Efecto de los polifenoles dietarios en el estrs oxidativo postprandial

INS URQUIAGA REUS Centro de Nutricin Molecular y Enfermedades Crnicas, CNMEC-UC Pontificia Universidad Catlica de Chile Simposio Internacional Alimentacin Mediterrnea, Bienestar y Salud
9 de Abril de 2013

Paradoja del Oxgeno

Anguila Rana Trucha Gorrin Ratn

Barthelemy et al 1981

Relacin entre tiempo promedio de sobrevida y presin de O2.. MO2, consumo de oxgeno. Animales con tasas metablica ms alta son ms susceptibles a la toxicidad por O2.

Dao Celular Inducido por Especies Reactivas del Oxigeno (EROs)

Fuentes de EROs: Respiracin celular, 2-3% Respuesta inmune Proceso de digestin de los alimentos Rayos ultravioletas Radiaciones ionizantes Humo del cigarrillo Frmacos

Estrs Oxidativo Postprandial

Triglicridos y glicemia post-prandial en diabeticos luego de la ingesta una mezcla de 75 g de glucosa y crema batida con 75 gr de grasa, 6 g de protena 5 de carbohidratos en pacientes diabticos
Centro de Nutricin Molecular y Enfermedades Crnicas Pontificia Universidad Catlica de Chile

OKeefe et al, 2008

Estrs Oxidativo Postprandial

Respuesta postprandial a la ingesta a una mezcla de glucosa (75 g) y crema batida (75 g grasa, 6 g protena, 5 g carbohidratos) en diabticos. Junto con el aumento de la glicemia y los triglicridos se produce un aumento del estrs oxidativo (nitrotirosina) , un aumento de la inflamacin (proteina C-reactiva) y el deterioro de la funcin endotelial (dilatacin mediada por flujo).
Centro de Nutricin Molecular y Enfermedades Crnicas Pontificia Universidad Catlica de Chile

OKeefe et al, 2008

Estrs Oxidativo Postprandial

300 700

Trigliceridos (mg/dl)
0 1 2 3 Horas Postprandial 4

250

600 500 400 300 200 100 0 0 1 2 3 Horas Postprandial 4

Glicemia (mg/dl)

200 150

100
50 0

% Dilatacin mediada por flujo

14

10
8 6 4 2 0 0 1 2 3 Horas Postprandial 4

Nitrotirosina (M)

12

1 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0 0 1 2 3 4 Horas Postprandial

Normales Diabeticos

Respuesta postprandial a la ingesta a una mezcla de glucosa (75 g) y crema batida (75 g grasa, 6 g protena, 5 g carbohidratos) en diabticos. Junto con el aumento de la glicemia y los triglicridos se produce un aumento del estrs oxidativo (nitrotirosina) y el deterioro de la funcin endotelial (dilatacin mediada por flujo).
Centro de Nutricin Molecular y Enfermedades Crnicas Pontificia Universidad Catlica de Chile

Ceriello et al. 2004

Estrs Oxidativo Postprandial

80 Trigliceridos (mg/dl) 70 Peroxido (M) 60 50 40 30 20

35 30 25 20 15 10 Malondialdehido (M) 0 1 2 4 Horas postprandial 6

2,5 2 1,5 1 0,5 0 0 1 2 4 Horas postprandial 6

10
0 0 1 2 4 Horas postprandial 6

5
0

Respuesta postprandial a la ingesta de una comida grasa, consistente en una crema batida 100% grasa: 60% saturada, 30 % minoinsaturadas y 10 % polinsaturadas. Hombres jvenes sanos
Centro de Nutricin Molecular y Enfermedades Crnicas Pontificia Universidad Catlica de Chile

Fisher-Wellman&Bloomer, 2010

Dao oxidativo postprandial

Durante el proceso de la alimentacin, consumo y digestin de los alimentos

Aumento en la formacin de especies oxidantes que se producen en el tubo digestivo despus del consumo y digestin de los alimentos, especialmente tras la ingesta de comidas grasa Este aumento de lpidos oxidados se relaciona con el desarrollo de enfermedades crnicas Antioxidantes naturales de la dieta, especialmente polifenoles, previenen este proceso oxidativo

Estudio del efecto biolgico sobre el proceso de la alimentacin de una bebida 100% natural, preparada a partir de concentrados de berries

Fuentes de Antioxidantes

Frutas Verduras Aceite de oliva Vino Caf T Chocolate Especias Legumbres secas y cereales integrales

Dieta Mediterrnea

Estudio del efecto biolgico sobre el proceso de la alimentacin de una bebida 100% natural, preparada a partir de concentrados de berries

Efecto de la Dieta Mediterrnea sobre el estrs oxidativo postprandial en adultos mayores

T2 T0 =

T4 T0 =

Estudio aleatorio cruzado, 3 dietas isocalricas durante periodos de 4 meses cada una:
Dieta rica en cidos grasos saturados, 38% grasa(22% SFA, 12% MUFA y 4% PUFA)
Dieta Mediterrnea 38% grasa (24% MUFA, 10% SFA y 4% PUFA) Dieta alta en carbohidratos, baja en grasa 28% (10% SFA, 12% MUFA 8% PUFA con 2 % cido alfa-linolenico)
Centro de Nutricin Molecular y Enfermedades Crnicas Pontificia Universidad Catlica de Chile

P1: efecto de la dieta

Perez-Jimenez et al. 2011

Funcin Endotelial en un estudio de intervencin de dietas altas en grasa

% cambio dimetro arteria braquial

12
b 10 ab b b

8 a 6

*
a

4 a 2

*
a

Dieta
Vino Blanco Vino Tinto

F&V

MUFA
Aceite de Oliva

PUFA
Aceite de Maravilla

El estrs oxidativo postprandial se modifica con el tipo de grasa

HFSA, 38% grasa (16% SFA, 12% MUFA y 6% PUFA)

HMUFA, 38% grasa

(20% MUFA, 8% SFA y 6% PUFA) LFHCC, 28% grasa (8% SFA, 11% MUFA 6% PUFA)

LFHCCn-3, 28% grasa

(8% SFA, 11% MUFA 6% PUFA + 1,24 gr LC n3 PUFA)

Centro de Nutricin Molecular y Enfermedades Crnicas Pontificia Universidad Catlica de Chile

Perez-Martinez et al. 2010

El vino tinto previene el aumento postprandial de hidroperxidos lipidicos y de productos de oxidacin de colesterol: un estudio piloto
Hidroperoxidos lipidicos 7--hidroxicolesterol Agua

Vino tinto

Hamburguesa doble queso, con 300ml agua o 300 ml de vino tinto La comida control induce un aumento significativo en la concentracin plasmatica de hidroperxidos lipidicos y de producto de oxidacin de colesterol 7--hidroxicolesterol. El vino tinto previene la oxidacin lipidica cuando se consume con la comida.
Centro de Nutricin Molecular y Enfermedades Crnicas Pontificia Universidad Catlica de Chile

Natella et al 2011

El arte de combinar los alimentos

Proyecto SC007

Mapeo antioxidante de 9 berries, 21 variedades, de 6 zonas geogrficas distintas (n=600) Formulacin de una mezcla 100% natural de extractos de berries caracterizada por su alta capacidad antioxidante
BPC-350 Proyecto 6C029

Estudios de estabilidad

Aplicacin en distintas matrices alimentarias

Estudio agudo de funcionalidad en humanos

Estudio de intervencin en humanos

Estudio del efecto biolgico sobre el proceso de la alimentacin de una bebida 100% natural, preparada a partir de concentrados de berries

BPC-350: mezcla lquida 100% natural de

concentrados de 4 berries chilenos, con una alta Proyecto SC007 capacidad antioxidante.
Alimento
Acai berry, freeze-dried Maqui berry, concentrated powder BPC-350 Maqui Goji berries Sauco Mora Cranberries, raw Frutilla Frambuesa Vino tinto Ciruela Granada Manzana Verde Durazno

ORAC (mmoles TE/g)

1027,0 750,0 453,7 258,4 253,0 145,2 136,4 96,0 49,6 48,5 30-40 34,1 19,1 12,9 4,6

BPC-350 es: Alta Capacidad Antioxidante Estable en el tiempo De buen sabor

Hiptesis

La ingesta de una bebida 100% natural preparada a partir de un concentrado de berries (BPC-350), rica en antioxidantes, aumenta la capacidad antioxidante del plasma y disminuye el dao oxidativo asociado al consumo de una comida grasa durante el proceso de la alimentacin

Estudio del efecto biolgico sobre el proceso de la alimentacin de una bebida 100% natural, preparada a partir de concentrados de berries

Objetivo
Estudiar el efecto del consumo de la bebida antioxidante
preparada a partir de un concentrado de berries (BPC-350)

en personas sanas, durante el proceso de la alimentacin,

a travs de la caracterizacin de su efecto antioxidante capacidad antioxidante del plasma y dao oxidativo a lpidos y protena-, con miras a su promocin como alimento funcional.

Estudio del efecto biolgico sobre el proceso de la alimentacin de una bebida 100% natural, preparada a partir de concentrados de berries

Preparacin de bebida antioxidante a partir de BPC-350

Bebida antioxidante: Agua purificada, BPC-350 al 5% p/v, edulcorante y preservantes; Y envasada en botellas plsticas desechables de 250 ml

Estudio del efecto biolgico sobre el proceso de la alimentacin de una bebida 100% natural, preparada a partir de concentrados de berries

Preparacin de bebida antioxidante a partir de BPC-350

La bebida antioxidante: ORAC 14,10 mmoles TE/g
Se determino que la capacidad antioxidante de la bebida ORACse mantena constante a lo largo del tiempo (7 das a 38 C equivalente a 6 meses de almacenamiento a temperatura ambiente).

1 botella de bebida antioxidante (250 ml) = 3.525 unidades ORAC (mmoles TE/g) = 70,5% de la dosis recomendada diaria por la FDA
(para aporte de antioxidantes provenientes de frutas y verduras) Equivalente a una copa de vino tinto de 125 ml
Estudio del efecto biolgico sobre el proceso de la alimentacin de una bebida 100% natural, preparada a partir de concentrados de berries

Preparacin de la comida

Carne molida de trutro de pavo, con 6% de materia grasa

Se elaboraron hamburguesas con o sin 6% de BPC-350

Se cocinaron al horno
Finalmente se envasaron al vaco, en porciones de 250g y se congelaron a -20C

Estudio del efecto biolgico sobre el proceso de la alimentacin de una bebida 100% natural, preparada a partir de concentrados de berries

Anlisis de la comida
Dao oxidativo a lpidos (MDA)
Hamburguesa antioxidante Cocida
Hamburguesa antioxidante cruda

0,002

0,004

Hamburguesa control cocida

Hamburguesa control cruda
0,000

0,045

Sacar el pavo crudo

0,005
0,005 0,010 0,015 0,020 0,025 0,030 0,035 0,040 0,045 0,050

MDA (mmoles/kg)

BPC-350 protege a los alimentos de la oxidacin

Estudio del efecto biolgico sobre el proceso de la alimentacin de una bebida 100% natural, preparada a partir de concentrados de berries

Estudio del efecto biolgico postprandial de la bebida antioxidante preparada en base a BPC-350
Diseo del estudio
Comida 1
250 grs de hamburguesa de trutro de pavo + 500 cc de agua

Comida 2
250 grs de hamburguesa de trutro de pavo + 500 cc de bebida antioxidante

Comida 3
250 grs de hamburguesa de trutro de pavo com BPC-350 6% + 500 cc de bebida antioxidante

0 hr

1 hr

2 hr

3 hr

4 hr

5 hr 6 hr

Ingesta de comida (30 min)

Estudio del efecto biolgico sobre el proceso de la alimentacin de una bebida 100% natural, preparada a partir de concentrados de berries

Anlisis de las muestras de sangre de los voluntarios (15 Jvenes):

Perfil lipdico, perfil bioqumico, hemograma: tiempo 0. Glicemia y triglicridos: tiempos 0, 1, 2, 3, 4, 5 y 6 horas. Perfil de Antioxidantes y Dao Oxidativo: tiempos 0, 1, 2, 3, 4, 5 y 6 horas
Antioxidantes: - Vitamina C

- Capacidad antioxidante total del plasma:

TAR, TRAP; FRAP y DPPH - Antioxidantes liposolubles: Vit. E, B-caroteno y Licopeno

Marcadores de Dao Oxidativo: MDA y Carbonilo

Anlisis Estadstico. El anlisis estadstico de todas la variables analizadas se realiz a travs de un Modelo Mixto, Generalized Estimating Equations (GEE),con el Software R.
Estudio del efecto biolgico sobre el proceso de la alimentacin de una bebida 100% natural, preparada a partir de concentrados de berries

Resultados:
Triglicridos

Triglicridos
160 70 60 130 50 40

Delta Triglicridos

mg/dL

30 100
COMIDA 1 COMIDA 2 COMIDA 3

20

10
0

COMIDA 1 COMIDA 2 COMIDA 3

70

T0

T1

T2

T3

T4

T5

T6

T0

T1

T2

T3

T4

T5

T6

Resultados:

Antioxidantes en el plasma: Los niveles plasmticos de Vitamina C y E en el tiempo no presentaron diferencias significativas entre las comidas. Capacidad antioxidante total en plasma: Los ndices TAR, TRAP y FRAP en el tiempo presentaron una tendencia de aumento no significativa principalmente en la comida 3. El ndice DPPH presento diferencias significativas en el tiempo.
Estudio del efecto biolgico sobre el proceso de la alimentacin de una bebida 100% natural, preparada a partir de concentrados de berries

Capacidad antioxidante en el plasma (DPPH)

DPPH
20

COMIDA 1
10

COMIDA 2 080,2 +/- 73,4

COMIDA 3

100,0 80,0
C

DPPH (uM)

rea DPPH (m M*hr)

1 Comida 1 Comida 2 Comida 3

60,0 5 40,0

-10

20,9 +/- 57,3

20,0
0,0

-20

Tiempo (hr)

-20,0
A

-32,6 +/- 46,4

-40,0

Estudio del efecto biolgico sobre el proceso de la alimentacin de una bebida 100% natural, preparada a partir de concentrados de berries

Dao oxidativo a lpidos (MDA) postprandial

MDA en plasma
0,3 Comida 1 Comida 2 0,2 Comida 3

1,2 1,0 0,8

A
1,07 +/- 0,16

MDA (uM)

0,1

B
0,82 +/- 0,18

0,0 0 1 2 3 4

0,6 0,4

-0,1

Tiempo (hr)

0,2

0,02 +/- 0,09

0,0 Comida 1 Comida 2

Comida 3

Estudio del efecto biolgico sobre el proceso de la alimentacin de una bebida 100% natural, preparada a partir de concentrados de berries

Dao oxidativo a protenas (carbonilos) postprandial

Carbonilos en plasma
0,04

Area bajo curva de Carbonilos

0,1

Carbonilos (uM)

0,00 0 1 2 3 4 5
A

6
B

0,0
rea Carbonilos (m M*hr)
-0,04

-0,016 +/- 0,08 -0,1 -0,126 +/- 0,097

Comida 1
Comida 2 Comida 3

-0,08

Tiempo (hr)

-0,2
-0,208 +/- 0,125

-0,3 COMIDA 1 COMIDA 2 COMIDA 3

Estudio del efecto biolgico sobre el proceso de la alimentacin de una bebida 100% natural, preparada a partir de concentrados de berries

Discusin (2)

La bebida antioxidante protege a la comida durante su preparacin y durante su digestin en el estomago de la oxidacin de lpidos y protenas. La bebida antioxidante aumenta la capacidad antioxidante del plasma, medida como DPPH.
La bebida antioxidante disminuye el dao oxidativo a lpidos, medido como MDA y de protenas, medido por la presencia de grupos carbonilos, lo que significa que es capaz de proteger estructuras celulares, como membranas, y molculas de nuestro cuerpo como las partculas LDL.

Estudio del efecto biolgico sobre el proceso de la alimentacin de una bebida 100% natural, preparada a partir de concentrados de berries

Conclusiones

BPC-350 protege del dao oxidativo a los alimentos desde su preparacin y durante su digestin BPC-350 protege a las personas que lo consumen: menor dao oxidativo mayor capacidad antioxidante en el plasma BPC-350 es un alimento funcional

Estudio del efecto biolgico sobre el proceso de la alimentacin de una bebida 100% natural, preparada a partir de concentrados de berries