Experimentacin en Qumica Analtica Calidad Procedimiento Analtico Podemos representarlo mediante el siguiente esquema:

Muestra bruta Muestra Medida de masa o volumen Secado Trituracin

Conservacin y Trat. muestra Destruccin Materia Orgnica Disolucin

Muestra de laboratorio Disgregacin

Subdivisin

Homogeneizacin

Lixiviacin

T cnica de se!aracin y"o !reconcentracin

#eacciones $nal%ticas

&ntroduccin &nstrumento $nal%tico

Medida $nal%tica

Aunque aqu constan casi todas las etapas posibles, no siempre tenemos que hacerlas, el hacer unas u otras va a depender del analito y de la matriz que tengamos. 1. Pre-tratamiento Las operaciones previas son todos los procesos fsicos y qumicos que se hacen sobre la muestra desde que se toma hasta que se prepara para un determinado anlisis y tienen las siguientes caractersticas: Poseen una gran variabilidad !son muy diversas" o Proceso de gran comple#idad o $%iste riesgo de e%plosi&n 'equieren una gran participaci&n humana o (e trata de un proceso lento o $s un proceso de difcil automatizaci&n (on una fuente importante de error o $s muy fcil que e%istan p)rdidas o contaminaci&n o $%iste una gran dificultad para hacer un control riguroso Las operaciones de pre tratamiento van a influir muchsimo tanto en el anlisis como en la anterior conservaci&n y almacenamiento de las muestras, en caso de que no podamos hacer un anlisis inmediato de las mismas* y por tanto son muy relevantes aunque no formen parte del anlisis. $stos procesos son los siguientes: Lavado: +onsiste en la eliminaci&n superficial de contaminantes mediante el empleo de agua, tensoactivos, cidos o agentes comple#antes o tambi)n disolventes orgnicos. ,o todas las muestras se lavan sistemticamente. (ecado: +onsiste en la eliminaci&n del agua de la muestra* y el m)todo que empleemos depende de la matriz y del analito, ya que provoca un cambio de peso en la muestra. -ambi)n conseguimos eliminar la disoluci&n parcial de la matriz en la muestra. Podemos hacerlo de las siguientes formas:

o $n estufa, pesando la muestra en un vidiro de relo# y calentando entre ./ y 0// 1+, para poder eliminar el agua pero no descomponer la matriz. -enemos que controlar la temperatura, ser conscientes de la naturaleza del analito, de la matriz y el tama2o de partcula. $s muy fcil que e%istan p)rdidas o Liofilizaci&n. (e trata de un secado en fo, en el que congelamos la muestra y la sometemos a vaco !0/ Pa", con lo que provocamos la sublimaci&n del agua. $ste procedimiento va muy bien con muestras termolbiles, que se descompongan con la temperatura, y as evitamos p)rdidas. -riturado y homogeneizaci&n: $l ob#etivo es que nuestra muestra sea representativa. Para ello en funci&n de si son duras o blandas, trituramos o molemos. o 3uestras duras: -riturador de mandbulas, de rodillo, de cono, de bolas de anillos, de disco vertical. !4samos golpeo y fricci&n" o 3uestras blandas: 3olinillo y picadora. $n estos casos se suelen congelar la muestra previamente. La contaminaci&n puede ser por dos vas, por desgaste del material con el que trituramos o cruzada debido a que lavamos mal entre muestras. La p)rdida de voltiles se minimiza, ya que intentamos traba#ar con refrigeraci&n. -amizado: +onsiste en pasar la muestra por unos tamices para que las partculas tengan todas un tama2o similar, para eso se emplean tamices con distinta luz de malla. 5ivisi&n y submuestreo: $s la toma de la muestra que ser sometida a tratamiento despu)s de haber hecho el pre tratamiento. $n funci&n de su estado de agregaci&n se har de una manera u otra. o (&lido: Puede ser manual, por el sistema del cuarteo, en el que hacemos un mont&n, lo dividimos en cuatro partes iguales y nos quedamos con dos de las partes que se encuentran enfrentadas. -ambi)n lo podemos hacer automticamente mediante un divisor mecnico. o Lquido: (implemente agitamos, calentamos y filtramos repetidas veces. Almacena#e y transporte: Aunque no es una operaci&n previa, es bsico para el anlisis. (iempre tenemos que guardar muestra suficiente para posibles repeticiones o contraanlisis de nuestra muestra. 6ay que tener en cuenta una serie de factores: la temperatura, la humedad, la luz y la contaminaci&n* tanto la cruzada por estar almacenada cerca de otras muestras, como la contaminaci&n debido a los envases contenedores. La primera se evita refrigerando, congelando y liofilizando o adicionando algunos aditivos. La segunda depende solamente de la correcta elecci&n del material contenedor, para lo que recurrimos a tablas. 2. Mtodos de preparacin de muestras para la determinacin de analitos inorgnicos La preparaci&n de las muestras va a depender del estado de agregaci&n en que se encuentren, ya sea lquido, gas o s&lido.

a" 3uestras Lquidas: -enemos dos situaciones: a. (oluciones acuosas 7eneralmente no requieren tratamiento previo (eg8n la concentraci&n del analito en la muestra y la t)cnica, tendremos que diluir o concentrar $n espectrofotometra 49 es necesario adicionar tampones para reducir interferentes Los tratamientos utilizados para separar s&lidos en muestras acuosas son: o :iltraci&n a gravedad o a vaco o +entrifugaci&n !o ultracentrifugaci&n" o :lotaci&n !mediante una corriente de gas que pasa a trav)s del lquido" o Adici&n de tensoactivos o co precipitantes. o 5esgasificaci&n !para bebidas carbonatadas" +omo consecuencia de los filtrados ahora tenemos dos muestras, lo que hemos filtrado, y lo que ha quedado retenido en el filtro* esto 8ltimo no podemos de#arlo atrs, y por tanto lo trataremos como si de una muestra s&lida se tratara. A la hora de hacer un filtrado tenemos que analizar dos parmetros: La naturaleza del filtro: de qu) material est formado, por e#emplo: celulosa, lana de vidrio, policarbonato, membranas; $l tama2o del poro: nos indica la capacidad que tiene el filtro para retener partculas, generalmente se emplea de /,<= >m. -ambi)n tenemos que cumplir los siguientes requisitos: 6ay que filtrar lo ms pronto posible, #usto despu)s de tomar la muestra si fuera posible. 6ay que tener cuidado con la contaminaci&n, debida a la naturaleza del filtro. $%isten ciertas algas que se pueden romper y liberar metales que retenan y que eran parte de nuestro analito, por lo que nos introducira mucho error. -enemos que evitar p)rdidas de analito por adsorci&n, tanto a los filtros como a las paredes de los recipientes. $n cuanto al material particulado del filtro: Podemos aplicarle un tratamiento cido adecuado, en el caso de que sean metales. Podemos hacer una e%tracci&n con disolventes seme#antes, para todo tipo de sustancias orgnicas. b. (oluciones no acuosas: tenemos dos tipos Aquellas muestras que vienen en disolventes orgnicos, o que son solubles en los mismos, por e#emplo en $AA con llama o con atomizaci&n electrot)rmica. Aceites minerales, petr&leos, pinturas, aceites vegetales, que no son analizables, y a las que vamos hacer un tratamiento anlogo al de las muestras s&lidas.

b" 3uestras 7aseosas (eg8n su procedencia pueden ser muestras de aire o efluentes industriales, por e#emplo medidos en chimenea para los cules tenemos las siguientes alternativas: Para el material particulado hacemos una filtraci&n, puesto que tenemos sustancias s&lidas en suspensi&n !el aire no de#a de ser un fluido" Para los gases tenemos dos posibilidades: o Adsorci&n sobre s&lidos o Absorci&n en disoluciones, mediante borboteadotes. c" 3uestras (&lidas: 5entro de la cuantificaci&n de analitos inorgnicos, estos pueden venir tanto en matrices de tipo orgnico, como por e#emplo, te#idos, plantas, alimentos o frmacos* como en matrices de tipo inorgnico como metales y aleaciones, minerales o cermicas. $n funci&n de la naturaleza de la matriz, tenemos las siguientes t)cnicas: ,aturaleza ?norgnica o :usi&n o @%idaci&n h8meda o digesti&n cida. ,aturaleza @rgnica o @%idaci&n seca o calcinaci&n o @%idaci&n h8meda o digesti&n cida. xidacin seca o calcinacin +onsiste en la eliminaci&n de la materia orgnica por calentamiento, que al quemarse nos da di&%ido de carbono y agua, siendo destruidos todos los compuestos orgnicos, mientras que los inorgnicos quedan sin alterar* por e#emplo en el caso de un compuesto organometlico s&lo el metal quedara sin alterar. Para hacer este proceso podemos recurrir a las siguientes t)cnicas o m)todos: 3ineralizaci&n en mufla: +onsta de cuatro etapas o Pesada de la muestra o +alentamiento de la muestra gradual o 5isoluci&n en un cido mineral diluido o Adici&n de un agente o%idante Las venta#as e inconvenientes de este m)todo son: que es muy simple y podemos tratar un gran n8mero de muestras y una gran cantidad de la misma. Adems el riesgo de contaminaci&n es ba#o. $n contra tenemos que no es aplicable a elementos voltiles. +ombusti&n (chAniger: $l proceso consta de las siguientes etapas: o +olocamos la muestra en un papel de filtro, y de#amos una parte de este para que act8e como mecha. o +olocamos una disoluci&n colectora en un matraz, por e#emplo per&%ido de hidr&geno o un absorbente. o Borboteamos o%geno para favorecer la o%idaci&n de la muestra. o ?ntroducimos el papel y le prendemos fuego, cerramos y de#amos que se produzca la combusti&n. o (e agita vigorosamente el matraz para que todo lo que e%iste en el matraz se absorba en el lquido.

+ombusti&n con o%geno a presi&n elevada 3ineralizaci&n con plasma de o%geno a ba#a temperatura: (e traba#a a temperaturas entorno a 0C/ 1+. $s muy adecuada para elementos voltiles xidacin !"meda o digestin cida $ste m)todo es vlido tanto para matrices orgnicas como inorgnicas. +onsiste en el tratamiento con cidos, ya sea en un medio abierto o a presi&n* y al que le podemos aplicar agitaci&n, ultrasonidos !otra forma de agitar" y microondas !para calentar". (iempre que hablemos de digesti&n estaremos considerando que se destruye la matriz* algo muy corriente con matrices inorgnicas. $n cambio si hablamos de e%tracci&n no se destruye la matriz sino que se DarrancaE el analito de la matriz, es algo ms corriente en matrices orgnicas. Para escoger qu) cido usar, siempre empezas por cidos diluidos, siempre que tengamos metales ms electropositivos que el hidr&geno funciona. (i no es as, usamos cidos concentrados y en caliente, o una mezcla de cidos, que nos permite combinar caractersticas de ambos, se suele hacer con las condiciones ya comentadas !agitaci&n o calentamiento". $n caso de que no funcione se usan cidos y otros agentes o%idantes. Podemos citar los siguientes e#emplos de cidos: +lorhdrico: $s fuerte, reductor y comple#ante. ,trico: $s fuerte, o%idante y no comple#ante, destruye muy bien la materia orgnica. Percl&rico: $s muy fuerte, y ataca mucho a la materia orgnica, no forma comple#os. :osf&rico: 5)bil y comple#ante. :luorhdrico: $s d)bil y muy comple#ante. (ulf8rico: $s fuerte y muy o%idante $l calentamiento se puede producir mediante radiaci&n de microondas, cuya longitud de onda oscila entre 0 mm y 0// cm, y no es ionizante, por lo que no cambia la estructura at&mica. $%isten distintos tipos de materiales en funci&n de su interacci&n con las microondas* los conductores, que refle#an la radiaci&n !no se usan", los transparentes, que de#an pasar la radiaci&n y los di)lectricos, con momento dipolar que son los que absorben la radiaci&n y se calientan, porque la radiaci&n afecta a su momento dipolar. La digesti&n en horno microondas consta de las siguientes etapas: 0. Pesada de la muestra C. Adici&n de los cidos correspondientes F. +alentamiento <. :iltraci&n

$ste proceso tiene las siguientes venta#as: La temperatura de calentamiento es ba#a, aunque hay que superar la temperatura de ebullici&n de los cidos. $l tiempo de digesti&n es corto. La cantidad de cido que tenemos que a2adir es peque2a Las p)rdidas de voltiles son mnimas $%iste un ba#o riesgo de contaminaci&n. Las condiciones de digesti&n son en)rgicas. Extraccin secuencial# $s una manera de conocer adems de la concentraci&n total de un analito su especiaci&n, ya que podemos tener distintas especies en variados estados de o%idaci&n, ya que todas las especies no tienen las mismas propiedades !la to%icidad por e#emplo". Lo que hacemos es someter a la muestra a distintos procesos de e%tracci&n, desde reactivos y condiciones muy suaves hasta las ms en)rgicas* y todo sobre la misma muestra. $usin +onsiste en la eliminaci&n de la matriz inorgnica con reactivos fundentes en caliente, entre G// y 0/// 1+. Pudiendo ser cida o bsica, o%idante o reductora. $l proceso consta de las siguientes etapas: Pesada de la muestra !o#o que el crisol no contamine" Adici&n del fundente +alentamiento en el horno mufla 5isoluci&n en un cido mineral La venta#a de este m)todo es que se disuelven materiales muy resistentes, sin embargo e%iste una gran p)rdida de voltiles y es muy fcil que e%ista contaminaci&n, ya sea por las pares de la mufla, el crisol o el fundente. (eg8n el tipo de fusi&n usamos los siguientes reactivos: Alcalinas: carbonatos, hidr&%idos y boratos Hcidas: bisulfatos, fluoruros y &%idos de boro @%idantes: alcalinos I o%idantes y per&%idos 'eductoras: alcalinos I reductores y sulfuros I lcalis. Adems de estas operaciones podemos hacer otras para separar, preconcentrar y conseguir una buena especiaci&n. (on procesos qumicos y fsicos, principalmente, bastane simples y son: $%tracci&n lquido lquido: lo que hacemos es una comple#aci&n selectiva del metal, e%tray)ndolo a un peque2o volumen de disolvente. $sta comple#aci&n puede ser por formaci&n de un quelato, un par i&nico, una sal solvatada o incluso una mol)cula covalente. $%tracci&n en fase s&lida: +onsiste en una reconcentraci&n ms o menos selectiva del analito en soporte s&lido de diferente naturaleza, posteriormente se hace una eluci&n con cido diluido. Para ello se pueden usar distintos soportes: resinas de intercambio i&nico, soportes quelatantes, o adsorbentes. +oprecipitaci&n: +onsiste en la adici&n de agentes precipitantes, posteriormente se filtra y se redisuelve en cidos diluidos. $vaporaci&n de disolventes

5ilisis 5estilaci&n %. Mtodos de preparacin de muestras para la determinacin de analitos orgnicos La preparaci&n de muestras que contengan analitos orgnicos consiste bsicamente en e%traer el analito, ya sea de forma lquida o s&lida, y de forma sucesiva, para enriquecer la muestra* el problema es que es muy difcil que este proceso sea selectivo, por lo que e%traemos generalmente familias de compuestos. Adems buscamos tambi)n una preconcentraci&n de la muestra, ya que eliminamos disolvente y por 8ltimo conseguimos limpiar la muestra, evitando posibles p)rdidas y la contaminaci&n por distintos interferentes. La e%tracci&n consiste en arrancar el analito de la matriz a la que est unido mediante el empleo de agentes e%tractantes: s&lidos, lquidos o fluidos supercrticos que debiliten la interacci&n matriz analito. -enemos los siguientes tipos de e%tracci&n: (&lido Lquido: $sta a su vez tiene varias posibles metodologas: o +on agitaci&n de ultrasonidos o $%tracci&n (o%hlet: La muestra se coloca en una carcasa poros y el disolvente se recircula continuamente a trav)s de ella mediante un sistema de destilaci&n condensaci&n. 6ay que tener en cuenta los siguientes parmetros: La naturaleza del disolvente La temperatura de e%tracci&n: ha de ser la adecuada para que no se evapore el analito y s lo haga el disolvente. $l tiempo, determina el n8mero de ciclos, que es el n8mero de veces que ser recircula completamente el disolvente. Las venta#as del proceso son que se trata de un m)todo estndar que no requiere filtraci&n, que es independiente del tipo de matriz, y que su coste es muy ba#o. Por el contrario tiene una serie de inconvenientes, y es que requiere un largo tiempo de e%tracci&n !0C <G horas", gran cantidad de disolvente !F// =// ml", preconcentraci&n y no es adecuado para compuestos termolbiles, puesto que calentamos. o $%tracci&n con microondas o $%tracci&n acelerada o $%tracci&n con fluidos supercrticos: 9amos a comentar simplemente las venta#as e inconvenientes: Adems el uso del +@C es rentable porque es inerte, no t&%ico, no inflamable, el punto crtico es asequible y lo conseguimos de alta pureza.

$n cuanto a la instrumentaci&n son necesarios: un tanque de acero, una bomba de alta presi&n, una cmara e%tractora, un restrictor y un colector que recoge el e%tracto. o $%tracci&n con agua subcrtica: La muestra se pone en contacto con agua a alta temperatura y presi&n, casi en las condiciones del punto crtico, es decir, entre =/ y 0// bar, y C=/ y F=/ 1+. Las venta#as son dos: que el e%tractante no es en absoluto t&%ico, y que el proceso es muy eficaz* el inconveniente es que requiere filtraci&n Lquido Lquido: $s obvio que ser necesario en el caso de que tengamos muestras lquidas. +onseguiremos preconcentrar y limpiar nuestra muestra. $l p6 es un factor muy influyente. (&lido (&lido: +onsiste bsicamente en dispersar un s&lido en otro. Para ellos tenemos que homogeneizar con un sorbente y eluir con un disolvente, por e#emplo, la slice. $n fase vapor: (e basa en que en equilibrio e%iste un reparto de la muestra, s&lida o lquida y una fase gas. (e determina la cantidad de materia en la fase vapor por el espacio de cabeza, que puede ser esttico o dinmico. Adems es necesario un sistema de purga, que puede ser cerrado o abierto. $n fase s&lida: $l analito se encuentra en un lquido y se retiene en un s&lido. +onsiste en pasar nuestra muestra a trav)s a trav)s del s&lido correspondiente, se produce una retenci&n de los analitos y posteriormente hacemos la eluci&n con un disolvente adecuado. $l proceso tiene las siguientes aplicaciones: eliminamos las interferencias, hacemos una preconcentraci&n del analito, provocamos un cambio de fase y es 8til para la conservaci&n y el transporte del analito. $l s&lido que usamos puede ser de tipo polar o apolar, puede retener los analitos por e%clusi&n molecular o por afinidad. $l proceso tiene las siguientes venta#as e inconvenientes: tiene una gran eficacia para muestras lquidas, el empleo de disolventes orgnicos, la recuperaci&n para muestras s&lidas y que e%iste la posibilidad de que se bloqueen los puntos activos. 3icroe%tracci&n en fase s&lida !(P3$": $s muy similar a la anterior lo que ocurre es que usamos una fibra especial, y que el proceso es muy 8til para hacer una toma de muestra y posteriormente introducirla directamente en el cromatografo. Los inconvenientes son que la manipulaci&n de la fibra tiene que ser muy cuidadosa y que la contaminaci&n de la fibra es muy fcil. La desorci&n que hay hacer posteriormente se puede hacer t)rmicamente o mediante disolventes de 6PL+.

Las fibras son fibras largas de slice fundida recubiertas por un sorbente, que tienen un pist&n de acero ino%idable y que poseen una agu#a protectora. Preconcentraci&n 3encionamos esto como una necesidad, ya que no podemos tratar grandes vol8menes de muestra. $sto es algo que tiene fcil soluci&n con muestras de tipo orgnico, ya que podemos preconcentrar mediante dos t)cnicas: 5estilaci&n: o (imple o :raccionada o A vaco o Asistida $liminaci&n del disolvente: o $vaporaci&n a temperatura y presi&n ambiente. o $vaporaci&n con nitr&geno o $vaporaci&n Juderna 5anish, a alta temperatura. o 'otavapor: a ba#as presiones. Por 8ltimo debemos de mencionar los procesos membrana: 3icrofiltraci&n: limpieza, purificaci&n y esterilaci&n 4ltrafiltraci&n: Aislamiento de analitos de alto peso molecular !0/// F//./// dalton" Ksmosis inversa: Purificaci&n y preconcentraci&n 5ilisis: $%tracci&n ;: $%tracci&n 3embranas lquidas: $%tracci&n selectiva