Pruebas Rpidas De Laboratorio En Farmacologa Y Toxicologa.

Ana Mara Restrepo Muoz Rafael I. Uribe Acevedo Residentes 1er ao Toxicologa Clnica Departamento de Farmacologa y Toxicologa Facultad de Medicina, U. de
Derechos de autor, 2013. Solo para uso educativo, no para uso comercial. Prohibida su distribucin sin autorizacin de la Universidad de Antioquia.

Laboratorio de farmacologa y toxicologa

Dirigido hacia la identificacin o cuantificacin de un xenobitico.

Las tcnicas primarias utilizadas son:

Pruebas rpidas Pruebas espectroqumicas Inmunoensayos Tcnicas cromatograficas

Pruebas Rpidas De Laboratorio En Toxicologa Y Farmacologa Son los test mas simples. Consisten en una reaccin rpida de un xenobitico con un reactivo qumico para producir un producto generalmente de color.
> frecuente en muestra de orina y o aspirado gstrico.

Pruebas Rpidas De Laboratorio En Toxicologa Y Farmacologa

< sensibles y especificidad.

Frecuentemente presentan falsos positivos. Ocasionalmente falsos negativos. Rpidas y econmicas

Pruebas Rpidas Organofosforados

En tubo de ensayo servir 1ml de contenido gstrico y agregar 1 perla de NaOH.
Positivo : Aparicin de color amarillo.

Detecta la presencia del radical paranitrofenol y se puede acelerar en bao de maria.

No en orina por que su color interfiere.

Pruebas Rpidas Organofosforados

1 ml de contenido gstrico o muestra no biolgica liquida.
Se le agrega 1 ml de agua.

Solo los organofosforados darn como resultado una emulsin de color blanco.

Pruebas Rpidas Alcoholes

Los alcoholes son hidrocarburos que contienen un grupo OH.
El etanol ( C2H5OH )es un liquido transparente altamente voltil, de olor caracterstico y soluble en muchos solventes orgnico. Es el elemento activo de las bebidas alcohlicas.

Pruebas Rpidas Alcoholes (Etanol)

Reaccin del Dicromato de Potasio

Muestras: orina, contenido estomacal y residuos de la escena.

Pruebas Rpidas Alcoholes (Etanol)

Procedimiento: Agregar 0,5 ml de dicromato de K a la muestra, calentar en bao mara durante 3 min.

Resultados: Color observado frente al Dicromato de potasio: verde

Pruebas Rpidas Alcoholes (Etanol)

Reaccin de Oxido reduccin alcoholes y aldehidos Tomar 1 ml de orina + 1 ml de mezcla sulfocromica. Color verde = Compuesto voltil reductor

Sensibilidad : 50 ppm No diferencia entre etanol, metanol, acetonas y aldehdos.

Pruebas Rpidas Alcoholes (Etanol)

Si es Positiva pasa de naranja a Verde

Pruebas Rpidas Alcoholes (Etanol)

Muestras: Orina, contenido estomacal y residuos de la escena. Reactivos: Dicromato de potasio (25 g/l) en cido sulfrico (500 ml/l).

Pruebas Rpidas Alcoholes (Etanol)

Aplicar 50 l se sol. de dicromato de K a una tira de papel filtro e insertar en el tubo de vidrio que contiene 1 ml de muestra, cerrarlo y colocarlo en un bao de agua hirviendo durante 2 minutos. Si cambia de naranja a verde indica la presencia de los agentes voltiles reductores como etanol, acetaldehdo, metanol y paraldehdo.
Sensibilidad: 0,5 g/l.

Pruebas Rpidas Alcoholes (Metanol)

Muestra: 1ml de Sangre total en un tubo de ensayo con fluoruro de Na.
Agregar 2 ml de Acido tricloroacetico ( TCA) al 5% para precipitar las protenas. Filtrar y tomar 1 ml del filtrado. Agregar 2 gotas de KMnO4, mezclar y esperar 2 minutos. Agregar la cantidad que tome con la punta de la espatula de bisulfito de sodio NaHSO3 y mezclar

Pruebas Rpidas Alcoholes (Metanol)

Agregar la cantidad que tome con la punta de la espatula de acido cromotropico y mezclar Agregar lentamente y por las paredes del tubo, 20 gotas de H2SO4 puro Si es positivo parece un anillo violeta en la interfase Sensibilidad 10 mg/ 100 ml de sangre El EDTA o heparina pueden dar falsos positivo

Pruebas Rpida Cianuro

Es una anin monovalente, voltil y se caracteriza por su olor a almendras amargas.

La intoxicacin es producto de la ingestin de KCN o NaCN, o de la inhalacin de vapores de HCN.

Pruebas Rpida Cianuro

Formacin de un complejo azul de ferriferrocianuro (azul de Prusia) con los iones ferrosos. Muestras: Contenido estomacal, residuos de la escena

Reactivos:

Solucin acuosa de hidrxido de sodio (100 g/l). Solucin acuosa de sulfato ferroso (100 g/l) recientemente preparada. Solucin acuosa de cido clorhdrico (100 ml/l)

Pruebas Rpida Cianuro

Procedimiento:
Diluir 1 ml de la muestra en 2 ml de hidrxido de Na. Agregar 2 ml de sol. de sulfato ferroso + cido clorhdrico hasta disolver el precipitado de hidrxido ferroso.

Positiva: Color Azul, sensibilidad 10 mg/L.

Pruebas Rpida Salicilatos

Grupo de sustancias derivadas del acido saliclico, con propiedades analgsicas, antipirticas y antiinflamatorias.

C7H6O3

Pruebas Rpida Salicilatos

Foln-Ciocalteu: -100 gr de tungstato de Na + 25 gr de molibdato en 800 ml de H2O. -Agregar 50ml de Ac. fosfrico y 100ml de Ac. Clorhidrico, dejar en reflujo 10 h. -Dejar enfriar y agregar 150 Gr de sulfato de litio + 50ml de H2O y 4-6 gotas de bromo y dejar estabilizar 2h. -Bao de mara 15 , dejar enfriar, filtrar y enrasar con 1 L de H2O - Mantener a 4C y dura 4 meses.

Pruebas Rpida Salicilatos

Muestras: Orina, contenido estomacal, resto de la escena.
Agregar la sol. de tricloruro frrico al 5% o el reactivo de FolnCiocalteu a una alcuota de la muestra. Positiva: - Azul-violaceo con el Cloruro frrico. - Azul con el Foln-Ciocalteu

Pruebas Rpida Salicilatos

Muestra : Orina. En un tubo de ensayo servir 1 ml de orina Agregar 1 ml del reactivo de trinder y mezclar Positivo: Aparicin de color violeta. Las fenotiazinas tambien producen color violeta pero desaparece inmediatamente El color debido a los salicilatos desaparece al adicionarle H2SO4 al 50%

Prueba Rpida Paracetamol

Es un metabolito de la fenacetina, con propiedades analgsicas.
Fsicamente es un polvo cristalino de color blanco, inodoro , de sabor amargo.

Prueba Rpida Paracetamol

Reactivos: Cloruro frrico, Folin-Ciocalteu, Liebermann, Nessler

Liebermann: -1 gr de nitrito de Na + 10 ml de Ac. Sulfrico se debe realizar en frio y bajo campana. Nessler: -50 gr de cloruro de Hg + 35 gr de ioduro de K en 200 ml de H2O ( En frio ) -50gr de Hidroxido de Na en 50ml de H20 ( En frio )

Prueba Rpida Paracetamol

Muestras: Orina, contenido estomacal, residuos de la escena. Agregar la solucin del reactivo a la muestra o a una solucin etanlica de la muestra. Cloruro frrico: azul Folin-Ciocalteu: azul Liebermann: violeta Nessler: marrn (fugaz)

Positivo si :

Prueba Rapida Acido Borico

Polvo blanco inodoro o escamas flexibles nacaradas o translucidas.

Se encuentra como Ac. Borico ( H3BO3 ) o el brax (tetraborato disodico).

Utilizado como: Insecticida, fungicida, preservante de madera, agentes limpiadores y removedores.

Prueba Rapida Acido Borico

Pesar 50 gramos de la muestra y agregar 5 gotas de H2SO4 + 5 gotas de metanol y encender una llama.

Positiva: Coloracin verde en la llama

PRUEBAS RPIDAS.
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. Reactivos. Fenotiazinas. Antidepresivos tricclicos. Betabloqueadores. Cocana. Opio y derivados. Anfetaminas. Marihuana. Paraquat y diaquat.

REACTIVOS
FPN: A 5 ml de solucin acuosa de cloruro frrico (50 g/l) agregar 45 ml de solucin de cido perclrico (200 g/kg 20% p/p) y 50 ml de solucin de cido. Forrest: Mezclar 25 ml de solucin acuosa de dicromato de potasio (2 g/l), 25 ml de solucin de cido sulfrico (300 ml/l), 25 ml de solucin de cido perclrico (200 g/kg) y 25 ml de solucin de cido ntrico (500 ml/L). Nessler: Disolver 50 g de cloruro mercrico y 35 g de ioduro de potasio en 200 ml de agua, realizar en fro. Disolver 50 g de hidrxido de sodio en 50 ml de agua, realizar en fro.

REACTIVOS
Reactivo de hipobromito de sodio: Disolver 0,5 ml de bromo elemental cuidadosamente y enfriando en 5 ml de solucin de hidrxido de sodio (400 g/l). Tiocianato de cobalto Disolver 6 g de nitrato de cobalto y 18 g de tiocianato de potasio en 100 ml de agua.

REACTIVOS
Liebermann 1 g de nitrito de sodio y 10 ml de cido sulfrico Mandelin Disolver 0,5 g de vanadato de amonio en 100 ml cido sulfrico concentrado (d = 1,86).
Marquis Mezclar 1 ml de solucin de formaldehdo con 9 ml de cido sulfrico concentrado.

REACTIVOS
Ninhidrina Adicionar 0,5 g de ninhidrina a 10 ml de cido clorhdrico y diluir a 100 ml con acetona. Simn Solucin acuosa de carbonato sdico al 20%. Solucin etanlica de acetaldehdo al 50%. Solucin acuosa de nitroprusiato de sodio al 1%.

Duquenois Disolver 2 g de vainillina y 0,3 ml de acetaldehdo en 100 ml de etanol. Guardar en frasco oscuro.

FENOTIAZINAS
En un tubo de ensayo servir 1 ml de orina. Agregar lentamente 1 ml de reactivo FPN

ANTIDEPRESIVOS TRICCLICOS

ANTIDEPRESIVOS TRICCLICOS
Muestras: orina, contenido estomacal y residuos de la escena. Reactivos FPN; Mandeln; Marquis; Forrest; cido sulfrico; Lieberman Procedimiento: Agregar 0,5 ml de reactivo a la muestra, calentar en bao mara durante 3 min.

ANTIDEPRESIVOS TRICCLICOS
Desipramina El reactivo de Forrest Imipramina

BETABLOQUEADORESS
ATENOLOL
Muestras: orina, contenido estomacal, resto de la escena. Reactivos: Liebermann y Nessler Procedimiento: Agregar 0,5 ml de reactivo a la muestra, calentar en bao mara durante 3 min. Resultados: Color observado frente al reactivo de Liebermann: negro Nessler: amarillomarrn (ligero)

ALCALOIDES
Son sustancias txicas extradas de las plantas, qumicamente pueden definirse como sustancias vegetales con nitrgeno bsico.

PRUEBA DE TANRED A la sustancia a estudiar, aada 3 gotas de agua si la sustancia es en polvo. Agitar y aadir 2 gotas de reactivo tanred. Un precipitado amarillo lechoso, indica prueba positiva para alcaloides

COCANA
Metil benzoilecgonina La cocana es un alcaloide obtenido de Erythroxylon coca y otras especies de Erythroxylon, o por la sntesis de ecgonina.
Los metabolitos principales son la benzolilecgonina, ecgonina y metil ester ecgonina.

COCANA

Prueba de Scott Tiocinata de Cobalto

Se adicionan 5 gotas de Tiocianato de Cobalto a la sustancia sospechosa . Si se torna AZUL TURQUESA, indica resultado parcialmente positivo.
A la sustancia AZUL se le adiciona una gota de acido clorhdrico concentrado (HCL), en presencia de cocana el color azul cambia a ROSADO.

COCANA
A esta solucin ROSA se le adicionan 5 gotas de Cloroformo, el color AZUL debe reaparecer nuevamente en la capa lquida inferior para indicar la presencia de cocana.

 El trmino opio se utiliza para denominar el extracto obtenido de la planta papaver somniferum
Opiaceo sustancias derivadas del opio. (morfina, codena) Opioides sustancias que actan en los receptores opioides. Se dividen en sintticos y semisintticos.

OPIOIDES
Naturales: Morfina, codena.
Semisintticos: herona, hidromorfona, dihidrocodena, naloxona.

Sintticos: meperidina, metadona, fentanilo, tramadol, remifentanilo.

OPIO Y DERIVADOS
PRUEBA DE MARQUIS

En una placa para prueba a la gota se adiciona una mnima cantidad de la sustancia sospechosa.
Se vierten 2 gotas de reactivo de marqus. La aparicin de un color violeta oscuro indica resultado preliminar positivo para opio y sus derivados.

Si aparece virando amarillo- naranja marrn, es positivo para anfetaminas, SI es negro son anfetaminas con anillo sustitudo.(MDMA y anlogos)

MORFINA, CODENA Y HERONA

Se vierte pequea cantidad de la sustancia en una placa para prueba de gota. Se aade 1 gota de reactivo cido ntrico. Positiva para morfina= un color naranja que vira rapidamente a rojo y luego lentamente amarillo. Positiva para codena: un color naranja que vira lentamente a amarillo. Positiva para herona: un color amarillo que vira lentamente a verde claro

CODENA, METADONA, MORFINA

Muestras: orina, contenido estomacal, restos de la escena. Reactivos Liebermann Mandelin Marquis Procedimiento: Agregar 0,5 ml de reactivo a la muestra, calentar en bao mara durante 3 min. Resultados: Colores observados frente a los reactivos de Liebermann: negro Mandelin: verde Marquis: violeta

ANFETAMINAS
La anfetamina es un lquido incoloro, de olor dbil y sabor acre, se volatiliza lentamente a temperatura ambiente. Poco soluble en agua destilada, soluble en alcohol y ter, fcilmente soluble en cidos minerales diluidos.

ANFETAMINAS
Reaccin de Liebermann Muestras: orina, contenido estomacal y residuos de la escena, polvos. Resultado: La aparicin de un color rojonaranja indica presencia de anfetaminas

ANFETAMINAS
Reaccin de Marquis Muestras: orina, contenido estomacal y residuos de la escena, polvos. Procedimiento: colocar una pequea cantidad de la muestra (1 a 2 mg de polvo o una o dos gotas si se trata de un lquido) en una placa y agregar el reactivo de Marqus gota a gota y no ms de tres gotas. Resultados: La aparicin de un color anaranjado que cambia al pardo indica la presencia de anfetamina como de metanfetamina. Sensibilidad: 1 mg.

ANFETAMINAS
Reaccin con ninhidrina Muestras: orina, contenido estomacal y residuos de la escena, polvos Agregar 0,5 ml de reactivo a la muestra, calentar en bao mara durante 3 min. Resultados: La aparicin de un color rosadoanaranjado luego de calentar indica la presencia de anfetaminas.

ANFETAMINAS
Reactivo de Simn. Colocar una pequea cantidad de la muestra (1 a 2 mg de polvo o una o dos gotas si se trata de un lquido) sobre una placa de toque y agregar reactivo. Resultados: Produce un color azul la metanfetamina y otras aminas secundarias. La anfetamina y otras aminas primarias producen un color rosado que cambia lentamente a rojo cereza.

MARIHUANA
La marihuana es extrada de la planta cannabis sativa. La principal sustancia psicoactiva del cannabis es el tetrahidrocannabinol (THC), adems, la planta contiene en total cerca de 60 cannabinoides (entre stos: cannabinol, cannabigerol, cannabicromeno, cannabiciclol), que se presenta en muchas variedades, siendo la mas activa la 9THC

MARIHUANA
Tambin se puede mezclar en la comida o beber como t. La marihuana comn contiene en promedio 5 % de THC
La sin-semilla (botones y flores de la planta hembra) contiene en promedio 12 % de THC(- 1 % al 27%) El hachs ( resina gomosa de las flores de las plantas hembras) 10 % de THC

MARIHUANA
Prueba de Duquenois Levine:

2ml de Vainillina (0,4g en 20 ml de etanol al 95%) 0,5 ml de acetoaldehdo 2 ml de cido clorhdrico concentrado, si es positiva forma un color verde azul o violeta. se agita y se agrega 2 ml de cloroformo Resultado: el color violeta se extrae y pasa a la fase orgnica. Cabe mencionar que el cannabidiol no da esta reaccin.

PARAQUAT Y DIQUAT

Prueba de ditionito Disolver 100 mg de ditionito de sodio en 10ml de NaOH (hidroxido de sodio ) En un tubo de ensayo adicionar 5ml de orina. Agregar 1 ml de la solucin de ditionito, y teniendo un tubo de control negativo, observar: AZUL: Paraquat Verde: diquat