LA PLATE-FORME IMAGERIE OPTIQUE

Regarder lactivit du cerveau : les mthodes d'imagerie optique

Le champ des techniques dimagerie optique repose sur le principe que lactivit neuronale peut changer les proprits optiques du tissu nerveux. Comment mesurer optiquement lactivit dun groupe de neurones ? Il existe plusieurs grandes familles de techniques optiques car lactivit neuronale peut affecter directement ou indirectement un certain nombre de phnomnes optiques (figure 1), soit intrinsques au tissu nerveux (tels que labsorption ou la diffusion) soit extrinsques via lapport de sondes optiques (comm e la fluorescence). Dans tous ces cas de figure, limagerie optique repose sur lutilisation dune camra ultrasensible capable denregistrer de trs petites variations de lumire (de lordre de 1 pour 1000). Limagerie optique intrinsque repose globalem ent sur les proprits optiques de lhmoglobine. Si le cortex est clair, la quantit de photons absorbs va dpendre de la concentration en hmoglobine dans le tissu (volume sanguin), de son tat d'oxygnation ou des deux, selon la longueur donde utilise. Ces mesures peuvent tre relis aux signaux IRMf, - BOLD et autres -, et permettent de mesurer lactivit nerveuse de faon indirecte via le couplage neuro-hmodynamique. Limagerie optique extrinsque, en revanche, ncessite lutilisation dune sonde optique extrinsque au cerveau. La sonde la plus couramment utilise in vivo est le blue dye (VSDI pour voltage sensitive dye imaging). Elle se lie aux membranes plasmiques et met une quantit de photons fluorescents linairement dpendante du niveau de dpolarisation membranaire. Limagerie VSD donne ainsi accs la dynamique de lactivit synaptique de population. Quels sont les avantages de cette technique ? Cette technique est invasive car elle ncessite davoir un accs optique au tissu nerveux mais elle revt cependant des avantages ingals par rapport aux autres techniques dimagerie crbrale de population. En particulier, limagerie optique est la seule qui permet davoir accs lactivit dune large population de neurones (diamtre 20mm) avec un fort rapport signal sur bruit (analyse essai par essai possible) avec une forte rsolution spatiale (20-50 m) et temporelle (1-10ms en VSDI).

Figure1 : Les grandes familles dimagerie optique

L'imagerie optique Marseille

Au GLM, deux dispositifs dimagerie optique sont en activit, un chez le singe vigile et un autre chez le rat anesthsi (figure 2). Ces deux dispositifs sont partags par 4 chercheurs de lIFR (F. Chavane, I. Vanzetta - DyVA, INCM ; C. Xerri, Y. Zennou-Azogui Neuroplasticit corticale, Ple3C) et souvriront bientt dautres (A. Norena, L. Vinay). Cette plateforme va sagrandir avec la cration dun troisime dispositif pour un modle singe-cureuil anesthsi. Les dispositifs exprimentaux ont t regroups afin de mutualiser les moyens humains, techniques et matriels. Cette logique fdratrice, soutenue par lIFR, sest avre importante pour le transfert de connaissances et lmergence de nouveaux projets collaboratifs.

Figure 2. A gauche, le dispositif singe veill (haut) o nous travaillons sur le systme visuel (stimulus visuel en bas). A droite, le dispositif petit animal (haut) accueille entre autres des expriences portant sur le systme somesthsique (stimulus piezo-lectrique en bas)

Les projets en cours

Ces dispositifs exprimentaux accueillent un grand nombre de projets exprimentaux sur diffrentes modalits, espces et niveaux dintgrations. Des projets sur animal anesthsi sont accueillis sur le dispositif petit animal, pour tester lintgration sensorielle et la topographie dynamique dans le cortex somesthsique (Y. Zennou-Azogui, C Xerri, figure 3A) mais aussi depuis peu au niveau visuel, pour quantifier limpact fonctionnel au niveau cortical de rtines artificielles (voir projets ci-dessous; L. Hoffart, I. Balansard, F. Chavane). Au niveau du dispositif exprimental singe veill, nos travaux exprimentaux ne portent que sur le systme visuel. Nous cherchons

comprendre comment le cortex visuel intgre et reprsente lentre sensorielle au niveau de V1 pour des stimuli en mouvement (F. Chavane, G. Masson ; thsards : A. Reynaud, Q. Montardy ; figure 3B) mais aussi au niveau de V4 pour la forme et la couleur (I. Vanzetta ; Master : F. Guilleminot ; figure 3C). Finalement, afin de mieux apprhender le signal dimagerie optique, nous avons galement de fortes collaborations avec lquipe dOlivier Faugeras (INRIA, Odysse) au niveau du couplage neurohmodynamique (I. Vanzetta, G. Masson, O. Faugeras ; Thsard : T. Deneux), et de la rponse de fluorescence en VSDI (F. Chavane, T. Vieville, O. Faugeras ; Thsard : S. Chemla, F. Grimbert).

Figure 3. A. Exemple de dcours temporel de lactivation du cortex somesthsique primaire suite une stimulation t actile. B. Intgration de stimulus de type mouvement apparent dans le cortex visuel primaire (en haut). Le cercle dnote la position rtinotopique et le moment de prsentation du stimulus. Cette intgration est contrainte par une forte vague de suppression qui se dplace dans le sens inverse du mouvement (en bas). C. Haut: image de la vasculature de V4 (1x0.4mm). Image du bas: Carte fonctionnelle obtenue en imagerie optique intrinsque avec des stimuli orients: les colonnes d'orientation apparaissent que dans une petite rgion para-fovale (ellipse blanche pointille).

Le futur
Projet ANR TecSan RETINE : REal TIme 2D NEurostimulation for high definition neural implants (F. Chavane, L. Hoffart, I. Balansard) Projet collaboratif Rorganisation des cartes corticales rtinotopiques, tonotopiques somesthsiques aprs lsion priphrique (F. Chavane, Y. Zennou-Azogui, A. Norena , C. Xerri) Projet Hemospike (demande ANR 2009) (I. Vanzetta, C. Benar, C. Bernard, A. Ivanov; C. Flynn) et

Les dveloppements
Un troisime dispositif dimagerie optique pour la prparation singe-cureuil anesthsi est en cours de dveloppement. Lavantage de ce modle animal, est quil possde un systme visuel similaire celui du macaque tout en tant lissencphale. Ce dispositif exprimental est financ grce aux contrats NRJ (I. Vanzetta) et RETINE (F. Chavane). A plus long terme, nous envisageons galement de complter limagerie optique classique avec des approches nouvelles lies la polarisation et la diffusion (collaboration avec lInstitut FRESNEL), ainsi que par limagerie optique 2 photons. Cette dernire technique offre la possibilit de mesurer lactivation neuronale en 3D avec une prcision cellulaire, mais sur une rgion corticale plus restreinte. Le dveloppement de cette technique se ferait dans loptique de cration dun pole dimagerie photonique dans le futur Institut de Neurosciences de la Timone, qui serait complt par la microscopie confocale (P3M, U751).

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