MICROSPCOPIA OBJETIVO GENERAL Manejo correcto del microscopio como herramienta de observacin y caracterizacin de microorganismos OBJETIVOS PARTICULARES Apropiar

de los conceptos de los fenmenos bsicos de la ptica (Difraccin, Refraccin), espectro electromagntico, lentes, campo focal, etc. Estudiar las aplicaciones de la ptica en los diferentes tipos de microscopia (de transmisin de luz en campo brillante, campo oscuro, contraste de fases; microscopia electrnica de transmisin de electrones y de barrido) Apropiarse del correcto manejo y mantenimiento de un microscopio, aplicaciones y limitaciones. PRACTICA DE LABORATORIO Descripcin de un microscopio compuesto de campo brillante. Correcto uso del microscopio: Limpieza y mantenimiento, Enfoque, cantidad de luz, intensidad de luz Montaje de muestra para observacin

DESCRIPCION DEL MICROSCOPIO Tome el microscopio y haga una descripcin detallada de cada elemento de abajo hacia arriba

USO APROPIADO DEL MICROSCOPIO Verificar que el microscopio respecto a su condicin de limpieza, la platina en la posicin Inferior, si no, hgalo usando el tornillo micromtrico. Encender el microscopio y ajustar la intensidad con el restato a posicin 4 6 Ajuste la palanca del condensador en la mitad de su rango de apertura Tomado el dispositivo de oculares con ndice y pulgar de los dos extremos cierre o abra completamente los dos oculares Al colocar los ojos sobre los oculares, observar dos campos visuales Con los dedos pulgares e ndices ajuste la distancia entre oculares muy lentamente hasta que los dos campos se junten en uno solo. Aqu estamos listos para iniciar la observacin.

PREPACION y OBSERVACIN DE MUESTRA O ESPECIMEN Con ayuda de un hisopo, empleando el cabo de madera, tome haga un raspado de la cara interna de su mejilla. Expanda suavemente la muestra sobre una lmina portaobjetos limpia Coloque la lmina en la platina del microscopio que se encuentra en su posicin ms baja. Del Microscopio Verifique : Luz encendida, Platina en la parte ms baja, Objetivo de 4X, Condensador cerrado, Restato en 4 o 5. Ponga sus ojos sobre los lentes bionoculares y con ayuda del tronillo macromtirco comience a subir lentamente (pero sin pausa) la platina del microscopio hasta que aparezca una imagen clra de clulas epiteliales.

http://inakiresa.files.wordpress.com/2007/11/mucosa_bucal_foto1.jpg Una vez observada la preparacin cambiamos los aculares a 10 X y 40X para ver las diferencias en la observacin en relacin al poder de magnificacin. Para ver los efectos de cantidad e intensidad de luz debemos dejar la preparacin en 40X, abrir completamente el condensador y amentar la intensidad de la luz al mximo con el restato. Tratar de observar y de manera muy suave cerrar el condensador hasta su tope. Luego el observador deber hacer un balance condensador, restato para crear las condiciones ms propicias de observacin

PREPARACIONES, FRESCAS, FIJAS Y COLOREADAS Tincin Simple, Preparacin Fresca Tome la anterior preparacin, deposite una gota de azul de metileno y luego coloque una laminilla cubreobjetos y realice las observaciones 4x, 10X y 40 X. Determine las diferencias en la observacin entre la preparacin coloreada y no coloreada.

Tincin Compuesta, Preparacin Fija. Haga una preparacin de su epitelio bucal similar al preparado anteriormente y pselo varias veces sobre la llama de un mechero, para calentarlo suavemente, durante un minuto o dos. Luego coloque la preparacin sobre un riel de coloracin y realice una coloracin de Gram. o Violeta de Gram (1 min) o Lavar suavemente con agua o Lugol de Gram (1 min) o Lavar suavemente con agua o Solucin de Alcohol-Acetona (5 a 10 segundos) o Lavar suavemente con agua o Fucsina de Gram (1 min) o Lavar suavemente con agua o Secar la preparacin Coloque la preparacin coloreada en el microscopio y haga las observaciones en 4X, 10X y 40X Una vez hechas las observaciones pertinentes, mover a un lado el objetivo de 40X y adicionar sobre el campo de luz observado en la preparacin una gota de Aceite de Inmersin y colocar el objetivo de 100X, enfocar y hacer las observaciones pertinentes. Reconozca las diferencias en tamaos y coloraciones de los diferentes microorganismos observados.