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MAESTRA EN CIENCIAS
REA ACUACULTURA
ESTIMACIN DE LOS REQUERIMIENTOS ALIMENTICIOS PARA E L
CRECIMIENTO DEL BRAQUlPODO Artemia franciscana (Kellog, 1906)
ALIMENTADO CON LA DIATOMEA Chaetoceros muelleri (Lemmerman)
ORIENTADA A LA PRODUCCIN MASIVA .
T E S I S
QUE PARA OBTENER EL GRADO DE
MAESTRA EN CIENCIAS
REA ACUACULTURA
PRESENTA
IGNACIO PINZN GUTIRREZ
ASESORES
Dr. Manuel Garca Ulloa Gmez
M.C. Alfredo Mena Herrera
Dr. Manuel Patio Barragn
M.C. Sonia I . Quijano Scheggia
Manzanillo, Colima, Mxico, Julio de 2000
UNIVERSIDAD DE COLIMA
Facultad de Ciencias Marinas
Manzanillo, Col., 15 de Junio de 2000
M en C. Sergio Alberto Lau Cham
Director de la Facultad de Ciencias Marinas
Pr e s e n t e .
Los que suscriben, Sinodales de la Comisin nombrada para examinar el
manuscrito de Tesis titulado:
Estimacin de l os requerimientos alimenticios para el crecimiento del
branquiopodo Artemia franciscana (Kellog, 1906) alimentado con la
diatomea Chaetoceros muelleri (Lemmerman) orientada a la produccin
masiva.
que presenta el candidato al Grado Acadmico de Maestra en Ciencias: rea
Acuacultura, el
C. IGNACIO PlNZN GUTIRREZ
Manifiestan su aceptacin a dicho trabajo en virtud de que satisface l os
requisitos sealados por las disposiciones reglamentarias y que se han hecho
las correcciones que cada uno en particular consider pertinentes.
A t e n t a me n t e
Sinodal suplente
, /*
M. C. Sonia I. QuijanoScheggia
kilmetro 20 I Carretera Manzanillo - Barra de Navidad / A P. 9-21 / Telefax 01 (333) 5 00 01 / Colima. Mxico / E-mail: facimar@volcan.ucol.mx
AGRADECIMIENTOS
A la Universidad de Colima por mi formacin acadmica en el rea de
Acuacultura.
A todo el equipo de trabajo del Laboratorio de Ciencias Marinas de la Universidad
Autnoma de Guadalajara, por el gran apoyo recibido gracias.
Ing. Daniel E. Godnez Siordia
Sria. Sofa Bartoleo
Sr. Jos Mitoma Flores.
Sr. Juan Ramn Almada Mitoma.
Sr. Ramn Almada Hernndez.
Al Dr. Manuel Garca Ulloa Gmez por todo el apoyo brindado en la direccin de la
tesis, por su ejemplo y dedicacin.
A mis sinodales por sus valiosas sugerencias al trabajo:
M. en C. Alfredo Mena Herrera
Dr. Manuel Patio Barragn
M. en C. Sonia I. Quijano Scheggia
A mis compaeros de generacin.
DEDICATORIA
A Dios por esto y todo lo que me a dado en la vida.
Con mucho amor y cario a mi esposa e hijos.
Rosalva Lpez Sotelo
Francisco Javier, Liliana araceli, Juan Ignacio.
A mi madre con todo cario.
Rogelia Gutierrez Ramirez
A mis Hermanos con cario.
Bertha, Jos, Chabelo, Mauricio, Mara, Victoria, Jess.
A mis suegros y cuados.
INDICE
PAG
1
INTRODUCCION
ANTECEDENTES
5
OBJETIVO GENERAL 15
OBJETIVOS PARTICULARES
15
HIPOTESIS
16
MATERIALES Y METODOS 17
A)
Origen de la Artemia y decapsulacin
17
B)
Tratamiento de1 agua y cultivo de la microalga
17
C)
Mantenimiento de1 cultivo madre de Artemia
18
D) Condiciones experimentales para determinar los indices
de filtracin e ingestin de Artemia en tubos de ensayo
19
E)
Condiciones experimentales para determinar los indices
de filtracin e ingestin de Artemia en cultivo masivo
a diferentes densidades 20
F)
Evaluacin de 1os indices de filtracin e ingestin de
A. franciscana alimentada con Ch. muelleri
22
G)
Evaluacin de parametros biolgicos
23
1) Fase experimental en tubos de ensayo 23
2) Fase experimental en cultivo masivo 24
3) Evaluacin estadstica 25
RESULTADOS
A) Fase experimental en tubos de ensayo 26
B) Cultivo masivo de A. franciscana alimentada con Ch. muelleri y
cultivada a diferentes densidades 29
DISCUSIONES
CONCLUSIONES
BIBLIOGRAFIA
3 6
45
4 7
Lista de Tablas
Tabla 1, Valores promedio ( desviacin estndar) de filtracin
(ml/Art/h) de A. franciscana mantenida en tubos de ensayo y
alimentada con Ch. muelleri. (Los nmeros I a V representan las
replicas utilizadas en esta fase experimental) 2 6
Tabla 2. Valores promedio ( desviacin estndar) de ingestin
(cl. X 10
4
Art./h) de A. franciscana mantenida en tubos de ensayo y
alimentada con Ch. muelleri. (Los nmeros I a V representan las
rplicas utilizadas en esta fase experimental) 27
Tabla 3. Longitud promedio ( desviacin estndar) de A.
franciscana mantenida en tubos de ensayo y alimentada con
Ch. muelleri. (Los nmeros de1 I al V representan las replicas
Utilizadas en esta fase experimental). 2 8
Tabla 4. Valores promedio ( desviacin estndar, n=3) de filtracin
(ml/Art/h) de A. franciscana alimentada con Ch. muelleri
en condiciones de cultivo masivo y a diferentes densidades: I= 1,000
Art/1; II= 3,000 Al-t/1; III= 5,000 Art/1; IV= 7,000 Art/1. 3 0
Tabla 5. Valores promedio ( desviacin estndar, n=3) de ingestin
(cl X 10
4
/Art./h) de A. franciscana alimentada con Ch. muelleri
en condiciones de cultivo masivo y a diferentes densidades: I= 1,000
At-t/l; II= 3,000 Art/l; III= 5,000 Art/l; IV= 7,000 Art/l. 3 1
Tabla 6. Longitud promedio ( desviacin estndar, n=3) de A.
franciscana alimentada con Ch. muelleri en condiciones de cultivo
masivo y a diferentes densidades: I= 1,000 Art/l; II= 3,000 Art/l;
III= 5,000 Al-t/l; IV= 7,000 Art/l. 3 2
Lista de Figuras
Fig. 1. Produccin de recursos acuticos generados por la industria
de La acuacultura reportadas por FAO desde 1990 hasta 1997.
Los valores en cada barra horizontal representan millones de
toneladas (Aquaculture Magazine,2000). 1
Fig. 2. Criterios de seleccin para una dieta en beneficio de la
larva predadora (Lger et al., 1986). 5
Fig. 3. Principio de la tcnica de bioencapsulacin de A.
franciscana en la que varios ingredientes esenciales pueden ser
Incorporados a la dieta de1 predador. 11
Fig. 4. Relacin entre 1os valores promedio de ingestion (y)
y filtracin (x) de A. franciscana alimentada con la microalga
Ch. muelleri y cultivada en tubos de ensayo. 28
Fig. 5. Relacin entre 1os valores promedio de ingestin (y)
y longitud (x) de A. franciscana alimentada con Ch. muelleri
cultivada en tubos de ensayo. 2 9
Fig. 6. Correlacin entre 1os valores promedio de filtracin
(ml/Art/h) e ingestin (cl. X 10
4
/Art./h) de A.franciscana
(n=3) alimentada con la microalga Ch. muelleri en cultivo
masivo (A= 1,000 Art/l; B= 3,000 Art. /l; C= 5,000 Art/l;
D= 7,000 Art/l.
Fig. 7. Correlacin promedio entre la longitud total ( ) e ingestin
(cl. X 10
4
/Art./h) de A. franciscana alimentada con la microalga
Ch. muelleri en cultivo masivo (A= 1,000 Art/l; B= 3,000 Art. /l;
C= 5,000 Art/l; D= 7,000 Art/l ( n=3 por tratamiento).
33
34
Fig. 8. Porcentaje de sobrevivencia (%) y produccin de biomasa
promedio (g) de A.franciscana alimentada con Ch. muelleri a
diferentes densidades: I= 1,000 Art/l; 2= 3,000 Art. /l;
3= 5,000 Art/l; 4= 7,000 Art/l ( n=3 por tratamiento). 35
Lista de Fotos
Foto 1. Adulto macho de Artemia franciscana
3
Foto 2. Larva de1 sargo europeo Sparus aurata, alimentandose de
nauplios de A. franciscana 7
Foto 3 Dietas inertes micropulverizadas derivadas de subproductos
agricolas , levadura de pan, microalgas vivas y secas, para la
alimentacin de organismos filtradores. 8
Foto 4. Chaetoceros sp., una de las microalgas mayormente
Utiiizadas en acuacultura 11
Foto 5. Contenedor experimental para 1os ensayos de filtracin e
ingestin a nivel de cultivo masivo 22
RESUMEN
Se estim el requerimiento alimenticio de Artemia franciscana alimentada con la microalga
Chaetoceros muelleri, por medio de la obtencin de los ndices de filtracin e ingestin del
branquipodo bajo condiciones experimentales y de cultivo masivo a diferentes densidades.
Se sembraron 5 larvas Instar II/ml en tubos de ensayo y la microalga a una densidad de
1.2X106 cl/ml. Tanto la filtracin como la ingestin fueron registradas 2 horas despus de
la siembra y este procedimiento fue realizado los primeros 10 das una vez que las larvas
nauplio de Artemia alcanzaron la edad de 48 horas despus de la eclosin. El ensayo se
repiti dos veces y se usaron 6 rplicas por ensayo. Los valores mximos de filtracin e
ingestin promedio (al da 10 experimental) fluctuaron desde 0.051 hasta 0.079 ml/ind./h, y
desde 8.88 hasta 11.38 X 104 cl/ind./h, respectivamente. La misma densidad de Ch.
muelleri y condiciones experimentales fueron utilizadas para el ensayo en cultivo masivo
pero las densidades de Artemia se ajustaron a 1, 3, 5 y 7 ind./ml. En este caso, el
tratamiento con menor densidad obtuvo 1os valores ms altos de filtracin e ingestin
durante todos 1os das experimentales, observando una relacin inversa entre la densidad y
1os ndices alimenticios. La longitud promedio de Artemia obtenida en el presente ensayo
(< 4,300 ) sugiere que la densidad de la microalga se encontro por debajo de 1os
requerimientos alimenticios para promover el ptimo crecimiento y desarrollo de A.
franciscana, aunque es necesario tambien considerar aspectos relacionados con la
morfologa y digestibilidad de Ch. muelleri para la correcta interpretacin de resultados.
La diferencia en 1os resultados obtenidos en las dos etapas de los experimento pudieron
haberse debido principalmente a las condiciones de cultivo especficas en cada ensayo. De
acuerdo a las condiciones experimentales en este trabajo, una Artemia de 11 das de edad
consumi 50,000 clulas de Ch. muelleri por hora.
ABSTRACT
The food requirement of Artemiafranciscana fed on the microalgae Chaetoceros muelleri
was estimated by using the filtration and ingestion rates, under experimental and massive
culture conditions at different densities. Artemia and algae densities in small glass tubes
were adjusted at 5/ml and 1 .2X106/ml, respectively, in which the filtration and ingestion
indexes were registered after 2 hours. This routine was applied to animals from two to
eleven days old. The assay was performed twice with 6 replicates each. Mean higher
filtration and ingestion values (at the tenth experimental day) varied from 0.051 to 0.079
ml/Art/h, and from 8.88 to 11.38 X104 cells/Art/h, resp. The same culture conditions were
used for the massive culture phase, but Artemia densities were adjusted at 1, 3, 5 and 7/ml.
In this case, the group with the lowest density showed the higher fluctuation and ingestion
indexes during all the experimental days. There was an inverse relationship between the
density and the feed rates. The mean length of Artemia in this experiment (< 4,300 )
suggests that the algae density was below the optimum level for the growth and
development of A. franciscana, although algae morphology and digestibility should be
considered for better results interpretation. Differences in results between the two
experiments may be due to the specific culture conditions. According to the experimental
conditions used in this work, a 1l-days old Artemia consumed 50,000 Ch. muelleri cells per
hour.
I. INTRODUCCION
Las ltimas estadisticas sobre la produccin de organismos acuticos reportadas por la
Organizacin de Alimentos y Agricultura (FAO, por sus siglas en ingls) indican un
volumen de cosecha de 28.8 millones de toneladas en 1997 (Fig. l), y estima que tal
cantidad alcanzar 1os 37 millones de toneladas en el ao 2000 (Aquaculture Magazine,
2000). Dicho incremento en la produccin representa cerca de1 35% de1 volumen total
estimado para la industria pesquera, considerando un modesto indicador de solo 3.7% en la
prediccin anual.
Fig. 1. Produccin de recursos acuticos generados por la industria de la acuacultura
reportadas por FAO desde 1990 hasta 1997. Los valores en cada barra horizontal
representan millones de toneladas (Aquaculture Magazine, 2000).
En gran medida, la produccin de crias, huevecillos, esporas o semillas de calidad y en
cantidades suficientes y constantes para cubrir la creciente demanda de las unidades de
engorda en todo el mundo, ha significado un importante bastin en tal acelerado
crecimiento de la industria. Sin embargo, en 1os ltimos aos ha sido tambin un factor
muy crtico en la sustentabilidad de la produccin de crias, reconociendose como uno de 1os
cuellos de botella de mayor impacto en la acuacultura (Sorgeloos y Lger, 1992). Una de
las principales razones de lo anterior recae en el aspecto nutricional, en el que la produccin
de alimento vivo juega un papel primordial y la investigacin en este rubro se convierte en
una herramienta imprescindible para el mantenimiento de la acuacultura como industria
productora de alimento.
En la actualidad, tanto a nivel industrial como experimental, la produccin de crias de
larvas y peces y crustaceos sigue condicionada por la alimentacin basada en presas vivas
(Jones y Houde, 198 1) entre las que destaca el camarn de salmuera, Artemia, como la ms
utilizada, sobre todo en su fase de larva. El uso de Artemia como alimento vivo para
organismos acuticos a crecido exponencialmente de tal manera que sus primeros estados
larvarios constituyen no solo el mejor, sino algunos casos, el nico alimento vivo
disponible para las larvas de peces y crustaceos cultivados (Bardach et al., 1966; Goodwin,
1976; Kinne y Rosenthal, 1977). Sin embargo, la produccin de quistes de Artemia en 1os
ultimos aos, ha sido afectada por fenmenos naturales como El Nio y factores
relacionados a la captura de1 recurso de1 Gran Lago Salado, Utah, E.U.A. -embalse que que
surte cerca de1 95% de quistes para acuacultura en el mundo (Garcia-Ulloa, 1998a)-, por lo
que algunas de las principales altemativas adems de probar otros organismos vivos como
alimento, se refieren a la produccin de biomasa de Artemia en estadios juveniles y adultos
para posteriormente ser procesados de acuerdo a las necesidades particulares, y la
optimizacin de las tcnicas de decapsulacin, bioencapsulacin y uso comn de 1os
nauplios.
El empleo de biomasa de adultos y preadultos de Artemia en la acuacultura es relativamente
menor si lo comparamos con la utilizacin de 1os nauplios (Foto 1). En 1os ltimos aos se
han desarrollado tcnicas de cultivos que permiten cosechar grandes cantidades de biomasa
de Artemia adulta en volmenes reducidos de agua con gastos relativamente bajos aunque
superiores a mtodos extensivos. Adems, este tipo de produccin presenta ventajas en
primera instancia, por la obtencin de cantidades preestablecidas de biomasa en el
momento que se requiera sin depender de1 medio natural y en Segundo lugar, por obtener
organismos de mayor calidad nutricional (Amat et al., 1992).
Foto 1. Adulto macho de Artemia franciscana.
Uno de 1os principales factores biticos que influyen en el xito de su cultivo en forma
intensiva, se refiere a su nutricin. Actualmente, son varias las dietas que son usadas para
tal proposito, las cuales pueden diferenciarse en dietas vivas (microalgas, levaduras,
protozoarios y bacterias) y dietas inertes (microalgas secas, microparticulas, microcapsulas,
emulsiones y harinas derivadas de subproductos agricolas). Dado que Artemia es un
consumidor obligatorio y no selectivo de partculas (Dobbeleir et al., 1980; en: Sorgeloos et
al., 1986) es necesario considerar la cantidad de alimento que ingiere diariamente para
estimar su requerimiento alimenticio. Por otro lado, siendo un organismo filtrador captura
constantemente partculas nutritivas de1 medio, las cuales deben medir menos de 50 micras
de dimetro (Dobbeleir et al., 1980; en: Sorgeloos et al., 1986).
La herramienta ms til para estimar la cantidad de alimento necesaria para realizar las
necesidades metablicas de 1os organismos planctnicos que dependen de un sistema de
filtracin para alimentarse, es la obtencin de 1os indices de filtracin e ingestin (Tizol et
al., 1994) 1os cuales son utilizados para conocer la cantidad de alimento ingerido en un
lapso relativo de tiempo. Por esto, es necesario estimar la cantidad de alimento diario de
Artemia de tal manera que no carezca pero al mismo tiempo no exista en exceso, pues
ambas situaciones limitan su crecimiento y desarrollo pudiendo colapsar su cultivo antes de
que 1os organismos alcancen su estado adulto.
ll. ANTECEDENTES
Desde que Seale (1993) y Rollefsen (1939) descubrieron que las larvas de Artemia son un
buen alimento para estadios tempranos de peces, este crustaceo es utilizado como presa
viva para muchas especies acuticas. Considerando 1os criterios para la seleccin de un
alimento en beneficio del depredador (Fig. 2) sealados por Lger et al. (1986), es
indispensable conocer las caractersticas biomtricas y cualidades fisicas y nutritivas de la
dieta, las cuales deben ser lo suficientemente completas para las especies que se
alimentarn de ella (Sorgeloos, 1980).
CRITERIOS DE SELECCIN DE UNA
DIETA EN BENEFICIO DE LAS LARVAS
FISICOS:
Pureza
Disponibilidad
Aceptabl e:
Capturable
Palatable o sabor
Ingerible
NUTRICIONALES:
Requerimientos
nutricionales y energticos
completos
Digerible
Fig. 2. Criterios de seleccin para una dieta en beneficio de la larva predadora (Lger et
al., 1986).
Como algunas de las propiedades biolgicas que contribuyen al aumento en el uso de este
branquipodo en la alimentacin larvaria se mencionan las siguientes: Artemia es un
alimento disponible en cualquier etapa de su vida ya que tanto sus quistes decapsulados
como adultos, son ampliamente utilizados; es de fcil cultivo y tiene alta resistencia al
manejo, debido a que vive en amplios rangos de salinidad, oxgeno y temperatura; adems,
es un alimento vivo de tamao adecuado para la mayoria de 1os organismos acuticos en
sus primeros estados de vida (Castro et al., 1993)
Los nauplios de Artemia son bien aceptados por 1os depredadores por su brillante color y
permanente movilidad, caracteristicas que 1os hacen visibles (Foto 2.). La palatabilidad, es
adecuada para 1os depredadores, por lo que ha menudo Artemia se usa como atrayente
gustativo en las dietas artificiales. Artemia es digerible casi en un 83% en carpas y 89%
para la trucha arcoiris (Leger et al., 1986). La buena calidad de la protena y su alto
aprovechamiento, favorecen el crecimiento y la reproduccin de las especies depredadoras.
El contenido energtico de Artemia influye en la velocidad de desarrollo de las larvas
cultivadas. En cuanto al contenido energtico, la Artemia adulta viva alimentada con algas
contiene 5.854 cal/g mientras que en la misma biomasa, pero congelada, contiene 5.100
cal/g, es decir 0.754 cal/g menos. Por lo que se sabe, el contenido energetico de Artemia
adulta es 0.40 cal/g mayor que el de 1os nauplios, aunque a un costo ms alto por el
alimento que consume (Lger et al., 1986).
En cuanto a la calidad nutritiva, Artemia contiene la mayora de 1os macro y
micronutrientes que requieren las especies marinas y dulceacuicolas. Sin embargo, existen
diferencias en el contenido de protenas, lipidos y carbohidratos entre las diversas cepas de
este pequeo crustaceo. El contenido de aminocidos de adultos y nauplios es ms estable
debido probablemente, a que es una caracterstica controlada genticamente (Castro et al.,
1993). Ambos estados de desarrollo contienen la mayoria de 1os aminocidos que son
esenciales en la nutricin de peces y crustaceos. Sin embargo, Artemia como otros
organismos planctnicos
Foto 2. Larva de1 sargo europeo Sparus aurata, alimentandose de nauplios de A.
franciscana.
(rotferos, coppodos, cladoceros y microalgas), no contienen la totalidad de varios
compuestos como 1os cidos grasos esenciales, ni en las cantidades suficientes para las
especies cultivadas, por lo que se recomienda mejorar la calidad de este organismo
mediante tcnicas de enriquecimiento (Lger et al., 1986), o suministrarla junto con otros
organismos planctnicos para que en su conjunto, provean de 1os cidos grasos
polinsaturados que requiere el depredador.
De las dietas que mayormente se utilizan en la produccin de biomasa de Artemia se
mencionan las siguientes:
a) Los desechos derivados de productos de la industria agricola son usados como alimento
para larvas y juveniles de Artemia (Garcia Ulloa, 1998b). El salvado o cascarilla de arroz,
soya, maz y otros subproductos agrcolas (Foto 3) han sido reportados como fuentes
alimentarias apropiadas para cultivarla a altas densidades (Dhont et al., 1993).
Foto 3. Dietas inertes micropulverizadas derivadas de subproductos agrcolas, levadura de
pan, microalgas secas y vivas, para la alimentacin de organismos filtradores.
Bossuyt y Sorgeloos (1980) establecieron una tecnologa de produccin con la cual es
posible producir dos kilos de biomasa en 1,000 litros de agua despues de dos semanas,
manteniendo la temperatura de cultivo a 25C y alimentado con harina de arroz. Dobbeleir
et al. (1980: en Sorgeloos et al., 1986) examinaron el comportamiento de cultivo a altas
densidades probando harina de trigo, soya y arroz, concluyendo que la harina de trigo como
dieta nica,no es apropiada debido a su contenido bioquimico. Estos autores lograron
sobrevivencias mayores al 50% en contenedores experimentales de 1,000 ml de capacidad,
pero una vez que se realize en cultivo de tanques de produccin masiva, la sobrevivencia se
redujo hasta menos de 10% en el caso de la harina de trigo, pero no as en animales
alimentados con harina de soya, para 1os cuales se registr una sobrevivencia de1 80%. La
principal ventaja que ofrecen estos productos es su bajo costo combinado con la
disponibilidad a nivel mundial (Lavens y Sorgeloos, 1991), sin embargo y al igual que las
microalgas secas y las microcpsulas, se requiere de un cuidado extra durante el tiempo de
cultivo, ya que la calidad de1 agua puede ser facilmente deteriorada. Adems, las partculas
deben ser generalmente homogenizadas en cuanto a su tamao debido a que el producto
derivado de1 tratamiento de la micropulverizacin, no produce partculas de1 mismo
dimetro. Por ello, la preparacin de estas soluciones alimenticias debe realizarse
diariamente.
b) Las levaduras de pan (Foto 3) de cerveza y de origen marino que son usadas para
alimentar Artemia y otros organismos (Sorgeloos y Lger, 1992)-, presentan varias ventajas
como su pequeo tamao (< 20 micras), su pared celular que evita la solubilidad de 1os
nutrientes y su gran disponibilidad en el mercado (Litchfield, 1980). Coutteau et al. (1990)
recomiendan el uso de levaduras marinas siempre y cuando estas Sean tratadas por una
sustancia enzimatica (Novozim 234) que las convierta en partculas ms digeribles, sin que
al mismo tiempo pierdan su potencial nutritivo.
c) El uso de microcpsulas ha sido tambin reportado para engordar y mantener Artemia
(Kanazawa et al., 1982; Jones et al., 1997). Este tipo de dieta tiene la ventaja de presentar y
mantener una calidad bromatolgica constante la cual es retenida por una membrana que es
facilmente digerible por el crustaceo en cuestin, sin embargo 1os resultados obtenidos en
cuanto a la sobrevivencia no ha sido muy alentadores usndolas como nica fuente de
alimento. En este caso, 1os criterios para la seleccin de1 alimento para larvas de peces y
crustaceos mencionados por Lger et al. (1987) pudieran no ser cubiertos de1 todo.
d) Otra modalidad en su alimentacion lo representa el uso de molculas orgnicas solubles
aplicadas en altas concentraciones, mismas que son absorbidas por via cutanea. Tambin
existen emulsiones basadas en su contenido de cidos grasos esenciales, que sirven como
enriquecedores durante la incubacin de 1os diferentes estados de Artemia, 1os que
posteriormente son otorgados a 1os organismos presas o depredadores que se pretende
cultivar. Es decir, por medio de la tecnica de bioencapsulacin (Sorgeloos, 1987) o
enriquecimiento de Artemia (Fig. 3), su calidad bioqumica es capaz de ser mejorada
sustancialmente lo cual se ha comprobado con 1os resultados en la produccin de larvas de
peces y crustaceos a nivel mundial. Tocher et al. (1997) y McEvoy et al. (1997) han
reportado el uso de extractos de tejido nervioso de atn y bacalao, preparados como
soluciones enriquecedoras de Artemia y de1 rotifero Brachionus plicatilis, obteniendo
resultados muy alentadores en la produccin de larvas de rodaballo europeo.
rotifero
Artemi a
J
Fig. 3. Principio de la tcnica de bioencapsulacin de A. franciscana en la que varios
ingredientes esenciales pueden ser incorporados a la dieta de1 predador.
e) De las dietas que comnmente se han utilizado para la produccin de biomasa de
Artemia se encuentran las microalgas vivas (Foto 4). Su importancia radica en representar
una fuente confiable de energia para favorecer el crecimiento, regulando la digestin de1
depredador y por lo tanto, incrementando su valor alimenticio (Freeman, 1991).
Foto 4. Chaetoceros sp., una de las microalgas mayormente utilizadas en acuacultura
Fbregas et al. (1996) han demostrado que al cultivar la prasinofita Tetraselmis suecica con
diferentes concentraciones de nitrgeno en el medio de cultivo, provoca cambios en el nivel
nutricional de Artemia. Consecuentemente, sus funciones metablicas fueron tambin
afectadas, situacin que se reflej en la obtencin de diferentes valores en 1os parmetros
de sobrevivencia, peso seco, longitud total, porcentaje de hembras gravidas, cantidad de
desoves y nmero de nauplios por desove. Estos investigadores alimentaron inicialmente al
crustaceo con 25 g (peso seco) de Tetraselmis suecica/ind., y la racin alimenticia fue
incrementada gradualmente dependiendo de la transparencia del agua.
Barata et al. (1996) reportaron el uso de la microalga Dunaliefia sp. para la produccin de
biomasa de especies de poco uso comercial de Artemia (A. tunisiana, A. parthenogenetica)
con el objetivo de sugerir la seleccin de dichas cepas como recursos potenciales a ser
explotados y usados en la acuacultura. Sin embargo, existen reportes de microalgas que por
sus caractersticas morfolgicas, ms que por su cont eni do nutricional, no son
recomendadas para alimentar al crustceo en cuestin. Tal es el caso de Chlorella o
Stichococcus, las cuales presentan una pared celular rgida que dificilmente es dirigida por
Artemia (Sick, 1976); o la microalga Coccochloris, la cual produce sustancias gelatinosas
que obstaculizan 1os mecanismos digestivos (Takano, 1967).
Muchas especies de microalgas han sido utilizadas como alimento para Artemia en especial
de1 genero Chaetoceros spp., la cual es considerada como una de las mejores por su
pequeo tamao y su alto contenido de cidos grasos poli-insaturados (Jory, 1997). El alto
porcentaje de sobrevivencia, as como la obtencin de organismos de tallas ms grandes
refleja la calidad de1 alimento, particularmente en 1os organismos alimentados con
Chaetoceros sp. donde se demuestra con base en 1os resultados obtenidos en varios estudios
como el de Cordero-Esquivel et al. (1993) que esta microalga rene gran parte de 1os
requerimientos nutricionales para A. franciscana. Correa y Buckle (1993) y Correa et al.
(1994) reportaron una racin alimenticia de 1.5X10
5
clulas de Chaetoceros sp./da
incrementandola gradualmente hasta 1.14X16
6
clulas/da.
Como antecedente en el uso de esta microalga para la produccin de biomasa de Artemia, el
laboratorio de St. Croix Marine Station (Texas, USA), emplea sistemas de circuito abierto y
usa como alimento Chaetoceros sp. con la cual se han reportado producciones de 25 Kg de
biomasa de Artemia a partir de 30 g de huevecillos en un 1m
3
en solo dos semanas; esto
promovido adems, por un florecimiento artificial de nutrientes y por una biomasa de
microalgas excepcionalmente elevada (Castro y Gallardo, 1993).
Al parecer el valor nutricional de esta microalga es adecuado para el cultivo de Artemia ya
que por ejemplo, presenta un alto porcentaje de protena comparado con otras especies
(32.5% de protena, Paniagua-Chavez y Voltolina, 1995) pero se requiere la realizacin de
ms estudios en cuanto a la dosis y a otras caractersticas nutricionales de dicha dieta, ya
que existe mucha discrepancia en 1os resultados encontrados de la literatura.
Existen varios mtodos para determinar el consumo de partculas en organismos
planctnicos entre los que destacan el uso de radioistopos como el C
l4
(Davalos-Lind,
1996) el cual es captado e incorporado en las microalgas durante el proceso de fotosintesis
para despus ser trasmitido ya sea al organismo presa o desechado en las heces; otra
metodologa consiste en la medicin de pigmentos como la clorofila (Lee y Wong, 1997)
mediante un colorimetro. Sin embargo, el ms usado radica en la aplicacion de formulas
para obtener los indices de tiltracin e ingestin, para los cuales existen reportes especificos
para Artemia (Braun, 1980; Coutteau, 1992; Garcia-Ulloa, 1998b) y para otros organismos
planctnicos como el rotifero Brachionus calyciflomus (Ferrando et al., 1993) ambos
alimentados con diversas dietas inertes y vivas.
Por todo lo anterior y debido a la gran importancia que Artemia representa en el
crecimiento sostenido de la produccin acucola a nivel mundial, es importante la
optimizacin en el uso de dicho recurso para su mejor aprovechamiento. El presente estudio
pretende contribuir al conocimiento, acerca del requerimiento alimenticio mediante el uso
de una mi croal ga como o dieta nica en la produccin de biomasa, evaluando su
comportamiento alimenticio tanto a nivel de laboratorio como en cultivo masivo a
diferentes densidades.
III. OBJETIVO GENERAL
Estimar los requerimientos alimenticios de Artemia franciscana mediante la obtencin de
1os indices de filtracin e ingestin, alimentada con la microalga Chaetoceros muelleri bajo
condiciones de laboratorio y en cultivo masivo.
III.1 OBJETIVOS PARTICULARES
1) Determinar 1os indices de filtracin e ingestin de A. franciscana alimentada con la
diatomea Ch. muelleri bajo condiciones experimentales y en cultivo masivo.
2) Comparar el comportamiento alimenticio de A. franciscana alimentada con Ch. muelleri
y cultivada a nivel experimental e intensivo.
3) Evaluar la sobrevivencia de A. franciscana alimentada con Ch. muelleri, cultivada en
forma intensiva a diferentes densidades.
4) Evaluar la longitud corporal de A. franciscana alimentada con Ch. muelleri en cultivo
intensivo a diferentes densidades.
5) Comparar la produccin de biomasa de A. franciscana alimentada con Ch. muelleri,
cultivada de manera intensiva a diferentes densidades.
IV HIPOTESIS
a ) La microalga Ch. muelleri cubrir 1os requerimientos alimenticios de A. franciscana a
la concentracin experimental.
b) La filtracin e ingestin de A. franciscana sern similares en el experimentoh a nivel
laboratorio y en cultivo masivo.
c) La filtracin e ingestin presentaran una relacin directa respecto a la edad de 1os
organismos.
d) La longitud de Artemia ser proporcional a 1os indices de ingestin y filtracin
e) La produccin de biomasa y sobrevivencia estaran en relacin directa con la densidad
de siembra.
V. MATERIALES Y METODOS
A) Origen de la Artemia y decapsulacin
Los quistes de Artemia fueron obtenidos de la compaia comercial GREAT LAKE
ARTEMIA (grado A, USA) y fueron decapsulados e incubados siguiendo la tcnica
propuesta por Sorgeloos et al. (1986).
B) Tratamiento de1 agua y cultivo de la microalga
El agua de cultivo fue tomada de la laguna de Barra de Navidad, pasada a travs de un filtro
de arena (Jacuzzi
)
Para esta fase se uso un mdulo experimental propuesto por Garca-Ulloa et al., (1998) el
cual consiste de 12 garrafones invertidos de plstico de 19.8 1. de capacidad con un
adaptador central para mallas intercambiables y con un sistema de cultivo que puede ser
modificado -ya sea abierto o cerrado de circulacin de aqua-, 1os que fueron usados como
contenedores de cultivo (Foto 5). En cada uno de estos, se coloc un anillo de tubo de
plstico al centro para proveer de la aireacin suficiente y mantener en suspension tanto
alimento como animales. El volumen de trabajo se ajust a 10 1. 1os animales fueron
sembrados a cuatro densidades experimentales (1,000, 3,000, 5,000 y 7,000 Art/l.) despus
de 24 horas de la eclosin de 1os quistes. Los tratamientos fueron distribuidos al azar
evalundose por triplicado. La alimentacin consisti en la microalga Ch. muelleri a la
densidad descrita en 1os experimentos en tubos de ensayo. Diariamente se monitorearon 1os
siguientes parametros: salinidad, pH y temperatura, y se realizaron recambios totales de
agua siguiendo la rutina descrita para el contenedor de1 cultivo madre. Tambipen para este
ensayo, la longitud de Artemia fue determinada por replica y tratamiento como se menciona
en el inicio anterior.
Al final de1 cultivo (edad de Artemia = dia 11) se cosecharon 1os animales de cada
tratamiento para obtener la biomasa hmeda y seca. Los indices de filtracin e ingestin
fueron obtenidos despues de 2 horas de haber alimentado a 1os animales con la microalga,
para lo cual se obtuvo la densidad celular de Ch. muelleri al tiempo de siembra y despus
de 120 minutos, en cada contenedor (n=l 0 en cada contenedor).
Foto 5. Contenedor experimental para 1os ensayos de filtracin e ingestin a nivel de
cultivo masivo.
F) Evaluacin de 1os indices de filtracin e ingestin de A. franciscana alimentada con Ch.
muelleri
Para el clculo de filtracin (ml/Art/h) e ingestin (clulas/Art./h) se emplearon las
frmulas propuestas por Hayward y Gallup (1976; en: Coutteau, 1992):
IR = [(Co-Cf)V]/n t (l),
CR = IR/Cm
(2),
IR = ingestin (cl.lArt./h),
CR = filtracin (ml/Art/h),
Co = concentracin inicial de algas (cl./ml),
Cf = concentracin final de algas (&L/ml),
Cm = (Co + Cf)/2,
t = tiempo experimental (hora),
n = densidad de Artemia/ ml,
V = volumen (ml).
G) Evaluacin de parametros biolgicos
I.- Fase experimental en tubos de ensayo
a) Para obtener la longitud de A. franciscana por dia se extrajeron 10 organismos de cada
tubo de ensayo (n = 50 org. por dia), se fijaron con lugol y se colocaron en un portaobjetos
el cual se fij en un microscopio de reflexion de imgenes provista de un micrmetro
ocular, midiendo 1os organismos desde el ojo naupliar hasta el telson (Amat, 1980).
b) Para la filtracin e ingestin se tomaron muestras de1 medio de cada uno de 1os 5 tubos y
se fijaron con 1 gota de formol al 10%. La densidad de microalgas se realiz con la ayuda
de un microscopio compuesto (Bausch & Lomb
) y un hematcimetro (0.1 mm de
profundidad) realizando 6 conteos por cada rplica.
2.- Fase experimental en cultivo masivo
a) Para obtener la longitud de A. franciscana por dia, se extrajeron 10 organismos de cada
garrafn para ser procesados como en el prrafo anterior.
b) Para la filtracin e ingestin se procedi tambien como en el parrafo anterior realizando
6 conteos de cada garrafn.
c) La sobrevivencia se evaluo diariamente, tomando 10 muestras por garrafn con una
pipeta de 10 ml., para finalmente estimar el nmero de organismos en el volumen de
cultivo aplicando la frmula, propuesta por Cruz et al., (1993): sobrevivencia = # final de
organismos/# inicial de organismos X 100.
d) La biomasa de Artemia por garrafn y tratamiento se obtuvo al extraer todos 1os
organismos de cada garrafn en un tamiz de 150 de abertura y quitando la humedad por
medio de1 papel absorbente para obtener el peso hmedo de 1os animales utilizando una
bascula electrica marca OHAUS