Microbiologia Introduo Procariotas vs eucartiotas

Procariotas (unicelulares sem membrana celular) Eucariotas (ncleo verdadeiro) Forma das bactrias Bastonetes (cilindros compridos) Cocos (forma esfrica) Vibrio (em forma de lgrima) Forma esfrica cocos Diplococos duas clulas juntas depois de diviso segundo um plano. Podem ser em gro de caf ou em chama de vela (POR FOTO) Em cadeia clulas juntas depois de repetidas divises segundo um plano (estreptococos) Em cacho clulas juntas depois de repetidas divises segundo diversos planos (estafilococos) Em ttrada Bacteria (parede celular normal, com peptidoglicano) Archeae (parede celular sem peptidoglicano, uma nica membrana lipdica)

Estrutura das clulas procariotas

Envelope 1) Cpsula (no existe em todos) 2) Parede celular (2/3 das espcies no tm) 3) Membrana citoplasmtica

o o o o o o

1) Cpsula Natureza polissacrida (tambm pode ter polipptidos) Mobiliza grande quantidade de gua Proteco da bactria contra a dessecao As bactrias capsuladas so normalmente muito virulentas para o Homem dadas as propriedades fagocitrias da cpsula A cpsula um alvo de produo de vacinas A estrutura antignica da cpsula varia e a bactrias pode no expressar sempre a cpsula. 2) Parede celular Alvo de vrios antibiticos Existe porque normalmente as bactrias desenvolvem-se em ambientes hipotnicos e dada a fragilidade da membrana celular ocorreria lise celular se no existisse uma parede celular rgida O componente responsvel por essa rigidez o peptidoglicano A parede celular, estruturada sob controlo gentico, tambm responsvel pelo duplo comportamento das bactrias em relao colorao de Gram - permite dividir as bactrias em Gram positivo e Gram negativo 1

o o

o o

o o

As bactrias Gram + ficam roxas com o corante violeta de cristal e as Gram - coram de vermelho (fucsina bsica); As diferenas qumicas na parede celular as bactricas Gram + e - so visveis na sua estrutura. Estas diferenas qumicas e morfolgicas justificam a diferena de comportamento das bactrias em relao colorao de Gram. As bactrias sem lpidos na parede celular tomam a cor roxa do primeiro corante (violeta de cristal) e resistem descolorao com acetona: Gram + As bactrias com lpidos na parede celular perdem o primeiro corante durante a descolorao com acetona e tomam a cor do segundo corante (vermelho safranina???): Gram As bactrias gram + tem cerca de 70% de peptidoglicano e as gram - tm cerca de de 1-5% de peptidoglicano.

Peptidoglicano (ou mucopptido ou murena) - constitudo por duas cadeiras lineares de aminoacares: NAG (N-acetil-glucosamina) NAM (cido N-acetil-murmico) Dispostos alternadamente e unidos por ligaes glicosdicas

A L-alanina, a D-alanina, a D-glucosamina e a lisina so os pptidos mais frequentes a formar tetrapptidos nas pontes entre o NAG e o NAM. Os tetrapptidos ligados ao NAM estabelecem entre si uma rede atravs de um pentapptido (5 resduos de glicerina) ligando a Dglucosamina D-alanina. Os antibiticos -lactmicos (penicilina) ligam-se enzima que cataliza a ligao da pentaglicina ao tertapptido. Bactericdas matam a bactria Bacteriostticos param a diviso 3) Membrana citoplasmtica a estrutura que rodeia o citoplasma celular e constituda por uma bicamada fosfolipdica com protenas perifricas e integrais (no tem colesterol)

Funes: o Permeabilidade selectiva (permevel a molculas lipoflicas e impermevel a hidroflicas) o Funo biossinttica (peptidoglicano) e bioenergtica (metabolismo oxidativo) o Controlo de fluxo de solutos o A maioria dos antibiticos atravessa a membrana citoplasmtica por transporte activo com interveno das permeases (protenas transportadoras) Espao periplasmtico ou periplasma Nas bactrias Gram +: entre a parede celular e a membrana plasmtica Nas bactrias Gram-: entre a membrana plasmtica e a membrana externa Componentes externos a parede celular: Fimbrias: estruturas tubulares proteicas com 3 a 10 nm de dimetro. Cada clula pode conter 1000 fimbrias. Reconhecem receptores nas superfcies mucosas do Homem viabilizando a colonizao e infeco das mucosas. Por exemplo, desempenham um papel determinante na patognese das infeces urinrias. Uma bactria no fimbriada menos patognica. 2

 Pili: 1 a 10 por clula com um dimetro de 9 a 10 nm. Medeiam o contacto entre bactrias
de sexo diferente (F+ e F-) permitindo, durante o processo de conjugao a transferncia de material gentico. Flagelos: so rgos de locomoo com 15 a 20 m de comprimento, constitudos por 3 subunidades: filamento flagelar (projectado para o exterior da clula), corpo basal (inserido no envelope) e gancho. A disposio dos flagelos na clula tem um significado taxonmico (1 flagelo montrico, 2 [um em cada extremidade] anftricos, tufos de flagelo loftricos, por todo o lado pertrica). As bactricas capsuladas no tm flagelo. Componentes internos a parede celular: Citoplasma: est rodeado pela membrana citoplasmtica. Contm os corpos de incluso, os ribossomas, o nucleide e os plasmdeos. As protenas estruturais tambm existem nas clulas procariotas. O citosqueleto nas clulas procariotas constitudo por 3 protenas (FstZ, MreB e crescentina) com funes na diviso celular e na manuteno da sua forma. Corpos de incluso: grnulos de material gentico e inorgnico dipersos no citoplasma. A sua funo o armazenamento de compostos de carbono (grnulos de glicognio) e material inorgnico (grnulos de poli-fosfato) e de energia. O nmero de corpos de incluso varia com as necessidades nutricionais da clula. Ribossomas: so muito abundantes no citoplasma bacteriano e so os locais de sntese proteica. So constitudos por duas subunidades (30S e 50S), contento protenas e RNA. Ribossomas livres protenas intracelulares Ribossomas ligados protenas para transportar para fora da clula Nucleide: regio que contm o cromossoma nico, no envolvido por membrana nuclear. Na sua composio inclui-se 60% de DNA (circular e super enrolado), 30% de RNA e 10% de protenas. Genoma bacteriano = 1 cromossoma de DNA circular em dupla hlice + plasmdeos Plasmdeos: so pores de DNA extra-cromossmico. So molculas menores que o cromossoma do nucleide contm, que tem poucos genes no essenciais clula e produzem-se de forma autnoma. Conferem resistncia a antibiticos. - Plasmdeos conjugativos - Plasmdeos de virulncia F: codifica a produo de plis R: factor de resistncia

Ciclo da clula bacteriana

- Conjunto de eventos de ocorrem entre duas divises celulares Diviso binria: Elongao celular Replicao do cromossoma (replicao do cromossoma) Separao das duas molculas de DNA (replicao do cromossoma) Formao do septo (citoquinese) Separao das duas clulas (citoquinese) Todos os constituintes da clula duplicam durante o ciclo celular. Quase todas as macromolculas so sintetizadas continuamente durante o ciclo celular. H duas excepes a essa sntese contnua: replicao do cromossoma e formao do septo. A velocidade de sntese exponencial ao longo do ciclo celular. Processo: 1) A clula alonga-se (prepara-se para a diviso) 2) Replicao do cromossoma 3

3) A clula alonga-se mais (dois cromossomas na mesma clula) 4) Formao do septo e diviso Replicao do cromossoma Replicaco a unidade de replicao do genoma e contm a origem de replicao. Origem/origem de replicao local onde tem incio a replicao do cromossoma, que rico em adeninas e timinas. Na posio oposta da molcula situa-se o ponto onde a replicao termina o terminus. Na fase inicial da diviso celular o replissoma move-se para a origem. Replissoma complexo de enzimas e protenas necessrias para a replicao. Exemplos: polimerases, helicases, topo-isomerases, protenas de ligao de DNA, primases, ligases. Duplicao do cromossoma a replicao inicia-se com a abertura da cadeia de DNA junto origem e continua bidireccionalmente em volta do cromossoma, at que as duas cadeias se encontrem na regio terminal. Citoquinese o processo de formao de duas clulas-filhas. O processo essencial da citoquinese a formao do septo parece celular entre duas clulas-filhas. A formao do septo compreende os seguintes passos: a) Seleco do local onde o septo ser formado. b) Reunio das protenas necessrias para a formao do Z ring, das quais a protena FtsZ do citosqueleto fundamental. c) Ligao do Z ring membrana citoplasmtica e talvez at parede celular. d) Reunio do material celular necessrio para a sntese da parede, isto , sntese do peptidoglicano (NAM e NAG) e outros compostos. e) Constrio celular e formao do septo. Papel das protenas do citosqueleto na diviso celular MreB: esta protena forma uma espiral em volta da clula. Enrola-se mais ou menos conforme as necessidades. A origem liga-se protena e arrastada quando a espiral se movimenta entre os polos opostos ficando as duas cpias de DNA separadas. FtsZ: esta protena uma protena homloga tubulina eucaritica. Da polimerizao da FtsZ resulta em anel Z em volta da clula. A este anel Z associam-se muitas outras protenas, algumas modeladoras da funo da FtsZ. Aps a diviso binria necessrio sintetizar peptidoglicano. As autolisinas hidrolisam as ligaes 1,4 entre resduos de NAM e do NAG do peptidoglicano. Sntese do peptidoglicano Fase citoplasmtica Sntese de NAG e NAM-pentapptido (ligao de NAM a um pentapptido), os tijolos do peptidoglicano em construo. Fase membranar Transporte dos NAG e NAM-pentapptido atravs da membrana citoplasmtica alternando-os. O bactoprenol, lpido membranar, transporta o percursor UDP-NAM-pentapptido e UDP-NAG atravs da membrana citoplasmtica, formando o NAG-NAM-pentapptido. Fase parietal Colocao do NAG-NAM-pentapptido na parede celular em crescimento e promoo da sua ligao com a parede. 4

Inicia-se com a incorporao do percursor NAG-NAM-pentapptido no peptidoglicano prformado e a sua ligao mediada por transglicolases, ocorrendo posteriormente a ligao entre o 3 e o 4 aminocido de cadeias peptdicas vizinhas mediadas por D-D-carboxitranspeptidases. Todas as enzimas esto localizadas no folheto externo da membrana citoplasmtica bacteriana. Complexos inibidores da sntese do peptidoglicano: Lisozima um constituinte natural das lgrimas, saliva e colostro. Modo de aco: quebra as ligaes glicosdicas entre NAM e NAG. Antibiticos as penicilinas, as cefalosporinas e outros -lactmicos inibem a transpeptidao final que estabelece as ligaes cruzadas. A vancomicina liga-se poro terminal da cadeia polipeptdica ligada ao NAM, inibindo assim a transpeptidao final que estabelece as ligaes cruzadas. A bacitricina impede a desfosforilao do lpido transportador, impedindo a ligao nova unidade do peptidoglicano. Endosporos So formas de resistncia (ao calor, radiao UV, radiao gama, desinfectantes). Desenvolvem-se a partir do interior da clula vegetativa de algumas bactrias Gram +: Baccilus, Clostridium e Sporosarcina. reas sensveis presena de esporos ou sua utilizao: - Indstria alimentar - Microbiologia clnica - Controlo biolgico de esterilizao (Baccilus stearotherenophylus) - Bioterrorismo Se houverem bactrias no h esterilizao!! Como destruir endosporos? Fervura Autoclavagem Mtodos qumicos (formaldedo, glutaraldedo, etc) Autoclave panela de presso em que se controla a presso e a temperatura (aumentam ou diminuem as duas) Designao de endosporos, relativamente sua localizao na clula-me (esporngio): o Esporo terminal o Esporo central (Baccilus cereus) o Esporo sub-terminal (Baccilus subtilis) o Esporo terminal (em raquete) (Clostridium tetani) Formao dos endosporos: 1. O DNA concentra-se no centro da clula; 2. A membrana celular da clula-me invagina-se e envolve parte do DNA (alonga); 3. A membrana celular da clula-me continua a crescer e envolve o esporo em formao que fica agora com as duas membranas; 4. Entre elas forma-se o crtex onde se acumulam o cido diplicolnico e clcio. O DNA da clula-me degrada-se; 5. Forma-se uma camada proteica em volta do crtex e o esporo est maduro e resistente s condies adversas ambientais; 6. Alguns esporos formam uma camada externa chamada exosporo; 7. Enzimas lticas destroem a clula-me (esporngio) e o esporo libertado. 5

Germinao dos esporos forma vegetativa Ocorre em 3 fases 1: Activao (prepara o esporo para a germinao e ocorre normalmente com calor) 2: Germinao (rotura do crtex e camada proteica e aumento da actividade metablica) 3: Desenvolvimento (sntese de constituintes plasmticos a partir dos compostos do envlucro do esporo)

Gentica Bacteriana
Genoma - DNA cromossmico (clula haplide) - DNA extracromossmico plasmdeos (DNA circular) O DNA contm a informao necessria para manter um indivduo nico, dividir-se e dar origem a outro indivduo. Toda a informao gentica transmitida a todos os organismos descendentes. O funcionamento da clula e o processo de diviso depende do fluxo de informao entre genes, num processo designado expresso gentica. A transmisso gentica entre clula ocorre pelo processo de replicao do cromossoma. O DNA contm a informao ordenada em unidades designadas genes. Estrutura do DNA: - Fosfato - Base azotada Purinas (adenina = guanina) Pirimidinas (timina citosina) Desoxirribose

- Acar

Ligaes fosfodister os nucletidos esto ligados entre si por ligaes covalentes, entre o grupo hidroxilo do carbono 3 de um nucletido, e o fosfato do carbono 5 do nucletido adjacente, com remoo de uma molcula de gua.

Replicao do DNA
O DNA tem a capacidade de se auto replicar mas no tem aptido para formar directamente protenas. A informao contida na dupla cadeia de DNA vai ser inicialmente transcrita a RNA, ou seja, o DNA dirige a sntese do RNA, por um processo designado transcrio. O RNA formado vai ser descodificado em protenas, por um mecanismo designado traduo. Ao conjunto destes dois processos d-se o nome de sntese proteica. Os vrus que contm RNA no genoma podem sintetizar DNA a partir de RNA pela aco da enzima transcriptase reversa. A replicao o processo que assegura a duplicao da molcula de DNA e que ocorre antes da diviso celular. O incio da replicao determina que todo o genoma seja replicado e obriga a clula a uma diviso posterior. A replicao do DNA semi-conservativa, ou seja, cada uma das cadeias de DNA da dupla hlice serve de molde para a sntese da cadeia-filha complementar. A dupla hlice original d origem a duas duplas hlices nas clulas-filhas, cada uma constituda por uma rplica do DNA da clula-me.

A sntese do DNA tambm semi-descontnua. Durante a replicao do DNA as cadeias tm denominaes diferentes. A cadeia condutora (leading) sintetizada continuamente no sentido 5 3, por incorporao de nucletidos livres (promovida pela DNA polimerase). A cadeia lenta (lagging) sintetizada em pequenos fragmentos de 1000 a 2000 bases, designados fragmentos de Okazaki. As DNA polimerares asseguram a replicao do DNA que, a partir de uma pequena sequncia de RNA designada por primer (iniciador, sintetizados pela RNA primase e ligados pela ligase), sintetizam uma cadeia complementar cadeia molde. O replico a unidade de replicao do genoma e contem o local para o incio da replicao: origem ou origem de replicao, que rico em adeninas e timinas. A partir da origem de replicao forma-se o garfo ou forquilha de replicao que se move ao longo do DNA. A replicao pode ser unidireccional, com a formao de um garfo de replicao, ou bidireccional, com dois garfos de replicao a moverem-se em direces opostas. Depois da origem de replicao estar activada, a separao da dupla hlice em cadeias simples catalizada por um grupo de protenas especficas, as helicases, custa da quebra de ATP. Os pontos de iniciao da sntese de DNA no so reconhecidos pelas DNA polimerares, mas sim por outras enzimas, as RNA primases, que transcrevem o DNA em pequenas cadeias de RNA que vo ser utilizadas como iniciadores.

Sntese proteica
Transcrio o processo pelo qual uma regio de DNA copiada, resultando RNA, a partir de DNA molde, ribonuclesidos trifosfatados (RNTP) e um conjunto de protenas catalisadoras da sntese de RNA. A unidade de transcrio uma sequncia de DNA que codifica para um RNA e constitudo por 3 regies crticas: Um promotor Uma sequencia que codifica o RNA Um terminador O RNA formado por uma cadeia simples, uma ribose e uridina, caractersticas que permitem diferenci-lo do DNA (o RNA tem uracilo em vez de timina). O RNA total de uma clula constitudo por: RNA mensageiro (mRNA) RNA ribossomal (rRNA) RNA transferncia (tRNA) Na maioria dos procariotas, a sntese dos vrios tipos de RNA efectuada por uma nica RNA polimerase atravs da incorporao no sentido 5 3 de ribonuclesidos trifosfatados (ATP, GTP, CTP e UTP). A regulao da transcrio mediada por protenas que se ligam ao DNA, dentro ou prximo da regio promotora, e que so responsveis pelo aumento ou diminuio da velocidade com que a RNA polimerase inicia a sntese de RNA. Estas protenas podem ser repressoras, para inibirem a ligao da RNA polimerase, ou activadoras, para estimularem a actividade de transcrio.

A transcrio iniciada pela enzima RNA polimerase que separa os pares de bases de DNA, desenrolando o DNA e formando uma bolha de transcrio. O mRNA ento uma cadeia nucleotdica complementar ao molde de DNA de interesse, onde a timina substituda por uracilo. No final do processo de transcrio o mRNA maduro constitudo apenas pelas sequncias que codificam os aminocidos de uma protena (exes) e migra para o citoplasma onde vai ocorrer a leitura da mensagem. Cada aminocido codificado por uma ou mais sequncias de trs bases, o codo do mRNA. Cada codo especfico para um aminocido mas a maioria dos aminocidos so codificados por mltiplos codes. O codo AUG, que codifica para a metionina o codo de iniciao mais comum, especificando assim o aminocido que vai estar presente na extremidade NH2 da cadeia proteica. Trs codes que no codificam para nenhum aminocido funcionam como codes de terminao: UAA, UAG e UGA. Traduo A informao contida no mRNA, vinda do ncleo, vai ser descodificada por um processo designado por traduo que conduz formao de protenas. Ocorre no citoplasma pelo ribossoma. A descodificao no mRNA feita por um mecanismo de leitura de bases de uma nica cadeia atravs do cdigo gentico, interpretado pelo tRNA para seleccionar o aminocido especfico de modo a que a sequencia peptdica esteja correcta. Esta leitura feita em grupos de trs nucletidos que no se sobrepem, em que cada grupo representa um aminocido. Cada sequncia de trs nucletidos ou tripleto designada por codo. A sequncia de aminocidos da protena formada do terminal amina para o terminal carboxilo. A codificao de um aminocido por um conjunto de trs bases permite a existncia de 64 codes, dos quais 61 codificam para aminocidos (podendo cada aminocido ser codificado por mais de um codo e trs codes de terninao). Existem no total 20 aminocidos diferentes. O cdigo gentico tem certas caractersticas prprias: No tem vrgulas, dado que lido continuamente; universal, pois lido da mesma maneira desde as bactrias aos mamferos com algumas excepes, como a mitocndria; degenerativo e redundante; Possui um codo de iniciao (AUG metionina) e trs codes de terminao (UAA, UGA, UAG). O RNA transferncia vai ser utilizado como adaptador de aminocidos no processo de traduo por emparelhamento dos diferentes codes do mRNA com as sequncias especficas existentes no tRNA designadas por anticodo. Em termos estruturais, o tRNA constitudo por 73 a 95 nucletidos ligados covalentemente numa cadeia nica. No tRNA a maioria das bases formam ligaes hidrognio entre si, resultantes da complementaridade entre bases, que so responsveis pela formao de hlices duplas, as hastes, e pela configurao em folha de trevo que estas molculas apresentam. A ligao covalente entre a extremidade 3 do tRNA e o aminocido requer a activao inicial do aminocido que catalizada por aminoacil-tRNA sintetases. Estas enzimas, na presena de ATP formam um complexo com o aminocido, que s posteriormente se vai ligar ao tRNA e constituir o tRNA carregado. O tRNA depois de carregado vai para o ribossoma, onde ocorre a sntese proteica. 8

Os ribossomas dos procariotas (70S) so formados pelas subunidades maior (50S) e menor (30S). durante a sntese proteica, o ribossoma 70S est constantemente a dissociar-se nas suas subunidades e a reunir-se novamente para iniciar a sntese proteica. Cada ribossoma tem 3 locais de ligao para os tRNA: O local P para a ligao do tRNA iniciador O local A para a ligao do segundo tRNA O local E que promove as alteraes conformacionais que levam ejeco dos tRNA A sntese proteica iniciada no codo de iniciao AUG, codificantes da metionina, podendo tambm ser GUG ou UUG em bactrias. Fases da sntese proteica Iniciao: a sub-unidade 30S do ribossoma liga-se extremidade 5 do mRNA e desliza ao longo da molcula de mRNA at encontrar o codo de iniciao AUG. O tRNA transporta o aminocido metionina e liga-se ao codo de iniciao. Alongamento: o 2 tRNA transporta um aminocido especfico do codo seguinte. Estabelece-se uma ligao peptdica entre o novo aminocido e a metionina. O ribossoma avana 3 bases ao longo do mRNA no sentido 5 3 repetindo-se este processo. Finalizao: o ribossoma encontra um dos codes de finalizao (UAA, UAG ou UGA) e termina o alongamento. O ltimo tRNA abandona o ribossoma. As subunidades separamse, podendo ser recicladas e o pptido libertado.

Metabolismo microbiano
Metabolismo conjuntos de reaces qumicas/bioqumicas desenvolvidas por organismos vivos no interior da clula, que permitem a sua sobrevivncia e o exerccio das suas funes biolgicas. Anabolismo actividade biossinttica da clula, onde h consumo de energia. Catabolismo degradao de molculas (polmeros), nas suas unidades constituintes (monmeros). Da degradao subsequente dos monmeros h libertao de energia. O anabolismo e o catabolismo ocorrem em simultneo mas as clulas no produzem energia se no necessitarem (porque as reservas so alimento). Libertar electres oxidada fonte de energia Receber electres reduzida Energia livre (G) capacidade de reaco de uma molcula ou de um conjunto de molculas diferentes. a energia utilizvel.

Oxidao e reduo
Agente redutor (A) Oxidado (A)

Agente oxidante (B) A perde electres B ganha electres

Reduzido (B)

Nucletidos essenciais
ATP (adenosina trifosfato) um nucletido que funciona como uma coenzima, usada na transferncia energtica intracelular. Na maioria das reaces biolgicas da oxidao-reduo a transferncia de electres efectuada atravs de uma das seguintes coenzimas: o NAD+ (nicotinamida-adenina-dinucletido): oxidado o NADH: reduzido o NADP+ (nicotinamida-adenina-dinucletido-fosfato) o FAD+ (flavina-adenina-dinucletido) o FADH o FMN (flavina-mononucletido) Estas coenzimas tornam-se alternadamente oxidadas ou reduzidas por libertao ou aceitao de 2 electres ou 2 protes. Os electres so transportados pelas coenzimas NAD+ e FAD+ at aos locais especficos onde se verifica a sntese de ATP, ou so reoxidadas atravs de reduo de intermedirios metablicos, tal como acontece ao piruvato na fermentao lctica e ao acetaldedo na fermentao alcolica.

Processos de obteno de energia

Os microrganismos so classificados em funo da fonte de energia e da fonte de carbono. Bactrias quimiotrficas - Quimio-heterotrficas - Quimio-autotrficas - Foto-heterotrficas - Foto-autotrficas

Bactrias fototrficas

Quimio-heterotrficas: quando utilizam compostos orgnicos como fonte de carbono e

usam como fonte de energia compostos orgnicos (organoquimio-heterotrficos) ou compostos inorgnicos (litoquimio-heterotrficos). Quimio-autotrficas: quando utilizam CO2 como fonte de carbono e usam como fonte de energia compostos orgnicos (organoquimio-autotrficos) ou compostos inorgnicos (litoquimio-autotrficos). Foto-heterotrficas: quando utilizam compostos orgnicos como fonte de carbono e a luz como fonte de energia. Foto-autotrficas: quando utilizam CO2 como fonte de carbono e a luz como fonte de energia. Exergnicas (metablicas, energticas ou catablicas) Produzem energia e podem ocorrer espontaneamente. Reaces metablicas Endergnicas (anablicas) Consomem energia. Asseguram a biossntese da clula. As vias catablicas implicam a oxidao de uma substrato e a reduo de um receptor final de electres. As vias metablicas energticas (para obteno de energia) utilizadas pela clula para oxidar um substrato, associam-se a reaces catablicas, no que se chama metabolismo intermedirio. 10

Como que a clula obtm energia? Nutrientes ou substratos qumicos Armazenamento de energia Utilizao de energia

Catabolismo

Como usada a energia obtida pela clula? Biossntese de material celular: sntese de enzimas, fosfolpidos, cidos nucleicos, polissacridos, protenas estruturais, etc. Crescimento e multiplicao Armazenamento e excreo Afluxo e efluxo de substncias atravs da membrana citplasmtica Degradao de macromolculas Movimentos de flagelos e outras actividades essenciais. Os microrganismos obtm energia por um dos seguintes processos: 1) Respirao: se o receptor final de electres for o oxignio (respirao aerbia); se o receptor de electres for um composto inorgnico oxidado, diferente de oxignio, como o nitrato, o sulfato e o dixido de carbono (respirao anaerbia). 2) Fermentao: quando o dador e o receptor de electres so ambos compostos orgnicos. 3) Fotossntese: se o dador e o receptor de electres for a clorofila (fosforilao cclica).

Respirao
o processo de transformao das ligaes qumicas de molculas ricas em energia. A respirao celular processa-se em diferentes etapas, nem sempre presentes em todos os microrganismos: - Gliclise (ou via de Embden-Meyerhof) - Ciclo de Krebs - Cadeia respiratria - Fosforilao oxidativa Gliclise uma das principais vias de produo de ATP em todos os tipos de clulas, uma sequncia de reaces bioqumicas atravs das quais a glicose (com 6 tomos de carbono) oxidada produzindo duas molculas de piruvato, duas molculas de ATP e dois equivalentes reduzidos de NAD+, que sero introduzidos na cadeia respiratria ou na fermentao. Glicose + 2NAD+ + 2ADP+Pi 2 NADH + 2 piruvato + 2ATP + 2 H2O Ciclo de Krebs Ocorre na matriz das mitocndrias das clulas eucariotas e no citoplasma das clulas procariotas. frequente em bactrias aerbias, protozorios, algumas algas e fungos. O piruvato (ou cido pirvico) formado na gliclise, para ser metabolizado no ciclo de Krebs, tem de ser convertido em acetil-CoA. O acetil-CoA formado pela descarboxilao oxidativa do piruvato (ou da degradao dos cidos gordos e de alguns aminocidos) oxidado atravs de um ciclo de reaces que constituem o ciclo de Krebs. Resumo: No decurso da oxidao de cada grupo acetilo reduzem-se 4 receptores de electres (3 NAD+ e 1 FAD), forma-se uma molcula de ATP e libertam-se duas molculas de CO2. Cada uma das molculas de cido pirvico (3 tomos de carbono) produzidas na gliclise degradada em acetil-CoA por aco da enzima piruvato desidrogenase. O acetil-CoA reage com o oxalacetato e forma citrato. O citrato vai dar origem a um composto com 5 carbonos, o alfa-cetoglutarato, com libertao de NADH e CO2. 11

O alfa-cetoglutarato vai dar origem a outros compostos de 4 carbonos, com formao de 2 NADH, 1 FADH2 e ainda uma molcula de ATP. No conjunto das reaces subsequentes formao do acetil-CoA, libertam-se mais duas molculas de CO2. A glucose est agora completamente degrada e transformada em 6 molculas de gs CO2. Todos os hidrognios da glucose j se perderam, isto , a glucose foi completamente oxidada. Cadeia respiratria/transportadora de electres - Receber os electres de um substrato dador (NADH e FADH2) e entreg-los por fim ao oxignio; - Conservar parte da energia que libertada durante a transferncia de electres e electres para a sntese de ATP. Nos eucariotas a cadeia transportadora de electres est inserida na membrana interna da mitocndria, enquanto nos procariotas est localizada na membrana plasmtica. A cadeia transportadora de electres funciona como uma bomba, usando a energia dos electres para bombear os protes atravs da membrana, para o espao intermembranar. O citocromos tm mais afinidade para os electres do que o NADH. Uma vez ligado ao primeiro citocromo, os electres ligam-se a uma segunda protena, a ubiquinona, e passam para o segundo transportador. Entre o segundo e o terceiro transportadores, os electres ligam-se ao citocromo C. Quando os electres passam de uma protena para a seguinte, a energia libertada e usada para bombear os protes atravs da membrana. Cada um dos transportadores tem maior afinidade para os electres do que o anterior, razo pela qual os electres continuam na cadeia transportadora. O papel do oxignio na respirao aerbia atrair os electres da ltima protena da cadeia transportadora e liga-se ento a 2 protes para formar gua. Fosforilao oxidativa O citoplasma est carregado negativamente pelo que os protes que agora esto no espao intermembranar no so atrados e voltam a passar de novo para o citoplasma, mas agora atravs da enzima ATP sintetase. Quando os protes passam atravs desta enzima, esta gira, une um ADP a um fosfato e produz ATP. Assim, a maioria do ATP formado durante a fosforilao oxidativa, quando o NADH e o FADH2 so oxidados na cadeia de transporte. o Na cadeia de transporte de electres 1) Cada NADH liga-se primeira protena transportadora, 2 electres entram na cadeia e 6 protes so bombardeados para o espao intermembranar. 2) O FADH2 liga-se apenas ao citocromo, 2 electres entram na cadeia e apenas 4 protes so bombardeados para o espao intermembranar. o Na fosforilao oxidativa 1) Cada par de electres activa a enzima ATP sintetase, isto , cada NADH d origem a trs molculas de ATP. 2) Cada FADH d origem a 2 molculas de ATP. Rendimento energtico 1 FADH2 2 ATP 1 NADH 3 ATP Depois da oxidao do NADH e do FADH2, o NAD+ e o FADH+ voltam gliclise e ao ciclo de Krebs. 12

 Fermentao (respirao anaerbia)

O processo em tudo idntico respirao aerbia, mas o receptor de electres no o oxignio. Pode ser um nitrato, um sulfato, enxofre, etc. Estes receptores tm um menor potencial de reduo, pelo que na respirao anaerbia, se obtm menos energia. Na ausncia de oxignio, a respirao no se completa aps a gliclise e o ciclo de Krebs porque no h o receptor de electres. Como consequncia no h regenerao de NAD e FAD para entrarem em novo ciclo de Krebs. A alternativa aps a gliclise o processo fermentativo, pelo qual a clula obtm energia. Estrategicamente, a clula vai recuperar o NAD+ necessrio gliclise. A fermentao um conjunto de reaces bioqumicas e oxi-reduo, em anaerobiose, controlada enzimaticamente, que fornece energia clula. Ocorre no citoplasma, ao nvel do substrato. O receptor de electres um composto orgnico, como o piruvato. Depois da gliclise, h a reduo do cido pirvico. Cada molcula de cido pirvico reduzida pelo hidrognio que libertado pelo NADH produzido na glicolise, originndo, conforme o tipo de organismo fermentativo, cido lctico, cido actico, ou lcool etlico e CO2. Na fermentao h apenas produo de 2 ATP, que so libertados durante a gliclise.

Mecanismos de variabilidade gentica

Os procariotas so organismos haplides que se reproduzem assexuadamente por diviso binria. A replicao do seu DNA altamente fiel, ocorrendo muito raramente uma alterao na sequencia de nucletidos. Seria ento espectvel que a transmisso dos caracteres fosse exclusivamente vertical. No entanto, verificou-se que a capacidade de gerar diversidade tem por base transferncias horizontais de material gentico, o que um factor perturbador dos estudos de evoluo porque organismos com antecessores distintos podem ter um conjunto de genes semelhantes. a partir dessa variabilidade que surgem novos tipos de patogenicidade, resistncia a antibiticos, etc. Os mecanismos atravs dos quais os procariotas e os eucariotas trocam material gentico e as suas consequncias diferem fundamentalmente nos seguintes aspectos: Nos eucariotas, durante a reproduo sexuada, ocorrem trocas genticas entre cromossomas homlogos. Pelo contrrio, nos procariotas, a reproduo assexuada e no depende nunca de trocas genticas. Ao contrario dos eucariotas, onde ocorre a mistura dos cromossomas provenientes da fuso de gmetas de polaridade diferente, nos procariotas apenas um pequeno fragmento de DNA transferido de um dador para uma clula receptora. Este tipo de transferncia tem uma elevada probabilidade de no ter qualquer consequncia, uma vez que o fragmento de DNA transferido no tem condies para se replicar na clula receptora. Este DNA s poder manter-se se estiver integrado num replico (segmento de DNA que contm uma origem de replicao e as funes replicativas). Outras grandes diferenas so: A maioria das clulas dos eucariotas superiores so diplides (possuem dois cromossomas homlogos) e por consequncia, os fentipos dos alelos recessivos no so visveis. Em contraste, nos procariotas, a grande maioria dos genes s tem uma nica cpia no cromossoma e por isso os alelos recessivos podem manifestar-se. A troca de material gentico nos eucariotas realiza-se apenas aps a fuso dos gmetas masculino e feminino. Nos procariotas as transferncias genticas podem ocorrer atravs de 3 processos diferentes: transformao, transduo e conjugao. A transformao uma propriedade natural de algumas espcies bacterianas para captar DNA do ambiente, enquanto a transduo e a conjugao so processos mediados por elementos genticos mveis, respectivamente bacterifagos e plasmdeos, ou transposes conjugativos.

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 Transformao A transformao significa a mudana da captao de DNA do meio ambiente (clula dadora) e incorporao, por recombinao homloga, de uma parte desse DNA no genoma. Este fenmeno tem em clulas que apresentam um estado fisiolgico particular dito de competncia, que se desenvolve, em geral, em culturas que atingiram um patamar elevado de densidade celular. Entre bactrias patognicas para o Homem, as mais competentes so dos gneros Haemophilus, Streptococcus e Neisseria.

Transduo A transferncia de genes entre bactrias pode denominar-se transduo e ocorre segundo duas modalidades distintas: transduo generalizada e transduo restrita. Na transduo generalizada qualquer dos genes do genoma da bactria doadora pode ser transferido para a bactria receptora. Pelo contrrio, na transduo restrita, apenas transferido um pequeno grupo de genes do dador. A transduo generalizada est associada ao ciclo vegetativo dos bacterifagos de DNA de cadeia dupla. (Bacterifagos p. 17) Conjugao A conjugao consiste na transferncia de DNA de um contacto directo entre bactrias. Esta transferncia unidireccional, o que leva a admitir que as bactrias tm sexualidade. Nas populaes bacterianas existem indivduos que tm capacidade para transferir genes, chamados dadores, F+, e indivduos que no apresentam essa capacidade, denominados receptores, F-. As bactrias dadoras contm elementos genticos conjugativos, plasmdeos, que codificam para as protenas do sistema de transferncia, onde se destaca, nos Gram -, o pili sexual. Este apndice proteico tem como funo detectar uma molcula parietal nas superfcies das clulas receptoras. Uma vez reconhecido o repector, a clula puxada por retraco do pili para junto da clula dadora. O contacto celular desencadeia a formao de um poro por onde ir passar a cadeia de DNA formada por um mecanismo de rolling circle.

Bacterifagos
Vrus que infectam apenas clulas procariotas. Composio e estrutura: - Cabea: constituda por uma cpside proteica e cido nucleico DNA ou RNA. - Cauda (nem todos possuem): constitudas por um tubo oco atravs do qual o cido nucleico injectado na clula hospedeira, revestido (nem sempre) por uma bainha contrctil. Contm a placa basal e fibras utilizadas na ligao do vrus clula. Fases de infeco da clula hospedeira: Adsoro: ligao do fago a receptores especficos da clula, mediada pelas fibras da cauda. Ligao: ligao irreversvel clula hospedeira mediada pela placa basal. Injeco do cido nucleico: contraco da bainha e introduo do cido nucleico na clula atravs da cauda.

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Ciclo de multiplicao: Fagos lticos ou virulentos inicial o processo de replicao logo que infectam a clula. Provocam a lise da clula hospedeira que liberta os fagos para o exterior. Fagos lisognicos ou temperados ficam quiescentes (em repouso) dentro da clula hospedeira. O genoma fgico fica numa fase de represso, nos chamados profagos. O DNA viral integrado no genoma bacteriano, passando para as clulas-filhas. Podem manter-se indefinidamente na clula. Fim da lisogenia ou induo transformao de fagos temperados em virulentos. As condies adversas clula hospedeira (desidratao, exposio a UV, exposio a radiaes ionizantes, etc) conduzem produo de proteases que destroem a protena repressora. Os genes fgicos so expressos e h replicao dentro da clula hospedeira e lise com libertao de vrus. Ciclo de acontecimentos 1) O fago liga-se a receptores celulares e injecta o seu DNA. 2) Uma enzima do fago degrada o DNA da clula hospedeira. 3) O DNA fgico sintetizado e o vrus encapsulado. Durante a formao da partcula viral, o DNA bacteriano, em vez do DNA fgico, pode ser envolvido pelo invlucro proteico. Depois de alguns ciclos de replicao os fagos provocam lise celular. 4) O novo fago transfere o DNA para outra clula. 5) O novo fragmento de DNA integrado no seu cromossoma.

Nutrio e Crescimento
Em microbiologia quando se refere a ocorrncia de crescimento microbiano, tal entendido no na perspectiva de uma clula individuar, mas de uma populao celular. Assim, o crescimento microbiano definido pelo aumento do nmero de indivduos de uma populao e no pelo tamanho de uma clula individual. No entanto, o crescimento celular implica diviso celular (por fisso binria ou gemulao) que, por sua vez, requer um aumento do tamanho celular. O intervalo de tempo necessrio para a formao de duas clulas, e por consequncia, para a duplicao da populao designado por tempo de gerao ou duplicao. O crescimento um passo dinmico que requer energia e nutrientes para a sntese dos componentes celulares e manuteno da clula. A gua representa cerca de 80-90% do peso total das clulas microbianas. Macronutrientes so nutrientes exigidos em quantidades relativamente elevadas e que desempenham papis fundamentais na estrutura e metabolismo da clula. Ex.: C, O2, N, P. Micronutrientes ou elementos mnimos so exigidos em menores quantidades mas funcionalmente muito importantes. Ex.: K+, Mg2+, Ca2+, Na+, Cl-, Fe2+.
Designao Fonte de Carbono
So capazes de sintetizar os seus prprios nutrientes orgnicos a partir de compostos inorgnicos. Usam CO2 para obter carbono, sulfito de hidrognio (H2S) ou amnia (NH3) como fonte de hidrognio. No so capazes de sintetizar os seus prprios compostos orgnicos. Utilizam os compostos orgnicos que resultam da decomposio da matria orgnica.

Fonte de Energia

Fototrficos utilizam a luz como fonte de

energia.

Autotrficos

Quimiotrficos utilizam a energia

libertada na oxidao dos compostos orgnicos ou inorgnicos.

Fotoheterotrficos obtm a energia a Heterotrficos

partir da luz mas necessitam de carbono em compostos orgnicos para viverem e se multiplicarem. Quimioheterotrficos usam uma fonte orgnica de carbono como fonte de energia para viverem e se multiplicarem.

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Curva de crescimento
a representao logartmica do nmero de bactrias viveis vs tempo de incubao. 1) Fase de latncia 2) Fase logartmica ou exponencial de crescimento 3) Fase estacionria 4) Fase de morte

1) Fase de latncia ocorre imediatamente aps a inoculao, caracterizando-se pela manuteno da densidade populacional. Corresponde a uma adaptao dos microrganismos s novas condies fsico-qumicas ambientais, podendo estar associada sntese de DNA, de RNA e de protenas, bem como de enzimas necessrias sntese de metabolitos essenciais, ausentes no meio de cultura e/ou metabolismo de novos substratos presentes no meio de cultura. 2) Fase logartmica ou exponencial de crescimento nesta fase h um consumo significativo de nutrientes. O crescimento diz-se equilibrado, dado que todos os constituintes celulares duplicam mesma taxa especfica e, por conseguinte, a composio qumica celular mantm-se constante. Esta caracterstica permite que o crescimento possa ser monitorizado pela determinao de qualquer constituinte celular (protenas, lpidos, cidos nucleicos, gua intracelular, etc.). O crescimento um processo necessariamente limitado pelo esgotamento de um ou mis nutrientes essenciais ao crescimento. No entanto, em muitos casos, a paragem do crescimento est associada apenas acumulao de produtos finais do metabolismo que inibem o crescimento. 3) Fase estacionria nesta fase, semelhana da fase de latncia, apenas da populao no se multiplicar, mantm-se metabolicamente activa. 4) Fase de morte por fim, segue-se a fase de morte associada a uma diminuio exponencial da densidade populacional. Factores que influenciam o crescimento microbiano

Temperatura
A temperatura constitui um dos mais importantes factores ambientais que afectam o crescimento dos microrganismos. Quando a temperatura aumenta, as reaces enzimticas, tal como qualquer outra reaco qumica, passam a efectuar-se a velocidades maiores, o metabolismo celular torna-se por isso mais activo e o crescimento mais rpido. No entanto, acima de certos valores de temperatura ocorre desnaturao de algumas protenas essenciais, tais como protenas envolvidas no transporte de nutrientes e diferentes enzimas, e a perda de integridade da membrana celular. Os microrganismos, ao activarem os mecanismos de reparao dos diferentes danos celulares provocados, gastam energia, ficando desta forma menos energia disponvel para o crescimento, o que pode reflectir-se na sua inibio/paragem.

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Abaixo de certos valores de temperatura a membrana citoplasmtica congela e os processos de transporte celular, assim como as reaces enzimticas, tornam-se to lentos que no conseguem assegurar o crescimento. Desta forma, para todos os microrganismos existe uma temperatura mnima, abaixo da qual o crescimento no mensurvel, uma temperatura ptima, para a qual a taxa especfica de crescimento mxima, e uma temperatura mxima acima da qual o crescimento de microrganismos no possvel. A temperatura ptima sempre mais prxima da temperatura mxima do que da temperatura mnima, estas trs temperaturas, designadas temperaturas cardiais, so geralmente caractersticas de cada tipo de microrganismo, mas no so valores rigorosamente fixos, uma vez que podem ser modificados por outros factores ambientais, nomeadamente pela composio do meio de cultura. Por outro lado, as temperaturas cardiais de um dado microrganismo reflectem o intervalo de temperatura e a temperatura mdia do seu habitat. O intervalo de temperatura para o qual ocorre crescimento de um microrganismo geralmente na ordem dos 30C. No que respeita temperatura ptima possvel distinguir 4 grupos de microrganismos: Psicrfilos com temperatura ptima baixa Mesfilos com temperatura ptima mdia Termfilos com temperatura ptima elevada Hipertermfilos com temperatura ptima muito elevada

Psicrfilos so microrganismos com temperatura ptima de 15C ou inferior, Tmx aproximadamente 20C e Tmin 0C. Estes microrganismos encontram-se em ambientes que esto constantemente congelados, como as zonas glaciares. Produzem enzimas com uma temperatura ptima baixa. Psicrotolerantes Tp entre 20 e 40C mas sobrevivem a 0C. So um grupo amplo (bactrias, fungos, protozorios e algas) que podem contaminar alimentos e outros substratos refrigerados. Mesfilos crescem numa faixa de temperatura de 20-40C, com um crescimento preferencialmente a 37C, sendo os principais microrganismos encontrados em animais de sangue quente. Ex.: E. coli Termfilos temperatura ptima de crescimento de 45C. Encontram-se nos solos e fontes termais. Geralmente so procariotas (mas tambm existem fungos e algas), sendo as Archaea as mais resistentes, apresentando enzimas e protenas termo estveis. Tm cadeias lingas de cidos gordos saturados nos seus lpidos membranares. Hipertermfilos e muito hipertermfilos Tp superior a 80C.

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 Oxignio

A aerbios estritos B anaerbios estritos C aerbios facultativos D microaerfilos E anaerbios aerotolerantes

A) Aerbios estritos proliferam na presena das tenses normais de O2 (20%). Esto dependentes da respirao aerbia para fazer face s suas deficincias energticas, utilizam o oxignio como aceitador final de electres. B) Anaerbios estritos o O2 provocam inibio do crescimento ou causa morte celular. Estes microrganismos obtm energia exclusivamente pelo processo fermentativo ou por

respirao anaerbia.
C) Aerbios facultativos apesar de crescerem melhor na presena de oxignio, so tambm capazes de crescer na sua ausncia, utilizando, em condies de anaerobiose, processos bioenergticos como a fermentao ou respirao anaerbia. D) Microaerfilos requerem O2 para crescerem mas a tenses reduzidas (2-10%). E) Anaerbios aerotolerantes obtm energia exclusivamente por processos fermentativos, no sendo, contudo, sensveis presena de oxignio.

pH Cada espcie tem um intervalo de pH, assim como um valor de pH ptimo, qual a taxa especfica de crescimento mxima, - Os acidfilos apresentam um crescimento ptimo para valores de pH entre 1 e 5,5 (fungos). - Os neutrfilos apresentam um pH ptimo entre 5,5 e 8 (bactrias E. coli, P. aeruginosa). - Os alcalfilos apresentam pH ptimo de 8,5 a 11,5. - Os alcalfilos extremos apresentam pH > 10. gua
o principal constituinte da clula (cerca de 80%). - Halfilos: microrganismos que se desenvolvem em concentraes salinas (NaCl). Moderados (1-6%) ou extremos (6-15%). - Halotolerantes: apresentam capacidade de crescimento num meio contendo uma concentrao de NaCl at cerca de 3M, embora cresam melhor na sua ausncia. - Osmfilos: proliferam melhor em ambientes com concentraes elevadas de acar. - Osmotolerantes: toleram elevadas concentraes de acar mas crescem muito melhor sem. - Xerfilos: crescem em ambientes muito desidratados.

Taxonomia
a rea da biologia que compreende trs disciplinas distintas mas intrinsecamente ligadas: Classificao organiza dos microrganismos que tm em comum traos morfolgicos. Metablicos e genticos em grupos especficos ou taxons. Nomenclatura atribuio dos nomes aos grupos taxonmicos de acordo com as regras internacionais, reguladas por edies sucessivas do Cdigo Internacional de Nomenclatura Bacteriana (Internacional Code of Bcateride Nomenclature).

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 Identificao o acto e o resultado de determinar que um novo isolado pertence a um taxon j estabelecido. Hierarquia dos taxons: Reino Filo Classe Ordem Famlia Gnero Espcie

Espcie o taxon mais bsico, que compreende menor nmero de microrganismos. Ocasionalmente as espcies ainda podem conter subgrupos designados subespcies. Bitipo, serotipo e fagotipo conjunto de bactrias da mesma espcie que partilham poucas caractersticas em comum. Sem importncia clnica. Com importncia em epidemiologia. Gnero o segundo taxon mais bsico. Compreende diferentes espcies que tm vrias caractersticas importantes em comum mas que diferem o suficiente para manterem o seu status de espcies diferentesFamlia agrupa um conjunto de gneros que partilham algumas caractersticas fenotpicas e genotpicas em comum. Ordem, classe, filo, reino os microrganismos no possuem um to grande numero de caractersticas como as de alguns organismos como animais e plantas. Haver ento possibilidade de estabelecer, sem margem de dvida, as diferenas entre caractersticas de modo a classificar os microrganismos em ordem, classe, filo e reino? Esta pergunta no tem interesse em clnica nem em epidemiologia. Exemplo: Bacteria Protobacteria Gammaproteobacteria Enterobacteriales Enterobacteriaceae Porteus mirabilis Sistemas de 6 reinos: Animais, protista, fungos, plantas e archaeobacteria Regras do sistema de nomenclatura Gnero-espcie normalmente nomeados em conjunto Os nomes tm origem latina ou grega Gnero primeira letra maiscula espcie primeira letra minscula Escrita impressa em itlico
Escrita manuscrita em sublinhado

Escrita abreviada primeira letra do gnero. Nome da espcie por extenso (S. aureus, S. pneumoniae). Designao informal (stafilococos, streptococos, meningococos) escrito com minsculas e no em itlico. O que fazer quando a nomenclatura muda, como resultado dos estudos taxonmicos? Como devem os microbiologistas clnicos informar os clnicos? Como devem ser designados os nomes dos microrganismos nos boletins de resultados analticos? Stenotrophomonas (Xanthomonas) maltophila Burkholderia (Pseudomonas) cepacia Estabelecendo o perfil das caractersticas essenciais de um microrganismo, este comparado com os perfis de microrganismos j previamente caracterizados, de modo a que o

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microrganismo em estudo possa ser classificado e que lhe seja atribudo um nome (nomenclatura) de gnero e espcie. Critrios para identificao para a classificao de microrganismos: fentipo e gentipo.

Critrios fenotpicos Morfologia macroscpica Caractersticas observadas a olha n relativas ao crescimento microbiano em meios artificiais (laboratrio) tamanho, forma do bordo, brilho, textura e pigmentao de colnias Caractersticas observadas com microscpio forma, tipo de agregao, mobilidade, comportamento face a corante, etc. Capacidade do organismo utilizador diferentes fontes de carbono e azoto, quando se multiplica em condies ambientais particulares. Capacidade do organismo utilizar diferentes fontes de carbono e azoto, quando se multiplica em condies ambientais particulares. Resistncia natural aos antibiticos (exemplo: Proteus e nitrofurantona; Klebsiella e ampicilina).

Morfologia microscpica

Exigncias ambientais

Exigncias nutricionais Perfil de resistncia aos antibiticos Critrios genotpicos

Relao de bases na composio de DNA

Sequncia nucleotdica de DNA e RNA ribossomal

O contedo de G+C relativamente ao total de bases de DNA pode ser usado para estabelecer a relao de proximidade entre microrganismos. Exemplo: um microrganismo com um contedo de G+C de 50% no pode estar prximo de um outro com um contedo de G+C de 25%. O grau de homologia das sequncias nucleotdicas entre microrganismos pode ser conhecido usando metodologias moleculares de estudo e uma medida do grau de proximidade entre microrganismos.

Cocos

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Staphylococcus
Habital humano Habitat ambiental Morfologia Caractersticas culturais Caractersticas bioqumicas Comensal da pele e mucosas fossas nasais, orofaringe, perneo. Ar, solo e gua. Cocos Gram + em cacho Cresce em meios simples entre 10-40C, numa gama variada de valores de pH e concentrao salina. Catalase + (gnero). As espcies distinguem-se com base no metabolismo bioqumico, nomeadamente urease, fosfatase alcalina, etc. Contacto com as fontes ambientais. Pessoa a pessoa (problemas graves na transmisso hospitalar). As infeces ocorrem quando as estirpes comensais entram em compartimentos naturalmente estreis, devido a trauma ou leso da pele ou mucosas, manobras mdicas invasivas, cirurgia, etc. Morfologia, cultura em meio simples selectivos ou indicadores, pesquisa da catlase, da coagulase (S. aureus) e testes bioqumicos (galerias comerciais). Antibiticos -lactmicos, quinolonas, aminoglicosidos, vancomicina.

Modo de transmisso

Fisiopatologia Diagnstico laboratorial Tratamento

Factores de patogenicidade Staphylococcus aureus Toxinas Hemolisinas possuem poder necrotizante Leucocidina medeia a destruio dos polimorfonucleares reduzindo o nmero de fagcitos no local da infeco Enterotoxina (apenas algumas estirpes) so termo-estveis e resistentes aos sucos gstricos. So responsveis por infeces alimentares e enterocolites. Coagulase protena termo-estvel que coagula o plasma. Hialuronidase ou factor de difuso hidrolisa o cido hialurnico (elemento do tecido conjuntivo). Esta enzima e a coagulase potenciam a invaso e sobrevivncia dos tecidos. Fibrinolisina ou estafiloquinase depois do cogulo ser envolvido por estafilococos, esta enzima causa a sua destruio em micro mbolos. Desoxirribonucleases so capazes de hidrolisar o DNA, intervm na formao de leses cutneas. Lipases e esterase so capazes de intervir no metabolismo das gorduras cutneas. -lactamases so capazes de inactivar os antibiticos -lactmicos.

Enzimas

Factores de patogenicidade Staphylococcus no aureus Produo de slime (polissacrido extracelular) e biofilme (multicamadas de clula aderidas ao slime). O biofilme impede o acesso dos mecanismos naturais de defesa e dos antibiticos ao local da infeco.

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Infeces estafiloccicas por Staphylococcus aureus Os factores de virulncia de Staphylococcus aureus incluem enzimas e toxinas que medeiam a invaso tecidular e a sobrevivncia no local da infeco. Fuliculite Furnculos Imptigo Infeco de feridas Endocardite Infeco articular, ssea e de outros rgos e tecidos profundos

Infeces localizadas na pele

Infeces sistmicas Choque sptico Toxinfeces alimentares

Infeces por estafilococos coagulase negativa Infeces de prteses Infeces de cateteres Consequente bacterimia (bactrias na corrente sangunea) ou septicemia (infeco na corrente sangunea).

Streptococcus
Bacteria; Firmicutes; Bacilli; Lactobacillales; Streptococcaceae Classificao com base no tipo de hemlise Streptococcus hemolticos (lise completa dos eritrcitos do sangue adicionado gelose) Streptococcus hemolticos (reduo da hemoglobina dos eritrcitos adicionados gelose) Streptococcus sem hemlise S. pyogenes (grupo A de Lancefield) S. agalactiae (grupo B de Lancefield) Grupo C e G de Lancefield S. pneumoniae S. agalactiae (grupo B de Lancefield) S. pneumoniae S. spp (grupo viridans)

Classificao com base nos antignios do polissacrido C da parede Classificao de Lancefield Grupo A - S. pyogenes Grupo B - S. agalactiae Grupo C Grupo D - Enterococcus (gnero diferentes que j foi Streptococcus) Grupo G Grupo F

Streptococcus pyogenes
Habital humano Habitat ambiental Morfologia No um comensal normal no homem mas pode colonizar a pele e o tracto respiratrio superior em indivduos assintomticos. Bactria estritamente humana. Cocos Gram+ em cadeia 22

Caractersticas culturais Caractersticas bioqumicas Modo de transmisso Fisiopatologia Diagnstico laboratorial Tratamento

Bactrias exigentes. Cultura em gelose com 5% de sangue de cavalo ou carneiro, em aerobiose ou anaerobiose. Hemlise . Catlase (gnero). A espcie identifica-se com base nas caractersticas antignicas do polissacrido C grupo A de Lancefield. Pessoa a pessoa por contacto directo ou inalao de partculas de secrees respiratrias contaminadas. Morfologia, hemlise em meios com sangue, pesquisa da catlase, teste de aglutinao, grupos de Lancefield. Antibiticos -lactmicos, penicilina, eritromicina.

Factores de patogenicidade Streptococcus pyogenes Protenas estruturais Substncias extracelulares, enzimas, hemolisinas Protena M (antifagocitria) Hemolisinas contribuem para a invaso e destruio dos tecidos. Estreptolisina O, Estreptolisina S, Hialuronidase, Dnase, Streptoquinase. Exotoxinas toxina eritrognica responsvel pela produo de rash (escarlatina). Semelhana antignica entre a protena M e o tecido cardaco reaco cruzada entre anticorpos anti estreptoccicos e tecido humano. Depsito de complexos antignio anticorpos anti estreptoccicos

Infeces estreptoccicas por S. pyogenes Imptigo Infeco de feridas Erisipela Faringite aguda Pneumonia (reactividade cruzada com tecido humano)

Infeces localizadas na pele

Infeces respiratrias Febre Reumtica Choque sptico Glomerulonefrite

(depsito no rim de imunocomplexos)

A streptolisina O antignica. O ttulo de anti steptolisina O (TASO) permite monitorizar as complicaes das infeces por S. pyogenes.

Streptococcus agalactiae
Habital humano Habitat ambiental Morfologia Caractersticas culturais Comensal genital feminino. Comensal do trato GI Mastite em bovinos Cocos Gram+ em cadeia Bactrias exigentes. Cultura em gelose com 5% de sangue de cavalo ou carneiro, em aerobiose ou anaerobiose. Hemlise ou . 23

Caractersticas bioqumicas Modo de transmisso Fisiopatologia Diagnstico laboratorial Tratamento

Catlase (gnero). A espcie identifica-se com base nas caractersticas antignicas do polissacrido C grupo C de Lancefield. Me-filho durante o parto. Entrada da bactria num compartimento naturalmente estril. Mal conhecida Morfologia, hemlise ou em meios com sangue, pesquisa da catlase, teste de aglutinao, grupos de Lancefield. Antibiticos -lactmicos, penicilina com ou sem aminoglicosidos, ceftriaxone e cefotaxima.

Infeces por Streptococcus agalactiae Meningite no recm-nascido Septicemia Infeco respiratria (rara)

Streptococcus pneumonia
Habital humano Habitat ambiental Morfologia Caractersticas culturais Caractersticas bioqumicas Modo de transmisso Fisiopatologia Diagnstico laboratorial Tratamento Comensal da nasofaringe. Bactria estritamente humana. Diplococos Gram+ Bactrias exigentes. Cultura em gelose com 5% de sangue de cavalo ou carneiro, em aerobiose ou anaerobiose. Hemlise ou . Catlase (gnero). Optoquina + Pessoa a pessoa por contacto directo ou inalao de partculas de secrees respiratrias contaminadas Cpsula inibe fagocitose. Morfologia, hemlise ou em meios com sangue, pesquisa da catlase, optoquina. Antibiticos -lactmicos, penicilina ou ceftriaxone.

Infeces por Streptococcus pneumoniae Meningite na criana e no adulto Septicmia Otites e conjuntivites Pneumonia

Enterococcus
Bacteria; Firmicutes; Bacilli; Lactobacillales; Enterococcaceae - Enterococcus faecalis - Enterococcus faecium So comensais normais do intestino humano e animal. So um indicador de contaminao fecal.

Enterococcus spp.
Habital humano Habitat ambiental Morfologia Intestino Solo, gua, intestino de alguns animais Cocos Gram+ em cadeia 24

Caractersticas culturais Caractersticas bioqumicas Modo de transmisso Fisiopatologia Diagnstico laboratorial Tratamento

Bactrias exigentes. Cultura em gelose com 5% de sangue de cavalo ou carneiro, em aerobiose ou anaerobiose. Hemlise ou ou nenhuma Catlase (gnero). Degrada a blis-esculina Bactrias endgenas penetram em locais normalmente estreis. Pessoa a pessoa atravs de instrumentao invasiva (hospitalar) Adesinas, citolisinas. Morfologia, hemlise em meios com sangue , ou ausente, pesquisa da catlase, teste da esculina +, grupo D de Lancefield. Antibiticos -lactmicos, penicilina, vancomicina+aminoglicosidos.

Infeces por Enterococcus spp. Infeco urinria Endocardite e Septicmia Infeces de feridas Infeces abdominais e plvicas

Cocos (diplococos) Gram negativo

Bactria Moraxella catarrhalis Neisseria meningitidis Neisseria gonorrhoeae Glucose + + Maltose + Lactose Oxidase + + +

Moraxella spp.
Habital humano Habitat ambiental Morfologia Caractersticas culturais Caractersticas bioqumicas Modo de transmisso Fisiopatologia Diagnstico laboratorial Tratamento Flora comensal do tracto respiratrio superior. Bactria estritamente humana Diplococos GramCultura em gelose com 5% de sangue de cavalo ou carneiro. Aerbio estrito. Oxidase + Pessoa a pessoa por contacto directo ou inalao de partculas de secrees respiratrias contaminadas. Penetrao da flora endgena em compartimento estril. Adesinas Morfologia, oxidase, caractersticas bioqumicas. Antibiticos -lactmicos.

Neisseria meningitidis
Habital humano Habitat ambiental Morfologia Caractersticas culturais Pode colonizar o trato respiratrio superior em induvduos assimptomticos. Bactria estritamente humana Diplococos GramBactrias exigentes. Cultura em gelose com 5% de sangue de cavalo ou carneiro + CO2. Aerbio estrito. 25

Caractersticas bioqumicas Modo de transmisso Fisiopatologia Diagnstico laboratorial Tratamento Infeces por N. meningitidis Meningite Septicmia Infeces repiratrias (raras)

Oxidase + Pessoa a pessoa por contacto directo ou inalao de partculas de secrees respiratrias contaminadas. Adesinas, endotoxina, cpsula. Morfologia, oxidase, caractersticas bioqumicas. Penicilina, ceftriazone, ciprofloxacina e rifampicina

Neisseria gonorrhoeae
Habital humano Habitat ambiental Morfologia Caractersticas culturais Caractersticas bioqumicas Modo de transmisso Fisiopatologia Diagnstico laboratorial Tratamento No um comensal normal no homem. Quando est presente infecta. Bactria estritamente humana Diplococos GramBactrias exigentes. Cultura em gelose com 5% de sangue de cavalo ou carneiro + CO2. Aerbio estrito. Oxidase + Pessoa a pessoa por contacto sexual. Me-filho durante o parto. Adesinas Morfologia, oxidase, caractersticas bioqumicas. Ceftriazone, ciprofloxacina.

Infeces por N. Gonorrhoeae Infeces genitais: cervicite na mulher; uretrite no homem Conjuntivite (oftalmia neonatorum) Artrite

Bacilos

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Bacillus anthracis
Habital humano Habitat ambiental Morfologia Caractersticas culturais Caractersticas bioqumicas No faz parte da flora comensal humana. Solo e intestino de animais herbvoros. Bacilos Gram + capazes de formar esporos. Gelose de sangue no hemoltico. Catlase + (gnero). As espcies do gnero Bacillus distinguem-se com base no metabolismo bioqumico. Contacto com as fontes ambientais, com animais infectados ou com os seus produtos. A infeco ocorre por inalao de esporos ou contacto dos esporos com leses na pele e mucosas. Ocasionalmente por ingesto. Potentes exotoxinas que causam a destruio dos tecidos. Morfologia, cultura em meios de sangue ou selectivos e estes bioqumicos (galerias comerciais). Penicilina

Modo de transmisso Fisiopatologia Diagnstico laboratorial Tratamento

o agente do carbnculo ou antrax Contgio: Contacto com animais ou produtos animais contaminados, por contacto directo, ingesto ou inalao. Arma de bioterrorismo utilizada na forma de p branco ou esporos. Perodo de incubao: 12 horas a 5 dias Sinais e sintomas aps exposio: Cutneos uma pequena ferida na pele que evolui para lcera com um centro negro. Ferida e lcera no dolorosos. Gastrointestinais nuseas, diarreia sanguinolenta, febre e dores de estmago. Respiratrios aps inalao inicialmente semelhante a constipao ou sndroma gripal, com dores de garganta, febre e dores musculares. Tardiamente com tosse, dores no peito, dificuldades respiratrias, cansao. Causa de morte: hemorragia e edema.

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Listeria monocitogenes
Habital humano Habitat ambiental Morfologia Caractersticas culturais Caractersticas bioqumicas Modo de transmisso Fisiopatologia Diagnstico laboratorial Tratamento No normal na flora comensal humana mas pode colonizar o intestino. Solos, intestino de animais e vegetais. Bacilos Gram + que no formam esporos Gelose de sangue com hemlise Catlise + (gnero) Por ingesto de alimentos contaminados, como carne de lacticnios. Passagem me-filho durante a gravidez. Toxina listeriolisina, hemoltica e citotxica, capaz de sobreviver dentro dos fagcitos. Morfologia, catlase e testes bioqumicos (galerias comerciais). Penicilina ou ampicilina com ou sem um aminoglicosido.

Infeces por Listeria monocitogenes Meningite (recm nascidos ou indivduos imunossuprimido) Infeco in tero causa de nado morto

Corynebacterium diphtheriaes
Habital humano Habitat ambiental Morfologia Caractersticas culturais Caractersticas bioqumicas Modo de transmisso Fisiopatologia Diagnstico laboratorial Tratamento No normal na flora comensal mas pode colonizar a nasofaringe. Bacilos Gram + que no formam esporos Gelose de sangue normalmente com hemlise Catlise + (gnero) Pessoa a pessoa por inalao de partculas de secrees respiratrias contaminadas ou contacto directo com leses cutneas. Toxina diftrica (exotoxina), transmitida por um bacterifago. Morfologia, catlase e testes bioqumicos (galerias comerciais). Pesquisa da toxina. Penicilina. A preveno faz-se por vacinao

Infeces por Corynebacterium diphtheriaes Difteria Forma respiratria faringite caracterizada por uma pseudomembrana exsudativa branco acinzentado que cobre as amgdalas, vula e palato. A toxina libertada pode afectar o recido cardaco e nervoso. Forma cutnea rara Infeces por Corynebacterium ulcerans Causa um sndroma difteria like

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Enterobacteriaceae

Microrganismo Citrobacter Edwardsiella Enterobacter Escherichia Hafnia Klebsiella Morganella Proteus Providencia Serratia Salmonella

Habitat

Modo de transmisso

Comensal normal no intestino humano e animal

Endgeno. Pessoa a pessoa atravs de material contaminado. Importante problema hospitalar.

Shigella

No normal no intestino humano. S presente quando infecta. No normal no intestino humano. S presente quando infecta.

Ingesto de alimentos ou gua contaminada com excrementos humanos contaminados. Por contacto pessoa a pessoa pela via fecal-oral. De roedores a humanos atravs de picada de pulga ou ingesto de animais contaminados. No caso de epidemias, pessoa a pessoa por inalao de partculas de secrees respiratrias infectadas. 29

Yersinia pestis

No normal no intestino humano. Transportado por roedores.

Yersinia pseudotuberculosis

Yersinia enterocolitica

No normal no intestino humano. Transportado por roedores e aves. No normal no intestino humano. Flora intestinal de ces, gatos, roedores, porcos, carneiros e gado.

Consumo de alimentos mal cozinhados como a carne e produtos lcteos. Contacto com animais infectados.

Enterobactrias
Habital humano Habitat ambiental Morfologia Caractersticas culturais Caractersticas bioqumicas Modo de transmisso Fisiopatologia Diagnstico laboratorial Tratamento

Bacilos Gram - que no formam esporos Crescem bem em meio simples. Aerbio-anaerbio facultativos. Oxidase -, fermentador da glucose, reduz os nitratos a nitritos. Endgeno (enterobactrias patognicas oportunistas); contaminao via vector alimentar ou animal (enterobactrias patognicas) Cpsula, adesinas, endotoxinas. Morfologia, oxidase negativa, fermentao da glucose e testes bioqumicos (galerias comerciais). Cefalosporinas, aminoglicosidos, tetraciclinas, quinolonas, etc.

Infeces por Enterobactrias Infeces urinrias Infeces hospitalares Infeces GI Disenteria Febre tifide (Salmonella enteritidis) Peste bubnica e pneumonia bubnica (Yersinia pestis)

Acinetobacter spp. e Stenotrophomonas spp.

Habital humano Habitat ambiental Morfologia Caractersticas culturais Caractersticas bioqumicas Modo de transmisso Fisiopatologia Diagnstico laboratorial Tratamento No normal na flora comensal mas pode colonizar a pele e trato respiratrio superior em doentes hospitalizados. Vastamente distribudos na natureza, incluindo meio hospitalar. Bacilos Gram + que no formam esporos Gelose simples ou com sangue. Oxidase Colonizao hospitalar. Introduo em locais normalmente estreis por instrumentao. Desconhecido Morfologia, oxidase e testes bioqumicos (galerias comerciais). Frequentemente multirresistente.

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Infeces por Acinetobacter spp. e Stenotrophomonas spp. Infeces urinrias Infeces hospitalares feridas, pneumonias

Chamydophyla
Bacteria; Chlamydiae; Chlamydiae; Chlamydiales; Chlamydiaceae Clamydia trachomatis Clamydia psittacci Clamydia pneumoniae Chlamydophyla trachomatis Chlamydophyla psittaci Chlamydophyla pneumoniae

Chlamydophyla spp.
Possuem formas cocoides de 0,2 a 1,5 m. So parasitas intracelulares obrigatrios crescem e reproduzem-se dentro de vesculas das clulas hospedeiras. O seu ciclo de desenvolvimento envolve a formao de dois tipos de clulas: corpos elementares e corpos reticulados. Ciclo de vida Comea com a ligao de um corpo elementar superfcie celular (estes corpos so infecciosos e contm material nuclear) que fagocitado pela clula hospedeira. O corpo elementar ento reorganizado em corpo reticulado 2 ou 3 vezes maiores do que o elementar e no contm material nuclear. A multiplicao efectua-se por diviso binria. Quando a clula se move dessas partculas ela sofre lise e liberta novos corpos para infectarem novas clulas. A parede celular no contm cido murmico nem peptidoglicano. A estabilidade dos corpos elementares resulta de ligaes de enxofre entre protenas da membrana externa. Os corpos reticulados so pouco rgidos. Infeces por Clamidias Chlamydophyla trachomatis o agente mais frequente de IST, causa uretrite que depois passa para infeco genital e sexualmente transmissvel. Causa conjuntivite ao recmnascido. Causa do tracoma. Chlamydophyla pneumoniae Chlamydophyla pisttaci Causa infeces pouco Causa psitacose. severas no trato respiratrio inferior e superior.

Mycoplasma spp. e Ureaplasma

Bacteria; Tenericutes; Mollicutes; Mycoplasmatales; Mycoplasmataceae So as bactrias mais pequenas que se conhecem. No grupo das micoplasmas incluem-se Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum e Mycoplasma pneumoniae. Os dois primeiros causam IST, o M. pneumoniae agente de infeco respiratria. A clula no possui parede celular.

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Haemophilus spp.
H. influenzae, H. parainfluenzae e outras espcies comensais Comensais no trato respiratrio superior. As infeces so maioritariamente causadas H. influenzae, normalmente de origem endgena. O factor de patogenicidade mais importante a cpsula. As infeces graves incluem meningite, septicemia e epiglotite. As infeces menos severas incluem otites, conjuntivites e pneumonia. H. ducreti No um comensal humano. O contgio faz-se por via sexual.

Antibiticos
Antimicrobianos - Interagem de alguma forma com a vida dos microrganismos. Antibacterianos Antiparasitrios Antivirais Antifngicos Podem ter actividade bactericida ou bacteriosttica. Os antibiticos podem ser: naturais, semi-sintticos ou sintticos. Antibiticos e farmacocintica (ADME) Para se garantir que o antibitico se encontra na forma activa quando chega ao local de infeco necessrio ter em conta a via de administrao. Antibiticos e microrganismos existem receptores celulares (bacterianos) para a molcula do frmaco. A ligao do antibitico aos receptores ocorre na superfcie da clula bacteriana. A molcula entra na clula, uma vez que o alvo dos antibiticos intracelular. Os antibiticos ligam-se ao seu alvo especfico e ocorrem interaces bioqumicas entre a molcula do antibitico e compostos celulares. Bacteriosttico a aco do antibitico apenas bloqueia o composto celular. Isto , a bactria no morre, mas no se divide. Bactericida a aco do antibitico causa a morte da bactria (por lise, por exemplo).

Mecanismos de aco dos antibiticos alvos bacterianos

Penicilinas Cefalosporinas Vancomicina Ciclocerina Bacitracina Aminoglicosidos Cloranfenicol Tetraciclinas Eritromicina Clindamicina 32

1) Sntese da parede celular

2) Sntese proteica

3) Sntese dos cidos nucleicos

cido nalidxico Rifampicina Metronidazol Trimetropim Nitrofurantona Polimixinas

4) Reaces metablicas 5) Sntese da membrana celular

Antibiticos mecanismos de resistncia Uma bactria resistente a um antibitico quando mantm todas as duas funes e se divide dando origem a novas geraes de bactrias na presena do antibitico. As bactrias podem ser naturalmente resistentes (resistncia intrnseca) ou podem adquirir resistncia algum tempo depois de serem sensveis ao antibitico. As alteraes sofridas pelas bactrias podem ser adquiridas por transformao, conjugao, transduo ou mutao. Como mecanismo de defesa pode ocorrer: o Reduo da permeabilidade celular o Destruio do antibitico por enzimas o Alterao da gentica do alvo o Bombas de efluxo A resistncia natural ou intrnseca geneticamente determinada e pode ocorrer por mltiplos mecanismos. Exemplo: Klebsiella resistente ampicilina reduz uma beta lactamase que destri a molcula antes de ela alcanar as PBPs. As bactrias Gram + so resistentes ao Aztreonam estas bactrias perderam as PBPs que se ligam ao antibitico. 1) Antibiticos que actuam ao nvel da sntese da parede celular

Antibiticos lactmicos
Estrutura um derivado do cido aminiopenicilnico com uma cadeia lateral ligada ao grupo amina. As vrias penicilinas diferem entre si pela cadeia ligada ao grupo amina. A parte crucial da molcula para a sua bioactividade o anel lactmico.

Actividade o antibitico entra na clula, liga-se a receptores proteicos bacterianos, designados por PBPs (Penincillin Binding Proteins). Existem muitos tipos de PBPs e normalmente 4 a 6 num s organismo, ligadas membrana citoplasmtica ou livres. Estas enzimas esto envolvidas em cross-linking da molcula do peptidoglicano, isto , so transpeptidases. A estrutura da molcula dos antibiticos lactmicos assemelha-se poro terminal da Dalanil-D-alanina da cadeia peptdica do peptidoglicano. Essa semelhana natural engana a enzima. O antibitico ocupa o local do substrato natural das PBPs, no ocorrendo reaces 33

enzimticas. As PBPs catalisam a reaco de transpeptidao que forma as ligaes intracatenares do peptidoglicano, estabelecendo pontes interpeptdicas entre as cadeias do peptidoglicano.

Espectro de actividade as penicilinas tm um espectro estreito. So activas sobre bactrias Gram +: Streptococcus, Staphylococcus, Clostridium, Bacillus e alguns Gram : Neisseria meningitidis e N. gonorrhoeae. Usa-se no tratamento de infeces estreptoccicas como faringite, escarlatina ou amigdalite, meningite bacteriana, endocardite, septicemia, pneumonia, gonorreia, otites e conjuntivites. J no o antibitico de primeira escolha (pelo menos a nvel hospitalar) no tratamento de infeces por Staphylococcus aureus devido ao grande nmero de estirpes resistentes. A procura de novos antibiticos, com base na mesma molcula, aumentou o espectro de actividade. As novas molculas evoluram no sentido de serem resistentes s enzimas que destroem o anel lactmico ( lactamases), mais resistentes aos cidos estomacais e activas em cada vez maior nmero de bactrias Gram . Perderam alguma actividade sobre os Gram+.

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Penicilinas M (metilcilina, oxacilina) so resistentes s peniciliases (ou lactamases), pelo que podem ser activas em Staphylococcus produtores de lactamases. Penicilinas semi-sintticas (ampicilina e amoxicilina) Enterobactrias, Hemophilus e ainda alguns Gram +. Carbenicilina e Piperacilina Pseudomonas e outras bactrias multirresistentes. Aztreonam bactrias Gram como as Enterobactrias e multirresistentes como Pseudomonas, Acinetobacter. resistente s lactamases mas destrudo por lactamases de largo espectro. A actividade dos antibiticos cujas molculas so destrudas pelas lactamases mantm-se se forem adicionadas ao cido Clavulnico, molcula de lactmico sem actividade antibitica que destri estas enzimas. Cefalosporinas desenvolvidas sequencialmente a partir das primeiras cefalosporinas isoladas pela primeira vez em 1948 a partir do fungo Cephalosporium. 1 gerao: mais activas em bactrias Gram + do que Gram 2 gerao: alargou-se a actividade a mais bactrias Gram e a alguns anaerbios 3 gerao: activos particularmente em Gram 4 gerao: largo espectro com actividade nas bactrias Gram e +, mesmo as multirresistentes. Forma de administrao Penicilina G (Benzilpenicilina) administrao parentrica, intravenosa ou intracelular, porque destruda pelos cidos estomacais (injectvel). Penicilina V (Fenoxipenicilina) um derivado estvel em meio cido da penicilina. A administrao pode ser parentrica ou oral. absorvida ao nvel do intestino. Penicilinas semi-sintticas (Amoxicilina e ampicilina) administrao oral. Aztreonam administrao intravenosa. Pode ser administrado em doentes alrgicos penicilina. Cefalosporinas algumas so administradas por via oral, outras por via parentrica. Mecanismos de resistncia 1 Alterao das PBPs como resultado de mutao. O antibitico no se liga, logo, no actua. 2 Modificao da molcula do antibitico por aco de enzimas que abrem o anel lactmico. Problemas emergentes 1961 - Staphylococcus aureus meticilina resistentes 1967 - Streptococcus pneumoniae com susceptibilidade diminuda penicilina

Antibiticos Glicopptidos
Vancomicina produzido por um fungo Streptomyces orientalis Teicoplanina produzido por Actinoplanes tichomyceticus Mecanismo de aco actua ao nvel da sintese da parede celular. O antibitico liga-se poro terminal D-alanil-D-alanina da cadeia peptdica do peptidoglicano, impedindo as pontes peptdicas entre as cadeias do peptidoglicano. Mecanismo de resistncia: Resistncia natural a membrana externa das bactrias Gram so impermeveis molcula de grandes dimenses da Vancomicina.

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Resistncia adquirida alterao do alvo bacteriano: alterao do resduo D-alanina para Dlactose ou D-serina, parece ser promovida por uma enzima. Espectro de actividade (usado em teraputica e profilaxia) Staphylococcus aureus Enterococcus spp Clostridium difficile Via de administrao parentria. O antibitico no absorvido ao nvel do intestino. Problemas emergentes 1987 Enterococcus resistentes Vancomicina 1990s e 2000s Staphylococcus aureus com sensibilidade diminudo Vancomicina

Bacitracina
Mecanismo de aco actua ao nvel da sntese da parede celular. Interfere com a desfosforilao do bactoprenol, a molcula que transporta os tijolos do peptidoglicano, isto , N-acetil-glucosamina (NAG) e cido N-acetilmurmico (NAM). Espectro de actividade Staphylococcus Via de administrao tpica, no tratamento de feridas e de oftalmites.

2) Antibiticos que actuam ao nvel da sntese proteica

Gentamicina Tobramcina Kanamicina Amikamicina Netilmicina Streptomicina Espectinomicina Eritromicina Azitromicina Claritromicina Clindamicina Linezolid Cloranfenicol Tetraciclina Doxicilina Minociclina

Aminoglicosidos

Macrlidos Lincosamidas Oxazolidinonas Fenicois Tetraciclinas

Os ribossomas bacterianos so nucleoprotenas citoplasmticas, constitudas por duas subunidades, 50S e 30S.

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Deslizam ao longo da cadeia de mRNA durante o processo de translao, na sntese de protenas. A subunidade 30S constituda por 16S rRNA e 21 protenas. A subunidade 50S constituda por 23S rRNA e 34 protenas. Os antibiticos diferenciam os ribossomas das clulas procariotas dos das clulas eucariotas.

Aminoglicosidos
Ligam-se subunidade 30S dos ribossomas. Causam uma leitura errada da mensagem codificada do mRNA com um fim prematuro da sntese proteica. Antibiticos bactericidas porque acrescentam aos erros na sntese proteica actividade na membrana externa, com formao de fissuras a esse nvel, e perca do contedo citoplasmtico. Espectro de actividade bactrias Gram e Gram +, particularmente em associao com antibiticos com aco ao nvel do peptidoglicano. No deve ser administrado com outros antibiticos com o mesmo mecanismo de aco. Sinrgico com antibiticos que actuam ao nvel da sntese do peptidoglicano. Mecanismo de resistncia trs mecanismos: A presena de enzimas que inactivam o antibitico. Os genes que codificam para estas enzimas podem disseminar-se entre estirpes, por transferncia de plasmdeos ou de transposes (conjugao), pelo que este o mecanismo com maior importncia clnica. Mutao pontual que leva a alteraes no ribossoma, a causa comum de resistncia Spectinomicina e Streptomicina. Diminuio da permeabilidade devido a alteraes dos lipossacridos, com resistncia a todos os aminoglicosidos. Via de administrao antibitico no absorvido ao nvel do intestino, pelo que exige a administrao parentrica. Possvel aplicao tpica. Indicaes teraputicas particulares tratamento (muitas vezes emprico) de infeces graves respiratrias hospitalares e septicmicas. Infeces por Pseudomonas, Acinetobacter e Enterobacter. Streptomicina no tratamento da tuberculosa em terapia mltipla. Toxicidade nefrotxico (rins) e ototxico (ouvidos)

Tetraciclinas
Antibitico com uma estrutura comum com 4 anis, aos quais podem estar ligadas diferentes cadeias. Mecanismo de aco a molcula de antibitico liga-se subunidade 30S de modo a que o complexo tRNA-aminocido no pode ligar-se ao ribossoma. Mecanismos de resistncia alterao do ribossoma, bombas de efluxo, actividade da enzima da mono-oxigenase com alterao da molcula de antibitico. Espectro de actividade largo espectro. Activo sobre bactrias Gram + e Gram -. Boa penetrao em clulas humanas, pelo que tem indicao no tratamento de infeces por bactrias intracelulares Clamydia e Chlamydophila, Rickettsia, Brucella, etc.

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Precaues e efeitos indesejveis afecta o crescimento sseo e causa manchas nos dentes, pelo que no deve ser administrado a grvidas nem a crianas. Fotossensibilidade da pele, pelo que os doentes no devem expor-se luz solar. Esta presente no leite materno e, sendo prejudicial em crianas, no deve ser administrado em mulheres que amamentam. inactivado pelo clcio, pelo que no deve ser ingerido com leite ou derivados.

Fenicois Cloranfenicol
O Cloranfenicol liga-se de forma reversvel subunidade 50S ribossomal. Inibe a adio de novos aminocidos ao pptido em sntese. um antibitico bacteriosttico. Espectro de actividade largo espectro. Activo sobre bactrias Gram e Gram +. Haemophilus influenza, Neisseria meningitidis, Streptococcus pneumoniae. Os lactmico substituem com vantagem os fenicois. Farmacocintica excelente difuso nas clulas do organismo. Boa penetrao nas clulas bacterianas atravs de porinas da membrana externa. Txico medular. Mecanismo de resistncia aco enzimtica da cloranfenicol acetil-transferase (codificada pelo gene cat) que, promovendo a aceptilao da molcula do antibitico, impede a sua ligao ao ribossoma.

Macrlidos
Mecanismo de aco a molcula liga-se ao 23S do rRNA da subunidade 50S do ribossoma, impedindo a elongao da cadeia peptdica em sntese. So bacteriostticos ou, em altas concentraes, bactericidas. O antibitico acumula-se nos leuccitos sendo assim levado aos locais da infeco. Mecanismos de resistncia: Mutao ao nvel do 23S rRNA. Neste caso todos os macrlidos so resistentes. Produo de enzimas (esterases ou cinases) que degradam a molcula. Bombas de efluxo que eliminam a molcula para fora da clula bacteriana. Estes dois ltimos mecanismos de resistncia so mediados por plasmdeos. Espectro de actividade largo espectro. A eritromicina mais activa em bactrias Gram positivo mas tambm Mycoplasma, Legionella, Chlamydia, e alguns Gram como Haemophilus, Bordetella, etc. So usados principalmente em indivduos alrgicos aos lactmicos. Os novos macrlidos tm sensivelmente o mesmo espectro, com particular actividade em algumas espcies bacterianas. Farmacocintica a eritromicina degradada pelos cidos gstricos. Existem formulaes que a protegem dos cidos e permitem a sua absoro a nvel intestinal. Difunde bem nos tecidos. Os novos macrlidos (Claritromicina e Azitromicina) so altamente resistentes em meio cido. Passam mais rapidamente da corrente sangunea oara o compartilmento intracelular, tendo por isso uma concentrao sangunea mais baixa e uma concentrao tecidular mais alta. Tm uma semi-vida longa, pelo que o tratamento pode ser feito com dose nica ou com dose diria. Eliminao pela blis, onde tem uma concentrao 10 vezes superior concentrao plasmtica.

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Indicaes teraputicas infeces do trato respiratrio baixo (bronquites e outras), incluindo pneumonia por Legionella pneumophila, e alto (otites e outras). Infeces por bactrias intracelulares como uretrites e cervicites no complicadas por Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia thracomatis, Ureaplasmas spp., etc. Tratamento da tosse convulsa, difteria, diarreia por Campylobacter.

3) Antibiticos que actuam ao nvel da sntese dos cidos nucleicos

Antibiticos que inibem a DNA polimerase e DNA helicase, impedindo consequentemente a replicao, ou inibem a RNA polimerase, inibindo consequentemente a transcrio. Uma vez que os cidos nucleicos das clulas procariotas e eucariotas no diferem muito quanto sntese dos cidos nucleicos, os antibiticos que actuam a este nvel no so to selectivamente txicos como os que tm sido falados at aqui.

Quinolonas
1 gerao 2 gerao 3 gerao 4 gerao cido nalidxico cido pipemdico Norfloxacina Ofloxacina Ciprofloxacina Gatifloxacina Levofloxacina

Mecanismo de aco o antibitico entre na clula via porinas. Inibe a sntese do DNA e do RNA. Antibitico bactericida. Espectro de actividade largo espectro. Bactrias Gram + e Gram -. Uma que vez que entra nas clulas hospedeiras, so activas em bactrias intracelulares obrigatrias como Legionella pneumophila, Mycoplasma spp., Chlamydia spp., etc. Efeitos secundrios toxicidade principalmente a nvel do sistema nervoso central. Pelo seu grau de toxicidade devem ser, sempre que possvel, substitudos por outros antibiticos com o mesmo espectro, como o caso das tetraciclinas, alguns lactmicos, etc. Algumas molculas, como a do cido nalidxico so consideradas carcinognicas. Mecanismos de resistncia conhecem-se trs mecanismos: Bombas de efluxo que diminuem a concentrao de antibitico dentro da clula bacteriana. Resistncia mediada por plasmdeos que conferem genes que codificam para protenas que se ligam s DNA girase, diminuindo o grau de ligao do antibitico ao seu alvo. Mutao em pontos-chave da DNA girase, diminuindo o grau de ligao do antibitico ao seu alvo.

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 Rifampicina
Mecanismo de aco inibe a RNA polimerase impedindo assim a transcrio em RNA e subsequente traduo em protenas. Espectro de actividade bactrias Gram +, Gram e, por ser lipoflico, tem boa penetrao em Micobactrias. Farmacocintica absoro ao nvel do intestino e hidrolisado na blis, mantendo-se activo. Mais de 60% do frmaco excretado pelas fezes. A presena de alimentos limita a absoro do frmaco. Hepatxico. Mecanismo de resistncia alterao da RNA polimerase (subunidade ). A transmisso de genes que codificam esta polimerase alterada mediada por plasmdeos. Indicaes teraputicas profilaxia da doena invasiva meningoccica, uso tpico em infeces estafiloccicas, tratamento da tuberculose.

Metronidazol
Mecanismo de aco actuao por fixao nvel do DNA fazendo parar a sntese de cidos nucleicos. Indicaes teraputicas usado no tratamento de infeces por bactrias anaerbias e por protozorios, como por exemplo Trichomonas vaginalis.

4) Antibiticos que actuam ao nvel das reaces metablicas

Mecanismo de aco param as funes das vias metablicas, inibindo as funes enzimticas. Param o metabolismo celular normal. Funcionam como bactericidas. Exemplos nitrofurantona, sulfonamidas, trimetoprim, trimetroprim-sulfametoxazol. Nitrofurantona 75% metabolizada pelo fgado, 25% excretada na urina na forma activa. utilizado no tratamento de infeces urinrias. Tomado com alimentos aumenta em 45% a sua absoro. Espectro de absoro E. coli, Staphylococcus saprophyticus, algumas outras enterobactrias e cocos Gram +. Trimetoprim usado no tratamento de profilaxia de infeces urinrias. 5) Antibiticos que actuam ao nvel da sntese da membrana celular Polimixinas: Colistina e Polimixina B. Mecanismo de aco a molcula interfere com os fosfolpidos da membrana citoplasmtica interrompendo a sua sntese. Espectro de actividade dados que so as bactrias Gram as que possuem uma membrana externa mais rica em fosfolpidos, essas so as sensveis a estes antibiticos.

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Numa era com mltiplas resistncias a antibiticos, estes frmacos pouco utilizados no passado, so agora de grande interesse.

Microrganismo-Hospedeiro
uma relao complexa e ainda no completamente conhecida. Reservatrios ambientes onde vivem microrganismos com que nos cruzamos e que podem colonizar e/ou infectar o Homem ou outros animais. Os reservatrios podem ser animais, gua, alimentos, solo, ar ou outros seres humanos. Flora endgena/comensal Quando os microrganismos encontram naturalmente o Homem ficam superfcie da pele e/ou das mucosas, constituindo a flora endgena ou comensal. Num adulto, o nmero de clulas microbianas 10 vezes superior ao nmero de clulas humanas. A flora endgena situa-se na pele, mucosa oral, mucosa GI, mucosa do trato respiratrio e msica do trato genito-urinrio. A interaco entre microrganismo comensal e o hospedeiro dinmica e tem benefcio mtuo. A constituio da flora comensal varia nos diferentes compartimentos que ele ocupa. Os factores selectivos so to diversos como a presena de receptores especficos a natureza da superfcie colonizada e dos metabolitos por ela elaborada. A aquisio da flora endgena inicia-se durante o parto, no contacto com a me e com as pessoas prestadoras de cuidados ao beb. A flora comensal , na maioria dos casos, potencialmente patognica, isto , a maioria das infeces humanas causada por microrganismos endgenos da flora comensal que alcanam outros locais do organismo e infectam localmente ou entram na corrente sangunea e infecta num local distante da porta de entrada. Exemplos: infeco urinria causada por bactrias fecais que alcanam a bexiga subindo a uretra. Infeces respiratrias causadas por bactrias comensais da nasofaringe. Microrganismo potencialmente patognico faz parte da flora endgena, vivem em comensalismo ou parasitismo com o Homem. Normalmente no causam doena mas podes causar doena se o Homem tiver as defesas diminudas. Microrganismo patognico no faz parte da flora comensal. Causa doena. Patgenos oportunistas so microrganismos que causam doena em hospedeiros com o sistema imunitrio debilitado e no causam doena em indivduos saudveis. Composio da flora comensal Pele Mecanismos protectores: - Barreira fsica para os microrganismos; - Camada exterior espessa, com queratina que dificulta a penetrao de microrganismos;

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- Descamao contnua das clulas epiteliais da superfcie com a consequente remoo dos microrganismos aderidos pele. A composio da flrea comensal varia com a anatomia e fisiologia da pele. Epiderme no um ambiente apropriado ao desenvolvimento de flora comensal abundantemente pelo seu pH ligeiramente cido, concentrao salina elevada, pouca humidade, presena de substncias inibidoras, bactericidas ou bacteriostticas, como a lisozima produzida pelas glndulas sudorparas. Glndulas sebceas e sudorparas as secrees destas glancdulas proporcionam nutrientes (aminocidos, electrlitos, lpidos) e gua necessrios ao desenvolvimento bacteriano. Bactrias mais frequentes: Staphylococcus epidermidis, bacilos coriniformes, micrococos e, nas zonas mais hmidas, enterobactrias. As bactrias mais prevalentes nas glndulas sebceas so os anaerbios Gram +, Propionibacterium acnes. Glndulas sebceas e odor os lpidos segregados por estas glndulas so parcialmente degradados por Propionibacterium acnes, em cidos gordos insaturados, alguns volteis, que podem estar associados a forte odor. Os desodorizantes contm substncias bactericidas que actuam selectivamente sobre bactrias Gram +, reduzindo a produo de cidos gordos insaturados volteis e o odor corporal. Trato respiratrio superior Narinas a flora comensal constituda predominantemente por Staphylococcus aureus e S. epidermidis, isto , aproximadamente a mesma encontrada na pele da face. Nasofaringe a este nvel j se encontram bactrias potencialmente patognicas como Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae e Neisseria meningitidis, e outras no necessariamente patognicas como hemolticos, Neisseria lactamica e difteroides Orofaringe a flora comensal muito diversa, constituda predominantemente por Streptococcus hemolticos (S. oralis, S. milleri, S. salivarius, etc), um grande nmero de difterides, Moraxella spp. e Neisserias comensais. Nas amgdalas existe um aumento do nmero de micrococcus e de anaerbios. Trato respiratrio inferior No existe flora comensal no trato respiratrio inferior de um indivduo normal. As clulas epiteliais segregam continuamente muco que aprisiona corpos estranhos. As clulas epiteliais ciliadas impelem-nos para fora do trato respiratrio. Os macrfagos alveolares destroem os microrganismos. A lisozima do muco nasal tem efeito bactericida. Olho e ouvido externo Conjuntiva a flora comensal do olho composta predominantemente por Staphylococcus epidermidis, Haemophilus influenzae e Streptococcus pneumoniae. Ouvido externo flora da pele com predomnio de difterides. Trato gastrointestinal Intestino delgado a motilidade relativamente acelerada do duodeno e do jejuno, a influncia da acidez gstrica e das secrees biliares mantm um nmero baixo de bactrias por ml. No leo o pH torna-se mais alcalino, o que resulta da possibilidade de vida de mais microrganismos. Aqui se encontram anaerbios e gneros da famlia das Enterobacteriaceae. Intestino grosso (clon) o compartimento do organismo com maior nmero de microrganismos. As condies de anaerobiose no clon favorecem o desenvolvimento da flora 42

anaerbia. A este nvel, a proporo de flora anaerbia e facultativa de 300/1. A maioria das 400 espcies diferentes que colonizam o clon no so cultivveis. Das espcies cultivveis predominam Bacteroides fragilis (bactrias anaerbias). As restantes bactrias so E. coli e outras enterobactrias, Enterococcus faecalis, estafilococos, pseudomonas e leveduras. Trato genito-urinrio Rim, urteres e bexiga tm ambientes estreis. Uretra quer a feminina, quer a masculina, na poro distal, pode existir um pequeno nmero de bactrias Staphylococcus epidermidis, E. feacalis e difterides. Vagina a flora vaginal varia com a idade. Durante a infncia a flora constituda maioritariamente por bactrias aerbias como enterobactrias, estafilococos e leveduras. Depois da puberdade, sob a influncia de estrognios, as clulas epiteliais vaginais produzem glicognio, o que promove o predomnio de lactobacilos, que degradam o glicognio em cido lctico, criando um ambiente com o pH cido que impede o desenvolvimento de outras bactrias. Esses lactobacilos so predominantemente Lactobacillus acidophilus, designados bacilos de Doderlein. Depois da menopausa, a reduo da produo de glicognio provoca alteraes que fazem com que a flora comensal se assemelhe flora antes da puberdade, com predomnio de enterobactrias. Conceito de patogenicidade Factores do hospedeiro: Barreira fsica (pele e mucosas) Resposta inflamatria Imunidade inata actividade do complemento) Imunidade humoral Imunidade celular Resposta inflamatria O tecido infectado liberta sinais qumicos (histaminas e prostaglandinas). Ocorre a vasodilatao, aumenta a permeabilidade dos vasos e os neutrfilos passam dos vasos sanguneos para os tecidos (diapedese). Os neutrfilos fagocitam os microrganismos e os restos das clulas mortas.

Imunidade inata Conjunto de mecanismos que nascem com os indivduos e que o protegem. inespecfica. Alguns elementos da imunidade inata so: barreiras fsicas (pele e mucosas), macrfagos (ligao aos antignios, fagocitose nos tecidos), neutrfilos (fagocitose), compostos qumicos como a lisozima (lgrimas, suor, saliva), pH (acidez), protenas do complemento. Sistema imunitrio

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Imunidade humoral Mecanismos de defesa do indivduo que dependem da aco de anticorpos produzidos por clulas sanguneas (linfcitos B). Factores do microrganismo virulncia microbiana ou factores de patogenicidade Cpsula polissacardica defesa contra a fagocitose Competio para alguns substratos, particularmente ferro a ausncia destes micronutrientes so factores limitantes do seu desenvolvimento. Adesinas ligao s clulas com repectores. Protenas como proteases IgA protease. Outras protenas de membrana externa promovem a ligao s clulas alvo. Produo de toxinas endotoxinas ou exotoxinas. Tm mecanismos de aco muito diversos. Fases possveis de infeco 1) Contacto ou contgio a flora comensal j esta presente no organismo. As infeces causadas por microrganismos da flora comensal so ditas de origem endgena. As infeces causadas por microrganismos com origem no exterior dizem-se de origem exgena. Adquirem-se por: contacto directo, inalao, ingesto, trauma ou inoculao ou passagem transplacentria. 2) Colonizao depois do contgio, o microrganismo teve de sobreviver e se multiplicar nas condies do novo habitat. Se competir favoravelmente com a flora endgena, contornar os mecanismos locais de defesa do hospedeiros e tiver os seus prprios mecanismos de patogenicidade, existem condies para se instalar a infeco. Exemplo de factores de patogenicidade: adesinas que se ligam a receptores nas clulas humanas, IgA proteases, etc. 3) Penetrao os microrganismos tem de quebrar barreiras fsicas do hospedeiro, ou tirar vantagem de leses j existentes (leses na pele, trauma, feridas cirrgicas, mordedura de insectos, etc.). Nos locais onde penetram, tm de ultrapassar, uma vez mais, os mecanismos naturais de defesa. 4) Disperso os microrganismos que penetram at um qualquer compartimento do organismo e ultrapassam os mecanismos de defesa do hospedeiro podem dispersar-se para tecidos vizinhos, dispersar-se por via sangunea ou linftica. 5) Destruio os microrganismos destroem os tecidos por vrios mecanismos: i. Mediados por toxinas ii. Alterao das funes de rgos, tecidos ou clulas.

Meningites
Infeces do sistema nervoso central O crebro e a espinal medula so protegidos por: - Osso craniano - Membranas chamadas meninges (trs membranas), a duramter, aracnide e a piamater. Entre as membranas meningias h espaos. No espao sub-aracnoideu circula lquido cafelarraquidiano (LCR), que envolve o crebro e a espinal medula. As suas funes so: Proteger o crebro como um lquido de amortecimento; Transporta metabolitos essenciais; Limpa os tecidos de resduos. Meningite infeco no espao sub-aracnoideu ou das meninges.

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Tipos de meningite (relativamente ao tipo de clulas produzidas pelo hospedeiros): Meningite assptica Meningite purulenta Meningite assptica Linfcitos e mononucleares presentes no LCR. De origem viral (frequentemente) adenovirus, enterovrus, Herpes vrus, etc. Bactrias e fungos ausentes. Doena auto-limitada. Polimorfonucleares presentes no LCR em grande nmero. Normalmente de origem bacteriana. Doena muito grave que requer antibioterapia imediata.

Meningite purulenta

importante saber se a meningite causada por vrus ou bactria, uma vez que a gravidade da doena e tratamento diferem. A meningite viral geralmente menos grave e cura-se sem tratamento especfico. A meningite bacteriana pode ser muito grave, a letalidade alta e as sequelas so frequentes (surdez, danos cerebrais, amputao das extremidades, etc.) Fisiopatalogia Colonizao nasofarngea normalmente a primeira fase de doena, embora a maioria dos indivduos colonizados no adoenam. Vias de infeco Hematognia (a mais frequente); Directa, quando existe uma infeco localizada em tecidos prximos ou contguos aos tecidos do sistema nervoso central (ouvido interno); Alteraes anatmicas do SNC, congnitas ou resultantes de traumatismos; Disperso atravs de nervos (a menos frequentes), como infeces causadas pelo vrus da raiva e vrus Herpes simplex. Mecanismos de virulncia microbiana Tropismo para o SNC no bem compreendido mas reconhecido em vrus e em bactrias. Alguns microrganismos caracteristicamente causam meningite em indivduos com deficincia no sistema imunitria. o caso de Listeria monocytogenes (bactrias) e Cryptococcus neoformans (fungo). Cpsula impede a fagocitose promovida pelos neutrfilos. Est presente nos agentes etiolgicos mais frequentes de meningite Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Streptococcus pneumoniae, E. coli e Streptococcus agalactiae. Adesinas permitem a ligao das bactrias s clulas com receptores especficos. Lipopolissacridos (LPS) e toxinas algumas bactrias libertam toxinas (N. meningitidis), havendo uma relao directa entre nvel de toxina e gravidade da doena. Proteases algumas bactrias produzem uma IgA protease que inactiva a IgA produzida no muco. A actividade desta exoenzima compromete a funo de aglutinao dos anticorpos e os mecanismos de clearance promovidos pelas clulas da mucosa do hospedeiro.

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Mecanismos de defesa do hospedeiro Imunidade inata a cpsula bacteriana capaz de activar a via alternativa do complemento, que se inicia pela lise do componente C3 ligado bactria e a activao em cascata de outros componentes (C5 a C9). Resulta a opsonizao, fagocitose e, consequentemente, clearance da bactria. Ocorre ainda a resposta inflamatria e a produo de citocinas. Imunidade humoral produo de anticorpos especficos. Diagnstico Clnico Laboratrio Inicia-se com a colheita do LCR Exame citobacteriolgico do LCR Diagnstico a partir de uma amostra clnica o Antignios solveis o Exame citolgico o Exame qumico o Exame directo (aps colorao de Gram e Ziehl) o Exame bacteriolgico e/ou micolgico cultural o Teste de susceptibilidade aos antibiticos o Mtodos de biologia molecular PCR especfico. Exame citolgico contagem e diferenciao do nmero de leuccitos no LCR. Observao de leveduras e de formas vegetativas parasitrias. Exame qumico quantificao da glucose e das protenas no LCR. Agentes mais frequentes de infeco e a sua relao com a idade (em pases industrializados): Idade ou condies Recm-nascido Inferior a 2 anos Inferior a 10 anos Adolescentes e adultos jovens Idosos Doentes com SIDA Microrganismos E. coli, S. agalactiae, Listeria monocitogenes, Vrus Herpes simplex 2 E. coli, S. agalactiae, L. monocitogenes, N. meningitidis. S. pneumoniae, H. influenzae, Vrus Vrus, N. meningitidis S. pneumoniae, bacilos Gram -, L. monocitogenes Cryptococcus neoformans

Tratamento De acordo com o agente infeccioso. Meningite meningocccica a nica forma que pode ser epidmica, alm de tratar os doentes preciso fazer a profilaxia antibitica dos contactos. Antibiticos utilizados em profilaxia ciprofloxacina e rifampicina.

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Profilaxia Vacinas 1 Meningocccica 2 Haemophilus tipo b (Hib) 3 Pneumococos Polissacardica com 23 tipos capsulares Conjugada com 7 tipos capsulares Grupo C Grupo A, C, W135 e Y (quadrivalente polissacridica) Grupo A, C, W135 e Y (quadrivalente conjugada)

Infeces do trato respiratrio superior

Constituio cavidade nasal, faringe (nasofaringe + orofaringe) e epiglote. Contgio: Inalao de partculas infectadas com microrganismos Aspirao (rara) Disperso por via hemotognica (rara) Mecanismos de defesa do hospedeiro: a) Mecanismos que impedem o acesso de microrganismos ao trato respiratrio inferior: - filtrao do ar - reteno de partculas estranhas no muco - destruio de microrganismos por lisozima e IgA do muco - mecanismo de tosse reflexa b) Mecanismos que destroem as partculas que atinguem o pulmo: - macrfagos alveolares. Mecanismos de virulncia bacteriana: Variao dos antignios de superfcie, frequente nos vrus, para os quais a produo no est imunizada. Cpsula e resistncia fagocitose. Produo de IgA protase. Hemaglutinina viral medeia a ligao s clulas epiteliais. Produo de toxinas. O comportamento humano pode aumentar o risco de infeco respiratria. O fumo que reduz a eficincia da funo das clulas e aumenta a viscosidade do muco. A denominao da infeco est de acordo com a sua localizao anatmica. Laringite Est normalmente associada a constipao e sndrome gripal. Caracteristicamente os doentes tm rouquido ou perda de voz. uma doena autolimitada no grave (excluem-se casos como a difteria). Epiglotite uma infeco da epiglote e tecidos moles acima das cordas vocais. mais frequente em crianas com idades entre 2 e 6 anos. A infeco grave quando no tratada, devido ao edema e inflamao local, que pode levar a obstruo respiratria. Causa Haemophilus influenzae tipo B. Raramente Streptococcus e Staphylococcus.

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Diagnstico clnico Diagnstico laboratorial hemocultura Adenovrus Influenza vrus Rhinovrus Coronavrus complicaes: otite mdia (2%), sinusite (0,5%) Parainfluenza Streptococcus hemoltico

Constipao

Faringite e amigdalite Infeco da faringe associada a dor de garganta. Afecta crianas e adultos. Patognese varivel com o agente causal. Invaso directa dos tecidos: Arcanobacterium haemolyticum. Invaso dos tecidos e produo de toxinas: Streptococcus pyogenes. Produo de toxinas: Corynebacterium diphtheriae. Adenovrus Influenza vrus Rhinovrus Coronavrus Parainfluenza Streptococcus hemoltico Streptococcus hemolticos do grupo C e G Arcanobacterium haemoliticum Corinebacterium diphtheriae

Faringite

Sazonalidade meses frios nas zonas temperadas; poca das chuvas nas zonas tropicais, frequentemente aps infeco viral. A diferenciao entre infeco viral e bacteriana necessria para descartar ou no o tratamento com antibitico. O tratamento importante porque infeco por Streptococcus pyogenes podem conduzir a febre reumtica e glomerulonefrite. Angina de Vincent Infeco muito grave mas rara, com maior incidncia nos adultos. Infeco ao nvel das amgdalas, causada por mltiplas bactrias anaerbias, particularmente Fusobacterium necrophorum, com formao de uma pseudomembrana superfcie das amgdalas. Factor de risco higiene oral deficiente. Sinusite aguda Infeco ou inflamao dos seus perinasais (espao entre os ossos do crnio e da face, com ligao cavidade nasal). Muitas vezes precedida de infeco do trato respiratrio superior. Frequentemente de origem viral. Quando de origem bacteriana, os 3 agentes mais frequentes so: o Streptococcus pneumoniae o Haemophilus influenzae o Moraxella catarrhalis 48

Sinusite

Streptococcus pneumoniae (pneumococos) Streptococcus pyogenes Haemophilus influenzae Moraxella catarrhalis Staphylococcus aureus Bactrias anaerbias Serologia PCR Cultura celular (raramente possvel)

Pesquisa de vrus

Pesquisa de bactrias

Exame bacterilogo cultural Serologia PCR

Pneumonia Infeco do trato respiratrio inferior que envolve os pulmes. Vias de infeco: Bactrias que colonizam ou infectam as vias respiratrias superiores invadem o trato inferior; Aspirao do contedo da orofaringe. Os germes atingem os pulmes, evitando os mecanismos de defesa do trato superior. Ocorre em indivduos em estado de inconscincia, alcolicos, idosos, etc.; Inalao de gotculas infectadas; Disperso hematognica a partir de um local distante. Tipos de pneumonia: 1) Pneumonias adquiridas na comunidade O agente etiolgico mais comum depende da idade. Mais de 80% das pneumonias em crianas so devidas a vrus. Quando bacterianas, so causadas maioritariamente por H. influenzae, S. pneumoniae e S. aureus. Em adultos, apenas 10 a 20% das pneumonias so virais. S. pneumoniae causa mais de 80% das pneumonias bacterianas. 2) Pneumonias hospitalares (at 3 dias depois do internamento) So a primeira causa de morte em doentes com infeco adquirida no hospital. Os agentes etiolgicos mais frequentes so Klebsiella spp. e outras Enterobacteriaceae, S. aureus, Pseudomonas aeruginosa, S. pneumoniae e Legionella. Agentes atpicos de pneumonia causam infeco com tosse no produtiva de expectorao mucide. - Mycoplasma pneumoniae - Chlamydophila pneumoniae - Legionella pneumophila

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Pneumonia

Streptococcus pneumoniae (pneumococos) Streptococcus pyogenes Haemophilus influenzae Moraxella catarrhalis Staphylococcus aureus Enterobactereacea Pseudomonas aeruginosa Vrus Agentes atpicos Legionella, Chlamydophila, pneumoniae, Mycoplasma pneumoniae

Infeces orais cries dentrias e gengivites Os Streptococcus (S. salivarius, S. sanguins, S. mutans e outros) so bactrias predominantes na boca, uma vez que so capazes de aderir aos dentes e gengivas e no so removidos pela saliva. Estas bactrias produzem glicoprotenas e outros factores de aderncia que facilitam a sua fixao aos dentes. Assim, elas contribuem para a formao de placa dentria, gengivites e cries. Infeces relacionadas com infeces respiratrias Streptococcus pneumoniae (pneumococos) Haemophilus influenzae Moraxella catarrhalis Pseudomonas aeruginosa Aspergillus spp (s otite)

Otite e conjuntivite

Tuberculose
Micobactrias Gnero (Mycobacterium) nico da famlia das Mycobacteriaceae. So bacilos imveis, com 1.2 a 1.4 m de comprimento por 0.3 a 0.6 m, que tendem a agrupar-se em pequenas cordas. No produzem esporos e so aerbios estritos. Parede das micobactrias camada espessa de peptidoglicano ligada a polissacridos de arabinogalactano, que por sua vez esto ligados a cidos miclicos. Rica em lpidos complexos e lipopolissacridos, consequentemente hidrofbica. Resistente a um grande nmero de desinfectantes e corantes. Resistente a antibiticos. cidos miclicos cidos gordos de cadeia longa (70 a 90 carbonos) semelhantes a ceras. Espcies e complexos de espcies Espcies prximas (fentipo, gentipo e caractersticas culturais) agrupadas em complexos.

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Complexo Mycobacterium tuberculosis (MTC) Tuberculosis Bovis Mycobacterium Africanum Microti Critrios de diferenciao de micobactrias Tempo de crescimento Temperatura ptima de crescimento

Complexo Mycobacterium avium (MAC) Mycobacterium Avium Intracellulare

Pigmentao ou no pigmentao

Rpido (superior a 7 dias) Lento (menos que 7 dias) 30C 37C 42C No cromognicas Fotocromognicas Escotocromognicas

Mycobacterium tuberculosis (o Homem o nico habitat) agente etiolgico da tuberculose. Micobactrias atpicas ou no tuberculosis (ubiquitrias) Expresso clnica da tuberculosa Astenia (85%) Tosse (76%) Emagrecimento (68%) Febre (59%) Expectorao (53%) Anorexia (44%) Dispneia (31%) Dor torcica (26%) Suores (24%) Hemoptise (22%) Patognese Primo-infeco Tuberculose latente Tuberculose activa A probabilidade de se transmitir a tuberculose depende de alguns factores: o Da contagiosidade do caso ndice (doente bacilfero fonte de infeco); o Do tipo de ambiente onde a exposio ocorreu; o Da durao da exposio. Agente etiolgico Mycobacterium tuberculosis Via de transmisso inalao de aerossis contaminados (tuberculose molecular). Os linfcitos T activam inespecificamente os macrfagos alveolares.

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H duas hipteses ps penetrao dos alvolos: 1) Os macrfagos alveolares fagocitam os bacilos e no maioria dos casos eliminam-nos em 1 a 3 dias. 2) Os macrgafos alveolares no destroem os bacilos. Estes bacilos que no foram fagocitado pelos macrfagos comeam a multiplicar-se no lisossoma ao nvel do alvolo pulmonar. Depois de alguns ciclos de multiplicao, os macrfagos so destrudos, libertam os bacilos (agora em maior nmero do que inicialmente) e cria-se um ciclo vicioso de fagocitoseapoptose-necrose que define o foco primrio ou leso (imperceptvel na radiografia9 com mais de 100000 bacilos. Cria-se uma relao simbitica de 7 a 21 dias durante a qual os macrfagos multiplicam-se activamente no interior da leso, enquanto o material necrtico se acumula no interior. Gradualmente a caverna/tubrculo fica totalmente preenchida de material necrtico enquanto o parnquima alveolar perde vascularizao e morre a caverna vai calcificando. No centro da caverna calcificada mantm-se bacilos em dormncia. A conteno da infeco feita pela morte do tecido. O processo pode ser contido nesta fase durante toda a vida ou at haver imunossupresso. Se a infeco no for contida, a caverna aumenta formando um abcesso que drena material necrtico liquefeito e com bacilos para o pulmo (expectorao bacilfera). Se o hospedeiro for imunocompetente, cada bacilo libertado inicia uma nova infeco/ leso/caverna em outro ponto do pulmo expandindo a doena. Se for imunossuprimido ento os bacilos disseminamse pelo sistema vascular e linftico (disseminao hematogica e linftica) com o aparecimento de tuberculose miliar.

Tuberculose pulmonar Patognese resultado da libertao de citocinas pelos linfcitos T (especficos para os antignios bacilares), com agregao de fibroblastos, clulas imunitrias (linfcitos T e B), macrfagos que aprisionam as bactrias. A sua funo bsica a de barreira disseminao do bacilo a outros locais do tecido so. Um nmero muito pequeno de bacilos permancece de forma latente (inactivos mas viveis) no interior dos granulomas.
Forma de latncia que perdura durante toda a vida, em 90 a 95% dos indivduos infectados tuberculose latente em que os indivduos permanecem assintomticos. Evoluo para doena activa (5 a 10% dos infectados) por deficincia do sistema imunitrio e desequilbrio entre o bacilo e os mecanismos imunitrios de defesa, h reactivao da infeco: do foco, os bacilos vo pelos vasos linfticos at aos gnglios regionais onde se multiplicam e disseminam para o pulmo ou outros tecidos.

Tuberculose extrapulmonar Localizao pulmonar por excelncia devido riqueza em oxignio. A tuberculose extra pulmonar ocorre quando um foco que resultou da disseminao linfohematognica foi reactivado. Os bacilos esto num inspito, pobre em oxignio, pelo que as infeces so paucibacilares e de difcil diagnstico. Localizao: Miliar (frequentemente com envolvimento multi-sistmico) Ganglionar perifrica Mediastnica Renal Genital
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ssea Articular Menngea, etc.

Diagnstico da tuberculose: clnico, radiolgico, prova de Mantoux ou da tuberculina laboratorial. Diagnstico laboratorial: Exame directo: pesquisa de bacilos cido-lcool resistentes colorao de Ziehl Neelsen ou Auramina. Exame cultural: meio slido de Lowenstein ou lquido, em sistemas automatizados. Teste de susceptibilidade aos antibiticos: Streptomicina, Isoniazida, Rifampicina e Etambutol (SIRE). Deteco de cidos nucleicos por tcnicas de PCR. Tratamento: Utilizao simultnea de vrios antibiticos (numa populao bacteriana h sempre bactrias sensveis a um frmaco e um pequeno nmero de bactrias resistentes a outros frmacos. longo (6 ou 9 meses) No pode haver abandono (sob pena de haver aparecimento de resistncia a antibiticos. Alguns frmacos so txicos ou mal tolerados. Antibiticos de 1 linha: o Isoniazida (bactericida) inibio da sntese dos cidos miclicos. o Estreptomicina (bactericida) o Etambutol (bacteriosttico) o Rifampicina (bactericida) ligao subunidade da RNA polimerase. O antibitico entra dentro dos macrfagos. o Pirazinamida (bactericida) Antibiticos de 2 linha (utilizados em casos de resistncia ou toxicidade aos frmacos de 1 linha): o Capreomicina o Ciclocerina o Etionamida o Fluoroquinolonas (ofloxacina, levofloxacina, ciprofloxacina) o Amicacina e outros aminoglicosidos. Tuberculose resistente aos antibacilares - Tuberculose multirreristente: resistncia simultnea Isoniazida e Rifampicina. - Tuberculose extremamente multirresistente ou XDR: resistncia simultnea Isoniazida, rifampicina e frmacos de 2 linha, incluindo, pelo menos, uma fluoroquinolona e um injectvel (aminoglicosido ou capreomicina). Tuberculose e HIV Reaparecimento em pases onde a tuberculose tinha sido erradicada Aumento da incidncia e prevalncia Aumento da resistncia a antibiticos Aumento de infeces por micobactrias atpicas

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Tuberculose e profilaxia Vacinao dos bebs com a BCG Profilaxia (com Isoniazida) dos contactos Deteco da tuberculose lactante e tratamento (?)

Infeces urinrias
Epidemiologia a infeco mais comum no Homem. Cerca de 10% dos indivduos tero, em algum tempo da sua vida uma infeco urinria. Grupo etrio < 1 ano > 1 ano < 60 anos > 60 anos Grupo vulnervel Meninos Meninas e senhoras Senhoras e homens Staphylococcus saprophyticus Streptococcus viridans Difterides Nesserias no patognicas Cocos e bacilos anaerbios Enterobacteriaceae Staphylococcus Streptococcus viridans Enterococos

Flora comensal uretral

Flora na zona perianal

Infeco adquirida na comunidade E. coli o agente etiolgico mais frequente. Outros agentes frequentes em infeces no complicadas so Klebsiella spp., outras enterobacterias, Staphylococcus saprophyticus. Infeces recorrentes ou complicadas podem ser causadas por Proteus spp, Pseudomonas e Enterobacter spp. Infeco hospitalar E. coli, Klebsiella, Proteus mirabilis, Peudomonas, Staphylococcus e Enterococcus. Vrus e parasitas no causam infeces urinrias, mas parasitas podem estar presentes. Vias de infeco: Via ascendente a mais comum na mulher, quer pela curta dimenso da uretra e a sua proximidade da zona perianal, quer no decurso de actividade sexual. As bactrias podem atingir o rim por via ascendente. Infeces por esta via esto associadas a instrumentao e so comuns em meio hospitalar. Via hematognica ou descendente consequncia de bacterimia ou infeco sistmica. S. aureus, Salmonella spp, Mycobacterium tuberculosis e Candida albicans so muitas vezes indicadores de pielonefrite adquirida por via hematognica. Tipos de infeco urinria com base na localizao: Uretrite infeco da uretra. Infeco urinria ? Infeco sexualmente transmissvel? (Clamydophila trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, Trichomonas vaginalis). Cistite infeco da bexiga 54

Pielonefrite infeco do parnquima renal e plvis (poro terminal o ureter localizado no interior do rim). Diagnstico laboratorial Colheita jacto mdio de urina colhido assepticamente. Exame citolgico contagem de clulas epiteliais, eritrcitos (e cilindros quando presentes) Exame directo colorao de Gram e Ziehl Neelsen Exame cultural quantitativo isolamento e identificao bacteriana. Interpretao de resultados Teste de susceptibilidade aos antibiticos

Infeces genitais Infeces sexualmente transmissveis

Flora comensal vaginal depende da idade uma vez que esta influencia o nvel de estrognio na mucosa e, consequentemente, o nvel de glicognio e do pH. O glicognio promove o predomnio de lactobacilos, que degradam o glicognio em cido lctico, criando um ambiente com pH cido que impede o desenvolvimento de outras bactrias. Esses lactobacilos so predominantemente Lactobacillus acidophilus, designados como bacilos de Doderlein. Flora comensal feminina: - Crianas e mulheres ps menopausa: estafilococos e corinebactrias - Mulheres em idade frtil: lactobacilos ou bacilos de Doderlein, em predomnio, e outros anaerbios, Enterobactrias, Estafilococos, etc. Flora comensal uretral Estafilococos coagulase negativa, Estreptococos, Neisseria no patognica, etc. Tipos de infeco Exgena adquiridas pela actividade sexual. Designadas como infeces sexualmente transmissveis (IST). Endgena causadas por bactrias comensais do prprio indivduo, normalmente quando existem em muito baixo nmero em indivduos saudveis. Tipos de infeco de acordo com a sua localizao Normalmente adquirida directamente por contacto sexual mas Pode ser adquirida por outras vias. Inclui infeco da vulva, vagina e colo do tero. So frequentemente complicaes em infeces baixas, depois de os microrganismos migrarem para a cavidade uterina, trompas de falpio e ovrios. Uretrite, normalmente adquirida por contacto sexual. So frequentemente complicaes das infeces baixas. Os microrganismos dispersam-se pelas mucosas contguas at infectarem um rgo reprodutor como o epiddimo.

Infeco baixa Mulher Infeco alta Infeco baixa Homem Infeco alta

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Infeco Verruga genital ou anal Displasia cervical Vaginite

Agente Papiloma vrus Humano (HPV) Gardnerella vaginalis Trichomonas vaginalis Candida albicans Neisseria gonorrhoeae Chlamydia trachomatis Micoplasmas Vrus Herpes simplex tipo 2 Vrus da Imunodeficincia Humana (HIV) Chlamydia trachomatis Treponema pallidum

Uretrite/cervicite Herpes genital Sida Linfogranuloma venreo Sfilis

Transmisso me-filho passagem transplacentria de microrganismos. Contaminao durante o parto por contacto directo com as leses ou fluidos contaminados. Exemplo: HIV, herpes simplex vrus, N. Gonorrhoeae. Diagnstico laboratorial Exame citolgico contagem de leuccitos. Pesquisa de Trichomonas. Exame directo corado por Gram descrio da flora com referncia obrigatria, no caso de amostra vaginal feminina, presena ou ausncia de bacilos de Doderlein. Exame cultural (bacteriolgico e micolgico, opcionalmente parasitolgico) pesquisa de microrganismos patognicos. Utilizao de meios selectivos. TSA (quando aplicvel) Chlamydia trachomatis ciclo de desenvolvimento bifsico: corpos elementares, infecciosos mas metabolicamente inactivos. So captados pelas clulas epiteliais da mucosa. Formao de um vacolo intracelular onde os corpos elementares se tornam metabolicamente activos, se multiplicam por diviso binria e formam os corpos reticulares. Em cerca de dois dias os corpos reticulares tornam-se metabolicamente inactivos e transformam-se em corpos elementares. A clula lisada e libertam.se os corpos elementares que vo infectar novas clulas. Profilaxia das ISTs vacinas anti papilomavrus e proteco para o cancro do colo do tero Papilomavrus vacinas Vacina bivalente tipos 16 e 18 Vacina tetravalente tipos 16, 18, 6 e 11.

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