Kit EZ metilacin del ADN-Gold

Simple, preciso bisulfito de conversin de ADN en 3 horas!

Junto al calor de desnaturalizacin / Bisulfito de tratamiento para la rpida La conversin del no metilado Citosina a uracilo

Dentro de la columna Desulphonation Tecnologa

La Kit EZ metilacin del ADN-Gold es un refinamiento de nuestro popular Kit de ADN EZ metilacin . La Kit EZ metilacin del ADN-Gold integra ADN desnaturalizacin y los procesos de conversin de bisulfito en una solo paso (ver la figura a continuacin). Adems, el kit ha sido simplificado para la recuperacin de alto rendimiento de ADN siguiente tratamiento con bisulfito. Ambos kits se basan en una de tres pasos proceso de reaccin entre la citosina y bisulfito de sodio resultando en la citosina se convierte en uracilo. La Kit EZ metilacin del ADN-Gold caractersticas innovadoras en la columna tecnologa desulphonation que elimina etapas de precipitacin de ADN engorrosos y proporciona resultados consistentes en todo momento. El kit ha sido diseado para reducir al mnimo la plan la degradacin, prdida de ADN durante el tratamiento y limpieza, y para proporcionar la conversin completa citosinas no metiladas de. ADN recuperado es ideal para PCR, secuenciacin, microarrays, etc

Entrada
500 pg - 2 g de ADN por tratamiento con 200-500 ng de ser ptima Esquema de la corriente de Zymo Investigacin productos de conversin de bisulfito

ADN es convertida Ideal para anlisis de aguas abajo Incluyendo ...

real PCR PCR en tiempo Microarray Secuenciacin

Formatos
pocillos Single Column Formato de 96

Resumen comparativo
EZ metilacin del ADN-Gold Tiempo de procesamiento 3 hrs. Protocolo Conversin Desulphonation ADN Recuperacin Formato de 96 pocillos Simple Proveedores C & H 16-20 hrs. Complicado

Rpida, completa - integra Lenta, incompleta - desnaturalizacin y desnaturalizacin / conversin en un solo paso. pasos de conversin estn separados. Conveniente En-columna Alto S Precipitaciones Cumbersome Bajo No

Kit EZ metilacin del ADN-Gold

Kit EZ metilacin del ADN-Gold Protocolo Corto
Preparacin de la TC de conversin del reactivo:
Aadir 900 l de agua, 50 l de M de disolucin tampn y 300 l de M-dilucin Buffer a un tubo de CT Conversin de Reactivo. Mezclar durante 10 minutos. ADN original con metilado CmpG Secuenciacin de DNA despus de la conversin CT

1.

Aadir 130 l de la preparada CT Conversin Reactivo a 20 l de muestra de ADN. Mezclar. Lleve a cabo los siguientes pasos de temperatura: 98 C durante 10 minutos, 64 C durante 2,5 horas, a continuacin, mantenga a 4 C. Aadir 600 l de M-Binding Buffer a un Zymo-Spin columna IC, a continuacin, aadir la muestra. Cierre la tapa y mezcle invirtiendo varias veces. Centrifugar a mxima velocidad (> 10.000 x g) durante 30 segundos. Deseche el flujo a travs de! Aadir 100 l de M-tampn de lavado a la columna, girar 30 segundos. Aadir 200 l de M-Desulphonation Buffer a la columna y esperar durante 15-20 minutos. Haz girar a toda velocidad durante 30 segundos. Aadir 200 l de M-tampn de lavado a la columna, girar 30 segundos. Repita este paso de lavado una vez ms. Aadir 10 l de M-tampn de elucin directamente a la matriz de la columna. Colocar en un tubo de 1,5 ml. Girar brevemente para eluir el ADN.

2. 3.

Resultados de la secuenciacin de ADN despus del tratamiento con bisulfito. AD con metilado CmpG (en la posicin de nucletido # 5) se proces mediante el EZ metilacin-Gold Kit DNA. El ADN recuperado se amplific por PCR y luego secuenciados directamente. La citosina metilada en posicin # 5 se mantuvo intacta, mientras que las citosinas no metiladas (es decir, posiciones # 7, 9, 11, 14 y 15) fueron completamente convierte en uracilo despus del tratamiento con bisulfito y detectado como timina tras la PCR. Citaciones seleccionados:

4.

5. 6.

7. 8.

9.

1. Takahiro Arima, et al. ZAC, LIT1 (Kcnq1ot1) y p57KIP2 (CDKN1C) son en una red gen impreso que puede desempear un papel en el sndrome de BeckwithWiedemann sndrome. Nucleic Acids Res.., Mayo de 2005; 33: 2650-2660. 2. Hiroyuki Izumi, et al. Silenciamiento frecuente de DBC1 es por gentica o epigentica mecanismos en los cnceres de pulmn de clulas no pequeas. Hum. Mol. Genet., 04 200 14: 997-1007. 3. Siu-hong Chan, et al. Clonacin de mellar CviPII y sistema de modificacin de virus chlorella NYS-1 y la aplicacin de Nt.CviPII en el ADN al azar amplificacin. Nucleic Acids Res.., 11 2004, 32: 6187 hasta 6199. 4. Remco van Doorn, et al. Epigentica Perfilado del linfoma cutneo de clulas T: Hipermetilacin del promotor de mltiples genes supresores de tumores incluyendo BCL7a, PTPRG, y P73. J. Clin. Oncol., Mayo de 2005; 10,1200 JCO.2005.11.353. 5. Michael T. McCabe, et al. Reglamento de ADN metiltransferasa 1 por el PRB / E2F1 Camino. Cancer Res.., Mayo de 2005; 65: 3624 a 3632.

Informacin para hacer pedidos Equipo Kit EZ metilacin del ADN-Gold Kit EZ metilacin del ADN-Gold Kit de metilacin del ADN-Gold EZ-96 Kit de metilacin del ADN-Gold EZ-96 N de catlogo D5005 D5006 D5007 D5008 Kit Tamao 50 rxns. 200 rxns. 2x96 rxns., 2x96 Shallow-as Silicio-A Plate 2x96 rxns., 2x96 Profundo-bien Zymo-Spin I-96 Plate

Normas ADN metilado Universal ADN metilado Estndar Universal metilado humana ADN Estndar Universal metilado Ratn ADN estndar

N de catlogo D5010 D5011 D5012

Kit Tamao 1 juego 1 juego 1 juego

Los Kits EZ metilacin del ADN-Gold y EZ metilacin del ADN-Direct estn pendiente de patente. El proceso de la Reaccin en Cadena de la Polimerasa (PCR) est protegido por las patentes EE.UU.. Nos. 4.683.195 y 4.683.202 asignada a Hoffmann-La Roche. Patentes pendientes en otros pases. No son licencias de estas patentes de utilizar el proceso de PCR se transporta expresamente o implcitamente al comprador por la compra de kits EZ ADN de metilacin de Zymo investigacin. Para ms informacin sobre la compra de licencias para practicar el proceso de PCR se puede obtener del director de Licencias al Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404 o en Roche Molecular Systems, Inc., 1145 Atlantic Avenue, Alameda, California 94501. El uso de PCR metilacin especfica (MSP) est protegido por las patentes estadounidenses 5.786.146 y 6.017.704 y 6.200.756 y 6.265.171 y La patente internacional WO 97/46705. No son licencias de estas patentes de utilizar el proceso de MSP es transportado en forma expresa o implcita al comprador por la compra de este producto. Nota - El sello distintivo de Zymo Research Corporation. Este producto es para uso exclusivo en investigacin y slo debe ser util izado por profesionales capacitados. Algunos reactivos incluidos en este kit son irritantes. Use guantes y proteccin para los ojos. Siga las pautas de seguridad y las normas establecidas por su institucin de investigacin o centro.