Diseo experimental y determinacin del tamao muestral

Diseo experimental

Principios bsicos
Formular cuestiones y objetivos por adelantado Comparacin y control Replicacin Aleatorizacin Estratificacin Experimentos factoriales

Ejemplo
Cuestin: est aumentada la concentracin de cobre en plasma en la intoxicacin aguda por paracetamol? Experimento: Administrar a un ratn 12 g de paracetamol en el agua de beber Esperar 120 minutos Medir el cobre en plasma
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Comparacin y control
Un buen experimento es comparativo comparar las concentraciones de cobre en ratones tratados con paracetamol y en ratones con agua limpia comparar las concentraciones de cobre en una camada A y en una camada B de ratones ambas tratadas con paracetamol Idealmente el grupo experimental es comparado con controles concurrentes, no histricos

Replicacin

Cobre en plasma

Cobre en plasma

Agua

Paracetamol

Agua

Paracetamol

Tratamiento

Tratamiento

Replicacin
Reduce el efecto de la variabilidad no controlada = aumenta la precisin Permite cuantificar la incertidumbre: una estimacin carece de valor sin no se conoce su incertidumbre Evita sesgo (por ejemplo, los seis primeros
ratones podran tener intrnsecamente alto el cobre)

Aleatorizacin
Los sujetos o unidades experimentales se asignan a los grupos de tratamiento de forma aleatoria aleatoriamente

caprichosamente

Controla el azar: permite usar la teora de la probabilidad y fundamentar slidamente el anlisis estadstico
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Debe explicitarse la forma de aleatorizacin: utilizando un programa informtico que genere nmeros aleatorios; o monedas, dados, naipes...

Estratificacin o bloqueo
Suposiciones: existe un cierto ritmo circadiano es posible efectuar determinaciones de muestras obtenidas por la maana y por la noche Deber: asegurarse que dentro de cada perodo existe el mismo nmero de individuos en cada grupo de tratamiento tenerse en cuenta las diferencias entre perodos al realizar el anlisis
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Ejemplo
20 ratones machos y 20 hembras La mitad se tratan con paracetamol Slo es posible trabajar con 4 ratones al da... Cmo asignar los individuos al tratamiento? Cmo asignar los individuos a cada grupo? Cmo asignar los individuos a cada da?

Mal diseo
Semana 1 L C C C C M C C C C X C C C C J C C C C V C C C C L T T T T M T T T T Semana 2 X T T T T J T T T T V T T T T

Diseo aleatorizado
Semana 1 L T C C T M T T C C X T T C C J T T T C V T T T C L C C C C M T C C T Semana 2 X T C T C J C T C T V T C C T

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Semana 1 L M C C C C X C C C C J C C C C V C C C C L T T T T

Semana 2 M T T T T X T T T T J T T T T V T T T T

Diseo estratificado
Semana 1 L C T C T M T T C C X T C T C J C C T T V T C C T L C T C T M T T C C Semana 2 X T C T C J C C T T V T C C

C C C C

Semana 1 L T C C T M T T C C X T T C C J T T T C V T T T C L C C C C

Semana 2 M T C C T X T C T C J C T C T V T C C T

Semana 1 L M T T C C X T C T C J C C T T V T C C T L C T C T C T C T

Semana 2 M T T C C X T C T C J C C T T V T C C T

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Randomizacin y estratificacin
Si se puede (y quiere) tener una variable fija p ej.: ratones macho de 8 semanas de una misma camada Si no se puede fijar una variable: estratificarse por ejemplo: ratones macho de 8 y 12 semanas estratificados respecto a la edad Si no se puede fijar ni estratificar una variable: aleatorizar
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Experimentos factoriales
Supngase que se desea investigar el efecto del paracetamol y del contenido graso de la dieta Situacin ideal: experimento con cuatro tratamientos: tratamiento con paracetamol sin paracetamol dieta grasa dieta magra Se aprende ms y es ms eficaz que un diseo unifactorial

Interacciones

Otros puntos
Experimentos ciegos Las mediciones hechas por personas pueden estar influenciadas por sesgo inconsciente Idealmente, las mediciones deben realizarse desconociendo el tratamiento aplicado Control interno los individuos experimentales son sus propios controles (antes y despus del tratamiento) aumento de la precisin
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Cobre en plasma

Dieta grasa

Cobre en plasma

Dieta grasa

Dieta pobre

Dieta pobre

Agua

Paracetamol

Agua

Paracetamol

Tratamiento

Tratamiento

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Otros puntos
Representatividad Los individuos experimentales seleccionados, son realmente representativos de la poblacin que se desea estudiar? Idealmente, el material de estudio es una muestra aleatoria de la poblacin de inters.

Efectos fijos y aleatorios

Modelo de efectos fijos: el investigador est interesado por el nmero (finito) de niveles incluidos el factor; Modelo de efectos aleatorios: el investigador est interesado en el efecto del factor del que ha includo un nmero limitado representativo de los tericamente infinitos posibles niveles

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Resumen: un buen experimento

Insesgado
Aleatorizado Ciego

Espectro de aplicacin
Variacin intencionada Diseos factoriales

Preciso
Material uniforme Replicado En bloques

Estimacin de la incertidumbre
Replicado Aleatorizado

Sencillo
Protegido de errores

Determinacin del tamao muestral

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Como perder el tiempo

Test de significacin
Comparacin de la cupremia de 6 ratones tratados con paracetamol con la de 6 ratones tratados con agua Efecto del tratamiento: = diferencia en la cupremia H0 : = 0 (no hay efecto) Estadstico del test, T Si |Tobs| > T, se rechaza H0 seleccionada para que la probabilidad de rechazar H0, si H0 es cierta, sea 5 %

Demasiado pocos individuos prdida total de tiempo y recursos Demasiados individuos prdida parcial de tiempo y recursos

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Test de significacin

Potencia estadstica
Potencia = probabilidad de rechazar H0 cuando H0 es falsa (conclusin acertada de que existe efecto del tratamiento cuando en realidad existe)

Distribucin de T cuando = 0
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La potencia depende de
La estructura del experimento El mtodo de anlisis de los datos El tamao del efecto subyacente La variabilidad de las medidas El nivel de significacin seleccionado El tamao muestral

Potencia estadstica
Se determina el tamao muestral para una determinada potencia, por ejemplo del 80 %

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Efecto del tamao muestral

6 por grupo:

Efecto del efecto

= 8,5

12 por grupo:

= 12,5:

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Otros efectos
Aumentar el tamao muestral Si se desea aumentar la potencia Si se desea aumentar el rigor del test estadstico Si aumenta la variabilidad Disminuir el tamao muestral Si aumenta el efecto del tratamiento

Determinacin del tamao muestral

Debe conocerse La estructura del experimento El mtodo de anlisis El nivel de significacin escogido (habitualmente 5 %) La potencia deseada (habitualmente 80 %) La variabilidad de las mediciones (a travs de un estudio piloto) El efecto significativo mnimo
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Frmulas estadsticas

Frmula fundamental, no estadstica

n = 2

z 2 z 1

n=

disponibles por individuo

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Reduccin del tamao muestral

Reducir el nmero de tratamientos Utilizar medidas ms precisas p. ej., en lugar de proporcin de ratones afectados, duracin del incremento de la concentracin de cobre Disminuir la variabilidad de las medidas Individuos ms homogneos Estratificar Controlar otras variables (p. ej., el peso) Mediciones repetidas en cada individuo
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