UNIVERSIDADE FEDERAL DE GOIS ESCOLA DE VETERINRIA E ZOOTECNIA PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM CINCIA ANIMAL Disciplina: SEMINRIOS APLICADOS

DESENVOLVIMENTO DE NOVOS FRMACOS

Priscilla Regina Nasciutti Orientadora: Prof. Dr. Rosngela de Oliveira Alves Carvalho

GOINIA 2012

PRISCILLA REGINA NASCIUTTI

DESENVOLVIMENTO DE NOVOS FRMACOS

Seminrio apresentado junto Disciplina Seminrios Aplicados do Programa de Ps-Graduao em Cincia Animal da Escola de Veterinria e Zootecnia da Universidade Federal de Gois. Nvel: Mestrado.

rea de Concentrao: Patologia, Clnica e Cirurgia Animal Linha de Pesquisa: Alteraes clnicas, metablicas e toxmicas dos animais e meios auxiliares de diagnstico.

Orientador: Prof. Dr. Rosngela de Oliveira Alves Carvalho UFG Comit de Orientao: Prof. Dr. Valria de Oliveira UFG Prof. Dr. Adilson Donizeti Damasceno UFG

GOINIA 2012

ii SUMRIO

1 INTRODUO.............................................................................................. 2 REVISO DE LITERATURA........................................................................ 2.1 Histrico da origem dos medicamentos........................................ 2.2 Agncias reguladoras.............................................................................. 2.2.1 Resoluo CNS 251-79........................................................................ 2.3 Processo de pesquisa e desenvolvimento de frmacos...................... 2.3.2 Otimizao do composto-prottipo....................................................... 2.3.3 Triagem do composto-prottipo............................................................ 2.3.4 Estudos pr-clnicos............................................................................. 2.3.5 Estudos clnicos.......................................................................................

1 3 3 8 9 10 16 17 19 23

2.3.1 Descoberta de novos compostos-prottipos......................................... 11

a) Fase I....................................................................................................... 23 b) Fase II...................................................................................................... 24 c) Fase III..................................................................................................... 24 d) Fase IV.................................................................................................... 2.3.6 Estudos multicntricos.......................................................................... 2.4 Aspectos ticos........................................................................................ 3 CONSIDERAES FINAIS......................................................................... REFERNCIAS................................................................................................ 25 26 27 28 29

1 INTRODUO O processo de pesquisa e desenvolvimento de frmacos (P&D) complexo, longo e de alto custo. O impacto do uso de medicamentos na sociedade tem vrias facetas. Por um lado, os frmacos podem aumentar a expectativa de vida das pessoas, tratar certas doenas, trazendo assim benefcios sociais e econmicos; por outro lado, podem aumentar os custos da ateno sade se utilizados inadequadamente e/ou levar ocorrncia de reaes adversas. A descoberta de novos medicamentos tem suas razes profundamente ligadas s inovaes cientficas e tecnolgicas. Os avanos expressivos da qumica e biologia e a melhor compreenso de vias bioqumicas fisiolgicas, alvos moleculares e de mecanismos que levam ao aparecimento e desenvolvimento de doenas, tornaram possvel a descoberta de formulaes teraputicas notveis. As etapas envolvidas no processo de P&D baseia-se, simplificadamente, no estudo de compostos para o tratamento de doenas. A primeira etapa consiste na descoberta de um composto com atividade teraputica. Na segunda etapa so feitos testes in vitro para avaliao das propriedades biolgicas das molculas obtidas, por meio de bioensaios in vivo estudando o metabolismo e investigando a farmacocintica e farmacodinmica nos animais, o que considerado o estudo pr-clnico. Na terceira e ltima etapa do processo so realizados estudos clnicos em humanos, em vrias fases, parte denominada estudo clnico (LOMBARDINO & LOWE, 2004; FERREIRA et al., 2009; GUIDO et al., 2010). Introduzir um novo medicamento na teraputica um processo longo e bastante oneroso como citado anteriormente. Todo o processo de P&D dura cerca de doze anos, com probabilidade de sucesso muito pequena (LIMA et al., 2003). Assim, de cada 30.000 molculas sintetizadas, 20.000 (66,7%) entram na fase de estudos pr-clnicos, 200 (0,67%) entram na fase I dos estudos clnicos, 40 (0,13%) passam para a fase II, 12 (0,04%) entram na fase III e somente nove (0,027%) so aprovadas pelos rgos regulatrios. importante mencionar ainda, que apenas um medicamento aprovado (0,003%) includo nos protocolos teraputicos (CALIXTO & SIQUEIRA JNIOR, 2008).

2 Diante do exposto, v-se a importncia de se estudar e entender o processo P&D, pois por meio deste que os medicamentos so criados e disponibilizados populao. Esse processo produz outras formas de tratamento antes no existentes e podem agregar novos frmacos a tratamentos convencionais, melhorando assim a resposta teraputica dos indivduos. Da mesma forma, podem ser desenvolvidos medicamentos a partir da modificao estrutural dos j existentes, com vantagens que vo desde a diminuio dos efeitos adversos, melhora do efeito desejado. Este seminrio, portanto, tem como objetivo descrever o histrico do uso de medicamentos e as fases envolvidas no processo P&D, para que compostos recm-desenvolvidos possam chegar s prateleiras de maneira segura e serem opes para o tratamento das diversas enfermidades.

3 2 REVISO DE LITERATURA 2.1 Histrico da origem dos medicamentos Desde os primrdios da humanidade, o homem busca na natureza recursos para aliviar a dor e tratar as doenas que o acomete. Basicamente, os recursos teraputicos utilizados pelos nossos ancestrais concentravam-se nos recursos advindos da natureza (plantas, animais e minerais). Embora a medicina aloptica (sistema teraputico em que se trata a doena por meios contrrios a ela) praticada na atualidade tenha sua origem na cultura grega, o uso de plantas na medicina foi muito difundido inicialmente pelos egpcios, indianos e chineses, h mais de 8.000 anos, sendo posteriormente praticado em outras regies do mundo (BARBERATO FILHO, 2006). H registros do uso de muitas plantas medicinais h milhares de anos antes de Cristo, como a papoula (Papaver somnniferum), maconha (Cannabis sativa), babosa (Aloe vera) e outras. Entretanto, somente no sculo XIX iniciou-se a procura pelos princpios ativos presentes nas plantas, criando assim, os primeiros medicamentos com as caractersticas que ns conhecemos atualmente (CALIXTO & SIQUEIRA JNIOR, 2008). Historicamente foram os farmacuticos, desde Galeno (129-199 D.C.), que procuraram descobrir e utilizar medicamentos naturais na sua forma pura. Exemplo relevante e histrico do emprego de produtos naturais na medicina encontra-se entre os frmacos cardiotnicos. A planta Digitalis, foi descrita em 1785 por Whitering e seu emprego como cardiotnico data de 1250. A digitoxina e a digoxina so princpios ativos importantes encontrados nesta planta, tais substncias atualmente classificadas como glicosdeos, responsveis pela atividade cardiotnica desta planta. Embora tenham decorrido centenas de anos da identificao desses compostos na Digitalis, ainda hoje essa planta fonte desses glicosdeos cardioativos (BARREIRO, 1990; BARREIRO & BOLZANI, 2009). Em 1806 Friedrich Serturner, farmacutico alemo, foi o primeiro a isolar o alcalide morfina da papoula (Papaver somnniferum), fato que marcou a busca constante por outros medicamentos a partir de plantas. A morfina teve sua

4 estrutura determinada apenas em 1923 por Robinson & Gulland, sendo sintetizada em 1952 por Gates & Tschude. Deve-se morfina a descoberta de outros compostos farmacologicamente ativos (BARREIRO, 1990; CALIXTO & SIQUEIRA JNIOR, 2008). Em 1824 Pierre Jean Robiquet isolou a codena (antitussgeno) tambm da papoula e em 1848, George Fraz Merck isolou a papaverina (alcalide espamoltico e vasodilatador) desta mesma planta. Outros exemplos importantes de princpios isolados de plantas foram a atropina (antagonista muscarnico) proveniente da Atropa beladona por Mein em 1831; a cafena (alcalide) obtida por Runge em 1820 da Coffea arbica; o curare (relaxante muscular) isolado por Winstersteiner e Dutcher em 1943 do Chondrodendron tomentosum. Entretanto, o marco histrico no processo de desenvolvimento da indstria farmacutica mundial foi a descoberta da salicina (analgsico e antitrmico) por Rafaele Piria em 1829 a partir da planta Salix alba. A partir da salicina foi realizada a primeira modificao estrutural, originando o cido saliclico em 1839. A partir do cido saliclico, Felix Hoffman sintetizou a aspirina (cido acetil saliclico) em 1897, a primeira patente que se tem conhecimento na rea de medicamentos (CALIXTO & SIQUEIRA JNIOR, 2008). Paul Erlich, pesquisador alemo, Prmio Nobel de Medicina em 1908 (1854-1915), tornou-se grande marco na indstria farmacutica por realizar a primeira sntese metdica e intencional de compostos qumicos para combater a sfilis. Erlich, modificou substncias para o combate da sfilis, chegando ao salvasan e neosalvasan, medicamentos que se tornaram referncia no tratamento desta doena. Paul Erlich estabeleceu, tambm, o conceito acerca do mecanismo de ao dos medicamentos e as primeiras noes do que conhecemos hoje sobre a pesquisa clnica. A partir de suas descobertas, surgiu o conceito relativo aos receptores farmacolgicos. Nas primeiras dcadas do sculo XX, surgiram ainda, outras descobertas importantes como a sulfonamida e, mais tarde, a penicilina por Alexander Fleming em 1928, medicamentos que marcaram a histria da humanidade (PALMEIRA FILHO & PAN, 2003). Os princpios bsicos para a realizao de ensaios clnicos para novos medicamentos foram sugeridos por Ceiling e Cannon (1938), aps acidente ocorrido nos Estados Unidos, onde 76 pessoas morreram aps o uso de um tipo

5 de sulfonamida. Aps este acontecimento foi estabelecido o Cdigo de Nuremberg, vlido at hoje, cujo paradigma : toda pesquisa em seres humanos deve ter como principal preocupao o bem estar do sujeito da pesquisa. Este cdigo estabeleceu que antes de administrar ao ser humano qualquer novo frmaco, ele deveria apresentar: composio qumica, mtodo de preparao e grau de pureza estabelecidos; testes de toxicidade aguda e crnica por doses repetidas (segurana) em diferentes espcies animais; completa anlise patolgica em diversos rgos animais (especialmente rins e fgado); absoro, excreo e concentrao nos tecidos conhecidas; e se ocorre interao com outros medicamentos e alimentos (LIMA et al., 2003; CALIXTO & SIQUEIRA JNIOR, 2008). A partir da segunda guerra mundial, surgem as grandes corporaes farmacuticas em vrios pases da Europa e, sobretudo, nos Estados Unidos. A indstria farmacutica passa a utilizar os recursos da qumica sinttica para aumentar o arsenal teraputico. Uma forte e estreita interao entre as principais indstrias farmacuticas, as universidades de vrios pases e institutos de pesquisas da Europa e Estados Unidos passou a ser firmada, iniciando a partir da, o conceito moderno empregado para a P&D baseados na descoberta de alvos teraputicos, desenho e seleo da molcula lder para o alvo pretendido, otimizao da molcula lder, desenvolvimento do candidato a frmaco e, finalmente, descoberta do medicamento (PALMEIRA FILHO & PAN, 2003). O processo P&D de frmacos sofreu reestruturaes e mudanas quando comparado aos modelos empregados pelas indstrias farmacuticas nas dcadas de 50 at o final da dcada de 80. Neste perodo os programas de pesquisa compreendiam estratgias de modificao molecular e princpios de otimizao dos compostos-prottipo estabelecidos e empregados. Nas dcadas de 60 e 70 a produo do primeiro computador de acesso mltiplo, a criao do Protein Data Bank (PDB) e a aplicao de novas estratgias de modificao molecular levaram descoberta do primeiro agente anti-hipertensivo. O captopril (inibidor da enzima conversora de angiotensina - ECA) (Figura 1) foi desenvolvido por meio de estratgia baseada na estrutura (LIMA, 2007).

FIGURA 1. Estrutura qumica do captopril Fonte: LIMA (2007) Na dcada de 80, os avanos da biologia molecular contriburam para a compreenso dos aspectos bioqumicos associados a vrias fisiopatologias, favorecendo o fortalecimento da abordagem de planejamento racional de frmacos baseado no mecanismo de ao pretendido, mtodo consagrado pela descoberta da cimetidina (Figura 2). Avanos em sistemas computacionais para anlise do complexo receptor-ligante foram realizados e os conceitos de pontos e grupamentos farmacofricos foram consolidados (LIMA, 2007).

FIGURA 2. Estrutura qumica da cimetidina Fonte: LIMA (2007) Posteriormente as indstrias farmacuticas evoluram, beneficiando-se por tecnologias analticas e sintticas de caracterizao estrutural, introduo da qumica combinatria, da biologia molecular e cincias genmicas. Tornaram-se importantes o processo de obteno do alvo teraputico em relao ao compostoprottipo, o processo de rastreamento farmacolgico, as construes de colees

7 combinatrias (quimiotecas) e o mtodo de ensaio biolgico automatizado, que aumentaram a velocidade de preparao de novos compostos sintticos (LIMA, 2007). O marco do desenvolvimento da atual gerao de frmacos se deu por meio dos avanos da biologia molecular, das cincias genmicas e da aplicao da tecnologia do DNA recombinante, que utiliza novas tcnicas de engenharia gentica, gerando a descoberta dos chamados frmacos biotecnolgicos (PALMEIRA FILHO & PAN, 2003). Para realizar com sucesso todas essas etapas, as grandes indstrias farmacuticas mundiais vem firmando parcerias com as universidades. Para agilizar esse processo, a indstria passou a utilizar, alm dos recursos da qumica combinatria, os testes controlados por robs de alta capacidade, capazes de testar mais de um milho de amostras a cada ano. Esse fato, ao mesmo tempo em que reduziu, em parte, o tempo da descoberta de novos frmacos, fez com que os custos de desenvolvimento de um novo medicamento aumentassem expressivamente (DIMASI et al., 2003). Os dados do Grfico 1 mostram que, apesar dos custos crescentes para desenvolver um medicamento, a quantidade de novas entidades qumicas aprovadas mundialmente vem decrescendo marcadamente a cada ano, estabilizando em torno de 18 novos frmacos em 2005 e 2006. Para 2007, esse quadro no demonstrou sinais de alteraes. Tal fato fez com que os investimentos em P&D, por parte das grandes indstrias farmacuticas mundiais, passassem de cerca de dois bilhes de dlares na dcada de 1980, para mais de 40 bilhes de dlares atualmente. Isso explica, pelos menos em parte, o grande aumento dos preos observados para os medicamentos atuais (FRANTZ, 2005; OWENS, 2007).

FIGURA 3. Quantificao de novas molculas aprovadas pela Agncia Americana de Controle de Alimentos e Medicamentos (FDA) Fonte: CALIXTO & SIQUEIRA JNIOR (2008)

2.2 Agncias reguladoras Paralelamente a todas as inovaes descritas anteriormente, foi criado nos Estados Unidos em 1906, o Food and drug act (FDA), que mais tarde foi transformado na Agncia Americana para o Controle de Alimentos e Medicamentos. A partir 1951, o FDA passou a definir que alguns frmacos no atendiam a segurana necessria para uso humano, e estabeleceu que os medicamentos deveriam ser usados somente sob prescrio mdica. Em 1962 a FDA estabeleceu que antes do uso clnico ou da realizao de propaganda de um novo medicamento, o fabricante deveria provar, no somente a sua eficcia, mas principalmente a sua segurana. A partir dessa nova deciso da FDA, a maioria dos pases passou a adotar esses mesmos critrios e os medicamentos passaram por um rigoroso processo de anlise, antes da sua aprovao e posterior uso clnico. Na dcada de 1950 o dossi de registro de um medicamento continha, em mdia, 60 pginas; j nos anos 80 os dossis registravam, em mdia, 100.000 pginas e hoje atingem algo em torno de 300.000 pginas. Isto

9 o resultado de 12 a 15 anos de P&D, durante os quais os estudos relativos segurana se tornaram mais necessrios e exigidos (LIMA et al., 2003). Na Europa, a Agncia Europia de Medicamentos (EMEA) contribui para a proteo da sade pblica e animal, garantindo a segurana, eficcia e qualidade dos medicamentos. No Brasil, foi criada a Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria (ANVISA) pela Lei n 9.782, de 26 de janeiro de 1999. A finalidade institucional da ANVISA promover a proteo da sade da populao por intermdio do controle sanitrio da produo e da comercializao de produtos e servios submetidos vigilncia sanitria. Atualmente essas agncias so responsveis pelo monitoramento dos medicamentos presentes no mercado, at os dias de hoje a FDA utilizada como referncia. Elas possuem a autoridade de introduzir e/ou retirar um medicamento do mercado, buscando qualidade, eficcia e segurana (FERREIRA et al., 2009). Da mesma forma que foram regulamentados o processo P&D nos pases acima citados, as atividades de pesquisa envolvendo seres humanos seguem o que foi determinado como Boas Prticas Clnicas (GCP Good Clinical Practice), que tem a finalidade de consolidar e estabelecer inmeros acordos com a finalidade de garantir segurana e eficincia nas atividades de pesquisa. O estabelecimento de diretrizes para pesquisas clnicas no Brasil comeou na dcada de 1980 com a aprovao, em 1988, das Normas para Pesquisas em Sade, primeira resoluo do Conselho Nacional de Sade (CNS). Em 1996, as Diretrizes e Normas Regulamentadoras de Pesquisas Envolvendo Seres Humanos, por meio da Resoluo CNS 196/96 foram tambm propostas. A pesquisa com novos medicamentos foi considerada uma das oito reas especiais que mereceriam ateno especial da, ento criada, Comisso Nacional de tica em Pesquisa (CONEP). Essa foi a primeira rea a merecer normas especficas, estabelecidas na Resoluo CNS 251/97 (GOLDIM, 2007).

2.2.1 Resoluo CNS 251/97 A resoluo CNS 251/97 diz respeito rea temtica especfica de pesquisa com novos frmacos, vacinas e testes diagnsticos. Alm disso, a

10 resoluo dispe acerca do regulamento tcnico sobre a verificao de boas prticas de pesquisa clnica. Nesta resoluo so determinados que em qualquer ensaio clnico e particularmente nos conflitos de interesses envolvidos na pesquisa com novos produtos, a dignidade e o bem estar do sujeito includo na pesquisa devem prevalecer sobre outros interesses, sejam econmicos, da cincia ou da comunidade (CNS, 1997). Toda pesquisa na rea temtica de P&D deve estar alicerada em normas e conhecimentos cientificamente consagrados em experincias laboratoriais in vitro e conhecimento da literatura pertinente. necessrio que a investigao de novos produtos seja justificada e que os mesmos efetivamente acarretem avanos significativos em relao aos j existentes. So descritos termos e definies em relao P&D no que se refere s pesquisas com estes tipos de produtos em fase I, II, III e IV (CNS, 1997).

2.3 Processo de pesquisa e desenvolvimento de frmacos O processo de pesquisa e desenvolvimento de novos frmacos est intimamente relacionado qumica medicinal. Segundo a Unio Internacional de Qumica Pura e Aplicada (IUPAC) a qumica medicinal envolve a inveno, a descoberta, o planejamento, a identificao, a preparao e a interpretao do mecanismo de ao molecular de compostos biologicamente ativos aplicados ao processo P&D. Fica claro a importncia do estabelecimento de interfaces fundamentais entre as cincias qumicas, biolgicas, farmacuticas, mdicas, fsicas e computacionais (GUIDO et al., 2010). BERKOWITZ (2006) e GUIDO et al. (2010) descreveram simplificadamente o processo de P&D. A descoberta ou sntese de uma molcula com potencial ativo e a sua correlao com um alvo biolgico apropriado constitui o incio do processo. Por lei, a segurana e a eficcia dos frmacos devem ser definidas antes de sua comercializao. Em fase posterior, so realizados, alm dos estudos in vitro, os estudo in vivo, que caracterizaro os efeitos biolgicos da molcula em animais (testes pr-clnicos) antes que possam ser iniciados estudos

11 clnicos em seres humanos. Na Figura 4 so esquematizadas as fases do processo de P&D de frmacos.

FIGURA 4. Etapas envolvidas no processo P&D de frmacos (ADMEabsoro, distribuio, metabolismo e excreo) Fonte: Adaptado de GUIDO et al. (2010)

2.3.1 Descoberta de novos compostos-prottipos As molculas candidatas a frmacos so descobertas, em sua maioria, por meio de identificao e elucidao de um alvo para o composto; planejamento

12 racional do frmaco, com base no conhecimento dos mecanismos biolgicos, estrutura dos receptores e estrutura prpria; modificaes qumicas de uma molcula conhecida; triagem de grande nmero de produtos naturais procura de atividade biolgica (Figura 5), bancos de entidades qumicas previamente descobertas e grandes bancos de peptdios, cidos nuclicos e outras molculas orgnicas; e por meio de biotecnologia e clonagem utilizando genes para produzir peptdios e protenas maiores (BERKOWITZ, 2006).

FIGURA 5. Esquema demonstrando o processo de descoberta de novos frmacos a partir da triagem de produtos naturais com atividade biolgica Fonte: Adaptado de KOEHN & CARTER (2005) A qumica medicinal tem um papel muito importante nesta fase, pois, possvel explorar o espao qumico delineando o trabalho de identificao, seleo e otimizao de molculas capazes de interagir com alta afinidade e seletividade com o alvo molecular selecionado (por exemplo, enzima x receptor). Vrias estratgias podem ser empregadas para a investigao do espao qumico-biolgico, tais como: organizao de bases de dados, aplicao de filtros moleculares, emprego de triagens biolgicas automatizadas em alta escala (Hts -

13 High-throughput screening) e uso da triagem virtual (vs - virtual screening) (GUIDO et al., 2010). A maioria dos frmacos em uso clnico atualmente ou so de origem natural, ou so desenvolvidos por sntese qumica planejada a partir de produtos naturais. As plantas, fungos, insetos, organismos marinhos e bactrias constituem, ento, importantes fontes de substncias biologicamente ativas. As modificaes moleculares tambm so comumente empregadas em estruturas de produtos naturais (Figura 5), visando introduzir mudanas nas propriedades relacionadas s fases farmacodinmica e farmacocintica (BARREIRO & BOLZANI, 2009). O planejamento racional de frmacos se desenvolveu a partir do modelo chave-fechadura proposto por Emil Fischer, em 1885. Este modelo contribuiu para a concepo das teorias dos receptores e, consequentemente, para o surgimento da qumica medicinal e dos estudos a respeito do processo P&D (BARREIRO, 2009). A abordagem fisiolgica constitui uma estratgia importante no processo, por meio da prvia definio do mecanismo de interveno teraputica pretendida. Esses mecanismos vo servir de base para o planejamento racional ou desenho molecular de compostos-prottipo, candidatos a frmacos, como demonstrado na Figura 6. Esse processo se inicia pela correta escolha do alvo teraputico, etapa crucial do processo. O alvo teraputico inspirar, ento, a estratgia mais adequada ao desenho estrutural dos novos padres moleculares necessrios ao eficiente reconhecimento molecular pelo alvo teraputico eleito. Quando este alvo teraputico identificado torna-se importante a determinao da localizao celular, se membrnico, transmembrnico ou intracelular, e qual a interveno teraputica que se pretende utilizar, se inibio enzimtica, antagonista ou agonista de biorreceptores (BARREIRO & FRAGA, 2005; BARREIRO, 2009).

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FIGURA 6. Etapas hierrquicas do processo de descoberta/inveno de novo composto-prottipo de frmacos pelo emprego da abordagem fisiolgica Fonte: Adaptado de BARREIRO (2009) A escolha da estratgia de planejamento estrutural a ser adotada para o desenho molecular do ligante depender do nvel de conhecimento estrutural do alvo teraputico eleito. Quando a estrutura tridimensional do alvo eleito conhecida (aquela do stio de reconhecimento molecular) o planejamento molecular do ligante seletivo pode ser realizado pela qumica computacional. Por meio dela ser identificado e sintetizado o padro estrutural, este padro ser avaliado, ento, por meio de bioensaios in vitro que, se obtido sucesso, fornecer um ligante do biorreceptor (eleito como alvo teraputico). Quando disponvel em estado de pureza adequado, o novo ligante submetido ao processo de validao do conceito teraputico origem da eleio do alvo e identificao das propriedades farmacocinticas do ligante, candidato a composto-prottipo, realizando-se bioensaios farmacolgicos in vivo. Se ocorrer sucesso nesta etapa, o novo composto-prottipo descoberto, tornando-se candidato a frmaco que atuar no alvo eleito (BARREIRO & FRAGA, 2005). Alternativamente, quando a estrutura do alvo teraputico eleito no conhecida, o planejamento molecular do prottipo pode ser conduzido a partir da estrutura qumica de seu substrato natural, inspirando novos anlogos ativos, empregando-se estratgias de planejamento estrutural. Muitas estratgias se

15 destacam nesse momento, como bioisosterismo, a simplificao molecular e a hibridao molecular (BARREIRO, 2009). O bioisosterismo uma estratgia de modificao molecular de um composto-prottipo baseada na troca de determinados fragmentos moleculares, por exemplo, um grupamento funcional por outro que apresente propriedades fsico-qumicas semelhantes, como a acidez (Figura 7). Esta tcnica pode ser aplicada visando melhorias na fase farmacocintica (modulando as propriedades de absoro, distribuio, metabolismo e eliminao), ou farmacodinmica de ao de um composto bioativo. A motivao de seu emprego pode estar ainda, relacionada melhoria do perfil farmacodinmico de uma substncia identificada a partir de um rastreamento de colees de milhares de outras, visando transform-lo em um candidato a composto-prottipo mais promissor e atraente em termos teraputicos (BARREIRO & FRAGA, 2005).

FIGURA 7. Exemplo de bioisosterismo realizado por meio de isosterismo de anis e de grupos funcionais Fonte: BARREIRO & FRAGA (2008) Outra estratgia bastante utilizada a simplificao molecular e a hibridao molecular exemplificadas na Figura 8. Estas estratgias vm sendo amplamente utilizadas em prottipos derivados de produtos naturais na descoberta de inmeros frmacos de classes teraputicas distintas. Um planejamento de simplificao molecular pode ser efetuado para se eliminar

16 centros estereognicos ou promover a introduo de issteros funcionais (BARREIRO & BOLZANI, 2009).

FIGURA 8. Exemplo de simplificao e hibridao molecular a partir de duas estruturas diferentes Fonte: Adaptado de VIEGAS JNIOR et al. (2009)

2.3.2 Otimizao do composto-prottipo Uma vez descoberto o composto prottipo, a etapa seguinte na cadeia de P&D a sua otimizao. Nesta etapa sero identificadas as distintas contribuies farmacofricas de todas as subunidades estruturais, de maneira a nortear sua otimizao estrutural, visando potencializar sua estrutura. Est uma etapa obrigatria, com isso os compostos-prottipos inventados so sempre estruturalmente mais simples que os frmacos que originam. Ao atingir este estgio do processo da descoberta planejada de novos frmacos tem-se uma entidade molecular, o que significantemente relevante para a elaborao de pedidos de proteo intelectual desta descoberta (BARREIRO & FRAGA, 2005; BARREIRO, 2009).

17 2.3.3 Triagem dos compostos-prottipos Independentemente da origem ou da idia-chave que leva a uma molcula candidata a frmaco, e a estratgia utilizada para a sua descoberta e desenvolvimento, os testes efetuados envolvem uma sequncia de experimentos e caracterizao, denominada triagem de prottipos. So utilizados diversos ensaios biolgicos em nvel molecular, celular, orgnico e de animais integrais para definir a atividade e a seletividade do futuro candidato a frmaco. O tipo e o nmero de testes iniciais dependem do objetivo farmacolgico buscado. Em geral, a molcula tambm ser estudada procura de uma ampla variedade de outras aes, a fim de estabelecer o seu mecanismo de ao e seletividade. Isso tem a vantagem de demonstrar efeitos txicos inesperados e, em certas ocasies, revelar uma ao teraputica no prevista anteriormente (BARREIRO, 2002). No Quadro 1 so descritos alguns destes testes, levando em considerao o mtodo experimental escolhido, a espcie ou tecido utilizado para o teste, a via de administrao e como so medidos os resultados destes testes farmacolgicos.

18 QUADRO 1. Testes de perfil farmacolgico

Mtodo Experimental ou rgo-alvo Ligao a receptores (exemplo:receptores -adrenrgicos) Atividade enzimtica (exemplo: dopamina) Citocromo P450 Via de Administrao Molecular Fraes de membrana celular de rgo ou In vitro clulas em cultura; receptores clonados Nervos simpticos, glndulas In vitro suprarrenais; enzimas purificadas Espcie ou Tecido Fgado Celular Funo celular Clulas em cultura Vasos sanguneos, corao, pulmo, leo (rato ou cobaia) In vitro Evidncias de atividade dos receptores agonismo ou antagonismo Efeitos sobre a contrao e o relaxamento vasculares; seletividade para receptores vasculares; efeitos sobre outros msculos lisos Alteraes sistlicasdiastlicas Efeitos anti-hipertensivos Eletrocardiografia Efeitos inotrpicos, cronotrpicos, dbito cardaco, resistncia perifrica total Efeitos sobre a resposta a medicamentos conhecidos e estimulao eltrica de nervos autnomos centrais e perifricos Efeitos sobre a frequncia e amplitude respiratrias, tnus brnquico Natriurese, caliurese, diurese aquosa, fluxo sanguneo renal, taxa de filtrao glomerular Motilidade e secrees gastrintestinais Concentrao srica Tempo de coagulao, retrao do cogulo, tempo de protrombina Grau de sedao, relaxamento muscular, atividade locomotora, estimulao In vitro Medida

Afinidade pelo receptor e seletividade Inibio enzimtica e seletividade Inibio enzimtica; efeitos sobre o metabolismo

Tecido isolado

In vitro

Presso arterial

Sistema/modelos de doena Co, gato Parenteral (anestesiado) Rato hipertenso Oral (consciente) Co (consciente) Oral Co (anestesiado) Parenteral

Efeitos cardacos

Sistema nervoso autnomo perifrico

Co (anestesiado)

Parenteral

Efeitos respiratrios

Co, cobaia

Parenteral

Atividade diurtica Efeitos gastrointestinais Hormnios circulantes, colesterol, glicemia Coagulao sangunea Sistema nervoso central

Co Rato Rato, co Coelho

Oral, parenteral Oral Parenteral, oral Oral

Camundongo, rato

Parenteral, oral

Fonte: BERKOWITZ (2009)

19 2.3.4 Estudos pr-clnicos Os candidatos a frmacos que passam com sucesso pelos

procedimentos iniciais de triagem e estabelecimento do perfil farmacolgico devem ser cuidadosamente avaliados quanto aos riscos potenciais, antes e no decorrer dos testes clnicos (Figura 9). Esses riscos so monitorados por meio de testes pr-clnicos (BERKOWITZ, 2006).

FIGURA 9. Esquema do processo de desenvolvimento e testes necessrios para a utilizao e comercializao de um novo frmaco Fonte: Adaptado de BERKOWITZ (2006) Os estudos pr-clnicos tm como objetivo principal a avaliao farmacolgica em sistemas in vitro e em animais in vivo para a obteno do maior conhecimento possvel acerca das propriedades e dos efeitos adversos do frmaco em desenvolvimento. Ao mesmo tempo, a farmacocintica testada em animais. O composto submetido a testes de toxicidade a curto e longo prazo em animais, para que suas propriedades farmacolgicas possam ser definidas dentro de uma relao dose-resposta (FERREIRA et al., 2009).

20 Segundo GRAHAME-SMITH & ARONSON (2004) a durao do teste pr-clnico toxicolgico est relacionada com a provvel durao do uso teraputico. Neste estgio torna-se importante ainda, a avaliao dos efeitos do composto sobre a fertilidade e a reproduo, testes de teratogenicidade e testes para mutagenicidade e carcinogenicidade (Quadro 2). Tambm so realizados nesta fase testes relacionados com a estabilidade do novo composto, possibilidade de produo em larga escala, bem como estudos de formulao. QUADRO 2. Teste de segurana pr-clnica em animais
Segurana Toxidade aguda/imediata Toxidade de curto prazo Toxidade longo prazo Carcinogenicidade (tempo de vida da toxidade) Teratologia/anomalias congnitas Fertilidade Fertilidade e comportamento reprodutivo Perfil fisiolgico/farmacolgico Absoro, distribuio, metabolismo, eliminao (ADME) Modelo do teste Rato, camundongo, co Rato, camundongo, co, macaco Rato, camundongo, co, macaco Rato, camundongo Camundongo, rato, coelho Teste de mobilidade de esperma in vivo Rato, coelho Rato, camundongo, co Rato, camundongo, co, macaco Durao da dose 1-14 dias 30-90 dias 6-12 meses 24 meses dias meses (duas geraes) dias dias, meses dias, meses

Fonte: LIMA et al. (2003) De acordo com o artigo 52 as normas do Conselho Nacional de Sade (CNS), toda pesquisa em que o ser humano for submetido a estudo (ensaios clnicos), deve estar fundamentada na experimentao prvia realizada em animais, tornando-se indispensveis os estudos pr-clnicos. Para este rgo as exigncias da pesquisa pr-clnica so (CNS, 1988): 1. Os estudos devem ser planejados de maneira a obter o mximo de informaes, utilizando-se o menor nmero possvel de animais; 2. Todos os animais utilizados devem ser criados em biotrios que assegurem boa qualidade; 3. Os estudos pr-clnicos devem ser realizados em trs espcies de mamferos, sendo pelo menos uma no roedor;

21 4. Os animais devem pertencer a linhagens bem definidas, evitando-se cepas com caractersticas genticas especiais; 5. Deve-se utilizar igual nmero de machos e fmeas; 6. Para os estudos agudos deve-se utilizar pelo menos duas vias de administrao; 7. A investigao toxicolgica pr-clnica de um medicamento deve incluir estudos de toxicidade aguda, toxicidade de doses repetidas, toxicidade subcrnica e toxicidade crnica. Nos testes de toxicidade aguda o animal exposto a uma nica dose do medicamento ou a doses fracionadas, de tal forma que o perodo total de administrao no exceda 24 horas. Devem ser planejados de tal modo que seja possvel obter: a) Um ndice de letalidade (no necessariamente com alto nvel de presso estatstica); b) O modo pelo qual o medicamento induz agudamente a morte; c) Estabelecer uma relao quantitativa entre as doses administradas e os sinais de toxicidade, incluindo-se alteraes de peso corporal e consumo de alimentos, observaes comportamentais, bioqumicas (sangue e urina), hematolgicas e histopatolgicas; d) Todos os animais que morrem devem ser necropsiados e os demais devem ser submetidos a eutansia e necropsia at o final do perodo de observao; e) O perodo de observao ideal devem ser de 14 dias e nunca inferior a sete; f) Grupos controles devem ser realizados (animais injetados apenas com o veculo e animais no tratados) (CNS, 1988). Nos testes de toxicidade de doses repetidas o medicamento administrado a intervalos regulares, por um perodo mnimo de 14 dias. Deve-se utilizar trs nveis de doses espaadas geometricamente, sendo a menor correspondente maior dose que no produz efeitos detectveis aps uma nica administrao (CNS, 1988). Nos estudos de toxicidade subcrnica o medicamento administrado a intervalos regulares por um perodo mnimo de 30 dias e o protocolo de administrao das doses similar ao teste de toxidade de doses repetidas.

22 a) A avaliao deve ser a mais ampla possvel incluindo-se necessariamente observaes comportamentais, perfil bioqumico (sangue e urina), alteraes hematolgicas e histopatologia; b) Sempre que possvel a escolha da espcie para os estudos subcrnicos e crnicos deve levar em conta a semelhana farmacocintica com o ser humano; d) Se nos estudos crnicos o frmaco adicionado ao alimento ou a gua, devese assegurar sua estabilidade nestas condies; ajustando as concentraes no alimento ou na gua, de modo a manter as doses dirias administradas constantes em relao ao peso do animal (CNS, 1988). Nas avaliaes de toxicidade crnica o medicamento administrado a intervalos regulares, por um perodo mnimo de 90 dias, seguindo os mesmos critrios da toxicidade subcrnica. A durao dos estudos pr-clnicos de cada medicamento est relacionada ao tempo previsto para o seu uso teraputico (CNS, 1988). Alm dos estudos relacionados toxicidade, importante efetuar vrias estimativas quantitativas. Essas estimativas incluem a dose sem efeito a dose mxima em que no se observa um efeito txico especfico; a dose letal mnima menor dose observada que mata qualquer animal e a dose letal mediana a dose que mata cerca de 50% dos animais. Essas doses so utilizadas para calcular a dose inicial a ser administrada experimentalmente a seres humanos, tomada geralmente de um centsimo a um dcimo da dose sem efeito em animais. Em geral, necessrio realizar estudos integrais em animais para estabelecer o efeito do frmaco sobre os sistemas de rgos e modelos de doena (BERKOWITZ, 2006). Nos ensaios pr-clnicos avalia-se tanto a toxicidade dos candidatos frmacos, como a cintica destes no organismo dos animais. Esses estudos so realizados por meio da administrao de doses do prottipo a frmaco e posterior monitorao destes no organismo do animal, por meio de coletas programadas de sangue e urina, para determinao de concentraes plasmticas do frmaco e metablitos gerados e eliminados pela urina. O material coletado , ento, avaliado por mtodos analticos, como radioimunoensaio e tipos relacionados de ensaio de saturao, diversas tcnicas de separao envolvendo cromatografia e/ou espectrometria de massa, associadas a sistemas detectores de alta

23 sensibilidade para a determinao quantitativa dos componentes separados, alm de tcnicas fotomtricas e fluorimtricas (RANG et al., 1997).

2.3.5 Estudos clnicos Os estudos clnicos correspondem pesquisa conduzida em pacientes, ou em voluntrios sadios, usualmente, destinada a avaliar um novo tratamento (LIMA et al., 2003). A resoluo 01/88, do CNS (1988) regulamenta que a pesquisa de medicamentos em farmacologia clnica compreende a sequncia de estudos realizados, desde quando se administra a substncia pela primeira vez ao ser humano, at quando se obtm dados sobre sua eficcia e segurana teraputica em grandes grupos de populao. Os estudos clnicos so divididos em quatro fases distintas. a) Fase I Segundo FERREIRA et al. (2009) o objetivo principal da fase I da pesquisa clnica avaliar a tolerncia em seres humanos e determinar a posologia segura. Nesta fase utilizam-se frmacos qumicos ou biolgicos novos, pela primeira vez administrados a seres humanos hgidos. A fase I inicia-se com a administrao de uma pequena dose de um agente experimental administrado a poucos voluntrios, trs ou mais indivduos, podendo chegar at 80. O objetivo o estabelecimento de parmetros farmacocinticos, de dose nica e/ou mltiplos e, em especial, a biodisponibilidade absoluta da forma farmacutica, de modo a estabelecer a dose e regime posolgico. Simultaneamente, uma avaliao da segurana da substncia feita (LIMA et al., 2003; BRICK et al., 2008). Nestes estudos, os voluntrios so monitorados por 24 horas, j que se busca avaliar os efeitos das primeiras doses (estabelecer a faixa de dose tolerada, de nica a mltiplas doses, ou seja, dose segura e posologia). Estes estudos podem eventualmente ser conduzidos em pacientes gravemente enfermos, em circunstncias nas quais a toxicidade elevada torna-se aceitvel

24 (pacientes com cncer, por exemplo), ou mesmo em pacientes com doenas como epilepsia quando se quer averiguar aspectos farmacocinticos (interao medicamentosa com enzimas microssomais, por exemplo). Nesses ltimos casos, a eficcia tambm pode ser avaliada (LIMA et al., 2003). b) Fase II A fase II visa estudar a eficincia teraputica, intervalo de dose, cintica e metabolismo. Um pequeno nmero de indivduos com ateno especfica selecionado (BRICK et al., 2008). As doses estabelecidas nos estudos Fase I so utilizadas para orientar justificativas dos protocolos dos estudos de Fase II, nos quais avalia-se a eficcia do medicamento em ensaios piloto, bem como a segurana e a eficcia. Esses estudos podem envolver de 100 a 300 pacientes (ou mais), subdivididos em IIa e IIb (FERREIRA et al., 2009). O estudo IIa caracteriza-se por ser realizado em populao selecionada de pacientes, e tem por objetivo avaliar vrios aspectos de segurana e eficcia (curva dose-resposta, tipo de paciente, frequncia da dose, etc). Os estudos IIb avaliam a eficcia e a segurana do medicamento em teste nos pacientes com a doena a ser tratada, diagnosticada ou prevenida. Em geral, correspondem a uma demonstrao de eficcia sob condies experimentais mais rigorosas, envolvendo um grupo controle comparativo. Mesmo nesta fase, outros dados experimentais de estudos em animais podem ser agregados e tambm so levados em considerao, com vistas a modificaes no curso dos estudos clnicos (LIMA et al., 2003). c) Fase III A fase III destina-se a testar a eficcia e segurana por meio de um grande nmero de amostras (BRICK et al., 2008). Os estudos de Fase III, tambm denominados de estudos de eficcia comparativa, consistem do aumento da amostragem e diversificao da gama de pessoas nos testes. Nesta fase so includos tratamentos mais prolongados com o composto, cerca de seis a 12

25 meses, visando a flexibilidade na dosagem, bem como a coleta de dados sobre a segurana e eficcia do mesmo (PIMENTEL et al., 2006). O medicamento em estudo administrado a uma populao de pacientes muito prxima daquela a que se destina aps a sua comercializao. Aqui, usada a expresso muito prxima certamente porque esses estudos so controlados, impem critrios de incluso e excluso que, muitas vezes, no correspondem realidade da prtica mdica; usam grupos-controle que tm placebo como agente comparativo e podem impor que os pacientes faam uso da terapia padro. Como geralmente esses estudos so multicntricos internacionais, a terapia padro refere-se ao que h de mais atual, com base nas diretrizes estabelecidas pelas sociedades mdicas internacionais, e isto pode alterar os parmetros comparativos da relao benefcio/risco ao se tentar extrapolar os resultados obtidos no estudo para a prtica clnica diria. Por outro lado, por serem estudos multicntricos internacionais, comportam um corte de pacientes o mais heterogneo possvel, o que torna seus resultados e suas concluses mais aceitveis e aplicveis. A populao de pacientes includa nestes estudos chega, em alguns casos, a dez ou vinte mil indivduos (LIMA et al., 2003). d) Fase IV A fase IV, assim como a fase III, destina-se a testar a eficcia e segurana por meio de um grande nmero de amostras (BRICK et al., 2008). Depois de comercializado, o medicamento continua a ser estudado. Esses estudos tambm so chamados de Farmacovigilncia e tm por objetivo obter mais informaes sobre os seus efeitos, suas interaes medicamentosas e, sobretudo, ampliar as avaliaes de segurana realizadas por intermdio dos estudos farmacoepidemiolgicos (LIMA et al., 2003). Quando um novo medicamento introduzido no mercado, os dados de eficcia e segurana so comumente baseados na experincia de vrios milhares de pacientes que foram includos nos estudos clnicos de pr-aprovao. Mesmo com um plano muito rigoroso de desenvolvimento, alguns eventos adversos podem no ser detectados neste perodo, assim como interaes

26 medicamentosas ou condies clnicas pr-existentes, que podem no ser bem avaliadas antes do produto estar de fato no mercado. Na verdade, esta a clssica crtica feita aos estudos clnicos, uma vez que eles no conseguem refletir o mundo real, coisa que s a prtica clnica, aps o lanamento, ter a capacida de fazer (DAINESI, 2005). A fase IV de responsabilidade do rgo regulamentador (PIMENTEL et al., 2006) e o estudo do uso do frmaco na prtica mdica. Esta vigilncia aps a comercializao, que ocorre aps a aprovao da ANVISA, necessria para fornecer feedback do uso em grande escala do frmaco. Nessa fase, podem ser descobertos novos efeitos teraputicos ou txicos, incluindo efeitos a longo prazo ou raros que no eram discernveis em pequeno grupo de indivduos (SEVALHO, 2001). FERREIRA et al., 2009 refere-se aos estudos de farmacovigilncia (vigilncia ps-comercializao) como sinnimos do processo de deteco, acompanhamento e controle de problemas decorrentes do uso j autorizado de medicamentos. A importncia da farmacovigilncia pode ser exemplificada pelos inmeros frmacos que foram introduzidos na teraputica e, posteriormente, por razes de toxicidade foram retirados.

2.3.6 Os estudos clnicos multicntricos Os estudos multicntricos so aqueles em que o estudo clnico realizado em populaes de mais de um pas. Os estudos multicntricos nacionais e, principalmente, internacionais so elaborados contemplando-se o que h de mais atual sobre a doena em questo e incorporam os mtodos e tecnologias exigidas. Estas exigncias so feitas pelas agncias reguladoras e comits de tica (com maior diversidade tnica e cultural), alm dos centros de excelncia e comits independentes de anlise de segurana ou de comprovao de eventos. Assim sendo, os protocolos aprovados e a execuo do estudo se refletem em um controle mais eficiente, exigente e diversificado dos estudos clnicos (CALIFF et al., 2003).

27 A pesquisa clnica avana cada vez mais no sentido de necessitar da cooperao entre inmeros centros de vrios pases. Com a participao dos pases do Leste Europeu, houve um aumento exponencial do nmero de pacientes includos nos estudos multicntricos internacionais. A Amrica Latina caminha tambm aceleradamente para a sua incluso definitiva. Alm do Brasil, a Argentina, o Mxico e o Chile tm contribudo para esta evoluo (LIMA et al., 2003).

2.4 Aspectos ticos Segundo LIMA et al. (2003) a tica em pesquisa clnica compreende princpios que fundamentam a sua execuo. A observao dos princpios ticos implica avaliar, entre outros aspectos, os seguintes referenciais fundamentais para pesquisa envolvendo seres humanos: a) O Respeito Autonomia: abrange os direitos de liberdade, privacidade, escolha individual, liberdade da vontade, ser o motor do prprio comportamento e pertencer a si mesmo. Exemplos tpicos incluem dizer a verdade, respeitar a privacidade dos outros, proteger informaes confidenciais, obter consentimento para intervenes nos pacientes, ajudar os outros a tomar decises importantes (quando solicitado); b) No-maleficincia: obrigao de no infligir dano intencionalmente. Est intimamente ligado com a mxima primum non nocere acima de tudo (ou antes de tudo) no causar danos. Trata-se da garantia de que danos previsveis sero evitados; c) Beneficncia: contribuir para o bem estar dos indivduos. Alm da compaixo, bondade, caridade, altrusmo, amor, humanidade, o princpio da beneficncia, em pesquisa, deve ser visto de modo que inclua todas as formas de ao que tenham o propsito de beneficiar. Deve-se proceder a uma ponderao entre riscos e benefcios, tanto atuais como potenciais, individuais ou coletivos, buscando o mximo de benefcios e o mnimo de danos e riscos; d) Justia - engloba equidade, merecimento (o que merecido) e prerrogativa (aquilo a que algum tem direito). Desse modo, o princpio da justia implica um

28 tratamento justo, eqitativo e apropriado, levando-se em considerao aquilo que devido s pessoas. Segundo esse princpio, uma pesquisa deve ter relevncia social com vantagens significativas para os sujeitos da pesquisa e minimizaro do nus para os sujeitos vulnerveis, garantindo a igual considerao dos interesses envolvidos, no perdendo o sentido de sua destinao socio-humanitria (CASTILHO & KALIL, 2005).

29 3 CONSIDERAES FINAIS O processo de pesquisa e desenvolvimento de novos frmacos considerado umas das oito reas que merecem ateno especial dos rgos que o regulam, isso confirma a sua importncia como mtodo para que novos medicamentos sejam inseridos no mercado de maneira a aumentar a possibilidade de tratamento e cura para diversas doenas. Com o avano da pesquisa genmica e protemica, e com o ganho de conhecimento cientfico nesta rea, o processo de P&D de uma nova molcula ir se tornar cada dia mais eficiente. Alm disso, os medicamentos podero ser desenhados especialmente para um determinado grupo de pacientes com marcadores genticos de risco para diversas doenas. Os ensaios pr-clnicos, tanto para avaliao de toxicidade, quanto para determinao farmacocintica, so etapas indispensveis na avaliao de todos os candidatos a frmacos, pois a partir desses estudos determinam-se os processos de absoro, distribuio, biotransformao e excreo do futuro frmaco e, consequentemente, a viabilidade e os efeitos colaterais de sua utilizao. A funo primordial da pesquisa clnica a de contribuir para o conhecimento geral e, se apropriadamente desenhada e executada, a maneira eticamente mais apropriada para se obter conhecimento, testar e renovar conceitos ou contestar teorias e tratamentos em uso. Os benefcios resultantes da pesquisa clnica so extensivos a todas as pessoas.

30 REFERNCIAS 1 BARBERATO FILHO, S. Pesquisa e desenvolvimento de frmacos no Brasil: estratgias de fomento. 2006. 192f. Tese (Doutorado em Cincias Farmacuticas) Faculdade de Cincias Farmacuticas, Universidade de So Paulo, So Paulo. 2 BARREIRO, E. J. Produtos naturais bioativos de origem vegetal e o desenvolvimento de frmacos. Revista Qumica Nova. Rio de Janeiro, v.13, n.1, p.29-39, 1990. 3 BARREIRO, E. J. Estratgia de simplificao molecular no planejamento racional de frmacos: a descoberta de novo agente cardioativo. Revista Qumica Nova. Rio de Janeiro, v.25, n. 6B, p.1172-1188, 2002. 4 BARREIRO, E. J. A qumica medicinal e o paradigma do composto-prottipo. Revista Virtual de Qumica. Rio de Janeiro, v.1, n.1, p.26-34, 2009. 5 BARREIRO, E. J; BOLZANI, V. S. Biodiversidade: fonte potencial para a descoberta de frmacos. Revista Qumica Nova. Rio de Janeiro, v.32, n.3, p.679688, 2009. 6 BARREIRO, E. J.; FRAGA, C. A. M. A questo da inovao em frmacos no Brasil: proposta de criao do programa nacional de frmacos (PORNFAR). Revista Qumica Nova. Rio de Janeiro, v.28, suplemento S56-S63, 2005. 7 BERKOWITZ, B.A. Avaliao Bsica e Clnica de Novas Drogas. In: KATZUNG, B.G. Farmacologia Bsica & Clnica. 9.ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2006. cap.5, p.53-61. 8 BRICK, V. S.; HOSSNE, W. S.; HOSSNE, R. S. Clinical research on new drugs (Phase I). Profile of scientific publications: data from the pre-clinical phase and

31 bioethical aspects. Acta Cirrgica Brasileira. So Paulo, v.23, n.6, p.531-535, 2008. 9 CALIFF, R. M.; MORSE, M. A.; WITTES, J. Toward protecting the safety of participants in clinical trials. Controlled Clinical Trials. London, v.24, n.1, p.256271, 2003. 10 CALIXTO, J. B.; SIQUEIRA JNIOR, J. M. Desenvolvimento de medicamentos no Brasil: desafios. Gazeta Mdica da Bahia. Bahia, v.78, suplemento 1, p.98106, 2008. 11 CASTILHO, E. A.; KALIL, J. tica e pesquisa mdica: princpios, diretrizes e regulamentaes. Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical. Uberaba, v.38, n.4, p.334-347, 2005. 12 CONSELHO NACIONAL DE SADE (CNS). BRASIL. Resoluo n 251, de 07 de agosto de 1997. Estabelece as normas de pesquisa em sade. Dirio Oficial da Unio, Braslia, DF, 07 ago. 1997, p.10713-10718. 13 CONSELHO NACIONAL DE SADE (CNS). BRASIL. Resoluo n 01, de 13 de junho de 1988. Estabelece as Normas de Pesquisa em Sade. Dirio Oficial da Unio, Braslia, DF, 13 jun. 1988. Disponvel em: http://www.bioetica.ufrgs.br/r01-88.htm. Acesso em: 12 set. 2012. 14 DIMASI, J. A.; HANSEN, R. W.; GRABOWSKI, H. G. The price of innovation: new estimates of drug development costs. Journal of Health Economics. New York, v.22, n.1, p.151-185, 2003. 15 DAINESI, S. M. Pharmacovigilance: more than ever, an overall responsibility. Revista Clinics. So Paulo, v.60, n.4, p.267-270, 2005.

32 16 FERREIRA, F. G.; POLLI, M. C.; OSHIMA FRANCO, Y.; FRACETO, L. F. Frmacos: do desenvolvimento retirada do mercado. Revista Eletrnica de Farmcia. Gois, v.6, n.1, p.14-24, 2009. 17 FRANTZ, S. 2004 approvals: the demise of the blockbuster? Nature Reviews Drug Discovery. London, v.4, n.1, p.93-94, 2005. 18 GRAHAME SMITH, D. G.; ARONSON, J. K. Tratado de Farmacologia Clnica e Farmacoterapia. 3.ed. Rio de Janeiro: Nova Guanabara , 2004. 83p. 19 GOLDIM, J. R. A avaliao tica da investigao cientfica de novas

drogas: a importncia da caracterizao adequada das fases da pesquisa. Revista Hospital das Clnicas de Porto Alegre. Porto Alegre, v.27, n.1, p.66-73, 2007. 20 GUIDO, R. V. C.; ANDRICOPULO, A. D.; OLIVA, G. Planejamento de frmacos, biotecnologia e qumica medicinal: aplicaes em doenas infecciosas. Revista Estudos Avanados. So Paulo, v.24, n.70, p.81-98, 2010. 21 LIMA, L. M. Qumica medicinal moderna: desafios e contribuio brasileira. Revista Qumica Nova. Rio de Janeiro, v.30, n.6, p.1456-1468, 2007. 22 LIMA, J. S.; REZA, D. L.; TEIXEIRA, S.; COSTA, C. Pesquisa clnica: fundamentos, aspectos ticos e perspectivas. Revista da Sociedade de Cardiologia do Estado do Rio de Janeiro. Rio de Janeiro, v.16, n.4, p.225-233, 2003. 23 LOMBARDINO, J. G.; LOWE, J. A. The role of the medicinal chemist in drug Discovery then and now. Nature Reviews Drug Discovery. London, v.3, n.10, p.853-862, 2004. 24 KOEHN, F. E.; CARTER, G. T. The evolving role of natural products in drug discovery. Nature Reviews Drug Discovery. London, v.4, n.1, p.206-220, 2005.

33

25 OWENS, J. 2006 drug approvals: finding the niche. Nature Reviews Drug Discovery. London, v.6, n.1, p.99-101, 2007. 26 PALMEIRA FILHO, P. L.; PAN, S. S. K. Cadeia farmacutica no Brasil: avaliao preliminar e perspectivas. BNDES Setorial. Rio de Janeiro, v.1, n.18, p.3-22, 2003. 27 PIMENTEL, L. C. F.; CHAVES, C. R.; FREIRE, L. A. A.; AFONSO, J. C. O inacreditvel emprego de produtos naturais qumicos perigosos no passado. Revista Qumica Nova. Rio de Janeiro, v.29, n.5, p.1138-1149, 2006. 28 RANG, I. L. P.; DALE, M. M.; RITTER, J. M. Farmacologia. 3.ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 1997, 692p. 29 SEVALHO, G. Farmacovigilncia: Bases histricas, conceituais e operacionais. In: GOMES, M. J. V. M.; REIS, A. M. M. Cincias Farmacuticas: Uma abordagem em farmcia hospitalar. 1.ed. So Paulo: Atheneu, 2001, p.109. 30 VIEGAS JR, C.; NICASTRO, P. C.; FOSSALUZZA, P. C.; GOMES, C. P. G.; SANTOS, L. A.; BOLZANI, V. S.; PIVATTO, M.; SILVA, D. J. C.; MELO, G. M. A.; SILVA, Y. K. C.; MOREIRA, M. A.; COSTA, R. S.; AREAS, T. F. M. A.; CASTRO, N. G. Modificaes estruturais na (-)cassina e LaSSBio-767: estratgias para a descoberta e otimizao de novos candidatos a frmacos. Revista Virtual Qumica. Rio de Janeiro, v.1, n.2, p.117-127, 2009.