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HEMOGLOBINA
Reactivo para la determinacin cuantitativa de Hemoglobina en la sangre.
Para uso en el diagnstico in Vitro. SIGNIFICANCIA CLINICA La Hemoglobina es una protena conjugada normalmente presente slo en los eritrocitos. Esta constituida por cuatro grupos heme (porfirinas), unidos a una cadena polipeptdica. Los grupos heme son capaces de ligar reversiblemente oxgeno dixido de carbono. La Hemoglobina transporta el oxgeno desde los pulmones a los diferentes tejidos corporales, donde es utilizado en el metabolismo energtico, y retira de ellos el dixido de carbono producido por dicho metabolismo. La cuantificacin de la Hemoglobina ya sea en sangre venosa, arterial o capilar, es de utilidad para el diagnstico de variadas patologas que alteran su concentracin, puesto que su concentracin en la sangre es esencial para que el transporte de los gases sea adecuado. FUNDAMENTOS DEL METODO. El reactivo de Hemoglobina VALTEK se basa en el mtodo de la cianmetahemoglobina. Los eritrocitos son lisados por accin de un agente tensioactivo presente en el reactivo, liberando su contenido de Hemoglobina en la solucin. La Hemoglobina liberada es oxidada a metahemoglobina por el ferricianuro, siendo esta ltima convertida en cianmetahemoglobina por la presencia de cianuro. La absorbancia de la cianmetahemoglobina es medida a 540 nm., siendo la intensidad del color obtenida, directamente proporcional a la concentracin de Hemoglobina en la muestra. REACTIVOS Conservado en un lugar fresco y protegido de la luz, estable hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta. Reactivo de Hemoglobina: Ferricianuro de Potasio Cianuro de Potasio Sterox-SE Buffer y estabilizantes no reactivos Standard Hemoglobina: Metahemoglobina disuelta en reactivo de hemoglobina equivalente a 18 g/dl de hemoglobina. Descartar el reactivo si su coloracin es diferente al amarillo, o en caso de aparicin de algn precipitado. MUESTRA Sangre total obtenida utilizando EDTA como anticoagulante. Tambin se puede utilizar como anticoagulantes citrato, oxalato o heparina. La muestra colectada con anticoagulante, es estable por una semana a temperatura ambiente. EQUIPO REQUERIDO Espectrofotmetro o fotocolormetro de filtros capaz de leer absorbancia a 540 nm. (rango 520 a 560 nm.), cronmetro y pipetas. 0,6 mM 0,7 mM 1 ml/L c.s. TECNICA Preparacin del reactivo de trabajo: Diluir el reactivo 1:10 con agua destilada antes de usar. La solucin Standard se provee lista para su uso, medir su absorbancia directamente contra el blanco reactivo. Blanco Desconocido Muestra (ml) --0.01 Reactivo trabajo (ml) 2.50 2.50 Mezclar e incubar 3 minutos a temperatura ambiente (sobre 20 C), o 10 minutos si la temperatura ambiental es muy baja. Leer las absorbancias llevando a cero el equipo con el blanco reactivo. El color obtenido es estable por a lo menos 1 hora. CALCULOS FACTOR= 18 Absorbancia Standard Hemoglobina (g/dl)= FACTOR x Absorbancia Desconocido ADVERTENCIA El factor obtenido con la solucin Standard provista con el kit es vlida durante la vigencia de los reactivos. La confiabilidad de los resultados de la prueba debe ser verificada utilizando estndares y controles en la misma forma que la muestra de los pacientes. Este reactivo CONTIENE CIANURO, manipular con mxima precaucin y en lo posible evitar utilizar la boca. NO MEZCLAR CON ACIDOS. Eliminar residuos junto a grandes volmenes de agua. Los volmenes indicados pueden ser modificados proporcionalmente, sin alterar los resultados.

ESPECIFICACIONES DE DESEMPEO: -Linealidad: 20 g/dl . Para valores superiores 20 g/dl, diluir la muestra con suero fisiolgico y el resultado obtenido se multiplica por el factor de dilucin. -Reproducibilidad interserie: n= 10 Nivel Normal Patolgico Media (gr/dl) 12,76 17,28 C.V. 2,76% 1,79%

Estos datos han sido obtenidos utilizando la tcnica manual. Los resultados pueden variar al cambiar de instrumento - Certificado de Conformidad y Trazabilidad disponible a solicitud RANGOS DE REFERENCIA Hombre: 14.0 a 18.0 g/dl Mujer: 12.0 a 16.0 g/dl BIBLIOGRAFIA 1. 2. 3. 4. Tietz, N.W., Fundamentals of Clinical Chemistry, 2 Ed., W.B. Saunders & Co., Philadelphia (1976) Walters, M.I., Clin Chem 14(682), 1968. Young, R.B., et al., Clin Chem 21(314), 1975). Recommendation for Haemoglobinometry in Human Blood, Dr. J. Haematol, Suppl 71(13), 1967.

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