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Qu es bioetanol?

El bioetanol es un alcohol de origen vegetal que se produce a travs de la fermentacin de distintos tipos de materias primas tales como los cereales, maz, trigo y cebada al igual que de cultivos con alto contenido en azucares como la caa de azcar o la remolacha. Tambin se puede producir a partir de distintos compuestos lignocelulsicos como la paja, la madera o distintos residuos vegetales como el caote del maz o el bagazo. El bioetanol se utiliza en mezclas con gasolina de forma directa o travs de compuestos oxigenados como el ETBE. Su uso aumenta el nmero de octanos y promueve una mejor combustin, reduciendo las emisiones contaminantes por el tubo de escape, como monxido de carbono, dixido de carbono y distintos hidrocarburos. Del mismo modo contribuye al cumplimiento del Protocolo de Kyoto al ser el CO2 emitido de ciclo cerrado. La materia prima utilizada en la fabricacin del bioetanol fija el CO2 emitido en su combustin al realizar el proceso de la fotosntesis, bsico en el crecimiento de la planta. Por otro lado el uso del bioetanol reduce la dependencia energtica de la Unin Europea. Recientemente el Consejo de Jefes de Gobierno ha aprobado que el uso de los biocarburantes alcance un mnimo del 10% del mercado de los carburantes en 2020. Todos los pases de la Unin Europea han aprobado o estn en proceso de aprobacin de leyes que establecen una cuota mnima de biocarburantes dentro del mercado de los combustibles.

LAS VENTAJAS DEL BIOETANOL


Es una fuente de combustible renovable y sostenible. Reduce el problema de los excedentes agrarios en la UE. Se puede utilizar sin realizar cambio alguno en todos los automviles de gasolina en mezclas de hasta un 15%. Fcil de producir y almacenar. Los biocarburantes emiten un 40-80% menos de gases invernaderos que los combustibles fsiles. Los programas de I+D+i estn haciendo continuos avances para lograr una produccin ms barata, aumentando el abanico de fuentes de materia prima, mejorando su logstica y aumentando sus aplicaciones como el E-diesel y los coches flexibles (capaces de utilizar gasolina o bioetanol en cualquier porcentaje de mezcla). La demanda de bioetanol en la UE se encuentra afectada por tres criterios fundamentales: Criterios medioambientales. Criterios de poltica energtica Criterios regulatorios. Criterios medioambientales. La creciente demanda del bioetanol en Europa est afectada por los beneficios medioambientales derivados de su uso como biocombustible. La produccin y combustin de los carburantes fsiles, as como su ciclo completo de vida tenemos necesariamente que considerar que un carburante fsil tiene su origen en el petrleo en cuyo proceso natural de formacin se necesita de grandes cantidades de energa y de tiempo- lleva aparejado inevitablemente emisiones de CO2 que tardaron miles de aos en fijarse, y que se estn emitiendo en la actualidad a un ritmo mucho ms acelerado. Por el contrario la

produccin del bioetanol tiene un carcter claramente renovable y sostenible. Es decir el consumo de bioetanol se lleva a cabo al mismo ritmo que su produccin. Por esa razn el ciclo completo de CO2 es cerrado y anual. El CO2 emitido tanto en su produccin es utilizado por las plantas que son materia prima para la produccin de este biocarburante durante su ciclo de vida. Por ello se consigue una reduccin entre un 40% y un 80% en las emisiones de CO2 en comparacin con las emitidas por los carburantes fsiles. Criterios de poltica energtica. La creciente dependencia energtica de la UE y de EEUU con respecto a terceros pases polticamente muy inestables, ha influenciado de forma muy positiva al sector de las energas renovables y muy especialmente al sector de los biocarburantes. Tenemos que ser conscientes que en la actualidad la dependencia energtica de la UE en el sector del transporte se encuentra por encima del 80% y que esta dependencia tiende a incrementarse con el agotamiento de las reservas del mar del Norte. Por este motivo tanto la UE como EEUU han impuesto objetivos de crecimiento muy ambiciosos que implican un desarrollo exponencial de la demanda de los biocarburantes y por consiguiente de la oferta necesaria para cubrirla. Criterios regulatorios. La demanda de biocarburantes en la UE est regulada bajo la Directiva Europea de Promocin y Uso de los Biocombustibles que establece un objetivo de consumo del 2% para el 2005 y del 5,75% para el 2010. En desarrollo de esta Directiva los distintos Estados de la UE han regulado normas incluso ms exigentes imponiendo porcentajes superiores a los establecidos en la Directiva. Actualmente muchos de los pases de la UE han aprobado o estn ultimando las normas que regularn el uso obligatorio de los biocarburantes en porcentajes de mercado cada vez mayores. Adems en consonancia con la poltica energtica mencionada, muy recientemente, el Consejo de Jefes de Estado y de Gobierno de la UE ha establecido un porcentaje ms ambicioso que impone un objetivo de consumo de biocarburantes del 10% del consumo de carburantes para el ao 2020. Marco regulatorio en la UE. La UE ha aprobado un marco regulatorio para los biocarburantes que aborda dos cuestiones fundamentales. La primera consisti en el establecimiento de una Directiva que se encargara de promover e impulsar el uso de los biocarburantes en la UE. Por ello en el 2003 el Parlamento Europeo y el Consejo Europeo aprobaron la Directiva 2003/30/CE para la promocin y uso de biocarburantes. En la misma se establecan unos objetivos indicativos de consumo del 2% para el ao 2005 y del 5,75% para el ao 2010. La Directiva exiga a los Estados miembros que establecieran las medidas legales, fiscales y administrativas necesarias para el cumplimiento de los objetivos. La segunda consisti en la aprobacin, en octubre de 2003, de la Directiva sobre Tasacin de Energa en la que se permita a los Estados miembros eximir parcial o totalmente a los biocarburantes del impuesto especial aplicable a los carburantes. Algunos Estados miembros han ido incluso ms all en el fomento y promocin de los biocarburantes incorporando en su legislacin nacional objetivos obligatorios ms exigentes que los recogidos en la Directiva 2003/30/CE. Incluso muy recientemente el Consejo de Jefes de Estado y de Gobierno ha aprobado aumentar los objetivos de consumo de los biocarburantes hasta el 10% para el 2020.

Bioetanol[editar editar cdigo]


El etanol es un combustible que puede producirse a partir de un gran nmero de plantas, con una variacin, segn el producto agrcola, del rendimiento entre el combustible consumido y el generado en dicho proceso. Este etanol, conocido como bioetanol, est sujeto a una fuerte polmica: para unos se perfila como un recurso energticopotencialmente sostenible que puede ofrecer ventajas medioambientales y econmicas a largo plazo en contraposicin a los combustibles fsiles, mientras que para otros es el responsable de grandes deforestaciones y del aumento del precio de los alimentos, al suplantar selvas y terrenos agrcolas para su produccin, 1 dudando adems de su rentabilidad energtica. El bioetanol tiene las mismas caractersticas y composicin qumica que el etanol ya que se trata del mismo compuesto. La diferencia radica en su proceso de produccin. El bioetanol ha de ser obtenido desde biomasa, no pudiendo obtenerse del petrleo. Todos los licores alcohlicos que proceden de la fermentacin del azcar de alguna planta se pueden denominar como bioetanol. Debido al aumento de las medidas tomadas para controlar las emisiones totales de gases con efecto invernadero, la utilizacin de este alcohol como combustible para el trasporte por carretera est creciendo muy rpido. Un anlisis del ciclo de vida completo de este producto como combustible muestra como las emisiones generadas en el proceso de produccin del combustible y las de operacin son compensadas por las fijadas en el cultivo durante su crecimiento. An estn pendientes estudios claros acerca de las emisiones de este combustible en la operacin. Es posible que contaminantes orgnicos como el benceno o algunosaldehidos aumenten, por lo que es necesario estudiar su impacto en la salud humana. El etanol se obtiene fcilmente del azcar o del almidn en cosechas de maz y caa de azcar, entre otros. Sin embargo, los actuales mtodos de produccin de bio-etanol utilizan una cantidad significativa de energa en comparacin con la energa obtenida del combustible producido. Por esta razn, no es posible sustituir enteramente el consumo actual de combustibles fsiles por bio-etanol.

Informacin en un surtidor de California.

Fermentacin[editar
Artculo principal:

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Fermentacin del etanol

Desde la antigedad se obtiene el etanol por fermentacin anaerbica de azcares con levadura en solucin acuosa y posterior destilacin. La aplicacin principal tradicional ha sido la produccin de bebidas alcohlicas. Hoy en da se utilizan varios tipos de materias primas para la produccin a gran escala de etanol de origen biolgico (bioetanol):

Sustancias con alto contenido de sacarosa

Dulces Caa de azcar Remolacha Melazas Sorgo dulce

Sustancias con alto contenido de almidn Maz Patata Yuca

Sustancias con alto contenido de celulosa Madera Residuos agrcolas (incluyendo los residuos de los ctricos2 3 ).

El proceso a partir de almidn es ms complejo que a partir de sacarosa, pues el almidn debe ser hidrolizado previamente para convertirlo en azcares. Para ello se mezcla el vegetal triturado con agua y con una enzima (o en su lugar con cido), y se calienta la papilla obtenida a 120 - 150 C. Posteriormente se cuela la masa, en un proceso llamado escarificacin, y se enva a los reactores de fermentacin. A partir de celulosa es an ms complejo, ya que primero hay que pre-tratar la materia vegetal para que la celulosa pueda ser luego atacada por las enzimas hidrolizantes. El pre-tratamiento puede consistir en una combinacin de trituracin, pirlisis y ataque con cidos y otras sustancias. Esto es uno de los factores que explican por qu los rendimientos en etanol son altos para la caa de azcar, mediocres para el maz y bajos para la madera. La fermentacin de los azcares es llevada a cabo por microorganismos (levaduras o bacterias) y produce etanol, as como grandes cantidades de CO2. Adems produce otros compuestos oxigenados indeseables como el metanol, alcoholes superiores, cidos y aldehdos. Tpicamente la fermentacin requiere unas 48 horas.

Campo de maz en Sudfrica

En la actualidad tres pases han desarrollado programas significativos para la fabricacin de bioetanol como combustible: Estados Unidos (a partir de maz), Brasil y Colombia (ambos a partir de caa de azcar). El etanol se puede producir a partir de otros tipos de cultivos, como remolachas, zahna, mijo perenne, cebada, camo, kenaf, patatas, mandioca y girasol. Tambin puede extraerse de mltiples tipos de celulosa "no til". Esta produccin a gran escala de alcohol agrcola para utilizarlo como combustible requiere importantes cantidades de tierra cultivable con agua y suelos frtiles.

Cosecha de caa de azcar. Gracias en parte al uso de etanol, Brasil ha reducido su dependencia de petrleo extranjero.

Se pueden obtener cantidades ms reducidas de alcohol combustible de los tallos, de elementos reciclados, de la paja, de las mazorcas de maz, y de productos sobrantes de las granjas que ahora se utilizan para hacer piensos, fertilizantes, o que se utilizan como combustibles de plantas de energa elctrica. De hecho, EEUU podra conseguir todo el etanol que necesita usando una mezcla de, por ejemplo, los tallos (parte no aprovechada) del maz y de la planta de maz, sin roturar ms tierras de labranto [cita requerida] (sin embargo, habra que cultivar ms tierra para substituir ese material, usado por muchos granjeros como fuente barata, confiable y limpia de piensos o fertilizantes).

Purificacin[editar editar cdigo]


El mtodo ms antiguo para separar el etanol del agua es la destilacin simple, pero la pureza est limitada a un 9596% debido a la formacin de un azetropo de agua-etanol de bajo punto de ebullicin. En el transcurso de la destilacin hay que desechar la primera fraccin que contiene principalmentemetanol, formado en reacciones secundarias, ste es el nico mtodo admitido para obtener etanol para el consumo humano. Para poder utilizar el etanol como combustible mezclndolo con gasolina, hay que eliminar el agua hasta alcanzar una pureza del 99,5 al 99,9%.[cita requerida] El valor exacto depende de la temperatura, que determina cundo ocurre la separacin entre las fases agua e hidrocarburos. Para obtener etanol libre de agua se aplica la destilacin azeotrpica en una mezcla con benceno o ciclohexano. De estas mezclas se destila a temperaturas ms bajas elazetropo, formado por el disolvente auxiliar con el agua, mientras que el etanol se queda retenido. Otro mtodo de purificacin muy utilizado actualmente es la adsorcin fsicamediante tamices moleculares. A escala de laboratorio, tambin se pueden utilizar desecantes como el magnesio, que reacciona con el agua formando hidrgeno y xido de magnesio.

Sntesis qumica[editar editar cdigo]


El etanol para uso industrial se suele sintetizar mediante hidratacin cataltica del etileno con cido sulfrico como catalizador. El etileno suele provenir del etano (un componente del gas natural) o de nafta (un derivado del petrleo). Tras la sntesis se obtiene una mezcla de etanol y agua que posteriormente hay que purificar mediante alguno de los procesos descritos ms arriba.

Segn algunas fuentes, este proceso es ms barato que la fermentacin tradicional, pero en la actualidad representa slo un 5% de la capacidad mundial de produccin de etanol.

Bioetanol

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Definicin y caractersticas
El alcohol etlico o etanol es un producto qumico obtenido a partir de la fermentacin de los azcares que se encuentran en los productos vegetales, tales como cereales, remolacha, caa de azcar, sorgo o biomasa. Estos azcares estn combinados en forma de sacarosa, almidn, hemicelulosa y celulosa. Las plantas crecen gracias al proceso de fotosntesis, en el que la luz del sol, el dixido de carbono de la atmsfera, el agua y los nutrientes de la tierra forman molculas orgnicas complejas como el azcar, los hidratos de carbono y la celulosa, que se concentra en la parte fibrosa la planta. El bioetanol se produce por la fermentacin de los azcares contenidos en la materia orgnica de las plantas. En este proceso se obtiene el alcohol hidratado, con un contenido aproximado del 5% de agua, que tras ser deshidratado se puede utilizar como combustible. El bioetanol mezclado con la gasolina produce un biocombustible de alto poder energtico con caractersticas muy similares a la gasolina pero con una importante reduccin de las emisiones contaminantes en los motores tradicionales de combustin. El etanol se usa en mezclas con la gasolina en concentraciones del 5 o el 10%, E5 y E10 respectivamente, que no requieren modificaciones en los motores actuales. Un obstculo importante es la legislacin europea sobre la volatilidad de las gasolinas que fija la proporcin de etanol en mezclas E5. Concentraciones ms elevadas, autorizadas en Suecia y Estados Unidos, implica que se debe disponer de un vehculo flexible (FFV), con un depsito, motor y sistema de combustible nico capaz de funcionar con gasolina y etanol, solos o mezclados en cualquier proporcin. La otra alternativa para su uso es en forma de aditivo de la gasolina como etiltercbutil ter (ETBE). Las especificaciones para la utilizacin de bioetanol se compendian en la norma Europea de Gasolinas EN 228, en Espaa se encuentra transpuesta la Directiva 2003/17/CE relativa a la calidad de las gasolinas y gasleo, en el Real Decreto R.D. 61/2006 de las especificaciones y uso de biocarburantes.

Procesos de obtencin de bioetanol


El bioetanol se obtiene a partir de la remolacha (u otras plantas ricas en azcares), de cereales, de alcohol vnico o de biomasa, mediante un proceso de destilacin. En Espaa la produccin industrial emplea principalmente cereal como materia prima bsica, con posibilidad de utilizar los excedentes de la industria remolachera transformados en jugos azucarados de bajo costo. En general, se utilizan tres familias de productos para la obtencin del alcohol:

Azucares, procedentes de la caa o la remolacha, por ejemplo. Cereales, mediante la fermentacin de los azcares del almidn. Biomasa, por la fermentacin de los azcares contenidos en la celulosa y hemicelulosa.

El esquema general de fabricacin del bioetanol (diagrama 1), muestra las siguiente fases en el proceso

Dilucin: Es la adicin del agua para ajustar la cantidad de azcar en la mezcla o (en ltima instancia) la cantidad de alcohol en el producto. Es necesaria porque la levadura, usada ms adelante en el proceso de fermentacin, puede morir debido a una concentracin demasiado grande del alcohol.

Conversin: La conversin es el proceso de convertir el almidn/celulosa en azcares fermentables. Puede ser lograda por el uso de la malta, extractos de enzimas contenidas en la malta, o por el tratamiento del almidn (o de la celulosa) con el cido en un proceso de hidrlisis cida.

Fermentacin: La fermentacin alcohlica es un proceso anaerbico realizado por las levaduras, bsicamente. De la fermentacin alcohlica se obtienen un gran nmero de productos, entre ellos el alcohol Destilacin o Deshidratacin: La destilacin es la operacin de separar, mediante calor, los diferentes componentes lquidos de una mezcla (etanol/agua). Una forma de destilacin, conocida desde la antigedad, es la obtencin de alcohol aplicando calor a una mezcla fermentada.

Grfica 1. Proceso de obtencin de bioetanol. Otra alternativa a las cosechas dedicadas a fines energticos, son los materiales lignocelulcos son los que ofrecen un mayor potencial para la produccin de bioetanol, el uso de residuos de procesos agrcolas, forestales o industriales, con alto contenido en biomasa. Estos residuos pueden ir desde la paja de cereal a las "limpias" forestales, pasando por los Residuos Slidos Urbanos (RSU) o las cscaras de cereal o de arroz. Los residuos tienen la ventaja de su bajo coste, ya que son la parte no necesaria de otros productos o procesos, salvo cuando son utilizados en la alimentacin del ganado. Los RSU tienen un alto contenido en materia orgnica, como papel o madera, que los hace una potencial fuente de materia prima, aunque

debido a su diversa procedencia pueden contener otros materiales cuyo pre proceso de separacin incremente mucho el precio de la obtencin del bioalcohol. Tambin pueden utilizarse residuos generados en algunas industrias, como la papelera, la hortofrutcola o la fraccin orgnica de residuos slidos industriales. Muchos de estos residuos no slo tienen valor econmico en el contexto donde se generan sino que pueden ser causa de problemas ambientales durante su eliminacin [Cabrera, J. A., 2006]. Los residuos de biomasa contienen mezclas complejas de carbohidratos, llamados celulosa, hemicelulosa y lignina. Para obtener los azcares de la biomasa, sta es tratada con cidos o enzimas que facilitan su obtencin. La celulosa y hemicelulosa son hidrolizadas por enzimas o diluidas por cidos para obtener sacarosa, que es entonces fermentada. Los principales mtodos para extraer estos azcares son tres: la hidrlisis con cidos concentrados, la hidrlisis con cidos diluidos y la hidrlisis enzimtica. En la grfica 2 se muestra las diferencias entre los procesos de obtencin de bioetanol, segn sea su materia prima de origen.

Grfica 2. Diferencias en los procesos de obtencin de bioetanol. Otro ejemplo de proceso de obtencin de bioetanol a partir de alcohol vnico, lo lleva a cabo la empresa Acciona-Energa en la planta de Alczar de Juan, donde se procede a la limpieza y deshidratacin del alcohol bruto, adquirido en las licitaciones que realiza trimestralmente el Fondo Espaol de Garanta Agraria (FEGA), para elevar su pureza del 92 % al 99,9 % y comercializarlo, una vez desnaturalizado, como bioetanol. El proceso comprende las siguientes fases:

Desulfuracin: eliminacin del anhdrido sulfuroso (SO2) presente en el alcohol bruto. Deshidratacin: reduccin del contenido en agua mediante su tamizado con zeolitas, sustancias que captan las molculas de agua. Desmetilizacin: proceso en el que el alcohol ya deshidratado (99,9%) ve separado su contenido de metanol. Esta sustancia resulta corrosiva para los vehculos y puede ser comercializada como producto qumico o combustible Almacenamiento en depsitos : desde ellos el producto se trasporta por tuberas a la cisterna de carga y en ese trayecto se le aade una sustancia que desnaturaliza el bioetanol para evitar as su derivacin al consumo humano.

Subproductos de la obtencin del bioetanol


Los subproductos generados en la produccin de bioetanol, as como el volumen de los mismos, dependen en parte de la materia prima utilizada. En general se pueden agrupar en dos tipos:

Materiales

lignocelulcos:

tallos, bagazo, etc., correspondientes a las partes estructurales de la planta. En general se utilizan para valorizacin energtica en cogeneracin, especialmente para cubrir las necesidades energticas de la fase de destilacin del bioetanol, aunque tambin se puede vender el excedente a la red elctrica (con precio primado).

Materiales alimenticios: pulpa y granos de destilera de maz desecados con solubles (DDGS), que son los restos energticos de la planta despus de la fermentacin y destilacin del bioetanol. Tienen inters para el mercado de piensos animales por su riqueza en protena y valor energtico.

La caa de azcar es la planta ms aprovechable por el bagazo generado para su combustin y generacin energtica. La remolacha azucarera genera, por su parte, unas 0,75 ton de pulpa por tonelada de bioetanol producido. La produccin de bioetanol a partir de trigo o maz genera en torno a 1,2 ton de DDGS por tonelada de bioetanol. En general, existen dos filosofas alimenticias en cuanto al empleo del DDGS. Cuando el pienso est en el 15 % o menos de la dieta, el DDGS sirve como una fuente de protena suplementaria. Cuando el pienso est en los niveles ms altos (superior al 15 % de la dieta de la materia seca) su papel primario es como fuente de energa. El DDGS est compuesto de grasa "en un 10-15 %", de fibra neutra detergente "en un 40-55 %", de protena de crudo (CP) "en un 30-35 %" y de ceniza en un 5 %.

Balance energtico de la produccin de bioetanol


Para que el etanol contribuya perceptiblemente a las necesidades de combustible para el transporte, necesitara tener un balance energtico neto positivo. Para evaluar la energa neta del etanol hay que considerar cuatro variables: la cantidad de energa contenida en el producto final del etanol, la cantidad de energa consumida directamente para hacer el etanol, la calidad del etanol resultante comparado con la calidad de la gasolina refinada y la energa consumida indirectamente para hacer la planta de proceso de etanol. Aunque es un asunto que crea discusin, algunas investigaciones que hagan caso de la calidad de la energa sugieren que el proceso toma tanta o ms energa combustible fsil (en las formas de gas natural, diesel y de carbn) para crear una cantidad equivalente de energa bajo la forma de etanol. Es decir, la energa necesitada para funcionar los tractores, para producir el fertilizante, para procesar el etanol, y la energa asociada al desgaste y al rasgn en todo el equipo usado en el proceso (conocido como amortizacin del activo por los economistas) puede ser mayor que la energa derivada del etanol al quemarse. Se suelen citar dos defectos de esta argumentacin como respuesta, en primer lugar el no dar importancia a la calidad de la energa del bioetanol, cuyos efectos econmicos son importantes. Si se compara la calidad de la energa con los costes de descontaminacin del suelo que provocan los derrames de gasolina al ambiente y los costes "mdicos" de la contaminacin atmosfrica (porque no se puede descontaminar la atmsfera), resultado de la refinacin y de la gasolina quemada. Por otro lado, el desarrollo de las plantas de etanol implica un prejuicio contra este producto basado estrictamente sobre la preexistencia de la capacidad de refinacin de la gasolina. La decisin ltima se debera fundar sobre razonamientos econmicos y sociales a largo plazo. El primer argumento, sin embargo, sigue debatindose. No tiene sentido quemar 1 litro de etanol si requiere quemar 2 litros de gasolina (o incluso de etanol) para crear ese litro. La mayor parte de la discusin cientfica actual en lo que al etanol se refiere gira actualmente alrededor de las aplicaciones en las fronteras del sistema. Esto se refiere a lo completo que pueda ser el esquema de entradas y salidas de energa. Se discute si se deben incluir temas como la energa requerida para alimentar a la gente que cuida y procesa el maz, para levantar y reparar las cercas de la granja, incluso la cantidad de energa que consume un tractor. Adems, no hay acuerdo en qu clase de valor dar para el resto del maz, como el tallo por ejemplo, lo que se conoce comnmente como coproducto. Algunos estudios propugnan que es mejor dejarlo en el campo para proteger el suelo contra la erosin y para agregar materia orgnica. Mientras que otros queman el coproducto para accionar la planta del etanol, pero no evitan la erosin del suelo que resulta, lo cual requerir ms energa en forma de fertilizante. Dependiendo del estudio, la energa neta vara de 0,7 a 1,5 unidades de etanol por unidad de energa de combustible fsil consumida. En comparacin si el combustible fsil utilizado para extraer etanol se hubiese utilizado para extraer petrleo y gas se hubiesen llenado 15 unidades de gasolina, que es un orden de magnitud mayor. Pero, la extraccin no es igual que la produccin. Cada litro de petrleo extrado es un litro de petrleo agotado. Para comparar el balance energtico de la produccin de la gasolina a la produccin de etanol, debe calcularse tambin la energa requerida para producir el petrleo de la atmsfera y para meterlo nuevamente dentro de la tierra, un proceso que hara que la eficiencia de la produccin de la gasolina fuese fraccionaria comparada a la del etanol. Se calcula que se necesita un balance energtico de 200 %, o 2 unidades de etanol por unidad de combustible fsil invertida, antes de que la produccin en masa del etanol llegue a ser econmicamente factible.

1.

Corte

jima

del

agave

(corte

de

las

hojas

del

maguey

maduro

de

sus

races)

El proceso de cortar o jimar el agave consiste en cortar las pencas y la raz del agave para dejar solamente el corazn pia. Este proceso se hace mediante la utilizacin de herramientas de corte como machetes y en especial con la coa (ver imagen) que es un objeto semicircular de metal afilado y con un mango de madera para su sujecin.

Coa: herramienta para jima o corte del maguey La savia de ciertos agaves puede causar escozor en la piel o irritacin. Dicen los expertos coloquialmente que es porque los agaves se ponen celosos. Tambin hay que tener mucho cuidado con las espinas de los agaves ya que son muy duras y puntiagudas. En la antigedad y todava en algunas zonas se utilizan las espinas de agave a manera de aguja para cocer.

Pias jimadas de agave Espadn y Karawinskii (Madrecuixe) Hay pias pequeas y otras que llegan a alcanzar proporciones enormes, como la de un agave Espadn que gano un concurso en Santiago Matatln, Oaxaca que lleg a pesar 600 kilos. Por lo tanto el trabajo de jimar los agaves no es algo sencillo ya que implica desde buscar y encontrar los agaves (en el caso de los silvestres), arrancarlos de la tierra, cortarlos, moverlos, cargar el vehculo para el transporte, transportarlo y descargarlo en el palenque.

Paisaje con agaves Espadn cultivados

Paisaje con agaves silvestres Como hemos explicado en la seccin de Tipos de Agaves, cada especie de agave tiene un crecimiento especfico que vara en su tamao, lugar de crecimiento, altura sobre el nivel del mar en la que crece, tiempo de maduracin, etctera, por lo que entender esto es una parte fundamental para conocer la elaboracin y apreciacin del mezcal. Estos aspectos sern en parte lo que dar como resultado la cantidad de mezcal que ser elaborado en cada produccin y el precio de venta del mezcal entre otros factores.

Debido a que hay especies de agaves silvestres (no cultivados) que tardan mucho tiempo en llegar a su punto de maduracin (algunos hasta 30 aos) y que son escasos, los Maestros Mezcaleros, los productores de mezcal de los palenques y los miembros de las comunidades rurales en las que viven, establecen mediante acuerdos entre ellos la pertenencia de los agaves encontrados en las distintas zonas o sobre las ganancias de la produccin del mezcal, etctera. Hay que comprender que la produccin y oferta del mezcal no puede siempre satisfacer a las reglas del mercado a las que estamos acostumbrados hoy en da. Es por eso que no nos debe sorprender si por ejemplo no encontramos un mezcal de algn agave silvestre durante un tiempo. Hay que respetar siempre que el mezcal se rige de acuerdo a las leyes de la naturaleza para seguir conservando su verdadera esencia y tambin para conservar el medio ambiente.

2.

Cocimiento

con

fuego

de

las

pias

de

los

agaves

jimados

El segundo paso en la elaboracin del mezcal consiste en obtener los azucares provenientes del agave. Posiblemente esta es la parte ms importante en el proceso, histricamente hablando, ya que fueron nuestros antepasados hace miles de aos los que descubrieron estas propiedades tan importantes en los agaves. Se dice que porque un rayo cado del cielo fue

el encargado de quemar un maguey en el campo y fue ah cuando se dieron cuenta de el valioso alimento que les poda proporcionar. Para obtener los azucares de la pia de agave hay que elevar la temperatura del mismo mediante el uso de hornos, tpicamente cnicos de piedra y bajo tierra (ver foto) calentados con madera gruesa de la misma zona. Por ejemplo, en Oaxaca se utiliza comnmente madera de mezquite o encino.

Horno cnico de piedra listo para cocer agaves. San Baltazar, Oaxaca.

Los Maestros Mezcaleros generalmente son los encargados de saber cunto hay que esperar antes de que la temperatura este en su punto para colocar las pias dentro. Ellos saben que hay que esperar a que la lea este totalmente consumida y que las piedras estn al rojo vivo, de lo contrario al meter las pias con todava madera quemndose, recogern ese olor y por lo tanto el mezcal tambin. Las pias que son de tamao grande se cortan en dos o cuatro partes, para optimizar su coccin.

Llenado de horno Cuando el horno esta listo se procede a colocar las pias de manera ordenada y compacta sobre las piedras calientes, formando una especie de pirmide.

Horno completo y listo para tapar. Una vez colocadas todas las pias sobre el fuego, se procede a tapar el horno mediante el uso de bagazo proveniente de producciones anteriores, mantas (costales, mantas de plstico, etc), tierra y troncos para sellar completamente el horno.

Horno completamente cubierto. Cuando el horno esta completamente sellado con tierra y troncos entonces se deja un mnimo de 72 horas para su cocimiento. Como te irs dando cuenta, el proceso de elaboracin del mezcal es un proceso que requiere tiempo y paciencia. Lo mismo que hay que hacer para beberlo y disfrutarlo. Generalmente los palenques son tambin la vivienda habitual de los productores de mezcal por lo que se convive diariamente con todo el proceso de elaboracin. Durante generaciones los productores de mezcal van transmitiendo de padres a hijos sus conocimientos acerca de todo lo referente al mezcal, por lo que es parte importante de la cultura, artesana, tradicin e historia de Mxico. > Aqu un video donde podrs ver bien el cocimiento de las pias

3. Molienda de las pias de los agaves cocidos Una vez cocidas las pias de los agaves, se cortan nuevamente en trozos ms pequeos con hacha o machete para colocarlos en la molienda.

Cortado de pias cocidas en trozos ms pequeos.

Normalmente se utiliza una molienda circular de piedra o cemento en la que gira otra piedra, de aproximadamente 500 kilos, tirada o jalada por un an de carga (caballo o mula), este tipo de molino se llama molino chileno, thaona chilena molino egipcio (ver foto).

Molino de Tahona Chilena

Otra forma de moler las pias del agave es de forma manual utilizando un mazo y un recipiente para triturarlo. Evidentemente este ltimo es un proce ms complejo porque requiere un gran esfuerzo fsico. Generalmente este tipo de molienda se utiliza para producir pequeas cantidades de mezcal o elaborar mezcal de olla.

Debido a que es ms comn encontrar el molino de tahona chilena, explicaremos el proceso basndonos en ella. Los trozos del agave cocido y corta colocan en el molino para triturarse y dejar una especie de pasta y bagazo. El encargado del molino tiene que estar constantemente removiendo el b y el agave cocido para que la piedra pase sobre de ella y la triture. Algo de lo que hay que estar pendiente tambin es de mover al animal de carga p que camine y la piedra gire en el molino.

Molino de piedra tirado por un caballo. En el interior del molino se encuentran las pias cocidas y trituradas.

Agave cocido triturado en el interior del molino de piedra.

4.

Fermentacin

del

bagazo

de

los

agaves

cocidos

molidos

El agave ya triturado despus de la molienda, se coloca en recipientes para que se fermente durante algunos das, aunque la fermentacin comienza realmente al terminar el cocimiento del agave. El tipo de material con que estn hechos los recipientes en los que se llevar acabo la fermentacin juegan un papel importante en el sabor del mezcal, los hay hechos de cuero de res, recipientes de cemento o piletas de tabique, piletas de piedra de cantera, recipientes construidos con troncos completos a manera de canoa, de plstico, de acero inoxidable, recipientes de madera en forma de cajn, ollas de barro rojo y el ms comn que es el de forma de cubeta o cilndrico fabricado con tiras o cintas de madera, se utilizan diferentes maderas segn la regin. Los recipientes se llenan aproximadamente al 75% de su capacidad con el agave triturado durante algn tiempo para despus agregar agua hasta llegar al 90% de su capacidad, logrando as acelerar la fermentacin. Este proceso esta supervisado por el prctico, nombre de la persona con el conocimiento para esta etapa de elaboracin del mezcal.

Tinas para fermentacin. El agua juega un papel importante en el sabor del mezcal debido a las propiedades en la regin de la que procede. Despus de que el prctico ordeno el llenado al 90% de capacidad con agua, se deja un tiempo fermentar para luego llenar por completo el contenedor con agua tibia. Se tienen que dejar unos 15 cm de espacio en la tina ya que al fermentarse el agave y el agua suben.

Tina con agave en fermentacin. Existen dos formas de fermentacin del agave: natural y acelerada. En la primera como su nombre ndica, no se adiciona ningn qumico para acelerar el proceso de fermentacin, que dependiendo de la temperatura medioambiental, el tipo de tina, el tipo de agave, etctera, puede ser de 8 a 20 das. Y en la fermentacin acelerada se agregan qumicos como el sulfato de amonio y una cscara de un rbol llamado timbre.

Redistribucin de bagaso en el proceso de fermentacin. Durante la fermentacin hay que remover cada cierto tiempo todo el contenido de la tina para conseguir un proceso completo. Al principio de la fermentacin se perciben fuertes olores alcohlicos y dulces, los cuales van disminuyendo con el paso del tiempo hasta tener un olor avinagrado y un color caf obscuro. Tambin en las primeras etapas de la fermentacin la temperatura del contenido se eleva considerablemente debido a el proceso que se esta llevando a cabo.

Imagen de una fermentacin en los primeros das.

Imagen de una fermentacin en los ltimos das.

5.

Destilacin

del

tepache

La separacin de las sustancias voltiles de las no voltiles del tepache proveniente de la etapa de fermentacin, es lo que se conoce como destilacin. En el tepache encontramos materia slida (no voltiles) y liquida (voltiles) los cuales deben de ser separados mediante la destilacin. En la parte liquida hay alcoholes, cetonas, steres, etc. Y en la slida hay grasas y sales minerales, fibras, etc.

Alambique de cobre enfriado con agua. Al someter al tepache a la accin del calor provoca la evaporacin de alcoholes e impurezas, quedando separada de los materiales slidos. Si esos gases son colectados y retornan a su estado natural se obtiene un alcohol que en el caso del agave recibe el nombre de mezcal en los estados con Denominacin de Origen (ver Historia del mezcal). El proceso de destilacin se lleva a cabo en un alambique, varias teoras explican el uso del alambique para destilar el agave fermentado, aunque dos son las ms conocidas, una menciona que fueron los espaoles (que lo heredaron de los rabes) los que lo introdujeron a nuestro territorio y la otra teora sostiene en que los filipinos fueron los que lo introdujeron el alambique chino. Puedes encontrar una mayor explicacin en la seccin de artculos de nustra web. Existen varios tipos de alambique pero todos hacen lo mismo, destilar.

El resultado de la destilacin del tepache es el mezcal como hemos mencionado. Una vez obtenido el mezcal, hay que ajustar su riqueza alcohlica para lograr el exacto grado que se requiere segn los requerimientos del embotellador, o segn considere adecuado el Maestro Mezcalero. Dicho ajuste se pude llevar a cabo utilizando las colas y puntas del mezcal. La parte que se obtiene primero en la destilacin, la punta, contiene mayor % Alc. Vol. que la parte del final, llamada cola. Existen mezcales de puntas, que son sin duda una delicia y al contrario de lo que puede uno pensar al beber un mezcal de ms de 70% Alc. Vol., son sorprendentes. El ltimo proceso en la elaboracin del mezcal es el embotellado y etiquetado, que obviamente no vale la pena ahondar en el tema. La elaboracin del mezcal es un proceso puramente tradicional, artesanal y orgnico, elaborado por personas que han recibido los conocimientos de generacin en generacin mediante la palabra y la prctica. Los Maestros Mezcaleros y todos los involucrados en la produccin del mezcal, son personas que nacen, crecen y viven con todo lo que involucra al mezcal. Por eso el mezcal es netamente algo creado con el corazn de sus productores y que debemos de tener en cuenta para apreciar en cada sorbo.

Etanol celulsico por Zymomonas mobilis


T.K. Morales-Martnez L.J. Ros Gonzlez1 J.G. Gaona-Lozano Y. Garza-Garca J. Rodrguez-Martnez Departamento de Biotecnologa Facultad de Ciencias Qumicas Universidad Autnoma de Coahuila

CIENCIACIERTA No.26 abril - julio 2011

Introduccin Los combustibles fsiles como el petrleo, el carbn y el gas natural, han sido consumidos a altas velocidades durante las ltimas dcadas. El uso de energa a nivel mundial se increment 17 veces el siglo pasado, como consecuencia del desarrollo industrial y del crecimiento poblacional (Nikolic, Mojovic, Rakin y Pejin, 2009). El balance nacional en Mxico del ao 2004, publicado en el sitio de la Secretara de Energa (Sener), indic que la produccin de energa primaria est sustentada en los hidrocarburos (90.6%, con una contribucin de 9, 359.645 petejoules). La gran dependencia de la economa moderna sobre estos combustibles est obligada a terminarse debido a su impacto ambiental negativo y al hecho de que estos tarde o temprano se agotarn. Ante esta problemtica, resulta de vital importancia la bsqueda urgente de nuevas fuentes energticas que permitan un desarrollo sustentable y una eficiencia mayor del funcionamiento de la industria en las sociedades modernas sin afectar al medio ambiente (Tripetchkul, Ruanglek y Maneewatthana, 2006). Produccin de bioetanol El bioetanol es uno de los combustibles renovables ms importantes que contribuyen a la reduccin de los impactos ambientales negativos generados por la utilizacin mundial de los combustibles fsiles. La produccin de bioetanol como alternativa de combustible fsil y fuente de energa, ha sido un tema de gran inters desde la crisis del petrleo de los aos setenta (Tao, Miao, Shi y Zhang, 2005). En general, la produccin de bioetanol comercial se ha confiado en la fermentacin de sacarosa de caa de azcar, remolacha y melaza o glucosa derivada de cosechas basadas en almidn, como el grano de maz, trigo y yuca (Ray, Behera, Kar y Mohanty, 2010; Nakamura, Yamashita, Kurosumi y Sasaki, 2008). Sin embargo, su uso masivo para la produccin de etanol no resulta factible por tratarse de materias primas de grado alimenticio (biocombustible de primera generacin; Ray et al., 2010). Sacarificacin de celulosa Otra alternativa altamente atractiva es la biomasa lignocelulsica, que puede ser usada como materia prima para la produccin de bioetanol (biocombustible de segunda generacin) debido a que es la ms abundante y barata en el mundo. La produccin de etanol a base de biomasa lignocelulsica implica diferentes etapas de pretratamiento, hidrlisis (sacarificacin) y fermentacin. La hidrlisis de biomasa es esencial para la generacin de azcares fermentables que posteriormente son convertidos a bioetanol por actividad microbiana. La hidrlisis cida y enzimtica de biomasa lignocelulsica son los dos mtodos ms empleados, con eficiencias que varan dependiendo de las condiciones de tratamiento, tipo de biomasa y las propiedades de los agentes hidrolticos. El primero es un mtodo muy conocido, pero con las desventajas de generacin de residuos cidos peligrosos y las dificultades tcnicas en la separacin del azcar del cido. Sin embargo, el mtodo enzimtico es ms eficiente y es obtenido en condiciones ambientales sin la generacin de ningn residuo txico. Este mtodo es llevado a cabo de una manera rpida y tiene enorme potencial para el mejoramiento del costo y la eficiencia (Pandey, Sukumaran, Singhania y Mathew, 2009). Los principales polisacridos presentes en diferentes residuos lignocelulsicos son la celulosa y la hemicelulosa. La hidrlisis enzimtica de estos polisacridos a azcares solubles (y finalmente a monmeros como glucosa, xylosa y otras hexosas y pentosas) ocurre bajo la accin de diferentes enzimas que actan en sinergia (Prez, Muoz-Dorado, De la Rubia y Martnez, 2002). Independientemente del tipo de sustrato lignocelulsico, el costo y la eficiencia hidroltica de las enzimas son los factores principales que limitan la comercializacin de los procesos de bioconversin de biomasa (Galbe y Zacchi, 2002). La eficiencia hidroltica de un complejo multienzimtico en el proceso de sacarificacin de lignocelulosa depende tanto de las propiedades de las enzimas en forma individual, como su proporcin en el coctel multienzimtico. Fermentacin por Zymomonas mobilis La sntesis de etanol por va microbiana tradicionalmente ha sido llevada a cabo por levaduras, siendo la ms utilizada Saccharomyces cerevisiae. Sin embargo, ha sido reportado en la literatura la produccin de bioetanol por Zymomonas mobilis bajo diferentes condiciones, resultando en procesos altamente ventajosos comparado con S. Cerevisiae. Zymomonas mobilis es una bacteria gram negativa, anaerobia facultativa. Se encuentra predominante como parte de la flora natural en fermentacin de las savias, por ejemplo el agave, la palma y la caa de azcar, donde estn presentes altas concentraciones de glucosa; as como en las cervezas, peras y las sidras, donde acta como flora de los desechos (M. Coton, Laplace, Auffray y E. Coton, 2005). Comparado con S. cerevisiae y otras levaduras, se ha reportado que puede producir etanol con rendimientos hasta cinco veces mayores por

la va Entner-Doudoroff bajo condiciones anaerobias (Tao et al., 2005). Produciendo 1 mol de ATP por mol de glucosa, a diferencia de la va Embden-Meyerhoff-Parnas en S. cerevisiae, que produce 2 mol de ATP por mol de glucosa, este decremento permite que ms energa sea usada para la formacin de etanol (Wilkins, 2009; Rogers, Davis, Pearce y Peiris, 2006). Adems, Zymomonas mobilis tiene la capacidad de crecer en un medio con concentraciones de etanol por arriba de 13% (p/v). Esta tolerancia al etanol se debe a la alta cantidad de hopanoides en la membrana citoplasmtica (30 mg g-1 de peso seco celular). Sin embargo, su capacidad catablica se limita a pocos sustratos como la glucosa, fructosa y sacarosa, y este exigente microbio requiere estrictamente el nitrgeno orgnico o medios semidefinidos con minerales. Dentro de los factores ms crticos que contribuyen a un aumento de los rendimientos de produccin de etanol por Z. mobilis, se encuentran la concentracin de sustrato (sacarosa, glucosa o fructosa), temperatura, velocidad de agitacin, pH, concentracin de inculo, tiempo de fermentacin, y algunas sustancias nutritivas y compuestos minerales como extracto de levadura, (NH4)2SO4, MgSO4, fosfato monopotasio, FeCl3 (Tripetchkul et al., 2006). El bioetanol puede ser producido utilizando clulas libres o inmovilizadas. El uso de estas ltimas es ventajoso en comparacin con las primeras, debido al incremento en los rendimientos de produccin, la facilidad de separacin de la masa celular del medio, la reduccin del riesgo de contaminacin, mayor estabilidad operacional y viabilidad celular a varios ciclos de operacin (Ray et al., 2010). Entre las diferentes tecnologas de inmovilizacin, el atrapamiento de clulas microbianas en matrices polimricas, como agar-agar, alginato de calcio, gelatina, k-carragenina, etctera, ha sido estudiado ampliamente, al igual que la produccin de etanol por clulas microbianas inmovilizadas en diferentes soportes (levadura Saccharomyces cerevisiae y bacteria Zymomonas mobilis) utilizando diferentes sustratos y bajo diferentes condiciones de reaccin. En la tabla 1 se muestran algunos resultados reportados en la literatura de estos procesos. Tabla 1. Rendimientos de produccin de etanol obtenido con diferentes cepas de Zimomonas mobilis y Saccharomyces cerevisiae productoras de etanol, con y sin inmovilizar en diferentes soportes bajo diferentes condiciones de reaccin.

Conclusiones El etanol es un combustible limpio, renovable, que puede reducir la dependencia del petrleo; sin embargo, aunque el proceso fermentativo para la produccin de bioetanol es ya bien conocido, los costos de produccin son todava el impedimento clave para su amplio empleo como combustible. Para que esto resulte factible, es necesario seguir llevando a cabo proyectos de investigacin enfocados al uso de cepas altamente eficientes en la produccin de etanol como lo es Zymomonas mobilis, con capacidad de co-fermentar C5/C6, sustratos de fermentacin econmicos, inmovilizacin de clulas, y optimizacin de condiciones para que ocurra la fermentacin. El uso de biomasa lignocelulsica resulta en una propuesta prometedora con fines en la produccin de bioetanol, sin embargo, siendo adems un punto clave y crtico la sacarificacin (hidrlisis) de los residuos lignocelulsicos, resulta por dems importante la bsqueda de cepas con actividad celuloltica que conviertan a este proceso factible en lo tcnico y econmico.

Referencias bibliogrficas 1. Coton, M., Laplace, J. M., Auffray, Y., y Coton, E. (2005). Duplex PCR method for rapid detection of Zymomonas mobilis in cider. Journal of the Institute of Brewing, 111(3), 299-303. 2. Galbe, M. y Zacchi, G. (2002). A review of the production of ethanol from softwood. Apply Microbial Biotechnology, 59, 618-628. 3. Nakamura, Y., Yamashita, Y., Kurosumi, A., y Sasaki, C. (2008). Ethanol production from paper sludge by immobilized Zymomonas mobilis. Biochemical Engineering Journal, 42, 314-319. 4. Nikolic, S., Mojovic, L., Rakin, M., y Pejin, D. (2009). Bioethanol production from corn meal by simultaneous enzymatic saccharification and fermentation with immobilized cells of Saccharomyces cerevisiae var. ellipsoideus. Fuel Elsevier, 88, 1602-1607. 5. Pandey, A., Sukumaran, R. K., Singhania, R.R., y Mathew, G. M. (2009). Cellulase production using biomass feed stock and its application in lignocellulose saccharification for bio-ethanol production. Renew Energ. 34, 421-424. 6. Peiris, F., Markham, J., y Bavor, J. (2009). A novel co-culture process with Zymomonas mobilis and Pichia stipitis for efficient ethanol production on glucose/xylose mixtures. Enzyme and microbial Technology, 45, 210-217. 7. Prez, J., Muoz-Dorado, J., De la Rubia, T., y Martnez, J. (2002). Biodegradation and biological treatments of cellulose, hemicellulose and lignin: an overview. Int Microbiol. 5, 53-63. 8. Ray, R. C., Behera, S., Kar, S., y Mohanty, R. C. (2010). Comparative study of bio-ethanol production from mahula (Madhuca latifolia L.) flowers by Saccharomyces cerevisiae cells immobilized in agar agar and Ca-alginate matrices. Applied Energy, 87, 96-100. 9. Rogers, P., Davis, L., Pearce, J., y Peiris, P. (2006). Evaluation of Zymomonas-based ethanol production from a hydrolysed waste starch stream. Biomass and Bioenergy, 30, 809-814. 10.Tao, F, Miao, J. Y., Shi, G. Y., y Zhang, K. C. (2005). Ethanol fermentation by an acid-tolerant Zymomonas mobilis under non-sterilized condition. Process Biochemistry, 40, 183-187. 11.Tripetchkul, S., Ruanglek, V., y Maneewatthana, D. (2006). Evaluation of thai agro-industrial wastes for bio-ethanol production by Zymomonas mobilis. Process Biochemistry, 41, 1432-1437. 12.Vane, M., y Govindaswamy, S. (2007). Kinetics of growth and ethanol production on different carbon substrates using genetically engineered xylose-fermenting yeast. Bioresource Technology, 98, 677-685. 13.Wang, Q., Ma, H., Qian, D., Gong, L., y Zhang, W. (2009). The utilization of acid-tolerant bacteria on ethanol production from kitchen garbage. Renewable Energy, 34, 1466-1470. 14.Wilkins, M. R. (2009). Effect of orange peel oil on ethanol production by Zymomonas mobilis. Biomass and Bioenergy, 33, 538-541.

Actividad de especies Zymomonas en palma savia obtenida a partir de tres reas en el estado de Edo, Nigeria.
Obire, O. Departamento de Biologa Ambiental y Aplicada, Universidad Rivers State de Ciencia y Tecnologa, NkpoluOroworukwo, PMB 5080, Port Harcourt. Nmero de cdigo: ja05005 RESUMEN: La bacteria Zymomonas mobilis se aisl de las muestras frescas de palma-savia de tres localizaciones diferentes en cuanto a determinar la contribucin del aislado bacteriano de la produccin de alcohol en el vino de palma. (Azcar) en la fermentacin de carbohidratos, la tolerancia al alcohol, y el crecimiento de la bacteria a diferentes valores de pH y temperatura se determinaron, y una comparacin de la fermentacin de azcar por Z. mobilis y Saccharomyces cerevisiae tambin se determin. Z. mobilis contribuye mucho a la fermentacin de vino de palma debido a su capacidad de fermentar la sacarosa, glucosa y fructosa, que son los principales azcares en la palma de la mano-savia. La bacteria alcanza su densidad mxima de 2.72 x 10 7 clulas / ml entre 12 y 15 horas despus de la toma de la savia de palma. Z. mobilis es el cido y el alcohol ser capaz de crecer a valores de pH entre 4.0 y 7.0 y en la concentracin de alcohol de entre 2,5% y 15% respectivamente tolerante. Z.mobilis se encontr tambin para fermentar azcares a un ritmo ms rpido que Saccharomyces cerevisiae. El anlisis estadstico de los datos obtenidos mediante ANOVA mostr que no hay diferencia significativa a p = 0,05 nivel de significacin en el crecimiento de las cepas de Z. mobilis obtenidos a partir de las tres ubicaciones diferentes pH bajo, el alcohol y los valores de temperatura. @ Jasem

Palma-vino es una bebida alcohlica obtenida por fermentacin de la savia azucaradas de varias especies de palma en Nigeria. Por lo general, se obtiene a partir Raphia vinifera, Raphia hookeri, y Elaeis guineensis por mtodos descritos por Bassir (1965), Faparusi (1966) y Okafor (1972). Palmas Raphia generalmente producen ms sabia que la palma de aceite, aunque las palmas rafia slo se pueden tomar una vez en su vida porque su inflorescencia terminal es destruida durante el roscado (Okafor, 1977). La presencia de diversos microorganismos especialmente las bacterias y levaduras responsables de la fermentacin de vino de palma ha sido reportado por Bassir (1962), Faparusi (1966) y Okafor (1977).Durante la fermentacin, los azcares en la palma de la mano-savia se metabolizan al alcohol y cidos orgnicos con el resultado de que la savia pierde su dulzor (Okafor, 1975). Los tipos de bacterias presentes parecen depender de la etapa de fermentacin y la composicin de la savia (Bassir, 1962; Okafor, 1977). Aunque la produccin de alcohol es comn entre las levaduras, es raro en las bacterias (Ingraham e Ingraham, 2004). Las levaduras se utilizan para hacer la mayora de las bebidas alcohlicas. Pero pulque es una excepcin. El pulque es una bebida alcohlica del zumo de la planta de agave fermentada por Zymomonas mobilis (Talaro y Talaro, 1999, Ingraham y Ingraham, 2004). En Mxico, el aguardiente tequila se hace tradicionalmente de la fermentacin de los jugos de la planta de agave con la bacteria Z. mobilis (Ingraham y Ingraham, 2004;. Nester et al, 2004). especies Zymomonas son quizs los fermentadores alcohlicas ms importantes del grupo de bacterias en planta de jugos y zumos de Zymomonas son anaerobios facultativos con tanto respiratoria y capacidades de fermentacin.. Al igual que en la levadura, piruvato de Zymomonas descarboxila no oxidativamente con la formacin de acetaldehdo, que posteriormente se reduce a etanol por va del Entner-Doudoroff (Oscilaciones y De Ley, 1977; Talaro y Talaro, 1999; Ingraham y Ingraham, 2004). La produccin de acetaldehdo y el caracterstico olor a fruta de Zymomonas tambin contribuyen al olor y el sabor de los vinos (Columpios y de Ley, 1977, Ingraham y Ingraham, 2004). La dificultad de almacenar vino de palma para retener sus caractersticas normales debido a la capacidad fermentativa de probablemente las especies Zymomonas y otros microorganismos presentes en el vino ha sido un problema importante en el embotellado de vino de palma en Nigeria y en consecuencia su distribucin para el consumo. Adems de su capacidad fermentativa, especies de Zymomonas se sabe que son inofensivos para el hombre y el ganado. Algunos de sus productos de fermentacin se encuentran tiles en el tratamiento de diversas enfermedades que van desde los trastornos metablicos entricas crnicas a las infecciones ginecolgicas (Oscilaciones y De Ley, 1977). La presencia de especies de Zymomonas en vino de palma por lo tanto puede ser beneficioso para el hombre. Por tanto, el presente estudio tiene como objetivo el aislamiento y la identificacin de las especies Zymomonas en palm-savia y para determinar si la especie est presente en la savia de palmeras de diferentes lugares. Tambin se hicieron intentos para determinar en qu etapa de la fermentacin de la bacteria es ms abundante en la savia de palma y para determinar la contribucin de la bacteria a la fermentacin de los azcares de la savia de palma y por lo tanto a la produccin de alcohol en el vino de palma. MATERIALES Y MTODOS Muestra de vino de palma se obtuvieron de Elaeis guineensis por el mtodo de "inflorescencia tocando" como se describe por Faparusi (1966) y Okafor (1972). Las muestras de vino de palma fueron intervenidos simultneamente desde tres zonas ecolgicas diferentes (Ogba, Ekiadolor Nigeria y el Instituto de Investigacin en Palma de Aceite, NIFOR) en el estado de Edo de Nigeria. El vino de palma se puso en recipientes de plstico estriles y los contenedores se sumergieron inmediatamente en una mezcla de congelacin de cloruro de sodio y trozos de hielo y luego se trasladaron al laboratorio para su anlisis. Este mtodo de recogida se sabe que reduce considerablemente velocidad de fermentacin (Bassir, 1962). Los medios de comunicacin con las siguientes composiciones, segn lo prescrito por cambios y de ley (1977), fueron utilizados para la deteccin, aislamiento y recuento de especies Zymomonas de vino de palma: Deteccin medio: 3,0 g de extracto de malta, 3.0g extracto de levadura, 20 g de glucosa, peptona, 5,0 g Etanol 30 ml, 1 litro de agua destilada, pH 4,0; Aislamiento y recuento de Medios: A. (I) medios slidos de levadura 5,0 g Extracto de Estndar, 20 g de glucosa, 20 g de agar, 1 litro de agua destilada, pH 6,8, (ii) Medio extracto de malta MYPG 3,0 g, 3,0 g de extracto de levadura, 5,0 g de peptona, 20 g de glucosa, 20 g de agar, Agua destilada 1 litro, pH 4,8, (iii) PGA Medio Peptona 5,0 g, 20 g de glucosa, 20 g de agar, 1 litro de agua destilada, pH 6,4, B. Estndar lquido extracto de medio de levadura 5,0 g, 20 g de glucosa, agua destilada 1 litro, pH 6.8,

El pH de cada medio se ajust al valor de pH apropiado usando NaOH o HCl. Cada medio se trat con actidiona (cicloheximida) para inhibir el crecimiento de la levadura, y luego en autoclave a 121 C durante 15 minutos. Poblacin de Zymomonas en muestras de palmeras savia: Los medios slidos se utilizan por separado para la tcnica de placa de propagacin en el conteo de colonias Zymomonas. Las placas inoculadas con muestras de palma-savia se incubaron en un recipiente anaerbico en el que se coloc Gas Pak Bolsita para agotar el oxgeno en el frasco y producir dixido de carbono atmsfera saturada. La incubacin se realiz por lo general durante 2 das a 30 C despus de lo cual se cont el nmero de colonias en las placas de Zymomonas. Enumeracin se llev a cabo en intervalos de 3 horas para establecer, cuando la poblacin de Zymomonas alcanz su densidad mxima. Identificacin de Zymomonas sp: Las colonias sospechosas de ser los de Zymomonas fueron aisladas de las placas de propagacin y se purific por rayas en medios recin preparados y se incubaron durante 2 das a 30 C en el recipiente de anaerobios. Los aislados de dichas placas frescas fueron sometidos a las siguientes pruebas para la caracterizacin de los aislamientos: tincin de Gram, catalasa, la motilidad, oxidasa, ureasa, reduccin de nitratos, indol, fermentacin de hidratos de carbono y la tolerancia a las pruebas de alcohol. Hidratos de carbono (azcar) de fermentacin: La capacidad de la bacteria para fermentar diversos hidratos de carbono utilizando la glucosa, fructosa, sacarosa, maltosa, lactosa y arabinosa se determin mediante el cultivo en un medio de aislar el estndar de lquido que contiene 1% (w / v) de los hidratos de carbono en particular. Durhamtubos se invirtieron en los tubos de cultivo para la recoleccin de gas.La incubacin fue a 30 C durante 24 horas. y caldos inoculados se utilizaron como control. Determinacin de la tolerancia al alcohol: La tolerancia al alcohol del aislado se determin mediante el cultivo en medios que contienen 2,5%, 5%, 7,5%, 10%, 12% y etanol 15%. El alcohol se aadi aspticamente al medio estril. Los cultivos se incubaron a 30 C durante 24 horas. La absorbancia del cultivo se registraron a 600 nm utilizando un Busch y Lomb Spectronic 20. Caldo no inoculado se utiliz como el control. Crecimiento de aislar a diferentes pH y TEMPERATURA: El crecimiento del aislado se examin a pH 3,0 a 8,0 utilizando el caldo estndar. El crecimiento se midi utilizando un Spectronic 20 a 600 nm. El Spectronic 20 se estandariz con caldo no inoculado. Adems, los cambios en el valor de pH durante la fermentacin se controlaron a intervalos de 0h, 3h, 15h, 36h, 48h y despus de la recoleccin. Las siguientes temperaturas de 25 , 30 , 35 y 40 C, se estudi la tasa de crecimiento del aislado durante 24 horas. Se registr la absorbancia a 600 nm. La fermentacin de azcar por Zymomonas mobilis y Saccharomyces cerevisiae: Dos presente (2%) solucin de sacarosa se utiliz en este experimento. Nueve mililitros de la solucin de sacarosa se dispended en tubos de ensayo con tapn de rosca con tubos de Durham invertidas en ellos para recoger el gas producido. Los tubos de ensayo se dividieron en seis grupos de cuatro tubos cada uno. Tubo de ensayo individual en cada grupo se inocul de la siguiente manera: Grupo A: 1 ml de suspensin de Z mobilis,. Grupo B: 1 ml de vino de palma, Grupo C: 0,5 ml de Z. mobilis y 0,5 ml de palma de vino, Grupo D: 1 ml S. cerevisiae, Grupo E: 0,5 ml Z. mobilis y 0,5 ml S. cerevisiae, Grupo F: 0,5 ml S. cerevisiae y 0,5 ml de vino de palma. Los tubos se incubaron a 30 C durante 24 horas despus de lo cual, se compar el volumen de gas producido por los diferentes grupos. RESULTADOS Y DISCUSIN Zymomonas mobilis fue identificada como la nica especie Zymomonas presentes en vino de palma obtenido a partir de los tres sitios ecolgicos diferentes. Fue Gram negativas, anaerobias, varillas catalasa positivos, regordeta, con una anchura inusual. Fue heterofermentativo, produccin de gas a partir de glucosa, fructosa y sacarosa. Maltosa y arabinosa no se fermentaron. Todos los aislados en este estudio eran mviles, pero oxidasa y ureasa negativo.

Estas observaciones fueron similares a los reportados por oscilaciones y De Ley (1977) de Z. mobilis aislado de varias fuentes. Z. anaerobia tambin tiene caractersticas similares con Z. mobilis excepto que la primera es no mvil. La poblacin de la bacteria era casi el mismo para todas las muestras con un rango de 98 x 10 5 clulas / ml en Ekiadolor y muestras Ogba a 99 x 10 5 clulas / ml para la muestra NIFOR su llegada al laboratorio. Ningn trabajo se ha informado a la cuenta de Z. Mobilis en vino de palma. Okafor (1975) realiz un trabajo sobre el organismo, pero no determin su poblacin. La poblacin de Z. mobilis en el vino de palma utilizado en este estudio Ogba se muestra en la figura. 1 . El organismo alcanza su mxima densidad entre 12 a 15 horas despus de la recogida. La densidad inicial fue de 98 x 10 5 clulas / ml. Este alcanz el mximo de 2,72 x 10 7 clulas / ml despus de 12h y disminuy despus de 15 horas hasta que la densidad despus de 24 horas fue casi 50% de la densidad inicial. El aumento inicial en la densidad dentro de las primeras pocas horas podra ser debido al alto contenido de sacarosa de fresco vino de palma que proporciona un buen sustrato para el crecimiento de la bacteria y tambin un favorable pH casi neutro del vino. Los organismos en el vino de palma estn vivas y activas (Ekundayo, 1969; Faparusi, et al, 1973;. Rose, 1977; Columpios y de Ley, 1977; Okafor 1977), y se metabolizan el azcar presente en el vino para producir alcohol y cido orgnico con la consiguiente disminucin en el pH de las muestras de vino de palma como se muestra en la Tabla 1 . Con la disminucin en el pH y el agotamiento de las sustancias de sustrato y el crecimiento, el crecimiento de la bacteria se convierte en inhibida, por lo tanto, la posterior disminucin en el nmero del organismo despus de 15 horas. de la fermentacin. No se ha reportado la etapa en la que esta bacteria alcanza su mxima densidad durante la fermentacin del vino de palma (Columpios y de Ley, 1977). Z. mobilis tiene buen crecimiento a la concentracin de alcohol ms alto que normalmente est presente en vino de palma ( Fig. 2. ) La bacteria creci bien en los medios con 2,5 -. 10% de alcohol. Normal vino de palma contiene aproximadamente 0,5% a 7. 1% de etanol en funcin de su etapa de fermentacin (Bassir, 1968; Van Pee y Swing, 1971; Okafor, 1978). El aumento adicional en la concentracin de alcohol ms all de 10% dio como resultado un crecimiento pobre de la bacteria. Columpios y De Ley (1977) haban demostrado que era Zymomonas alcohol tolerante. El crecimiento del organismo en condiciones cidas y las bebidas alcohlicas muestra que el organismo participa en la segunda etapa de fermentacin de vino de palma (Collard y Levi, 1959; Bassir, 1962; Tortora et al, 1998;. Ingraham y Ingraham, 2004). El pH de los cambios de fermentacin de vino de neutro a cido ( Tabla 1 ). El crecimiento de las cepas a diferentes valores de pH es como se muestra en la figura 3 . Z. mobilis crece mejor a un pH entre pH 5 y 7. El pH de la muestra de vino de palma, 15h despus de la recoleccin ( Tabla 1 ), que tena la mayor poblacin ( . Fig. 1 ) tambin cae dentro de este rango. Sin embargo, el crecimiento ptimo a pH 7,0 ( . Fig. 3 ) est en contraste con el crecimiento del organismo en la muestra de vino de palma despus de la recogida ( . Fig. 1 ) en 0HR cuando el pH de la muestra era Ogba pH 7,0 ( Tabla 1 ) . Bajo condiciones naturales (muestra Ogba) la microflora nativa es viva y eficaz, y que existe una fuerte competencia por los nutrientes presentes en el vino. A medida que la edad de vino algunos microorganismos muere y otros se hacen ms activo que es la sucesin de microorganismo en el vino de palma en diferentes momentos. Se puede deducir de ello que, Z.mobilis es ms activo despus de 12 horas de coleccin de palmeras vinos. La reduccin en el pH durante el almacenamiento puede atribuirse a la utilizacin de los azcares presentes en el vino y la produccin de CO 2 y otros cidos orgnicos en el medio. La amplia gama de pH cido adecuado para el crecimiento de Z. mobilis no es sorprendente, ya que la bacteria se ha aislado a partir de vinos cidos como sidra con valores de pH de 4,0 (Oscilaciones y De Ley, 1977). Z. mobilis crecieron mejor a temperaturas de 30 - 35 C ( . Fig. 4 ). Su crecimiento se inhibe a temperaturas ms altas. La mayora de los microorganismos, excepto los termfilos no crecen bien a temperaturas mucho ms altas que 35 C. En general, el anlisis estadstico de los datos obtenidos en este estudio mostr que, no hay ninguna diferencia significativa en el crecimiento de Z. mobilis aisladas de los diferentes lugares en diversas condiciones de pH, el alcohol y la temperatura. Esta similitud en las propiedades de crecimiento de todos los aislados no es sorprendente ya que se obtuvieron de la misma sustrato natural (vino de palma). La actividad y por lo tanto, la contribucin de fermentacin de un organismo pueden ser determinadas por el volumen de gas producido (Bassir, 1962; Talaro y Talaro, 1999; Nester et al, 2004.). El resultado obtenido en la capacidad fermentativa de Z. mobilis se muestra en la Tabla 2 .

Z. mobilis cuando se introducen solos a un sustrato de azcar producen ms gas que en S. cerevisiae solo se introdujo. Esto mostr que Z. Mobilis es una mejor fermentacin del vino de palma de S.cerevisiae. Este estudio tambin mostr que una combinacin de Z. mobilis y S. cerevisiae no fermentan tanto como Z. mobilis solo. Esto probablemente indica un antagonismo entre los dos organismos en trminos de competencia por los nutrientes esenciales en el medio. A partir del estudio, se observa que Z. mobilis contribuye a la fermentacin de vino de palma. Z. mobilis es conocido por ser beneficioso para el hombre y el ganado. Preservacin de vino de palma, debido a la inactividad de los microorganismos especialmente Z. mobilis, se debe hacer con 15 horas. despus de la grabacin, cuando la densidad de Z. mobilis est en su apogeo. El efecto beneficioso de Zymomonas mobilis para el hombre ser mejor ser girado en esta etapa. Agradecimiento: Agradezco al Dr. YS Izuagbe por su orientacin. REFERENCIAS

. Atlas, RM (1997) Produccin de disolventes y combustibles - etanol en:. JE Fishback (Ed) Principios de Microbiologa. Segunda edicin. WCB Publishers, Chicago, EE.UU.. Pp854 - 855 y 985. Bassir, O (1962). Observaciones sobre la fermentacin del vino de palma. West Afric.J. Biol.. Appl. Chem.. 6: 20 - 25. Bassir, O (1968). Algunos Vinos nigerianos. West Afri. J. Biol.. Appl. Chem.. 10: 41 - 45. Collard, P; Levi, B. (1959). Una fermentacin de dos etapas de la yuca. Nature (Londres). 183: 620-621. Ekundayo, JA (1969). Preparacin de Pito;. Una bebida fermentada de Nigeria J. Alimentacin Ciencia. Technol. 4: 217 - 225. Faparusi, SI (1966). Un estudio bioqumico de vino de palma de diferentes variedades de Elaeis guineensis. Ph.D. Tesis de la Universidad de Ibadan, Nigeria. Faparusi, SI; Olofinboba, MO; Ekundayo, JA (1973). La microbiologa de Burukutu cerveza. Z. Allg. Mikrobiol. 13: 563-568. Ingraham, JL; Ingraham, CA (2004) Beneficios y usos de los microorganismos en: M Julet (Ed) Introduccin a la Microbiologa: un enfoque Historia de un caso... Tercera edicin. Brooks / Cole - Thomson, California, EE.UU.. p 270. Nester, EW; Anderson, DG; Roberts, CE, Pearsall, NN; Nester, MT (2004). Microorganismos en Alimentos y Bebidas Produccin - fermentaciones alcohlicas por levaduras En: CH WheatleyMicrobiologa: una perspectiva humana.. Cuarta edicin. Mc Graw Hill, NY, EE.UU.. Pp 151-153 y Pp 804-806. Okafor, N (1972). La fuente de los microorganismos en palmwine. Symp. Nig. Soc.Microbiol. 1: 97. Okafor, N (1975). Microbiologa del nigeriano palmwine con especial refrence a las bacterias. J. Appl. Bact. 38: 81-88. Okafor, N (1977). El mtodo microbiolgico de palmwine conservacin. J. Appl.Bact. 43: 159-161. Okafor, N (1978). Microbiologa y Bioqumica de aceite palmwine. Adv. Appl. Microbiol. 24: 237-256. Rose, AH (ed.) (1977). "Bebida alcohlica". Academic Press, Nueva York. 33p. Columpios, J; DE LEY. (1977). La biologa de Zymomonas. Estadounidense J. Bacteriol. Rev. 41: 1-46. Talaro, PK; Talaro, A (1999) Las fermentaciones microbianas en los productos alimenticios de plantas Cerveza y otras bebidas alcohlicas en:.. KT Kane Fundaciones (Ed) en Microbiologa. Tercera edicin. Mc Graw Hill, Nueva York, EE.UU.. Pp859 - 861. Tortora, GJ, Funke, BR, Case, CL (1998). Fermentacin - La fermentacin del alcohol en: L Fogel, G Wong (Eds) Microbiologa: Una Introduccin.. Sexta edicin. Addison Wesley Longman Inc. California, EE.UU.. Pp 132-134. Tulley, P (1965). Cmo aprovechar una palma Raphia. Nig. Fd. J. 30 (3): 120-132. Van pis, W; Swings, JG (1971). Qumica y los estudios microbiolgicos sobre palmwine congoleo (Elaeis guineensis). Oriente Afri. y Forestal J. 36: 311-314.

Material y mtodos
Origen de las Zymomonas spp.

Muestras de jugos naturales frutos vegetales se colectaron en frasco estril de 50 ml, transportadas en hielo al laboratorio para su procesamiento. Deteccin de Zymomonas spp. Se realiz en tubos en CELMG o caldo extracto de levadura g/L: 3g, extracto de malta 3, peptona de caseina 5, glucosa 20; 100 ppm de cicloheximida y 3% de etanol, a un de pH 5.0 ajustado con cido lctico, c/tubo con un Durham invertido. Los tubos se incubaron a 30C/24 a-48 h, la presencia de Zymomonas se detect por produccin de gas y la morfologa tpica: diplobacilos cortos Gram Negativos. Este etapa se repiti para su aislamiento en cultivo axnico. Aislamiento de Zymomonas spp. Los tubos positivos en la etapa anterior, se sembraron en cajas de Patri con agar (1.5%) y ELMG incubadas a 30C/24-48h. Se seleccionaron aquellas colonias tpicas de Zymomonas y por resiembra en el ELMG sin etanol en placa, as se obtuvieron los cultivos axnicos (5,20). Identificacin de los aislados. Se uso el Manual de Bacteriologa Determinativa de Bergeys novena edicin del 2000 (1). Con base en las pruebas para la identificacin de Zymomonas sp se incluyo la cepa de coleccin Z. mobilis ATCC 10988 como patrn de referencia y comparacin (3). Conservacin de los aislados. Los aislados al igual que la cepa de coleccin de Zymomonas, se resembraron mensualmente en agar ELMG, sin etanol con cicloheximida y conservaron a 10C en refrigeracin.

Produccin de etanol.
Para comprobar la capacidad de sntiesis de etanol de los aislados de Zymomonas, se sigui el siguiente protocolo: Fermentacin. Los aislado se activaron en CELMG sin etanol y cicloheximida, se incubaron a 30C/2448h, posteriormente se tom una asada de c/u para sembrar un matraz de 500 ml con 250 ml de CELMG, el cual se incubo a 30C, a 100 rpm en agitador rotatorio/24-48h, de est se sembr otro matraz con CELMG para la sntesis de etanol. Produccin de etanol. Cada aislado activado en CELMP, se uso el 5% (v/v) de i para un matraz de 250ml. con 150ml. de medio de produccin de etanol g/L: KH2PO4 2, extracto de levadura 10 y 10, 30, 50, 100 y 150. de glucosa en agua destilada a pH 5.0 ajustado con cido lctico, las sales se agregaron despus de esterilizar la base (17-21), cada aislado se sembr por triplicado, en condicin esttica y en agitacin a 100 rpm a 30C por 120 h se tomaron 5ml cada 24 h. en tubos con tapn de rosca para medir: Cuantificacin de etanol. La muestra de la fermentacin se congelaron hasta la medicin de etanol, se centrifugaron a 3000 rpm/20 min a baja temperatura, el sobrenadante transferido a viales, para posteriormente medir concentracin de etanol porcromatografa de gases Beckman Mod. GC 72-5, con detector de ionizacin de flama, nitrgeno como gas acarreador y columna de acero inoxidable de 6 pies de largo y 1/8 de pulgada de dimetro empacada con Porapak Q en anlisis cromatogrficos, se utilizaron las siguientes condiciones (10,13). Flujo de Nitrgeno 40 c.c./min., flujo de Hidrgeno 40 c.c./min., flujo de aire 230 c.c./min., temperatura de Columna 180 C., temperatura de Inyector 170C., temperatura de Detector 160C., detector de ionizacin de flama, atenuacin de Registro 0.8, velocidad de la Carta 0.1 pulg/min., volumen inyectado 1.0 microlitro. Medicin de crecimiento. Cada aislado se midio la turbidez (D.O.) a 600nm (2,4,5) en un espectrofotmetro Coleman Junior II, cada 24 h durante la fermentacin. Azcares totales. La muestra utilizada para la cuantificacin de etanol, tambin se emplearon para determinar azcares totales en el medio de cultivo, por el mtodo de la Antrona con una curva de calibracin con estndares de glucosa (3). Produccin de etanol por Zymomonas

Resultados y discusin.
A partir de aguamiel de maguey, de caa de azcar, de pulque, y de jugo de uva, se recuperaron 15 aislados de Zymomonas spp como se muestra en el cuadro 1, en donde se comprueba que este el gnero es cosmopolita y relativamente fcil de encontrar en la naturaleza, segn se reporta en la literatura (1-4). En referencia a las pruebas bioqumicas de los aislados silvestres en comparacin con la cepa de coleccin Z. mobilis ATCC 10988 de acuerdo con Bergeys del 2000 (1), tuvieron morfologa celular similar a la cepa de referencia: fueron diplobacilos Gram Negativos, mviles a excepcin el aislado R4, mientras que los aislados silvestres respondieron negativamente a la sntesis de: oxidasa, la ureasa, la gelatinasa, el indol y la reduccin nitratos, pero si liberaron catalasa y todos fermentaron la glucosa.

La cepa ATCC 10988 y el aislado denominado Zymomonas sp U I, fueron positivas al cido sulfhdrico y la produccin de gas de glucosa, a la fermentaron de fructosa y sacarosa con generacin etanol, en donde la cepa ATCC 10988 creci mejor que los aislados en el medio de cultivo con diferente concentracin de glucosa (11-14), aunque solo el aislado U I, genero etanol. Los 15 aislados silvestres de Zymomonas fueron clasificados como Z. mobilis ya que fermentaron la glucosa a diferente concentracin de 10, 30, 50, 100 y 150g/L, pero con una mnima liberacin de etanol en comparacin con la cepa Z. mobilis ATCC 10988 tanto en condicin esttica como en agitacin a 100 rpm, mientras que la ATCC10988 con un nivel de glucosa de 10, 30, 50, 150g/L libero etanol hasta 104g/L de manera similar en agitacin y como en condicin esttica, debido a lo anterior se selecciono a Z. mobilis U I aunque sintetiza levano (1) . El cuadro 3 muestra el anlisis comparativo del mximo rendimiento celular, entre la Z. mobilis silvestre UI de 0.17 en agitacin a 0.15 esttica en 10g/L de glucosa, mientras que para la ATCC 10988 fue de 0.36 y 0.69 en agitacin con 10 y 150g/L de glucosa en el medio de cultivo (19-21). Por otro lado se observo que la mayora de los aislados silvestres producen levano, actualmente se analiza la capacidad que tienen y el potencial para su posible explotacin. Conclusiones Los resultados de ambos cuadros 1 y 2 demuestran que si bien es posible recuperar Z.mobilis de jugos naturales la seleccin para la produccin de etanol es un trabajo de tiempo, si se desea que esa capacidad sea natural, dado el contraste entre lo que libera la cepa de coleccin de la silvestre, pues con el avance de la ingeniera gentica es posible seleccionar una Zymomonas spp mejor que la tpicaSaccharomyces spp, para la produccin masiva de etanol que ayude a minimizar el impacto de la disminucin combustibles del petrleo. Cuadro 1. Origen de los aislados de Zymomonas mobilis productoras de levanoa etanolb y/o de algunas regiones de Mxico. Aislado B 1a B 2a B 3a E 2a E 3a R 3a R 4a R 5a R 6a Z 4a Z 5a Pa Fa Ta U I ab Fuente de aislamiento Jugo agave* Jugo agave* Jugo agave * Aguamiel maguey Aguamiel maguey Jugo de agave Jugo de agave Jugo de agave Jugo de agave Mosto con 24 h* Mosto con 24 h*. Pulque Pulque Pulque Jugo de uva Sitio Bustamante, N. L**. Bustamante, N. L. Bustamante N. L. Iturbide, N. L.** Iturbide, N. L. Laguna de Snchez, N. L**. Laguna de Snchez, N. L. Laguna de Snchez, N. L. Laguna de Snchez, N. L. Tequila, Jal.*** Tequila, Jal. Matehuala, S. L. P.+++ Fortn Ver. + Yondije, Edo. de Mx++. Monterrey, N. L.**

*jugo o mosto en fermentacin, **noreste, ***centro occidente, nororiente+++, +Costa noreste, ++centro de Mxico. Cuadro 2. Anlisis comparativo de la produccin de etanol por Zymomonas mobilis** de coleccin y un aislado de jugos de frutos vegetales de algunas regiones de Mxico. Glucosa (g/L) Z. mobilis ATCC 10988 Z. mobilis UI

Esttica 10 30 50 100 150 5.30 16.45 29.29 54.50 70.00

Agitacin 3.60 15.50 33.60 53.45 104.67

Esttica 1.49 1.80 1.60 1.27 1.34

Agitacin 1.72 3.28 4.40 4.00 3.00

**Condiciones de fermentacin: Inculo 5%, agitacin 100 rpm 30C, pH 5.0 Cuadro 3. Anlisis comparativo del rendimiento de produccin celular (Y=p/s) entre Zymomonas mobilis* de coleccin y un aislado silvestre de jugos naturales de vegetales de algunas regiones de Mxico. Z. mobilis ATCC 10988 Esttica 0.53 0.54 0.58 0.54 0.46 Agitacin 0.36 0.51 0.67 0.53 0.69 Esttica 0.15 0.06 0.032 0.013 0.009 Z. mobilis UI Agitacin 0.17 0.11 0.08 0.04 0.02

Glucosa (g/L)

10 30 50 100 150

*condicione similares en agitacin al cuadro 2. Agradecimientos a Jeanneth Caicedo Rengifo por su trabajo secretarial, al proyecto 2.7 de la CIC-UMSNH 2005-2006 por las facilidades para su publicacin.

Literatura citada
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. Buchanan R.E. & N.E. Gibbons2000. Bergeys Manual of Determinative Bacteriology. Nine edition: The Williams & Wilkins Company/Baltimore, USA: 200-205, 289. Chan-Lin Chang, Ceng-Shung Gong, Li-Fu Chen & George T.Tsao. 1981. D-Xylulose Fermentation to Ethanol by Saccharomyces cerevisiae. Appl. Environ. Microbiol. 42: 284 289. Dimler R.J., W.C. Shasfer, O.S. Wise & C.E. Rist. 1952. Method of Antrona. Anal. Chem. 124 :1411 . Montenecourt, B. S., in Biology of Industrial Organisms (eds Demain, A. L. and Soloman, N. A.), BenjaminCummings Publishing Co., California, 1985, pp. 261189. Parker, C., Barnell, W. O., Snoep, J. L., Ingram, L. O. and Conway, T., Mol. Microbiol., 1995, 15, 795802. Scopes, R. K. and Griffiths-Smith, Biotechnol. Lett., 1986, 8, 653656. Barrow, K. D., Collins, J. G., Leigh, D. A., Rogers, P. L. and Warr, R. G., Appl. Microbiol. Biotechnol., 1984, 20, 225 232. Dawes, E. A., Ribbons, D. W. and Large, P. J., Biochem. J., 1966, 98, 795803. Wills, C., Kratofil, P., Londo, D. and Martin, T., Arch. Biochem. Biophys., 1981, 210, 775785. Algar, E. M. and Scopes, R. K., J. Bacteriol., 1985, 2, 275287. Buchholz, S. E., Dooley, M. M. and Eveleigh, D. E., Trends. Biotechnol., 1987, 5, 199204. Pankova, L. M., Shvinka, Y. E., Beker, M. E. and Salva, E. E., Microbiologia, 1985, 54, 141145. Viikari, L. and Korhola, M., Appl. Microbiol. Biotechnol., 1986, 24, 471476. Wecker, M. S. A. and Zall, R. R., Appl. Microbiol. Biotechnol., 1987, 53, 28152820. Pond, J. L., Eddy, C. K., Mac Kenzie, K. F., Conway, T., Borecky, D. J. and Ingram, L. O., J. Bacteriol., 1989, 171, 767 774. Michel, G. P. F. and Baratti, J., J. Gen. Microbiol., 1989, 135, 453460. Mortatte, M. P. L., Sato, H. H. and Park, Y. K., Biotechnol. Lett., 1983, 5, 518526. Viikari, L. and Linko, M., Biotechnol. Lett., 1986, 8, 139144. Lyness, E. W. and Doelle, H. W., Biotechnol. Lett., 1983, 5, 345350. Liegh, D., Scopes, R. K. and Rogers, P. L., Appl. Microbiol. Biotechnol., 1985, 20, 413415. OMullen, P., Szakacs-Dobogi, M. and Eveliegh, D. E., Biotech. Lett., 1991, 13, 137142

Leer ms: http://www.monografias.com/trabajos38/produccion-etanol/produccion-etanol2.shtml#ixzz2lCutlPBT

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