todos os efeitos legais e nica
forma de proteo de cultivares e de
direito que poder obstar a livre utiliza-
o de plantas ou de suas partes de
reproduo ou de multiplicao
vegetativa, no Pas.
Seo II
Do rgo de Proteo de Cultivar
Art. 3o O Servio Nacional de
Proteo de Cultivares - SNPC, criado
pela Lei no 9.456, de 1997, no mbito
do Ministrio da Agricultura e do Abas-
tecimento, o rgo competente para
a proteo de cultivares no Pas, ca-
bendo-lhe especialmente:
I - proteger as novas cultivares e
as cultivares essencialmente deriva-
das, outorgando-lhes os certificados de
proteo correspondentes;
II - divulgar, progressivamente, as
espcies vegetais e respectivos
descritores mnimos, necessrios aber-
tura de pedidos de proteo, bem como
a data-limite, na hiptese da alnea "a"
do 1o do art. 6o deste Decreto, para
apresentao dos pedidos;
III - elaborar e submeter aprova-
o do Ministro de Estado da Agricultu-
ra e do Abastecimento normas comple-
mentares, no mbito de sua competn-
cia, sobre a proteo de novas cultiva-
res e de cultivares essencialmente de-
rivadas, bem assim de cultivares pass-
veis de proteo na forma do art. 4o,
1o, da Lei no 9.456, de 1997, de qual-
quer gnero ou espcie vegetal, e
estabelecer os formulrios necessrios
tramitao do pedido de proteo;
IV - receber, protocolizar, deferir e
indeferir pedidos de proteo, formali-
zados mediante requerimento assina-
do pela pessoa fsica ou jurdica que
obtiver cultivar, ou por seu procurador
devidamente habilitado;
V - receber, protocolizar, julgar,
deferi r e i ndeferi r pedi dos de
impugnao apresentados por tercei-
ros ou pelo requerente do direito de
proteo;
VI - receber, protocolizar, instruir
e encaminhar ao Ministro de Estado da
Agricultura e do Abastecimento recur-
sos apresentados por terceiros ou pelo
requerente do pedido de proteo;
VII - divulgar, mediante publica-
o no Dirio Oficial da Unio e em
publicao peridica especializada, os
extratos dos pedidos de proteo, a
proteo concedida, as transferncias
de titularidade, a declarao de
licenciamento compulsrio ou de uso
pblico restrito, a suspenso transit-
ria, a extino da proteo e a nulidade
ou o cancelamento dos certificados de
proteo e outros atos, despachos e
decises administrativas decorrentes da
proteo de cultivares;
VIII - conceder, manter, transferir,
cancelar e anular Certificado Provisrio
de Proteo e Certificado de Proteo
de Cultivar;
IX - estruturar ou credenciar ban-
cos destinados conservao de amos-
tras vivas que integraro a coleo de
germoplasma de cultivares protegidas;
X - determinar a realizao de
ensaios de campo e testes em labora-
trio para diferenciao da cultivar,
quando julgar necessrios;
XI - fiscalizar o cumprimento das
normas legais pertinentes proteo e
ao direito de proteo;
XII - fornecer certides relativas s
matrias de que trata a Lei no 9.456, de
1997;
XIII - estabelecer os modelos de
certificados de proteo;
XIV - emitir parecer tcnico con-
clusivo em processos de requerimento
de licena compulsria da cultivar pro-
tegida, bem como adotar as medidas
complementares, referentes comuni-
cao s partes interessadas e acompa-
nhamento da implementao da licen-
a concedida;
XV - emitir parecer tcnico con-
clusivo com vistas a subsidiar declara-
o de uso pblico restrito de cultivar
protegida;
XVI - criar grupo de trabalho com-
posto de especialistas para prestar
assessoramento em matrias especfi-
cas;
XVII - opinar sobre a convenincia
de assinatura, ratificao ou denncia
de convenes, tratados, convnios e
acordos sobre proteo de cultivares;
XVIII - averbar, no cadastro de
cultivar protegida, as decises relativas
a processos de licena compulsria e
de declarao de uso pblico restrito;
XIX - indicar a participao de
servidores em reunies tcnicas, comi-
ts e grupos de trabalho de mbito
nacional e internacional sobre prote-
o de cultivares;
XX - relacionar-se com instituies
pblicas e privadas, de mbito nacio-
nal, internacional e estrangeira, com o
objetivo de manter banco de dados de
denominaes e de descritores de cul-
tivares, bem como para intercmbio
tcnico-cientfico na rea de proteo
de cultivares;
XXI - implantar e manter atualiza-
do o Cadastro Nacional de Cultivares
Protegidas - CNCP;
Pargrafo nico. Os servios tc-
nicos de que tratam os incisos IX e X
deste artigo podero ser realizados por
convnios ou contratos, ou pelo siste-
ma de credenciamento, com institui-
es pblicas ou privadas.
Art. 4o O SNPC, sempre que ne-
cessrio, consultar o Instituto Nacio-
nal de Propriedade Industrial - INPI,
para verificar se a denominao pro-
posta para a cultivar consta como mar-
ca de produto ou servio vinculado
rea vegetal ou de aplicao da culti-
var, depositada ou j registrada naque-
le Instituto.
Pargrafo nico. O SNPC se arti-
cular com o INPI visando a troca de
informaes pertinentes proteo de
cultivares com as marcas depositadas e
registradas naquele Instituto.
Seo III Da Proteo de Cultivar
em Geral
Art. 5o Considera-se, para os efei-
tos deste Decreto:
I - melhorista: a pessoa fsica que
obt i ver cul t i var e est abel ecer
descritores que a diferenciem das de-
mais;
II - descritor: a caracterstica
morfolgica, fisiolgica, bioqumica ou
molecular que seja herdada genetica-
mente, utilizada na identificao de
cultivar;
III - margem mnima: o conjunto
mnimo de descritores, a critrio do
SNPC, suficiente para diferenciar uma
nova cultivar ou uma cultivar essenci-
almente derivada das demais cultiva-
res conhecidas;
IV - cultivar: a variedade de qual-
quer gnero ou espcie vegetal supe-
rior que seja claramente distinguvel
de outras cultivares conhecidas por
margem mnima de descritores, por
sua denominao prpria, que seja
homognea e estvel quanto aos
descritores atravs de geraes suces-
sivas e seja de espcie passvel de uso
pelo complexo agroflorestal, descrita
em publicao especializada dispon-
vel e acessvel ao pblico, bem como
a linhagem componente de hbridos; V
- nova cultivar: a cultivar que no tenha
sido oferecida venda no Brasil h
mais de doze meses em relao data
do pedido de proteo e que, observa-
do o prazo de comercializao no Bra-
sil, no tenha sido oferecida venda
em outros pases, com o consentimen-
to do obtentor, h mais de seis anos
para espcies de rvores e videiras e
h mais de quatro anos para as demais
espcies;
VI - cultivar distinta: a cultivar que
se distingue claramente de qualquer
outra cuja existncia na data do pedido
de proteo seja reconhecida;
VII - cultivar homognea: a culti-
var que, utilizada em plantio, em esca-
la comercial, apresente variabilidade
mnima quanto aos descritores que a
identifiquem, segundo critrios esta-
belecidos pelo SNPC;
VIII - cultivar estvel: a cultivar
que, reproduzida em escala comercial,
mantenha a sua homogeneidade atra-
vs de geraes sucessivas;
IX - cultivar essencialmente deri-
vada: a essencialmente derivada de
outra cultivar se, cumulativamente, for:
a) predominantemente derivada
da cultivar inicial ou de outra cultivar
essencialmente derivada, sem perder
a expresso das caractersticas essenci-
ais que resultem do gentipo ou da
combinao de gentipos da cultivar
da qual derivou, exceto no que diz
respeito s diferenas resultantes da
derivao;
b) claramente distinta da cultivar
da qual derivou, por margem mnima
de descritores, de acordo com critrios
estabelecidos pelo snpc;
c) no tenha sido oferecida ven-
da no Pas h mais de doze meses em
relao data do pedido de proteo e
que, obser vado o pr azo de
comercializao no Brasil, no tenha
sido oferecida venda em outros pa-
ses, com o consentimento do obtentor,
h mais de seis anos para espcies de
rvores e videiras e h mais de quatro
anos para as demais espcies;
X - linhagens: os materiais genti-
cos homogneos, obtidos por algum
processo autogmico continuado;
XI - hbrido: o produto imediato do
cruzamento entre linhagens genetica-
mente diferentes;
XII - teste de distinguibilidade,
homogeneidade e estabilidade (DHE):
o procedimento tcnico de comprova-
o de que a nova cultivar ou a cultivar
essenci al ment e der i vada so
distinguveis de outra cujos descritores
sejam conhecidos, homogneas quan-
to s suas caractersticas em cada ciclo
reprodutivo e estveis quanto repe-
tio das mesmas caractersticas ao lon-
go de geraes sucessivas;
XIII - amostra viva: a fornecida
pelo requerente do direito de proteo
que, se utilizada na propagao da
cultivar, confirme os descritores apre-
sentados;
XIV - semente: toda e qualquer
estrutura vegetal utilizada na propaga-
o de uma cultivar;
XV - propagao: a reproduo e a
multiplicao de uma cultivar, ou a
concomitncia dessas aes;
XVI - material propagativo: toda e
qualquer parte da planta ou estrutura
vegetal utilizada na sua reproduo e
multiplicao;
XVII - planta inteira: a planta com
todas as suas partes passveis de serem
utilizadas na propagao de uma culti-
var;
XVIII - complexo agroflorestal: o
conjunto de atividades relativas ao cul-
tivo de gneros e espcies vegetais
visando, entre outras, alimentao
humana ou animal, produo de com-
bustveis, leos, corantes, fibras e de-
mais insumos para fins industrial, medi-
cinal, florestal e ornamental.
Art. 6o passvel de proteo a
nova cultivar ou a cultivar essencial-
mente derivada, de qualquer gnero
ou espcie vegetal.
1o So tambm passveis de
proteo as cultivares no enquadrveis
no disposto no caput e que j tenham
sido oferecidas venda at a data do
pedido, obedecidas as seguintes con-
dies cumulativas:
a) que o pedido de proteo seja
apresentado at doze meses aps cum-
prido o disposto no 2o deste artigo,
para cada espcie ou cultivar;
b) que a primeira comercializao
da cultivar haja ocorrido h, no mxi-
mo, dez anos da data do pedido de
proteo;
c) a proteo produzir efeitos to
somente para fins de utilizao da cul-
tivar para obteno de cultivares es-
sencialmente derivadas; d) a proteo
ser concedida pelo perodo remanes-
cente aos prazos previstos no art. 11 da
Lei no 9.456, de 1997, considerada,
para tanto, a data da primeira
comercializao.
2o Cabe ao SNPC divulgar, pro-
gressivamente, as espcies vegetais e
respectivos descritores mnimos ne-
cessrios abertura de pedidos de
proteo, bem como as respectivas
datas-limite para efeito da alnea "a" do
pargrafo anterior.
3o A divulgao de que trata o
pargrafo anterior obedecer a uma
escala de espcies, observado o se-
guinte cronograma, expresso em total
cumulativo de espcies protegidas:
a) na data de entrada em vigor
deste Decreto: pelo menos cinco es-
pcies; b) aps trs anos: pelo menos
dez espcies; c) aps seis anos: pelo
menos dezoito espcies; d) aps oito
anos: pelo menos 24 espcies.
Art. 7o Da denominao de culti-
var a ser protegida, dever constar no
mnimo uma palavra e, no mximo,
trs, uma combinao alfanumrica,
uma combinao de palavras e letras,
ou uma combinao de palavras e n-
meros.
1o O titular do direito de prote-
o no poder utilizar, como denomi-
nao da cultivar, uma designao que:
a) no permita a identificao da
cultivar;
b) seja suscetvel de induo a
erro ou a confuso quanto origem,
procedncia, s caractersticas, ao va-
lor ou identidade da cultivar, ou
quanto identidade do obtentor;
c) seja idntica ou possa confun-
dir-se com outra denominao que
designe uma cultivar preexistente de
uma mesma espcie botnica ou de
uma espcie semelhante;
d) seja idntica ou possa confun-
dir-se com outra designao sobre a
qual um terceiro possua direito de
proteo anterior;
e) seja contrria moral e aos bons
costumes;
f) se refira unicamente a atributos
comuns de outras cultivares da mesma
espcie; g) conste de um nome bot-
nico ou comum de um gnero ou
espcie;
h) sugira que a cultivar derive de
outra cultivar ou com essa esteja rela-
ci onada, quando este fato no
corresponder realidade;
i) inclua termos como: variedade,
cultivar, forma, hbrido, cruzamento ou
tradues dos mesmos;
j) por motivos distintos, no resul-
te como denominao genrica da cul-
tivar;
l) reproduza, no todo ou em parte,
marca de produto ou servio vinculado
rea vegetal, ou de aplicao da
cultivar, ou marca notria.
2o Quando a cultivar j se
encontrar protegida ou em processo
de proteo em outro pas, dever ser
mantida a mesma denominao, salvo
quando esta for inadequada em face de
razes lingsticas ou por algum dos
motivos enumerados no pargrafo an-
terior, cabendo, neste caso, ao reque-
rente propor outra denominao, sob
pena de arquivamento do processo do
pedido de proteo.
Art. 8o A pessoa fsica ou jurdica
que produzir para fins comerciais, ven-
der, oferecer venda, reproduzir, im-
portar, exportar, bem como embalar
ou armazenar para esses fins material
de propagao de cultivar protegida
ficar obrigada a utilizar a denominao
aprovada por ocasio da proteo da
mesma.
Pargrafo nico. Para os efeitos
do caput deste artigo, a denominao
da cultivar protegida poder ser associ-
ada a uma marca industrial ou comerci-
al ou a um nome comercial ou ainda a
uma denominao similar, desde que
seja facilmente reconhecida e devida-
mente autorizada pelo titular da referi-
da cultivar.
Art. 9o Durante o prazo de prote-
o da cultivar o titular deve garantir
que a cultivar protegida permanea
conforme sua descrio, aps reprodu-
es ou multiplicaes sucessivas ou,
quando o mesmo haja definido um
ciclo particular de reprodues ou
multiplicaes, ao final de cada ciclo.
Art. 10. O documento original de
transferncia inter vivos da titularidade
da proteo de cultivar conter a qua-
lificao completa do cedente e do
cessionrio, bem como das testemu-
nhas e a indicao precisa da cultivar
protegida. Captulo II DAS DISPOSI-
ES ESPECFICAS Seo I Do Pedido
de Proteo de Cultivar
Art. 11. Somente ser aceito pe-
dido de proteo para nova cultivar ou
para cultivar essencialmente derivada
na hiptese de o SNPC ter, previamen-
te, divulgado as espcies vegetais e
seus respectivos descritores mnimos.
Pargrafo nico. Aplica-se, tam-
bm, o disposto no caput s cultivares
passveis de proteo, de que trata o
art. 4o, 1o, da Lei no 9.456, de 1997.
Art. 12. O pedido de proteo de
cultivar dever ser apresentado em
formulrio prprio, a ser estabelecido
pelo SNPC.
Pargrafo nico. Quando se tratar
de pedido de proteo de cultivar es-
sencialmente derivada, o interessado
dever, sem prejuzo das exigncias
previstas no art. 14 da Lei no 9.456, de
1997, indicar, alm da origem gentica
prevista no seu inciso III, a condio de
essencialmente derivada.
Art. 13. O pedido de proteo de
cultivar ser apresentado ao SNPC, que
far a verificao formal preliminar
quanto existncia de sinonmia e, se
inexistente, o protocolizar, desde que
devidamente instrudo.
Art. 14. Do protocolo do pedido
de proteo de cultivar constaro a
data e a hora do registro, o nmero de
apresentao do pedido, o nome e
endereo completo do interessado e
de seu procurador, se houver, para fins
de prevalncia da proteo solicitada.
Art. 15. Protocolizado o pedido
de proteo de cultivar, proceder-se-
a anlise para verificao das exignci-
as legais e tcnicas, notadamente quan-
to aos descritores indicativos das carac-
tersticas de DHE, comprovao da
efetivao de testes e ensaios com a
cultivar, dentre outros.
1o Caso seja detectada a simila-
ridade entre duas ou mais cultivares da
mesma espcie, no decorrer da anlise
do processo, prevalecer a prioridade
do pedido de proteo na forma
estabelecida no artigo anterior.
2o Quando o pedido de prote-
o no oferecer os elementos sufici-
entes para a completa anlise proces-
sual, o SNPC solicitar ao requerente
que, no prazo de sessenta dias, a contar
da data do recebimento da notificao,
apresente novo relatrio tcnico des-
critivo, bem como outras informaes
complementares.
3o Cumprida a exigncia pre-
vista no pargrafo anterior e persistin-
do dvidas relativas diferenciao da
cultivar, o SNPC poder realizar os
testes ou ensaios comparativos de cam-
po s expensas do requerente, caso
este concorde, ou determinar o arqui-
vamento do pedido.
4o No caso de diligncia, o
prazo para publicao do pedido de
proteo de cultivar, de at sessenta
dias, previsto no art. 16 da Lei no 9.456,
de 1997, passar a ser contado a partir
da data do pleno atendimento da cita-
da diligncia.
5o Publicado o pedido, correr
o prazo de noventa dias para apresen-
tao de eventuais impugnaes.
6o Recebida a impugnao, o
SNPC, no prazo de at trinta dias,
cientificar o requerente da proteo,
encaminhando-lhe cpia do inteiro teor
da impugnao, para manifestar-se no
prazo de trinta dias, a contar da data do
recebimento da notificao.
7o Recebida a defesa do reque-
rente em relao impugnao, ou
decorrido o prazo de trinta dias de que
trata o pargrafo anterior, sem manifes-
tao, o SNPC decidir pelo deferimen-
to ou no do pedido de proteo.
8o Da deciso que deferir ou
denegar o pedido de proteo, caber
recurso no prazo de sessenta dias a
contar da data de sua publicao, con-
forme o disposto no 7o do art. 18 da
Lei no 9.456, de 1997.
9o Recebido e protocolizado o
recurso, o SNPC instruir o processo,
submetendo-o ao Ministro de Estado
da Agricultura e do Abastecimento,
que decidir no prazo de sessenta dias,
a partir daquele registro.
Art. 16. Cabe ao SNPC fazer exi-
gncia, aps publicado o pedido de
proteo, para alterao do nome da
cultivar quando for:
I - constatado algum fato que teria
impedido a aceitao da denominao,
se identificado por ocasio da anlise
do pedido de proteo;
II - solicitado pelo titular do direito
ou seu representante legal, devida-
mente justificado; III - solicitado por
terceiro, caso seja constatada a exis-
tncia de um direito anterior em rela-
o denominao.
1o Deferido o pedido de altera-
o da denominao, de que tratam os
incisos II e III deste artigo, o SNPC
solicitar ao detentor do direito a indi-
cao de nova denominao, no prazo
de sessenta dias, a contar da data do
recebimento da notificao.
2o Caso a solicitao no seja
atendida no prazo estipulado no par-
grafo anterior, o pedido ser arquivado
e cancelado o Certificado Provisrio de
Proteo, se expedido.
3o Indicada nova denominao
para a cultivar, o pedido de proteo
ser republicado, restabelecendo-se,
em decorrncia, o prazo de noventa
dias para eventuais impugnaes, dan-
do-se cincia ao requerente.
Art. 17. O titular do direito de
proteo de cultivar prestar ao SNPC
todas as informaes e esclarecimen-
tos que lhe forem solicitados, inclusive
quanto inspeo dos meios adotados
para a conservao da amostra viva da
cultivar em seu poder.
1o As amostras fornecidas para
integrar a coleo de germoplasma de
cultivares, a que se refere o inciso IX do
art. 3o deste Decreto, s podero ser
utilizadas para fins de comprovao de
questes afetas proteo de cultiva-
res.
2o A manipulao e o exame
das amostras vivas a que se refere o
pargrafo nico do art. 22 da Lei no
9.456, de 1997, restringir-se-o com-
provao do teste de DHE da cultivar.
Art. 18. No pedido de proteo
de cultivar, o prazo de oferecimento
venda ou comercializao a ser obser-
vado, para os fins previstos no art. 6o
deste Decreto, ser o da primeira
operao comercial da cultivar em
referncia, como semente bsica,
registrada, certificada ou fiscalizada.
Art. 19. Sero vlidas, para
instruir processo administrativo de
pedido de proteo de cultivares, e
acompanhamento de sua tramitao,
as certides dos originais das procu-
raes pblicas, expedidas pelos
rgos competentes.
Seo II Do Cadastro Nacional
de Cultivares Protegidas - CNCP
Art. 20. O Cadastro Nacional
de Cultivares Protegidas - CNCP
conter, no mnimo:
I - o nmero do protocolo do
pedido de proteo; II - o nmero
do Certificado Provisrio de Prote-
o; III - o nmero do Certificado de
Proteo de Cultivar; IV - o nome da
espcie (nome botnico e nome
comum); V - a denominao da
cultivar; VI - a data do incio da
proteo; VII - a data do trmino da
proteo; VIII - o nome e endereo
do titular da proteo; IX - o(s)
nome(s) do(s) melhorista(s); X - o
nome e endereo do representante
legal; XI - o nome e endereo do
responsvel tcnico; XII - a indica-
o do pas de origem da cultivar;
XIII - as alteraes no certificado de
proteo; XIV - as averbaes.
Seo III Da Licena Compul-
sria
Art. 21. A licena compulsria
o instrumento utilizado pelo Po-
der Pblico para autorizar, a reque-
rimento de legtimo interessado, a
explorao de cultivar protegida,
independentemente da autorizao
do seu titular, por prazo de trs
anos, prorrogvel por iguais pero-
dos, sem exclusividade, e mediante
remunerao, na forma deste De-
creto.
1o Considera-se legtimo in-
teressado, para fins de requerer li-
cena compulsria, o produtor de
sementes como definido em lei,
desde que contra ele no exista
representao por infrao ordem
econmica, nos termos da Lei no
8.884, de 11 de junho de 1994.
2o A remunerao a que se
refere o caput ser arbitrada pelo
SNPC na falta de acordo entre o
titular de cultivar protegida e o reque-
rente da licena compulsria, tomando
por base percentuais livremente nego-
ciados segundo as prticas correntes
de mercado para a espcie.
Art. 22. O requerimento de licen-
a compulsria dever ser instrudo
com:
I - a qualificao do requerente; II
- a qualificao do titular do direito
sobre a cultivar; III - a denominao e
a descrio suficiente da cultivar; IV -
os motivos do requerimento, observa-
do o disposto no art. 28 da Lei no 9.456,
de 1997; V - prova escrita de que o
requerente esgotou todas as providn-
cias ao seu alcance, no sentido de
negociar proposta de licena volunt-
ria apresentada ao titular da cultivar ou
ao seu procurador; VI - prova de que o
requerente goza de capacidade finan-
ceira e tcnica para a explorao da
cultivar, consubstanciada em:
a) rea de sua propriedade ou
cooper ada; b) capaci dade de
beneficiamento de sementes; c) capa-
cidade de armazenamento; d) respon-
svel tcnico; e) laboratrio prprio ou
de terceiros para anlise de sementes;
f) rede de distribuio de sementes; g)
relao de clientes; h) relao descriti-
va das cultivares por ele produzidas e
comercializadas, por gnero ou esp-
cie vegetal; i) prova do seu registro,
como produtor de sementes, no Minis-
trio da Agricultura e do Abastecimen-
to; j) capital compatvel com os custos
da operao;
VII - outras provas exigidas em ato
especfico do Conselho Administrativo
de Defesa Econmica - CADE, obser-
vado, se for o caso, o disposto no art. 35
deste Decreto.
1o O requerente indicar, ain-
da, a existncia de licena voluntria
sobre a cultivar, concedida a terceiros,
e de ao judicial pendente, pertinen-
te ao mesmo assunto, se delas tiver
conhecimento.
2o dever do SNPC e do CADE
guardar sigilo, na forma da lei, sobre as
informaes prestadas pelo requeren-
te.
Art. 23. Recebido o requerimen-
to de licena compulsria, o Ministrio
da Agricultura e do Abastecimento, se
entender satisfatoriamente cumpridos
os requisitos do artigo anterior, deter-
minar:
I - a autuao do requerimento
com os anexos;
II - a elaborao de parecer tcni-
co pelo SNPC;
III - a intimao do titular da culti-
var e, quando couber, do titular de
licena voluntria, para que se mani-
festem, querendo, no prazo de dez
dias, a contar da data do recebimento
da intimao; IV - a publicao do
extrato do pedido de licena compul-
sria, para conhecimento e impugnao
de terceiros interessados, no prazo de
dez dias.
1o Expirado o prazo de dez dias
concedido ao titular da cultivar prote-
gida e ao titular de licena voluntria,
se houver, de que trata o inciso III
deste artigo, o processo, com ou sem
manifestao, ser encaminhado ao
CADE, instrudo com o parecer tcni-
co, na forma do artigo seguinte, no
prazo mximo de quinze dias.
2o Se o requerimento no esti-
ver suficientemente instrudo com os
documentos que comprovem as exi-
gncias previstas no artigo anterior, o
mento poder determinar que o re-
querente complemente a documenta-
o especificada, no prazo de quinze
dias, a contar da data do recebimento
da notificao, sob pena de arquiva-
mento do pedido.
Art. 24. O parecer tcnico do
SNPC sobre o requerimento da licena
compulsria conter:
I - relatrio sobre o requerimento
que, alm de observar o disposto no
art. 22 deste Decreto, indicar a exis-
tncia, se for o caso, de pedidos ante-
riores de licena compulsria;
II - avaliao objetiva das conse-
qncias adversas ao comrcio que a
licena deseja reparar;
III - proposta de deferimento ou
indeferimento da licena compulsria,
com indicao objetiva dos motivos da
recomendao.
Pargrafo nico. O SNPC, quando
solicitado, prestar ao CADE as infor-
maes adicionais necessrias instru-
o do processo de licena compuls-
ria.
Art. 25. Se no houver necessida-
de de diligncias complementares, o
CADE apreciar o requerimento da li-
cena compulsria no prazo mximo
de trinta dias.
Art. 26. Salvo por motivos legti-
mos, a juzo do CADE, com base no
parecer tcnico do SNPC, a licena
compulsria caducar, independente-
mente de notificao se, no prazo de
seis meses, contado da publicao da
concesso, o requerente no adotar as
provi dnci as necessri as sua
implementao.
Pargrafo nico. O prazo para
implementao do disposto neste arti-
go poder ser prorrogado uma vez, a
pedido do interessado, devidamente
justificado.
Art. 27. Aplica-se licena com-
pulsria, no que couber, as disposies
previstas na Lei no 9.279, de 14 de
maio de 1996.
Seo IV Do Uso Pblico Restrito
Art. 28. A cultivar protegida ser
declarada de uso pblico restrito, ex
officio, pelo Ministro de Estado da Agri-
cultura e do Abastecimento, com base
em parecer tcnico dos respectivos
rgos competentes, no exclusivo in-
teresse pblico, para atender s neces-
sidades da poltica agrcola, nos casos
de emergncia nacional, abuso do po-
der econmico, ou outras circunstnci-
as de extrema urgncia e em casos de
uso pblico no comercial.
1o Considera-se de uso pblico
restrito a cultivar que, por ato do Minis-
tro de Estado da Agricultura e do Abas-
tecimento, puder ser explorada direta-
mente pela Unio Federal ou por ter-
ceiros por ela designados, sem exclusi-
vidade, sem autorizao de seu titular,
pelo prazo de trs anos, prorrogvel
por iguais perodos, desde que notifi-
cado e remunerado o titular na forma
deste Decreto.
2o A notificao de que trata o
pargrafo anterior ser expedida ime-
diatamente aps a publicao da de-
clarao de uso pblico restrito e con-
ter no mnimo:
a) razes da declarao; b) relao
de pessoas fsicas ou jurdicas autoriza-
das a explorar a cultivar, contendo o
nome, o endereo e o nmero do CPF-
Cadastro de Pessoa Fsica ou CGC-
Cadastro Geral de Contribuinte junto
ao Ministrio da Fazenda; c) remunera-
o pertinente; d) volume mnimo anual
de material de reproduo ou multipli-
cao vegetativa da cultivar, necess-
rio sua explorao.
3o A remunerao pela explo-
rao de cultivar protegida, declarada
de uso pblico restrito, ser calculada
tomando-se por base os preos de
mercado para a espcie, praticados na
data da declarao, levando-se em con-
siderao os fatores que a determina-
ram.
Seo V Dos Servios Pblicos
Art. 29. Os servios de que trata
o art. 53 da Lei no 9.456, de 1997,
sujeitos remunerao pelo regime de
preos de servios pblicos especfi-
cos, compreendem:
I - pedido de proteo; II - anui-
dade; III - transferncia de titularidade;
IV - outras alteraes no certificado de
proteo; V - testes de laboratrio; VI -
ensaios comparativos de campo sobre
a DHE da cultivar; VII - certides.
Art. 30. Compete ao Ministrio
da Agricultura e do Abastecimento fi-
xar, arrecadar e aplicar os valores de-
correntes da prestao dos servios de
que trata o artigo anterior, bem como
promover as suas atualizaes.
Pargrafo nico. O produto da
arrecadao, a que se refere o caput,
ser aplicado na capacitao de pesso-
al e na implantao, aparelhamento,
aperfeioamento e execuo dos ser-
vios de que trata este Decreto.
Seo VI Da Comisso Nacional de
Proteo de Cultivares - CNPC
Art. 31. Fica criada, no Ministrio
da Agricultura e do Abastecimento, de
carter consultivo e de assessoramento
ao SNPC, a Comisso Nacional de Pro-
teo de Cultivares - CNPC, sob a pre-
sidncia do Titular do SNPC, composta
de um representante de cada rgo e
entidade a seguir discriminados:
I - Secr et ar i a de Def esa
Agropecuria, do Ministrio da Agricul-
tura e do Abastecimento; II - Ministrio
das Relaes Exteriores; III - Ministrio
da Indstria, do Comrcio e do Turis-
mo; IV - Ministrio da Cincia e
Tecnologia; V - Ministrio do Meio
Ambiente, dos Recursos Hdricos e da
Amaznia Legal; VI - entidade nacional
que congregue os Obtentores Vege-
tais; VII - Associao Brasileira dos Pro-
dutores de Sementes; VIII - Organiza-
o das Cooperativas Brasileiras; IX -
Confederao Nacional da Agricultura;
X - Confederao Nacional dos Traba-
lhadores na Agricultura; XI - Conselho
Federal de Engenharia, Arquitetura e
Agronomia. 1o Os membros da CNPC
sero designados pelo Ministro de Esta-
do da Agricultura e do Abastecimento,
para mandato de dois anos, permitida
uma reconduo.
2o No prazo de trinta dias, aps
a publicao deste Decreto, os rgos
e entidades relacionados no caput des-
te artigo indicaro os representantes,
com seus respectivos suplentes, para
compor a CNPC.
3o A comisso se reunir com a
presena da maioria simples de seus
integrantes.
4o As decises da comisso
sero tomadas pela maioria dos mem-
bros presentes, cabendo ao Presidente
o voto de qualidade.
5o Os membros da CNPC no
sero remunerados, sendo os servios
por eles prestados considerados, para
todos os efeitos, como relevantes em
prol do desenvolvimento do Pas.
6o Os custos de deslocamento
e hospedagem decorrentes da partici-
pao dos membros nas reunies da
CNPC correro conta dos respectivos
rgos e entidades representadas.
7o O SNPC prestar apoio admi-
nistrativo e operacional CNPC.
8o A CNPC ter prazo de ses-
senta dias, a contar da sua constituio,
para elaborar o seu regimento interno,
que ser aprovado mediante portaria
do Ministro de Estado da Agricultura e
do Abastecimento.
Art. 32. CNPC compete:
I - manifestar-se sobre as matrias
submetidas sua apreciao pelo SNPC;
II - sugerir normas e regulamentos
sobre proteo de cultivares; III - as-
sessorar o SNPC nas matrias relaciona-
das proteo de cultivares e, em
especial, sobre convnios e acordos
nacionais e internacionais. CAPTULO
III DAS DISPOSIES FINAIS
Art. 33. Para os efeitos da indeni-
zao prevista no art. 37 da Lei no
9.456, de 1997, a remunerao do
titular ser calculada com base nos
preos de mercado para a espcie,
praticados poca da constatao da
infrao, sem prejuzo dos acrscimos
legais cabveis.
Art. 34. Para fins de abertura de
pedido de proteo de cultivares, fi-
cam divulgadas as seguintes espcies
vegetais: algodo, arroz, batata, feijo,
milho, soja, sorgo e trigo, cujos
descritores mnimos esto definidos na
forma dos Anexos I a VIII deste Decre-
to.
Pargrafo nico. A divulgao das
demai s espci es vegetai s, seus
descritores mnimos e alteraes, se
necessrias, sero feitas pelo SNPC.
Art. 35. Os Ministros de Estado da
Agricultura e do Abastecimento e da
Justia, no mbito das respectivas atri-
buies, disporo, de forma comple-
mentar, sobre o procedimento e as
condies para apreciao e conces-
so da licena compulsria, observadas
as exigncias procedimentais ineren-
tes ampla defesa e proteo ao
direito de propriedade institudo pela
Lei no 9.456, de 1997.
Art. 36. A estrutura do SNPC ser
definida na estrutura regimental do
mento.
Pargrafo nico. O Ministro de Es-
tado da Agricultura e do Abastecimen-
to, no prazo de sessenta dias, a contar
da data de publicao deste Decreto,
aprovar o regimento interno do SNPC,
bem como promover a reorganizao
dos setores incumbidos das atividades
de sementes e mudas, inclusive os
inerentes aos laboratrios de anlise de
sementes, de forma a compatibiliz-los
com a estrutura do SNPC.
Art. 37. Fica o Ministro de Estado
da Agricultura e do Abastecimento au-
torizado, observado, se for o caso, o
disposto no art. 35, a editar normas
complementares necessrias execu-
o deste Decreto.
Art. 38. Este Decreto entra em
vigor na data de sua publicao.
Braslia, 5 de novembro de 1997;
176 da Independncia e 109 da Re-
pblica.
Fernando Henrique Cardoso
Arlindo Porto

Biotecnologia Ciência & Desenvolvimento - Nº 3

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