Acta Pediatr Mex 2011;32(5):309-310

Criterios peditricos

Microdilisis: bases y aplicaciones en el estudio de las enfermedades del sistema nervioso

M en C. Liliana Rivera-Espinosa, 1 M en C. Aristides III Sampieri, 2 Dra. Liliana Carmona-Aparicio 1*

a microdilisis se desarrollo con el fin de monitorear eventos bioqumicos mediante la recoleccin de muestras en sitios especficos de forma contina, debido a que el intercambio qumico entre las clulas ocurre en el lquido extracelular y que a diferencia de otros procedimientos experimentales con los cuales slo se observa una imagen nica de estos eventos, debido a que las funciones bioqumicas del organismo son determinadas en base al anlisis de muestras sanguneas o biopsias. El grupo de Bito y cols. (1966) fue el primero en implantar sacos de dilisis en el interior del tejido subcutneo del cuello y en el interior del parnquima en el hemisferio cerebral de perros con el fin de analizar el contenido de los aminocidos en esa regin del cerebro 1. Estos experimentos introdujeron la idea de que se podra inducir un microambiente insertando una membrana de dilisis en la cual se establecera un equilibrio qumico en el espacio extracelular que se podra estudiar en condiciones normales, alteradas o modificadas.
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Laboratorio de Farmacologa, Instituto Nacional de Pediatra. Laboratorio de Biologa Molecular y Gentica, Facultad de Ciencias, UNAM. Laboratorio de Neuroqumica, Instituto Nacional de Pediatra.

Correspondencia: Dra. en C. Liliana Carmona-Aparicio. Investigador en Ciencias Mdicas C. Laboratorio de Neuroqumica, Torre de Investigacin. Insurgentes Sur 3700, Letra C, Col. Insurgentes Cuicuilco, Delegacin Coyoacn, C.P 04530, Mxico D.F. Telfono celular: 044-5525334306 Telfono: (+52) (55) 10840900 (1429) Email: c_apariccio@yahoo.com.mx Recibido: agosto, 2011. Aceptado: agosto, 2011. Este artculo debe citarse como: Rivera-Espinosa L, Sampieri A, Carmona-Aparicio L. Microdilisis: bases y aplicaciones en el estudio de las enfermedades del sistema nervioso. Acta Pediatr Mex 2011;32(5):309-10. www.nietoeditores.com.mx

El principio de la microdilisis se basa en el fenmeno fisicoqumico de la difusin pasiva. Esto ocurre cuando una sustancia no esta homogneamente distribuida en un medio y se presenta un intercambio de esta sustancia hasta llegar a un equilibrio 2. Este es un proceso espontneo e irreversible en el que una sustancia en solucin se distribuye como consecuencia del movimiento de sus partculas, hasta ocupar todo el volumen disponible en el que se encuentran. Este movimiento es constante y al azar, es decir, las molculas pueden moverse hacia una direccin u otra de manera indistinta. Sin embargo, si se toma en cuenta que el nmero de partculas de una sustancia dada es mayor en sitios en los que se encuentra en alta concentracin, predomina su desplazamiento hacia sitios de baja concentracin. Por ende, se establece una difusin neta de la sustancia desde los sitios de alta hacia sitios de baja concentracin 3. Es importante mencionar que las membranas semipermeables se caracterizan por el tamao de sus poros, por lo que slo las molculas con peso molecular menor a este tamao podrn atravesar esta barrera 4 (Figura 1). La microdilisis consiste en el paso de un vehculo (perfusin) a determinada velocidad a travs de la membrana implantada en el tejido en estudio, de los modelos experimentales in vivo, as como en humanos, y en una solucin de concentracin conocida para el caso de experimentos in vitro. La eleccin del vehculo en estos tipos de experimentos depende del sitio donde se va a implantar una cnula de microdilisis. En general los vehculos son soluciones acuosas con bajas concentraciones de iones de sodio y potasio, sin protenas o a muy bajas concentraciones, que asemejan a las que existen en el espacio extracelular en estudio. Los vehculos usados en la microdilisis son de diferente composicin qumica, tales como solucin salina, lquido cefalorraqudeo artificial, entre otros.

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En el caso de la retrodilisis, el vehculo es la matriz en la cual va contenido del anlito de inters que se espera ejerza un efecto fisiolgico y bioqumico en el espacio extracelular en estudio. En el proceso de la perfusin, el flujo del vehculo genera el movimiento del anlito, que se difunde debido a un gradiente de concentracin que ocurre entre dos regiones que estn separadas por una membrana (Figura 1). La difusin ocurre a travs de la membrana semipermeable, donde los compuestos endgenos (neurotransmisores, neuropptidos, neurohormonas, entre otros) y compuestos exgenos (frmacos y sus metabolitos) se difunden al interior, mientras que los compuestos que han sido agregados al vehculo, se difunden fuera de la solucin de perfusin, proceso conocido como retrodilisis (Figura 1).
APLICACIN DE LA MICRODILISIS EN EL ESTUDIO DE LAS ENFERMEDADES DEL SISTEMA NERVIOSO

La microdilisis es una poderosa herramienta usada ampliamente en el rea de las neurociencias, debido a que permite comprender los posibles mecanismos responsables

de las neuropatas, as como la identificacin de blancos moleculares para su tratamiento. La microdilisis para estudiar las enfermedades del sistema nervioso central se aplica en modelos experimentales y actualmente en humanos 5. Cabe mencionar que los estudios en humanos son muy restringidos, ya que implican cuestiones ticas y legales; sin embargo, los datos obtenidos de ellos han mostrado resultados favorables que han contribuido a la aplicacin de tratamientos especficos, dando como resultado la mayor probabilidad de la remisin de la enfermedad, as como la minimizacin de las secuelas que puedan dejar estas enfermedades; mejora as el pronstico de vida de estos pacientes. Algunos ejemplos del uso de la microdilisis es la monitorizacin de pacientes con traumatismo craneoenceflico 6 y hemorragia sub-aracnoidea 7 en salas de cuidados intensivos. Adems en la investigacin de enfermedades neuronales como la epilepsia, Alzheimer, Parkinson, Huntington, esclerosis lateral amiotrfica, encefalopatas, entre otras.
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS 1. Bito L, Davson H, Levin E, Murray M, Snider N. The concentrations of free aminoacids and other electrolytes in cerebrospinal fluid, in vivo dialysate of brain, and blood plasma of the dog. J Neurochem 1966;13:1057-67. Kenneth E, Garrisona SA, Pasasb JD, Cooperb MD. A review of membrane sampling from biological tissues with applications in pharmacokinetics, metabolism and pharmacodynamics. Euro J Pharma Sci 2002;17:112. Jaitovich A. Introduccin al trfico de sustancias a travs de la membrana celular. En: Bases fisiolgicas de la prctica mdica. Best and Taylor Eds. 13 ed. Argentina: Mdica Panamericana; 2003. Verbeeck RK. Blood microdialysis in pharmacokinetic and drug metabolism. Advanced Drug Delivery Reviews 2000;45:21728. Whittle IR. Intracerebral microdialysis: a new method in applied clinical neuroscience research. Br J Neurosurg 1990;4:459-62. Robertson CS, Gopinath SP, Goodman JC, Contant CF, Valadka AB, Narayan RK. SjvO2 monitoring in head-injured patients. J Neurotrauma 1995;12:891-6. Bullock R, Zauner A, Woodward JJ, Myseros J, Choi SC, Ward JD, Marmarou A, Young HF. Factors affecting excitatory aminoacid release following severe human head injury. J Neurosurg 1998; 89(4):507-18.

2.

3.

4. 5. Figura 1. Representacin esquemtica de la difusin de un soluto a travs de una cnula de microdilisis. Se muestra la trayectoria del vehculo (A) al ser sustrado, se le domina proceso de microdilisis y (B) cuando es perfundido, se le denomina proceso de retrodilisis. Ntese que una vez obtenida la muestra, sta se somete a un proceso de cuantificacin. 6. 7.

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