Titulao Potenciomtrica de Aminocidos

Alunos: Joo Pedro Ferreira Faria, n mec. 72739 Gonalo Chaves da Silva Neves, n mec. 72729 Curso: Cincias Biomdicas, 1 ano Objectivos Gerais
No final da actividade laboratorial, o estudante dever compreender o comportamento cido-base dos aminocidos e, atravs da curva de titulao, determinar os valores de pKa de um aminocido.

Objectivos Especficos
1. 2. 3. 4. Entender o conceito de pKa; Identificar, pelos valores de pKa, os grupos ionizveis de um aminocido; Calcular o pI de um aminocido; Determinar experimentalmente os valores de pKa da glicina pela curva de titulao.

Reagentes
Soluo aquosa de glicina 0.1 mol/dm HCl concentrado Soluo aquosa de NaOH 0.1 mol/dm

Interpretao dos Resultados

pH Volume gasto (mL) 0 2,49 0,5 1 2 3 2,51 2,54 2,57 2,61 2,65 2,69 2,72 17 16 15

14

8,66 8,77 8,86 8,93 9,01 9,06 9,11 9,15

28 29 30 31

9,99 10,02 10,05 10,1 10,14 10,17 10,23 10,27

42 43 43,5

11,87 11,91 11,94 11,97

p.I tabelado 5,97

4 5 6 7 8 9 10 11 12 13

2,77 2,8 2,84 2,89 2,93 2,98 3,04 3,09 3,15 3,22 3,29 3,38 3,49 3,63 3,82 4,13 6,74 8,01 8,33 8,53

18 19 20 21 22 23 24 25 26 27

9,17 9,22 9,27 9,31 9,35 9,39 9,43 9,46 9,5 9,53 9,56 9,6 9,64 9,67 9,7 9,77 9,84 9,88 9,91 9,95

32 33 34 35 36 37 38 39 40 41

10,33 10,38 10,42 10,51 10,56 10,66 10,73 10,82 10,93 11,03 11,12 11,22 11,31 11,4 11,47 11,52 11,62 11,7 11,77 11,82

pH
12 11.5 11 10.5 10 9.5 9 8.5 8 7.5 7 6.5 6 5.5 5 4.5 4 3.5 3 2.5 2 1.5 1 0.5 0 0

Titulao Potenciomtrica da glicina

Zona tampo 2

Zona Tampo 1

12

15

18

21

24

27

30

33

36

39

10.5

13.5

16.5

19.5

22.5

25.5

28.5

31.5

34.5

37.5

40.5

42

Volume gasto (mL)

Grfico 1 - Variao do pH durante a titulao da glicina

43.5

1.5

4.5

7.5

De acordo com o comportamento cido-base dos aminocidos, a glicina actuou como cido e como base. O pKa1 calculado foi de 3.31; nesta zona, a glicina adquire a forma:

Entre o pKa1 e o pI, o aminocido vai ceder protes de acordo com a equao HNCHHCOH HNCHHCO + H.

O pH caracterstico no qual a carga total igual a zero denominado ponto isoelctrico. Nesta titulao, o pI 6.59 e nele a glicina adquire a forma zwitterionica:

Entre o pI e o pKa2, o aminocido vai captar protes de acordo com a equao HNCHHCO + H HNCHHCO.

O pKa2 calculado foi de 9.87; nesta zona, a glicina adquire a forma:

O ponto isoelctrico calculado fazendo a mdia aritmtica entre o pKa1 e o pKa2, para aminocidos que no apresentam cadeias laterais titulveis, ou seja, capazes de perder ou captar protes. Caso a cadeia lateral seja titulvel, ento os valores de pK usados sero diferentes: para calcular o pI de aminocidos cidos deve-se considerar apenas o pKa1 e o pKa da cadeia lateral; para calcular o pI de aminocidos bsicos considera-se apenas o pKa2 e o pKa da cadeia lateral. Por exemplo, no caso da lisina cujo pKa1 2.18, o pKa2 8.95 e o pKa da cadeia lateral 10.53, como um aminocido bsico, o clculo do pI apenas vai considerar o pKa2 e o pKa da cadeia lateral; assim, para a lisina, o pI (8.95+10.79)/2 = 9.87.

Observaes
Na bibliografia usada indicado que o valor do pKa1 da glicina 2.34 e o pKa2 9.60. No entanto, na nossa titulao, o valor do pH no instante inicial antes da titulao era de 2.49, sendo superior ao valor de pKa1; como tal, o pKa1 calculado tem um valor superior ao tabelado, assim como o valor de pKa2.

Referncias Bibliogrficas
Lehninger, Principles of Biochemistry 5th Edition by David L. Nelson and Michael M. Cox, W.H. Freeman and Company, New York; J.McMurry, M.E.Castellion, D.S.Ballantine, Fundamentals of General, Organic, and Chemistry, Pearson Prentice Hall, London, 2007; George I. Sackheim, Dennis Lehman, Qumica e Bioqumica para Cincias Biomdicas, 8 edio, 2001 http://200.156.70.12/sme/cursos/index.php?intPagina=6&intAula=10&intMod ulo=2&intDisciplina=2&intCurso=1