1. 2. 3. 4. 5. 6.

Oxidoreductasas Transferasas Hidrolasas Liasas Isomerasas Ligasas

Hay 10 subclases de transferasas son las siguientes: 2.1 2.2 2.3 2.4 Son enzimas que catalizan la transferencia de grupos de un solo carbono. Son enzimas que catalizan la transferencia de grupos aldehdo o cetona. Son enzimas que catalizan la transferencia del grupo funcional acilo. Son enzimas que actan como catalizadores en la transferencia de un monosacrido de un nucletido de azcar activado (tambin conocido como el "donador glicosil") a una molcula, que normalmente es un alcohol, aceptor de glicosil. 2.5 Son enzimas que catalizan la transferencia de los grupos alquilo o arilo. 2.6 Son enzimas que catalizan la transferencia de grupos funcionales que contienen nitrgeno. 2.7 Son enzimas que catalizan la transferencia de grupos funcionales que contienen fosforo. 2.8 Son enzimas que catalizan la transferencia de grupos funcionales sulfurados. 2.9 Son enzimas que catalizan la transferencia de grupos funcionales que contienen Selenio. 2.10 Son enzimas que catalizan la transferencia de grupos funcionales que contienen molibdeno y tungsteno.

ATP + D-hexosa ADP + D-hexose 6-fosfato ATP: D-hexose 6-fosfotransferasa Puede usar CTP, ITP y UTP.

Las hexoquinasas, son un grupo de enzimas del tipo quinasas, que pueden transferir un grupo fosfato desde una molcula de "alta energa" a otra, que actuar como aceptora de este fosfato, denominada sustrato. Esta transferencia se denomina fosforilacin. El trmino hexo quiere decir que puede fosforilar a cualquier monosacrido que sea una hexosa, como por ejemplo fructosa, gulosa o glucosa, por esta razn es una enzima con baja especificidad. Su rol en la clula es variado, sin embargo se encuentra asociada mayormente al metabolismo celular, y especficamente, el rol de mayor importancia se encuentra en la gluclisis, dnde esta enzima fosforila a una molcula de glucosa, a partir de ATP, con lo cual se inicia la va principal de metabolismo de azcares, esto es, el camino principal por dnde los seres vivos obtienen energa a partir de stos compuestos. Como se encuentra asociada a la gluclisis, esta enzima est presente en prcticamente la totalidad de seres vivos del planeta, y es por esto que posee formas y tamaos muy diversos, un remanente de la larga historia evolutiva de sta enzima. El cofactor de esta enzima es el ATP en la mayora de casos, aunque puede utilizar otros anteriormente nombrados, necesita de iones metlicos de magnesio (+2) para su activacin, tiene tambin varios inhibidores, como el 1-5.Anhidro-D-glucitol-fosfato, las altas concentraciones en el in cloruro la inhiben, las altas concentraciones de D-glucosa inhiben a las hexoquinasas, la d-glucosa-6-fosfato y la D-glucosa-1,6-difosfato, son inhibidores por producto, la n-acetil-glucosamina etc El rango de pH ptimo al que trabajan es de 7 a 9, su temperatura optima es de 25 a 37 grados Celsius, su pI vara desde 5.35 a 6 y su peso molecular vara de 50000 a 118000 g/mol.

La diferencia vital entre velocidad y rapidez, es que la velocidad es un vector y la rapidez es una magnitud escalar. Mientras que la velocidad depende de la trayectoria sobre la cantidad de tiempo que tomo para recorrerse esa trayectoria, la rapidez depende de la distancia total recorrida de un punto 1 a un punto 2 en una cantidad de tiempo.

Las enzimas no cambian los niveles energticos sustratos o productos, las enzimas disminuyen la barrera energtica para que un sustrato se convierta en un producto llamada energa de activacin. El parmetro visiblemente alterado es la energa libre de activacin.

Hay cuatro transformaciones de la ecuacin de Michael, son la transformacin de LinewearBurk, Hames, Eadie-Hofstee y la de Eisenthal-Cornish-Bouden.

Este modelo slo es vlido cuando la concentracin del sustrato es mayor que la concentracin de la enzima, y para condiciones de estado estacionario, es decir, cuando la concentracin del complejo enzima-sustrato es constante. Tambin se tiene que suponer que la reaccin de complejo a producto es irreversible. La velocidad V indica el nmero de molculas del sustrato que se convierten en producto por segundo. Como se acaba de mencionar, aunque es imposible medir exactamente la concentracin de sustrato que da Vmax, las enzimas pueden caracterizarse mediante la concentracin de sustrato a la cual la velocidad de reaccin es la mitad de la velocidad mxima. Esta concentracin de sustrato se conoce como constante de Michaelis-Menten (Km). Para enzimas que exhiben una cintica de Michaelis-Menten simple esta constante representa la constante de disociacin del complejo enzima-sustrato (ES) (o la inversa de la afinidad entre enzima y sustrato). Valores bajos indican que el complejo ES est unido muy fuertemente y raramente se disocia sin que el sustrato reaccione para dar producto. En estos casos se obtendr una KM diferente segn el sustrato especfico sobre el que acte la enzima (como sucede en el caso de enzimas que actan sobre sustratos anlogos) y segn las condiciones de reaccin en que se realicen las mediciones.

Mtodo Lineweaver Hanes Hofstee

Pendiente

Interseccin

Ka

Vm

-Pendiente

Interseccin

Para el sistema de Lineweaver-Burk: 1/a 0,5 0,35714286 0,25641026 0,18181818 0,12987013 0,09259259 0,06622517 0,04739336 0,03389831 0,02421308
0.07 0.06 0.05

1/v0 0,05988024 0,04761905 0,03546099 0,03174603 0,02304147 0,01754386 0,01636661 0,01474926 0,01338688 0,01242236

1/V0

0.04 0.03 0.02 0.01 0 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6

y = 0,102x + 0,009 R = 0,992

1/[A]

Con esta los resultados de Ka y Vmax son: Para el sistema de Hanes: [A] 0 2 2,8 3,9 5,5 7,7 10,8 15,1 21,1 29,5 41,3 [A]/vr 0 0,11976048 0,13333333 0,13829787 0,17460317 0,17741935 0,18947368 0,24713584 0,31120944 0,39491299 0,51304348

Para los valores de Ka y Vmax

Para el sistema de Hofstee: vr 0 16,7 21 28,2 31,5 43,4 57 61,1 67,8 74,7 80,5 vr/s 0 8,35 7,5 7,23076923 5,72727273 5,63636364 5,27777778 4,04635762 3,21327014 2,53220339 1,94915254

Para convertir las unidades y dejarlo en micromoles hay que multiplicar por 10 y 100.

Inhibidores

Tipo de inhibidor Competitivo Acompetitivo No competitivo

Pendiente

interseccin

[I] mM [A] mM 0 6,4 12,8 25,6 51,2 102,4 204,8 409,6 809,2 1638,4 1/[A] 0 0,15625 0,078125 0,0390625 0,01953125 0,00976563 0,00488281 0,00244141 0,00123579 0,00061035

0 V0 mol/ min 0 39 66,9 104,0 144,0 178,3 202,4 217,0 225,2 229,5 1/v0 0 0,025641026 0,014947683 0,009615385 0,006944444 0,005608525 0,004940711 0,004608295 0,004440497 0,004357298

6 V6 mol/ min 0 37 61,3 91,1 120,4 143,4 158,6 167,5 172,3 174,8 1/v6 0 0,027027027 0,016313214 0,010976948 0,008305648 0,006973501 0,00630517 0,005970149 0,005803831 0,005720824

12 V12 mol/ min 0 35,3 56,5 81 103,4 120 130,4 136,3 139,5 141,1 1/v12 0 0,028328612 0,017699115 0,012345679 0,00967118 0,008333333 0,007668712 0,007336757 0,007168459 0,007087172

24 V24 mol/ 1/v24 min 0 0 32,2 0,0310559 49 0,02040816 0,01506024 80,6 0,01240695 90,4 0,01106195 96,2 0,01039501 99,4 0,01006036 101,1 0,0098912 101,9 0,00981354

Es inhibicin acompetitiva ya que cambian los interceptos pero no las pendientes. Se sabe que las regresiones lineales de cada una de estas rectas son: Para La concentracin de inhibidor de 0 mM la regresin es la siguiente: Y= 0,136732246*x + 0,004273166 con un R2=1 Para La concentracin de inhibidor de 6 mM la regresin es la siguiente: Y= 0,136862997*x + 0,005634462 con un R2=1 Para La concentracin de inhibidor de 12 mM la regresin es la siguiente: Y=0,136554527*x + 0,007005453 con un R2=1 Para La concentracin de inhibidor de 24 mM la regresin es la siguiente: Y=0,136523314*x + 0,009730345 con un R2=1 Como se sabe que a concentracin de inhibidor de 0 sigue el modelo de Linewear-Burk entonces:

Sabiendo esto entonces se iguala cada intercepto a lo que equivale para encontrar cada Kii.

Se despeja cada Kii y dan los siguientes valores: [I] mM 6 12 24 Kii mM 18,83425017 18,76742481 18,79285643

[I] mM [A] mM 0 8 16 32 64 128 256 512 1024 2048

0 1/[A] V0 M/min 0 33,3 57,1 88,9 123,1 152,4 173,0 185,5 192,5 196,2 1/v0

4 V4 M/min 0 30,4 51,6 79,3 108,4 132,7 149,5 159,7 165,2 168,2 1/v4

8 V8 M/min 0 27,9 47 71,6 96,8 117,6 131,7 140,1 144,7 147,2 1/v8

16 V16 M/min 0 24 39,9 59,9 79,8 95,7 106,3 112,6 116 117,8 1/v16

0 0,125 0,0625 0,03125 0,015625 0,0078125 0,00390625 0,00195313 0,00097656 0,00048828

0,03003003 0,017513135 0,011248594 0,008123477 0,00656168 0,005780347 0,005390836 0,005194805 0,00509684

0,032894737 0,019379845 0,01261034 0,009225092 0,007535795 0,006688963 0,006261741 0,006053269 0,005945303

0 0,035842294 0,021276596 0,01396648 0,010330579 0,008503401 0,007593014 0,007137759 0,00691085 0,006793478

0 0,04166667 0,02506266 0,01669449 0,01253133 0,01044932 0,00940734 0,00888099 0,00862069 0,00848896

Graficando:

Es inhibicin no competitiva pues cambian las pendientes y los interceptos. Se sabe que las regresiones lineales de cada una de estas rectas son:

Para La concentracin de inhibidor de 0 mM la regresin es la siguiente: Y= 0,200248614*x + 0,004997263 con un R2=1 Para La concentracin de inhibidor de 4 mM la regresin es la siguiente: Y= 0,216453883*x + 0,005843034 con un R2=1 Para La concentracin de inhibidor de 8 mM la regresin es la siguiente: Y= 0,233318505*x + 0,006682083 con un R2=1 Para La concentracin de inhibidor de 16 mM la regresin es la siguiente: Y= 0,266549778*x + 0,008366128 con un R2=1 Como se sabe que a concentracin de inhibidor de 0 sigue el modelo de Linewear-Burk entonces:

Como se sabe que cambia la pendiente y el intercepto, entonces para cada caso se iguala las pendientes:

Remplazando para la concentracin de inhibidor de 4 mM:

Se despeja cada Kis y dan los siguientes valores: [I] mM 4 8 16 Kis mM 49,4280259 48,4425208 48,3246089

Sabiendo esto entonces se iguala cada intercepto a lo que equivale para encontrar cada Kii.

Remplazando para la concentracin de inhibidor de 4 mM:

Se despeja cada Kii y dan los siguientes valores: [I] mM 4 8 16 Kii mM 49,4280259 48,4425208 48,3246089

[I] mM [A] mM 0 7,8 15,6 31,2 62,4 124,8 249,6 499,2 998,4 1996,8 1/[A] 0 0,128205128 0,064102564 0,032051282 0,016025641 0,008012821 0,00400641 0,002003205 0,001001603 0,000500801 Graficando:

0 V0 mol/ min 0 54,3 93,1 144,9 200,6 248,4 281,9 302,4 313,7 319,8 1/v0

3 V3 mol/ min 0 51,5 89 139,8 195,7 244,5 279,5 300,9 313 319,4 1/v3

6 V6 mol/ min 0 49 85,1 135 190,9 240,8 277 299,5 312,2 318,9 1/v6 0 0,02040816 0,01175088 0,00740740 0,00523834 0,00415282 0,00361010 0,00333889 0,00320307 0,00313577

12 V12 mol/ min 0 44,5 78,4 126,4 182,1 233,7 272,2 296,7 310,7 318,1 1/v12 0 0,02247191 0,01275510 0,00791139 0,00549148 0,00427899 0,00367376 0,00337040 0,00321853 0,00314366

0,01841620 0,01074113 0,00690131 0,00498504 0,00402576 0,00354735 0,00330687 0,00318775 0,00312695

0,01941747 0,01123595 0,00715307 0,00510986 0,00408998 0,00357781 0,00332336 0,00319488 0,00313087

Es inhibicin competitiva pues cambian solo las pendientes. Se sabe que las regresiones lineales de cada una de estas rectas son: Para La concentracin de inhibidor de 0 mM la regresin es la siguiente: Y= 0,119720416*x + 0,003066759 con un R2=1 Para La concentracin de inhibidor de 3 mM la regresin es la siguiente: Y= 0,127515664*x + 0,003066758 con un R2=1 Para La concentracin de inhibidor de 6 mM la regresin es la siguiente: Y= 0,135282012*x + 0,003069504 con un R2=1 Para La concentracin de inhibidor de 12 mM la regresin es la siguiente: Y= 0,151321214*x + 0,003065637 con un R2=1 Como se sabe que a concentracin de inhibidor de 0 sigue el modelo de Linewear-Burk entonces:

Como se sabe que cambia la pendiente y el intercepto, entonces para cada caso se iguala las pendientes:

Remplazando para la concentracin de inhibidor de 3 mM:

Se despeja cada Kis y dan los siguientes valores: [I] mM 3 6 12 Kis mM 46,0743834 46,159949 45,4623006