Introduccin

Los grupos sanguneos son agrupaciones de la sangre segn caractersticas dependientes de los antgenos de superficie de los glbulos rojos y en la sangre. Las dos clasificaciones ms importantes para describir grupos sanguneos en humanos son el grupo ABO (antgenos) y el factor Rh. Esta clasificacin de grupos sanguneos es importante ya que las transfusiones de sangre entre grupos incompatibles pueden provocar una reaccin inmunolgica que puede converger en hemlisis, anemia, fallo renal, shock, o muerte. El factor subyacente que diferencia el sistema ABO de los dems sistemas, como el sistema Rh, es la presencia de anticuerpos contra los antgenos A y B. Estos anticuerpos estn presentes en los individuos que no expresan antgenos A y B, por lo cual una transfusin de sangre no compatible pueda ser potencialmente mortal. Por lo tanto, el descubrimiento del sistema de grupo sanguneo ABO allan el camino para las transfusiones de sangre seguras. Debido a su complejidad, el estudio del sistema ABO es causa de inters no slo en la medicina transfusional, sino tambin en una gran variedad de campos cientficos. Adems de los cuatro grupos (A, B, AB, O), sabemos que existen ms de una docena de subgrupos que presentan diferentes formas y grados de aglutinacin. Adems, los antgenos A y B se encuentran no slo en los glbulos rojos, sino tambin en la superficie de otros tipos de clulas y en las secreciones. Por razn consiguiente, este sistema se refiere a menudo como "sistema de grupo histo-sanguneo". La presencia de antgenos A y B en otras clulas adems de en los glbulos rojos hace hincapi en la importancia del grupo sanguneo ABO no slo en las transfusiones de sangre, sino tambin en otras clulas, en tejidos y en los trasplantes de rganos. Tanto la sntesis como las propiedades de los antgenos A y B plantean muchas preguntas importantes sobre su papel no slo en medicina sino tambin en muchos otros aspectos de la biologa. Los antgenos A y B son sintetizados mediante una serie de reacciones enzimticas catalizadas por unas enzimas llamadas glicosiltransferasas. De hecho, el ltimo paso en la produccin de estos antgenos requiere una glicosiltransferasa, que est codificada por los alelos funcionales A y B en el locus gentico ABO. El hecho de que las frecuencias allicas varen entre diferentes razas plantea preguntas interesantes sobre la relevancia del sistema del grupo sanguneo ABO en los estudios de poblacin, antropologa y gentica humana. Otra caracterstica interesante de los antgenos A y B es su presencia en otros animales adems de en los seres humanos. Las glicosiltransferasas implicadas en la produccin de antgenos A/B en humanos tambin exhiben los mismos efectos enzimticos en otros animales. Por lo tanto, el sistema de grupo sanguneo ABO tambin tiene importancia evolutiva y enzimtica. Los antgenos A/B

tambin presentan cambios dinmicos durante el desarrollo y la patognesis, lo que sugiere su importancia en cncer, biologa molecular y celular y en el desarrollo embrionario. Ahora bien, el anlisis que utilizan los reactivos para determinar el grupo sanguneo (Sistema ABO) se basa en el principio de hemaglutinacin directa. La incubacin de los eritrocitos que se analizan con Anti-A, Anti-B u Anti-A, B dar lugar a una reaccin antgeno-anticuerpo especfica si el antgeno A o B correspondiente est presente en los glbulos rojos. La deteccin visible de esta reaccin se pone de manifiesto por hemaglutinacin. La ausencia de aglutinacin indica un resultado negativo e indica la ausencia del antgeno correspondiente, dentro de las limitaciones aceptadas del procedimiento de anlisis. Rh D Mezcla de monoclonales. La presencia o ausencia del antgeno D se determina por medio de las pruebas con eritrocitos y el anti D, la aglutinacin indica que las clulas probadas son D positivo. La no aglutinacin indica que las clulas probadas son D negativo, en este caso, el resultado que est sujeto a una prueba de antiglobulina indirecta para D dbil. De sta manera, en la prctica ya realizada, se pudo determinar los grupos sanguneos de diferentes personas utilizando ste mtodo, y a continuacin, el presente informe presenta los diferentes materiales, mtodos y resultados de dicha determinacin, as como tambin ejercicios de cruce entre personas de diferentes grupos sanguneo.

Materiales y Mtodos
MATERIALES Jeringas de 3cc. Agujas adecuadas. Algodn. Alcohol isoproplico al 70% Gradillas. Guantes. Torniquete. Tubo con anticoagulante EDTA (tapa morada) Micropipeta. Tubos de ensayo. Mezcladores. Rotulador de vidrio. Lmina Portaobjeto de fondo oscuro con divisiones. Reactivos Suero anti-A Suero anti-B Suero anti-Rh Muestra Sangre intravenosa.

METODOLOGA Toma de muestra Identificar el tubo; donde se va a colocar la muestra, con el nombre o nmero del paciente (cual sea el caso). Explicar al paciente en qu consistir la toma de muestra sangunea. Verificar que los materiales a usar estn listos y que el paciente este commodo de preferencia en una silla especial para venopuncin con descanso para los brazos y si est en cama, preferiblemente acostado. Se debe seleccionar el sitio de la vena donde se realizar la puncin, la mejor manera es realizando una palpacin de las mismas para esa decisin. Para ello coloque el torniquete 3 a 4 pulgadas por arriba del sitio seleccionado, para visualizarlas mejor. Debe tener presente en no mantener el torniquete por ms de 3 minutos, para evitar la hemoconcentracin. Las venas ms utilizadas para la venopuncin, estn localizadas en el rea antecubital. Al palpar, se debe hacer con la punta de sus dedos, tratando de seguir el rastro de las venas Una vez que se ha decidido por la vena a puncionar, debe proceder a descontaminar el rea con alcohol isoproplico al 70% utilizando algodn y con movimientos circulares del interior al exterior. se debe tener presente que una vez realizada la descontaminacin, no se debe volver a tocar el rea venosa. El brazo debe estar preferiblemente en posicin cmoda horizontalmente. Con el torniquete en posicin, se le indica al paciente cierre y abra el puo de 3 a 5 veces para bombear mejor la sangre, y luego que mantenga el puo cerrado. Colocar la punta de la aguja en un ngulo de 15 a 30 grados sobre la superficie de la vena escogida y atraviese la piel con un movimiento firme y seguro, hasta el lumen de la vena. Apretando firmemente la jeringuilla, debe jalar el mbolo con movimiento continuo para extraer la sangre hasta el volumen requerido. Evite presionar fuertemente la aguja durante la extraccin. Aflojar el torniquete para que la sangre fluya mejor y remover la aguja del brazo con movimiento suave al terminar de colectar, sin apretar el rea de la puncin con el algodn. Presionar el algodn sobre el sitio de la puncin aplicando una presin adecuada y no excesiva para evitar la formacin de hematoma. Llenar los tubos en su orden. En este caso, para esta prctica, solo se llen un tubo con anticoagulante de tapa morada, para proceder a hacer la determinacin del grupo sanguneo. Se descarta la jeringuilla y aguja en un contenedor apropiado. Se le coloca al paciente un algodn en la herida y se le indica que doble el codo para evitar derrame de sangre.

Toma de muestra sangunea en el rea antecubital.

Ensayo en lmina. 1. Rotular la lmina identificando cada crculo con la letra A, B, y Rh, respectivamente, y el nombre del paciente en cada grupo de 3 pocillos:

Nombre del paciente 1 Nombre del paciente 2

2. Se rotula el tubo donde se va a colocar la muestra y se procede a la toma la misma, de la forma ya explicada anteriormente y luego colocarla un tubo con anticoagulante con EDTA (2 gotas de EDTA). Se debe agitar el tubo de inmediato por inversin suavemente, por lo menos 10 veces para mezclar muy bien la sangre con el anticoagulante, con el fin de evitar la coagulacin parcial o total de la muestra.

3. Colocar en cada pocillo 50l de la muestra y 50l de cada reactivo: Anti-A en el pocillo A, Anti-B pocillo B y Anti-Rh pocillo Rh, respectivamente.

4. Mezclar la sangre con el suero en cada casilla con palillos mezcladores, utilizando siempre un palillo mezclador nuevo para que los sueros no se mezclen y den confusiones. Rotar la lmina en forma circular previniendo de que la las muestras no se entremezclen.
Anti-A Anti-B Anti-Rh

Ensayo en tubo 1. Rotular 3 tubos de ensayo colocando la letra A, B, y Rh, respectivamente, e identificar al paciente en cada tubo.

Rh

2. Se rotula el tubo donde se va a colocar la muestra y se procede a la toma la misma, de la forma ya explicada anteriormente y luego colocarla un tubo con anticoagulante con EDTA (2 gotas de EDTA). Se debe agitar el tubo de inmediato por inversin suavemente, por lo menos 10 veces para mezclar muy bien la sangre con el anticoagulante, con el fin de evitar la coagulacin parcial o total de la muestra.

3. Colocar en cada tubo 50l de la muestra y 50l de cada reactivo en el tubo correspondiente: Anti-A en el tubo A, Anti-B tubo B y Anti-D tubo Rh.

4. Mezclar la sangre con el reactivo rotando el tubo en forma circular.

Anti-A Anti-B Anti-Rh

Lectura de resultados: Para ambos procedimientos tanto para en lmina como en tubo: 5. Esperar unos minutos y observar: presencia o ausencia de aglutinacin.

Ensayo en lmina Paciente: Luz

Ensayo en tubo Paciente: Adelino

INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS Presencia de aglutinacin: reaccin positiva (+) Ausencia de aglutinacin: reaccin negativa (-)

Paciente: Luz Tipo sanguneo: A Rh + (A+) Paciente: Adelino Tipo sanguneo: A Rh + (A+) PROBLEMAS 1. Cmo podran ser los hijos de un hombre grupo O y una mujer del grupo AB? Haz un esquema del cruzamiento y los porcentajes esperados en la descendencia. Cruce entre O y AB HOMBRE: O ----- OO MUJER: AB ----- AB
PADRE MADRE

Fenotipo: 50% A 50% B Genotipo: 50% AO 50% BO Segn los resultados obtenidos en el esquema; se puede decir, que entre padres del grupo O (padre) y del grupo AB (madre) hay una probabilidad del 50% que los hijos sean AO BO.

2. En una prueba de paternidad se ha comprobado que el grupo sanguneo de un nio es AB y el del supuesto padre es O. Cul crees que puede ser el veredicto? NIO: AB PADRE: O El sujeto no es su verdadero padre, puesto que es de grupo sanguneo O, lo que quiere decir que su genotipo es OO, por lo que las posibilidades de que genere un hijo con tipo de sangre AB son nulas; por lo tanto es imposible que el sujeto sea el padre del nio. Sosteniendo este resultado, se proceder a comprobar con el siguiente cruce: EJEMPLO 1. HOMBRE: O ----- OO MUJER: AB ----- AB
PADRE MADRE

Fenotipo: 50% A 50% B Genotipo: 50% AO 50% BO Aunque la madre del nio presentara grupo sanguneo AB, ste sera del grupo A B, como se evidencia en el problema.

3. Cul tipo sanguneo podra tener el padre de mi hijo si mi hijo y yo somos del tipo A? MADRE: A ------ AA, AO HIJO: A ------- AA, AO PADRE: ? A ------- AA, AO B ------- BB, BO O ------ OO AB ---- AB

CRUCES. Padre A ------- AA, AO Madre A ------- AA, AO CRUCE 1. En el caso de que tanto el padre como la madre sean AA:

Fenotipo: 100% grupo A Genotipo: 100% AA

CRUCE 2. En el caso de que la madre sea AO y el padre sea AA o viceversa ocurre lo siguiente:

Fenotipo: 100% A Genotipo: 50% AA 50% AO

CRUCE 3. En el caso de que tanto la madre como el padre sean de tipo AO, existe una probabilidad del 75% de que el descendiente sea del tipo A, como se muestra a continuacin:

Fenotipo: 75% A y 25% O Genotipo: 25% AA ; 50% AO

y 25% OO

CRUCES. Padre B ------- BB, BO Madre A ------- AA, AO CRUCE 4. Cuando la madre sea AA y el padre BB.
Padre Madre

Padres

BB

AA

Gametos

Hijos

AB

Fenotipo: 100% grupo AB Genotipo: 100% AB En este caso es imposible que el padre sea del grupo sanguneo AB debido que al cruzarlo con una madre del grupo A estos daran hijos serian del grupo AB y BO. CRUCE 5. Cuando la madre sea AA y el padre BO.
Padre Madre

Padres

BO

AA

Gametos

Hijos

AB

AO

Fenotipo: 50 % AB 50 % A

Genotipo: 50 % AB 50 % AO En este caso existe una probabilidad del 50% de que el padre sea AB para tener un hijo del grupo sanguneo AO CRUCE 6. Cuando la madre sea AO y el padre BO.

Padre

Madre

Padres

BO

AO

Gametos

Hijos

AB , BO , BO , AO

Fenotipo: 50% B 25% AB 25% A Genotipo: 50% BO 25% AB 25% AO En este caso solo existe una probabilidad del 25% de que el hijo sea del grupo A si su padre es del grupo BO y su madre es del grupo AO.

CRUCES. Padre O ------- OO Madre A ------- AA, AO CRUCE 7. Cuando la madre sea AA y el padre OO.
Padre Madre

Padres

OO

AA

Gametos

Hijos

AO

Fenotipo: 100% A Genotipo: 100% AO

CRUCE 8. Cuando la madre sea AO y el padre OO.

Padre Madre

Padres

OO

AO

Gametos

Hijos

AO , OO

Fenotipo: 50 % A 50 % O Genotipo: 50 % AO

50 % OO En este caso existe una probabilidad del 50% de que el padre sea O para tener un hijo del grupo sanguneo AO

CRUCES. Padre AB ------- AB Madre A ------- AA, AO CRUCE 9. Cuando la madre sea AA y el padre AB.
Padre Madre

Padres

AB

AA

Gametos

Hijos

AA , AB

Fenotipo: 50% A 50% AB Genotipo: 50% AA 50% AB

Hay una probabilidad del 50% que un padre de grupo sanguneo AB tenga un hijo del grupo A (AA)

CRUCE 10. Cuando la madre sea AO y el padre AB.

Padre

Madre

Padres

AB

AO

Gametos

Hijos

AA , AB , AA , BO

Fenotipo: 50% A 25% AB 25% BO Genotipo: 50% AA 25% AB 25% BO En este caso existe una probabilidad del 50% de que el hijo sea del grupo A si su padre es del grupo AB y su madre es del grupo AO.

Conclusiones. Se realizaron todos los cruces posibles entre una madre del grupo A para determinar el grupo sanguneo del padre que tuvo un hijo del grupo sanguneo A. Se puede concluir que el padre puede tener cualquiera de los grupos sanguneos A, B, AB, u O, sin embargo en algunos cruces existi una probabilidad mayor que en otros. En el caso de cruzar el grupo sanguneo AA de la madre con el BB del padre, en ste es imposible que en haya un hijo con un grupo A ya q sus hijos seran 100% AB. Sin embargo, en cruces puros como en el caso de que el padre sea grupo AA con una madre del grupo AA es 100% la probabilidad de el hijo del grupo A. De igual manera, con cruces con el padre del grupo AO y la madre del grupo A tambin arroj altas posibilidades de tener hijos A

Al cruzar un padre del grupo BO con la madre del grupo AA los resultados fueron 50% de probabilidad de tener hijos AO, y al cruzar el padre BO con la madre AO las probabilidades disminuyeron a un 25% de tener hijos del grupo AO. Sin embargo, al cruzar el padre con grupo O y la madre con grupo AA, ste dio un 100% de tener un hijo del grupo AO, y al hacerlo con la madre siendo del grupo AO, arroj un 50% de posibilidad de tener un hijo AO.

4. De acuerdo a la prctica realizada, haga el cruce entre grupo A (Luz) y A (Luis).

Fenotipo: 100% A

Fenotipo: 75% A y 25% O Genotipo: 100% AA / Genotipo: 50% AA y 50% AO / Genotipo: 25% AA; 50% AO y, 25% OO Entre Luis y Luz pueden tener hijo solo del grupo A, variando fenotpica y genotpicamente como se evidencia en los cruces

Fenotipo: 100% A