Immunologie

Immunogntique normale et pathologique

Grard LEFRANC Marie-Paule LEFRANC
Universit Montpellier 2, CNRS UPR1142, Institut de Gntique Humaine, IMGT, Information System http://www.imgt.org Cours Montpellier Montpellier, fvrier 2011
L3 et Master 1re anne
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Objectifs du cours:

Immunodficiences f ( (dficits f immunitaires) ) hrditaires Contenu:

Immuno et g gntique q normale et pathologique

Protines, Gnes Signes g cliniques, q signes g biologiques, gq traitements Fonctions de ces protines dans les cellules impliques dans les rponses adaptatives B, T, NK et CPA (O?, Quand? Comment?) Non exhaustif: dficits par dfauts des rarrangements de lADN
( (mutations des g gnes RAG 1 et 2, , des gnes g NHEJ pour p NonHomologous-End Joining comme Ku70 et 80, la sous-unit catalytique de DNA-PK, Artemis, XRCC4, DNA-ligase IV, Cernunnos) non traits
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Sources dinformation: HGNC (gnes), OMIM (maladies), IMGT (immunogntique)

Immunogntique normale et pathologique

Plan du cours: 1- Lymphocytes T: Adnosine dsaminase (ADA) 2- Lymphocytes T et NK: ZAP 70 Chane commune aux IL-R (-2, -4, -7, -9, 15, -21) JAK3 3- Lymphocytes B: Bruton tyrosine kinase BTK 4- Coopration cellulaire B et T: CD40L, 5- Cellules prsentatrices dantignes (CPA): CTAII, 6 Proprits effectrices (cytotoxiques): 63 MYO5A,

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IMGT Education Ed i Enseignement g Marie-Paule Lefranc f

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P Pour plus l s dinformation, di f m ti voir i chapitre: h it :

Dficits immunitaires primaires: les mcanismes molculaires

The international ImMunoGeneTics information system Coordinator: M.-P. Lefranc, Montpellier, France http://www.imgt.org

IL10, IL35 TGF IL2, TGF

IL10, IL35 TGF

IL2 TGF

IL-12, IFN-

IL-2, IFN-, TNF-

5 March 2004, Vol 303, Science, 1481/2

Gram-positive p

Gram-negative bacteria

HSV-1, herpes simplex virus 1. LPS, lipopolysaccharides. RSV, Roux sarcoma virus. MMTV mouse mammary tumor virus MMTV, virus.

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Perforine et Granzymes

I G IgG

Antibody Dependent Cell Cytotoxicity

CD16

Cellule NK (Natural Killer)

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Lymphocytes T

TCR-CD3 : reconnaissance de molcules du CMH normales + peptides CD4 = T helper pour CMH classe II des CPAg CD8 = T cytotoxiques y q p pour CMH classe I des cellules nucles

Cellules NK ( (Natural Killer) )

Pas de TCR Prsence de FcRIIIA (CD16) ADCC (Antibody Dependent Cell Cytotoxicity) Prsence de rcepteurs du CMH I contrle de qualit des molcules de CMH I : cytotoxicit si ces molcules sont absentes ou trs peu exprimes ou de structures anormales.
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Perforine et Granzymes

I G IgG

Antibody Dependent Cell Cytotoxicity

CD16

Cellule NK (Natural Killer)

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Classes Sous-classes IgM IgD IgG1, 2, 3, 4 IgG IgA IgA1, 2 IgE

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Classes Sous-classes IgM IgD IgG1, 2, 3, 4 IgG IgA IgA1, 2 IgE

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Lyse (CDC) Lyse (CDC)

Cytotoxicit (ADCC)

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FcR I and R IIA : FcR IIIA : ADCC by NK cells

(endocytosis by macrophages)

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Perforine et Granzymes

I G IgG

Antibody Dependent Cell Cytotoxicity

CD16

Cellule NK (Natural Killer)

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Classes Sous-classes IgM IgD IgG1, 2, 3, 4 IgG IgA IgA1, 2 IgE

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Des mutations ltat homozygote ou deux mutations diffrentes des gnes RAG-1 et RAG-2 ne permettent pas ces rarrangements et entranent larrt de la diffrenciation des lymphocytes B et T (mort par apoptose). Il en rsulte un Dficit Immunitaire Combin Svre (DICS ou SCID) : pas de rponses cellulaires, ni de rponses 43 humorales (Syndrome dOMENN).

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Rarrangements des gnes V(D)J dans les lignes lymphodes B et T: diversit combinatoire des sites Ac des Ig
d B et des t des d rcepteurs t des d T

Interventions successives de nombreuses protines; des mutations des gnes correspondants vont entraner des dficits immunitaires: . RAG 1 et 2 (Recombination Activating Genes): cassure doublebrin de lADN l ADN . Ku 70 et 80, htrodimre fixant lADN ainsi cass . DNA DNA-PKcs PKcs, sous sous-unit unit catalytique associe Ku 70/80 qui phosphoryle . Artemis, recrute par le complexe prcdent P i i Puis intervention t ti d de 3 d dernires i enzymes assurant tl la rparation ti de lADN: . XRCC4 . DNA-Ligase IV . Cernunnos Tous ces complexes reprsentent la voie de rparation des extrmits non homologues (Non-Homologous End Joining48 ou NHEJ)

DNA ligase g 4 (LIG4) ( )

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Dficit en Terminal deoxynucleotidyl T Transferase f (TdT)

A la diversit combinatoire vient sajouter celle des squences N*(entre D et J et entre V et D D-J). J) Elle rsulte des actions successives de la forme Longue TdT-L, action exonuclase, puis de la forme courte TdT-S, action TdT**: cration de novo, p sans brin matrice, de courtes squences nuclotidiques alatoires, diffrentes dun B ou dun T un autre, qui augmentent considrablement la diversit et le nombre de spcificits des sites Ac et des sites de reconnaissance des Rcepteurs T. Ces squences N signent lidentit des lymphocytes B et T et des clones qui en rsultent. Des mutations du gne TdT vont diminuer cette diversit et les spcificits correspondantes diminuant dautant correspondantes, d autant les rponses immunitaires. immunitaires *Sont concernes, par ces squences N, les rgions variables des chanes lourdes des Ig et les rgions variables des chanes des Rcepteurs T. 50 **Les formes TdT- L et S rsultent dun pissage alternatif.

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Lyse (CDC) Lyse (CDC)

Cytotoxicit (ADCC)

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: -1

-2

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Coopration cellulaire B et T

(1) (2) (3) (4) (5)

B reconnat T (MHCII CD4) T reconnat t B (TR peptide/MHCII) tid /MHCII) et t devient d i t T activ ti T activ synthtise CD40L et des cytokines B reconnat T activ (CD40- CD40L) et devient B activ B activ synthtise des rcepteurs de cytokines, SWITCH, 56 hypermutations somatiques

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Commutation de classe (Switch) des IG dans les g ganglions g lymphatiques y p q (follicules ( secondaires) )

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Dficit en CD40L (CD154): absence de commutation de classe, classe hyperimmunoglobulinmie IgM (HIGM1)

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4- Coopration cellulaire B et T

- Protine: CD40L (ligand de CD40) ou CD154 Gne: TNFSF5 ou TRAP (TNF-related activation protein, car homologie avec le TNF) (Xq26) Dficit: HIGM1 (affecte les garons),1 naissance sur 200.000 Signes cliniques: infections opportunistes (pneumocystose, (pneumocystose cryptosporidiose) Signes biologiques: absence de lymphocytes B mmoires, absence b d de centres germinaux, h hyperimmunoglobulinmie l b l IgM, pas de switch, absence des autres classes dIg. - Protine: CD40, CD40 rcepteur de CD40L. Gne: TNFRSF5 (20q12-q13.2) Dficit: HIGM3 (affecte filles et garons). - Protines: enzymes A.I.D. (Activation [B] Induced cytidine Deaminase) et UNG (Uracile-DNA Glycosylase). Dficits: HIGM3 et HIGM5 (affectent filles et garons). garons)
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Absence de Switch mais aussi de mutations somatiques: IgM seulement et affinit faible de leurs sites Ac

En l labsence absence de l linteraction interaction CD40-CD40L CD40 CD40L et, et de ce fait, fait de certaines cytokines, PAS dactivation des B et, par voie de consquence, PAS dactivation des gnes ncessaires au Switch* et au phnomne d dhypermutation hypermutation somatique*, , dont ceux: - dune cytidine daminase (AID pour B cell Activation-Induced cytidine Deaminase) -d dune une Uracil-DNA Uracil DNA Glycosylase (UNG) Lhypermutation somatique se traduisant par une augmentation daffinit des sites Ac, son absence fait que les IgM, les seules Ig tre exprimes la surface des lymphocytes B et tre secrtes par les Plasmocytes, ont une affinit faible. Les consquences en sont une activation faible des lymphocytes B. Par P ailleurs, ill elles ll ne peuvent t pas se fixer fi aux Rcepteurs R t de d F Fc des IgG prsents la surface des macrophages et des NK, do une dfense immunitaire insuffisante et des infections frquentes des patients souffrant d dHIGM HIGM. Rem.: hypermutation somatique et switch tant lis*, il en rsulte que les IgG (les IgA et IgE aussi) ont une affinit nettement suprieure celle des IgM. IgM * Switch et hypermutation somatique ne concernent que les 65 lymphocytes B.

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Interfrons: IFN-,, 35, 35

Chimiokines

-Family CYS-X3-CYS

-Other Chemokine: -CYS-

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2- Lymphocytes T et Natural killers (NK) Protine: P i Ch i gamma commune (c) aux Chaine rcepteurs de cytokines (IL-2R, IL-4R, IL-7R, L R IL-9R, L 9R IL-15R L 15R et IL-21R) L 21R) Gne: IL2RG (Xq13) ( q ) Dficit: SCID-X1 SCID X1 (affectent les garons)
SCID lis lX: plus de 50% des cas de SCID
Enfant-bulle de Houston (12 ans dans une bulle strile) Pas de thymocytes, pas de lymphocytes T et pas de NK, lymphocytes B en nombre lev mais peu ou pas fonctionnels en l b labsence d de l lymphocytes h t T (SCID T T- B+) B )
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2- Lymphocytes T et Natural killers (NK)

Protine: Chaine gamma commune (c) aux rcepteurs p de cytokines y (IL-2R, IL-4R, IL-7R, IL-9R, IL-15R et IL-21) q Gne: IL2RG (Xq13) Dficit: SCID-X1 (affectent les garons)

Traitement: Greffe de moelle osseuse, osseuse

9 enfants traits Equipe de Fischer en 2000. Avantage slectif des cellules transfectes. par intgration g du Problme: 3 leucmies p vecteur dans le gne LMO2)

Thrapie gnique

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2- Lymphocytes T et Natural killers (NK) Protine: Janus kinase 3 (JAK3) Gne: JAK3 (19p13) Dficit: SCID
Autosomal rcessif (Dfinition gnrale: Les patients sont homozygotes pour une mme mutation ou htrozygotes pour deux mutations diffrentes) Pas de thymocytes, thymocytes pas de lymphocytes T et pas de NK, l lymphocytes h t B en nombres b l levs mais i pas ou peu fonctionnels

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JAK3-deficient SCID Autosomal recessive Lack L k of f T and d NK cells ll Non functional B cells Recurrent infections y in life Lethal early BMT curative Candidate for gene therapy
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(ht (htrozygotes) t ) , 1999 et 2001

1998, 1999 et 2001 87

ab

++

cd

1/2
ef
++

1/2
+

+ ac
1/2
+

ad

++

gh

1/2
+

ae

ag

En raison de la consanguinit greffes HLA compatibles entre l des lun d parents et un enfant f Cas de -Janet AK a e SCID

1/2 1/2

ag
SCID

eg

-+

eg

--

++

ae

aa

Loci autosomiques: ex: - Jak J k 3 Janus J Ki Kinase 3 + allle normal; - allle mut - HLA: haplotypes a, b, c, d, e, f, g, h: polymorphisme trs important Gnes indpendants, ports par des autosomes diffrents

Greffe comme dans les familles panmictiques entre frre(s) et sur(s)

SCID

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Mutation de STAT3

e ngative

TYK2 -/DOCK8 -/-

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Arbre gnalogique dune maladie dominante autosomique.

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1- Lymphocytes T et B Protine: Adnosine dsaminase (ADA) Gne: ADA (20q13) ( q )

ADA Adnosine Hypoxanthine Inosine PNP

Dfi it alymphocytose, Dficit: l h t lymphopnie l h i

- Premier dficit immunitaire caractris au niveau molculaire - Enzyme dans le cycle des nuclotides puriques: dficit entrane accumulation de dsoxyadnosine et augmentation de dATP (x100) qui inhibe la synthse des autres dNTPs

Traitement: Polythylne glycol (PEG) + ADA 99

recombinante et Thrapie gnique

2- Lymphocytes T et Natural killers (NK) Protine: Zeta chain associated p protein 70

(ZAP70)

Gne: ZAP70 (2q12) Dfi i Severe combined immunodeficiency Dficit:

(SCID), autosomique rcessive

Immunodficience des lymphocytes T et NK

Dcouverte en 1994 de patients dpourvus de ZAP70
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2- Lymphocytes T
Dficit en ZAP70: Dfaut en lymphocytes T Les lymphocytes T priphriques expriment le TR et le CD4, mais pas le CD8 Lymphocytes T double positifs CD4+CD8+ dans le cortex t du d th thymus Absence de T CD8+ dans la mdulla du thymus -Dfaut Df t i intrathymique t th i d de l la diffrenciation diff i ti des d lymphocytes l h t T CD8+

mais aussi:

- Dfaut dans la signalisation des lymphocytes T CD4+ matures 103

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