Control biolgico de organismos fitopatgenos: un reto multidisciplinario

Cuando acudimos a un mercado, entramos a un mundo complejo de colores y fragancias que son, en buena medida, resultado de las mercancas que ah se expenden. De hecho, el criterio ms importante en la seleccin de nuestros alimentos se basa en caractersticas que nos producen placer a travs de nuestros sentidos: color, aroma, consistencia e incluso tamao. Estos criterios de calidad determinan, adems del precio, la oportunidad de venta de los productos. Sin embargo, ofrecer al consumidor productos de buena calidad implica que a lo largo de toda la cadena de produccin y comercializacin una buena parte de ellos sea desechado, incluso cuando su calidad nutricional sea irreprochable. Tal es el caso de los productos agrcolas que, a lo largo del ciclo que va del productor al consumidor, ven mermada su calidad y por lo tanto su comercializacin, debido a factores climticos, ataques de plagas (artrpodos, roedores y malezas) y patgenos (microorganismos causantes de enfermedades) durante las etapas de pre y post-cosecha. Estos factores ocasionan daos durante el crecimiento y maduracin en campo y durante el manejo que va de la cosecha hasta su exposicin en el anaquel en el punto de venta. Todos estos factores determinan el xito o fracaso econmico del productor y, finalmente, el precio de venta al consumidor. Es tambin importante considerar el creciente inters pblico por la calidad del producto en lo que se refiere a la ausencia de residuos de agroqumicos o de patgenos (por ejemplo, contaminacin con la bacteria Salmonella) a lo cual, de manera genrica, se le ha denominado inocuidad alimentaria. Estos factores de calidad pueden no afectar la apariencia del producto pero s impactar fuertemente tanto en el costo de produccin como en el costo al consumidor.

Entre todos estos factores, las prdidas de productos agrcolas relacionadas con el ataque de plagas y enfermedades durante las etapas de pre y post-cosecha son considerables. Las plagas y enfermedades son un problema que inici con la agricultura misma, debido a que se destinan grandes extensiones de tierra a un solo cultivo, modificando el equilibrio ecolgico natural. Durante milenios el hombre combati insectos y otras plagas con mtodos manuales y herramientas naturales. As, por ejemplo, en el Mxico precolombino la rotacin de cultivos promova la diversidad ecolgica del ecosistema, limitando el predominio de plagas y enfermedades derivado del monocultivo. Asimismo, el control ejercido por otros elementos vivos (enemigos naturales) de los ecosistemas tuvo un papel muy importante para minimizar el dao por plagas y enfermedades. En la agricultura comercial contempornea, el combate de plagas y enfermedades sigue siendo una cuestin muy importante; esta actividad llega a representar hasta un 20 por ciento o ms del costo de produccin, dependiendo de la severidad del dao.

Entre todos estos factores, las prdidas de productos agrcolas relacionadas con el ataque de plagas y enfermedades durante las etapas de pre y post-cosecha son considerables. Las plagas y enfermedades son un problema que inici con la agricultura misma, debido a que se destinan grandes extensiones de tierra a un solo cultivo, modificando el equilibrio ecolgico natural. Durante milenios el hombre combati insectos y otras plagas con mtodos manuales y

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herramientas naturales. As, por ejemplo, en el Mxico precolombino la rotacin de cultivos promova la diversidad ecolgica del ecosistema, limitando el predominio de plagas y enfermedades derivado del monocultivo. Asimismo, el control ejercido por otros elementos vivos (enemigos naturales) de los ecosistemas tuvo un papel muy importante para minimizar el dao por plagas y enfermedades. En la agricultura comercial contempornea, el combate de plagas y enfermedades sigue siendo una cuestin muy importante; esta actividad llega a representar hasta un 20 por ciento o ms del costo de produccin, dependiendo de la severidad del dao.

Los plaguicidas y agentes qumicos antimicrobianos adquirieron un papel preponderante en la proteccin de cultivos contra plagas y enfermedades debido en gran parte al fuerte apoyo que recibi la investigacin y desarrollo de la industria agroqumica. Sin embargo, el empleo intensivo (y a veces desmedido) de productos qumicos ha tenido efectos negativos sobre el ambiente y la calidad de vida de las poblaciones humanas. Su eficacia puede ser de corta duracin, ya que pueden tener el efecto de seleccionar poblaciones de plagas y patgenos resistentes. Asimismo, estos productos se pueden acumular en los alimentos, suelos y aguas si no se respetan las dosis, intervalos de seguridad y los productos aprobados para un cultivo, lo cual ocurre con gran frecuencia. Por otra parte, estos productos afectan tambin a los enemigos naturales de los organismos nocivos, causndoles la muerte o reduciendo las poblaciones de especies que les sirven de alimento.

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El llamado manejo integrado de plagas es un conjunto de tcnicas de control que son eficaces desde el punto de vista biolgico (por ejemplo inhibitorio, antibitico), ecolgico y econmico; posibilita y resalta el empleo de elementos naturales para regular poblaciones de plagas o patgenos por debajo del nivel de dao que sera econmicamente aceptable. Una de las herramientas del manejo integrado de plagas es el cont rol biolgico , que aunque data de los principios de la agricultura, se formaliz como disciplina a principios del siglo XX y que ha adquirido nuevamente relevancia por la preocupacin de la preservacin del ambiente y la inocuidad alimentaria.

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Control biolgico
El control biolgico es el uso de organismos (o de sus metabolitos o subproductos) que son enemigos naturales de una plaga o patgeno, con el fin de reducir o eliminar sus efectos

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dainos en las plantas o sus productos. De manera similar al uso de gatos para controlar poblaciones de ratones o el uso de bacterias benficas (como los lactobacilos) para preservar alimentos o prevenir infecciones gastrointestinales, el control biolgico de plagas y patgenos ha sido utilizado en la agricultura de manera emprica desde sus inicios. La razn principal por la cual muchos productos agrcolas no son destruidos completamente por las plagas y las enfermedades es la presencia natural de agentes de control biolgico: organismos capaces de antagonizar con las plagas o patgenos, reduciendo sus efectos nocivos. El desarrollo y aplicacin de este potencial de la naturaleza cobra cada vez mayor importancia, y seguramente tendr un gran impacto en la agricultura en el futuro cercano. Recientemente, la aplicacin de la ingeniera gentica (la introduccin artificial de genes de una especie en otra) para mejorar la resistencia de cultivos a plagas o patgenos ha abierto un sinfn de posibilidades para el control biolgico. Un ejemplo actual es el cultivo, en el norte del pas y en Estados Unidos, de algodn con la capacidad de producir una protena (producida naturalmente por la bacteria del suelo Ba cillus thuringiensis ) la cual es txica para las plagas que afectan (en forma de larva o gusano) a ese cultivo, pero que son prcticamente inocuos para otros insectos y sin ningn efecto adverso para el ser humano.

Recientemente, la aplicacin de la ingeniera gentica para mejorar la resistencia de cultivos a plagas o patgenos ha abierto un sinfn de posibilidades para el control biolgico

A pesar de la gran cantidad de esfuerzos acadmicos invertidos en el estudio y desarrollo de estos agentes de control biolgico , es paradjico que el uso comercial y a gran escala de este tipo de productos ha sido muy limitado. Una de las limitantes ms importantes para alcanzar el uso a nivel comercial de los agentes de control biolgico es que, a diferencia de los pesticidas o antimicrobianos qumicos, que generalmente hacen disminuir rpidamente la densidad de la plaga o la severidad de la enfermedad, la eficacia de los productos biolgicos en el campo depende sensiblemente de factores ambientales difciles de controlar (temperatura, humedad, acidez, exposicin a luz ultravioleta, etctera). Adems, su espectro de accin contra diferentes plagas o patgenos es menor que el de los plaguicidas o antimicrobianos qumicos. Por otra parte, la comercializacin de los agentes de control biolgico se ha visto limitada por la falta de mtodos rigurosos de evaluacin que permitan anticipar de manera racional las complejas interacciones entre planta, la plaga o agente patgeno, el agente de control biolgico, el suelo y el ambiente, presentes todos en el campo. Finalmente, el uso de agentes de control biolgico en el control de plagas o enfermedades requiere de un manejo y aplicacin ms complejos que los requeridos para el uso de pesticidas o antimicrobianos qumicos. Ello conduce a una mayor variabilidad y mayor tiempo de respuesta para poder observar los resultados en el campo. Esto, a su vez, es uno de los mayores problemas para su comercializacin y uso extensivo.

En consecuencia, el desarrollo de productos exitosos para el control biolgico de plagas o

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patgenos requiere de la participacin de un grupo multidisciplinario conformado por especialistas en fitopatologa, entomologa, agronoma, microbiologa, biologa molecular e ingeniera de bioprocesos. Antes de que un agente de control biolgico sea introducido con xito en el mercado es indispensable llevar a cabo una serie de evaluaciones. Despus de la seleccin inicial en laborato rio de un aislado microbiano que sea eficaz, es importante estudiar su ecologa, fisiologa y modo de accin. Paralelamente, debe desarrollarse un sistema de produccin y formulacin del agente de control biolgico para obtener un producto con una vida de anaquel suficientemente alta y que otorgue al producto ventajas competitivas en el ambiente en el cual ser aplicado. Posteriormente, se debe escalar el proceso a nivel piloto para la obtencin de cantidades de producto suficientes para llevar a cabo su evaluacin en invernadero y campo. Finalmente, si el producto presenta atributos suficientes y su produccin es viable tanto tcnica como econmicamente, se lleva a cabo el registro y se inicia la comercializacin del producto.

El caso de los plaguicidas biolgicos es el ms estudiado: se comercializan varios productos de este tipo desde la dcada de los setenta. Destacan los ejemplos de Bacillus thuringiensis y de hongos que atacan insectos (entomopatgenos). En el caso de agentes biolgicos para el control de enfermedades (principalmente producidos por hongos), los xitos comerciales son todava limitados y estn basados principalmente en hongos de los gneros Trichoderma , Gliocladium , Streptomyces , Coniothyrium y Candida, y bacterias de los gneros Pseu domonas, Bacillus y Agrobacterium .

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Las cepas de Trichoderma pueden enzimas fotos muestran: antagonizar lticas que a) el degradan un ataque amplio son de las espectro consideradas pare-des de celulares hongos como fitopatgenos del los patgeno ms efectivos gracias provocando biofungicidas a que la produccin su muerte. ya de que La Trichoderma harzianum contra superficie el fitopatgeno perforada de Pythium Rhizoctonia ultimum solani (verde), despus el cual de remover se observa las invadido; hifas de b) aspecto (naranja) de la Trichoderma. Fotos University cortesa of Jerusalem. de: a) J.P. Hubbard; American Phytopathological Society; b) I. Chet, Hebrew En causa agricultura tecnologas ocasionan panorama comercializacin vista de que las general plagas dedicada de las enfermedades produccin prdidas de en del este a los reto productos vegetales tipo de de cientfico postcosecha, productos de agentes productos. de (organismos exportacin y tecnolgico para agrcolas el debido control fitopatgenos). en pueden que a nuestro la biolgico implica importancia llegar pas, el de hasta A desarrollo es continuacin los crucial importante un organismos 50 y por la se eventual tiene desarrollar ciento que expone laslo un a generalmente Los microorganismos aislados a (hongos partir del o bacterias) suelo oy de empleados la planta en el biocontrol de fitopatgenos son

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agentes Retos parabiolgico el desarrollo tecnolgico y comercializacin de de control de fitopatgenos

Aislamiento y seleccin del agente de control biolgico: Los microorganismos (hongos o bacterias) empleados en el biocontrol de fitopatgenos son generalmente aislados a partir del suelo o de la planta.

Sin embargo, no todos los aislamientos presentan caractersticas ptimas para ser usados en biocontrol. De manera general, la estrategia utilizada para el aislamiento de cepas con potencial como entomopatgenos es la recoleccin de muestras de plantas sanas (races, tallo u hojas) provenientes de campos infectados con el fitopatgeno que se desea controlar. La lgica de esta estrategia reside en que aquellas plantas que resisten en cierta medida el ataque de la enfermedad en un campo donde la productividad se vio sensiblemente disminuida pueden deber su resistencia a la presencia de microorganismos antagonistas de la misma.

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Una vez que el fitopatlogo ha aislado en el laboratorio los microorganismos recuperados de las muestras, lo que implica el uso de medios de cultivo selectivos (substratos nutritivos artificiales) que permitan el crecimiento de la mayora de los microorganismos presentes en la muestra original, es necesario evaluar su eficacia como antagonistas del patgeno por medio de bioensayos in vitro. Estos bioensayos consisten en confrontar al patgeno con el posible antagonista con el fin de evaluar su potencial para inhibir el crecimiento o inclusive causar la muerte del patgeno. Posteriormente, aquellos aislamientos con capacidad antagonista evidente deben ser evaluados nuevamente a nivel laboratorio, invernadero y campo, considerando varios criterios para conocer su potencial tecnolgico.

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Desarrollo tecnolgico para la comercializacin de ACB de fitopatgenos. Entre principalmente: caso, casos colonizacin las y frutos). obtencin diferentes producidos evaluacin su d) verdadera races); resistencia los produccin de De criterios la de criterios esta en c) en diseminacin aislamientos capacidad resistencia campo una a a) manera, las luz de ms velocidad arriba escala races esporas, ultravioleta del importantes de la descritos, a agente de mayor de con seleccin antimicrobianos accin. de los la que alto crecimiento planta agentes (en de y son de potencial que pueden control caso a establecerse (en estructuras nivel el de de microbilogo el biolgico qumicos considerarse y control laboratorio antagonista caso antagonistas de accin muy en biolgico; es frecuentemente antagonistas el resistentes debe representa biolgica indispensable, ecosistema y candidatos de que, considerar patgenos b) al capacidad sobre ser responsables un importantes previsto. empleados evaluados patgenos paso ya el se de patgeno, que pueden de importante las Asimismo, asociacin permite hojas en bajo que a en ser citar muchos agricultura; y o afecten los en conocer en los la su o la a los Es organismos importante que desarrollar ocasionan tecnologas plagas en de los produccin vegetales de (organismos agentes para fitopatgenos) el control biolgico de Estudios de los mecanismos de antagonismo del agente de control biolgico: contraste qumicos complejos a ms cuando competentes. control mayor las difciles plantas, dificultad biolgico es (cuyo con modos necesaria de incluyendo lo Sin mecanismo manejar para que representa embargo, de ocurre accin la desarrollar conjuncin y a aplicar la de con una de mayora complejidad accin los la ventaja resistencia que mayora microorganismos de se los de varios sobre conoce), antimicrobianos de hacia factores agentes los los modos compuestos ellos. productos no que se para de comprenden control directamente de qumicos que accin qumicos, utilizados sean biolgico. de comunes, eficaces por muchos o pues indirectamente como completo Son, el o especialmente antimicrobianos patgeno agentes ecolgicamente regularmente, los En de afectan tendr Aunque en algunos casos (como los mecanismos de antagonismo de especies del gnero hoderma Tric mecanismos contra as agente que de hbitat produccin lticas); inducir los para slo actan agentes hongos la (competencia de produccin la un resistencia control mayora de mecanismo de enzimas fitopatgenos) manera de defensa biolgico control de de de por antibiticos los conjunta capaces la antagonista de espacio biolgico planta agentes eficaz la se planta. para de cuenta contra y cuenta, (ya se nutrientes), perforar sea controlar sea encuentran, control el con responsable generalmente, solubles patgeno y un biolgico. destruir al el conocimiento patgeno. parasitismo principalmente, en mediante del literalmente agua Esto con control Entre o es varios amplio sobre voltiles) la debido, o estimulacin los al la supresin mecanismos la del patgeno colonizacin mecanismos plaga y en modo la parte, habilidad o del de patgeno, de (enzimas patgeno. los antagonistas a accin, rpida antagonistas que para es del la no raro Un es

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El control biolgico de fitopatgenos en Mxico

La Sociedad Mexicana de Fitopatologa, fundada en 1967, agrupa actualmente a ms de 300 investigadores y profesionales que trabajan en aspectos relacionados con el control de fitopatgenos en Mxico. Sus reas de trabajo cubren aspectos muy variados, desde estudios bsicos de fisiologa de la interaccin planta-patgeno hasta aspectos de regulacin sanitaria. Sin embargo, y a pesar de que el desarrollo de procesos de produccin y formulacin es sumamente importante para lograr el xito comercial de agentes de control biolgico, se ha dedicado muy poco esfuerzo a la bioingeniera de estos procesos. La Sociedad Mexicana de Fitopatologa, agrupa actualmente a ms de 300 investigadores y profesionales que trabajan en aspectos relacionados con el control de fitopatgenos en Mxico Una de las razones principales de esto ha sido el nfasis del control qumico en la agricultura y la relativa poca tradicin de trabajo multidisciplinario de los investigadores mexicanos, adems del nmero limitado de plantas piloto para biotecnologa disponibles en el pas. Actualmente, slo cuatro instituciones cuentan con la infraestructura necesaria para el desarrollo y escalamiento de bioprocesos: el Centro de Investigacin y Estudios Avanzados del Instituto Politcnico Nacional en la ciudad de Mxico, la Universidad Autnoma Metropolitana-Iztapalapa, la Universidad Autnoma de Nuevo Len y la Universidad Nacional Autnoma de Mxico (UNAM, en sus Institutos de Biotecnologa y de Investigaciones Biomdicas). De estas instituciones, slo el Instituto de Biotecnologa de la UNAM y la Facultad
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de Ciencias Biolgicas de la Universidad Autnoma de Nuevo Len trabajan en el desarrollo de productos para el control biolgico de fitopatgenos a nivel de formulacin comercial o semicomercial. Cabe aclarar que existen otras instituciones como el Colegio de Postgraduados, el Centro de Investigacin en Alimentacin y Desarrollo (CIAD) en Culiacn y la Universidad Autnoma de Chapingo, donde tradicionalmente se han desarrollado estudios de identificacin y de efectividad biolgica de organismos con posible capacidad de control a nivel de laboratorio o de campo; sin embargo, en general se ha hecho poco a nivel de formulacin y pruebas masivas. Una accin importante podra ser concentrar la informacin de los organismos que han sido aislados en distintos ambientes y cultivos, y que estn disponibles en colecciones, para facilitar su potencial uso y disponibilidad por los investigadores de distintas instituciones. Este acervo podra ser impulsado por la Comisin Nacional de Biodiversidad (CONABIO), como ya lo hace con otros organismos y proyectos.

Desarrollos tecnolgicos en el Instituto de Biotecnologa de la UNAM

A continuacin se muestran, a manera de ejemplo, algunos desarrollos tecnolgicos para la produccin, formulacin y aplicacin de agentes de control biolgico de fitopatgenos que se encuentran en proceso de optimizacin en el Instituto de Biotecnologa de la UNAM en colaboracin con el Centro de Investigacin en Alimentacin y Desarrollo de Culiacn. No se pretende hacer una exposicin detallada de dichos desarrollos esto sera material de otro tipo de publicacin ni inducir la idea en el lector de que son los nicos ejemplos de este tipo en el pas.

Control biolgico de patgenos del cultivo de tomate: Trichoderma harzianum ha demostrado ser efectivo contra diversas especies de Fusarium, hongos que causan daos importantes en el cultivo del jitomate. El uso de Trichoderma harzianum durante la etapa de invernadero del cultivo de jitomate permite disminuir significativamente la incidencia de Fusarium en las races y en el fruto maduro. La incidencia de Fusarium en el cultivo de jitomate causa anualmente prdidas econmicas importantes a los productores, adems de que puede potenciar el efecto negativo de los nemtodos (gusanos microscpicos causantes de daos en la raz) en el mismo cultivo.

En el Instituto de Biotecnologa de la UNAM se han realizado estudios sobre la produccin de un formulado a base de una cepa de Trichoderma harzianum. Se estudiaron aspectos como la composicin y la acidez del medio de cultivo, la temperatura, la agitacin, as como aspectos

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de formulacin y secado para la obtencin de un producto en polvo con alta viabilidad. Se estableci un proceso estndar de cultivo sumergido en fermentadores con capacidad de hasta 30 litros. Por otra parte, se estandariz un proceso de recuperacin, formulacin y secado de las esporas que permite la obtencin de un producto con un alto porcentaje de recuperacin y una vida de anaquel de, al menos, 12 meses en refrigeracin. Actual-mente se encuentran en desarrollo formulaciones capaces de prolongar la vida de anaquel del producto a temperatura ambiente y estudios (en colaboracin con el Centro de Investigacin en Alimentacin y Desarrollo) con cepas aisladas en campos de jitomate. La evaluacin en campo demostr que el producto biolgico es capaz de competir con fungicidas qumicos (con efectividad contra hongos) para el control de Fusari um y Pythium en la produccin de jitomate. Sin embargo, el resultado ms importante de esta evaluacin de formulaciones es que el producto biolgico permite obtener frutos de mejor calidad, los cuales son particular-mente atractivos para el mercado de exportacin.

Antagonistas de Colletotrichum gloeosporoides, agente causal de la antracnosis en mango: Mxico es uno de los principales productores y el primer exportador de mango en el mundo. En el 2001 se produjeron un milln y medio de toneladas de este fruto. Una de las enfermedades postcosecha ms importantes que afectan al mango es la antracnosis, causada por el hongo Colletotrichum gloeosporoides, el cual daa la calidad y disminuye significativamente la vida de anaquel del producto. En un proyecto conjunto entre el Instituto de Biotecnologa de la UNAM y el Centro de Investigacin en Alimentacin y Desarrollo en Culiacn se aislaron, seleccionaron e identificaron diferentes microorganismos (bacterias y levaduras) con actividad antagnica contra la antracnosis en mango. El uso de Trichoderma harzianum durante la etapa de invernadero del cultivo de jitomate permite disminuir significativamente la incidencia de Fusariu m en las races y en el fruto maduro Se disearon medios de cultivo con componentes de bajo costo que permitieron lograr cultivos de los antagonistas de alto rendimiento, viabilidad y productividad. Se desarrollaron procesos de fermentacin sumergida para la produccin de clulas viables de cada una de las cepas en fermentadores con capacidad de hasta 100 litros. El producto mantiene su viabilidad dentro de los niveles de efectividad hasta por diez meses. Los resultados de las pruebas de campo mostraron que los antagonistas utilizados lograron disminuir la incidencia de la antracnosis tanto antes como despus de la cosecha. Esta proteccin fue mayor, en algunos casos, que la obtenida utilizando un fungicida qumico.

Otro aspecto de gran importancia radica en el hecho de que los formulados biolgicos retrasan la maduracin del fruto, alargando su vida de almacn hasta en 25 por ciento sin afectar sus

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propiedades organolpticas (sabor, olor, textura). Esto ofrece la posibilidad al productor de exportar sus frutos a mercados ms lejanos y con mayor precio de comercializacin.

No debe, sin embargo, prevalecer la idea de que siempre un agente de control biolgico mejora atributos de calidad organolptica. Su intencin se orienta a mejorar la calidad sanitaria y eventualmente la inocuidad, al reducir la presencia de residuos de plaguicidas. sta es otra rea an por estudiarse y desarrollarse en Mxico con respeto a los organismos con capacidad de control biolgico. Hoy, los esfuerzos por buscar la sustentabilidad de los cultivos y preservar el ambiente demandan una visin interdisciplinaria en la concepcin y diseo de nuevas estrategias de manejo de las enfermedades. La diversidad ecolgica de nuestro pas, el hecho de que nuestros sistemas agrcolas se encuentran relativamente poco pertubados, y la composicin socioeconmica y cultural de los productores mexicanos, hacen del control biolgico una opcin con futuro.

Agradecimientos
Se reconoce el apoyo econmico del Conacyt (Proyecto Z-001), del Fondo Mixto Conacyt-SAGARPA (C01-0741) y de la DGAPA-UNAM (IN-231398) para el desarrollo de los proyectos de control biolgico de fitopatgenos, experiencia en la que se bas la presente contribucin.

Bibliografa
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