QUESTES PARA DISCUSSO

Artigo:

Plant lectins as defense proteins against phytophagous insects

Hygor F. Fernandes

QUESTO 1
As lectinas de plantas so protenas que apresentam na sua estrutura geral um domnio no cataltico capaz de reconhecer e se ligar a estruturas especficas de mono ou oligossacardeos. Uma exceo a essa regra observada no grupo das quimerolectinas, as quais possuem dois ou mais domnios de ligao a carboidrato, especializados numa determinada atividade biolgica.

QUESTO 1
Corrija a sentena levando em considerao a definio e

classificao corretas de lectinas de plantas

QUESTO 1
A resposta deve conter:
As lectinas podem apresentar um ou mais domnios no catalticos

A ligao entre a lectina e o carboidrato reversvel

Nas quimerolectinas, o domnio de ligao que exerce a atividade biolgica independente do domnio de ligao ao carboidrato

QUESTO 2
As lectinas so protenas ubquas no reino das plantas
Centenas de lectinas tm sido purificadas de diferentes espcies de plantas, e, por representarem um grupo muito heterogneo de protenas, houve a necessidade de um sistema de classificao para organizar essas diferentes protenas. Inicialmente, esse sistema de classificao se baseou na especificidade de ligao a carboidratos, no entanto, esse sistema apresentava falhas e um novo sistema de classificao foi criado

QUESTO 2
De acordo com o artigo, quais falhas o sistema de

classificao baseado na especificidade de ligao a carboidratos apresentava, e de forma geral, como as lectinas esto atualmente classificadas? O que permitiu estabelecer essa nova classificao?

QUESTO 2
A resposta deve conter:
As relaes evolucionrias entre as diferentes lectinas no eram levadas em considerao Diferentes domnios de ligao podem reconhecer estruturas de carboidratos similares 12 famlias de lectinas:
Membros de uma famlia compartilham domnios de ligao a carboidratos estruturalmente e evolucionariamente similares

Dados de sequenciamento do genoma de plantas disponveis nas ltimas dcadas

QUESTO 3
Estruturas de carboidratos de maior complexidade, tais

como N-glicanos, so provavelmente os alvos ideais para as lectinas

QUESTO 3
Justifique essa proposio conforme as evidncias dos

estudos de anlise estrutural dessas protenas

QUESTO 3
A resposta deve conter:
Nas lectinas, o domnio de ligao a carboidrato consiste em uma pequena depresso na superfcie da protena a qual complementar a uma unidade de carboidrato que compe uma cadeia maior de um Nglicano A proximidade entre os aminocidos vizinhos ao stio primrio de ligao com os resduos de acar da estrutura do N-glicano permite a formao de ligaes de hidrognio extras Por esse motivo... Lectinas apresentam uma maior afinidade por estruturas de carboidratos mais complexas N-gliganos

QUESTO 4
Diferentes lectinas de plantas apresentam distintos padres de

expresso, podendo ser sintetizas a partir de um dado momento do seu desenvolvimento, independentemente das condies externas (padro de expresso desenvolvimental) ou apenas quando submetidas a condies de estresse, como por exemplo, o ataque de insetos (padro de expresso induzvel)

QUESTO 4
Diferencie esses dois padres de expresso no que diz

respeito ao local de sntese e armazenamento das lectinas a nvel celular e em relao aos tecidos da planta nos quais se concentram.
Qual a principal vantagem do padro de expresso

induzvel?

QUESTO 4
A resposta deve conter:
Lectinas com padro de expresso desenvolvimental

Sintetizadas nos ribossomos associados ao RE e armazenadas em compartimentos vacuolares ou nos espaos inter/extracelulares Mais presentes nas sementes e outros tecidos de estoque
Lectinas com padro de expresso induzvel Sintetizadas no citoplasma e armazenadas no compartimento citoplasmtico ou nuclear Mais presentes em rgos de no armazenamento Padro de expresso induzvel = economia de energia!

QUESTO 5
Quais as principais evidncias que permitem afirmar que as

lectinas compem parte do arsenal de defesa das plantas?

Cite pelo menos 3 outros processos biolgicos nos quais as lectinas podem atuar

QUESTO 5
A resposta deve conter:
Seus alvos especficos normalmente no esto presentes no reino das plantas Diferentes estruturas de carboidratos presentes nos mais variados predadores mostram interagir com lectinas de plantas Lectinas esto presentes em grandes quantidades em rgos de estoque e sementes, normalmente mais vulnerveis A maioria sintetizada como precursores inativos, s se tornando ativa aps ser sequestrada em organelas especializadas

QUESTO 5
A resposta deve conter:
Outras atividades funcionais Coagulao do ltex Dobramento correto de glicoprotenas recm-sintetizadas no RE Transporte de glicoprotenas do RE para o complexo de Golgi Processos de sinalizao intracelular envolvidos no estresse fisiolgico das plantas Interaes simbiticas com outras plantas e micro-organismos benficos

QUESTO 6
Nas ltimas duas dcadas, um importante progresso tem sido feito

no estudo da atividade das lectinas de plantas contra patgenos em geral e em especial contra insetos fitfagos

QUESTO 6
Quais metodologias pode-se empregar para avaliar se uma

lectina possui atividade inseticida contra determinada espcie de inseto?

Quais os principais parmetros que so avaliados nesse

tipo de pesquisa?

QUESTO 6
A resposta deve conter:
Metodologias Expresso ectpica de lectinas de plantas em vegetais geneticamente modificados

Incorporao de lectinas purificadas em dietas artificiais Parmetros

Sobrevivncia das larvas Peso Capacidade de alimentao Pupao Emergncia do adulto Fecundidade

QUESTO 7
J se conhece que a expresso das lectinas induzveis regulada

por diferentes hormnios de sinalizao produzidos diferencialmente conforme o comportamento alimentar dos insetos
Sabe-se que o cido jasmnico aumenta os nveis de lectinas induzidas por insetos mastigadores (ou que se alimentam do contedo celular) e o cido silico regula a expresso de lectinas induzidas por insetos que se alimentam de plen

QUESTO 7
Analise o grfico abaixo e discorra sobre as principais

concluses a que se pode chegar ao que diz respeito ao padro de expresso da lectina NICTABA
Mastigadores
Contedo celular Plen

QUESTO 7
A resposta deve conter:
A expresso da lectina NICTABA regulada por cido jasmnico e no por cido silico Insetos que se alimentam do contedo celular produzem dano tecidual semelhante aos insetos mastigadores, por isso uma resposta de defesa semelhante Insetos que se alimentam do plen evitam danificar os tecidos da planta, por isso no h resposta

QUESTO 8
Em virtude das claras evidncias da toxicidade das lectinas de

plantas para pragas de insetos fitfagos, muito se especula sobre a utilizao dessas protenas como novas alternativas para a produo de plantas geneticamente modificadas resistentes a insetos

QUESTO 8
Quais preocupaes existem atualmente sobre o uso das

lectinas de plantas para propostas comerciais? Levando em considerao os diferentes domnios de lectinas, qual famlia de lectina voc considera mais segura para fins de alimentao humana? Por qu?

QUESTO 8
A resposta deve conter:
Toxicidade para seres humanos e outros mamferos
Toxicidade para insetos benficos Lectinas com domnio de hevena especificidade para quitina no encontrada em mamferos

QUESTO 9
Quais as possveis vias pelas quais insetos benficos podem

interagir com as lectinas inseticidas expressas em plantas geneticamente modificadas?

Qual metodologia voc considera mais apropriada para

avaliar o impacto das lectinas de plantas sobre insetos benficos? Justifique

QUESTO 9
A resposta deve conter:
Consumo de partes da planta
Predao de insetos que se alimentaram da planta Parasitar insetos que se alimentaram da planta

Expresso ectpica em plantas geneticamente modificadas

Condiz mais com as condies naturais (concentrao)

QUESTO 10
Lectinas de plantas tem mostrado exercer toxicidade para todas as

ordens de insetos. No entanto, o efeito de uma determinada lectina normalmente restrito a uma ou a poucas ordens de insetos. Alm disso, a atividade inseticida de uma lectina particular pode diferir dentro da mesma ordem de insetos.

QUESTO 10
Leia os exemplos a seguir e apresente uma provvel

justificativa para a variao observada na capacidade da lectina exercer efeito txico sobre os insetos em estudo

QUESTO 10
a) Planta transgnica de Brassica napus com expresso tecido-especfica da lectina PSA nas anteras provocou uma reduo do ganho de massa em larvas do besouro do plen (Meligethes aeneus), mas no exerceu efeito sobre os insetos adultos.
A resposta deve conter:
Perfil de glicosilao

Depende fortemente do estgio desenvolvimental

QUESTO 10
b) A lectina WGA, pertencente famlia das lectinas
relacionadas hevena exerce efeito toxico sobre as ordens de insetos lepidptera e coleptera, no entanto apresenta baixa ou nenhuma toxicidade para a ordem hemptera A resposta deve conter:
Presena ou no do carboidrato especfico Lectinas relacionadas hevena especificidade para quitina presente na MP do intestino dos insetos Insetos da ordem hemptera no apresenta MP funcional

QUESTO 10
c) A lectina NICTABA mostrou exercer suas propriedades
txicas preferencialmente em insetos da ordem lepidptera
A resposta deve conter:
pH do intestino mdio

NICTABA somente estvel em pH alcalino Insetos lepidpteros apresentam pH intestinal alcalino, enquanto outras ordens de insetos possuem pH cido

QUESTO 10
d) Que outro fator poderia ser a causa da variabilidade dos
efeitos que as lectinas exercem sobre os insetos?
A resposta deve conter:
Resistncia das lectinas protelise

QUESTO 11
Aps ingesto das sementes ou outros tecidos da planta por insetos

fitfagos, as lectinas so liberadas das estruturas celulares rompidas e ento se tornam livres para entrar em contato com as estruturas de carboidratos presentes no intestino mdio dos insetos.

QUESTO 11
Quais os provveis alvos das lectinas dentro do inseto e

quais as explicaes atuais sobre o modo pelo qual as lectinas exercem seus efeitos txicos?

QUESTO 11
A resposta deve conter:
Alvo das lectinas
Quitina e glicoprotenas que compem a matriz peritrfica Glicoprotenas secretadas pelas clulas endoteliais ou presentes na superfcie da sua membrana celular Alvos adicionais em outros tecidos do inseto

QUESTO 11
A resposta deve conter:
Modo de ao
Efeitos sobre a organizao ultraestrutural do intestino mdio Anormalidade na formao de MP funcional Rompimento das estruturas dos microvilos Formao de grandes complexos com as enzimas digestivas impede a difuso das enzimas atravs da MP e sua reciclagem pelo sistema digestivo

ALGUMA DVIDA??