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REVISTA

CLINICA

ESPAOLA

28 febrero 194S

herige Prparierung fr die Karenzditen gebraucht werden kann. Das durch Extraktion von fettloslichen Vitaminen freie Casein enthalt noch kleine Thiaminmengen, die mittels Verschwefelung zerstrt werden knnen. Die Grundnahrung setzt sich aus Casein, Sago, Hefe, Salzen und Lebertran zusammen. Wenn Hefe und Casein verschwefelt wurden, so fhrt diese Dit zu einer akuten, symptomarmen Mangelkrankheit, die in drei Wochen zum Tode fhrt. Wenn nur die Hefe verschwefelt wird, so kommt es zu einer subakuten Mangelkrankheit mit einem heftigen polyneurtischen Syndrom, und der T o d stellt sich nach 5-6 Wochen ein. Die Zerstorung des Thiamins in den Nahrungsstoffen ist ein spezifischer Vorgang; es handelt sich um ein neues Prinzip zur biologischen Auswertung dieses Vitamins, das besonders wertvoll ist bei thiaminarmen NahrungsstofFen. RSUM La sulfuration permet de dtruire la thiamine dans les aliments d une fagon comode et remarquablement sective. Ces aliments peuvent servir avec avantage pour la production de l'athiaminose chez le rat. La levre de boulanger sulfure reprsente une source de "complexe B , " suprieure la levre autoclave, car dj dans la proportion de 8 pour cent elle fournit au rat, l'exception de la thiamine, toutes les vitamines hydrosolubles dont il a besoin. Le tapioca est un glucide exempt de thiamine qui peut tre employ sans purifiction dans la prparation des dites carences. La cseine, prive, par extraction, des vitamines liposolubles, contient des petites quantits de thiamine, qu'on peut dtruire par sulfuration. La dite base se compose de casine, tapioca, levre, seis et huile de foie de morue. S la levre et la casine sont sulfures, la dite amne une carence aige, pauvre en symptomes, mortelle en trois semaines. Si seule la levre est sulfure on obtient une carence subaige avec un violen t syndrome polyneuritique et mort au bout de 5 6 semaines. La destruction de la thiamine dans. les aliments tant due un processus spcifique, ceci permet d'introduire un nouveau principe pour le dosage biologique de cette vitamine, qui est particulirement utile dans le cas d'aliments pauvres en thiamine.

a'lmortas no manifiestan ningn, sntoma de carencia especfica, pero muestran un retardo de crecimiento notable, el cual puede evitarse si a la dieta se aade una albmina de fcil utilizacin, aunque sea de escaso valor biolgico, como es la gelatina; este mismo efecto se obtiene cuando a la almorta se la suplementa con un extracto de hgado no autoclavado, y no, si ste ha sido sometido a la accin del calor. El referido hecho demuestra que si el crecimiento se retarda en la dieta 'de almorta ello es debido no a un escaso valor de sus albminas para promover el crecimiento, sino a una mala utilizacin de ellas; si se tratara de lo primero sera necesario aadir determinados aminocidos o una albmina valiosa como la casena, y no se remediara con gelatina, y adems, no se dara el hecho constantemente observado de que si bien el crecimiento es defectuoso al final de la duodcima semana, en cambio a la larga se va equilibrando de tal modo que dos meses ms tarde los animales son del mismo tamao que los normales; esto ltimo se explica en la rbita de la hiptesis de una mala utilizacin de las albminas de la almorta, por una habituacin que permite que ulteriormente sean bien absorbidas. La adicin del hgado no puede deber su efecto beneficioso a las protenas que contiene, ya que son en tan pequea cantidad y adems desapareciendo este efecto cuando el hgado es calentado; es por esto por lo que hemos supuesto entonces que en el extracto heptico ira una substancia termolbil que interviniera en la absorcin intestinal. Este supuesto nos ha parecido que necesitaba una comprobacin directa, y a este fin han ido encaminadas las experiencias que hoy referimos, efectuadas en perros sometidos a dietas de almortas con y sin adicin de extracto heptico, cuya absorcin ha sido estudiada por la determinacin del nitrgeno en las heces en experiencia prolongada.
Tcnica. Los animales utilizados fueron perros hermanos y de un tamao aproximadamente igual; sus pesos fueron 1.980, 2.150, 2.500 y 2.030 gramos, respectivamente; la edad era de tres meses. Los animales fueron puestos en jaulas metablicas individuales para poder llevar diariamente nota de la cantidad de dieta tomada y poder tomar las heces y la orina separadamente, Como nuestro objeto no era hacer un balance total del N ^ sino una medida de la absorcin, prescindimos de las determinaciones en la orina y nos limitamos a las de las heces. stas eran recogidas, pesadas y hechas las determinaciones del nitrgeno por el micromtodo de Kjeldahl. La dieta puramente de almortas la rechazan los animales, llegando a colocarse en situacin de marcada inanicin; adems se ponen muy estreidos y se les produce intenso meteorismo intestinal, como ocurre en las ratas. Por esto hemos empezado por una dieta que tena mezclada a la harina de almortas un 10 por 100 de. sal vado, todo ello amasado en agua; pasados 2 5 - 3 0 das de esa dieta y habituado ya el animal a ella, suprimamos el salvado y quedaba puramente de almortas y agua; en esta forma la tomaban muy bien y no les produca ningn trastorno del vientre. En los 4 perros se hizo primeramente la dieta de almortas con salvado durante 2 5 - 3 0 das y a continuacin 10 das de dieta de almortas pura con estudio diario de la deposicin. Dos de ellos recibieron una adicin de 20 c. c. del extracto de hgado; a los otro dos no se les di, quedando como patrn de comparacin.

E S T U D I O S SOBRE EL L A T I R I S M O
Vil Comunicacin

Influencia del factor heptico sobre la absorcin de ta albmina de la almorta C. JIMNEZ DAZ y J. M. ROMEO
(Instituto de Investigaciones Mdicas. Director: PROF. C. JIMNEZ DAZ)

En una comunicacin anterior de este Instituto 1 hemos hecho constar el siguiente fenmeno: las ratas alimentadas con una dieta exclusivamente de

EXPERIENCIAS EN LOS DOS PERROS PATRN (sin extracto de hgado). En los cuadros I y II ponemos respectivamente los resultados obtenidos en los dos perrosi patrn (perros V I I y I X ) .

Tono v i n
NMERO 4

ESTUDIOS SOBRJE EL LATIRISMO

CUADRO I. Perro VII Heces (patrn)

16

Da

Cant. tot. gramos

N. o/o gramos

N. tot. dia gramos

Observaciones

28-V . 29 . 30 . 1-VI . 2 . 4 5 . 8 . 9 . 10 . 11 . 12 . 15 . 16 . 17 . 18 . 19 . 22 . 23 . 24 . 25 . 26 . 1-VII. 2 3 . 10 11 . 12 . 13 . 14 15 . 16 . 17 . 18 . 19 .

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

29,66 10,600 18,75 16,00 36,80 11,00 15,60 35,00 17,60 34,00 26,00 64,60 73,600 121,00 85,00 69,00 73,00 28,00 29,20 38,50 48,60 48,00 35,50 39,00 23,00 20,00 24,00 40,00 22,00 19,00 25,00 33,00 13,00 34,00 24,00

1.489 1.419 2.670 3.805 3.114 3.615 4.419 2.291 4.737 2.411 1.266 1.792 1.584 1.619 1.962 1.021 1.930 0.985 1.172 1.363 0.900 0.854 0.591 2.277 1.571 0.611 2.077 1.549 1.065 1.524 1.106 1.637 1.148 2.160 1.550

0.442 0.150 0.501 0.609 1.146 0.398 0.689 0.802 0.834 0.820 0.329 1.158 1.166 1.949 1.643 0.706 1.409 0.275 0.342 0.525 0.437 0.410 0.210 0.888 0.361 0.122 0.498 0.620 0.234 0.289 0.276 0.540 0.149 0.734 0.372

Dieta de almortas con 1 0 por 1 0 0 de salvado.

ba mejor de ello es que en el perro V I I la media de eliminacin total de nitrgeno fecal en las 24 horas result ser de 0,720 gramos, y en el perro I X de 0,779 dos cifras, como se ve, prcticamente iguales. Cuando se suprime el salvado a la dieta el contenido en nitrgeno disminuye, lo cual corresponde a una mejor utilizacin de las albminas (V. NOORDEN), y al menor residuo de la dieta, cuya influencia ha sido ya sealada por MLTTCHELL. Los valores en los dos perros han sido de 0,363 y de 0,521.
CUADRO II. Perro IX (patrn)

Heces Da Cant. t o t gramos N.o/o gramos N. tot. dia gramos Observaciones

Almortas solas.

Hay unas variaciones de uno a otro da, tanto en la primera como en la segunda serie, manifiestas, las cuales 'corresponden ms bien que a concentracin de nitrgeno a cantidad de deposicin eliminada en el da; no obstante, hay tambin cambio en la concentracin de nitrgeno, que corresponde principalmente a variaciones en el contenido en agua. Algunos das se observan eliminaciones mayores de heces, en peso, en l da y simultneamente un aumento de su contenido en nitrgeno, lo cual coincide con heces blandas, diarreicas y traduce el aumento* de lquido segregado por la pared intestinal, que segn se sabe contiene albmina disuelta. Estos factores de variacin (secrecin de agua por la pared intestinal, cantidad de bacterias, cantidad de heces eliminadas) hacen que solamente sean vlidas experiencias muy largas y los valores medios obtenidos; 1 factor contenido en agua de la deposicin se anula desde el momento en que recogindose las heces totalmente se utilizan las cifras de cantidad total de nitrgeno eliminado en el da. Es cierto que como la dieta no les era muy grata, y sobre todo al principio, pasaban evidentemente hambre, se observ alguna vez coprofagia. Como se ha tratado de experiencias largas, los valores nos parecen absolutamente seguros y la prue-

28-V . 29 . 31 . 1-VI . 2 . 3 . 5 . 8 . 9 . 10 . 11 . 12 . 15 . 16 . 17 . 18 . 19 22 23 . 24 . 25 . 26 . 1-VII. 2 . 3 . 10 . 11 . 12 . 13 . 14 . 15 16 . 17 . 18 . 19 .

1.746 . 52,86 . 44.200 0.978 4.189 . 29,80 2.438 . 33,80 3.872 . 16,70 3.254 . 18,00 2.761 . 20,00 2.721 . 35,00 . 33,00 3.230 1.481 . 55,00 1.594 . 46,20 . 31,00 1.235 1.769 . 94,00 . 79,00 1.484 0.807 . 114,00 . 42,60 1.428 1.271 75,00 74,00 1.303 0.978 . 21,00 . 69,00 0.925 . 64,50 1.516 . 72,20 1.050 . 70,00 0.914 1.051 . 49,00 . 47,00 1.288 . 52,00 0.722 1.024 . 79,00 . 53,00 0.800 . 64,00 1.086 1.107 . 41,00 0.559 12,80 . 83,00 1.946 . 16,00 1.561 . 22,00 1.043 0.452 . 66,00

0.923 0.433 1.248 0.824 0.647 0.586 0.552 0.952 1.066 0.815 0.736 0.383 1.663 1.172 0.920 0.608 0.953 0.964 0.205 0.638 0.978 0.758 0.640 0.515 0.605 0.375 0.809 0.424 0.695 0.454 0.072 1.613 0.250 0.229 0.298

Dieta de almortas y salvado.

Dieta solamente de almortas.

Coprofagia?

Este resultado indica que las a'lmortas son bastante bien utilizadas en el intestino del perro; calculando la cantidad media de dieta ingerida (en la fase solamente almortas) como 75 gramos, resultara en el peor de los casos, es| decir, aunque todo el nitrgeno fecal se considerara como procedente del alimento (=0,422 grs. N , medio de las dos experiencias, o sea, 2,762 grs. de protenas), una utilizacin de 86 por ioo, valor alto y superior al que era de esperar para una protena vegetal. A continuacin ponemos en los cuadros III y I V las experiencias con adicin del extracto heptico. Basta echar una ojeada a los cuadros y comparar los datos obtenidos con los que constan en los dos cuadros anteriores para darse cuenta de que el grado

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X (almortas y

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de utilizacin de las protenas de la almorta es el mismo en las experiencias sin adicin del extracto heptico que con ella. T o d a v a se ve mejor a? obtener los valores medios y compararlos como se hace en el cuadro V . Podemos resumir, en consecuencia, que las albminas de la almorta son muy bien utilizadas en el intestino del perro, y que la adicin del mismo extracto heptico que en las citadas experiencias en las ratas obviaban el menor' crecimiento en la dieta de1 almortas, no aumenta el grado de utilizacin protenica. U n a medida directa en la rata tropezaba con dificultades y sobre todo con inseguridades tcnicas, pero hay motivos para pensar que, si como suponamos, el efecto del extracto heptico se deba a un aumento de utilizacin, ste debera ser igualmente visible en el perro. A l n o ser esto as debemos buscar otra explicacin al hecho. Simultneamente a estas experiencias se hicieron en nuestro Instituto las que se han participado en la comunicacin V de esta serie 2 , referentes al "cicerismo de las ratas". Dichas experiencias nos han permitido demostrar la existencia de un principio hidrosoluble y termolbil en el extracto heptico que es capaz de evitar el efecto txico del garbanzo. El influjo que el hgado ejerca sobre el crecimiento de
CUADRO III. Perro VIII (igual dieta que los patrones ms

CUADRO I V . Perro

extracto

de

hgado)

Heces Da Cant. tot. gramos . . . . 11,90 16,70 14,20 . . . . . . . . . . 7,00 10,60 8,50 29,00 8,80" 44,00 43,00 48,00 47,00 N. tot. da N.o/o gramos gramos 2.416 2.471 4.401 0.287 0.412 0.185 Observaciones

28-V 29 30

1-VI . 2 . 3 5 8 9 10 11 12 15 16 17 18 19 22 24 25 26 2 3 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 , . . . . . . . . . . . . . . . . . .

4.577 4.087 2.895 2.895 2.032 1.328 1.394 0.775 1.347 1.402 0.894 1.258 1.318 0.905 1.146 1.220 1.454 1.211 1.379 1.870 0.852 1.814 2.225 1.506 1.215 1.824 0.769 1.335 0.816 1.971

0.485 0.347 0.840 0.255 0.894 0.571 0.669 0.374 1.083 1.612 0.465 1.006 1.118 0.495 0.664 0.998 0.583 0.399 0.400 0.309 0.486 0.129 0.823 0.030 0.423 0.640 0.154 0.347 0.481 0.237

Almortas con diez por ciento de salvado, ms extracto heptico. No pudo hacerse la det.

80,40 . 115,00 . 52,00 . 80,00 . 84,60 . 54,50 . . . 58,00 81,80 45,60 33,00 29,00 16,50 57,00 8,00 37,00 2,00 34,80 32,00 20,00 26,00 59,00 12,00

1-VII.

.
. . .

extracto heptico) Heces Da Cant. tot. gramos N. tot. da N.o/o gramos gramos Observaciones

Alm. y extr. de hig. solamente. Coprofagia. Coprofagia. Coprofagia.

28-V . 29 . 30 . 1-VI . 2 . 3 5 . 8 . 9 . 10 . 11 . 12 . 15 . 16 . 17 . 18 . 19 . 22 . 23 . 24 . 25 . 26 . 1-VII. 2 . 10 . 11 . 12 . 13 . 14 . 15 . 16 . 17 . 18 . 19 .

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

21,26 2.350 25,05. 1.647 15,55 3,342 13,70 3.338 36,00 0.386 27,30 3.208 26,00 3.552 1.434 33,00 54,00 2.177 1.198 141,00 33,40 1.954 1.660 75,60 124.00 1.451 1.410 107,00 79,00 1.923 20,50 2.132 60,00 1.108 1.244 47,00 1.192 38,00 1.174 62,00 1.379 30,00 1.287 51,00 60,00 0.992 1.211 56,00 39,00 0.924 1.487 14,00 1.092 60,00 74,00 2.049 . Nada 66,00 2.472 1.193 50,00 1.613 32,00 1.511 44,00 35,00 1.332

0.499 0.413 0.509 0.457 0.139 0.876 0.923 0.473 1.176 1.689 0.653 1.255 1.799 1.501 1.519 0.437 0.664 0.585 0.453 0.728 0.384 0.656 0.595 0.678 0.360 0.208 0.655 1.516

Almortas con diez por ciento de salvado, ms extracto heptico.

. . . . . . . .

. . . . . . . .

CUADRO V . R e s u m e n de los

valores

medios

PERRO

Valor medio de N. fecal en gramos por da durante: Perodo de almortas con salvado Perodo de almortas solas

Sin adicin de hgado:

VII IX . .
0.720 0.779 0.363 0.521 0.442

Media 2.
Almortas y extracto de hgado solamente. VIII X . . . .

0-749 Con adicin del extracto heptico,

0.793 0.621 0.707

0.661 0.489

Media

0-575

1.632 0.596 0.516 0.665 0.466

las ratas en dieta de almortas, ya dijimos 1 que desapareca cuando el hgado era autoclavado, y por tanto, era la consecuencia de la accin, de un principio igualmente termolbil e hidrosoluble. Resulta un poco sorprendente que un mismo factor tenga dos efectos tan dispares como es el antitxico contra las

TOMO v n i NMERO 4

ESTUDIOS SOBRJE EL

LATIRISMO
RESUMEN

18

"leguminosis", y l favoreciente de la utilizacin intestinal de las protenas vegetales, - y menos verosmil an parece a primera vista que se trate de dos principios distintos cuyas cualidades fsicas (hidros o l u b i l i d a d , termolabilidad, independencia de la thiamina) sean las mismas. Esta dificultad se resuelve al averiguar en estas experiencias que hoy publicamos, que contra 'lo que primeramente habamos pensado, no hay tal influencia sobre la absorcin y utilizacin en el intestino; lo cual no quiere decir sino que el motivo de que las ratas no crezcan a la rapidez normal en las semanas de experiencia, no se debe a una mala utilizacin de las albminas, como tampoco (esto ya haba quedado anteriormente demostrado por nosotros) a una inferioridad biolgica de sus protenas, o a una falta de factores accesorios. N o puede explicarse esa lentitud de desarrollo sino como expresin de un efecto txico de la almorta; as como en el cerdo la almorta origina una rapidsima intoxicacin mortal y en el hombre y en el caballo una intoxicacin ms lenta, principalmente en el sistema nervioso que se traduce en el cuadro del latirismo, en otros animales, como en la rata, no produce una ni otra icosa, pero tiene de todos modos una accin txica general, que en el animal en crecimiento se revela por una lentificacin del mismo, efecto comn y conocido de otros txicos numerosos. Entonces, al aceptar esta explicacin que parece evidente, nos explicamos el efecto del principio termolbil hidrosoluble del hgado como una accin antitxica, lo mismo que se ve con mayor claridad por tratarse de na intoxicacin ms violenta frente a la dieta de garbanzos. As se comprende que el condicionamiento de uno y otro efecto sea el mismo, porque no se trata sino de un solo factor. Aparte de explicarnos los anteriores hallazgos, estos resultados a que llegamos nos interesan desde dos puntos de vista ms, a saber: as como no tenemos un test biolgico directo con el cual poder experimentar sobre l mecanismo y naturaleza del latirismo por su imposibilidad de reproducir l'a enfermedad en animales pequeos que permitiera trabajar con suficiente nmero de animales, y hemos debido recurrir a la afeccint similar que es el cicerismo en las ratas, sabiendo que la almorta tiene su accin txica en la rata manifiesta en forma de influjo retardante del crecimiento, podemos por el estudio de la curva de peso averiguar la naturaleza del txico latirgeno y ver si tiene las mismas propiedades que el de los! garbanzos; de otro modo, el latirismo en las ratas no es un cuadro neurolgico sino un retardo del desarrollo del animal en crecimiento. En segundo lugar, comprobamos que el factor termolbil e hidrosoluble existente en el hgado, protector contra el efecto txico del garbanzo, lo es tambin contra la accin perjudicial de la almorta sobre el crecimiento de la rata joven, y por consiguiente, que ambas acciones son la misma.
Como en las anteriores comunicaciones, debemos agradecer a la Direccin General de Sanidad el apoyo que ha prestado a estas experiencias.

Se estudia la utilizacin de las protenas de la harina de almortas en el perro, y el efetto sobre la misma de la adicin del extracto de hgado no autoclavado, averigundose que la utilizacin, es por s bastante buena (86 por i o o ) y que no se aumenta al hacer la mencionada adicin. El mejor desarrollo de las ratas en dieta de almortas por el principio hidrosoluble y termolbil (no thiamnico) descubierto por nosotros, no se debe, por tanto, a una influencia sobre la utilizacin intestinal de las albminas vegetales, sino por un efecto antitxico frente a la almorta comparable al que hemos demostrado que se desarrolla frente al garbanzo en el cicerismo de las ratas. Se hacen consideraciones sobre el inters futuro de esta demostracin.
BIBLIOGRAFA
1 2 JIMNEZ DAZ, C .

JIMNEZ DAZ, C . , VIVANCO , F . y CASTRO MENDOZA, H . R e v .

310, 1942.

VIVANCO , F . R e v .

Clin.

Esp.,

IV

Com.,

6,

Esp., V Com., 1043.

Clin.

ZUSSAMMENFASSUNG Man untersuchte die Ausntzung der Proteine des Platterbsenmehls (Lathyrus) beim Hunde und die Wirkung eines hinzugefgten Leberextraktes, der nicht im Autoclaven vorbereitet wurde. Dabei wurde festgestellt, dass die Ausntzung selbst ziemlich gut ist (86 % ) , und, dass diese bei Zusatz des besagten Extraktes nicht besser wird. Die bessere Entwicklung der Ratten mit Platterbsendiat durch einen wasserlosichen u n d warmeempfindlichen (nicht thiaminischen) Faktor, der von uns entdeckt wurde, beruht also nicht auf einer besseren intestinalen Ausntzung der pflanzlichen Eiweisse, sondern auf der antitoxischen Wirkung den Platterben gegenber. Diesen Effekt konnen wir mit dem vergleichen, den wir bei der Kichererbsenernahrung in Form des Cioerismus bei den Ratten auftreten sehen. Es werden Betrachtungen darber angestellt, welche Bedutung diese Tatsache fr die Zukunft haben wird. R S UM O n tudie l'utilisation des protines de la farine de gesse chez le chien, et en mme temps l'effet produit sur cette farine par l'addition de l'extrait de foie non autoclav: on apprend que l'utilisation est par elle mme sufFisamment bonne (86 % ) et qu"elle n'augmente pas lorsque l'addition a t faite. Le meilleur' dveloppement des rats avec une dite de gesse au moyen du principe hydrosoluble et thermolabile (non thaminique) que nous avons p dcouvrir, n'est pas d par consquence une influence sur l'utilisation intestinale des albumines vgtales, mais par un efFet antitoxique en face de la farine de gesse; cet efFet est comparable avec celui qui (nous ' avons dmontr) se dveloppe en . face des poischiches dans le cicrisme chez les rats. Des considrations sont faites au sujet de l'intret futur que peut ofFrir cette dmonstration.