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TRANSCRIÇÃO

Transcrição em procariont es

RNA polim erase: enzim a com plexa


form ada por cinco subunidades –
α2ββ’δ (holoenzim a).
Subunidades α: form ação do cerne
t et ram érico (α2ββ’)
Subunidade β: sít io de ligação de
ribonucleosídeo
Subunidade β’: região de ligação ao
DNA m olde
Subunidade δ: início da t ranscrição –
reconhecim ent o do prom ot or.
Transcrição em procariont es

Início da sínt ese do RNA:


Ligação da holoenzim a de RNA
polim erase à região prom ot ora
Desenrolam ent o dos dois
filam ent os de DNA – filam ent o
m olde
Form ação de ligações
fosfodiést er ent re os prim eiros
ribonucleot ídeos da cadeia
Transcrição em procariont es

Prom ot or: pequena seqüência


de nucleot ídeos reconhecida
por um a RNA polim erase com o
pont o onde deve se ligar ao
DNA para iniciar a t ranscrição.
Ocorre em um posição específica
logo ant es do gene a ser
t ranscrit o
Transcrição em procariont es

Prom ot ores apresent am


se qüê ncia s de conse nso
alt am ent e conservadas que são
reconhecida pela enzim a.Essa
seqüências ocorrem a cerca de
10 e 35 pares de nucleot ídeos
ant es do sít io de início da
t ranscrição.
Transcrição em procariont es

Se q ü ê n cia s d e con se n so:


-35: 5’-TTGACA-3’
-10: 5’-TATAAT-3’
A subunidade sigm a ( δ) se liga à
seqüência –35 (seqüência de
reconhecim ent o – com plexo
prom ot or fechado)
Seqüência –10: com plexo prom ot or
fechado.
Transcrição em procariont es

Se q ü ê n cia s d e con se n so:


-35: 5’-TTGACA-3’
-10: 5’-TATAAT-3’
A subunidade sigm a ( δ) se liga à
seqüência –35 (seqüência de
reconhecim ent o – com plexo
prom ot or fechado)
Seqüência –10: com plexo prom ot or
fechado.
Transcrição em procariont es

Alonga m e nt o:
realizado pelo cerne da enzim a
após a liberação da subunidade
δ.
Ocorre dent ro da bolha de t ranscrição
A polim erase cont inuam ent e
desenrola o DNA a sua frent e e enrola
o DNA que est á at rás do sít io de
t ranscrição (já foi t ranscrit o)
Transcrição em procariont es

Alonga m e nt o:
A cadeia de RNA nascent e vai se
se desligando do DNA à m edida
que a RNA polim erase se m ove
pela dupla hélice.
A região de paream ent o DNA-
RNA é m uit o curt a (cerca de 3
pares de bases)
Transcrição em procariont es

Té r m in o:
Ocorre quando a RNA polim erase
encont ra um sinal de t érm ino – o
com plexo de t ranscrição se dissocia e
há liberação da m olécula de RNA.
Exist em dois t ipos de t erm inadores
em E. coli:
t erm inadores dependent es de rô ( )
t erm inadores independent es de rô ( )
Transcrição em procariont es

Té r m in o:
Os t erm inadores independent es de
apresent am seqüências nucleot ídicas
capazes de form ar g r a m p os
(dificult am o m ovim ent o da RNA
polim erase pela cadeia de DNA)
Os gram pos são seguidos de um a
seqüência rica em A (a ligação A-U é
facilm ent e rom pida facilit ando a
liberação do RNA t ranscrit o)
Transcrição em procariont es

Té rm ino:
Os t erm inadores dependent es de
t êm um m ecanism o ainda
incert o de funcionam ent o:
quando a RNA polim erase
dim inui ou pára na seqüência de
t erm inação, se liga à
polim erase e ret ira o RNA da
bolha de t rsncrição
Transcrição em eucariont es:

Em eucariontes exist em 3 t ipos


de RNA polim erases diferent es
at uando na t rsncrição.
Cada RNA polim erase é
responsável pela transcrição de
um a classe específica de genes
Transcrição em eucariont es:

En z im a Localiz ação Prod u t os

RNA p olim eras e I Nu cléolo RNA rib os s ôm icos , excet o RNAr 5S

RNA p olim eras e II Nú cleo Pré RNA n u cleares

RNA p olim eras e III Nú cleo RNAt e p eq u en os RNA n u cleares


Transcrição em eucariont es:

Os t ranscrit os prim ários dos genes


que codificam prot eínas sofrem
m odificações ant es de serem
t ransport ados para o cit oplasm a:
São adicionados revest im ent os (caps)
de 7’ m et il guanosina às pont as 5’
dos t ranscrit os prim ários
Caudas poli(A) são adicionada às
pont as 3’ dos t ranscrit os
Seqüências ínt rons são rem ovidas
Transcrição em eucariont es:

A RNA polim erase precisa de


fa t ore s de t ra nscriçã o para
iniciar a sínt ese de RNA
Se ligam à região prom ot ora e
form am um com plexo de
iniciação pra a ligação da RNA
polim erase e início da
t ranscrição.
Transcrição em eucariont es:

Prom ot ores reconhecidos pela RNA


polim erase II: elem ent os curt os
conservados ant es do local da
t ranscrição
TATA box: TATAAAA na posição –
30
CAAT box: GGCCAATCT na posição
–80
Transcrição em eucariont es:

Fat ores de t ranscrição: TFIIX


TFIID – é o prim eiro a int eragir com o
prom ot or – prot eína de ligaçào ao
TATA (TBP)
TFIIA e TFII B
TFIIF se liga à RNA polim erase II e
depois ao com plexo de iniciação –
desenrolam ent o do DNA
TFIIE, TFIIH e TFIIJ
Transcrição em eucariont es:

O alongam ent o da cadeia ocorre


pelo m esm o m ecanism o das
células procariont es
No início do alongam ent o da cadeia
ocorre a adição da 7-m et il guanosina
(7MG): adicionado quando cerca de
30 nucleot ídeos já foram t ranscrit os
Os 7-MG são reconhecidos por fat ores
envolvidos no início da t radução a
prot ege as cadeias nascent es de RNA
da degradação por endonucleases.
Transcrição em eucariont es:

As pont as 3’ do t ranscrit o são form adas


pela clivagem do RNA e não por t érm ino
da t ranscrição
A t ranscrição segue at é 1000 ou 2000
nucleot ídeos além do sít io 3’ do
t ranscrit o final
Em seguida esse se g m e n t o t r a ile r é
rem ovido.
A rem oção ocorre pelo reconhecim ent o
de um a seqüência AAUAAA pert o da
pont a da unidade de t ranscrição
Transcrição em eucariont es:

Após a clivagem ocorre a


polia de nila çã o:
acréscim o de cerca de 200
nucleot ídeos de adenosina
m onosfofat o – aum ent a a
est abilidade do RNA
t em papel im port ant e no
t ransport e do RNA do núcleo
para a prot eína

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